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卵母细胞成熟比例与体外受精胚胎移植妊娠结局的关系
目的 探讨体外受精与胚胎移植(IVF-ET)中,所获卵母细胞的成熟比例与胚胎发育及妊娠结局的关系.方法 2006年1月至2007年7月在本中心接受卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的男性因素不孕患者242例,按卵母细胞成熟比例分为90%～100%(Ⅰ组)、80%～89%(Ⅱ组)、70%～79%(Ⅲ组)、<70%(Ⅳ组),回顾性分析这四组的胚胎发育情况及妊娠结局.结果 四组的卵裂率和优质胚胎率无显著差异.Ⅳ组的受精率(65.6%)低于前三组(73.3%、74.8%、78.9%)(P<0.05);临床妊娠率(25%)明显低于Ⅰ、Ⅱ组(52.3%、55.6%)(P<0.05);胚胎种植率(13.64%)也低于Ⅰ、Ⅱ组(34.1%、32.1% )(P<0.05).结论 卵母细胞成熟比例低组受精率偏低,胚胎的发育潜能及终的妊娠结局也偏差.
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胰岛素样生长因子I及其受体对卵母细胞成熟的影响
目的 探讨行促排卵治疗患者血清和卵泡液中胰岛素样生长因子I(insulin like growth factor I,IGF-I)及卵丘颗粒细胞中胰岛素样生长因子I受体(IGF-IR) mRNA的水平与卵母细胞成熟的关系. 方法 选择32例行卵胞浆内单精子注射(ICSI)的患者,收集取卵日静脉血、卵泡液及卵丘颗粒细胞,并记录卵母细胞成熟度.检测血清及卵泡液中IGF-I的水平及卵丘颗粒细胞IGF-IR mRNA的表达量. 结果 血清IGF-I水平/获卵数与卵泡液IGF-I水平呈正相关；MII期卵母细胞的卵泡液IGF-I水平高于MI期,MII期卵母细胞卵丘颗粒细胞IGF-IR mRNA相对表达量约为MI期的3倍,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 卵泡液中IGF-I可促进颗粒细胞IGF-IR mRNA的表达,二者可能协同促进卵母细胞成熟.血清IGF-I水平/获卵数可能对卵母细胞成熟有预测作用.
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人体外与体内成熟卵母细胞发育潜能及妊娠结局的观察
目的 观察体外成熟(IVM)与体内成熟人卵母细胞的发育潜能和妊娠结局. 方法 69例多囊卵巢或多囊卵巢综合征不育患者,分别行IVM治疗49个周期(IVM组)和体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗29个周期(IVF组). 结果 IVM组卵母细胞成熟率为65.4%.IVM组和IVF组受精率和卵裂率分别为62.1%和77.2%,60.2%和91.2%,两组受精率无显著性差异(P＞0.05),IVM组较IVF组卵裂率降低非常显著(P＜0.01).IVM组和IVF组临床妊娠率和种植率分别为26.5%和12.6%,41.4%和22.9%,IVM组临床妊娠率和种植率较低,但两组无显著性差异(P＞0.05).IVM组和IVF组卵母细胞受精后D2≥4细胞和D3≥6细胞胚胎数占受精卵数(2PN)的比例分别为24.5%和19.4%,67.0%和66.4%,IVM组较IVF组胚胎发育速度慢,两者有非常显著性差异(P＜0.01).IVM组D3优质胚胎形成率(23.7%)较IVF组(58.2%)为低,亦有非常显著性差异(P＜0.01). 结论 人卵母细胞IVM将成为一种选择性的辅助生殖技术.人卵IVM较体内成熟卵母细胞受精后2PN至卵裂期发育阻滞发生率高,胚胎发育速度慢和优质胚胎形成率低.
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体外受精失败MII期人卵母细胞的免疫荧光研究
目的探讨体外受精中MII期人卵母细胞受精失败的原因.方法收集体外受精后24～48 h仍未受精的MII期卵母细胞,进行免疫荧光染色和碘化丙啶(PI)复染,在荧光显微镜下对其失败原因进行分类.结果卵母细胞内未见精子的在常规体外受精(IVF)周期有55.8%,显著多于卵胞浆内单精子注射(ICSI)周期中的9.7%(P＜0.01);卵母细胞活化失败两者分别为14.9%和58.1%,有显著性差异(P＜0.01);原核形成和(或)迁移缺陷的在两者分别为25.3%和32.3%(P＞0.05);其他异常两者分别为3.9%和0.0%.结论IVF中MII期卵母细胞的受精失败主要是缺乏精子的穿透,ICSI周期中的主要原因是卵母细胞活化不完全.
