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胃癌相关基因β-catenin、APC、siah-1、cyclin D1的研究
随着分子生物学技术的发展,人们对胃癌发病机制的研究已经深入到分子水平,发现和了解了较多的胃癌相关基因.本文就癌基因、抑癌基因、细胞周期调节因子作一综述,介绍4种基因:癌基因β-catenin、抑癌基因siah-1、结肠息肉病基因APC和细胞周期调节因子cyclin D1的定位、作用机制及与胃癌发生发展的关系.对这四种基因进行检测,对于胃癌早期诊断、预后评估都具有重要意义.
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CleistanthinA对黑素瘤细胞迁移及β-catenin蛋白的影响
目的:研究Cleistanthin A(CA)对黑素瘤细胞迁移及β-catenin蛋白的影响.方法:通过划痕实验观察CA对A375细胞迁移活性的影响;通过West-ern blot实验观察CA对A375细胞中β-catenin蛋白的影响.结果:划痕实验显示:CA对A375细胞的迁移有抑制作用,且有剂量依赖性,且0.1μM这个浓度接近半数迁移抑制率;结合我们前期的实验得知:CA对A375细胞的生长活性有抑制作用,且有剂量依赖性,但低浓度的CA对A375细胞的活性抑制作用与阴性对照组相比虽有统计学意义却不显著[1],因此选用0.03μM、0.1μM、0.3μM较低浓度组CA进行后面的实验,以降低细胞凋亡对迁移的影响.Western blot实验显示:CA对A375细胞中β-catenin蛋白表达有抑制作用,且有剂量依赖性,0.3μM浓度时与阴性对照组相比有统计学意义.结论 CA可抑制A375细胞的生长活性及迁移且可下调与生长及迁移密切相关的β-catenin蛋白的表达.
关键词： CleistanthinA 恶性黑素瘤 迁移 β-catenin -
17β-雌二醇对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白表达的影响
目的 研究17β-雌二醇(17β-E2)对子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白表达的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路在介导雌激素促进内异症发生发展的作用.方法 体外分离培养内异症患者在位子宫内膜间质细胞.用不同浓度17β-E2处理子宫内膜问质细胞48 h;此后选用10-10.mol/L17β-E2处理子宫内膜间质细胞12、24和48 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blotting)检测17β-E2处理前后子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达水平.同法分析雌激素受体拮抗剂ICI182,780(10-6mol/L)对17～-E2促进pcatenin mRNA和蛋白表达的影响.免疫组织化学染色观察17β-E2作用后β-catenin在子宫内膜间质细胞中的定位.结果 17β-E2能明显促进内异症患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达,并呈剂量和时间依赖性,于10-10mol/L作用48 h明显.雌激素受体拮抗剂ICI182,780能明显抑制17β-E2对子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达.免疫组织化学染色发现17β-E2能促进β-catenin在子宫内膜间质细胞核内的表达.结论 雌激素可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进内异症在位子宫内膜的异位种植.
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β-catenin在25例成人髓母细胞瘤中的表达及意义
目的 探讨β-catenin在25例成人髓母细胞瘤中的表达,分析其表达与肿瘤临床病理特征及患者预后间的关系.方法 收集我院病理科确诊并有完整临床资料,可进行系统性评估及生存随访的成人髓母细胞瘤患者25例.收集治疗前患者的年龄、性别、肿瘤发生部位、病理学分型及预后,应用免疫组化技术检测β-catenin在25例成人髓母细胞瘤中的表达.结果 25例患者中,经典型髓母细胞瘤19例,促纤维增生/广泛结节型2例,大细胞/间变细胞型4例.β-catenin在25例患者中的阳性表达率为56.0％.结论 β-catenin在成人髓母细胞瘤中表达与预后相关,阳性表达可作为肿瘤预后良好的指标.
