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基于磁球富集的大肠杆菌菌株水平鉴别
本文研究低成本、快速鉴别大肠杆菌菌株水平的方法。通过合成Fe3O4-COOH纳米颗粒,使其快速富集细菌裂解液中的蛋白,然后通过MALDI/TOF MS对蛋白进行快速检测,鉴别大肠杆菌O127:H6和O157:H7。该方法简单、快速、成本低,因此,利用这种方法鉴别致病菌菌株水平有很大潜力。
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奥沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎疗效观察
奥沙拉嗪钠由二分子水杨酸经偶氮键相连接而成,在结肠部位被细菌裂解后成为二分子5-氨基水杨酸(5-ASA)而发挥作用,是一种治疗溃疡性结肠炎(UC)的新药.1997年我科采取随机双盲的方法用奥沙拉嗪钠和水杨酸偶氮磺胺吡啶(SASA)治疗41例轻中度溃疡性结肠炎(活动期),现将观察结果报告如下.
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改良一步法分离变形链球菌RNA
目的 快速、高效分离高质量变形链球菌RNA.方法 溶菌酶处理变形链球菌后加入10%SDS,再经沸水浴1~2 min可快速裂解细菌;裂解产物以一步法分离RNA.琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计观察和测量RNA完整性及浓度.结果 与其他方法比较,该法所获RNA产量高,几乎达30 μg RNA/109细胞且无DNA污染.反转录(RT)-PCR证实mRNA的完整性好.结论 改良一步法简便、经济、稳定,所得RNA可用于后续研究.
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弓形虫SAG2/GST融合蛋白在E.coli中的表达条件的研究与纯化
提高弓形虫SAG2/GST融合蛋白在在E.coli中的表达水平并纯化.对诱导温度、诱导物浓度与诱导时间等条件与目的蛋白在细菌裂解上清中的表达量的关系进行了研究.在表达条件优化后,大量制备目的蛋白利用GlutathioneSepharose 4B亲和层析进行初步纯化.纯化产物进一步切胶回收纯化.SAG2/GST融合蛋白在37℃,以0.2mMIPTG诱导4小时后在细菌裂解上清中的表达量高.SAG2/GST融合蛋白在亲和层析后得到初步纯化并在切胶回收后得到电泳纯的SAG2/GST融合蛋白.获得了SAG2/GST融合蛋白在E.coli的佳表达条件.得到了两种纯度的SAG2/GST融合蛋白.为进一步研制弓形虫重组抗原疫苗、弓形虫免疫诊断试剂及单克隆抗体提供了基础.