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卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡关系的初步研究
目的探讨卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡之间的关系.方法将卵母细胞在体外培养28～30 h后,取其颗粒细胞,采用TUNEL法进行凋亡率的分析,并与卵子的成熟情况和卵子的评分及形成胚胎结果进行对照. 结果经培养后,随着卵母细胞成熟度的降低,凋亡率升高;而且随着卵母细胞评分和发育潜能的降低,颗粒细胞凋亡率逐渐升高.结论卵子发育潜能与颗粒细胞凋亡密切相关,通过测定颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能.
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樟脑丸对雌性小鼠生殖细胞和脏器的影响
目的:探索由对二氯化苯制成的樟脑的生殖毒性.方法:采用卵母细胞体外培养、体外受精等方法研究樟脑丸对小鼠卵母细胞成熟和受精能力的影响.结果:接触樟脑丸3 d组和5 d组对小鼠的卵巢和肝脏有明显的毒性作用,5 d组能显著降低超排卵数;樟脑丸对卵母细胞生发泡破裂没有影响,但抑制卵母细胞第一极体的释放,影响其存活率及降低体外受精率.结论:本实验结果提示,樟脑丸可能影响超排卵小鼠卵母细胞的成熟,明显降低卵母细胞的体外受精的能力,并表现有明显的生殖细胞毒性.
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线粒体DNA拷贝数对卵母细胞受精结局的影响
目的 研究线粒体DNA拷贝数对卵母细胞受精结局的影响,为提高卵子质量,改善体外受精结局提供新思路.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测不同受精结局的卵母细胞线粒体DNA(mtDNA)拷贝数,并对各组结果作比较分析. 结果 A组52枚未受精卵的平均mtDNA拷贝数为(80,547±37,314) copies/μl,B组46枚发生原核阻滞的正常受精合子平均mtDNA拷贝数为(104,311±43,074) copies/μl,C组61枚单原核(1PN)或三原核(3PN)胚胎平均mtDNA拷贝数为(192,681±51,394) copies/μl.拷贝数A组显著小于B、C两组(P＜0.01),B组显著小于C组(P＜0.05).C组中碎片率＞30％的较差胚胎(C1组)和碎片率＜5％、发育速度正常的良好胚胎(C2组)两个亚组,两组的平均mtDNA拷贝数分别为(146,836±36,585)copies/μl和(297,268±102,369) copies/μl,两组比较结果有显著性差异(P=0.000). 结论 线粒体DNA拷贝数可作为衡量卵母细胞和胚胎质量的重要指标,线粒体缺乏可能是部分体外受精失败的原因.
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小鼠卵母细胞MII期核(纺锤体)移植后经体外受精正常产仔
目的：为研究和了解细胞核与细胞质的相互作用。方法：采用3%蔗糖预处理显示及去核法进行昆明白小鼠与C57BL/6小鼠(黑色)之间卵母细胞MII期核(纺锤体)的移植、电融合、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)。结果：经3%蔗糖预处理卵母细胞的去核率达100%。完成MII期核移植的重构卵母细胞约17.6%完成电融合。IVF的受精率为82%。受精卵2-细胞胚胎的发育率为80%～90%，8个1～4细胞胚胎移入两只自然怀孕1 d的寄母小鼠(Km×Km)输卵管，其中1只孕鼠生下3只小鼠，其中2只黑色小鼠为MII期核(纺锤体)移植生产的小鼠。移植产仔率为25%。结论：实验结果证明了3%蔗糖预处理显示MII期核(纺锤体)及去核效果可达100%；电融合的重构卵母细胞可完成正常的IVF。为进行不同年龄和卵龄间的MII期核移植提供了一个模型。
关键词： 小鼠 卵母细胞 MII期核(纺锤体)移植 电融合 体外受精 -
被动吸烟对雌性小鼠生殖功能的影响
为了探索被动吸烟对生殖功能的影响。采用体内实验和卵母细胞体外培养、体外受精的方法，研究被动吸烟对小鼠生殖力的影响。结果：被动吸烟可以显著降低小鼠的妊娠率，抑制胚胎发育和卵母细胞的体内成熟，降低第一极体的释放率和卵母细胞的体外受精率，使卵母细胞的质量和存活率显著降低，影响卵巢与体重比例，但对生发泡破裂无影响。实验结果还显示，停止被动吸烟和将卵母细胞以及受精卵培养在正常培养液中，小鼠的生殖能力又能基本恢复，卵母细胞的第一极体的释放率以及体外受精率都明显提高。结论：被动吸烟可以抑制卵母细胞的成熟，降低小鼠的生殖能力，香烟烟雾中的某些成分被育龄妇女吸收后，会导致生殖能力下降，甚至导致不孕，但香烟烟雾的这种毒性作用可能是短暂的、可逆的。
