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口腔鳞癌相关成纤维细胞能量代谢表型的实验研究
目的 运用细胞代谢呼吸动态分析仪研究口腔鳞癌相关成纤维细胞(oral cancer associated fibroblasts,CAFs)能量代谢表型,为靶向CAFs代谢治疗口腔鳞癌提供研究依据.方法 原代培养CAFs和癌旁正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),细胞代谢呼吸动态分析仪对CAFs和NFs进行线粒体和糖酵解压力测试,通过比较CAFs和NFs的OCR、ECAR值分析二者氧化磷酸化和糖酵解代谢水平的差异,得出CAFs能量代谢表型.结果 CAFs和NFs氧化磷酸化基础水平基本一致,CAFs氧化磷酸化大值和储备值明显提高(P<0.01);CAFs糖酵解基础值、大值和储备值均明显高于NFs(P<0.01).结论 CAFs氧化磷酸化和糖酵解代谢能力较NFs显著增强,氧化磷酸化水平的增强主要体现在储备能力上,抑制CAFs氧化磷酸化储备能力可能成为新的抑癌靶点.
关键词： 口腔鳞癌相关成纤维细胞 氧化磷酸化 糖酵解 -
口腔鳞癌相关成纤维细胞糖代谢的初步研究
目的 通过对口腔鳞癌相关成纤维细胞(carcinoma-associate fibroblasts,CAFs)糖代谢相关指标的检测,探讨肿瘤微环境CAFs糖代谢的可能方式并分析其作用和意义.方法 培养CAFs和癌旁正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),詹纳斯绿B染色观察线粒体的数量及分布,JC-1荧光染色观察线粒体膜电位的改变.培养1、2、3、4d,通过定磷法用可见分光光度计检测细胞中ATP的含量,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测细胞摄取葡萄糖的能力,乳酸酶法检测细胞分泌乳酸情况.结果 与NFs组相比,CAFs线粒体詹纳斯绿B和JC-1荧光染色强度明显下降,显示CAFs线粒体活性下降.随着培养时间的延长,CAFs较NFs组摄取葡萄糖增多,ATP产能却减少,分泌乳酸增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);以培养第4天差异更明显,CAFs和NFs组培养基葡萄糖浓度分别为(10.85 ±1.42)、(16.04±1.09) mmol/L,产生ATP浓度分别为(42.99 ±4.64)、(57.37±2.75) μmol/g,产生乳酸浓度分别为(12.1±0.81)、(7.06±0.95) mmol/L.结论 口腔鳞癌CAFs细胞糖代谢方式发生了改变,以糖酵解为主.
关键词： 口腔鳞癌相关成纤维细胞 糖代谢 反瓦伯格效应
