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主动免疫治疗对反复胚胎植入失败患者CD4+CD25+调节性T细胞表达的影响
目的 探讨淋巴细胞主动免疫治疗对反复胚胎植入失败(RIF)患者外周血CD4+ CD25+调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Treg)表达的影响. 方法 选择在郑州大学第三附属医院生殖中心就诊的30例RIF患者(RIF组),采用荧光标记流式细胞分析技术,检测其淋巴主动免疫治疗前、后2周的外周血CD4+CD25+Treg表达,并选择同期正常未妊娠妇女20例作对照(对照组). 结果 (1)RIF组治疗前CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)RIF组治疗后CD4+CD25+Treg的表达率明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 RIF的发生可能与CD4+CD25+Treg的表达下降有关;淋巴细胞主动免疫治疗可上调CD4+CD25+Treg的表达,调控母胎免疫耐受,有利于胚胎植入成功.
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慢性阻塞性肺疾病T淋巴细胞亚群与生化参数变化及其相关性分析
利用基于免疫荧光标记技术为原理的流式细胞分析技术研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者免疫功能与生化参数的变化及其相关性分析.对31例COPD患者与30名健康者T淋巴细胞亚群与生化参数等13项指标进行检测,并进行统计学相关分析.结果表明,COPD组和对照组免疫指标比较,CD3+CD4+T淋巴细胞计数无显著性差异(P>0.05),而COPD组中CD3+CD8+T淋巴细胞计数低于对照组(P<0.05),并且CD4/CD8比值升高(P<0.05);COPD组UN、UA、GLU、HDL-C均高于对照组(P<0.05),Cr则明显高于对照组(P<0.01),其余生化参数均无显著性差异(P>0.05);COPD组UA与CD3+CD8+T淋巴细胞呈负相关(r=-0.463,P<0.01),TG与CD3+T淋巴细胞呈负相关(r=-0.493,P<0.01),TG与CD3+CD4+T淋巴细胞呈负相关(r=-0.413,P<0.05).COPD患者的免疫功能与尿酸和血脂水平相关.
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流式细胞分析技术在淋巴瘤诊断中的应用
流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)是淋巴瘤诊断的一个重要工具.现代医学的迅猛发展使诊断学在整个临床医学中所占的比重逐渐增大,用于诊断的新学科、新技术也日益增多,如何将各种彼此独立的诊断资料加以综合分析从中得到对于临床治疗有用的信息是对现代医学的重大挑战.在淋巴及造血系统疾病的诊治中,常规血液学(包括涂片)、病理学(包括淋巴组织和骨髓的穿刺、活检)、免疫分型[包括FCM和免疫组织化学(IHC)]、细胞遗传学和分子生物学等等构成诊断的基础.如能将其中的各部分有效的加以整合便可以大限度地互补,大限度地避免不必要的重叠, 将正确的诊断信息及时提供给临床.病理医生处于整个诊断网络的中心,对于这一领域诊断信息的整合有着义不容辞的责任.笔者根据自己的工作经验,就FCM在淋巴瘤诊断中的应用作如下介绍.
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基于微球的多重流式分析技术
1 简介生化分析是生物基础研究及医学临床诊断的重要手段,其中有30多年历史的流式细胞分析技术已广泛应用于生物医学基础研究及实际应用的各个领域.尽管在流式分析技术的大多数实际应用中都以细胞作为载体或研究目标,但诸如微球之类的小固态颗粒同样也可以应用于流式分析技术.
