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细胞与分子免疫学

细胞与分子免疫学杂志

Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 影响因子: 0.81
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1007-8738
  • 国内刊号: 61-1304/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 52-184
  • 曾用名: 单克隆抗体通讯
  • 创刊时间: 1985
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《细胞与分子免疫学杂志》编辑部
  • 出版地区: 陕西
  • 主编: 杨安钢
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 人乳头瘤病毒18型L1-E6、L1-E7嵌合基因表达载体的构建及表达

    作者:李昂;郑瑾;来宝长;耿宜萍;王艳;王一理;司履生

    目的构建HPV 18 L1-E6、L1-E7嵌合基因的表达载体, 并在CHO细胞中表达.方法克隆HPV 18 L1-E6和L1-E7基因, 插入中介载体pGEMT-Easy中并测序鉴定.采用PCR定点突变法, 突变L1-E6、L1-E7基因序列中与转化作用相关的位点, 分别与L1基因连接后插入真核表达载体pVAX1, 构建真核表达质粒pVAX1-L1E6Mxx、 -L1E7Mxx.用磷酸钙沉淀法, 转染CHO细胞, 以抗HPV-18L1、抗E6和抗E7特异性单克隆抗体(mAb)做ELISA和免疫细胞化学法检测.结果 ELISA检测显示, 转染各种pVAX1-L1E6Mxx、 -L1E7Mxx融合蛋白表达质粒的细胞提取物的P-N值均>2.1; 免疫细胞化学检测, 在胞浆、 胞核可见棕黄色颗粒.结论所构建的pVAX1-L1E6Mxx-E7Mxx融合蛋白表达质粒, 可在转染细胞内表达相应的L1-E6Mxx和L1-E7Mxx蛋白, 为今后进行DNA疫苗的研究奠定了基础.

  • 超抗原SEA诱导T细胞无能的作用机制探讨

    作者:许桂莲;朱锡华;杨劲;黄云辉

    目的探讨超抗原诱导T细胞无能的分子机制.方法采用ELISA和FACS, 分别检测超抗原对诱导T细胞无能的过程中, IL-2、IL-10的产生和IL-2Rα链(CD25)的表达, 并以3H-TdR掺入法, 测定无能T细胞对rhIL-2、PMA及ionomycin的应答能力.结果在诱导T细胞无能的过程中, IL-2的产生显著降低, 而IL-10的产生则逐渐升高; CD25的表达与活化组相比较无显著差异.rhIL-2的加入可恢复T细胞增殖; PMA单独作用能诱导无能T细胞的部分增殖能力, 但PMA+ionomycin则能更大程度地恢复T细胞的增殖.结论超抗原SEA对T细胞无能的诱导, 可能与降低IL-2的水平和升高IL-10的水平有关.超抗原SEA的反复刺激对T细胞无能的诱导, 可能是干扰了TCR信号途径的近端事件, 导致Ras/MAPK途径和Ca/calcineurin途径受阻, 而使IL-2基因不能转录所致.

    关键词: SEA 无反应性 IL-2/IL-2R
  • 人CD38抗原胞外段基因克隆及表达

    作者:温新宇;舒翠玲;黎燕;戚中田;沈倍奋

    目的克隆并表达人CD38抗原分子的胞外段基因. 方法采用RT-PCR法, 从高表达CD38抗原的Daudi细胞系中, 扩增CD38全长cDNA, 并将其插入pGEM-T载体中.重新设计引物,从重组pGEMT载体中,扩增CD38抗原分子的胞外段基因,再亚克隆到表达载体pET28a(+), 转化大肠杆菌BL21, 用IPTG诱导表达. 结果经酶切鉴定及序列分析表明, 克隆的CD38胞外段基因的序列与文献[1,2]的报道完全一致.将该片段亚克隆到表达载体pET28a(+), 经 IPTG诱导在大肠杆菌BL21中获得表达. 结论获得了人CD38抗原分子胞外段基因及其原核表达产物, 对进一步制备单克隆抗体、研究CD38分子的功能具有重要的意义.

