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Pre-S1抗原在临床及健康体检中的应用价值
目的 探讨Pre-S1抗原检测的临床意义.方法 采用ELISA方法检测乙肝病毒"两对半"及Pre-S1抗原,HBV-DNA检测运用荧光定量PCR方法.结果 在HBsAg阳性的标本中,HBV-DNA检出率为69.3%,而Pre-S1检出率为65.8%;97例Pre-S1阳性而HBeAg阴性的标本,占Pre-S1总阳性病例的27.8%,在HBeAg阴性的病例中HBV-DNA阳性为97例,占HBV DNA总阳性病例的25.5%.在HBsAg阴性组的标本402例中,检出Pre-S1阳性9例.结论 Pre-S1抗原与HBV-DNA高度相关;PreS1可替代或补充HBe系统及HBV-DNA的检测,建议纳入从业人员健康体检和献血员筛查的检测项目.
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HBeAg时间分辨荧光免疫分析法的建立
采用平衡饱和法建立了乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)时间分辨荧光免疫分析法.以针对HBeAg的单克隆抗体G8包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3+及标记C4单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液.数据采用Log-Logit法函数和四参数Logitc函数数据处理程序处理.结果表明方法的批内和批间CV分别为2.39%和5.28%,平均回收率为97.62%,灵敏度为0.58NCU/mL,可测范围为12.01-529.84NCU/mL,ED20、ED50和ED80分别为6.36NCU/mL、26.85NCU/mL和136.7NCU/mL.本方法与HBsAg有13.1%的交叉反应.Eu3+标记抗体-30℃保存6个月免疫反应性基本无损失,同批试剂连续5个月应用分析结果稳定.HBeAg时间分辨荧光免疫分析的质量参数优于EIA和IRMA.
关键词： 时间分辨荧光免疫分析 乙型肝炎病毒e抗原 -
慢性乙型肝炎病例乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸载量和乙型肝炎病毒e抗原状态与丙氨酸氨基转移酶的相关性研究
目的 研究慢性乙型肝炎(乙肝)病例(Chronic Hepatitis B Patient,CHBP)乙肝病毒(Hepatitis B Virus,HBV)复制、乙肝病毒e抗原(HBV e Antigen,HBeAg)状态与丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase,ALT)检测值之间的相关关系.方法 对31个省(自治区、直辖市)发现的确诊CHBP采血,检测肝功能和HBV感染血清学标志物[乙肝病毒表面抗原(HBV Surface Antigen,HBsAg)、HBeAg]及乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV Deoxyribonucleic Acid,DNA)载量.ALT指标在采血24h内由当地医疗机构检测.HBsAg、HBeAg及HBV DNA载量检测由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所统一完成.HBsAg、HBeAg使用美国雅培(Abbott)试剂光化学发光微粒子免疫分析法(Chemiluminesent Microparticle Immunoassay,CMIA)检测.HBV DNA载量使用实时聚合酶链反应(Polymerase ChainReaction,PCR)工具包(中国复星医药有限公司)检测.结果 ＜20岁、20 ～ 40岁和＞40岁CHBP中,高病毒载量[HBVDNA＞105拷贝/毫升(Copies/ml)]者比例分别为70.21％、40.37％和28.75％(x2=29.38,P＜0.001).在HBV DNA低(＜103 Copies/ml)、中(103 ～ 105 Copies/ml)、高(＞105Copies/ml)载量组内,HBeAg阳性率分别为2.36％、9.40％和82.24％,两两差异均有统计学意义(x2 =5.57,P=0.02;x2=177.78,P＜0.001;x2 =140.31,P＜0.001).多因素分析结果显示,影响CHBP ALT的独立因素有年龄、性别和HBV DNA载量.相对于0～19岁CHBP,20 ～ 39岁CHBP ALT升高比值比(Odds Rate,OR)=3.27[95％可信区间(Confidence Interval,CI):1.32 ～8.01],＞40岁CHBP ALT升高OR=3.92 (95％ CI:1.54 ～9.98).相对于女性,男性CHBP ALT升高OR=2.93(95％ CI:1.64 ～5.24).中病毒载量和低病毒载量对CHBP ALT的影响差异无统计学意义(x2=0.20,P=0.66),但高病毒载量组ALT升高的OR =3.01 (95％ CI:1.33 ～6.80).结论 HBeAg阳性CHBP体内HBV复制活跃,HBVDNA高病毒载量是CHBP ALT升高的危险因素.
