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SiO2刺激肺泡上皮细胞间隙连接功能下调的研究
目的探索矽肺发病过程中,SiO2对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能(GJIC)的影响.方法不同剂量的SiO2刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞(PAM)培养上清液,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL-64细胞.用四唑盐(MTT)法测定CCL-64细胞增殖(以A570nm值表示);采用激光扫描共焦显微镜(LSCM,LeicaTCS SP)用荧光光漂白后再恢复(FRAP)技术测定CCL-64细胞GJIC功能[以荧光扩散率K(×10-3/s)]表示.结果体积分数为5%的SiO2刺激的PAM上清液能诱导CCL-64细胞增殖(F=9.679,P＜0.01),并抑制CCL-64细胞间GJIC功能(F=20.587,P＜0.01).在50～500 μg/mlSiO2范围内,随SiO2浓度增加,两者均呈良好的剂量依赖性关系(GJIC:r=-0.943,P＜0.05;增殖:r=0.891,P＜O.05).结论SiO2刺激PAM培养上清液可以抑制肺泡上皮细胞的GJIC功能,并诱导细胞增殖.推论肺泡上皮细胞GJIC功能下调在SiO2介导的肺泡上皮组织损伤中有重要的作用.
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二氧化硅刺激肺成纤维细胞间隙连接功能下调的研究
目的 探索矽肺发病过程中二氧化硅(SiO2)刺激肺纤维化发生与肺成纤维细胞间隙连接通讯功能 (GJIC)下调的关系。方法 不同剂量的SiO2刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞(PAM)及具有肺泡巨噬细胞特性的、经12-O-四 葵酰基-佛波-13-乙酸酯(佛波酯，PMA或TPA)诱导分化的人血单核细胞株(pTHP-1)培养 上清液 ，作用于中国仓鼠肺成纤维(CHL)细胞。用四唑盐(MTT)法测定CHL细胞增殖(A570 n m)；用激光扫描共聚焦显微镜,按荧光光漂白后再恢复(FRAP)技术测定CHL细胞GJIC功能［ 荧光传递速率K,(×10-3/s)］。结果 SiO2刺激的PAM上清液和pTHP-1上清液均能诱导CHL细胞增殖(PAM：F=3.205, P<0.05；pTHP-1：F=13.779,P<0.01)及抑制GJIC功能(PAM：F=19.948, P<0.01；pTHP-1：F=9.365,P<0.01)，并随SiO2浓度增加(50、100、20 0和500 μg/ml),细胞增殖能力渐强，呈剂量-效应关系(PAM：r=-0.803,P<0 .05；pTHP-1：r=-0.914,P<0.01)。PAM和pTHP-1细胞上清液可以增强CHL细胞 的GJIC功能(K均数分别为21.24×10-3/s、18.92×10-3/s)和抑 制细胞增殖(A 570 nm均数分别为0.506、0.218)，和空白对照(7.81×10-3/s、7 .81×10-3/s和0.539、0.388)相比，差异均有显著性(P<0.05)。结论 SiO2刺激PAM和pTHP-1培养上清液可以抑制肺成纤维细胞的GJIC功能，并诱导细胞增殖。 推测在矽肺纤维化发生过程中，肺成纤维细胞GJIC功能的下调进而诱导肺成纤维细胞增殖 可能发挥了重要的作用。