    关键词: CD38 RT-PCR cDNA克隆
  • 大鼠脑缺血后胶质细胞向树突状细胞转化的研究

    作者:李呼伦;钟照华;李国忠;金连弘

    目的探讨缺血脑组织中树突状细胞(DC)的来源, 以其及是否参与脑缺血损伤的过程.方法用线栓方法封闭大鼠右侧大脑中动脉制作动物模型.用免疫组化染色法, 检测脑缺血1 h到第6天时, 缺血脑组织中DC(OX62+)的存在, 以及胶质细胞/巨噬细胞(OX42+)转化成DC(OX62+)的情况.同时检测活化后的DC样细胞表达MHC-Ⅱ类分子的水平.结果缺血脑半球和假手术的脑半球相比较, 在12 h DC的数量明显增加(P<0.001).在脑缺血组中, 缺血脑半球与非缺血脑半球相比较, DC的数量也增多(P<0.001).脑缺血第6天, 缺血组与假手术组进行比较, DC表达MHC-Ⅱ类分子(OX62+OX6+)显著升高(P<0.001).缺血脑半球在1 h到第6天, OX42+的细胞转变成OX62+OX42+的细胞逐渐增加, 第6天缺血脑半球与非缺血脑半球相比较显著增多(P<0.001).脑缺血损伤的面积与以每100 mm2脑组织切片为单位的OX62+细胞的数量呈正相关(R2=0.8914, P<0.001).结论脑缺血后, 脑缺血组织中DC数量的增加与脑损伤的面积呈正相关, 提示DC参与了脑缺血过程.大鼠脑缺血后, 从胶质细胞向DC样细胞的转化是缺血脑组织中DC的来源之一.

  • 表达鼠精子Cyritestin蛋白的减毒沙门氏菌疫苗株的构建及其鉴定

    作者:李彦锋;靳风烁;何畏;江军;王洛夫;靳文生

    目的构建表达鼠精子cyritestin蛋白的可口服减毒沙门氏菌活疫苗株.方法应用质粒TAZ83/13, 将之进行双酶切获得含有成熟cyritestin蛋白cDNA序列的酶切片段.将其插入表达载体pYA3149中, 构建重组质粒pCFL.将该重组质粒转入鼠沙门氏伤寒杆菌疫苗株X4632和X4550中, 以获得重组菌株X4632(pCFL)和X4550(pCFL).结果该两种无抗药性的重组菌株在体外营养选择压力下, 可较稳定地携带重组质粒传代繁殖.X4550(pCFL)在体内可较稳定地定居于Peyer ' s结、肠系膜淋巴结和脾脏; X4632(pCFL)可较稳定地定居于Peyer ' s结.二者均可表达被抗cyritestin单抗(mAb)识别的重组cyritestin蛋白.口服该疫苗菌株无明显的毒性作用.结论 X4632(pCFL)、X4550(pCFL)疫苗株的构建, 为研究以cyritestin为靶抗原的精子抗原避孕疫苗打下了基础.

  • OPG与MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达

    作者:刘继中;纪宗玲;陈苏民;胡蕴玉;李毅;张晓楠

    目的克隆人骨保护素(OPG) 成熟肽段编码区基因, 并在大肠杆菌中表达.方法采用RT-PCR法, 扩增人OPG成熟肽段编码区cDNA, 并克隆入原核表达载体pMAL-c2x中, 转化BL21(DE3)PlysS大肠杆菌感受态细胞.经0.1 mmol/L IPTG诱导后, 收集菌体蛋白, 进行SDS-PAGE及Western blot鉴定. 结果获得人OPG成熟肽段编码区cDNA, 以构建的原核表达载体pMAL-OPG转化菌株后, 可表达人OPG和麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白, 相对分子质量(Mr)为85 000.表达产物的蛋白量约为菌体总蛋白的13%.Western blot 表明, 融合蛋白能与抗人OPG多克隆抗体特异性结合.结论获得人OPG成熟肽全长cDNA, 并在大肠杆菌中以OPG-MBP融合蛋白的形式表达.