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大肠腺瘤及癌组织中β-catenin、APC及CD44V6异常改变的意义
目的探讨β-catenin、APC基因及黏附分子CD44V6在大肠癌发生发展的作用.方法运用PCR-SSCP及免疫组化方法检测大肠腺瘤25例,大肠癌90例及癌旁正常粘膜45例中APC、β-catenin基因突变、蛋白表达及粘附分子CD44V6的表达.结果大肠粘膜中未见β-catenin、APC基因突变及CD44V6阳性表达(0%,0%,0%),而APC蛋白表达阳性率为100%(45/45).大肠腺瘤β-catenin突变率及蛋白异常表达率分别为24%(6/25),32%(8/25).APC突变率及蛋白表达率分别为12%(3/25)、80%(20/25).CD44V6异常表达率为4%(1/25).大肠癌中β-catenin突变率、蛋白表达率分别为27.8%(25/90)及32.2%(29/90),APC突变率、蛋白表达率分别为22.2%(20/90)及44.4%(40/90).CD44V6表达率72.2%(65/90).大肠癌及腺瘤中β-catenin突变率及蛋白异常表达率显著高于正常大肠黏膜(P＜0.05,P＜0.01),而大肠癌与腺瘤组织间无显著差别(P＞0.05).大肠癌中APC突变率及蛋白表达缺失率、CD44V6异常表达率显著高于腺瘤及正常大肠黏膜(P＜0.05,P＜0.01),而大肠腺瘤与正常组织间无显著差别(P＞0.05).CD44V6表达异常与大肠癌的淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05).三种基因改变之间无显著相关性.结论β-catenin、APC基因改变在大肠腺瘤向癌的转化中起一定作用.黏附分子CD44V6表达异常与大肠癌的预后有关,可作为判断预后的指标.
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β-catenin在非小细胞肺癌中的表达与临床病理因素的关系
目的:研究非小细胞肺癌中β-catenin表达及其与非小细胞肺癌组织学分型、分化及淋巴结转移的关系.方法:对120例非小细胞肺癌行S-P免疫组化法,检测β-catenin表达情况.结果:β-catenin异常表达率为80.0%.β-catenin的异常表达与NSCLC病理学类型(P＝0.494)和分明(P＝0.679)无相关性.高、中分化NSCLC中β-catenin的异常表达率明显低于低分化NSCLC(P＝0.003).有淋巴结转移的NSCLC中β-caentin异常表达明显高于无淋巴结转移的NSCLC(P＝0.44).结论:β-catenin的异常表达与NSCLC瘤细胞的分化负相关,与 NSCLC淋巴结转移正相关.
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β-catenin在大肠肿瘤中的表达及其意义
目的:探讨β-连环蛋白(β-catenin)在大肠肿瘤中的表达及其在大肠癌发生、发展中作用.方法:采用免疫组织化学(SP法)对23例大肠腺瘤及62例大肠癌标本中β-catenin的表达进行检测.结果:β-catenin在大肠癌表达缺失率、异位表达率高于大肠腺瘤中相应表达率(P=0.00,P=0.027);大肠癌组织中β-catenin蛋白的表达缺失率、异位表达率及表达程度在中、低分化间,高、低间相比,差异有统计学意义(P＜0.05);在浸透浆膜组高于未浸透浆膜组,在淋巴结有转移组高于淋巴结无转移组,TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)高于(Ⅰ+Ⅱ期),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:β-catenin与大肠癌的发生、发展、侵袭及转移有密切关系.