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乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸载量与乙型肝炎病毒e抗原和抗体定量对数正相关
目的 探讨乙型肝炎(乙肝)病毒(Hepatitis B Virus,HBV)脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid,DNA)载量与乙肝病毒e抗原(HBV e Antigen,HBeAg)和抗乙肝病毒e抗原抗体(Antibody to HBeAg,Anti-HBe)定量的相关关系.方法 使用美国雅培公司Abbott Axsym System,采用微粒子捕捉免疫发光技术(Microparticle Enzyme Immunoassay,MEIA),对621份HBV阳性回访人群血清进行HBV五项血清标志物的定性和定量检测；采用美国应用生物技术公司的7500实时聚合酶链反应系统[Real Time Polymerase Chain Reaction (PCR) System],运用PCR荧光探针法检测血清中HBV DNA含量；并进行统计分析.结果 (1)HBeAg阳性组HBV DNA阳性率高于HBeAg阴性组(x2=44.60,P＜0.0001);(2) HBV DNA载量分别与HBeAg、Anti-HBe定量存在对数正相关关系(偏相关系数r=0.65,P＜0.0001；r=0.71,P＜0.0001).结论 HBeAg阳性预示HBV复制活跃,血清转换后HBV复制下降,但HBeAg或Anti-HBe定量越高,HBV DNA载量均越高,传染性越强.
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HBsAg和HBeAg定量检测的临床应用及意义
HBsAg和HBeAg定量检测越来越广泛的应用于临床.近研究表明,这种定量检测不仅仅是一种方法学的进步,还能够指导慢性乙型肝炎患者预后及治疗,且一些基础和临床研究表明,这些抗原检测具有重要的临床意义,本文综述近年来此方面的重要进展并初步提出以后的研究方向.
关键词： 乙型肝炎病毒表面抗原 乙型肝炎病毒e抗原 慢性乙型肝炎 定量检测 -
HBeAg(-)乙型肝炎后肝硬化的临床特征
目的:探讨HBeAg(-)乙型肝炎后肝硬化患者临床特征.方法:我院2005-01/06,肝硬化住院患者371例,分为A,B,C三组,分别为HBVDNA(+)HBeAg(+),HBVDNA(+)HBeAg(-),HBVDNA(-)HBeAg(-)3组进行分析.观察癌变发生率、重症肝炎发生率,肝功能及血脂等指标.结果:B组癌变率明显高于A,C组(31.3%vs19.2%,18.2%,均P＜0.05);重症肝炎发生率三组间无显著差异(P＞0.05);ALB、PAB、CHE在C,B,A三组间依次降低,A组降低明显,与其他B,C组差异呈高度显著性(P＜0.05).血脂4项检测在C组高,与A,B组之间的差异呈高度显著性(P＜0.05).TBA在A,B,C三组间依次降低(96.89±101.44,76.46±83.80,58.92±77.17 μmol/L),相互之间有显著性差异(P＜0.01).平均病毒载量A组明显高于B,C组,有显著性差异(2.5×107 vs 7.7×106,0,P＜0.05).结论:HBVDNA(+)HBeAg(-)乙型肝炎后肝硬化患者癌变率高;肝脏受损程度介于HB eAg(+)DNA(+)组和HB eAg(-)DNA(-)组之间.