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膀胱移行细胞癌组组织Bcl-2的表达及与临床生物学行为的关系
目的 探讨Bcl-2在膀胱移行细胞癌及癌旁组织中的蛋白表达水平,分析其与临床病理指标的关系及意义,为膀胱移行细胞癌的诊断及临床治疗提供理论依据.方法 用流式细胞分析技术检测45例膀胱移行细胞癌及对应的45例癌旁组织及10例正常膀胱黏膜移行上皮组织中的Bcl-2蛋白的表达.结果 癌旁组织组Bcl-2阳性率高于正常膀胱组和膀胱移行细胞癌组,膀胱移行细胞癌组表达阳性率高于正常膀胱组,差异均有统计学意义(P<0.05).Bcl-2表达与膀胱移行细胞癌的组织学分级关系密切(P<0.05),而与患者性别、年龄、淋巴转移情况及肿瘤临床分期等均无相关性(P>0.05).膀胱移行细胞癌组织Bcl-2蛋白表达阳性的凋亡率明显低于阴性表达(P<0.05).结论 Bcl-2在正常膀胱组织中低表达.Bcl-2随着膀胱癌病理分级的增加阳性率逐渐增加,在膀胱移行细胞癌中,Bcl-2发挥重要作用,与膀胱移行细胞癌的生物学行为密切相关.
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膀胱移行细胞癌组织Livin的表达及其临床意义
目的 探讨Livin在膀胱移行细胞癌及癌旁组织中的蛋白表达水平,分析其与临床病理指标的关系及意义,为膀胱移行细胞癌的诊断及临床治疗提供理论依据.方法 用流式细胞分析技术检测45例膀胱移行细胞癌(膀胱转行细胞癌组)及对应的45例癌旁组织(癌旁组织组),及10例正常膀胱黏膜移行上皮组织(正常膀胱组)中的Livin蛋白的表达.结果 正常膀胱组、膀胱移行细胞癌组、癌旁组织组Livin表达阳性率分别为0、71.11%、0,其中膀胱移行细胞癌组阳性率均高于正常膀胱组和癌旁组织组,差异有统计学意义(P<0.05),而正常膀胱组和癌旁组织组均未见表达.Livin表达与膀胱移行细胞癌淋巴转移密切相关(P<0.05),与肿瘤的分级有一定关系;而与患者性别、年龄及临床分期等指标均无相关性(P>0.05).膀胱移行细胞癌组组织中Livin蛋白表达阳性的凋亡率明显低于阴性表达(P<0.05).结论 细胞凋亡抑制因子Livin在膀胱移行细胞癌组织中表达上调,并且与凋亡率呈负相关,提示Livin可能通过抑制细胞凋亡,对膀胱移行细胞癌的发生发展起重要作用,有望成为一种有效、敏感的肿肿瘤标志物志物,并为膀胱移行细胞癌的基因治疗提供新的靶点.
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五分类血液分析中分类异常复片情况的分析
ABX Pentra DF 120五分类血液分析仪采用细胞化学全染色技术,鞘流阻抗技术, 光学分析技术和流式细胞分析技术,白细胞采用平衡检测原理: LMNE 和BASO/WB C 二个通道同时测定白细胞,保证了白细胞结果的准确可靠,其结果准确性高, 对AL(异型淋巴细胞)、M、E、B异常的标本或有警示信息的标本,其分类结果不如显微镜目测法准确[1].本文在不考虑警告信息,对该仪器检测的98例AL、M、E、B增高结果进行分析评价.
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米非司酮诱导早孕绒毛及蜕膜组织细胞凋亡的研究
本文应用透射电镜、免疫组化及流式细胞分析技术,检测米非司酮药物流产绒毛及蜕膜组织在细胞超微结构上的改变及分子水平上细胞增殖与凋亡相关基因及DNA的变化,从细胞增殖与凋亡角度探讨米非司酮药物流产的作用机制.