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β-catenin 和 GSK-3β在红藻氨酸点燃动物模型颞叶癫痫形成中的变化
目的：探讨经典的 Wnt／β-catenin 信号分子β-catenin、GSK-3βmRNA 在红藻氨酸（KA）致痫大鼠颞叶癫痫形成中的时间变化过程及丙戊酸钠（VPA）对其表达的影响。方法利用生后30天的雄性 SD 大鼠，经皮下注射 KA 制成颞叶癫痫动物模型后，应用 Real-time PCR 技术检测 KA 后不同时期大鼠海马组织中 Wnt 信号通路分子β-catenin 和 GSK-3βmRNA 的表达，并观察抗癫痫药物丙戊酸钠对其表达的影响。结果 KA 致痫后在颞叶癫痫形成过程中，KA 组急性期β-catenin mRNA 的表达（0.76±0.06）较对照组（1.00±0.00）显著下降，差异有统计学意义；癫痫形成初期的表达（1.00±0.07）与对照组，差异无统计学意义；慢性期的表达（1.33±0.25）与对照组比较显著增高，差异有统计学意义。KA 组动物海马组织急性期 GSK-3βmRNA 的表达（0.72±0.12）较对照组（1.00±0.00）显著下降，癫痫形成初期（0.41±0.12）较对照组也降低，差异均有统计学意义；慢性期（0.82±0.10）与对照组比较，差异无统计学意义。红藻氨酸＋丙戊酸钠组大鼠海马组织 GSK-3β和β-catenin mRNA 的表达，在颞叶癫痫形成的不同阶段与对照组比较，与 KA 组有相同的变化趋势，但两组间比较，差异均无统计学意义。结论 Wnt5a 可能通过经典的 Wnt 信号通路调控 KA 点燃颞叶癫痫大鼠海马神经发生参与颞叶癫痫的产生。丙戊酸钠的抗痫作用机制与大鼠海马β-catenin、GSK-3β信号分子无关。
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健脾解毒方通过抑制MALAT1介导的β-catenin信号通路抗大肠癌侵袭转移
目的:探讨健脾解毒方通过抑制MALAT1介导的β-catenin信号通路抗大肠癌侵袭转移的作用机制.方法:利用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默MALAT1基因,观察健脾解毒方对大肠癌细胞侵袭转移及MALAT1介导的β-catenin信号通路的调控作用.结果:健脾解毒方能够抑制大肠癌细胞的侵袭转移能力,直接下调MALAT1基因的表达,抑制大肠癌细胞胞核内β-catenin的积累及其下游靶基因MMP-7的表达;MALAT1基因能够增加β-catenin在细胞核内的积累及其下游靶基因MMP-7的表达.结论:MALAT1通过激活β-catenin信号通路并促进下游靶基因MMP-7的表达以达到促进大肠癌细胞侵袭转移的目的,而健脾解毒方能够通过直接抑制MALAT1的表达发挥抗大肠癌细胞侵袭转移的作用.
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石斛合剂通过GLP-1/β-Catenin信号通路促进胰岛细胞增殖的机制
目的:探讨石斛合剂对胰岛β细胞保护作用及可能机制.方法:采用体外细胞培养的方法,予GLP-1受体抑制剂(Exendin9-39)干预胰岛β-TC-6细胞,MTT测细胞存活率,流式细胞仪测细胞周期,Westernblot检测相关蛋白表达变化.结果:抑制剂干预后细胞S期缩短(P＜0.01);石斛合剂组及阳性对照组S期延长(P＜0.05,P＜0.01).抑制剂干预后细胞GLP-1R、β-Catenin、p-β-Catenin(ser-675)、PDX-1蛋白表达显著下调(P＜0.01);石斛合剂组及阳性对照组GLP-1R、β-Catenin、p-β-Catenin(ser-675)、PDX-1蛋白表达水平明显上调(P＜0.05,P＜0.01).结论:石斛合剂可保护胰岛β细胞,促进其增殖,其机制可能是通过增加GLP-1R受体及其相关蛋白的表达实现的.
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鳖甲煎丸对肝癌细胞周期及Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、COX-2蛋白表达水平的影响
目的:研究鳖甲煎丸对肝癌细胞HepG2细胞周期、Wnt信号通路中β-catenin蛋白及其磷酸化水平、靶基因COX-2蛋白表达水平的影响,探讨鳖甲煎丸抗HepG2细胞增殖、黏附与侵袭的作用机制.方法:运用血清药理学方法,以鳖甲煎丸含药血清、空白血清及索拉菲尼含药血清分别培养HepG2细胞,采用流式细胞术、WesternBlot检测药物对细胞周期、Wnt信号通路中β-catenin、phospho-β-catenin(Ser675)、COX-2蛋白表达水平的影响.结果:鳖甲煎丸高中剂量组、索拉菲尼可使HepG2细胞发生C1期阻滞,下调HepG2细胞中β-catenin、COX-2、phospho-β-catenin(Ser675)蛋白表达水平.结论:鳖甲煎丸可抑制HepG2细胞增殖、黏附与侵袭,其机制可能与其使细胞发生G1期阻滞、减少β-catenin在细胞中的积聚、干预phospho-β-catenin(Ser675)的促转录作用、抑制靶基因COX-2表达具有相关.
