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血清OPN检测对恶性肿瘤患者诊断治疗的临床意义探讨
目的 探讨恶性肿瘤患者血清OPN检测的临床意义.方法 用酶联免疫吸附试验恶性肿瘤患者血清OPN水平.结果 恶性肿瘤患者血清OPN水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P <0.05).恶性肿瘤患者手术前或放、化疗前的OPN水平显著高于手术后或放、化疗后患者和对照组,差异有统计学意义(P <0.05).恶性肿瘤患者血清OPN水平还与淋巴结转移及远处转移有关.结论 血清OPN检测可以作为恶性肿瘤患者的诊断、预后以及疗效评判的检测指标.
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血管成形术后血管外膜α-SMA、PCNA和OPN表达变化及意义
目的 探讨大鼠胸主动脉血管成形术后血管平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)和骨桥蛋白(OPN)表达的变化与血管外膜增殖的关系.方法 6周龄健康、清洁纯系雄性SD (Sprague-Dawley)大鼠32只,体质量为(200±20)g；随机将其分为实验组和对照组,实验组大鼠用6F人冠状动脉快速交换球囊扩张及剥脱胸腹主动脉内膜,对照组大鼠行胸腹主动脉假手术处理,术后第2周取胸主动脉,进行α-SMA、PCNA及OPN免疫组织化学检查；第6周取胸主动脉做组织形态学检查,并进行对比分析.结果 对照组胸主动脉见α-SMA外膜和内膜极少量表达及中膜均匀表达；PCNA外膜和内膜极微量表达及外膜OPN阳性表达.实验组胸主动脉外膜和新生内膜α-SMA、PCNA及OPN阳性表达较对照组明显增强,而中膜α-SMA表达明显减弱.实验组胸主动脉外膜厚度和细胞数量及细胞增殖指数较对照组明显增加(P＜0.05).结论 血管成形术后,血管外膜成纤维细胞被激活、增殖,向肌成纤维细胞表型转变,外膜OPN表达增多,外膜增厚,参与血管收缩性重塑.
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血清骨桥蛋白和CA125联合检测在卵巢上皮癌诊疗中的应用价值
目的 探讨血清骨桥蛋白(osteopontin OPN)和CA125在卵巢上皮癌诊疗中的应用价值.方法 对卵巢上皮癌患者64例、卵巢良性肿瘤患者68例治疗前血清样品及48例健康妇女血清样品,分别用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)及微粒子化学发光法测定其OPN和CA125水平,并对卵巢上皮癌64例患者术后3个月内连续测定,观察疗效和OPN、CA125变化间的相关性.结果 卵巢上皮癌患者血清OPN、CA125水平明显高于卵巢良性肿瘤组及健康妇女组.OPN检测敏感度为82.8%;CA125检测敏感度为71.9%;联合检测敏感度93.8%.原发性卵巢上皮癌64例患者中,疗效为完全缓解(CR)的19例术后OPN、CA125水平较术前明显下降(P＜0.01);疗效为部分缓解(PR)的30例术后OPN、CA125值较术前下降(P＜0.05);疗效为进展(PD)的10例术后OPN、CA125值较术前升高(P＜0.05);疗效为无改变(SD)的5例手术前后OPN、CA125值差异无显著性(P＞0.05).结论 OPN测定是卵巢上皮癌诊断和监测疗效的有效检查方法,联合检测CA125可提高其临床应用价值.
