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CD19+ CD24hiCD38hi调节性B细胞在复发性流产合并抗磷脂综合征患者中的表达及意义
目的 探讨调节性B细胞(Breg)在复发性流产(RM)合并抗磷脂综合征(APS)中的作用. 方法 应用流式细胞术检测11例对照女性、18例复发性流产合并抗磷脂综合征患者(APS/RM)和37例无抗磷脂综合征的复发性流产患者(Non-APS/RM)外周血CD19+ CD24hiCD38hi Breg细胞比例及表达IFN-γ或TNF-α的辅助性T细胞(Th)的比例. 结果 与对照组相比较,CD19+ CD24hi CD38hi Breg细胞比例在APS/RM组(3.42±1.31)％ vs.(7.16士1.28)％,P＜0.01]和Non-APS/RM组[(4.79±1.10)％vs.(7.16±1.28)％,P＜0.01]显著降低,外周血表达IFN-γ的Th细胞比例在APS/RM组[(29.20±8.01)％ vs.(20.60±2.63)％,P＜0.01]和Non-APS/RM组[(25.00士6.06)％vs.(20.60士2.63)％,P＜0.01]中均显著增高,表达TNF-α的Th细胞比例在APS/RM组[(46.30士7.36)％Vs.(29.70士3.94)％,P＜0.01]和Non-APS/RM组[(39.70±9.35)％ vs.(29.70±3.94)％,P＜0.01]中亦显著增高.与Non-APS/RM组相比,外周血CD19+ CD24hiCD38hiBreg细胞比例在APS/RM组显著降低(P＜0.01),而表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加(P＜0.05).相关性分析结果显示,在对照组中CD19+ CD24hi CD38hi Breg细胞比例与表达IFN-γ (r2=0.38,P＜0.05)或TNF-α (r2=0.49,P＜0.05)的Th细胞比例呈显著负相关性,而在APS/RM组和Non-APS/RM组中无显著相关性(P＞0.05). 结论 APS/RM患者存在明显免疫失衡,即表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加,可能与CD19+ CD24hi CD38hi Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关.
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血清Th1/Th2细胞因子检测对儿童支原体肺炎的应用分析
目的：探讨支原体肺炎患儿血清Th细胞因子IFN-γ和IL-4水平及临床应用价值。方法：收治肺炎患儿139例(包括支原体肺炎72例)和健康儿童30例，测定血清IFN-γ和IL-4水平，比较组间差异。结果：支原体肺炎患儿血清IFN-γ水平显著高于健康儿童，但低于其他肺炎患儿(P＜0.05)，IL-4水平显著高于其他肺炎患儿和健康儿童(P＜0.05)，而支原体肺炎患儿的IFN-γ/IL-4比值均低于其他肺炎患儿和健康儿童(P＜0.05)。结论：支原体肺炎患儿急性期Th2细胞介导的免疫较Th1细胞占优，检测IFN-γ和IL-4水平的变化有助于支原体肺炎病情及预后的判断，在儿童支原体肺炎的诊疗中具有十分重要的意义。
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脾虚型哮喘儿童Th细胞和T细胞亚群的状态研究
目的 探讨脾虚型(缓解期)哮喘儿童外周血Th细胞和T细胞亚群的状态及意义.方法 设正常对照组(n=38),脾虚型(缓解期)哮喘组(n=17),采用荧光单细胞内染色法检测外周血Th1、Th2细胞活性,采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测T细胞亚群,统计检测结果并进行统计分析.结果脾虚型缓解期哮喘组与对照组比较,Th1与对照组比较无显著性差异(P＞0.05),Th2明显升高,Th1/Th2明显降低(P＜0.01);CD+3无显著性差异(P＞0.05),CD+4、CD+4/CD+8均明显降低(P均＜0.01),CD+8明显升高(P＜0.01);结论 脾虚型缓解期哮喘儿童存在Th1/Th2细胞偏移和T细胞亚群的紊乱,偏移的原因主要为Th2细胞活性明显升高所致.
