首页 > 文献资料
-
低温冻存对人脐血CD3AK某些生物学特性的影响
目的探讨人脐血CD3AK细胞的佳诱导体系及低温保存对其生物特性的影响.方法以适离心参数制备单个核细胞.用CD3McAb、完全培养基、人AB血清或同一自体脐血清,设计不同浓度组以优化诱导体系.经佳诱导体系培养的CD3AK细胞低温保存不同时间后复苏.检测免疫表型、活率以及细胞集落形成率.结果佳诱导体系为(15%自体脐血清+85%全培基+自体红细胞+CD3McAb),诱导的人脐血CD3AK细胞形态良好,低温冻存150天,免疫表型的变化无显著性,复苏活率均数高于90%,细胞集落形成率下降则有显著意义.结论以佳诱导体系培养的人脐血CD3AK细胞可低温保存一定时间,其免疫表型的变化无显著性,复苏活率均数高于90%.这对临床生物治疗有实用意义.
-
异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病的疗效比较
们自1997年1月开始用G-CSF刺激后的供者骨髓对慢性髓细胞白血病(CML)患者进行移植治疗,并和同期未用G-CSF动员的供者骨髓移植进行比较,现报道如下.病例和方法1 病例研究组:供者应用G-CSF处理组.患者共23例,男14例,女9例,中位年龄30(15～46)岁,移植前处于慢性期者17例,加速期者6例;供者:男11名,女12名,中位年龄30(18～45)岁.对照组:供者未接受G-CSF处理组.患者:共15例,男9例,女6例,中位年龄31(16～44)岁,移植前慢性期11例,加速期4例;供者:男8名,女7名,中位年龄27(16～42)岁.患者虽然非随机选择,但全部病例在同一时期进行移植.两组病例都有HLA相同,混合淋巴细胞培养(MLC)阴性的同胞兄妹,患者的年龄、性别、疾病的状况和供者的选择具有可比性.
-
恶性卵巢肿瘤患者体细胞染色体畸变研究
卵巢恶性肿瘤是常见的妇科恶性肿瘤.其发病率近年来有增加的趋势,由于卵巢位居盆腔深部,发生肿瘤后病情隐匿、不易早期诊断,治疗效果差,威胁极大.因此,寻求恶性卵巢肿瘤的早期诊断方法显得尤其重要.通过外周血淋巴细胞培养制备染色体的方法,观察卵巢肿瘤患者体细胞染色体数目畸变的特征,试图寻找一条恶性卵巢肿瘤的辅助方法,现分析报告如下:
-
染色体臂间倒位致配偶习惯性流产1例
患者男,27岁,其妻怀孕3次,第1、2、3胎孕60多天,均不明原因发生自然流产,孕期均无患病,无射线及有害物质接触,也无外伤,夫妻表型及智力正常,非近亲婚配,否认母亲有流产史.细胞遗传学检查:取外周血淋巴细胞培养,制片,染色体G显带,分析30个中期分裂相,患者核型为:46,xy,inv(4)(p16q31.1)(pter→p16::q31.1→p16::q31.1→qter),其妻核型为46,xx.
-
混合性性腺发育不全9例临床表型分析
我室于1988年4月至1997年8月共检测到9例男性发育不全和类似于Turner综合征的混合性性腺发育不全,现报道如下.9例患儿均为我院住院和门诊的病例,年龄2个月至16岁.经外周血淋巴细胞培养,常规染色体制片,G分带,其染色体核型均为45,X/46,XY.其中5例表现为男性发育不全,包括尿道开口异常4例,阴茎短小1例,阴囊分裂1例,小阴囊1例,小睾丸1例,单双侧隐睾4例.4例表现为女性外阴,其中完全性女性外阴2例,因身材矮小或闭经就诊;女性外阴发育较差2例,以无阴道开口或大阴唇内似有肿物就诊.典型病例:一女性外貌患儿,16岁,身材匀称,身高1.58m,智力正常.皮肤细腻,无喉结,嗓音细,无颈蹼及肘外翻,乳房略有发育.正常女性外阴,幼稚型.B超示:腹腔内双侧睾丸,子宫1.0cm×1.5cm×1cm,双侧卵巢未能明确显示.拒绝手术探查.经黄体酮肌肉注射,见极少量阴道出血,说明阴道是通畅的.染色体检查为45,X/46,XY,诊断为混合性性腺发育不全.
