二(噁)英对大鼠骨骼发育的抗雌激素作用

目的 研究环境类致畸因子的拮抗雌激素的致畸作用.方法 应用不同剂量二(噁)英(TCDD)构建先天SD大鼠骨骼发育畸形动物模型,茜素红染色法制作并观察透明骨骼标本,采用光镜观察胎鼠趾骨骨化中心的软骨细胞病理学变化,放射免疫法测定母鼠血清雌二醇的变化规律.结果 TCDD在5～15μg/kg浓度下诱导了大鼠骨骼发育畸形,并存在剂量依赖性生物学效应.光镜下在畸形胎鼠的趾骨骨化中心可见软骨发生带缩小,软骨细胞变性,肥大软骨细胞数量明显减少;TCDD实验组的母鼠血清雌二醇含量明显高于正常对照组(P＜0.05).结论 TCDD可能通过降低雌激素生物活性和干扰软骨细胞的代谢,引起大鼠肢端骨化中心的结构紊乱而发挥骨骼致畸效应.

热化联合对肺癌A549细胞生长、c-Jun N-末端激酶磷酸化及热休克蛋白70表达的影响

目的 研究热化联合对肺部肿瘤生长的影响及其可能的机制.方法 采用临床常用剂量(43℃加热联合50μg/L紫杉醇),通过单纯化疗、单纯热疗及热化联合的方法处理肺癌A549细胞,以未处理的A549细胞作对照,应用噻唑蓝比色法检测各处理方式下细胞增殖率的变化,进行损伤修复实验观察比较各组细胞的侵袭力,并通过蛋白免疫印记法检测JNK磷酸化和热休克蛋白70(HSPTO)的表达.结果 热化联合组细胞增殖率低于单纯化疗、单纯热疗及热化联合加JNK抑制荆SP600125组(P＜0.05),而热化联合加SP600125组的细胞增殖率与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);热化联合组的细胞侵袭力较其他组有所减弱;热化联合组JNK磷酸化的水平高于对照组及单纯化疗组(P＜0.05);HSP70在热化联合组的表达低于单纯热疗组(P＜0.05).结论 热化联合对肺癌A549细胞生长增殖的抑制作用强于单纯热疗和单纯化疗,这种抑制作用可能是通过激活JNK信号通路或抑制HSP70的表达完成的.

PCB153对PBDE-47致SH-SY5Y细胞DNA损伤和修复基因表达的影响

目的 探讨PCB153和PBDE-47单独及联合染毒对SH-SY5Y细胞DNA损伤及其修复基因表达的影响.方法 设DMSO溶剂对照组,1、5、10μmol/L PBDE-47(低、中、高)单独染毒组和与5μmol/L PCB153联合染毒组及相应的抗氧化剂组(N-乙酰-L-半胱氨酸NAC 100μmol/L),分别对SH-SY5Y细胞染毒24h.用单细胞凝胶电泳试验测定DNA损伤情况,用Real Time PCR检测DNA损伤修复酶XRCCI及XRCC3 mRNA表达情况.结果 中、高剂量单独染毒组和中、高剂量联合染毒组细胞尾部DNA百分率、Olive尾距均显著高于对照组(P＜0.05),且呈现明显的剂量.效应关系,中、高联合染毒组细胞尾部DNA百分率、Olive尾距均显著高于相应的PBDE-47或PCB153单独染毒组(P＜0.05),加入抗氧化剂后其细胞尾部DNA百分率及Olive尾距均明显下降(P＜0.05),高剂量联合组对细胞DNA损伤具有交互作用(F=23.74,P＜0.01);高剂量染毒组及中、高剂量联合染毒组XRCC1 mRNA表达与对照组相比均明显下降(P＜0.05),加入抗氧化剂后其XRCCI mRNA表达上升(P＜0.05);高剂量单独和联合染毒组XRCC3 mRNA表达与对照组相比均明显上升(P＜0.05),加入抗氧化剂后可使XRCC3 mRNA表达明显下降(P＜0.05).相关分析结果表明,细胞DNA损伤与XRCC1mRNA的表达呈负相关,与XRCC3 mRNA的表达呈正相关(r分别为0.74,0.76,P＜0.05).结论 一定剂量的PBDE-47可导致DNA损伤和影响DNA损伤修复基因的表达,PCB153可增强PBDE-47对细胞DNA的损伤作用,氧化应激可能在PBDE-47致DNA损伤过程中发挥了重要作用.

电子垃圾污染对产妇及新生儿甲状腺激素水平及受体表达的影响

目的 探讨电子垃圾拆解区产妇及新生儿甲状腺激素及受体表达水平的变化.方法 于2005年12月至2006年7月在中国南方有十余年历史的电子垃圾拆解区(暴露组)及距该地区约50km、地理条件和生活习惯相近的市区妇幼保健院(对照组),分别随机选取当地产妇48名和45名.采用放射免疫分析法检测血清甲状腺激素,包括游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、促甲状腺激素(TSH);采用实时荧光定量PCR测定胎盘组织和脐带组织中甲状腺激素受体(TR)α1、TRβ1和TSHR mRNA的表达水平;并确定母儿间甲状腺激素水平的相关性及胎盘组织与脐带组织中相应激素受体mRNA表达水平的相关性.结果 (1)暴露组母体血清和脐血清中FT4均低于对照组(P＜0.05),但TSH水平高于对照组(P＜0.05).(2)暴露组胎盘组织和脐带组织中TRα1、TRβ1 mRNA水平低于对照组(P＜0.05和0.01),但TSHR mRNA水平高于对照组(P＜0.01).(3)两组母血与脐血FT4、TSH均呈正相关(P＜0.05和0.01).(4)两组胎盘组织与脐带组织中TRα1、TRβ1和aSHR mRNA表达均呈正相关(P＜0.01).结论 电子垃圾处理环境暴露可能对产妇及新生儿甲状腺激素水平及受体表达有影响.

