细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子: 0.81
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1007-8738
- 国内刊号: 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人FKBP12基因可溶性表达及活性研究
目的获得具有生物学活性的hFKBP12, 以筛选新型的促神经再生药物.方法构建原核表达载体pExSecI/hFKBP12, 并在 BL21(DE3)plysE菌株中进行可溶性高效表达. 表达上清经CM Sepharose fast flow一步层析.结果获得电泳纯的hFKBP12. 活性测定结果表明,纯化后的 hFKBP12显示具有较强的肽基脯氨基顺反异构酶活性. 结论原核表达的hFKBP12具有天然生物学活性 .
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抗恶性疟HRP-11单链抗体的筛选和鉴定
目的研究开发简便、快速和有效的疟疾诊断技术.方法利用噬菌体抗体库技术,在构建抗恶性疟原虫红内期噬菌体抗体库的基础上,经3轮"吸附-洗脱-扩增"的富集反应后,筛选抗HRP-II阳性克隆株并进行可溶性诱导表达,后用ELISA和Western blot等进行鉴定.结果筛选出6株抗HRP-II阳性克隆株,表达的单链抗体Mr为31000左右,能与HRP-II抗原起特异性结合反应.结论本研究为研制疟疾快速诊断试剂盒奠定了基础.
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日本脑炎病毒E蛋白基因酵母双杂交表达载体的构建
日本脑炎病毒(JEV)为黄病毒属成员,基因组为单股正链RNA,长约11kb,编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白[1].其中3个结构蛋白分别为衣壳蛋白C、膜蛋白M和囊膜蛋白E.E蛋白为该病毒外部的糖蛋白,由500个氨基酸组成,相对分子质量(Mr)约为53000,具有多种生物学功能,包括受体结合活性和膜融合作用等,与病毒的致病性及组织亲嗜性密切相关[2].
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IL-12的真核表达载体增强小鼠对DNA疫苗的免疫应答
病毒感染严重危害人类身体健康,清除病毒感染主要依靠细胞免疫或细胞因子的作用.细胞免疫是通过特异性CTL识别、杀伤破坏病毒感染的细胞,以清除感染细胞内的病毒.大量资料表明,慢性乙型肝炎及其病毒携带者的细胞免疫功能明显低下[1].基因疫苗(核酸疫苗和DNA疫苗)是指含有编码某种蛋白抗原基因的真核表达质粒,直接接种体内后,可被体细胞摄取并表达相应抗原,进而激发保护性免疫应答,包括特异性CTL应答及特异性抗体的产生[2].IL-12是目前发现的对体内免疫活性细胞诱导和调节作用强、范围广的细胞因子.我们将HBVDNA疫苗(pCR3.1-S)[3]与编码鼠IL-12的真核表达载体[4]pWRG3169(下简称IL-12)共同免疫小鼠后,观察其对小鼠免疫应答的影响.
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人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选
目的构建人丙型肝炎病毒(HCV)特异性噬菌体抗体库,制备人源抗HCV单克隆抗体(mAb).方法用常规RT PCR法,直接从5例丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中,扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因,与噬菌体载体pComb3连接,构建噬菌体抗体Fab库.对抗体库进行5轮吸附-洗脱-扩增的亲和选择后,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体.结果RT PCR可有效地扩增出Fd和κ基因,并以此构建成容量为1.2×107的噬菌体抗体库.经5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达96%.结论抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCVmAb的制备,为HCV感染的诊断、治疗和发病机制的研究提供有效的分子工具.
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PPD免疫小鼠胸腺内降钙素基因相关肽能神经纤维的可塑性
目的观察免疫应答时胸腺内降钙素基因相关肽(CGRP)能神经纤维的可塑性,为CGRP在胸腺的调节作用提供线索.方法用PPD免疫Balb/c小鼠 ,胸腺切片用免疫组织化学法处理,光镜下观察.结果在正常Balb/c小鼠胸腺被囊、小梁内有较丰富的CGRP能神经纤维分布,胸腺实质中也有阳性纤维存在.用 PPD免疫28d后,胸腺被囊、小梁内血管周围的CGRP阳性纤维明显增加,这些纤维直径较粗、膨体少,多数围绕血管形成网状;有的聚集成束直行.胸腺实质内阳性纤维的数量少,免疫后较对照组略有增加,分布不均.此外,胸腺髓质中的一些较大的、三角形或椭圆形的上皮样细胞,亦呈CGRP免疫反应阳性.结论 CGRP与胸腺在免疫应答时的结构、机能变化有关.