  • 真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3的构建及在豚鼠耳蜗成纤维细胞中的表达

    作者:邓志宏;王锦玲;邱建华;金明;高下;王成济;杨安纲

    目的构建真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3, 并观察其在豚鼠耳蜗成纤维细胞中的表达及分布.方法用RT-PCR法, 从人肝脏组织中克隆NT3-cDNA基因, 构建真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3, 并经PCR及EcoR I/BamH I双酶切鉴定.用脂质体介导的方法, 将用真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3瞬时转染豚鼠原代耳蜗成纤维细胞. 转染48 h后,分别在荧光显微镜下及用免疫组化法观察转染细胞中NT-3的表达.结果人NT-3 cDNA的PCR产物约为744 bp.序列测定结果用BLAST软件进行同源性比较, 同源性为100%.经EcoR I/BamH I双酶切证实, NT-3 cDNA已成功地克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中.用脂质体介导法,将pIRES2-EGFP-NT3瞬时转染豚鼠原代耳蜗成纤维细胞, 在荧光显微镜下观察到呈绿色荧光的成纤维细胞. NT-3免疫组化染色结果显示,转染NT-3基因的成纤维细胞胞浆呈棕黄色着色; 而转染空载体的成纤维细胞免疫组化染色呈阴性.结论成功地构建真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3, 并在豚鼠耳蜗原代成纤维细胞中表达, 为NT-3基因转染治疗致聋豚鼠耳蜗动物试验奠定了基础.

  • 重组幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的高效表达及其初步纯化

    作者:冉向阳;邹全明;毛旭虎;田文标;王缚鲲

    目的在大肠杆菌中高效表达幽门螺杆菌的热休克蛋白A基因(hspA), 并对其初步纯化.方法用巢式PCR扩增hspA基因.经测序证实后, 克隆于表达载体pIM-1中, 转化大肠杆菌.以SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达, 并测定N-端氨基酸的序列.采用固相镍离子亲和层析, 对重组hspA进行初步纯化.结果扩增的hspA基因为357 bp, 并在大肠杆菌中得到高效可溶性表达.重组蛋白的表达量高可达细菌总蛋白的60.5%.免疫印迹及氨基酸测序结果证实, 表达产物为幽门螺杆菌hspA亚单位.固相镍离子亲和层析初步纯化的重组HspA的纯度为87.8%.结论 hspA亚单位的高效表达与初步纯化, 为批量获得Hp亚单位抗原打下了基础.

  • 人脐带血中内皮样前体细胞的初步研究

    作者:安小惠;蔡国平

    目的观察脐带血中内皮细胞的前体细胞, 并研究该前体细胞分化成熟所需条件.方法采用常规分离方法, 分离脐带血中的单个核细胞, 培养于含小牛下丘脑提取液和地塞米松的MCDB131培养液中, 以获得具有粘附性的细胞, 于倒置相差显微镜下每日观察两次一并记录.结果初步的实验结果表明脐带血中存在内皮细胞的前体细胞, 小牛下丘脑提取物对该细胞的生成有促进作用, 而地塞米松对其生成有抑制作用.结论初步证实脐带血中有内皮细胞的前体细胞存在, 并对其分化发育条件有了初步认识, 为对其进一步的研究及应用打下了基础.