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Vogt-小柳原田综合征患者外周血和脑脊液淋巴细胞共刺激分子的表达
目的探讨Vogt-小柳原田综合征(VKH)患者外周血及脑脊液淋巴细胞上B7、CD28和CTLA-4分子的表达及意义.方法采用流式细胞三色直接免疫荧光标记法,检测了39例VKH综合征患者外周血T、B淋巴细胞亚群上共刺激分子CD80 (B7-1)、 CD86 (B7-2)、CD28和CTLA-4的表达.VKH综合征患者分为葡萄膜炎活动期(18例)和静止期(21例)两组.对于3例初发的VKH综合征患者,我们还检查了脑脊液中T淋巴细胞上共刺激分子的表达.结果 VKH综合征活动期患者外周血CD4+T细胞表面CD28分子的表达有所增高(97.o%±3.71%,正常人为95.3%±3.19%),而静止期患者有所下降(93.796±7.56%),但三组比较无显著差异.静止期患者CD4+T细胞表面CTLA-4分子的表达(2.72%±1.42%)显著高于正常人1.73%±0.66%)(P<0.05).另外,VKH综合征活动期患者外周血CD4+和CD8+T细胞表面CD86分子的表达显著低于静止期患者和正常人(p<0.05).与自身外周血淋巴细胞比较,3例初发VKH综合征患者脑脊液CD4+T细胞显著增多(t=3.325,P<0.05),CD4/CD8比值显著升高(t=3.276,P<0.05),CD28分子的表达也显著增高(t=4.242,p<0.05).结论 VKH病患者外周血及脑脊液淋巴细胞上B7、CD28和CTLA-4分子的表达与葡萄膜炎的发生、持续、静止以及其他局部病变的发生密切相关.
关键词: Vogt-小柳原田综合征 共刺激分子 流式细胞分析技术 -
HIV原发感染者NKT细胞基线功能变化研究
目前国际上对NKT细胞在HIV感染过程中的功能变化研究甚少,特别是在HIV原发感染者NKT细胞的基线功能变化还未见报道.本实验主要应用多色流式细胞分析技术,以CD3+CD56+表面标志定义NKT细胞,检测了HIV原发感染者NKT细胞IFN-γ的分泌、CD107a分子表达情况,为探索HIV感染对NKT 细胞功能的影响提供科学依据.
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反复胚胎植入失败患者主动免疫治疗前后封闭抗体的检测及其意义
探讨反复胚胎植入失败(RIF)患者封闭抗体检测的临床意义.采用荧光标记流式细胞分析技术,检测200例RIF患者、200例复发性自然流产(RSA)患者封闭抗体的水平,并选择同期正常未妊娠妇女80例作对照(对照组).RIF组抗CD3-BE、抗CD4-BE、抗CD8-BE均显著低于对照组(P<0.05);RIF组与RSA组无统计学差异(P>0.05);RIF组主动免疫治疗后抗CD3-BE、抗CD4-BE、抗CD8-BE均显著高于主动免疫治疗前(P<0.05).RIF可能存在封闭抗体的缺失而导致母胎免疫失调,主动免疫治疗可调节异常的细胞免疫功能.
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新流式细胞分析技术在实验诊断中的应用
实验诊断主要是应用各种实验方法和技术检测人体中血液、体液、排泄物、分泌物及组织中各种细胞、代谢产物、结构成分,或者与感染病原体及其相关的成分等,为临床疾病的诊治、预防和研究等提供客观的实验依据.随着各种基础科学和应用学科飞速发展,各种新实验方法与技术的应用已成为促进临床实验诊断水平不断提高的重要推动力.
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尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞CD45抗原表达的研究
为了探讨CD45抗原在CA发病机制中的作用,我们应用双标记-流式细胞分析技术,对尖锐湿疣(CA)患者外周血淋巴细胞CD45RA、CD45RO亚群进行了研究,现报道如下.