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HBeAg结合蛋白4基因剪切体HBeBP4A的克隆化
目的:克隆HBeAg结合蛋白未知功能新基因HBeBP4的剪切体基因HBeBP4A,构建其真核表达载体,并应用生物信息学初步探讨其结构及功能.方法:应用PCR技术从HepG2细胞提取的cDNA扩增HBeBP4基因的剪切体基因HBeBP4A,选用pGEM-Teasy载体进行TA克隆,通过PCR,限制性酶切分析及测序进行鉴定,再将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM3.1/myc-HisA,通过PCR,限制酶切分析进行鉴定,并应用生物信息学初步分析其物理化学性质,蛋白质结构和功能.结果:成功扩增出HBeBP4剪切体基因,命名为HBeBP4A.利用生物信息学分析推定其ORF为1104个核苷酸(nt),编码产物为367个氨基酸残基(aa).结论:发现了HBeAg结合蛋白4(HBeBP4)基因的剪切体HBeBP4A,构建了pcDNATM3.1/myc-HisA真核表达载体.
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HBeAg阳性及HBeAg阴性乙型肝炎病毒相关原发性肝癌患者生物化学指标及病毒载量
目的：分析HBeAg阳性及HBeAg阴性乙型肝炎病毒相关原发性肝癌患者生物化学指标及病毒载量。方法随机选择2010年1月至2015年1月于本院住院的乙型肝炎病毒相关原发性肝癌患者200例，分析HBeAg阳性（137例）和HBeAg阴性（63例）患者的血常规、生物化学指标、甲胎蛋白（AFP）及HBV DNA载量等。结果HBeAg阳性组患者的ALT与HBV DNA均高于与HBeAg阴性组，AFP水平低于HBeAg阴性组，差异有统计学意义（t值分别为0.011、4.090和0.137，P值分别为0.042、0.045和0.013）。两组患者中不同HBV DNA载量患者的比例差异有统计学意义（χ2=9.582，P =0.007）。结论 HBV DNA病毒载量与ALT水平呈正相关。HBeAg阴性乙型肝炎病毒相关原发性肝癌发生率高于HBeAg阳性，且肝脏炎症程度重，甲胎蛋白水平更高，值得临床关注。
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毕赤酵母及大肠埃希菌表达的重组乙型肝炎病毒e抗原在乙型肝炎病毒e抗体检测中的比较分析
目的 探讨毕赤酵母及大肠埃希菌表达的重组乙型肝炎病毒e抗原(recombinant hepatitis B e antigen, rHBeAg)在乙型肝炎病毒e抗体(hepatitis B e antibody, HBeAb)免疫检测中的应用.方法 用分子筛纯化两种rHBeAg,进行特异性和免疫反应性鉴定;分别用纯化后毕赤酵母表达的HBeAg(A)、大肠埃希菌表达的HBeAg(B)作为中和试剂,单克隆HBeAb为固相抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆HBeAb为探测抗体,用固相-液相竞争抑制法酶联免疫吸附实验检测HBeAb标准品及乙型肝炎病毒PCR阳性和阴性的临床标本.结果 (1)检测中国药品生物制品检定所HBeAb国家参考品结果 :试剂A:阴性符合率(-/-)15/15,阳性符合率(+/+)10/10;灵敏度参考品低检出量(稀释度)1#= 1∶ 128,2#=1∶ 128,3#=1∶ 256.试剂B:阴性符合率(-/-)15/15;阳性符合率(+/+)9/10;灵敏度参考品低检出量(稀释度)1#=1∶ 32;2#=1∶ 64;3#=1∶ 64;大肠埃希菌抗原的灵敏度明显低于毕赤酵母抗原;(2)对乙型肝炎病毒PCR阳性及阴性的临床标本进行检测:试剂A和试剂B对PCR阳性组的HBeAb阳性检出率分别为50.4%和51.6%,差异无显著统计学意义(P＞0.05);PCR阴性组的HBeAb阴性检出率,试剂A和试剂B分别为 91.2%和 86.7%,差异有显著统计学意义(P＜0.01).结论 毕赤酵母表达的HBeAg用于HBeAb的检测灵敏度及特异性均优于大肠埃希菌表达产物.