氢醌诱导下肝细胞XPV基因mRNA表达规律的研究

目的 研究氢醌(HQ)对L-02肝细胞XPV基因mRNA表达的影响及其规律,探讨XPV基因在HQ所致肝细胞毒性过程中分子作用机制.方法 体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导后,采用实时荧光定量PCR法检测不同时间点(6、12、24和48h)XPV基因mRNA的表达;并检测不同剂量(0、5、10、20、40、80和160tmaol/L)HQ诱导24h后,各浓度组XPV基因mRNA的表达.结果 在24h的时间范围内,XPV基因在mRNA水平上的表达无论是染毒组(40μmol/L)还是正常对照组,均具有随时间的延长而增加的趋势;到24h时,相对表达量达到大值,当培养时间达到48h时,该基因的表达则有所下降;此外,在各时间处理组(6h、12h、24h和48h)中,染毒组L-02肝细胞内XPV基因在mRNA水平上的表达均高于正常对照组.各剂量HQ作用24h后,L-02肝细胞内XPV基因mRNA的表达在0～80μmol/L范围内随着剂量的增加而增加,以正常对照组XPV基因的相对表达量为1,各染毒剂量组内XPV基因mRNA的相对表达量分别增至1.20、2.02、2.37、2.67、4.40和2.32倍;80μmol/L时其相对表达量达到峰值,160μmol/L的HQ作用后,其表达却有所下降,但仍高于正常对照组.结论 HQ可以诱导XPV基因mRNA的表达变化,并且呈现一定的时间和剂量依赖性,提示XPV基因可能参与了肝细胞对HQ的应答过程.

肺癌组织中CTGF和WISP-1基因表达的研究

目的 研究肺癌中CTGF和WISP-1基因表达与临床病理因素的关系.方法 采用RT-PCR和免疫组化染色法对60名肺癌患者的癌组织和癌旁正常肺组织中CTGF和WISP-1表达水平进行测定.结果 65%(39/60)的肺癌组织CTGF基因表达水平低于癌旁正常肺组织(t=-1.59,P=0.016);83%(50/60)的肺癌组织WISP-1基因表达水平高于癌旁正常肺组织(t=4.15,P=0.000),此结果得到免疫组化的证实.Pearson相关分析:WISP-1和CTGF基因的表达呈显著负相关(r=-0.299;P=0.020).多元线性回归分析:肿瘤位置和性别对癌组织CTGF基因表达有重要影响;病理类型、年龄和家族史对WISP-1基因表达有影响.结论 CTGF和WISP-1基因中单个基因或两个基因相互作用对肺癌的进展均起重要作用及其与临床病理因素的关系.

铜绿的亚慢性健康效应研究

目的 探讨长期经口暴露铜绿对大鼠健康的影响及其可能的作用机制.方法 选用80只SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分为4组,铜绿染毒剂量分别为0、7.3、24.4和73.2mg/kg.每周大鼠经口灌胃染毒6天,第7天称重,连续13周,记录动物的外观体征、行为活动等.13周末处死动物,观察大鼠血清生化指标和尿液指标;取脑、心、肝、肾、胃和脾等脏器称重并对脏器进行病理学检查,同时测定组织匀浆中的丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果 大鼠的行为活动、摄食饮水、粪便尿液、组织超微结构正常,动物体重增加.与对照组比较,低剂量组雄性大鼠体重显著增加(P＜0.05);高剂量组大鼠血清乳酸脱氢酶活性较对照组显著降低(P＜0.05);实验组大鼠肝脏、脑、心脏SOD活力增加,心脏GSH-Px活性增强,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);中、高剂量组大鼠胃SOD、GSH-Px活性显著降低,MDA含量显著增高(P＜0.05).结论 在一定的暴露剂量下,铜绿可明显增加大鼠体重,提高大鼠肝、心和脑的抗氧化酶的活性,但是过量的铜绿会对胃组织产生一定的氧化损伤.

侧脑室注射苯并(a)芘对大鼠学习记忆功能和单胺类神经递质的影响

目的 探讨苯并(a)芘对大鼠学习记忆功能和单胺类神经递质的影响.方法 健康雄性SD大鼠40只,经麻醉后于立体定向仪上固定鼠头,于前卤十字缝交点后1.3～1.5mm、左或右1.5mm处定位插管.一周后称重,按体重将动物随机分为4组:橄榄油组(溶剂对照组)、B(a)P2.5mmol/L组、B(a)P 5mmol/L组、B(a)P 10mmol/L组.每组8只,麻醉后定位,应用微量注射器通过插管分别向高、中、低浓度组缓慢注入B(a)P溶液10μl,溶剂对照组橄榄油10μl,缝皮.每周给药一次,连续给药3周.跳台试验和水迷宫实验评价染毒大鼠学习记忆功能;高效液相色谱法分别测定海马中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量.结果 跳台试验结果显示,随染毒剂量的增加,大鼠步下平台的潜伏期缩短,中、高剂量组次数增多,有明显的剂量一反应关系.Morris水迷宫试验结果显示,随染毒剂量的增加,各组大鼠平均潜伏期延长,中、高剂量组在原平台停留时间缩短,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01),各荆量组问平均潜伏期比较差异无显著性,而在原平台象限停留时间高剂量组与低剂量组间有差异(P＜0.05).大鼠海马5-HT含量明显增高,各剂量组与对照组比较,P＜0.01,呈剂量-反应关系,而DA、5-HIAA含量各组未见明显变化.结论 苯并(a)芘降低大鼠学习记忆功能可能与海马5-HT含量升高有关.