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肺虚型哮喘儿童与Th细胞的关系探讨
目的 探讨肺虚型缓解期哮喘儿童外周血Th细胞的意义.方法 设正常对照组(n=38),肺虚型缓解期哮喘组(n=15),采用荧光单细胞内染色法检测外周血Th1、Th2细胞活性,统计检测结果并进行统计学分析.结果 肺虚型缓解期哮喘组Th1、Th1/Th2明显低于正常对照组(P＜0.01),Th2与对照组比较无统计学意义(P＞0.05).结论 肺虚型缓解期哮喘儿童存在Th1/Th2细胞偏移,偏移的原因主要为Th1细胞活性降低所致.
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芪玉三龙汤平衡肺癌小鼠Th1/Th2漂移相关机制
目的:探讨芪玉三龙汤对肿瘤细胞的促凋亡作用以及对肺癌小鼠辅助T细胞(Th cells)因子免疫生物调节作用.方法:采用Lewis肺癌细胞培养移植法(LLC)建立肺癌荷瘤小鼠模型,模型成功后随机分为模型组、化疗组、芪玉三龙汤组、联合组,每组8只,另设8只正常小鼠为空白组;观察小鼠的生存状态,称取瘤重,计算抑瘤率;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构的变化,判断芪玉三龙汤是否可诱导肿瘤细胞凋亡;采用酶联免疫(ELISA)法检测各组小鼠脾脏中白细胞介素(IL)-2,干扰素-γ(IFN-γ),IL-4,IL-10含量的变化;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肿瘤组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA的转录水平.结果:中药组、联合组生存状态明显优于化疗组.与模型组比较,芪玉三龙汤组、化疗组和联合组能显著抑制肿瘤生长(P＜0.01).芪玉三龙汤组电镜下可见肿瘤细胞的变化以凋亡为主,亦有坏死,化疗组电镜下可见多个凋亡小体,联合组电镜下可见典型坏死细胞.各组Bcl-2 mRNA表达水平显著低于模型组(P＜0.01);与化疗组比较,芪玉三龙汤组和联合组Bcl-2 mRNA表达水平显著降低(P＜0.01).各组Bax mRNA表达水平较模型组明显升高(P＜0.05).与模型组和化疗组比较,芪玉三龙汤组IL-2,中药组、联合组的IFN-γ含量显著增加(P＜0.01).芪玉三龙汤组及联合组IL-4,IL-10较模型组明显降低(P＜0.05),而联合组较化疗组IL-4,IL-10浓度显著降低(P＜0.01).结论:芪玉三龙汤可以改善肺癌小鼠的生存状态,诱导肺癌细胞凋亡,凋亡机制可能与下调Bcl-2,上调Bax有关.芪玉三龙汤能够增加IL-2,IFN-γ,降低IL-4,IL-10表达,从而平衡Th1/Th2漂移,改善免疫功能,抑制肿瘤细胞的免疫逃逸.
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不同证型缓解期哮喘儿童Th1/Th2状态初探
探讨缓解期哮喘儿童不同证型-肺虚、脾虚、肾虚型外周血Th1/Th2状态及意义.
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PPAR-γ激动剂吡格列酮对Jurkat T细胞分化的调节作用
目的 探讨吡格列酮对Jurkat T细胞T-bet/GATA-3表达的影响及其与调节TH1/TH2细胞分化作用机制之间的关系.方法 不同浓度的吡格列酮刺激Jurkat T细胞,在不同时间点分别用ELISA法检测TH1/TH2细胞因子表达谱及用RT-PCR检测T-bet和GATA-3 mRNA表达的变化.为探讨实验结果是否为过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPAR-γ)依赖性,同时设立加有PPAR-γ特异性拮抗剂GW9662(终浓度为10 mol/L)的对照组.结果 吡格列酮对Jurkat T细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-10的表达均起抑制作用,抑制T-bet和GATA-3 mRNA的表达,并具有浓度和时间依赖性.GW9662可缓解吡格列酮抑制IFN-γ分泌及T-bet mRNA表达,但对于IL-10和GATA-3 mRNA的受抑程度则无明显影响.结论 吡格列酮抑制TH0向TH1细胞分化是PPAR-γ依赖性地通过转录因子Tbet进行调节,对TH2细胞的抑制作用则非PPAR-γ依赖性的转录因子GATA-3途径的负性调节.