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原蛋白转化酶Furin P1启动区SNP-229 C/T影响HBV感染的转归
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)自限感染和慢性感染与原蛋白转化酶Furin P1启动区SNP-229 C/T的关系.方法 收集112例抗-HBs和抗-HBc阳性的HBV自限感染者和300例HBV慢性感染者的外周全血,提取基因组DNA;采用竞争分化聚合酶链反应技术为基础的方法 对Furin P1启动区SNP-229 C/T进行基因分型.结果 全部患者中,C等位基因频率为74.6%(615/824),T等位基因频率为25.4%(209/824),CC、CT和TT基因型的频率分别为60.9%(251/412)、27.4%(113/412)和11.7%(48/412),不完全符合Hardy-Weinberg分布.与自限感染相比,HBV慢性感染者携带较高频率的T等位基因(28.2%vs 17.9%,P
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慢性乙型肝炎患者血清定量HBsAg与HBV-DNA及肝功能指标间相关性的分析
目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清HBsAg定量检测结果分布状况及其与HBV-DNA和肝功能指标的相关性.方法 选取177例HBV-DNA阳性的慢性乙型肝炎患者,分为乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性组115例、HBeAg阴性组62例,电化学发光免疫分析法(ECLIA)定量检测HBsAg含量,实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测HBV-DNA,贝克曼AU6800全自动生化分析仪连续监测法检测肝功能指标(ALT、AST、ALP、γ-GT).统计分析组间HBsAg与HBV-DNA含量的差异性,各组内血清HBsAg与HBV-DNA及肝功能指标间的相关性.结果 数据以中位数与四分位数表示,HBeAg阳性组与阴性组中HBsAg与HBV-DNA含量(对数转换后表示)分别为4678.5 IU/ml(2806,6128.7)、2770.0IU/ml(1228,5440);5.56(3.86,7.54)、3.66(3.16,4.59),存在统计学差异(P＜0.05).HBeAg阳性组中HBsAg与HBV-DNA总体存在相关性(r=0.537,P＜0.01),在HBV-DNA处于103 ～ 105、105～ 107、＞ 107IU/ml复制量时两者相关系数分别为0.205、0.443、0.712(P均＜0.05).HBeAg阴性组HBsAg与HBV-DNA间相关系数为0.22,P=0.083;在HBV-DNA≤104IU/ml与＞104IU/ml复制量时两者相关系数分别为0.03和0.08;在ALT、AST升高与正常时两者相关系数分别为0.23和0.17.两组定量HBsAg与主要肝功能指标ALT、AST、ALP、γ-GT均不存在相关性.结论 HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清HBsAg含量可反映HBV-DNA复制程度,可辅助衡量肝脏炎症状况.
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乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA相关性分析
目的 分析乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原与HBV-DNA含量在反映HBV复制方面的相关性.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚合酶联反应(PCR)方法分别检测414例乙型肝炎患者的HBV-PreS1抗原和HBV-DNA,比较检出率.结果 414名患者中,HBeAg和HBV-PreS检测结果一致者64.5％,不一致者占36.5％,两种方法之间阳性率有统计学差异(x2=53.33,P＜0.05)；HBeAg和HBV-DNA同时阳性130人,占63.8％,不一致者占33.2％,两种方法检测阳性率之间有统计学差异(x2=66.13,P＜0.05)；HBV-DNA和HBV-PreS1检测结果一致者占94.9％,不一致者占5.1％,两种检测方法结果没有统计学差异(x2 =0.418,P＞0.05).结论 HBV-PreS1抗原与HBV-DNA呈高度相关,HBV-PreS1可作为HBV活动性复制指标.
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乙型肝炎病毒e抗原的研究进展
乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)是乙型肝炎核心抗原的可溶性成分,为HBV复制和具有传染性的标志.HBeAg可与人白细胞抗原协同,并调节宿主的免疫应答,在HBV病毒的清除中发挥重要作用.同时HBeAg对HBV DNA的复制具有调节作用.在临床实践中,HBeAg的检测对指导乙型肝炎的诊断和治疗也具有十分重要的临床意义.HBeAg变异后出现的HBeAg阴性慢性乙型肝炎具有特殊的临床特征,使其越来越受到重视.