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骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎大鼠关节软骨Wnt/β-catenin信号通路的影响
目的:通过骨灵膏(GLG)及其拆方制剂对骨关节炎关节软骨组织Wnt/β-catenin信号通路作用的研究,探讨GLG及其拆方制剂对骨关节炎的作用机制.方法:选用60只雌性SD大鼠随机分为骨灵膏组、骨膏(GUG)组、灵膏(LG)组、塞来昔布组、模型组及正常组6组,每组10只,除正常组外其余各组采用冷固法(寒冷刺激结合石膏固定的方法)6周建立骨关节炎模型,造模成功后除正常组和模型组分别给予0.9％氯化钠溶液灌胃外,其余组分别给予GLG、GUG、LG及塞来昔布灌胃,给药10周后,取大鼠膝关节软骨组织,采用免疫组化检测软骨组织Wnt-2、β-catenin的含量,采用Western Blot法检测LRP-5的表达,通过RT-PCR检测软骨细胞BMP-2、MMP-13、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达.结果:GLG可以减轻OA软骨组织浅表至钙化层各层的病理损伤;GLG及其拆方制剂可以明显下调Wnt2、β-eatenin的阳性表达,其中GLG与GUG、LG比较β-catenin阳性率明显下降(P＜0.01).Western Blot结果显示GLG组LRP-5蛋白表达较其他组显著降低;FQ-RT-PCR实验结果表明在骨灵膏组BMP-2mRNA的表达较GUG组明显增加(P＜0.01),而与LG组比较明显降低(P＜0.01),与正常组比较无差异(P＜0.05);GLG及其拆方制剂组BMP-2、MMP-13、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达较模型组显著降低(P＜0.01),GLG较GUG、LG及塞来昔布比较MMP-13、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达明显降低(P＜0.01).结论:GLG可能通过平衡调节OA中BMP-2 mRNA的表达,下调Wnt/β-catenin信号通路依赖的LRP-5跨膜蛋白的含量,阻止Wnt/β-catenin信号通路的过度抑制和异常激活,进而下调MMP-13、Caspase-9、Caspase-3 mRNA的表达起到减轻其对软骨ECM的降解及软骨细胞的异常凋亡作用,阻止了OA关节软骨进行性退变,GLG的上述作用优于其拆方制剂GUG和LG及塞来昔布.
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肾虚证骨质疏松与β-Catenin信号传导通路的相关性研究
目的:探索肾虚证骨质疏松与β-Catenin信号传导通路之间的相关性.方法:去卵巢复制肾虚证骨质疏松动物模型,将Topgal转基因小鼠、野生型小鼠、Axin2基因敲除小鼠分别按随机数字表法分为假手术组和模型组,于造模1个月后分离相应组织进行X-gal染色和细胞B-gal活性检测以及Micro-CT扫描分析骨量.结果:与假手术组比较,肾虚证模型组Topgal转基因小鼠肾脏组织和骨髓间充质干细胞中β-Catenin信号传导通路的活性均被明显抑制.Micro-CT检测结果发现,通过Axin2基因敲除可明显抑制小鼠去卵巢所致的胫骨骨量减少.结论:肾虚型骨质疏松症的发病病理机制与β-Catenin信号传导通路失活密切有关,通过激活β-Catenin信号传导通路可明显抑制肾虚引起的骨质疏松.
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补肾益脑灸法通过Wnt信号通路影响围绝经期抑郁症大鼠海马神经发生
目的:基于Wnt信号通路观察补肾益脑灸法对围绝经期抑郁症大鼠海马神经干细胞分化标记物表达的影响并探讨其治疗机制.方法:60只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、假手术组、西药组和艾灸组5组,采用去势和慢性不可预见刺激结合制备围绝经期抑郁症大鼠模型.连续治疗28 d,观察大鼠一般情况变化、动情周期、体质量及糖水消耗实验结果,运用ELISA法检测海马组织中的GFAP、Tuj-l、GSK-3β、β-catenin,RT-PCR法检测海马组织中的GSK-3βmRNA、β-catenin mRNA表达.结果:遣模后其他组较空白组表现出抑郁行为,而治疗后抑郁行为好转,西药组、艾灸组及假手术组较模型组海马组织中GFAP、GSK-3β及GSK-3βmRNA的表达量增加,Tuj-1、β-catenin及β-catenin mRNA表达量有所减少.结论:补肾益脑灸法可以通过调节海马Wnt通路GSK-3β、β-catenin的表达调控海马神经干细胞的定向分化,对围鲍经期抑郁症起到治疗作用.