  • 电磁脉冲辐射诱导小鼠成纤维细胞系NIH/3T3凋亡的研究

    作者:赵梅兰;曹晓哲;王德文;刘杰;谷庆阳

    目的研究电磁脉冲(EMP)辐射对小鼠成纤维细胞系(NIH/3T3)凋亡的影响, 并探讨EMP对生物体损伤的可能机制. 方法利用场强为60 kV/m的EMP照射细胞后, 采用细胞计数、MTT比色法、流式细胞术及免疫组化染色等方法, 分别观察EMP对HIN/3T3细胞的活力、凋亡以及Bcl-2和p53蛋白表达等的影响.对免疫组化染色阳性的细胞, 在高倍镜下用CMIAS-II图像-分析系统进行图像分析, 所有数据均经SPSS8.0软件进行分析.结果 EMP可明显抑制NIH/3T3细胞的增殖与活力(P<0.05); 非贴壁细胞率在辐射后明显增加, 6 h达高峰(33.9%), 并可诱导细胞明显凋亡, 6 h达高峰(15.07%).图像分析结果表明, EMP辐射后, 有不同程度的Bcl-2蛋白表达的下调及p53蛋白表达的上调(P<0.05). 结论 EMP可诱导NIH/3T3细胞凋亡及Bcl-2及p53蛋白异常表达, 提示Bcl-2及p53可能参与了NIH/3T3细胞的凋亡过程.

  • 幽门螺杆菌黏附素AlpA保守区基因的克隆、序列测定及其生物信息学分析

    作者:白杨;但汉雷;王继德;林焕健;张兆山;张亚历;周殿元

    目的克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)4种黏附素(babA、alpA、alpB和hopZ)基因的保守区, 并对其进行序列及生物信息学分析.方法利用ANTHEPROT V4.3c 软件, 分析已证实的Hp 4种黏附素蛋白序列, 发现4种黏附素的C-端氨基酸存在保守区. 选取AlpA的C-端结构基因序列作为引物进行PCR, 将PCR产物定向插入载体pET-22b(+), 以DNA自动分析仪进行序列测定, 并以生物信息学软件分析其生物学特性.结果克隆片段的长度为588 bp, 与发表的黏附素AlpA保守区基因的序列完全一致.ANTHEPROT V4.3c软件预测其蛋白质的Mr约为22 500, 并显示出良好的抗原性和疏水性.结论用PCR方法, 从幽门螺杆菌ss1中获取到黏附素AlpA保守区的基因序列, 为研究Hp黏附素的分子机制和免疫原性奠定了基础.

  • 中国株HIV-1核心蛋白Gag核酸疫苗的构建与表达

    作者:江文正;金宁一;李子健;金洪涛

    目的构建含HIV-1中国流行株B亚型核心蛋白Gag基因的真核表达质粒, 并在体外进行表达和鉴定.方法将Gag基因插入到核酸疫苗载体质粒pVAX1中, 构建真核表达质粒pVAXGAG.用脂质体法, 将重组质粒转染入Hela细胞后进行表达产物的检测.结果间接免疫荧光检测显示, 转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光.Western blot和Dot ELISA分析显示, 重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的Gag蛋白.结论构建的核酸疫苗可在体外进行表达, 且表达的蛋白具有特异性.