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尖锐湿疣患者白细胞功能相关抗原 1及其配体细胞间粘附分子 1的表达
为了探讨白细胞功能相关抗原- 1( leukocyte function associated antigen- 1,LFA- 1)及其配体细胞间粘附分子- 1( intercellular adhesion molecule- 1, ICAM- 1)在尖锐湿疣( CA)发病过程中的作用,我们采用免疫荧光标记单克隆抗体-流式细胞分析技术,对 CA患者外周血淋巴细胞 LFA- 1及 ICAM- 1的表达进行了研究,现报道如下。
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乙型肝炎病毒前C区基因变异与T细胞免疫状态的研究
目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区基因变异与T细胞免疫状态的关系.方法:通过DNA扩增、基因序列分析检测21例慢性乙型肝炎的基因序列,通过流式细胞分析技术(FCM)检测外周血T细胞亚群.结果:45例慢性乙肝发生前C变异有12例,变异株CD4+、CD8+相对数明显低于野生株组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:慢性乙肝前C变异后病毒得以逃避机体的免疫攻击,不利于宿主对病毒的清除
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不同单克隆抗体检测封闭抗体的结果比较
目的 比较不同厂家单克隆抗体检测封闭抗体的结果差异.方法 使用BD公司及贝克曼-库尔特(BC)公司的复合CD4/CD8/CD3三色荧光抗体,对30例反复自然流产(Recurrent spontaneous abortion,RSA)患者进行流式细胞术封闭抗体(Blocking antibody,BA)检测,用kappa系数评价两种抗体检测结果的一致性,用McNemar检验比较两种抗体的差异及其对临床决策的影响.结果 经McNemar检验,当以BA单项阴性为需要接受主动免疫治疗的标准,则两组差异有统计学意义(P<0.05);若以BA双项阴性为需要治疗的标准,则两组差异无统计学意义(P>0.05);两种抗体检测结果一致性较差,kappa系数=0.2.结论 两种单克隆抗体检测封闭抗体的结果存在差异,实验室应明确使用抗体的厂家,尤其是对同一患者治疗前后检测封闭抗体变化时应使用相同厂家的抗体.
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体外受精-胚胎移植反复失败患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达
目的:探讨外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞( CD4+ CD25+ Treg)在体外受精-胚胎移植反复失败(RIF)发病机制中的作用.方法:用流式细胞分析技术检测12例RIF组、15例胚胎移植妊娠组、15例正常未孕组患者外周血中CD4+CD25+ Treg的表达.结果:RIF组患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达率为(0.80±0.56)%,低于正常未孕组的(4.05±0.91)%,两组差异有统计学意义(P<0.05);胚胎移植妊娠组患者外周血中CD4+ CD25 +Treg的表达率为(11.01 ±2.09)%,高于RIF组,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论:辅助生殖中反复植入失败可能与CD4+ CD25+ Treg的表达下降有关,这为免疫治疗提供了理论依据.
关键词: 反复植入失败 妊娠 外周血 CD4+CD25+Treg 流式细胞分析技术 -
CD44v、p53在胆管癌组织中表达的定量研究
我们应用流式细胞分析技术对胆管癌及慢性胆管炎组织中蛋白的表达进行检测,探讨胆管癌的恶性生物学行为.一、材料与方法1.材料:胆管癌组织标本取自本院存档的石蜡包埋组织,共35例.所有胆管癌患者术前均未经过放化疗.临床分期采用TMN分期.另取10例慢性胆管炎组织作对照.p53鼠抗人单克隆抗体PAB1801、CD44v鼠抗人单克隆抗体HCAM,均选自Santa Cruz公司.
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IFN-γ和IL-4在胆脂瘤中耳炎患者外周血细胞中的表达及意义
胆脂瘤中耳炎是慢性中耳炎的一种常见类型,其主要的特征是骨质破坏,能导致严重的颅内、外并发症,甚至威胁患者生命.T辅助细胞(Th)1和2的平衡失调与各种疾病的关系是目前的研究热点.
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尿液有形成分流式细胞分析技术及应用策略
本文综述尿液有形成分流式细胞仪的性能评价,与传统方法相关项目检测结果的比较性研究.阐述尿液式细胞分析技术的初筛作用以及在诊断泌尿道感染和定位泌尿道出血等方面的意义.