首页 > 文献资料
-
HSP70在人小细胞肺癌细胞热疗中的作用
目的 探讨HSP70 在人小细胞肺癌细胞热疗中的作用.方法 采用43 ℃加热联合120μg/L 紫杉醇(热化联合组)、120μg/L 紫杉醇(单纯化疗组),43 ℃加热(单纯热疗组)处理H446 细胞和BEAS-2B 细胞,以未处理的细胞作对照,噻唑蓝比色法检测细胞增殖率,蛋白免疫印记法检测HSP70 的表达,SPSS13.0 进行统计分析.结果 热化联合组H446 细胞增殖率低于其余三组,单纯化疗组和单纯热疗组的BEAS-2B 细胞低于热化联合组;两种细胞热化联合组HSP70 表达均低于单纯热疗组.结论 热化疗联合作用于H446 细胞,可以明显抑制其生长,可能是通过抑制HSP70 实现的.
-
免疫负调控基因TIPE2对H446肺癌细胞MAPKs信号通路的影响
目的 探讨免疫负调控基因TIPE2过表达对小细胞肺癌H446细胞MAPKs信号通路的影响.方法 选取人小细胞肺癌细胞株H446,通过稳定转染系统构建TIPE2过表达小细胞肺癌H446细胞株,分为H446组、H446-Vector组和H446-TIPE2组.免疫细胞化学技术验证小细胞肺癌H446细胞过表达TIPE2情况,蛋白免疫印迹技术检测TIPE2过表达对MAPKs通路P38、ERK和JNK信号磷酸化的影响.结果 过表达TIPE2的H446细胞构建成功,TIPE2蛋白在胞浆中高表达.免疫细胞化学技术检测结果显示,H446-TIPE2组胞质中可见棕褐色阳性着色即为TIPE2蛋白,而H446组和H446-Vector组均未见棕褐色阳性表达.蛋白免疫印迹技术结果显示,三组细胞在内参Actin的标准化下,均有磷酸化ERK、P38和JNK信号表达,但H446-TIPE2组ERK和JNK磷酸化水平低于H446组和H446-Vector组,P38通路磷酸化水平高于H446组和H446-Vector组.结论 TIPE2过表达激活P38通路,但抑制ERK和JNK通路.
-
Tipe2过表达对小细胞肺癌H446凋亡相关分子的影响
目的 观察Tipe2过表达对小细胞肺癌细胞H446凋亡相关分子的影响.方法 以脂质体转染技术建立Tipe2过表达的H446小细胞肺癌细胞系,利用荧光显微拍照技术和Western Blot免疫印迹技术分别检测Tipe2过表达情况和细胞凋亡相关分子Bax和Mcl-1的变化.结果 GFP-Tipe2质粒脂质体转染H446细胞高表达Tipe2,并带有标签GFP的绿色荧光.Tipe2过表达的H446细胞促凋亡分子Bax表达增高,而抗凋亡分子Mcl-1表达降低,细胞凋亡明显.结论 Tipe2过表达通过上调Bax和下调Mcl-1促进小细胞肺癌H446凋亡.
-
莱菔硫烷对H446细胞株的抑制作用及CYR61的影响
目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对小细胞肺癌H446细胞株的抑制作用及CYR61基因表达的影响.方法 MTT法检测SFN对H446细胞的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Real-time PCR检测H446肺癌细胞株CYR61表达.结果 MTT结果显示:SFN从20 μM的浓度起开始出现细胞抑制效应,抑制率与SFN浓度呈正相关关系.40 μM SFN干预组的CYR61基因表达量较高,与其他组之间差异有统计学意义.结论 SFN在一定浓度下对H446细胞株有抑制作用,并促进CYR61基因表达,为食用十字花科类蔬菜防治肺癌提供依据.
关键词： 莱菔硫烷 H446 CYR61 Real-time PCR -
川芎嗪对人小细胞肺癌H446细胞的增殖抑制作用
目的观察中药川芎的提取物川芎嗪对人小细胞肺癌H446细胞的增殖抑制作用.方法用MTT法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)双荧光染色法、流式细胞术及扫描电镜观察川芎嗪对体外培养的人小细胞肺癌H446细胞存活率的影响、检测凋亡、分析其对细胞形态学及细胞周期的影响.结果川芎嗪对小细胞肺癌H446细胞有增殖抑制作用,细胞形态学发生变化,如细胞体积缩小、细胞质空泡化、细胞核碎裂;川芎嗪可诱导H446细胞凋亡并使细胞生长停滞在S期,抑制细胞有丝分裂及DNA合成.结论川芎嗪对小细胞肺癌H446细胞具有增殖抑制作用,呈浓度相关性,川芎嗪可诱导H446细胞凋亡,其机制可能与其导致细胞S期阻滞有关.
-
Hsa-let-7诱导肺癌细胞凋亡与G0/G1期阻滞及其分子机制
目的:研究hsa-let-7对肺癌细胞功能的影响并探索其机制.方法:构建重组质粒pGenesilTM-let-7a和pGenesilTM-control,经脂质体介导稳定转染人肺鳞癌细胞系KUM-LK2、肺腺癌细胞系A549,小细胞肺癌细胞系H446,经qRT-PCR检测转染后3种肺癌细胞中let-7a的表达差异,Western blot检测let-7a下游基因Ras、ERK的表达差异,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,探索let-7a通过MAPK信号转导通路影响肺癌细胞的功能及机制.结果:转染pGenesilTM-let-7a后,let-7a在实验组肺癌细胞中的表达显著高于对照组肺癌细胞,Western blot证实p-Ras、p-ERK在实验组细胞中的表达显著低于对照组(P＜0.05),而t-Ras及t-ERK的表达差异不显著(P＞0.05)；同时实验组肺癌细胞的凋亡率显著高于对照组肺癌细胞,实验组肺癌细胞S期比例显著低于对照组,而G0/G1期比例显著高于对照组(P＜0.05).结论:Let-7a通过作用于靶基因Ras,影响ERK的表达,调节MAPK信号转导通路,促进肺癌细胞的凋亡,使G0/G1期肺癌细胞比例增加,可能在肺癌的发生发展中起重要的作用.
