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裂褶菌胞外多糖的硫酸化修饰及红外表征
通过对提取出的裂褶菌胞外多糖的硫酸化修饰获得硫酸化多糖，用红外光谱检测硫酸化的结果。邻苯三酚自氧化法对多糖和硫酸化多糖的抗氧化活性进行了比较。随着多糖溶液浓度的增加，胞外多糖和硫酸化胞外的抗氧化活性也增强.当多糖溶液浓度为500μg/mL时，硫酸化胞外多糖对氧自由基的清除率达到32.73%，提高了28.88%。
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高山红景天多糖的硫酸化修饰及DPPH自由基清除活性研究
目的 优选高山红景天多糖(RSP)的佳硫酸化修饰条件,提高RSP的抗氧化活性.方法 利用氯磺酸-吡啶法对RSP进行了硫酸化修饰,并通过单因素实验确定了硫酸化反应的佳工艺条件;应用红外光谱(IR)和扫描电子显微镜(SEM)对RSP和硫酸化高山红景天多糖(S-RSP)的理化性质进行了分析;通过测定RSP和S-RSP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除能力,考察了S-RSP的取代度(DS)与多糖抗氧化活性之间的关系.结果 当氯磺酸与吡啶的体积比为1∶4、反应时间为2h、反应温度为60℃时,制得的S-RSP的含硫量大值为18.83％,取代度大值为2.38.RSP经硫酸化修饰后,增强了其抗氧化活性,S-RSP的DS与DPPH自由基清除能力存在一定的正比例关系.结论 氯磺酸与吡啶的体积比影响S-RSP的DS大小;RSP经硫酸化修饰后通过改变多糖的极性而增加了其抗氧化能力.
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淫羊藿多糖硫酸化修饰条件的优化
目的 优化淫羊藿多糖硫酸化修饰的佳条件.方法 采用氯磺酸-吡啶法.以硫酸基取代度和糖的质量分数为指标,采用L9(34)正交试验对反应温度、试剂配比和反应时间进行优选.结果 反应温度对修饰的影响大,适宜的修饰条件为反应温度80℃,氯磺酸与吡啶的体积比在1:8～1:10,反应时间2～3h.结论 采用优化的条件对淫羊藿多糖进行硫酸化修饰可以获得理想的硫酸化淫羊藿多糖.
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正交试验优选党参多糖的硫酸化工艺研究
目的 优选党参多糖硫酸化工艺.方法 用氯磺酸-吡啶法对党参多糖进行硫酸化修饰,以取代度和产物得率为指标,用L9(34)正交试验对试剂配比、反应温度、反应时间进行优选,用氯化钡-明胶法测定硫酸基的取代度.结果 试剂配比和反应时间分别对产物得率和取代度的影响大,氯磺酸与吡啶配比为1;6时产物得率高;反应时间为3 h时取代度高,达1.83;各因素不同水平对产物得率和取代度的影响无显著差异.结论 综合考虑适宜的修饰条件为氯磺酸与吡啶配比为1:6、反应温度80℃、反应时间3 h.
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山豆根多糖硫酸化修饰及其体外抗HBV活性测定
目的 对山豆根多糖进行硫酸化修饰并对其抗HBV活性进行测定.方法 提取山豆根多糖,采用氯磺酸-吡啶法对山豆根多糖进行硫酸化修饰,产物经红外光谱鉴定.用MTT法测定该修饰物的抗HBV活性.结果 通过山豆根多糖硫酸化前后的红外图谱分析,表明硫酸基与多糖已结合成酯,并且有抗HBV的作用.结论 山豆根多糖硫酸化修饰能提高对乙型肝炎病毒细胞转染的2215细胞培养液中HBeAg、HBsAg的抑制作用.
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菊粉硫酸酯的制备及其抑真菌活性研究
目的 研究菊粉硫酸酯(inulin sulfate,IS)的制备及其抑制真菌活性.方法 采用氯磺酸-吡啶法对菊粉(inulin)进行硫酸化修饰,得到IS;采用生长速率法对IS的抑制真菌活性进行测定.结果 IS产率为菊粉投料量的128%左右,水溶性好,呈中性,硫取代度(DS)为2.22左右,硫含量为18.2%左右.结论 抑菌实验表明IS具有一定抑制真菌的活性.
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多糖硫酸化修饰的突变模式
香菇多糖具有免疫活性,经过硫酸化修饰后转变为抗病毒活性.这样性质的变化可用突变理论解释,预期修饰后的硫酸多糖免疫活性状态与抗病毒活性状态可同时存在,至于哪一种状态显示作用受环境的影响很大,环境的扰动可使体系由一种状态进人另一种状态.
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苦豆子多糖硫酸化修饰工艺的研究
目的 确定氨基磺酸-甲酰胺法修饰苦豆子多糖的可行性,并应用正交试验法对苦豆子多糖硫酸化修饰工艺进行优化.方法 以硫酸根取代度为指标,采用L9(34)正交试验设计对氨基磺酸用量、甲酰胺用量、反应时间、反应温度进行优选.结果 苦豆子多糖硫酸化修饰过程中,取苦豆子多糖30 mg在氨基磺酸135mg,反应温度100℃,反应时间4h,甲酰胺20 mL的工艺条件下,苦豆子多糖可获得理想的硫酸根取代度,通过紫外光谱和红外光谱检测,苦豆子多糖的糖基单元已成功引入硫酸基团.结论 氨基磺酸-甲酰胺法适用于苦豆子多糖的硫酸化修饰,此方法有效可行,具有较好的硫酸化修饰效果.