-
人体外周血淋巴细胞培养和染色体标本制备实验的改进
人体外周血淋巴细胞培养和染色体标本的制备是医学遗传学的重要实验内容之一,是我校本、专科各层次实验教学的必修内容.实验中我们通常采用RPMI 1640培养基外加植物血凝素 (PHA)、小牛血清及抗生素等成分培养血细胞,获得分裂相.其中PHA是影响实验结果的主要因素之一.为保证实验效果,本教研室首先从PHA的定量问题入手,对每次提取获得的PHA进行定量(效价)测定,再根据PHA的效价,换算出培养基中的PHA加入量,使每批次培养基中所含PHA的效价一定,从而保证实验结果相对稳定.1 材料和方法取菜豆(产地不限),洗净晾干,研磨成粉末,过50目铜筛.称取10 g浸泡于0.85%生理盐水50 ml中,置4℃冰箱,每隔6～8 h摇动一次.48 h后,取出.以4000 r/min离心20 min.取上清液,过滤,以G6玻璃滤器抽滤除菌,分装小瓶,冷冻保存,使用前采用常规效价测定方法进行定量(效价)测定.
-
980例遗传咨询患者的细胞遗传学分析
我们对980例遗传咨询患者进行了染色体分析,报告如下.1资料与方法1.1 病例来源.980例患者均来自遗传咨询门诊,其中男522例,女458例,年龄从新生儿到40岁以上不等,生育年龄占84.9%.就诊原因包括:不良孕产史(包括流产、早产、死胎、死产和新生儿畸形),智力低下,性征异常,原发闭经等.1.2方法.按我室常规操作外周血淋巴细胞培养及G带分析,个别病例加做C带、高分辨显带.每例观察30个分裂相,分析3个核型,异常者加倍观察和分析.
-
TF口服液诱导T细胞IL-2、IL-6及CD分子的表达
转移因子(transfer factor,TF)是介导细胞免疫的重要因子之一,其TF口服液具有协同诱导人T淋巴细胞IFN-γ和HLA-DR/DQ分子的表达[1],促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能,促进人T淋巴细胞增殖发挥良好的免疫调节作用[2].为进一步了解TF口服液协同诱导细胞因子的分泌和CD分子的表达,我们以TF口服液加入外周血淋巴细胞培养,观察其协同PHA诱导T细胞、IL-2、IL-6的分泌及CD3、CD4、CD8T细胞的变化.
-
外周血淋巴细胞培养及制备染色体G显带的技术研究
人们用物理、化学因素处理后,再用染料对染色体进行分化染色,使每条染色体上出现明暗相间,或深浅不同带纹的技术称为显带技术(banding technique).染色带的数目、部位、宽窄和着色深浅均具有相对稳定性,所以每一条染色体都有固定的分带模式,即称带型.
-
性分化异常细胞遗传学分析(附40例报告)
近年来，由于细胞遗传学、h-r抗原检查法、组织器官培养法、γ探针分子 水平检测等方法的改进，使诊断及预测性分化异常患者有无性腺癌变有了可能。性分化异 常并 不少见，若将性别判定错误，不仅是个人问题，也是一个社会问题，因此早期正确 诊断，以便采取必要措施，本文作者检测性分化异常患者40例，现分析如下。 1 检测方法 常规外周血淋巴细胞培养、制片、胰酶G显带，每例计数3 0个分裂相，分析3个核型。如为嵌合型，则计数增加至60～100个分裂相，分析6～10个核型 。 2 结 果 40例受检患者中，Turner氏综合征12例；混合型性腺发育不全 伴 精原细胞癌1例；男性假两性畸形21例，其中包括睾丸女性化综合征2例，核型46，XY性腺 发育不全症2例；女性假两性畸形5例；46，XX男性综合征1例。
-
脾移植前去除成熟树突状细胞预防移植排斥反应的体外研究
［陈天宇，姜洪池，孙备.中华肝胆外科杂志，2000，6(5)：361］目的建立治疗性单抗溶液持续灌注大鼠脾脏模型，应用抗大鼠树突状细胞单克隆抗体(WZD)降低大鼠移植脾的免疫原性。方法以WZD溶液持续灌注移植脾，筛选佳方案，并观察灌注后混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture,MLC)淋巴细胞增殖情况及脾细胞的超微结构，以及灌注后移植脾细胞的免疫组化情况。结果 WZD灌注组MLC淋巴细胞增殖能力明显降低，与对照组及应用CsA组相比差异有显著意义(P<0.05)，与WZD灌注+CsA组相比差异无明显意义(P>0.05)，21℃灌注组脾细胞功能活跃，线粒体损伤小，灌注后移植脾DC呈现强荧光染色。结论移植脾在21℃下，每小时给予灌注50ml单抗溶液灌注获得了佳效果，WZD溶液灌注移植脾，可去除成熟树突状细胞，确能降低其免疫原性，有可能减少免疫抑制剂的应用剂量。
-
淋巴细胞培养法检测血中分枝杆菌及其L型的初步研究
目的建立一种快速诊断外周血分枝杆菌及其L型的培养方法,并对其进行初步评价.方法取肺癌病人和牛型分枝杆菌L型感染小鼠的血液注入1640培养基内,常规进行淋巴细胞培养,7 d后制备滴片并进行抗酸和免疫组化染色,其结果与溶血离心培养法和滴片法比较.结果7例肺癌病人外周血细胞培养法有2例查见分枝杆菌或其L型,感染小鼠心脏血检测均阳性.结论在进行淋巴细胞转化试验和染色体检查的同时,淋巴细胞培养法可用于检测血中分枝杆菌及其L型,可缩短培养时间,方法简便.