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肾移植急性排斥反应中的TH和Tc类细胞失衡
目的 探讨TH和Tc类细胞的平衡状态及在肾移植急性排斥反应中的作用.方法 用流式细胞术检测24例肾移植受者外周血中TH1/TH2/TH3和Tc1/Tc2类细胞的百分率及CD4/CD8比值的动态变化,同时以10例健康成人作对照.结果 健康对照组TH1、TH2、TH3及Tc1、Tc2细胞百分率分别为:(10.45±8.15)%、(5.05±4.15)%、(3.90±3.21)%及(9.83±7.03)%、(4.51±2.17)%.肾移植术后稳定组受者外周血TH1、Tc1细胞百分率[(7.29±5.52)%和(7.04±5.15)%]减低,TH2、TH3及Tc2细胞[(6.34±5.67)%、(4.94±4.14)%及(6.86±4.42)%]增多;急性排斥组受者TH1、Tc1细胞百分率[(18.55±13.21)%和(15.84±11.72)%]增多,TH2、TH3及Tc2细胞[(4.19±3.62)%、(3.02±2.83)%和(3.88±1.63)%]减低.急排组、稳定组、健康对照之间的差异均具有统计学意义(P＜0.05).急排组受者CD4/CD8比值(2.24±0.59)较稳定组(1.95±0.45)明显增高.伴随免疫抑制剂的治疗,急排组TH1、Tc1百分率及CD4/CD8比值减低.结论 肾移植受者术后存在TH1/TH2/TH3和Tc1/Tc2类细胞失衡.TH1、Tc1类细胞可能通过分泌的IFN-γ在肾移植急性排斥中发挥重要作用,TH2、TH3及Tc2类细胞通过所分泌的IL-4和TGF-β等细胞因子诱导了移植后的免疫耐受.
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TIM-3 mRNA在外周血单个核细胞不同细胞亚群及活化的T细胞上的表达
目的观察健康人外周血单个核细胞(PBMC)不同细胞亚群和活化的CD4+、CD8+T细胞上TIM-3 mRNA的表达,探讨TIM-3 mRNA的表达与T细胞功能的关系.方法应用实时定量RT-PCR(realtime RT-PCR)技术,检测健康人PBMC不同亚群和CD4+、CD8+T细胞受刺激后TIM-3 mRNA的表达.结果健康人PBMC中CD14+单核细胞、CD4+T细胞TIM-3 mRNA的表达量较高(分别为0.84±0.088、0.64±0.11),CD4+T细胞受非特异性刺激后TIM-3 mRNA表达明显升高(0.57±0.065vs 0.85±0.080,t=18.07,P＜0.0001).结论TIM-3 mRNA可能优先表达在健康人PBMC CD14+单核细胞、CD4+T细胞上,活化后的CD4+T细胞TIM-3 mRNA的表达增多,提示TIM-3的表达与TH细胞的功能有关,也可能与单核细胞中某些产生TH1型细胞因子的亚群有关.
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全反式维甲酸对基因免疫应答的调节作用
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的特异性细胞免疫与体液免疫应答的调节作用.方法肌肉注射重组质粒TR421-hCGβ DNA(每只鼠50μg/100μl)初次免疫小鼠,以灌胃的方式给予ATRA,并以灌溶剂和TR421质粒免疫为对照;3周与6周后经同样的方式加强免疫各组小鼠,采用ELISA方法对基因免疫小鼠血清中IgG抗体水平进行动态观察,分析小鼠血清中IgG抗体亚类;3H-TdR掺入法测定特异性细胞增殖和细胞杀伤功能.结果 ELISA结果表明,TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生较高的抗hCGβ抗体水平,ATRA增强TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的抗hCGβ特异性IgG抗体水平并且伴随IgG2a/IgG1显著性降低;TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生较强的淋巴细胞增殖活性和CTL活性,ATRA抑制TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的特异性细胞增殖和细胞杀伤功能.结论 ATRA促进基因免疫诱生的TH2免疫应答,抑制TH1型免疫应答,为改变基因免疫诱生的特异性免疫应答类型提供了一条新的途径.