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蛋白P27、Survivin和骨桥蛋白在前列腺癌组织中的表达和意义
目的：探讨蛋白 P27、Survivin 和骨桥蛋白（OPN）在前列腺癌（PCa）组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化技术对 PCa 和癌旁组织标本中的蛋白 P27、Survivin 和 OPN 进行分析。结果80例 PCa 组织中，蛋白 P27、Survivin、OPN 阳性表达率与癌旁组织，差异显著（ P ＝0．015）；P27表达与 PCa 病理分期（ P ＝0．026）、临床分期（ P ＝0．037）和有无淋巴结转移（ P ＝0．033）有关，；Survivin 表达与 PCa 病理分期（ P ＝0．041）、临床分期（P ＝0．039）和有无淋巴结转移（P ＝0．031）有关，OPN 表达与 PCa 病理分期（P ＝0．023）、临床分期（ P ＝0．034）和有无淋巴结转移（ P ＝0．027）有关；P27和 Survivin，P27和 OPN 在 PCa 组织中表达呈负相关（P＜0．001）。结论临床中联合检测蛋白 P27、Survivin 和 OPN 为前列腺癌的防治和治疗提供一种治疗策略。
关键词： 前列腺癌 蛋白p27 蛋白Survivin 骨桥蛋白(OPN) -
骨桥蛋白在急性肺损伤后肺纤维化大鼠肺组织中的表达及作用
目的：观察骨桥蛋白（ OPN）在脂多糖（ LPS）诱导的急性肺损伤（ ALI）后肺纤维化大鼠肺组织中的表达及作用。方法120只SD大鼠随机分为对照组、模型组、干预组，每组40只。对照组第0、1、2天腹腔注射生理盐水，模型组和干预组注入等量LPS，5 min后干预组再注入抗OPN抗体，而模型组和对照组用生理盐水代替，于24 h、7 d、14 d、28 d处死3组大鼠各10只。行HE及Masson染色观察肺泡炎及肺纤维化改变；免疫组化测定肺组织转化生长因子－β1（ TGF－β1）的表达；检测肺组织匀浆中OPN蛋白水平、羟脯氨酸含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果模型组第24 h首先出现肺纤维化改变，第28天明显；同一时间点，模型组肺纤维化评分、TGF－β1的表达、OPN水平、羟脯氨酸含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均显著高于对照组，而干预组上述指标较模型组均显著降低。结论 OPN在LPS诱导的ALI后肺纤维化大鼠肺组织中高表达，能加重LPS诱导的ALI后肺纤维化，机制可能与OPN促进TGF－β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达有关。
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骨桥蛋白(OPN)与结肠肿瘤关系的研究进展
近年来,大量研究发现骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在结肠肿瘤的发展及转移过程中起到重要作用,因此OPN有望为结肠肿瘤早期诊断、复发和预后判断提供新的指标,亦有望成为防治肿瘤及肿瘤转移的潜在靶点.本文结合近几年文献,对OPN在结肠肿瘤发生发展中所起的作用及其在结肠癌诊断治疗方面潜在的临床价值作一综述.
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小鼠骨桥蛋白(OPN)基因RNA干扰慢病毒载体的构建及体内抑制效果鉴定
目的 构建骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因RNA干扰慢病毒载体并在小鼠体内鉴定其抑制效果.方法 参照OPN GenBank上的序列,对OPN基因沉默位点进行分析,设计针对OPN信使RNA的小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA) OPN-shRNA及阴性对照(negative control-shRNA,NC-shRNA)序列,合成pSicoR-GFP-shRNA 重组体.经鉴定序列无误后,与pCMV-VSV-G和pCMV-dR8.91辅助质粒包装并转染293FT细胞,得到有效滴度为5×109 TU/mL的病毒原液.经尾静脉将构建的慢病毒载体注射入小鼠体内,qRT-PCR及Westem blot检测小鼠肝脏OPN mRNA及蛋白的抑制效果.结果 成功构建针对OPN的shRNA慢病毒载体,经纯化、浓缩得到滴度为5×109TU/mL病毒原液.与正常对照组、阴性对照组相比,实验组OPN mRNA及蛋白表达水平明显下降;正常对照组、实验组OPN mRNA及蛋白表达水平无明显差别.结论 利用RNA干扰技术,借助慢病毒载体,成功构建小鼠肝脏OPN基因低表达模型.为进一步研究OPN在胆石症等疾病中的作用提供了有力工具.