  • 不同Th1/Th2细胞免疫应答支气管肺泡灌洗液中细胞学的变化

    作者:李超乾;徐永健;钟小宁;杨丹蕾;刘先胜;熊维宁;张珍祥

    目的探讨不同Th细胞优势应答下支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞学变化, 了解Th1/ Th2细胞免疫应答的细胞和分子机制. 方法用鸡卵清蛋白(OVA)致敏Wistar大鼠(每组10只), 制作致敏大鼠哮喘模型; 用"冻干BCG"皮内注射制作BCG免疫大鼠模型.收集BALF并做HE染色, 进行细胞分类计数.采用流式细胞术, 测定BALF中, CD2+、CD28+及γδTCR+ T细胞占总淋巴细胞的百分率及平均荧光密度(MIF).用原位杂交法, 检测肺组织中IL- 4 mRNA和IFN-γ mRNA的表达.用ELISA法检测血清IL- 4和IFN-γ的浓度.结果哮喘组BALF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞(EOS)、浆细胞和中性粒细胞的总数, 均显著多于正常组(P<0.01); BCG免疫组BALF中, 淋巴细胞和巨噬细胞的总数也显著高于正常组(P<0.01).哮喘组BALF中, CD2+ T细胞占淋巴细胞的百分率明显少于正常组(P<0.01), 非CD2+细胞明显增加.但哮喘组CD2+ T细胞的MFI显著高于正常组及BCG组(P<0.05); BCG组BALF中, CD2+ T细胞的百分率与正常组相比较无显著差异(P>0.05), 其CD2+ T细胞的MFI显著高于正常组(P<0.05).哮喘组和BCG组BALF中, CD28+细胞占淋巴细胞的百分率显著多于正常组(P<0.01); BCG组CD28+细胞的MFI高于哮喘组(P<0.01).两组的CD28+细胞的MFI均显著多于正常组(P<0.05).哮喘组和BCG组BALF中, γδTCR+细胞占淋巴细胞的百分率显著高于正常组(P<0.01).结论支气管哮喘患者Th2细胞的优势应答, 与BALF中的B细胞、EOS、浆细胞和中性粒细胞等APC数的增加及T细胞上CD2的高表达有关; 而BCG免疫组中的Th1细胞的优势应答与BALF中巨噬细胞、T细胞增加及T细胞上CD28的高表达有关.γδT细胞可能存在Th1/Th2细胞免疫模式, 既参与哮喘免疫也参与BCG免疫过程, 可能是调节Th0细胞分化的重要始动细胞.

  • 肺腺癌同源正常组织中差异表达基因的克隆

    作者:王辉;杨秋霞;李殿俊;李呼伦;马建群;张欣;吕雪莹

    目的从与肺腺癌同源的正常组织中筛选差异表达基因, 以期从分子水平阐明机体抑制肿瘤发生的机制.方法利用抑制性消减杂交分别获得肺腺癌组织及肺腺癌同源正常组织cDNA片段, 并建立相应的cDNA文库.用肺腺癌组织及与其同源的正常组织cDNA片段作为探针, 分别进行逆向和正向斑点杂交, 筛选与同源正常组织探针杂交而不与肺腺癌组织探针杂交的阳性克隆并测序, 测序结果与GenBank中的序列进行同源性分析.结果在肺腺癌同源正常组织中, 获得12个差异表达基因片段, 其中4个与细胞凋亡相关基因有较高的同源性; 8个与人类不同染色体的不同区域有较高的同源性, 功能不详.结论推测肺腺癌同源正常组织中存在凋亡相关基因等, 它们可能通过多种途径促进细胞凋亡而抑制细胞异常增殖, 从而达到抑制肿瘤发生的目的.

  • 年龄对人细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞中穿孔素表达的影响

    作者:李芳秋;方蓉;章金春;孟奎

    目的通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞(PBL)中细胞毒效应分子穿孔素(PFP)的表达水平的变化, 了解细胞毒性T细胞(CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制.方法利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD56单克隆抗体(mAb), 采用单标记免疫组化染色法, 检测外周血单个核细胞(PBMC)中PFP的表达.采用双标记免疫组化染色法, 检测上述细胞表面标志CD3或CD56的表达和细胞内PFP的表达. 结果儿童组、成人组及老年组PBL中表达PFP阳性细胞的百分率(%), 分别为(26.4±2.7)%, (21.6±3.2)%和(13.4±2.0)%, 老年组明显下降, 与其他两组相比较P<0.001.3个年龄组 CD3+ T细胞表达PFP的阳性率(%), 分别为(30.1±4.8)%、 (21.4±7.3)%和(18.8±4.2)%, 随年龄的增长而显著下降. 3个年龄组CD56+ NK细胞PFP的表达差别不显著.结论健康人PBL中PFP的表达随年龄增长而递减, CD3+ T细胞亚群PFP表达水平的下降尤其显著.这可能是老年人CTL杀伤活性下降的重要原因之一.

  • 成纤维细胞生长因子10在前列腺增生组织中的表达

    作者:邱建新;邹炼;李荣

    目的检测前列腺增生组织中成纤维细胞生长因子10(FGF-10)的表达, 探讨其在前列腺增生中的作用.方法应用半定量RT-PCR技术和免疫组织化学方法, 检测20例前列腺增生组织中FGF-10的表达, 并与正常的前列腺组织进行比较.结果前列腺增生组织中FGF-10 mRNA的水平高于正常前列腺组织; 前列腺组织中均见FGF-10阳性染色, 前列腺增生组织中表达显著高于正常的前列腺组织.结论前列腺增生组织中FGF-10的表达高于正常前列腺组织, 提示FGF-10对促进前列腺的增生起重要作用.