关键词： 全反式维甲酸(ATRA) 基因疫苗 Th细胞 -
TH细胞在记忆性CTL介导的肿瘤抑制中的作用研究
目的观察记忆性CTL的抑瘤作用是否需要抗原特异性TH细胞的辅助. 方法表达OVA T 细胞表位SIINFEKL特异性TCR的T细胞转输RAG-/-小鼠,经相应T细胞表位多肽刺激后产生记忆性CTL,将此记忆性CTL转输已产生特异性和非特异性TH细胞的C57BL/6小鼠体内并接种肿瘤细胞EG7. 结果经T细胞表位多肽免疫后,SIINFEKL特异性TCR T细胞成功在RAG-/-小鼠体内增殖并分化为记忆性CTL;抗原特异性TH细胞可辅助产生较多效应性CTL但并没有完全的肿瘤抑制作用;记忆性CTL的完全抑瘤活性需要抗原特异性TH细胞的辅助. 结论机体对肿瘤的长期完全杀伤作用不但需要肿瘤特异性抗原诱导产生的记忆性CTL,而且需要特异性TH细胞的辅助,肿瘤疫苗的设计必须包括特异性的CTL表位多肽和辅助性TH细胞多肽.
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γ干扰素在支气管哮喘中的免疫学作用
γ干扰素(IFN-γ)是Th1型细胞因子,在支气管哮喘(简称哮喘)的Th1/Th2失衡的机制中具有重要的复杂的多样化作用.尽管研究发现IFN-γ在哮喘发病中的作用存在一些矛盾现象,但对这种细胞因子在急性重症哮喘和慢性稳定型哮喘中的重要作用的认识是一致的.它可以通过多种途径在哮喘的发病中产生作用,包括:IL-17F-IP-10信号通路、转录因子T-bet和GATA-3、NO途径和调节嗜酸粒细胞等.近年来有关IFN-γ在哮喘发病机制中的作用研究很多.本文就IFN-γ在哮喘发病机制中的作用进行简要综述.
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苦参素联合甘草酸苷对湿疹患者辅助性T细胞免疫功能的影响
目的 探讨苦参素联合甘草酸苷对湿疹患者辅助性T细胞免疫功能的影响.方法 160例湿疹患者随机分为两组,对照组单纯给予复方甘草酸苷注射液100mg,治疗组在对照组的基础上加用苦参素注射液100mL.观察治疗前后两组的EASI评分、瘙痒评分、临床疗效、Th细胞、白介素(IL)因子、IgE和嗜酸粒细胞(EOS)的变化.结果 两组的有效率分别为95.0%和83.3%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).治疗后两组的EASI评分、瘙痒评分、Th1、Th2、IL-5、IL-10、IgE和EOS计数都有明显降低,Th1/Th2和IL-2有明显上升,治疗前后比较差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 苦参素联合甘草酸苷注射液能明显改善湿疹患者的Th细胞免疫功能,临床疗效显著,值得临床应用.
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Th细胞及其相关因子参与干眼发病机制的研究进展
干眼是眼表免疫稳态失衡所致的炎症性疾病.由泪膜、角结膜上皮、睑板腺、泪腺以及联络它们的神经通路共同组成的泪腺功能单位(lacrimal functional unit,LFU)是维持眼表生理稳态的完整系统,任何影响这一系统的因素都可以干扰眼表免疫平衡机制引发炎症反应,并终导致干眼的发生.研究发现,Th细胞及其相关因子在干眼炎症过程中发挥了重要作用,影响Th细胞分化或Th细胞相关因子的异常表达可以控制眼表炎症反应,有助于恢复眼表免疫稳态,有效抑制干眼病理改变和缓解临床症状.
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关键词：
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当归多糖组分AP-3诱生小鼠脾细胞IL-2和IFN-γ的作用
目的研究当归多糖组分AP-3对细胞因子IL-2和IFN-γ的诱生作用,以探讨其免疫调节的特点.方法流式细胞术测定培养的脾细胞中CD4+细胞比例;酶联免疫法测定培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度;RT-PCR法测定IL-2和IFN-γ mRNA的转录水平.结果 AP-3在0.6～2 μmol·L-1,能显著提高培养脾细胞CD4+细胞的百分率;在2～6 μmol·L-1,AP-3时间、剂量依赖性地增加培养的细胞上清液中IL-2的浓度和细胞内IL-2 mRNA的转录水平,而对于IFN-γ和IFN-γmRNA,则先升高后降低,并呈现剂量依赖性.结论当归多糖能够促进IL-2和IFN-γ的分泌,激活Thl细胞,从而发挥免疫调节作用.