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葡萄籽原花青素联合阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的初步观察
目的 观察葡萄籽原花青素对阿德福韦酯治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎肝功能的影响和不良反应.方法 将60例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随机分为两组,观察其单用阿德福韦酯(对照组)或联合应用葡萄籽原花青素(实验组)治疗8周的肝功能、HBeAg、HBVDNA载量的变化及不良反应.结果 对照组治疗前后血清ALT下降有显著意义,实验组治疗前后血清ALT和AST下降均有显著意义,实验组的血清ALT和AST降幅优于对照组,均为P<0.05.在观察期内,两组均未出现血清HBeAg阴转,HBVDNA载量降幅无显著差异,未见严重不良反应,且两组间无显著差异,均为P>0.05.结论 葡萄籽原花青素对抗病毒治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的肝功能具有一定保护作用,且无严重不良反应.
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乙肝病毒前S1抗原与其病毒复制关系分析
目的 探讨乙型肝炎前S1抗原与乙肝病毒DNA和乙型肝炎病毒e抗原之间的关系.方法 对入住笔者所在医院100例乙型肝炎患者分别采用PerS 1Ag检测、HBeAg检测和HBV-DNA检测.结果 PCR检测HBV-DNA55例指标呈阳性,其中HBeAg阳性18例,PerS1Ag阳性43例,两种检测结果比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PerS1Ag优于HBeAg,PerS1Ag在HBV诊断与疗效评判方面具有重要的临床应用价值.
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乙型肝炎病毒e、c抗原的B细胞表位预测及其表位比较研究
目的 预测乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)和C抗原(HBcAg)的B细胞表位.方法 用Lasergene软件包中的Protean软件和吴玉章的氨基酸抗原指数预测法对HBeAg和HBcAg的氨基酸序列进行分析,预测其B细胞表位.结果 推测HBeAg有可能的B细胞表位位于其N端第50～63、137～146、85～94区段和第150～157区段内或它们的附近,但其他区域如HBeAg N-端第37～43、12～18区段和第24～32区段内或它们的附近也可能存在B细胞表位;HBcAg有可能的B细胞表位位于其N-端第40～53、127～136、150～181、75～84区段和第140～147区段内或它们的附近,但其他区域如HBcAg N-端第27～33、2～8区段和第14～22区段内或它们的附近也可能存在B细胞表位.结论 用多种方法预测HBeAg和HBcAg的B细胞表位,并对其表位进行比较分析,为制备更好的HBV感染者血清学检测相关诊断用品的研究提供线索.
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慢性乙型肝炎102例B、C基因型临床特征分析
随着对乙型肝炎病毒(HBV)所致肝炎各种临床特征的深入认识及HBV基因型检测技术的不断成熟和普及开展,HBV的基因型与感染这种基因型病毒的乙型肝炎患者的临床特征之间所具有的内在联系逐渐受到人们的关注.根据HBV全基因序列异质性的的差异目前已发现HBV有A～H 8个基因型,在亚太地区主要以B和C基因型为主[1].中国大陆地区HBV基因型也主要是B和C基因型,其中南方地区以B基因型为主[2],北方地区主要以C基因型为主[3].目前已有国内外学者就乙型肝炎患者的临床特征与其所感染的HBV基因型的关系进行的研究报道认为,HBV的基因型是影响乙型肝炎患者临床特征的重要因素.镇江市第三人民医院对镇江地区部分乙型肝炎患者检测其所感染的HBV基因型,发现绝大多数为B、C基因型,该研究从中随机抽取HBV基因型为B、C基因型的乙型肝炎患者共102例,对其肝功能相关指标、肝纤维4项水平及肝炎病毒血清标志物等方面情况进行了调查分析,旨在对B、C基因型HBV感染的乙型肝炎患者的以上诸多临床特征比较研究,现将结果总结如下.