表皮生长因子受体及PI3K在硫酸锌诱导人呼吸道上皮细胞间粘附分子-1表达过程中的作用

目的 探讨硫酸锌对上皮细胞内细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响及其分子生物学机制.方法 应用PCR与蛋白质免疫印迹试验检测硫酸锌诱导人呼吸道上皮细胞ICAM-1mRNA与蛋白的表达,以及表皮生长因子受体(EGFR)及PDK的活化.结果 硫酸锌可诱导ICAM-1 mRNA与蛋白的过量表达.在同一试验条件下,硫酸锌可诱发EGFR及磷脂酰肌醇3激酶(P13K)下游激酶Akt的磷酸化或活化.用EGFR抑制剂(PD153035)及PDK抑制剂(LY294002)预处理上皮细胞,可明显抑制硫酸锌对ICAM-1表达的诱导作用.结论 硫酸锌可激活EGFR与PDK/Akt信号传导通路,进而上调ICAM-1的表达.

C2-神经酰胺所致HT-29细胞凋亡中线粒体的变化

目的 探讨外源性C2-神经酰胺所致HT-29细胞凋亡中线粒体的变化.方法 C2-神经酰胺作用人结肠癌HT-29细胞,采用透射电镜观察细胞线粒体超微结构的变化;采用Mitochondrial Apoptosis Detection Kit和流式细胞仪检测细胞凋亡时线粒体损伤及其膜电位的变化.结果 C2-神经酰胺作用HT-29细胞24h,线粒体发生空泡化、变性、嵴肿胀或消失等形态学改变;此时荧光显微镜下可观察到线粒体聚集,发出红色荧光,而正常细胞线粒体发出绿色荧光.C2-神经酰胺作用细胞6h,线粒体膜电位即开始降低,呈时间-剂量-效应关系;结论线粒体参与C2-神经酰胺诱导HT-29细胞凋亡作用.

6种多糖对小鼠免疫细胞活性作用的比较研究

目的 探讨香菇多糖等6种多糖(LPS)对小鼠免疫细胞活性的作用,并比较其免疫调节作用的逢径和强度.方法 6种多糖体外作用于小鼠免疫细胞,MTT法测脾淋巴细胞增殖活性,ELISA法测LPS诱导的脾淋巴细胞分泌IgG水平,吞噬中性红法测腹腔巨噬细胞吞噬功能,乳酸脱氢酶测定法测脾NK细胞活性.结果 协同ConA促进脾淋巴细胞增殖作用强弱依次是香菇多糖、灵芝多糖、黄芪多糖、人参多糖、海带多糖和地衣多糖(P＜0.05);协同LPS促进脾淋巴细胞增殖作用依次是灵芝多糖、香菇多糖、地衣多糖、黄芪多糖和人参多糖(P＜0.05);促进脾淋巴细胞分泌IgG的依次是黄芪多糖、灵芝多糖、人参多糖、地衣多糖和＞香菇多糖(P＜0.05);增强腹腔巨噬细胞吞噬活性的依次是黄芪多糖、地衣多糖、香菇多糖、海带多糖、灵芝多糖和人参多糖(P＜0.05);增强脾NK细胞活性的依次是黄芪多糖、地衣多糖、海带多糖、香菇多糖和灵芝多糖(P＜0.05).结论 6种多糖作用的机制和效果各不相同.香菇多糖、灵芝多糖、地衣多糖和黄芪多耱分别在增强细胞免疫、体液免疫和非特异免疫的某一功能上效果显著,可以适宜的剂量比例组合成复合多糖.

重庆市主城区长江和嘉陵江水中有机污染物对H4IIE细胞CYP1A1表达的诱导

目的 以重庆市主城区大溪沟(嘉陵江)和寸滩(长江)两个点为代表,研究2004～2005年度重庆市水源水中有机污染物对H4IIE细胞细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的诱导.方法 固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用逆转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增CYP1A1 mRNA,比较不同水样诱导H4IIE细胞CYP1A1mRNA表达的差异,用电泳迁移率实验(EMSA)检测CYP1A1启动子的激活情况.结果 CYP1A1引物则可以将4个水样12h和24h处理组细胞的cDNA扩增出条带,48h处理组只有2005年1月寸滩样和2005年1月大溪沟样处理的细胞能扩增出CYP1A1基因的条带,所有样品的72h处理组细胞都没有CYP1A1基因的扩增;4个水样处理H4IIE细胞24h后,均可在细胞核内形成可与标记的XRE探针结合的芳烃受体-芳烃受体核转移蛋白(AHR-ARNT)二聚体,从而在AHR-ARNT二聚体蛋白处呈现发光条带.结论 各水样均可激活CYP1A1基因的启动子XRE,也均可诱导H4IIE细胞CYP1A1 mRNA的表迭,CYP1A1 mRNA的表达量随处理时间的差异有所不同.