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人骨形成蛋白-7成熟肽cDNA的克隆和序列测定
人骨形成蛋白-7(hBMP-7)早由Celeste等[1]克隆并命名.同年,Ozkaynat等[2]从人脑cDNA文库中也筛选出此克隆.以后研究表明,BMP-7除了诱导成骨外,还具有广泛的生物学活性[3-6].由于hBMP-7在神经系统及造血组织中的特殊作用,故其在基础研究和临床应用中具有广阔的前景.我们采用自行设计合成的一对特异性引物,以骨肉瘤的λgt11噬菌体表达文库为模板,通过PCR扩增到hBMP 7成熟肽的cDNA.将其克隆入载体pGEM 3zf(-),所获序列与已发表的序列完全一致,为进一步对其表达和功能研究创造了条件.
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人La多肽融合蛋白在E.coli中的表达
目的构建在E.coli中表达人La多肽的质粒. 方法以人脾cDNA为模板,通过PCR获得La多肽(全长)的DNA片段.将此片段利用双酶切定向克隆到MBP(麦芽糖结合蛋白)融合系统的载体pMALTM-c中 , 表达可溶性融合蛋白,并通过亲和层析予以纯化.结果免疫印迹实验(IBT)证明, 表达的融合蛋白具有La抗原多肽的特异性,而敏感性超过生化制备的ENA制品. 结论重组融合蛋白与天然ENA制品存在免疫学同一性.
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人CD19基因在痘苗系统中的表达
目的在痘苗系统中表达人CD19基因 ,为研究CD19分子的结构、功能及研制抗CD19的单克隆抗体 (mAb)打下基础.方法用 PCR技术扩增人CD19全长基因 , 并重组入克隆载体pGEM-T, 进行序列测定.将CD19全长基因克隆入痘苗表达载体pJSA1175中 ,用脂质体介导的方法, 与野生病毒共转染TK-143细胞 .运用蓝斑筛选获得含人CD19全长基因的重组痘苗病毒,并用此重组病毒感染 TK-143细胞 , 以 APAAP法检测人CD19基因在真核细胞中的表达.结果含人 CD19基因的重组痘苗病毒可表达在TK-143真核细胞的表面.结论人CD19全长基因在痘苗系统中成功地得到表达.
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人肿瘤坏死因子与人纤溶酶原饼环区5融合基因原核载体的构建
人肿瘤坏死因子α(humantumornecrosisfactor-α,hTNF-α)是由单核巨噬细胞分泌的,杀伤肿瘤细胞活性强的一种细胞因子,特异性强,不损伤正常细胞.我们通过分子生物学技术获得的新型hTNF-α(nhTNF-α)[1]较天然hTNF-α的活性提高了100倍,而毒性却为天然hTNF-α的1/3.人纤溶酶原饼环区5(humanplasminogenkringle5,hPgnK5)蛋白[2]可特异性地抑制肿瘤新生血管内皮细胞的生长,进而达到抑制肿瘤生长,治疗肿瘤的良好效果,是目前通过抑制肿瘤新生血管生长治疗肿瘤的蛋白药物中较有前景的一种.我们通过PCR反应,去除nhTNF-α3′端终止码,再将其连入pGEM3ZF(-)hPgnK5基因位点前,获得nhTNF-α和hPgnK5的融合基因,序列分析正确,为进一步在原核系统中表达该融合蛋白打下了基础.
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人源抗-HAV Fab真核表达载体的构建及表达
目的构建人源抗 HAVFab真核表达载体并进行表达.方法采用DNA重组技术将抗体重轻链基因与信号肽基因连接,并分别插入真核表达载体pCdhfr1和pCDNA3.1;以脂质体介导法转染CHO细胞,经G418筛选细胞,ELISA检测Fab基因的表达.结果成功地构建了Fab表达载体.转染细胞后,经ELISA检测,细胞培养上清中有抗原结合活性的Fab片段.结论Fab真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达,为抗体编码基因在CHO细胞中稳定表达奠定了基础.
