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艾烟冷凝物对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549活性及凋亡的影响
目的 观察艾烟冷凝物(PM10采取人体可吸入的艾烟部分)对肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)活性及凋亡的影响.方法 体外培养A549细胞,加入不同浓度的艾烟冷凝物,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、荧光显微镜来观察其对A549的细胞活性以及细胞凋亡的影响.结果 MTT法结果显示:与对照组相比,A549的细胞存活率随浓度和时间发生改变,具有明显的时间浓度依赖性；0.12g/L浓度的艾烟冷凝物作用于细胞12h后可显著提高细胞存活率(P=0.005＜0.01);荧光显微镜下观察发现艾烟冷凝物可以引起细胞发生凋亡,且具有浓度依赖性.结论 A549细胞随着艾烟冷凝物浓度的增加、刺激时间的增加而引起细胞活力逐渐下降,表明一定浓度的艾烟冷凝物和一定的刺激时间对细胞具有毒性作用；一定浓度的艾烟冷凝物在较短刺激时间内具有细胞增殖作用,故认为艾烟对细胞的增殖作用可能是艾烟发挥有效作用的重要因素之一；能够引起细胞的凋亡可能是毒性作用的重要因素之一.
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艾烟冷凝物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383活性和吞噬功能的影响
目的 观察不同浓度的艾烟冷凝物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383活性和吞噬功能的影响.方法 在细胞增殖实验中,将艾烟冷凝物染毒浓度分别设计为:0、0.004、0.008、0.012、0.016、0.020 g/L,以上述不同浓度的艾烟冷凝物对NR8383进行细胞染毒,染毒时间分别为12、24、36、48h,然后采用CCK-8法对细胞增殖情况进行检测；吞噬功能实验中,艾烟冷凝物染毒浓度设计同上,对NR8383进行细胞染毒24 h后,采用流式细胞仪检测吞噬率.结果 艾烟冷凝物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞进行染毒12 h后,各实验组的细胞存活率虽都高于空白对照组,但各实验组与空白对照组差异无统计学意义(P＞0.05).染毒24、36 h后,实验组浓度为0.004、0.008、0.012、0.016 g/L时,各组细胞存活率不仅高于空白对照组,且各实验组与空白对照组差异有统计学意义(P＜0.05),实验组浓度为0.020g/L时,其存活率虽低于空白对照组,但与空白对照组差异无统计学意义(P＞0.05).染毒48 h后,除浓度为0.008g/L的实验组外,其余各组细胞存活率与空白对照组差异有统计学意义(P＜0.05).艾烟冷凝物对NR8383细胞分别进行染毒12、24、36、48 h后,NR8383细胞存活率随着艾烟冷凝物浓度的升高均呈现先增加后降低的趋势,且随着作用时间的延长,细胞存活率亦随着艾烟冷凝物浓度的增高而先增加后降低.艾烟冷凝物对NR8383细胞分别进行染毒24 h后,NR8383细胞的吞噬功能随着艾烟冷凝物浓度的升高而增强.除浓度为0.004g/L的实验组外,其他各组与空白对照组差异均有统计学意义(P＜0.005,校正卡方值).结论 在一定浓度范围内,艾烟冷凝物可提高大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的活性和吞噬功能,并呈现一定的浓度及时间依赖性.
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艾烟冷凝物对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549形态及活性的影响
目的 观察艾烟冷凝物对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549形态及活性的影响.方法 体外培养A549细胞,加入不同浓度的艾烟冷凝物,刺激24 h后,应用荧光显微镜、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法来观察其对A549的细胞形态以及细胞活性的影响.结果 显微镜下观察发现艾烟冷凝物在0.05 g/L时细胞形态基本无变化,在高于0.05 g/L时细胞形态逐渐改变、细胞数量逐渐下降,具有明显的浓度依赖性.MTT法结果显示与对照组相比,A549的细胞活性在0.09 g/L浓度时P=0.985,无统计学差异;在0.06,0.12 g/L浓度时统计结果分别为P=0.036和0.013,有明显差异,但差异不大;在高于0.12 g/L时,P值均小于0.01,具有极显著性差异,细胞活性呈逐渐下降趋势,具有浓度依赖性.结论 在24 h刺激时间内,低浓度的艾烟冷凝物有可能对A549细胞无影响,高浓度的艾烟冷凝物对细胞有一定毒性作用,这种毒性作用具有明显的浓度依赖性.
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艾烟冷凝物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383吞噬功能和ROS的影响
目的:通过艾烟冷凝物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的吞噬功能以及细胞活性氧的影响以探讨其对修复机体损伤和防卫免疫等方面是否具有一定调节的作用.方法:体外培养NR8383细胞,加入不同浓度的艾烟冷凝物,染毒24h后,应用流式细胞仪和DCFH-DA试剂盒来分别检测NR8383的细胞吞噬率及ROS.结果:在一定浓度范围内,艾烟冷凝物可以增强NR8383细胞的吞噬功能,各实验组(除浓度为0.004mg/ml的实验组外)与空白对照组的差异均具有统计学意义(P＜0.005).同时,在一定浓度范围内,它还可以降低NR8383细胞内的活性氧,分别对NR8383细胞用艾烟冷凝物染毒24h,该细胞的活性氧随着艾烟冷凝物的浓度升高而呈降低趋势,各实验组与空白对照组均具有统计学差异(P＜0.001).结论:在一定浓度范围内,艾烟冷凝物可以增强大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的吞噬功能,亦可降低该细胞的活性氧,这可能成为艾烟能够修复机体损伤和提高自身免疫力的重要机制之一.