水体富营养化状况的人工神经网络预测模型的建立

目的 建立郑州市主要生活饮用水源富营养化预测模型.方法 以郑州市主要生活饮用水源西流湖和黄河花园口段某调蓄池作为研究现场,监测富营养化相关理化指标水温(WT)、透明度(SD)、总磷(TP)、总氮(TN)、光照度(Li)、高锰酸盐指数(CODMn)、叶绿素a(Chla);采用评分法和综合营养状态指数法对水体富营养化状况进行评价;运用标准化函数对各理化因子原始监测数据进行归一化处理后,构建BP人工神经网络富营养化预测模型;并采用改进的Levenberg-Marquat算法对网络进行优化.结果 两水源富营养化状况评价结果显示:西流湖和黄河花园口段某调蓄池水体均为富营养化状态,西流湖随着春、夏、秋季节的变化,富营养化状况逐步加剧;应用BP神经网络技术,根据J=√n+m+a函数计算隐层数,将隐层节点数范围定位2～15,分别进行训练,终确定网络节点数为10;根据郑州市主要生活饮用水源环境理化指标检测数据,建立了水体富营养化相关因子Chla预测模型,重要的6个富营养化理化因子全部纳入模型进行分析,网络训练过程均方差为1e-11,实测值与预测值模型拟合相关系数为0.871,与预期目标比较接近,成功构建了郑州市主要生活饮用水源富营养化人工神经网络预测模型.结论 人工神经网络技术能够运用于水体富营养化预警系统的研究,所建立预测模型更符合实际情况.

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肝细胞生长因子和转化生长因子β1的调控

目的 动态观察黄芪(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾小管间质纤维化大鼠肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法 54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和模型+黄芪治疗组.在造模后第3、7和14天处死动物,观察肾脏病理改变.采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1、HGF表达.用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠HGF mRNA和TGF-β1 mRNA表达量.用Western blot检测大鼠HGF和TGF-β1蛋白表达量.结果 与假手术组相比,各时间点的模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重,黄芪治疗后可明显减轻模型组大鼠的肾小管损伤及肾间质纤维化程度(P＜0.05).随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾组织TGF-β1袁达逐渐增加;HGF表达呈现先升高后下降的表达规律,在UUO术后第7天达高峰,此后大幅回落;与模型组各对应时间点比较,黄芪治疗后可使肾组织中的HGF表达显著增高,TGF-β1表达明显降低(P＜0.05).结论 黄芪可能通过诱导HGF表达上调及抑制TGF-β1表达,减轻肾间质纤维化.

尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株papA基因的克隆和序列分析

目的 比较尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株papA与相关序列的差异,明确是否为未知的基因型.方法 采用PCR扩增、基因克隆与测序分析方法,分别对UPEC4030株papA进行基因与氨基酸序列分析,并与相关序列进行比较.结果 UPEC4030 papA由722个碱基对组成,编码192个氨基酸的多肽.与10个基因型UPECpapA核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较,结果分别为36.11%～77.95%和22.20%～78.34%;与papA基因分型多重PCR引物序列比较,下游分型引物在UPEC4030papA相应位置上的序列同源性只有10%～66.67%,推测该菌株papA为未知的基因型.结论 UPEC4030 papA为未知的基因型,相关致病机制和流行病学意义值得深入研究.

肥胖儿童血清中三种PAEs的检测和分析

目的 了解10-12岁肥胖儿童血清中3种邻苯二甲酸酯类(PAEs)--邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)的含量.评估三种PAEs对肥胖儿童可能产生的危害.方法 运用反相高效液相色谱分析法(HPLc)测定10～12岁肥胖儿童36名和正常体重儿童36名血清中三种PAEs含量,对两人群三种PAEs测定值(mg/L)作对比分析及性别差异分析.结果 肥胖儿童血清中三种PAEs的中位数(mg/L)分别为0.0032(DEP)、0.1649(DBP)和0.1680(DEHP);正常体重儿童血清中三种PAEs的中位数(mg/L)分别为0.0026(DEe)、0.0359(DBP)和0.1063(DEHP);经Wilcoxon两样本检验,Z值分别为1.1013、5.5584和3.0128,P值分别为0.2708、＜0.0001和0.0026,肥胖儿童与正常体重儿童血清中DBP和DEHP的含量差异有统计学意义,而DEP含量差异无统计学意义.两组儿童的含量构成比经X2检验,X2值分别为18.57、34.5956和10.9193,P值分别＜0.0001、＜0.0001和0.0043,肥胖儿童与正常体重儿童血清中DEP、DBP和DEHP的含量构成比均有统计学意义.结论 肥胖儿童DBP、DEHP的含量平均水平显著高于正常体重儿童,且肥胖儿童在含量较高水平上的人数多于正常体重儿童.