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原癌基因产物Ras及c-erbB2在着床前小鼠胚胎中的表达
目的观察小鼠着床前的胚胎细胞中原癌基因ras编码的蛋白产物p21Ras及c-erbB2的表达,并了解其对着床前的胚胎发育的可能作用.方法采用免疫组织化学ABC法,检测着床前小鼠胚胎中p21Ras及c-erbB2蛋白的表达.结果小鼠着床前的胚胎细胞中p21Ras的免疫反应呈阳性,阳性物质分布于胞质中,胚胎外透明带呈阴性反应;而在各期着床前的胚胎中均未检测到c-erbB2蛋白的表达.结论小鼠着床前的胚胎中,有原癌基因ras编码蛋白的表达,p21Ras是增殖和分化受体介导的信号传导途径中的重要组成部分,可能在小鼠着床前的胚胎发育过程中起重要的调节作用.C-erbB2基因对于围着床期子宫的生长发育具有重要的作用;而在小鼠着床前的胚胎发育过程中似乎不起重要作用.
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点突变p53及其抗原肽重组痘苗病毒抗肿瘤效应的比较研究
目的比较点突变p53及其抗原肽重组痘苗病毒诱导的抗瘤免疫反应,为重组抗原疫苗用于肿瘤免疫治疗提供实验依据.方法以人135位Cys→Tyr点突变p53为肿瘤相关抗原模型,观察以表达该点突变p53蛋白的重组痘苗病毒rVV-p53FL与表达包含该点突变抗原肽p53125-145的重组痘苗病毒rVV-p53M所诱导的CTL及对荷瘤Balb/c小鼠的免疫保护和治疗作用.结果rVV-p53FL和rVV-p53M均能诱导以CD8+T细胞为主的特异性CTL.用rVV-p53FL与rVV-p53M免疫小鼠后,接种致死剂量的P815-mp53细胞,能保护部分小鼠免遭致死剂量肿瘤细胞的攻击.小鼠接种致死剂量的肿瘤细胞后,以rVV-p53FL与rVV-p53M治疗荷瘤小鼠,可使小鼠平均存活时间显著延长.两种疫苗的抗瘤效应无明显区别.结论来源于突变p53的抗原肽重组疫苗,可代替抗原大分子应用于肿瘤的免疫防治.
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B7.1基因的表达对肝癌细胞生物学特性的影响
目的观察B7.1基因表达对肝癌细胞增殖特性的影响及诱发杀伤性T淋巴细胞(CTL)细胞毒活性的变化.方法用细胞计数法和流式细胞仪(FCM)测定细胞生长曲线、DNA含量及细胞周期的变化.同时测定CTL对转染B7.1基因前后肝癌细胞的细胞毒作用.结果转染B7.1基因后,肝癌细胞的增殖受到一定影响:生长延缓、增殖幅度降低和倍增时间延长.CTL对转染B7.1基因的肝癌细胞杀伤明显增强.结论转染B7.1基因的肝癌细胞出现了一定的增殖抑制现象,提示B7.1基因有一定的免疫调节作用.
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四种P-糖蛋白在胃癌组织中表达的研究
目的了解术后胃癌的多药耐药性与胃癌组织中P-gp过量表达的关系.方法利用免疫组化方法,以4种抗不同亚型P-gp(C494,MRK16,JSB 1和C219)的单克隆抗体(mAb),以及4种不同抗P-gpmAb的混合抗体和抗p53蛋白mAb,分别检测66例胃癌术后石蜡包埋组织中P-gp和p53的表达(其中16例为冰冻切片).结果P-gp呈中等或高度表达(占40%~70%).依次为:C494(75.75%,50/66),JSB 1(62.12%,41/66),MRK16(48.49%,32/66)和C219(36.36%,24/66).4种抗P-gpmAb的混合物的阳性检出率为78.79%(52/66),抗p53蛋白mAb的阳性检出率为60.61%(40/66).4种抗P-gpmAb的混合物与抗P-gpmAbC494(G=0.90,P<0.00001);抗P-gpmAbC494与抗JSB 1mAb(G=0.60,P<0.00005);抗MRK16mAb与抗C219mAb(G=0.64,P<0.0001)均高度相关.石蜡和冰冻切片中P-gpC494和JSB 1呈中度表达以上者阳性率基本一致;而C219和MRK16的阳性率相差则明显(P<0.05).p53蛋白的表达与C494和JSB 1的表达相关性显著(P<0.002和P<0.002),与MRK16和C219的表达也有相关性(P<0.01和P<0.05).结论C494阳性表达率高,可作为胃癌组织中耐药基因检测的标志物.P-gp的过量表达与p53蛋白的表达关系密切.