关键词： 骨桥蛋白(OPN) 小发夹RNA(shRNA) 慢病毒载体 小鼠 -
子宫内膜腺癌中OPN和VEGF-C的表达及意义
目的 检测骨桥蛋白(OPN)和血管内皮生长因子C(VEGF-C)在正常子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的表达情况,探讨其与子宫内膜腺癌的发生、发展的关系.方法 采用免疫组织化学SP染色法,检测OPN和VEGF-C在15例正常增殖期子宫内膜组织(NE)、22例子宫内膜不典型增生组织(AH)及75例子宫内膜腺癌组织(EC)中的表达.并评价其与子宫内膜腺癌临床病理特征的关系.结果 OPN和VEGF-C的表达从正常增殖期子宫内膜到子宫内膜腺癌的发展过程中逐渐增高,差异有显著性(P＜0.05).OPN和VEGF-C的表达随肿瘤的分化降低而增加,同时在肿瘤的肌层浸润及淋巴结转移等方面比较均有显著差异(P＜0.05).结论 OPN和VEGF-C在子宫内膜腺癌中呈明显阳性表达,与子宫内膜腺癌的发生、发展有密切关系,能够反映肿瘤的恶性程度,对其二者的检测将有助于判断患者的病情和预后.
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沙苑子提取液对大鼠泌尿系草酸钙结石形成影响的研究
目的:研究沙苑子提取液干预大鼠草酸钙肾结石形成的影响并探讨其作用机制.方法:将50只大鼠随机分成5组,A组为正常对照组,B组为模型对照组,干预组(C、D、E组):在B组的基础上每天以沙苑子提取液浓度为0.05g/mL、0.1g/mL、0.15g/mL的药液分别灌胃.喂养3周检测大鼠24h尿草酸(Ox),钙(Ca2+)浓度；血尿素氮(BUN),肌酐(Cr)含量；肾组织超氧歧化酶(SOD)的活性,丙二醛(MDA)含量；观察大鼠肾组织草酸钙结晶沉积情况；免疫组化检测大鼠肾组织骨桥蛋白(OPN)的表达水平.结果:干预组大鼠24h尿Ox、Ca>浓度,血清Cr较B组明显降低(P＜0.05).肾组织SOD的活力,C、D、E组较B组显著增高(P＜0.05)；MDA含量,C、D、E组较B组明显降低(P＜0.05).OPN在各组中均有表达,A组中仅能检测到OPN的微弱表达,B组OPN表达则明显增强；干预组低于B组.结论:沙苑子能够减少肾脏内草酸钙晶体沉积,其机制可能通过降低OPN表达,减轻肾损伤,抑制大鼠草酸钙结石形成.
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红藤养胃汤对胃癌患者血清 MG7-Ag、PG、TPS、OPN 水平的影响
目的：：探究红藤养胃汤对胃癌患者血清胃癌相关抗原(MG7-Ag)、胃蛋白酶(PG)、组织多肽特异性抗原(TPS)及骨桥蛋白(OPN)表达水平的影响,为胃癌治疗提供依据.方法：将我院2012年4月~2015年4月因胃癌接受治疗的患者90例纳入本研究,均衡分为 A、B、C 组,每组各30例,A 组服用红藤养胃汤进行治疗,B 组胃富春片进行治疗,C 组则采用西药进行治疗,治疗前及治疗1、2个月后检测各组 MG7-Ag、PG、TPS 及 OPN.结果：治疗前及治疗1、2个月血清 MG7-Ag 检测,各组治疗后 MG7-Ag 低于治疗前,差异有统计学意义(P ＜0．05).A 组服用红藤养胃汤,治疗后与 C、B 组 MG7-Ag 水平比较,差异均无统计学意义(P ＞0．05)；治疗1、2个月,A 组血清 PG 水平高于治疗前,并高于 B、C 组,差异均有统计学意义(P ＜0．05)；血清 OPN、TPS 水平显著低于治疗前,差异有统计学意义(P ＜0．05), A 组血清 OPN、TPS 水平低于 B、C 组,差异具有统计学意义(P ＜0．05).结论：胃癌患者服用红藤养胃汤后,血清 OPN、TPS 显著降低,血清 PG 升高,效果较为显著,患者血清 MG7-Ag 水平与西药、胃富春片疗效无显著变化,应进一步深入研究.