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白芍总苷对2型糖尿病大鼠肾组织Wnt/β-catenin信号通路表达的影响
该实验研究白芍总苷对2型糖尿病大鼠肾组织Wnt/β-catenin信号通路表达的影响,探讨白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏损伤的保护作用及可能机制.实验采用高糖高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠,动物分为正常对照组,糖尿病对照组,白芍总苷低、中、高剂量治疗组(50,100,200 mg·kg-1)及阳性对照组(雷公藤多苷8 mg· kg-1),灌胃给药,每日1次,14周末检测大鼠空腹血糖,血肌酐,尿素氮,24 h尿蛋白;光镜观察肾组织形态学的改变;病理图像系统分析平均肾小球面积及平均肾小球体积;免疫组织化学及Western blot检测肾组织Wnt-1,β-catenin蛋白表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织Wnt-1,β-catenin mRNA表达.研究发现高糖高脂诱导的2型糖尿病大鼠肾组织Wnt-1,β-catenin表达增高.与糖尿病对照组比较,各治疗组大鼠血肌酐,尿素氮,24 h尿蛋白,平均肾小球面积,平均肾小球体积显著降低,肾组织病理形态学明显改善;Wnt-1,β-catenin mRNA及蛋白表达显著减少.综上所述,2型糖尿病大鼠肾组织Wnt/β-catenin信号通路异常活化,白芍总苷可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活化,改善糖尿病大鼠肾脏损害,延缓糖尿病肾病的发生发展.
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白头翁皂苷调控RA模型大鼠FLS SFRP2表达
目的:研究中药白头翁主要活性成分白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS) SFRP2表达的调控.方法:采用大鼠关节炎评分法和足爪肿胀评分法评价PULC对RA模型大鼠的治疗作用,MTT法检测PULC灌胃治疗后对FLS增殖抑制作用.RT-PCR,Western blotting检测PULC灌胃治疗对FLS SFRP2基因表达的调控作用,对Wnt通路关键基因β-catenin,Wnt通路下游效应基因C-myc的调控作用.结果:RA模型大鼠FLS中SFRP2基因表达明显下调,经PULC灌胃治疗后,RA模型大鼠FLS中SFRP2表达上调,β-catenin和C-myc基因表达明显下调.结论:PULC通过对Wnt通路的调控抑制RA模型大鼠滑膜异常增殖.
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亚硝胺致食管癌前病变时Wnt通路抑制因子的变化及膈下逐瘀汤的影响
目的:探讨甲基苄基亚硝胺(MBNA)诱发食管癌前病变Wnt通路抑制因子的变化及膈下逐瘀汤的影响.方法:Wistar大鼠按3.5 mg·kg-1体重剂量皮下注射MBNA溶液,每周2次,造模首日起以膈下逐瘀汤16,8g·kg-1剂量灌胃给药,于造模第10周处死各组大鼠,观察食管黏膜病理变化,荧光定量PCR检测sFRP1,sFRP4,Axin1,Axin2,GSK-3β mRNA转录水平,Western blot检测β-catenin蛋白水平.结果:MBNA诱导下,模型组大鼠食管黏膜病理学检查呈轻度不典型增生,膈下逐瘀汤高、低剂量组与模型组比较病理形态学与组织学均未有明显改善;模型组大鼠食管组织sFRP1,sFRP4,Axin1,Axin2基因转录水平较对照组降低(P ＜0.05或P＜0.01),β-catenin蛋白水平较对照组升高(P＜0.01),膈下逐瘀汤低剂量组sFRP4,Axin1,Axin2基因转录水平较模型组升高(P ＜0.05或P＜0.01),β-catenin蛋白水平较模型组降低(P＜0.01).结论:上调β-catenin蛋白水平、下调Wnt通路抑制因子转录水平从而增强Wnt通路活性是MBNA致大鼠食管癌前病变的可能分子机制之一,膈下逐瘀汤虽可下调β-catenin 蛋白水平、上调Wnt通路抑制因子转录水平,但不足以阻断MBNA诱发的食管癌前病变.