-
尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对混合淋巴细胞反应的影响
目的通过观察尖锐湿疣病损组织粗提蛋白刺激后的树突状细胞(DC)对混合淋巴细胞反应的影响,探讨尖锐湿疣病损粗提蛋白对DC免疫功能的影响.方法用聚合酶联反应(PCR)鉴定尖锐湿疣病损组织中人乳头瘤病毒(HPV)6 DNA和HPV11 DNA.人脐带血和外周血分离培养10 d的DC分别用尖锐湿疣病损组织和健康儿童包皮组织粗提蛋白刺激2次.另设空白对照组磷酸盐缓冲液(PBS)刺激.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DC刺激同种异体和自体混合淋巴细胞反应的能力.同种异体淋巴细胞来源于脐带血和外周血,同种自体淋巴细胞来源于外周血.结果PCR结果显示尖锐湿疣病损组织中HPV6b DNA阳性.尖锐湿疣病损粗提蛋白刺激后的DC刺激来源于脐血的T淋巴细胞,其增殖指数(5.514)高于包皮对照组(2.645)和空白对照组(1.698,DC:T均为1:11).尖锐湿疣病损粗提蛋白刺激后的DC刺激来源于外周血的T淋巴细胞的增殖指数(2.352)高于包皮对照组(1.083)和空白对照组(0.644,DC:T均为1:3).结论尖锐湿疣病损粗提蛋白可能因存在的HPV病毒抗原对DC的刺激和功能活化,进一步促进了T淋巴细胞的增殖活化,并进而推测可以提高机体抗病毒特异性细胞免疫.
-
辐射遗传染色体标本制备
目的 改变染色体制备过程中的培养条件,在确保收获第一次核分裂细胞的前提下,改善染色体形态.方法 缩短淋巴细胞培养时间至44 h,加秋水仙素时间至培养开始后的第30小时.秋水仙索用量为0.04μg/ml.结果 染色体呈紫红色,长短适中,染色体间分离良好,染色体单体间分叉.结论 总培养时间为44 h,在培养开始后的第30小时加入秋水仙素,能保证培养出来的染色体属于第一次核分裂;缩短了秋水仙素的处理时间,可大大改善染色体的形态.
-
48，XXYY一例
患者，男，23岁。身高172cm，体重60kg。一般情况尚好，发育和营养中等，神志清楚，智力较同龄人差，说话口齿不清。皮肤偏白，声音细，眼裂稍宽。平时双眼睑经常抽搐，持续十几分钟后自动缓解。无喉节，无胡须，腋毛及阴毛稀少，乳房未发育，右手小指、无名指屈曲。睾丸花生米大小，无遗精现象。出生时母龄30岁，父龄35岁。父母非近亲，其妹发育、智力均正常，未婚。 实验室检查：甲状腺功能八项：S-TSH 3.14 μIU／L、FT 6.56pmol／L、FT４ 19.73pmol／L、TT３ 3.36nmol／L、TT４ 129.12nmol／L、rT３ 0.52nmol／L、TG－Ab 0.54％、TM－Ab 0.04％。性激素六项：FSH 44.8mIU／ml、LH 60.1mIU／ml、E２ 88.9pmol／L、P 2.29nmol／L、T 1.68nmol／L、PRL 0.42nmol／L。 细胞遗传学检查：常规外周血淋巴细胞培养、制片、G显带。镜下计数30个中期分裂相，分析6个核型，均为48，XXYY。父母核型正常。 讨论：核型为48，XXYY的个体是Klinefelter综合征的一个罕见病例。据推测其发病机理可能为（1）父母的生殖细胞在减数分裂时性染色体同时发生不分离而受精，这种可能性较小。（2）生殖细胞正常，而受精卵在第一次卵裂时发生差错，致XY均不分离，一个胚胎细胞为22条染色体，另一个胚胎细胞为24，XY染色体，而前者由于缺乏X染色体的支持不能成活，后者导致整个个体发育成48，XXYY个体。
-
化疗药物致肺损伤1例
一、病例报告