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OPN诱导小鼠MSCs向表皮细胞分化促进创面愈合的研究
目的 以骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因敲除小鼠及野生型小鼠为研究对象,探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分化为表皮细胞的潜能及骨桥蛋白在分化过程中的作用.方法 体外实验:将分离培养的野生型(WT)和基因敲除型(KO)新生鼠(鼠龄1d)MSCs鉴定纯度后分别设为WT组和KO组,取其第3代分别在表皮转化培养体系中孵育,通过镜下观察、流式细胞术、免疫荧光染色、Western blot等方法,比较两组表皮细胞标志物(CK14)表达水平的差异.动物实验:实验分4组,WT组小鼠创周注射GFP-MSCs (WT/MSCs)组,WT小鼠创周注射PBS(WT/PBS)组,KO小鼠创周注射GFP-MSCs (KO/MSCs)组,KO小鼠创周注射PBS(KO/PBS)组,每组各8只雄鼠,鼠龄6～8周,体质量20 ～25 g,按分组将分离培养的GFP-MSCs和PBS注射到创周,观察创面愈合及GFP-MSCs向表皮细胞分化的情况.结果 分离培养的MSCs呈梭形或成纤维细胞样生长,流式细胞术检测MSCs的纯度超过91％;诱导分化第12、17天的两组细胞检测发现,WT组和KO组的细胞均表达CK14;第17天免疫荧光结果示WT组CK14的表达阳性率(0.936 3±0.009 5)明显高于KO组(0.647 5±0.023 1),(P＜0.01);Western blot检测结果也显示KO组的CK14表达量(0.3894±0.016 8)明显低于WT组(0.614 6±0.015 3),(P＜0.01).动物实验WT/PBS组创面愈合速度快于KO/PBS组(P＜0.05),WT/MSCs组的创面愈合速度快于WT/PBS组(P＜0.05),注射的GFP-MSCs向表皮细胞分化的能力WT/MSCs组强于KO/MSCs组(P＜0.05).结论 OPN在体内、体外均可诱导MSCs分化为表皮细胞,进而促进创面愈合.
关键词： 愈合 间充质干细胞(MSCs) 骨桥蛋白(OPN) 表皮 分化 -
骨桥蛋白促MV4-11白血病细胞uPA表达及信号通路研究
目的 初步研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在MV4-11白血病细胞株促尿激酶纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator,uPA)表达的信号通路.方法 1)细胞培养:IMDM培养基培养MV4-11白血病细胞.2)分组:①人重组OPN蛋白(0-0.3)μg/mL处理MV4-11白血病细胞24h组;②PI3-K抑制剂(0-30)μmoL,LY294002处理MV4-11白血病细胞1h,再用OPN 0.3 μg/mL处理细胞24h组;③NF-KB抑制剂(0-15)μ moL处理MV4-11白血病细胞1h,再用OPN 0.3μg/mL处理细胞24 h组.3)Western blot法分别检测三组细胞uPA表达.结果 人重组OPN蛋白单独处理组,随OPN蛋白的浓度增加,uPA表达增加;预先用LY294002及BAY 11-7082处理组,OPN诱导的uPA表达降低.结论 OPN能促进MV4-11白血病细胞uPA表达;LY294002及BAY 11-7082均阻断了OPN促uPA蛋白表达效应,PI3K及NF-KB是这一信号通路中的关键分子.