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人胃癌细胞中COX-2基因的表达及其生物学活性
目的为研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)或通过前列腺素(prostaglandin,PG)引起的肿瘤免疫机制,我们检测了人胃癌细胞中COX-2mRNA及蛋白质水平的表达,PGE2的释放和COX-2酶活性的抑制剂消炎痛(indomethacin,Indo)对PGE2的释放和肿瘤细胞生长的影响.方法采用免疫细胞化学染色、RT PCR,ELISA,以及MTT比色试验方法研究人胃癌细胞COX-2基因与蛋白质的表达、PGE2释放以及消炎痛对PGE2释放和细胞活力的影响.结果所有检测的胃癌细胞均表达COX-2mRNA,胃癌细胞MKN45,SGC7901和AGS中有COX-2蛋白质的表达,MGC803则不表达.ELISA表明,所有胃癌细胞均有PGE2释放,给予COX-2表达的诱导剂PMA后,MGC803中PGE2的释放由57μg/L增加至63μg/L,小剂量COX-2酶活性的抑制剂-消炎痛(0.125μmol/L)则可使其水平降至47μg/L.MTT法进一步显示,消炎痛可使肿瘤细胞增殖与活力明显抑制,尤以小剂量为著.结论人胃癌细胞中存在COX-2基因的表达、PGE2的释放及肿瘤细胞增殖之间的相互关联.
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裸小鼠原位移植筛选高转移性人骨肉瘤细胞系及其生物学特性分析
目的在裸小鼠体内筛选人骨肉瘤高肺转移性细胞亚群,为实验研究提供模型.方法利用原位移植方法,将人骨肉瘤细胞系SOSP 9607皮下移植瘤接种于裸鼠胫骨骨髓腔.筛选到第2代时,有1例发生肺转移;以皮下扩增转移灶,再次原位移植,第3代肺转移率达83%(5/6).用组织块法培养收集,比较其与母系在形态结构、细胞核型,vimentin,actin,NSE抗原表达及体积倍增时间等方面的差别.结果同母系相比较,该转移细胞保持了人骨肉瘤细胞的组织学特征,生物学特性也有较大差别.结论该细胞亚群是一株新建立的人骨肉瘤细胞高转移性亚系.
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Fas基因转导逆转胃癌耐药细胞的作用及其机制分析
目的观察Fas基因转导人胃癌耐药细胞SGC7901/VCR对化疗药物的敏感性,并初步探讨其机制.方法以流式细胞仪检测Fas基因转导和对照胃癌细胞在细胞周期中的分布;用MTT实验检查癌细胞对多种药物的敏感性;用免疫细胞化学染色法检测胃癌细胞P-糖蛋白(P-gp)和拓扑异构酶II(TopoII)的表达.结果与胃癌细胞SGC7901和pBK-SGC7901/VCR相比较,Fas-SGC7901/VCR在G2期减少,S期增多,并出现明显的凋亡峰;Fas-SGC7901/VCR对DDP,MMC和5-Fu的敏感性增加,但对VCR和DOX的敏感性无明显变化;SGC7901,pBK-SGC7901/VCR和Fas-SGC7901/VCRTopoII的表达无明显差别;Fas-SGC7901/VCRP-gp的表达水平明显低于pBK-SGC7901/VCR,仅显示弱阳性.结论Fas基因可在一定程度上逆转人胃癌耐药细胞SGC7901/VCR的多药耐药性(MDR),其涉及的相关机制可能是增强细胞对凋亡诱导剂的敏感性,以及降低细胞P-gp的表达水平.