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正交实验优选黄芪多糖硫酸化修饰条件及修饰产物抗IBDV活性测定
目的:优选黄芪多糖硫酸化修饰的佳条件,探讨硫酸化修饰提高黄芪多糖活性的可能性.方法:采用氯磺酸-吡啶法对一步醇沉的总黄芪多糖和分步醇沉并纯化的3种分级黄芪多糖进行硫酸化修饰,以氯磺酸-吡啶配比、反应温度和反应时间为因素水平,用L9(3)4正交设计对修饰条件进行优选,用硫酸钡比浊法测定修饰产物的硫酸基取代度(DS),用MTT法测定修饰产物的抗IBDV活性.结果:黄芪多糖氯磺酸-吡啶法修饰的佳条件为氯磺酸:吡啶为1:6,反应温度95℃,反应时间1h.结论:硫酸化修饰能提高黄芪多糖的抗病毒活性,且与DS相关.
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正交实验优选土茯苓多糖的硫酸化工艺研究及修饰产物抗肿瘤活性测定
[目的]优选土茯苓多糖硫酸化修饰的佳条件,探讨硫酸化修饰提高土茯苓多糖活性的可能性.[方法]采用氯磺酸—吡啶法对纯化的土茯苓多糖进行硫酸化修饰,以产率、硫酸基取代度、糖含量作为考察指标,用L9(34)正交实验设计对反应时间、反应温度和氯磺酸—吡啶配比3个因素进行优化,用氯化钡—明胶法测定硫酸基的取代度(DS),用硫酸—苯酚法测定糖含量,红外光谱测定其结构,并用噻唑蓝(MTT)比色法检测正交试验中的各种硫酸化后多糖产物对肿瘤细胞HepG2和MCF-7增殖活性的影响.[结果]土茯苓多糖采用氯磺酸—吡啶法进行硫酸化修饰的佳条件为反应时间4.5 h,反应温度60℃和试剂配比为1:6;MTT结果显示:硫酸化后的多糖产物对肿瘤细胞HepG2和MCF-7具有一定的抑制增殖作用,并与浓度呈依赖性关系.[结论]氯磺酸—吡啶法对土茯苓多糖进行硫酸化修饰是可行的,且硫酸化修饰能提高土茯苓多糖的抗肿瘤活性.
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硫酸乙酰肝素结构功能多样性与硫酸化修饰
不同种属、不同机体、不同组织硫酸乙酰肝素(HS)糖链结构呈现不均一性,从而在多个生物领域发挥巨大功能活性.复杂多样的硫酸化修饰正是导致HS结构不均一、功能多样化的基础.硫酸转移酶是调控HS合成中硫酸化修饰的关键酶.了解并控制硫酸化修饰不仅为有关疾病治疗开发新靶点,也将为探讨多种疾病发病机制提供新思路.
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DON毒素和硒对软骨聚集蛋白聚糖硫酸化修饰的影响
目的 研究大骨节病(Kashin-Beck disease,KBD)可疑致病因子脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和补硒对软骨细胞外基质聚集蛋白聚糖(aggrecan)硫酸化修饰的影响.方法 应用体外单层培养C28/I2人软骨细胞,采用MTT法测定不同浓度DON和不同作用时间下的细胞增殖活性,通过Real-time PCR和Western-blot法分别检测加DON毒素或补硒后软骨细胞的aggrecan、PAPS合成酶2(PAPS synthetase 2,PAPSS2)、PAPS转运体1(PAPS transporter 1,PAPST1)、N-乙酰氨基半乳糖胺-4,6-硫酸转移酶[carbohydrate(N-acetylgalactosamine 4-sulfate 6-O)sulfotransferases 15,CHST15]以及芳基硫酸酯酶B(arylsulfatase B,ARSB)mRNA和蛋白的表达水平.结果 DON毒素可抑制C28/I2软骨细胞系的增殖活性,在DON毒素作用下aggrecan、PAPSS2、PAPST1和CHST15的mRNA和蛋白质表达水平降低,ARSB mRNA和蛋白质表达水平升高,加硒可在一定程度上改善这种状况.结论 DON毒素对软骨细胞的增殖有明显的抑制作用,细胞对毒素有一浓度和时间的依赖性;DON毒素可通过改变aggrecan硫酸化修饰相关酶类的表达水平影响软骨蛋白聚糖的硫酸化.
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蛋白聚糖与软骨结构、功能及骨关节病的关系
蛋白聚糖是一类由核心蛋白与1条或多条共价连接的氨基聚糖所组成的糖复合物,是细胞膜、基底膜、特别是细胞外基质的重要组成成份,与组织细胞的结构和功能息息相关.随着科学研究的发展,人们逐渐认识到蛋白聚糖代谢与骨软骨发育和退变、神经组织的发育和退变、心血管疾病和肿瘤的发生发展关系密切.本文仅对蛋白聚糖代谢与软骨结构和功能及骨关节病发病机制的研究进行探讨.