汽油尾气诱导的细胞毒性效应涉及氧化应激

目的 探讨氧化应激在汽油尾气三相有机提取物(EGE)细胞毒效应中的作用.方法 采用MTT比色试验检测汽油尾气对A549细胞的细胞毒性效应,同时用2',7'-二氯双氢荧光素双乙酸酯法测定汽油尾气对细胞活性氧(ROS)生成的影响;此外,用不同浓度谷胱甘肽(GSH)预处理细胞2h后再观察汽油尾气细胞毒性效应的变化.结果 当EGE浓度＞3.9ml/ml时,细胞存活率均显著降低(P＜0.05).并且具有良好的剂量一反应关系(r=-0.81,P＜0.01).当汽油尾气浓度为31.3ml/ml和62.3ml/ml时,A549细胞单位面积的荧光强度分别为(125.0±19.2)和(168.9±16.9),与对照组(8.5±1.4)比,细胞单位面积荧光强度显著增加(P＜0.05).采用0.5和1.0 mmol/L谷胱甘肽预处理细胞后,处理组细胞存活率显著高于未处理的对照组(P＜0.05).结论 氧化应激可能是汽油尾气细胞毒性的毒作用机制之一.

锌、铁、锰饱和乳铁蛋白体外抑制乙型肝炎病毒DNA的研究

目的 探讨锌、铁、锰饱和乳铁蛋白体外抑制乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)作用.方法 以天然HBV感染HeDG2细胞为模型,通过应用荧光定量PCR法测定细胞中HBV-DNA水平来检测锌、铁、锰饱和乳铁蛋白抑制HBV效果,并应用四甲基偶氛唑盐比色法(MTT)进行锌、铁、锰饱和乳铁蛋白对HepG2细胞的毒性研究.结果 锌、铁、锰饱和乳铁蛋白对细胞的大无毒剂量(TD0)分别为1.5、3.0和1.5g/L;用HBV感染HepG2细胞,分别加入锌、铁、锰饱和乳铁蛋白,各实验组对HBV-DNA均有显著抑制作用,浓度为1.5g/L的锌、铁、锰饱和乳铁蛋白抗HBV-DNA结果经对数转换后分别为:(5.746±0.114)、(6.446±0.103)和(5.999±0.725).结论 当HepG2细胞感染乙肝病毒后,锌、铁、锰饱和乳铁蛋白可以显著抑制HBV-DNA,抑制作用强弱依次为:锌饱和乳铁蛋白＞锰饱和乳铁蛋白＞铁饱和乳铁蛋白.

纳米硒对大鼠急性胃粘膜损伤的保护作用

目的 研究不同剂量纳米硒对大鼠急性胃粘膜损伤是否有保护作用.方法 将50只健康Wister大鼠随机分为5组:正常对照组、模型对照组、纳米硒低、中、高剂量组,舍纳米硒剂量分别为4.17、8.33和16.67μg/ks,用无水乙醇诱导大鼠急性胃粘膜损伤(AGML),然后进行胃粘膜组织病理学检查,分别测定各组大鼠胃粘膜损伤指数(UI)、血清谷胱甘肤过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量.结果 与模型对照组比较,纳米硒各剂量组的损伤指数显著降低(P＜0.01),且呈剂量依赖性,血清中GSH-Px活性显著升高(P＜0.01),MDA含量下降(P＜0.05,P＜0.01),粘膜损伤程度明显减轻.结论 纳米硒对无水乙醇诱导的急性胃黏膜损伤有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关.

牛初乳蛋白对大鼠股骨密度的影响研究

目的 探讨牛初乳蛋白对去卵巢大鼠骨密度等指标的影响.方法 将60只清洁级雌性SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢对照组和喂食牛初乳蛋白的去卵巢低、中、高剂量共5组,其中3个剂量组每天分别给予牛初乳蛋白0.20、1.00和2.00g/kg bw连续灌胃12周.检测体重、股骨长度、股骨重量,股骨近心端、中段和远心端骨密度的变化.结果 喂食牛初乳蛋白的各剂量组骨密度、股骨重,骨长、股骨重,体重均显著高于模型对照组.结论 每天给予0.20mg/kg bw牛初乳蛋白能显著增加去势大鼠股骨近心端、中段和远心端的骨密度.

体外羟自由基测定条件的优化与应用

目的 确定分光光度法体外羟自由基测定的优化条件与实际应用的意义,为羟自由基的体外检测与抗氧化剂的筛选提供检测方法.方法 采用经典的硫酸亚铁(FeSO4)与过氧化氢(H2O2)Fenton反应,以二甲亚砜(DMSO)为羟自由基捕捉剂,对原有的实验方法作了改进;通过试验确定该检测体系的主要影响因素以及适宜的范围.结果 测定条件达大吸收峰,37℃水浴10min、10mmol/L HC1、3.6mmol/L硫酸亚铁、24mmol/L过氧化氢和60mmol/LDMSO,得到了较为合理的实验方案.结论 通过剂量-反应关系、稳定性、重复性和与已知的羟自由基清除剂作用的研究证明该方法具有可行性.

沙门菌基因间共有重复序列-PCR分子分型方法的优化及应用初探

目的 优化沙门菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)分子分型方法,分析沙门菌标准菌株及流行分离株基因组DNA ERIC-PCR指纹图谱.方法 提取鼠伤寒沙门菌基因组DNA作为模板,根据ERIC核心片段设计引物,运用ERIC-PCR技术扩增沙门菌基因组中的靶序列,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后用凝胶成像分析仪对图谱进行观察分析.反应体系中模板量、Mg2+浓度、引物浓度和退火温度的优化实验则采用对优化项目设置梯度、其它条件不变的方法进行.以优化好的ERIC-PCR方法对16株沙门菌及1株大肠杆菌进行分析.结果 在总体积为25μl的反应体系中,选择DNA模板量为lOOng/25μl,Mg2浓度为2.0mmol/L,引物ERIC1R、ERIC2浓度分别为0.4tμmol/L,退火温度为52℃时,扩增产物的电泳图谱条带清晰完整.不同血清群、型和来源的沙门菌株间基因组DNA ERIC-PCR指纹图谱带型差异较大,可在250～5000bp范围内出现3～13条条带,并在250bp处出现一条特征条带.结论 优化了沙门菌ERIC-PCR的重要反应条件.ERIC-PCR法能区分不同来源的沙门菌,可用于沙门菌病的流行病学调查和同源性追踪,弥补传统分型方法的不足.

