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白蛋白纳米基因载体的制备与表征
目的 研制白蛋白纳米基因载体,评估白蛋白纳米粒用作基因载体的可行性.方法 采用去溶剂化法制备白蛋白纳米粒,并通过控制转速、pH值、搅拌时间三个变量来考察白蛋白纳米粒的表征变化情况,以PicoGreen荧光法来测白蛋白纳米载体的基因转载率,并用流式细胞仪检测膀胱癌细胞的基因转染率.结果 控制转速1000 RPM,自然状态下的溶液pH值(6.9),持续搅拌12 h条件下,制得满足基因载体需要的白蛋白纳米粒的平均粒径(253.1±11.9)nm,zeta电位(-34.0±4.5)mV,PDI0.43±0.04,性质相对稳定,基因转载率为(97.61±0.06)%,转染率为(48.21±5.94)%.结论 单纯质粒很难进入细胞核高表达,借助白蛋白纳米载体,使高效的基因转染成为可能.白蛋白纳米粒有望被广泛应用为二次基因转载工具.
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HPLC法测定羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒中的药物含量
目的 建立羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecin,HCPT)人血清白蛋白纳米粒(human serum albumin nanoparticle,HSA-NP)中药物含量的测定方法.方法 采用Kromasil C18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(体积比45:55),流速1.0 mL·min-1,紫外检测波长266 nm,柱温35℃.结果 在本实验条件下制剂中辅料对HCPT含量的测定无干扰,HCPT质量浓度在2.0～10.0 mg·L-1内线性关系良好(r=0.999 9,n=5),HCPT平均加样回收率为100.2%,RSD为1.0%(n=9).结论 本法准确可靠、简便易行,可用于羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒(HCPT-HSA-NP)中药物含量的测定.