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禹州漏芦总黄酮抑制佐剂性关节炎大鼠Wnt信号
研究地道药材禹州漏芦主要活性成分总黄酮(FELT)对佐剂性关节炎(AA)大鼠Wnt信号的影响.采用大鼠关节炎评分法和MTT检测FELT对AA大鼠的治疗作用,Real-time qPCR检测FELT灌胃治疗对AA大鼠滑膜中Wnt信号关键基因β-catenin,C-myc和cyclin D1表达的影响,Real-time qPCR检测FELT灌胃治疗对AA大鼠滑膜中Wnt信号上游负调控基因SFRP 1,2,4,5表达的影响.结果发现FELT对AA大鼠关节炎评分和MTT值有显著的抑制作用,对Wnt信号关键基因β-catenin,C-myc和cyclin D1表达有显著的抑制作用,对SFRP 1,2,4表达有显著的上调作用.FELT灌胃治疗对AA大鼠有较好的治疗作用,这种治疗作用可能是通过对Wnt信号的抑制实现的.
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藏药诃子提取物HZ4对脑梗死模型的神经保护作用及分子机制研究
为研究藏药诃子提取物HZ4对局灶性脑梗死大鼠模型的作用和分子网络机制.将雄性SD大鼠90只随机分为6组:假手术组,模型组,诃子提取物HZ4高、中、低剂量(80,40,20 mg·kg-1·d-1,ig)组和阳性对照组(三七总皂苷,30 mg·kg-1·d-1,ig).采用光化学法制备局灶性脑缺血模型,连续给药7d,对各组大鼠进行Beam balance,Foot-fault神经行为学评价,采用HE染色法研究脑梗死灶半暗带细胞形态学病变,利用TTC染色法研究脑梗死体积,利用RT-PCR技术检测病灶半暗带组织Wnt信号通路中关键节点基因β-catenin和cyclin D1的表达.结果发现,给药组与模型组相比,大鼠的行为学指标明显改善,脑梗死体积减小,脑梗半暗带病理指标有所改善.与模型组相比,给药组Wnt信号通路中关键节点基因β-catenin和cyclin D1表达明显上调(P＜0.01).该研究首次在整体水平证明了诃子HZ4具有减少脑梗死体积、提高运动能力评分、促进模型动物康复的作用,同时证明β-catenin和cyclin D1基因比模型组大鼠明显上调,其分子机制可能与Wnt信号通路有关,研究具有一定的创新性.
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补肾舒脊颗粒含药血清对人骨髓间充质干细胞Wnt5a、β-catenin mRNA及蛋白表达的影响
目的 探讨补肾舒脊颗粒延缓异位骨化的可能作用机制.方法 体外培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分为空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组.空白组加入基础培养基(3.8ml)+5％正常大鼠血清(0.2ml);模型组加入诱导培养基(4.8ml)+5％正常大鼠血清(0.2ml);西药组加入诱导培养基(3.8 ml)+5％洛索洛芬钠含药血清(0.2 ml);中药高、中、低剂量组分别加入诱导培养基(3.8 ml)+5％补肾舒脊颗粒含药血清(0.2ml).28天后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均升高(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,对照组和中药各剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均降低(P＜0.05或P＜0.01);与对照组比较,中药高剂量组Wnt5amRNA、β-catenin mRNA表达降低,中药中剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01);与中药低、中剂量组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低(P＜0.05或P＜0.01).与中药低剂量组比较,中药中剂量组Wnt5a蛋白表达降低,中药高剂量组β-catenin蛋白表达升高(P＜0.05). 结论 补肾舒脊颗粒可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白的表达,从而起到延缓强直性脊柱炎异位骨化的作用.