  • 细胞外基质对气道平滑肌细胞增殖活性的促进作用及其机制

    作者:宋立强;李妍;李毅;戚好文

    目的观察纤维粘连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)及胶原蛋白I (Col I)等主要细胞外基质成分, 对气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖活性的影响, 并探讨其作用机制.方法将原代培养的大鼠ASMCs, 接种于不同细胞外基质蛋白包被的培养板, 观察各时间点细胞的贴壁数量.在培养的ASMCs中分别加入两种浓度(20和60 mg/L)的不同细胞外基质蛋白溶液, 即FN组、LN组和Col I组, 采用3H-TdR掺入法, 检测作用8、12和24 h后各组ASMCs增殖活性的变化.间接免疫荧光染色法检测RAS蛋白在各组ASMCs中的表达.结果与无包被组相比较, FN、Col I包被组及LN包被组ASMCs的贴壁数量明显高(P<0.01或P<0.05).与正常对照组相比较, FN和Col I 各浓度组ASMCs的增殖活性增高显著(P<0.01), 且与浓度和作用时间成正比; 而LN组ASMCs的活性无明显差异.同时, FN和Col I 组ASMCs的RAS染色呈强阳性; 对照组及LN组ASMCs的染色则为弱阳性.结论 ASMCs对FN、LN和Col I均有良好的粘附性, 但只有FN和Col I能明显提高ASMCs的增殖活性, 其作用是通过RAS信号转导途径而实现的.表明细胞外基质是哮喘气道重塑的重要刺激因子之一.

  • CYP1A1、NAT2基因多态性与帕金森病的关系

    作者:黄跃东;高建平;杨国宗;林福利;梁建平

    为探讨代谢酶基因多态与帕金森病(PD)易患性的关系, 我们应用PCR-RFLP、ASA和自动实时荧光Light-Cycler技术对90例PD患者的CYP1A1MspI基因型和第7外显子4889位异亮氨酸(Ile)-缬氨酸(Val) 基因型及N-乙酰基转移酶2 (NAT2)基因4个多态: 第481位点的(C→T)[NAT2*5A]; 第590位点的(G→A)[NAT2*6A]; 第857位点的(G→A)[NAT2*7A/B]和第191位点的(G→A)[NAT2*14A]进行检测和分析.

  • E-cadherin 在乳腺良、恶性肿瘤中的表达及临床意义

    作者:王岭;张聚良;姚青;姚若全;袁世芳;易军;允军;陈江浩;李南林;李晓军

    目的探讨上皮型钙粘附蛋白(E-cadherin)在乳腺肿瘤增殖及转移中的临床意义.方法选用10例正常乳腺组织、28例乳腺良性肿瘤及40例乳腺恶性肿瘤标本, 以半定量反转录PCR(RT-PCR)检测E-cadherin mRNA的表达.结果正常乳腺和乳腺良性肿瘤组织中E-cadherin的表达, 分别为(85.3±15.7)%和(80.1±21.2)%, 二者无显著差异(P>0.01); 而在恶性肿瘤组织中, E-cadherin的表达则明显下降, 仅为(28.4±16.0)%(有淋巴结转移)和(42.5±19.1)%(无淋巴结转移), 且与肿瘤的分级相关.结论 E-cadherin在乳腺恶性肿瘤中的表达明显降低, 与肿瘤的组织学分级相关.E-cadherin表达的缺失或低表达, 可能是导致乳腺癌高转移的因素之一.