丙烯酰胺对小鼠脏器细胞DNA损伤及修复作用

目的 研究丙烯酰胺的遗传毒性,探测其遗传毒性的靶器官.方法 应用彗星试验检测50mg/kg丙烯酰胺腹腔注射染毒0、3、6、12和24h后小鼠肺、肝、脾、肾、睾丸、骨髓和外周血淋巴细胞的DNA损伤情况.结果 丙烯酰胺染毒后不同时间,可引起小鼠肝、脾、睾丸、骨髓和外周血淋巴细胞彗星尾长、尾部DNA百分含量及尾矩的显著增加,随时问延长有下降趋势;未观察到对肺和肾脏细胞的明显影响.结论 丙烯酰胺可以诱导小鼠多种组织细胞的DNA损伤,机体对丙烯酰胺造成的遗传损伤有一定的修复能力.

三种食源性致病菌多重PCR检测技术建立及应用研究

目的 建立多重PCR方法同时检测水产品中沙门菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生性李斯特菌.方法 分别以沙门菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和单核细胞增生性李斯特菌iap基因为靶基因,建立并优化了同时检测水产品中这3种致病菌的多重PCR体系,扩增产物分别为495bp(invA)、368 bp(toxR)和660 bp(iap).结果 建立的多重PCR方法可以简便、快速、灵敏地实现水产品中沙门菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生性李斯特菌的同时检测,人工污染水产品检测限为10cfu/ml.结论 为无公害水产品食源性致病菌的快速检测提供了理想手段,有良好的应用前景.

阿特拉津对小鼠淋巴细胞钙离子浓度和钙调蛋白表达的影响

目的 研究阿特拉津对小鼠脾脏淋巴细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)及钙调蛋白(CaM)表达水平的影响.方法 选用BALB/c小鼠分别以100、200和400mg/kg剂量的阿特拉津灌胃染毒,3周后处死,采用原子吸收光谱法测定血清中[Ca2+]i;脾淋巴细胞与荧光探针Fura-2/AM孵育后,用荧光分光光度法检测细胞内[Ca2+]i,蛋白印迹法观察细胞内CaM表达水平.结果 各剂量组血清中[Ca2+]i无显著变化;中、高荆量纽淋巴细胞内游离钙离子浓度显著高于阴性对照组(P＜0.01);中、高剂量组细胞内CaM的表达均显著低于阴性对照组(P＜0.01).结论 阿特拉津可致小鼠淋巴细胞内钙离子浓度升高,抑制其CaM的表达.

反相高效液相色谱法同时测定食品中的苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸

目的 建立反相高效液相色谱法同时测定食品中的苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的方法.方法 食品中的脱氢乙酸、苯甲酸和山梨酸经前处理后,过0.45μm超滤膜,经高效液相色谱C18柱的分离,二极管阵列检测器(DAD)于230nm处检测,以保留时间定性,峰高或峰面积定量.样品经溶解超滤后用反相高效液相色谱仪测定.结果 该方法对苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的分离度好,脚分别为0.50%、0.46%和0.66%.回收率分别为104.8%、107.2%和96.9%,检出限分别为12、8和10ng.当样品量为5g,定容体积50ml,进样量30μl时,低检出浓度分别为0.004、0.003和0.003g/kg.色素、乙酰磺胺酸钾、糖精钠均不干扰其测定.结论 该方法精密度高、准确度好、选择性强,适用于食品中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的定性定量分析.

功夫菊酯半抗原的合成及结构表征

目的 为了建立功夫菊酯残留的酶联免疫分析方法,设计并合成了功夫菊酯的半抗原.方法 利用功夫菊酸和α-氰基-(3-苯氧基)苄醇通过酰化、水解、酯化多步反应合成了功夫菊酯的半抗原:2,2-二甲基-3-(2-氯-3,3,3-三氟-1-丙烯基)环丙烷羧酸-α-(N-丁酸基)-甲酰氨-3-苯氧基苄酯.结果 通过质谱和核磁鉴定了半抗原的结构,证明所合成的产物为目标产物.结论 合成的半抗原分子保留了功夫菊酯结构的主要特点,为进一步建立功夫菊酯的酶联免疫分析方法提供了研究基础.

龙胆抗病毒有效部位(RG2-1)体外抗呼吸道合胞病毒作用机制的初步研究

目的 研究龙胆抗病毒有效部位(RG2-1)体外抗呼吸道含胞病毒(RSV)的作用及其作用机制.方法 经水提醇沉得到RG2-1,MTY法检测细胞毒性,以利巴韦林为阳性对照药物,通过细胞病变效应(CPE)观察RG2-1对RSV感染细胞的封闭作用、直接灭活作用、对RSV在细胞内增殖的抑制作用以及预防作用,从而对其抗病毒机制进行初步研究.结果 RG2-1的半数中毒浓度(TC50)为11.07mg/ml,药物直接灭活作用、对RSV在细胞内增殖的抑制作用以及预防作用的半数有效浓度(EC50)分别为0.43、0.42和0.48mg/ml,治疗指数(TI)为25.75、26.36和23.06.结论 RG2-1在体外能明显抑制RSV引起的CPE效应,CPE抑制率随着药物浓度的增加而增高;RG2-1能通过多种途径发挥抗RSV的作用.