患者女性,38岁,因咳嗽3月余,加重伴气短2月于2012年11月2日由普外科转入我科治疗。患者于2012-4-12在我院行直肠癌根治术,术后病理为中分化腺癌,术后按mFOLFOX方案(亚叶酸钙+5-氟尿嘧啶+奥沙利铂)规律化疗,7月18日开始出现干咳,无发热,7月19日胸部CT提示：两肺下叶斑片影、考虑感染。之后应用舒普深抗感染,咳嗽略有减轻,于7月26日改为口服拜复乐治疗；8月14日复查胸部CT：两肺下叶多发病变、右侧少量胸腔积液,与2012-7-19片比较范围增大。之后行快速新型隐球菌抗原检测：阴性；真菌半乳糖甘露醇聚糖检测值(Ⅰ)：0.206；1-3-β-D 葡聚糖：<10,淋巴细胞培养+干扰素A+B(北京协和医院)：淋巴细胞培养+干扰素A：28 SFC/10`6 M；淋巴细胞培养+干扰素B：0 SFC/10`6 M。于2012-8-22行CT引导下经皮肺穿刺活检术,术后病理结果回报：肺泡间隔增宽,肺泡Ⅱ型上皮细胞增生,肺间质纤维组织增生,散在炎性细胞浸润(特染：PAS-)。9月5日开始停拜复乐抗感染,改用异烟肼、利福喷丁、乙胺丁醇、实验性抗结核治疗。10月30日复查胸部CT检查报告：①两肺多发病变,考虑为感染性病变,与2012-08-22前 CT 比较,病灶明显增多、范围增大。②两侧少量胸水(见图1、图2)。查体：体温：36.5℃,脉搏：80次/min,呼吸19次/min,经皮血氧饱和度90%,两肺呼吸音清,两肺底腋中线附近可闻及湿啰音,以右侧明显,心率80次/min,律齐,各瓣膜区未闻及杂音。诊治经过：转入后将患者原肺穿刺活检病理切片至协和医院病理科会诊,协和病理会诊报告示：(肺穿刺)少许穿刺肺组织,肺泡间隔略增宽、纤维组织增生,肺泡Ⅱ型上皮广泛显著增生伴空泡变性,肺泡腔内有泡沫细胞聚集及个别肺泡腔内机化,结合临床不除外药物相关性肺损伤。至此患者肺部病变诊断明确,为化疗药物所致机化性肺炎,遂于11月6日加用甲泼尼龙(40 mg/d )治疗,予钙尔奇D片预防骨质疏松、奥美拉唑预防消化系溃疡,患者气短、干咳症状迅速改善,经皮血氧饱和度上升95%以上。12月19日复查胸部CT提示患者两肺病变较前明显吸收(见图3、4),患者出院后继续口服糖皮质激素治疗,并逐渐减量,气短症状未再加重,随访至今,复查胸部CT两肺病变基本完全吸收。 -
22-三体综合征1例报告
1临床资料患儿,男,2岁,智力低下就诊.第二胎,足月顺产,体重10kg,身高75 cm,头围40cm,头发稀少,不会说话和走路,耳低位畸形,塌鼻梁,双侧内毗赘皮,眼距宽,小阴茎,肌张力低下,左侧通贯手.细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞培养,G显带,计数20个分裂相,分析6个分裂相,患儿的染色体核型为47,XY,+22.其父母和同胞姐姐的核型均为正常.
-
46,X,i(Yq)致原发性不育一例报告
患者,男性,28岁,以结婚3年不育就诊.身高168 cm,体质量60 kg,智力正常,有少量胡须,体毛稀少,乳房无发育,睾丸外观偏小.精液常规检查:无精子.激素五项检查:E 226.09 pg/mL,FSH 5.77 mIU/mL,PRL 20.17 ng/mL,TEST 407.20 ng/dL,LH 6.16 mIU/mL.细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞培养,G显带,计数20个分裂相,分析6个分裂相,患者的染色体核型为46,X,i(Yq),其父核型为正常.
-
一例47,XXX致原发性不孕
患者,24岁,已婚,因月经不调,不孕来诊治.患者月经164-5/28或161/84-114或4-5/9-10,出生时母亲年龄32岁,父亲年龄35岁,姐姐和母亲均有流产史.体检:身高164cm,体重44kg,智力正常,皮纹正常,乳房发育差,腋毛稀少,阴毛正常女分布,外阴发育差,阴道通畅,B超检查子宫2cm×2cm×2cm大小,阴道细胞学检查雌激素水平中度低下,细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞培养,G显带,计数30个中期分裂相,分析6个分裂相,染色体检查核型为47,XXX.
-
47,XYY综合症一例报告
患儿,男,第二胎,4岁,足月顺产.出生时体重37kg,发育良好,出生时父亲年龄27岁,母亲年龄25岁,身体健康,非近亲婚配,母亲孕期无服药史和放射线接触史.体检:身高84cm,体重13kg,能行走,智能正常,心肺及其它脏器正常.细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞培养,G显带,计数30个中期分裂相,分析6个分裂相,患儿核型为47,XXY.