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阿德福韦酯抗乙型肝炎病毒临床疗效观察
目的:观察阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎的临床疗效.方法:175例慢性乙型肝炎患者口服阿德福韦酯胶囊10mg,每日1次,观察ALT、HBV-DNA、血清病毒学标志变化.结果:治疗96周,HBeAg(+)组与HBeAg(-)组对HBV-DNA下降21og10以上分别为82.3%、64.4%;HBV-DNA阴转率为71.5%、51.1%;ALT复常率为88.5%、86.7%.结论:阿德福韦酯对慢性乙型肝炎HBeAg(+)组与HBeAg(-)组疗效相近.
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基于社区人群的慢性乙型肝炎病毒感染孕妇产前血清学及病毒学特征
目的 了解中国部分地区基于社区人群的未经抗病毒治疗的乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)阳性孕妇产前HBV血清学和病毒学特点.方法 该研究从广西、江苏、河南地区入组1741例HBsAg阳性孕妇.所有孕妇的临产前血清样本采用Abbott Architect i2000和Abbott Architect m2000分别检测HBV血清学标志物及HBV DNA水平;采用型特异性引物巢式聚合酶链反应(nPCR)法进行HBV基因型分型.结果 1741例HBsAg阳性孕妇中,HBeAg阳性占37.0％ (645/1741),HBeAg阴性孕妇占63.0％(1096/1741).HBeAg阳性孕妇产前HBsAg滴度、HBV DNA水平以及B基因型孕妇所占比例均高于HBeAg阴性孕妇,但年龄低于HBeAg阴性孕妇.HBeAg阳性孕妇的HBsAg滴度和HBV DNA水平呈正相关(r=0.790,P＜0.001),HBeAg滴度和HBV DNA水平也呈正相关性(r=0.564,P＜0.001).而HBeAg阴性孕妇的HBsAg滴度和HBV DNA水平无相关性(r=0.020,P=0.517).结论 未经抗病毒治疗的HBsAg阳性孕妇在不同HBeAg状态下,血清HBV DNA水平及HBsAg滴度分布各不相同.对于HBeAg阳性孕妇人群,HBeAg滴度、HBsAg滴度可能成为HBV DNA水平的替代指标.
关键词： 乙型肝炎病毒 孕妇 乙型肝炎病毒表面抗原 乙型肝炎病毒e抗原 HBV DNA -
慢性乙型肝炎病毒感染孕妇血清学及病毒学特征——沈阳部分地区2016年与2010年对比研究
目的 通过比较2016年和2010年沈阳部分地区孕妇乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B s antigen,HBsAg)携带率、乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阳性和高病毒载量的比例,探讨HBV感染模式变化趋势.方法 调查2016年1-12月中国医科大学附属盛京医院产科收治孕妇慢性HBV感染的血清标志物和HBVDNA,并与2010年6月至2011年11月收治的孕妇进行比较.结果 2016年收治孕妇HBsAg携带率为3.08％(441/14 314),在441例HBsAg阳性的孕妇中,HBeAg阳性1 51例(34 24％),高病毒载量112例(25 40％),主要见于HBeAg阳性孕妇(95.54％,107/112);2010年孕妇HBsAg携带率为5.49％ (249/4536),在249例HBsAg阳性的孕妇中,HBeAg阳性167例(67.07％),高病毒载量37例(14 86％),仅见于HBeAg阳性孕妇.2016年和20)10年收治孕妇的HBsAg携带率、HBeAg阳性比例、高病毒载量的比例两组之间比较差异均有统计学意义(x2=56.59,P＜0.01;x2=69.02,P＜0.01;x2=10.44,P＜0.01).结论 2016年沈阳部分地区孕妇与2010年比较,HBsAg携带率下降但HBeAg阴性比例和高病毒载量的比例增高,应加强对HBeAg阴性孕妇的筛查.
关键词： 乙型肝炎病毒 孕妇 乙型肝炎病毒表面抗原 乙型肝炎病毒e抗原 HBV DNA