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来氟米特对类风湿关节炎患者外周血Thl/Tcl细胞的影响
目的:探讨来氟米特对类风湿关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞亚群的影响.方法:采用细胞内细胞因子染色、三色流式细胞分析法检测单个细胞分泌细胞因子的情况.收集25位RA患者和10例接受来氟米特治疗前及治疗3个月后的RA患者的外周血,对CD4+、CD8+细胞分泌IL-4和IFN的情况进行检测.结果:RA患者和健康对照组的外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞中,分泌IFN(的细胞群均比分泌IL-4的细胞群多,同健康对照组相比,RA患者外周血中Th1型细胞明显减少.产生IFN的Th1型、Tc1型细胞和产生IL-4的Th2型细胞在接受来氟米特治疗后明显减少,而Tc2型细胞则无明显增加或减少.结论:来氟米特可能通过抑制Th1型和Tc1型的分化、减少Th1/Tc1型细胞因子如IFN(的分泌而发挥抗炎及改变类风湿关节炎病程的作用.
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结核病人外周血T 辅助细胞含量分析
目的 分析结核病患者Th 细胞含量变化与结核分枝杆菌感染的关系.方法 抽取肺结核患者、肺外结核患者、肺癌患者和健康人2ml 肝素钠抗凝静脉血,按说明书进行胞内和膜表面分子染色,染色的细胞经流式细胞仪分析分泌IL-17、IFN-γ、IL-4 阳性的T 细胞和CTLA-4、PD-1 阳性的T 细胞.结果 肺结核、肺外结核和肺癌组Th17 细胞含量高于健康组、Th2 细胞含量低于健康组、Th1 细胞含量呈下降趋势,但与健康组比较差异无统计学意义.因此,肺结核、肺外结核组Th1 细胞含量与Th17 细胞含量比值及Th2 细胞含量与Th17 细胞含量比值低于健康组.肺外结核组CTLA-4 阳性的CD3+ T 细胞(CTLA-4+ CD3+ T 含量) 含量高于肺结核组、肺癌组和健康组,肺结核和肺癌组PD-1 阳性的CD4+ T 细胞(PD-1+CD4+ T 细胞) 含量高于健康组.肺结核组,CTLA-4+ CD3+ T 含量与Th1 细胞含量呈负相关(r=-0.48,P=0.014) ;肺外结核组,PD-1+ CD4+ T 细胞含量与Th17 细胞含量呈正相关(r=0.68,P=0.015).结论 活动性结核病患者Th17 细胞含量升高.
关键词： 结核 分枝杆菌 Th细胞 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 细胞程序性死亡受体1 -
CD28在实验性变态反应性脑脊髓炎发病机制中作用的研究
本文通过临床试验研究了CD28在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)免疫发病机制中的可能作用,为脑脊髓炎的临床研究与治疗提供了宝贵的科学依据和理论指导.
关键词： CD28 实验性变态反应性脑脊髓炎 Th细胞 -
初治肺结核患者T淋巴细胞亚群和Th细胞的变化及与预后的关系
目的：探讨初治肺结核患者T淋巴细胞亚群和Th细胞的变化及与预后的关系。方法选取2011年1月~2013年6月在本院结核科门诊治疗的肺结核患者60例为肺结核组，按初治疗效进一步将肺结核组分为好转组与未好转组，选取健康未患肺结核30例为对照组。测定外周血T细胞亚群、Th细胞及IFN-γ、IL-4。结果治疗前，未好转组CD4+、CD4+/CD8+、Th1/Th2、Th1表达较对照组与好转组显著降低，Th2表达较对照组与好转组显著升高(P<0.05)；治疗前，好转组CD4+、Th1/Th2、Th1表达较对照组低，Th2表达较对照组高(P<0.05)；治疗后，好转组CD4+、CD4+/CD8+、Th1/Th2、Th1显著高于未好转组及治疗前，Th2显著低于未好转组及治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；与治疗前比较，未好转组治疗后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、Th1/Th2、Th1、Th2差异无统计学意义(P>0.05)。结论初治肺结核患者 CD4+、CD4+/CD8+、Th1/Th2、Th1较正常人降低，Th2较正常人升高；肺结核治疗初期，CD4+、CD4+/CD8+、Th1/Th2、Th1偏高，Th2偏低的患者预后较好；治疗有效后CD4+、CD4+/CD8+、Th1/Th2、Th1升高，Th2下降。
