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基于液质联用技术的高通量靶标磷脂组学的分析研究
目的 建立高通量靶标磷脂组学分析方法,研究尿液中的磷脂轮廓并筛选出尿液样本中潜在的磷脂标志物.方法 用改良的甲基叔丁基醚法提取尿液中磷脂,用高效液相-电喷雾-四级杆-线性离子阱串联质谱技术对尿液中目标磷脂进行半定量分析,用7种磷脂标准品和15种随机选取的内源性磷脂化合物进行方法学考察,包括专属性、灵敏度、精密度、基质效应、携带效应、稳定性和回收率.对穿插在检测过程中的质控(QC)样品进行主成分分析,考察数据的可靠性.结果 磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇和鞘磷脂的定量下限分别为0.25,0.25,2.00,2.00,1.00,1.00ng·rnL-1和625.00 pg·mL-1.连续进样过程中的随机峰的保留时间精密度RSD为0.72％～3.44％,相对峰面积RSD为0.71％～10.53％,7种磷脂化合物的回收率均在54.05％～ 105.73％内,尿样经室温放置12 h、制备后放置24h、冻融2次以及-80℃下存放1个月后样本均保持稳定.QC样品在第一主成分图显示检测数据稳定可靠.结论 该检测分析方法在磷脂组学研究中具有简单、稳定和敏感的特点,可应用于后续大样本量的磷脂组学研究及潜在尿磷脂标志物的定量研究.
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基于主成分分析和正交偏小二乘判别分析对NSAIDs干预RAW264.7细胞炎症模型的磷脂组学研究
目的 采用主成分分析(PCA)和正交偏小二乘判别分析(OPLS-DA)对NSAIDs干预RAW264.7细胞炎症模型的磷脂代谢组学进行研究,筛选并鉴定潜在的生物标记物.方法 使用UPLC/Q-TOF-MS色谱质谱联用技术,分别在正、负离子模式下对空白细胞组、炎症模型组、美洛昔康给药组、双氯芬酸钠给药组和尼美舒利给药组细胞中甘油磷脂类成分进行液质检测,数据处理后,导入SIMCA-P和R软件进行化学计量学分析.结果 PCA得分图和OPLS-DA得分图中,5组样品能很好地区分.通过R软件,筛选并鉴定出34个潜在的生物标记物.结论 使用化学计量学能很好用于NSAIDs干预RAW264.7细胞炎症模型的磷脂组学的数据处理和分析,并且筛选出潜在的生物标记物.