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黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)抑制小鼠Lewis肺癌复发瘤生长的机制
目的 观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌术后复发瘤病理形态及转移相关蛋白CD44、CD62P和骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 选取C57BL/6J小鼠10只作为供瘤组,另外80只随机分为模型组、(50、100、200) μg/mLAPS处理组、6 mg/kg DDP处理组、3 mg/kg DDP联合(50、100、200) μg/mL APS处理组,每组10只.取供瘤组小鼠瘤组织制备Lewis瘤单细胞悬液接种于每只小鼠左侧后肢爪垫内侧皮下10 d后,切除爪垫瘤组织,建立肺癌术后复发转移模型;造模次日起给药,第16天脱颈处死.采用HE染色法观察术后复发瘤组织病理形态,免疫组织化学染色法检测复发瘤中CD44、CD62P和OPN的表达.结果 与模型组相比,各处理组复发瘤组织坏死加重,尤以DDP联合200 μg/mL APS处理组更明显,且各处理组CD44、CD62P和OPN蛋白的表达均有降低,以DDP以及DDP联合(100、200) μg/mL APS处理组为显著.结论 DDP联合APS能抑制Lewis肺癌细胞生长并降低瘤组织CD44、CD62P和OPN蛋白表达.
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骨桥蛋白基因在前列腺癌组织中的表达及临床意义
目的 研究骨桥蛋白(OPN)基因在前列腺癌中的表达及临床意义.方法 收集我院2008年1月至2011年5月行前列腺癌手术后的石蜡包埋标本80例、良性前列腺增生组织石蜡包埋标本35例.应用免疫组化MaxVision法,检测前列腺癌和前列腺增生组织中OPN的表达情况,分析OPN的表达与临床病理参数之间的关系.结果 OPN蛋白在前列腺癌和前列腺增生组织中的阳性表达率分别为72.50％(58/80)和8.57％(3/35),差异具有统计学意义(P＜0.05).OPN蛋白阳性表达率与前列腺癌的T、M分期正相关,差异有统计学意义(P＜0.05);OPN蛋白阳性表达率与前列腺癌的年龄、N分期和Gleason评分无相关性,差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 OPN蛋白在前列腺癌组织中高表达,提示OPN基因可能与前列腺癌的发生和转移过程有关.
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血清骨桥蛋白和CA125联合检测鉴别良恶性腹水
目的:探讨联合检测血清骨桥蛋白(OPN)和CA125在良恶性腹水中的诊断价值.方法:取39例恶性腹水患者、48例结核性腹水患者及40例健康妇女血清样品,分别用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)及微粒子化学发光法测定其OPN和CA125水平,观察其在诊断良、恶性腹水时的敏感性和特异性.结果:恶性腹水患者血清OPN水平明显高于结核性腹水患者及健康妇女组.OPN检测恶性腹水的敏感度、特异度分别为84.6%、95.0%;CA125检测敏感度、特异度为76.9%、87.5%;联合检测敏感度97.4%、特异度为95.0%.联合检测OPN、CA125较单独检测OPN及CA125其敏感度高(P<0.05);特异度无明显差异.结论:OPN与CA125联合测定是鉴别卵巢癌和结核性腹水的有效方法,联合检测CA125可提高其临床应用价值.
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骨桥蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及意义
目的:检测骨桥蛋白(OPN)在正常子宫内膜、子宫内膜癌前病变及子宫内膜腺癌组织中的表达情况,探讨其与子宫内膜腺癌发生、发展的关系.方法:采用免疫组织化学SP染色法.对15例正常增生期子宫内膜组织(NE)、14例子宫内膜不典型增生组织(AH)及68例子宫内膜腺癌组织(EC)中的OPN表达进行检测.并评价其与子宫内膜腺癌临床病理特征的关系.结果:OP N在NE、AH、EC中的阳性表达率分别为 26.67%、71.43%和80.88%.OPN的表达从正常增生期子宫内膜到子宫内膜腺癌的发展过程中逐渐增高.EC组表达明显高于NE组.OPN的表达随肿瘤的分化降低而增加,在低分化癌中表达明显高于高分化腺癌.分析OPN在随子宫内膜腺癌临床分期、肌层浸润及淋巴结转移等方面的发展,其表达均显著增加.结论:OPN在子宫内膜腺癌中呈明显阳性表达,为子宫内膜腺癌的诊断提供了进一步的依据;并与肿瘤的恶性程度呈明显的正相关,过度表达预示着预后不良.