  • 反义人钙周期素结合蛋白编码基因转染对胃癌细胞多药耐药性的影响

    作者:胡文华;尹芳;樊代明

    目的研究hCacyBP编码基因在胃癌多药耐药机制中的作用.方法采用Northern杂交, 检测SGC7901细胞及SGC7901/ADR细胞中hCacyBP mRNA表达水平的差异.将hCacyBP cDNA克隆到pcDNA3.1中, 构建反义核酸真核表达载体pcDNA3.1/hCacyBP-, 并转染耐阿霉素人胃癌细胞, 用RT-PCR检测转染细胞中hCacyBP mRNA水平的变化. 用MTT比色法和FCM, 分别检测SGC7901/ADR细胞、pcDNA3.1/hCacyBP-和pcDNA3.1分别转染的SGC7901/ADR细胞, 对ADR的药物敏感性和胞内ADR的蓄积浓度.结果 Northern杂交证实, SGC7901/ADR细胞中hCacyBP mRNA表达的水平显著高于SGC7901细胞.成功地构建了pcDNA3.1/hCacyBP-.以pcDNA3.1/hCacyBP-转染的SGC7901/ADR细胞中hCacyBP mRNA的表达水平, 显著低于空载体转染及未转染的SGC7901/ADR细胞.MTT检测表明, 转染pcDNA3.1/hCacyBP-的细胞, 对ADR的药物敏性较空载体转染及未转染的SGC7901/ADR细胞有所增高, 生存率较后两者为低. FCM显示, 转染pcDNA3.1/hCacyBP-的 SGC7901/ADR细胞、转染pcDNA3.1及未转染的SGC7901/ADR细胞内ADR的蓄积浓度, 分别为6.72、5.62和5.54.结论 hCacyBP碥码基因对胃癌细胞的MDR有一定的影响, CacyBP可能是一种胃癌细胞MDR中的重要分子.

  • 热休克蛋白在子宫内膜异位症中的表达及意义

    作者:于月成;辛晓燕;王滨;郑维国;王德堂;郭会玲

    目的探讨热休克蛋白27(HSP27)和HSP70在子宫内膜异位症发病中的作用.方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶染色法(SP法), 检测子宫内膜异位症中56例异位内膜与在位内膜(30例)中HSP27和HSP70的表达.采用原位杂交法, 检测HSP70 mRNA的水平, 并与正常子宫内膜相比较.结果免疫组化结果显示, 异位内膜组织中HSP27与HSP70均呈高表达, 与正常内膜组的表达差异显著(P<0.01), 而且失去其在正常内膜组织中表达的周期性变化.卵巢子宫内膜异位症组(OEM)与子宫腺肌症组(AM)组中, HSP27和HSP70的表达无显著差异(P>0.05).原位杂交结果显示, HSP70 mRNA在异位症组(包括OEM和AM组)中的表达, 明显强于正常对照组(分别为P<0.01和P<0.05).HSP27与HSP70的表达水平, 同OEM的严重性无关.结论异位内膜组织中的HSP70基因被激活, 转录增加.HSP27和HSP70呈高表达, 可能在EM的发病中起重要作用.

  • 三氧化二锑诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的研究

    作者:于文强;孙秉中;柴玉波;赵忠良;刘雪松;纪宗玲;路凡;陈苏民

    目的研究锑剂三氧化二锑(Sb2O3)对早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的诱导作用, 以寻求早幼粒细胞白血病治疗的新方法.方法采用细胞生长曲线、形态学及硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验, 判定NB4细胞的生长、分化及功能.采用细胞周期分析和DNA电泳研究细胞凋亡.结果Sb2O3能诱导早幼粒白血病细胞凋亡, 且具有时间、剂量依赖性.结论 Sb2O3能有效地诱导早幼粒白血病细胞凋亡, 提示锑剂诱导细胞凋亡的疗法, 有望成为临床治疗早幼粒细胞白血病的新方法.