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应用钙离子载体A23187及6-甲基嘌呤对人卵母细胞进行孤雌激活
目的:观察钙离子载体A23187(Ca-A23187)及6-甲基嘌呤(6-DMAP)对人类卵母细胞的孤雌激活作用.方法:收集体外受精周期中不适于进行卵胞浆内单精子注射的生发泡期或第一次减数分裂中期的不成熟卵母细胞244个在体外培养成熟,其中155个体外成熟卵母细胞按不同激活方案分组:5 μmol/L Ca-A23187组、10 μmol/L Ca-A23187组、对照组、6-DMAP组及Ca-A23187+6-DMAP组.激活处理后12～18 h观察第二极体排出及原核形成情况.结果:5及10 μmol/L Ca-A23187组卵母细胞激活率分别为40.7%(11/27)和37.1%(13/35),较对照组的9.5%(2/21)明显增加(P<0.01);6-DMAP组的激活率,11.5%(3/26)较Ca-A23187+6-DMAP组,58.7%(27/46)明显下降.Ca-A23187激活后卵母细胞主要表现为一原核二极体,而Ca-A23187+6-DMAP激活的卵母细胞以一原核一极体占多数(19/27,70.4%).结论:卵母细胞孤雌激活的发生及原核形成类型与激活方案有关,单独Ca-A23187或与蛋白激酶抑制剂6-DMAP联合应用都能使人类卵母细胞发生孤雌激活,二者联合应用更易于诱导卵母细胞发生孤雌激活.
关键词： 孤雌激活 卵母细胞 人类 钙离子载体A23187 6-甲基嘌呤 -
自然周期体外受精取卵前卵母细胞提早排出的预测因素分析
目的 分析卵巢低反应患者自然周期体外受精(ⅣF)方案中发生取卵前卵母细胞提早排出的相关因素,探讨预测和预防卵母细胞在取卵前提早排出的相关指标. 方法 实施自然周期ⅣF/卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的患者共378个周期,自月经第3天B超监测窦卵泡直径,基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)值;第8～11天B超监测卵泡直径;当卵泡直径＞14 mm时,监测血LH、E2、孕酮(P)水平,当E2≈1,100 pmol/L时,肌注0.2mg促性腺激素释放激素激动剂(GnRH a)诱发排卵(trigger),34～36 h后取卵.分析各项临床指标与卵母细胞在取卵前提早排出发生的相关性.结果 取卵前卵母细胞提早排出与基础E2值、“trigger”日P、LH值有关,与患者年龄、基础LH、FSH值和卵泡直径无关.结论 自然周期取卵时机的选择应根据患者基础E2值及监测P、LH水平进行预测和监控.
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表皮生长因子调节小鼠生发泡期卵母细胞发育成熟的实验研究
目的:观察表皮生长因子(EGF)对生发泡期(GV期)卵母细胞生发泡破裂(GVBD)、第一极体(FP)形成的影响.方法:体外培养的昆明种雌性小鼠GV期卵母细胞分为卵丘卵母细胞复合体(COC)组及去卵丘裸卵(DO)组,观察不同浓度(0、2、5、10、15 μg/L)EGF对体外培养0、4、8、12、24、36、48 h COC、DO各组GVBD、FP形成的影响.结果:(1)EGF可促进DO组的卵母细胞成熟分裂,培养48 h EGF各组与对照组相比,有显著性差异(P<0.05);(2)COC组培养36 h后EGF各组成熟率均显著大于对照组(P<0.05);(3)不论是否存在EGF,COC组成熟分裂率均显著高于DO组(P<0.05);(4)EGF作用呈剂量依赖性.结论:EGF不仅可促进COC组GVBD发生、FP形成,而且可不通过卵丘细胞直接刺激卵母细胞成熟,EGF对COC促进作用强于DO,并呈剂量依赖性.
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卵母细胞玻璃化冷冻对胚胎发育及妊娠结局的影响
目的 探讨玻璃化冷冻对卵母细胞体外受精、胚胎发育以及妊娠结局的影响.方法 将193枚玻璃化冷冻卵母细胞解冻复苏,采用卵胞浆内单精子注射法受精,观察胚胎发育形态,经72 h体外培养后移植.结果 成熟卵母细胞解冻复苏率为75.6%,正常受精率为72.6%,卵裂率为88.7%,优质胚胎率为48.9%.共移植19例,9例妊娠,已分娩2例,临床妊娠率为47.3%.新鲜周期与冻卵解冻周期相比,卵裂率、可移植胚胎率和优质胚胎率均无显著性差异(P>0.05).结论 玻璃化冷冻方法对成熟卵母细胞的胚胎发育及妊娠结局无显著影响.