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骨桥蛋白与MMP-9在宫颈癌中的表达及临床意义
目的:探讨骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶MMP-9在宫颈癌组织中的表达及其与宫颈癌临床病理特征的关系.方法:采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接染色法(SP法),检测62例宫颈癌I、Ⅱ期患者癌组织中骨桥蛋白及基质金属蛋白酶MMP-9的表达.结果:骨桥蛋白和基质金属蛋白酶MMP-9在宫颈鳞癌I、Ⅱ期中均为高表达,表达率分别为77.4%和69.4%,其表达与浸润深度及淋巴结转移相关.OPN与MMP-9的表达呈显著正相关(r=0.478).结论:骨桥蛋白和基质金属蛋白酶MMP-9与肿瘤的浸润及侵袭转移有关.
关键词： 骨桥蛋白(OPN) 基质金属蛋白酶(MMP-9) 宫颈癌 -
口腔鳞癌患者血清中骨桥蛋白（OPN）表达水平的研究
ELISA试剂盒检测口腔鳞状细胞癌患者（58例）、颌面良性肿瘤患者（45例）及健康对照者（60例）血清中OPN 的浓度（ng／ml）分别为161．8±12．6、52．3±8．6和48．6±12．8（P＜0．05），在淋巴结转移、临床分期晚的患者血清中表达水平要显著高于未转移、临床分期早的患者（P＜0．05），口腔鳞癌患者血清OPN与肿瘤的进展有关。
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骨转录因子Runx2和骨桥蛋白OPN在人乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌微钙化的关系
目的 观察骨转录因子Runx2、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在人乳腺癌组织中的表达,并进一步探讨其与乳腺癌微钙化形成间的关系.方法 利用免疫组化方法观察骨转录因子Runx2和骨桥蛋白OPN在62例乳腺癌组织中的表达.根据乳腺癌患者钼靶X线片中微钙化的有无与数量多少,将62例乳腺癌分为3组,即无钙化组、少量钙化组以及大量钙化组,观察Runx2和OPN蛋白表达与不同乳腺癌微钙化之间的关系.结果 Runx2蛋白在人类乳腺癌组织中表达阳性率为72.6％(45/62). OPN蛋白在人类乳腺癌组织中表达阳性率为79.0％(49/62). Runx2和OPN蛋白的阳性表达与乳腺癌钼靶X线片中微钙化的出现和数量密切相关,随着微钙化从无到有以及由少至多,Runx2(x2=15.686,P＜0.05)和OPN(x2=16.161,P＜0.05)蛋白的阳性表达率呈逐步增高的趋势.但Runx2和OPN阳性表达与乳腺癌钼靶片中微钙化形态无关.结论 Runx2和OPN蛋白在人类乳腺癌组织中高表达,其可能参与了乳腺癌微钙化的形成过程.
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得力生通过调节血管蛋白抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖并促凋亡
目的 探讨得力生注射液对肝癌SMMC-7721细胞的作用机制.方法 用不同浓度的得力生作用肝癌SMMC-7721细胞后,MTT方法检测肝癌SMMC-7721细胞不同时间(24、48、72 h)的增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫细胞化学方法检测肝癌SMMC-7721细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和内皮抑素(endostadin,ENS)的表达.结果 得力生作用于肝癌SMMC-7721细胞后,随着作用时间的延长和药物浓度的增加,细胞增殖逐渐减少,细胞凋亡逐渐增加,而对正常肝细胞HL-7702的作用很轻微.得力生将肝癌SMMC-7721细胞主要阻滞在G1期,且VEGF和OPN表达下调,ENS表达上调.结论 得力生抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖及诱导凋亡,呈现时间和浓度依赖效应,并可能通过调节血管蛋白而实现,这为得力生治疗肝癌提供了理论依据.