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Bcl-2核酶诱导SMMC7721细胞凋亡与p16,p21蛋白表达的关系研究
目的观察bcl-2核酶对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的作用,并检测p16和p21的表达情况. 探讨bcl-2核酶在肝癌治疗中的意义.方法经脂质体介导的方法,将PMTr-neo(正向bcl-2核酶真核表达载体)导入SMMC7721细胞中.细胞克隆转移扩大培养后,采用TUNEL法、免疫组化技术结合图像分析,在检测SMMC7721/PMTr-neo细胞凋亡的同时,检测p16, p21的表达.结果与对照组相比较 ,在 bcl-2核酶诱发SMMC7721细胞发生凋亡的同时,p16和p21基因的表达水平显著增高. 结论 bcl-2核酶通过封闭bcl-2的表达可促进SMMC7721细胞凋亡,同时伴发p21和p16表达水平的增高.
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白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡的基因调控
目的探讨白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中的基因调控作用.方法经小鼠尾静脉注射白色念珠菌后,采用FCM技术测定胸腺凋亡细胞上5个凋亡相关基因(p53,bax,bcl-2,fas和 c-myc)产物的水平在不同时间组的变化.结果 p53和bax两个基因产物的水平明显增加 ; 而bcl-2, fas和c-myc基因产物的水平无明显改变. 结论白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡,可能是经由基因调控的转录途径机制而发生,p53和bax基因在此过程起重要作用.
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膈下迷走神经切断对外周血CD4+/CD8+T细胞比值的影响
近年来越来越多的证据显示,神经系统和免疫系统存在着密切的相互影响.免疫系统在接受抗原刺激迅速作出反应的同时,还将免疫信息传递到中枢神经系统,影响该系统的活动并接受其调节.目前,对免疫信息向中枢传递的途径有几种假说,其中受到重视的是神经机制,特别是迷走神经可能起重要的作用.免疫信息可能通过刺激迷走神经感觉神经纤维或旁神经节细胞引起电活动将免疫信息上传至脑.本研究中我们切断大鼠膈下迷走神经后,通过观察外周血CD4+/CD8+T细胞比值的改变,探讨了迷走神经在神经系统调节免疫系统功能的环路中所起的作用.
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实验性汉坦病毒感染乳鼠诱导脑神经细胞表达热休克蛋白70
热休克反应(heatshockresponse,HSR)是细胞在受到缺氧、氧化损伤、病毒感染和免疫紊乱等各种应激因素损伤时,为适应周围微环境的改变而作出的一种自身保护性反应.该过程以暂时性下调许多细胞本身产物和有选择性地上调热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)的表达为特点[1].HSP的诱导表达具有保护细胞免受微环境中各种有害因素的损伤,减小组织的梗死面积,减轻脏器损伤,以及降低致死性应激状态下动物死亡率的作用[2].目前发现,有很多病毒可以诱导细胞热休克反应.我们在以往研究中发现,流行性出血热多种尸检组织中,有HSP70蛋白及其mRNA的表达,并与病毒抗原呈共存和相互抑制的关系.体外细胞培养证实,汉坦病毒感染可直接诱导HSP70表达,提示流行性出血热可诱导热休克反应[3].我们以汉坦病毒感染乳鼠为实验模型,目的在于证明热休克反应是否可作为普遍规律也出现于动物感染汉坦病毒的过程中.
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缺氧诱导的心肌细胞凋亡及一氧化氮的保护作用
目的研究缺氧在新生大鼠心肌细胞凋亡中的作用及一氧化氮(NO)的保护作用.方法取体外培养的新生大鼠心肌细胞置950 mL/L N2, 50 mL/L CO2孵箱中培养16, 32和 48 h, 造成缺氧损伤的细胞模型,观察凋亡发生的情况;将 NO供体 SNAP加入培养基中,使其终浓度为100 μ mol/L, 置于上述缺氧环境中培养16,32和48h,检测细胞凋亡. 结果在缺氧条件下培养16, 32, 48 h后 , 心肌细胞的凋亡率分别为:(2.9± 0.5)% , (6.2± 0.8)% 和 (26.6± 3.0)% ;而加入NO供体后,凋亡率分别为:(0.2± 0.3)% , (3.4± 0.4)% 和 (11.8± 1.2)% . 结论凋亡是心肌细胞缺氧损伤的主要形式;NO对缺氧引起的心肌细胞凋亡有保护作用.