实时荧光定量PCR快速检测大肠埃希菌的方法研究

目的 基于TaqMan探针建立产肠毒素大肠埃希菌实时荧光定量PCR检测方法.方法 针对编码大肠埃希菌耐热肠毒素STI、不耐热性肠毒素LTI基因片段设计引物、探针,采用外标法,绘制标准曲线,进行荧光定量PCR检测.结果 引物、探针特异性良好,该方法的灵敏度可达到每反应1DNA拷贝,特异性强,检测范围在10°～107拷贝每反应,重复性及稳定性好,整个过程只需要2h.结论 该方法能快速、灵敏、特异检出产肠毒素大肠埃希菌.

豚鼠心肌缺血型慢性心力衰竭的实验研究

目的 探讨药物诱导豚鼠慢性充血性心力衰竭(CHF)动物模型的制作方法.方法 采用皮下注射异丙基肾上腺素(1次/天)建立豚鼠心肌缺血型CHF模型.6周后观察动物生活状态、病理学、血液动力学和脏器,体质量比的改变.结果 模型组动物皮毛杂乱无光泽、气喘和活动减少;心肌细胞可见程度不同的凝固性坏死和灶性肌溶解;左室舒张压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)均显著升高(P＜0.01);+dp/dtmax和-dp/dt max的绝对值均显著降低(P＜0.01);心、肺/肝/体比值显著增加(P＜0.01).结论 豚鼠皮下注射异丙基肾上腺素6周,可有效建立豚鼠心肌缺血型CHF模型.

抗性淀粉生理功能的研究进展

抗性淀粉是不被健康人体小肠所吸收的淀粉及其降解物,它在血糖、血脂以及肠道代谢中发挥了积极的健康促进作用.本文就近年来抗性淀粉生理功能的研究进展进行综述.

纳米颗粒吸入毒性研究进展

随着纳米技术的广泛应用,纳米材料的安全性问题也越来越多的受到人们的重视.本文从纳米颗粒的流行病学研究、毒理学研究等方面综述了目前关于纳米颗粒吸入毒性方面的研究进展,提出纳米材料呼吸毒理学研究存在的问题,为进一步开展吸入毒性研究提供了参考.

尿苷二磷酸葡萄糖转移酶基因多态性与肿瘤遗传易感性研究进展

尿苷二磷酸葡萄糖转移酶是生物体内重要的Ⅱ相代谢酶,它催化多种内源性和外源性化学物的代谢.根据基因结构、组织表达和底物特异性可将尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶分为肝外和肝内表达酶.研究表明尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因存在大量多态性位点,一些位点改变将影响酶的活性,进而影响酶对化学致癌物的代谢.因此,尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因多态性终影响机体发生肿瘤的危险性,如结肠癌、乳腺癌、肺癌、近端消化道肿瘤、肝癌和前列腺癌.本文就尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因多态性与肿瘤遗传易感性关系作一综述.

氯原酸调节糖脂代谢的研究进展

氯原酸是一种广泛存在于植物性食物和咖啡饮品中的酚酸.研究表明它具有多种有益人体健康的生物活性.近来它调节糖脂代谢、增强胰岛素敏感性的生物活性受到人们的关注,这为通过饮食防治肥胖、糖尿病等慢性疾病提供科学的依据.本文就氯原酸与糖脂代谢的研究进展及其机制进行综述.

2型糖尿病患者血清微量元素、血糖及体成分相关性分析

目的 了解糖尿病患者与正常人群血清微量元素含量的差异,并探讨微量元素与糖尿病患者血糖、人体成分测量指标之间的关系.方法 随机选取72名糖尿病患者作为病例组,64名健康体检者作为对照组.分别测量病例组和对照组的血清锌、硒、锰、镉、铁、铅、铜、镍、钴、锂、铬含量,铜锌比值,比较两组间差异,并与血糖及蛋白质含量、矿物质含量、脂肪含量、瘦体重、腰围、臀围等人体成分指标进行相关性分析.结果 2型糖尿病患者血清锌、硒、铬含量显著低于对照组(P＜0.05),血清铜含量则显著高于对照组(P＜0.05),其他元素差异没有显著性.血清锌与血糖呈微弱负相关,铜与血糖呈正相关(P＜0.01).铜与腰围呈微弱正相关(P＜0.01),锰与蛋白质含量、矿物质含量、臀围均呈微弱负相关(p＜0.05).结论 纠正2型糖尿病患者体内存在着的微量元素代谢紊乱,对于糖尿病的治疗及预防并发症有重要价值.

