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酪蛋白抗凝血肽的制备及其体外抗凝血、溶栓作用研究
目的 研究抗凝血肽的制备、分离方法及其体外抗凝血、溶栓效果.方法 用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶对酪蛋白进行4酶混合水解制备抗凝血肽,以固定化凝血酶对抗凝血肽进行萃取,用新西兰兔进行体外抗凝血、溶栓实验.结果 实验确定的抗凝血肽制备条件为酪蛋白质量浓度15％,水解每克酪蛋白的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶用量分别为1 500、2 400、1000、1250U,水解温度50℃,pH 7.0,水解时间4h.固定化凝血酶萃取抗凝血肽的初始浓度6ATU/mL,萃取温度30℃,pH 5.0,萃取时间30 min.反萃取温度30℃,pH 7.6,反萃取时间40 min.抗凝血肽经高效体积排阻色谱分析,主要成分分子大小与马尿酰-组氨酰-亮氨酸相当.体外抗凝血时间超72 h,溶栓时间24 h.结论 酪蛋白抗凝血肽主要成分为3肽,体外抗凝血及溶栓实验效果良好.
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高效体积排阻色谱-示差折光检测器-多角激光光散射仪联用测定右旋糖酐70原料药的分子质量
目的:建立测定右旋糖酐70原料药的分子质量的方法.方法:采用不需要对照品的高效体积排阻色谱-示差折光检测器-多角激光光散射仪(HPSEC-RID-MALLS)联用法,另与《中国药典》方法即HPSEC-RID法(采用3种来源对照品)测定3批样品重均分子质量(Mw)的结果进行比较.两种方法色谱柱均为TSK-GEL G4000SWXL凝胶色谱柱,流动相分别为0.2 mol/L氯化钠水溶液和0.71％硫酸钠水溶液(均含0.02％叠氮化钠).结果:采用HPSEC-RID-MALLS法与采用其中2种来源对照品的HPSEC-RID方法测得的样品MW结果相近.结论:HPSEC-RID-MALLS法不需要对照品,可直接测定样品的分子质量,方法更简便、快速,且结果准确.
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应用HPSEC法测定蛇毒凝血酶样酶纯度和分子量
在对全国蛇毒凝血酶样酶产品的全面考察后,本文报道了采用高效体积排阻色谱法对其纯度及分子量的测定结果.国内蛇毒凝血酶样酶样品的纯度达到98%以上,分子量测定结果为37500±2000.