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流行性出血热肾组织中增殖细胞核抗原、波形丝蛋白的表达及其意义
目的研究流行性出血热(EHF)肾组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和波形丝蛋白(vimentin)的表达及意义.方法应用多重PAP免疫组化方法,对17例EHF尸检肾组织中PCNA和vimentin的表达进行观察. 结果 EHF尸检肾组织PCNA的阳性率为64.71% ,集合管的增殖指数显著大于远曲小管(P< 0.01), 低血压休克期患者远曲小管和集合管上皮细胞vimentin呈强阳性表达,相同部位 PCNA也呈阳性,PCNA的阳性强度与局部病变的程度相一致. 结论 EHF患者急性肾功能衰竭的早就存在损伤肾小管上皮细胞的再生、增殖和分化,这些变化在EHF肾损伤的修复反应中具有重要的意义.
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类风湿关节炎患者关节中Th1/Th2型细胞因子的模式及临床意义
目的分析类风湿关节炎(RA)患者滑膜液及外周血中Th1/Th2型细胞因子网络的偏移及其在疾病过程中的意义.方法用酶联免疫斑点法(enzymelinkedimmunospotassay,ELISPOT),检测RA患者滑膜液单个核细胞(SFMC)和外周血单个核细胞(PBMC)中的Th1和Th2细胞,并分析Th1/Th2细胞的比值与血沉(ESR)和C 反应蛋白(CRP)的相关性.结果与PBMC相比较,RA患者SFMC中CD3+T细胞的百分率,Th1细胞及Th1/Th2细胞的比值显著升高(P<0.01),且此比值与患者的ESR和CRP均呈正相关(分别为r=0.84,P<0.01和r=0.74,P<0.02).结论在RA患者关节中Th1细胞明显增多并占优势,Th1/Th2细胞的比值与疾病的活动程度明显相关,Th1/Th2细胞的平衡在RA的发病机制及疾病进展中可能具有重要的作用.
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慢性肾衰血透患者TTV检测及其与细胞免疫功能的关系
目的观察慢性肾衰(CRF)血液透析(HD)患者中,输血传播病毒(TTV)的感染与患者细胞免疫功能的关系.方法应用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT PCR),双抗体夹心ELISA法及流式细胞仪,分别检测了90例CRF血透患者和128例对照组血清TTV DNA,可溶性白细胞介素 2受体(sIL 2R)和外周血T淋巴细胞亚群.并随机选择对其中1株TTV的部分基因序列进行测定,分析TTV与细胞免疫功能、输血次数、HD时间和肝功能的关系.结果⑴90例CRF血透患者中,TTV DNA阳性率为46.67%,明显高于正常对照组(P<0.001),与日本报道的TTV DNA序列(AB008394)相应片段的同源性为98.5%.⑵CRF血透患者血清中,sIL 2R水平明显高于正常对照组(P<0.01);CD3+,CD4+和CD4+/CD8+T细胞比例明显降低(P<0.01).⑶TTV DNA阳性率与sIL 2R、输血次数及HD时间呈显著的正相关(r=0.486,P<0.01;r=0.586,P<0.001;r=0.492,P<0.01),与CD+,CD4+和CD4+/CD8+T细胞比例呈负相关(r= 0.476,P<0.01;r= 0.483,P<0.01;r= 0.496,P<0.01),而与年龄、性别及手术史均无显著的差别和相关性.结论CRF血透患者有严重的TTV感染;其高发生率可能与细胞免疫功能明显低下及其与血液紧密接触有关.