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镍对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响
为了研究镍的生殖毒性，采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究镍对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精率的影响。结果：氯化镍对卵母细胞生发泡破裂没有影响，但抑制卵母细胞第一极体的排放，降低体外受精率，并降低卵母细胞的存活率。实验结果提示，氯化镍破坏小鼠卵母细胞的减数分裂，影响小鼠的生殖功能。
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卵母细胞滑面内质网聚集对MII卵母细胞有效胚胎形成率的影响
目的 探讨卵母细胞滑面内质网聚集(SERa)对卵母细胞利用率的影响. 方法 回顾性分析2013年1月至2014年12月的250周期ICSI治疗患者,根据卵母细胞有无SERa分为两组:SERa+组(至少有1个卵母细胞SERa阳性,A组)50周期;SERa组(所有卵母细胞均无SERa,B组)200周期.分析两组患者的临床和实验室指标,包括受精率、异常受精率、卵裂率、有效胚胎形成率及卵母细胞利用率. 结果 与B组相比,A组卵裂率、有效胚胎形成率及卵母细胞利用率显著降低(P＜0.05),而异常受精率显著增加(P＜0.05);A组中的SERa-卵母细胞与B组卵母细胞相比,卵裂率、有效胚胎形成率及卵母细胞利用率显著降低(P＜0.05),异常受精率也显著增加(P＜0.05);A组中SERa+卵母细胞与SERa卵母细胞相比,异常受精率显著增加(P＜0.05),卵裂率、有效胚胎形成率及卵母细胞利用率无显著性差异(P＞0.05). 结论 卵母细胞胞浆内滑面内质网聚集增加异常受精率,降低卵母细胞利用率.
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家畜卵母细胞冷冻保存技术研究进展
卵母细胞是胚胎工程技术研究中为重要的一种实验材料,随着动物胚胎工程技术的迅速发展,卵母细胞的需求量急剧增加.卵母细胞冷冻保存技术可充分利用各种卵母细胞资源,为细胞核移植、体外受精、转基因生产等提供丰富而方便的材料来源,使这些技术不受时间、地域限制,可以随时随地进行,从而为其走向实用化、商业化发展开辟道路.本文就卵母细胞的冷冻保存技术做一简要的论述.
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卵母细胞代谢及其调节
卵母细胞发育与成熟过程依赖大量ATP,因此物质代谢旺盛.卵母细胞以葡萄糖和/或其中间产物丙酮酸为底物,在线粒体内氧化磷酸化,产生大量ATP,是卵母细胞主要的供能形式.但是,卵母细胞糖代谢模式有种属特异性差异.同时,卵母细胞也存在脂肪酸和氨基酸的代谢.除提供能量外,这些代谢产物在细胞信号传导、渗透压调节等方面也有重要作用.卵母细胞代谢的精确调控受多方面因素的影响如卵母细胞胞内、胞间、胞外的调控等.研究卵母细胞代谢及其机制,对探寻改善卵母细胞质量、提高卵母细胞体外成熟效能具有重要的意义.
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光镜下卵母细胞形态与辅助生殖妊娠结局
近年来,体外受精-胚胎移植技术作为不育症治疗的重要措施,已经为成千上万的不育症患者解决了生育难题,而在这一治疗过程中,提高临床妊娠率是医患关注的焦点.卵母细胞的质量是决定胚胎发育潜能及是否能够妊娠的一个重要因素,对卵母细胞的形态进行科学的评价必将有助于进一步改善辅助生殖技术的临床结局.
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葡萄糖代谢对卵母细胞成熟和植入前胚胎发育的影响
葡萄糖主要通过糖酵解途径、磷酸戊糖途径、己糖胺生物合成途径和多元醇途径进行代谢,在卵母细胞发育成熟及植入前胚胎发育过程中起重要作用.葡萄糖代谢异常,可导致卵母细胞成熟障碍和胚胎发育异常.本文对上述四条葡萄糖代谢途径在卵母细胞和植入前胚胎发育过程中的作用进行综述.进一步研究卵母细胞成熟和植入前胚胎发育过程中葡萄糖代谢途径的调控机制,有利于改善卵母细胞体外成熟和胚胎的培养条件,提高体外培养的卵母细胞和胚胎的发育能力.
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抗苗勒管激素在卵泡及卵母细胞发育中的作用
在女性,抗苗勒管激素(anti-müllerian hormone,AMH)由颗粒细胞生成,从初级卵泡到窦卵泡均有分泌.AMH在始基卵泡中不表达,卵泡被募集后开始表达,但随着卵泡的不断发育,在窦卵泡被选为优势卵泡时,表达显著下降,提示AMH可能在始基卵泡的起始募集和优势卵泡的选择中发挥作用.此外,AMH还与卵母细胞发育密切相关.本文综述AMH在卵泡和卵母细胞发育中的作用.