硫辛酸对高脂饲料小鼠氧化应激与糖、脂代谢基因表达的影响

目的 探讨硫辛酸(LA)对高脂饲料小鼠血糖、血脂代谢和抗氧化能力的影响.方法 24只C57BL/6雄性小鼠,随机分为3组:即对照组(正常饲料),高脂组(高脂饲料),LA组(高脂饲料+0.1%LA),6周后测定空腹血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)等糖脂代谢指标以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(TAC)等抗氧化指标,同时用Affymetrix MOE430A基因芯片分析肝脏抗氧化、糖脂代谢相关功能基因的表达.结果 与高脂组相比,LA组MDA含量显著降低,TAC明显升高(P＜0.05).LA显著降低血浆TG、TC、LDL-C和FPG、FINS的水平(P＜0.05),MDA含量与HDL-C/TC(r:-0.47,P＜0.05)和胰岛素抵抗指数(r=0.74,P＜0.05)显著相关.硫辛酸改变高脂组自由基/氧化应激、糖脂代谢相关通路大部分响应基因的表达水平.结论 高脂引发氧化-抗氧化系统失衡,硫辛酸通过直接清除自由基以及恢复自由基,氧化应激通路相关基因的表达水平解除氧化应激而有助于防治高脂引发的糖脂代谢紊乱.

胚胎干细胞实验模型在发育毒性评价中有效性的初步研究

目的 依据胚胎干细胞具有向心肌细胞分化的能力,建立体外分化发育毒性评价的模型,并对其判定受试物发育毒性强弱的有效性进行验证.方法 利用悬滴、悬浮培养方法,通过不同浓度青霉素G、苯妥英钠和氟尿嘧啶作用,检测胚胎干细胞分化为心肌细胞的能力,结合MTT法获得的受试物细胞毒性结果,判断受试物的发育毒性.结果 青霉素G、苯妥英钠和氟尿嘧啶的ID50(D3)分别为1099、47.4和0.023μg/ml,其发育毒性的判定依次无、弱和强.结论 建立的胚胎干细胞实验模型能够判定氟尿嘧啶、苯妥英钠和青霉素G发育毒性,结果与ECVAM的结论一致,可用于发育毒性的筛选和评价.

农村留守儿童生活质量影响因素的路径分析

留守儿童(rear children)是指父母双方或一方外出打工而需要留守在家乡,并需要成人或委托监护人照顾的年龄在16岁以下的儿童[1].留守儿童现象是中国经济转轨、社会转型过程中不可避免并将长期存在的社会现象.2006年6月～7月开展的本研究,旨在探索影响留守儿童生活质量的社会、家庭及个人因素.

深圳IT从业人员焦虑与应对方式的相关研究

IT业是工作压力较大的一个行业.中国大陆和香港等地的调查数据均显示,IT业是没安全感、职业焦虑严重的行业之一.焦虑是对外部事件或内在想法与感受的一种不愉快的体验.压力状态下,个体经常有焦虑体验,一般都伴随有生理、行为及认知方面的异常反应[1].

中国九省学龄儿童青少年零食消费行为变化趋势分析

随着社会经济的发展,零食消费在学龄儿童青少年中越来越普遍,指导学龄儿童青少年合理选择适量消费零食,使之成为正餐不足部分的补充显得十分重要,因此,我们分析了1993年以来"中国居民健康与营养调查"的4轮调查数据,对儿童青少年的零食消费行为进行了分析.

兰州地区410名高校医学生维生素A营养状况分析

维生素A(VA)摄入缺乏或不足是WHO确认的世界性的营养缺乏病之一,更是中国尤其是西部欠发达地区人群的主要公共卫生问题之一.2002年第四次中国居民营养与健康状况调查表明中国城乡居民膳食VA的总体摄入水平依然较低[1].

芹菜对小鼠卵巢超微结构的影响

据报道,芹菜具有降压、安神、保护血管等多种功效[1],古代美洲妇女饮用欧芹籽来避孕[2],芹菜灌胃后小鼠的精子密度明显降低[3].本实验通过对小鼠芹菜汁灌胃,观察小鼠卵巢组织结构的改变,初步探讨芹菜对雌性小鼠生殖系统的影响.

大连市12种海产贝螺生物体中铅和镉含量的调查

目的 测定大连沿海中鲍鱼、海螺、牡蛎等12种海产贝螺生物体中铅、镉的含量,分析贝螺生物体富集铅镉的能力.方法 采用高氟酸-硝酸消化法消解试样,采用火焰原子吸收光谱法(FAAS)测定生物体样品中铅、镉的含量.结果 FAAS法测定贝螺生物体中铅的含量为0.1323～2.199μg/g镉的含量为0.1983～3.613μg/g.且同一生物体不同组织器官对铅、镉积累能力存在明显差异.结论 贝螺生物体不同种属间铅镉含量存在差异,且常见的可以容易区分的内脏和肉的贝螺的不同组织对铅、镉富集能力存在差异.

氯仿/甲醇匀浆测定肝脏甘油三酯含量

肝脏组织中甘油三酯(TG)的测定是判断药物对脂肪肝有无作用的重要指标.然而,肝组织的匀浆方法报道不一,导致评价预防和治疗脂肪肝的药效受到怀疑.目前测定肝组织中的TG,归纳起来可以分为两类:一是用生理盐水或者磷酸盐缓冲液等匀浆[1,2];二是用有机溶剂主要是氯仿和甲醇匀浆[3～5].

芹菜对小鼠睾丸超微结构和血清激素的影响

有研究发现,常吃芹菜能减少男性精子的数量[1].据报道芹菜提取物作用于大鼠睾丸间质细胞时,以剂量依赖方式使原代培养的大鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌量明显减少[2];腹腔注射芹菜汁能够影响小鼠精子运动参数及降低精子密度[3].本文旨在通过观察小鼠血清激素和睾丸超微结构的变化,为深入研究提供科学依据.

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