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产空泡毒素幽门螺杆菌感染的临床意义
幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡和萎缩性胃炎的重要病因之一,并与胃癌、胃淋巴瘤的发生密切相关,其中人群中的感染率超过50%,目前已被世界卫生组织列为一级致癌因子[1].Hp的致癌因子包括:尿素酶、脂多糖、热休克蛋白、磷脂酶和空泡毒素(vacuolatingcytotoxin,VacA)等.其中VacA蛋白仅有部分菌株产生,可引起上皮细胞出现空泡样变及胃粘膜病变.为了解重庆地区HpVacA+株的感染与不同消化道疾病的关系,我们采用ELISA法和细胞培养法,检测了本校西南医院消化科住院患者HpVacA+株感染的情况.
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IL-1β对AVP诱导大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的抑制作用
目的探讨白介素 1β(IL-1β)对精氨酸加压素(AVP)诱导的新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CF)胶原合成的影响.方法采用3H 脯氨酸掺入法,观察IL-1β对AVP诱导的CF胶原合成的影响.结果(1)在基础状态下,1×105U/LIL-1β组CF3H 脯氨酸掺入率为(94.7±21.4)cpm/5×103细胞,较对照组[(165.7±31.2)cpm/5×103细胞]显著降低(P<0.05);(2)CF3H 脯氨酸掺入率随AVP作用浓度的增加而增高,其中10-7,10-6mol/LAVP组的CF3H 脯氨酸的掺入率分别为:(541.3±95.8和565±72.4)cpm/5×103细胞,明显高于对照组[(165.7±31.2)cpm/5×103细胞,P均<0.01];(3)IL-1β可以浓度依赖的方式抑制10-7mol/LAVP诱导的CF3H 脯氨酸掺入率,其中1×105U/LIL-1β+AVP组和2×105U/LIL-1β+AVP组CF3H 脯氨酸的掺入率分别为:(271.3±42.2和219.7±37.1)cpm/5×103细胞,较AVP组明显降低(分别为P<0.05,P<0.01).结论IL-1β可抑制基础状态下和AVP诱导的CF合成胶原,对逆转高血压病心肌肥厚可能有一定的作用.
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桥本氏甲状腺炎组织中IL-8的表达
目的研究IL-8的表达在桥本氏甲状腺炎发病机制中的作用及意义.方法采用免疫组织化学方法和图像分析,检测12例桥本氏甲状腺炎组织中IL-8的表达及分布.结果桥本氏甲状腺炎组织中甲状腺滤泡细胞IL-8表达的阳性率为100%,显著高于非毒性甲状腺组(62.5%,P<0.01);免疫组化染色的强度亦显著高于对照组(P<0.01).桥本氏甲状腺炎组织中病理改变越严重,甲状腺滤泡细胞中IL-8免疫组化染色阳性越强;浸润淋巴细胞IL-8免疫染色呈阴性.结论在桥本氏甲状腺炎组织中,甲状腺滤泡细胞IL-8呈高表达,且病理改变越严重,IL-8的表达越强,这可能是桥本氏甲状腺炎产生弥漫性淋巴细胞浸润及纤维化等病理改变的原因之一.
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DNA免疫法制备抗人Flt3-ligand单克隆抗体及其鉴定
Flt3-ligand(FL)是近几年新发现的一种相对分子质量(Mr)为30000的糖蛋白,其中有Mr为12000的糖类[1,2],主要参与体内的造血调控.在体外培养体系中,Flt3-ligand可与IL-3,IL-6,SCF及GM-CSF等细胞因子协同,刺激造血干/祖细胞增殖,并能协同诱导造血干/祖细胞分化为树突状细胞等,因而在造血干/祖细胞的体外培养中获得广泛应用[1,3].
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抗HCVNS3抗原单克隆抗体的研制与初步鉴定
丙型肝炎病毒(HCV)是一种单链正链RNA病毒,可通过输血等方式传播,引起急、慢性肝炎.目前,HCV的常规诊断方法主要有抗HCV-IgG,抗HCV-IgM及HCV-RNA的RT-PCR检测.对HCV抗原的检测文献报道较少.我们利用基因工程表达的HCVNS3蛋白作为免疫原,研制其单克隆抗体(mAb),试图用于HCV抗原诊断的研究.
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