  • HSV-tk/GCV自杀基因系统对喉癌细胞杀伤作用的体外研究

    作者:刘志;成诗银;鱼兵

    目的研究逆转录病毒介导的HSV-tk/GCV系统对人喉癌细胞的体外杀伤作用.方法构建携带HSV-tk基因的逆转录病毒载体, 并以该重组逆转录病毒感染人喉癌细胞Hep-2.以G418筛选的抗性克隆(命名为Hep-2/tk), 用MTT比色法观察GCV在体外对Hep-2/tk细胞的杀伤作用.结果 Hep-2/tk细胞与未转染tk基因的Hep-2/0、Hep-2细胞相比较, 三者的生长速度无明显差别.Hep-2/tk细胞对GCV高度敏感, 即低浓度GCV(0~1 mg/L)处理Hep-2/tk细胞7 d, 可将其大部分细胞杀死, 增加GCV的浓度(>1 mg/L)不能显著增强其对Hep-2/tk细胞的杀伤作用.结论人喉癌细胞Hep-2对HSV-tk/GCV系统高度敏感, 可望为喉癌的治疗提供一种有效的途径.

  • 表皮生长因子影响肿瘤患者舌苔变化的分子机制研究

    作者:许冬青;王明艳;狄洌;詹瑧

    目的研究表皮生长因子(EGF)对食管癌细胞Eca-109细胞周期及表皮生长因子受体(EGF-R)表达的影响, 探讨EGF促进肿瘤患者舌苔增厚的分子机制.方法应用流式细胞术, 检测EGF-R的表达和细胞周期.结果EGF能明显促进Eca-109细胞膜上EGF-R的表达, 使细胞增殖活性大大增强.结论 EGF有可能是通过促进EGF-R的表达影响舌苔形成.

  • 辅受体突变导致HIV感染抑制的机理研究

    作者:黎志东;徐志凯;陈峥

    目的研究抗HIV感染者淋巴细胞HIV-1辅受体突变的情况, 阐明其感染抑制的分子机理. 方法设计特定的引物, 用PCR方法检测健康人、 HIV感染者和抗HIV感染者的基因组DNA中HIV辅受体(CCR5)是否突变. 结果抗HIV感染者发生CCR5△32纯合子突变, 健康人及HIV感染者CCR5基因未发生突变. 讨论发现了我国本土人群存在CCR5△32纯合子突变, 此突变可能为抗HIV感染保护机制, 为艾滋病的治疗及预防提供新的方法和途径.

  • 北柴胡提取组分对小鼠淋巴细胞活性的影响

    作者:刘晓斌;高燕;刘永仙;符兆英;白慧卿

    柴胡是一种具有疏肝化郁和升阳作用的中草药, 主要包括北柴胡和南柴胡.北柴胡又称硬柴胡, 是伞形科植物北柴胡(Bupleurum chinese DC)之根; 南柴胡又叫软柴胡, 是伞形科植物狭叶柴胡(Bupleurum Scorzonerifolium Willd) 之根, 临床应用以北柴胡为主[1].

  • 重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析

    作者:葛军辉;张乐之;姚玉成;刘会敏;王新民;余宏宇;何金;胡以平

    目的构建乙型肝炎病毒(HBV)变异s基因真核表达载体, 研究变异所致乙肝表面抗原(HBsAg)免疫学性状的改变.方法利用Dra Ⅲ和XhoⅠ双酶切含有突变位点的HBV DNA 1.2拷贝的质粒P3.8Ⅱ, 获得904 bp带有突变点的HBV-S基因片段.将其置换含有HBV DNA(adr亚型) S和S2片段的真核表达载体pCMV-S2.S的相应片段, 从而构建s基因nt587 G→A突变的真核表达载体pCMV-S2.S+145R; 并转染人肝癌细胞系Hep G2, 以获得分泌变异型HBsAg的细胞系.利用EIA及细胞免疫染色法, 探讨变异抗原与抗-HBs结合力的变化.结果构建了HBsAg 的第145位甘氨酸→精氨酸突变体的真核表达载体.将其转染哺乳动物细胞后第3天, 培养上清中用EIA检测HBsAg呈阳性, A值随时间延长而上升, 但变异型的A值明显低于野生型.变异型与野生型HBsAg细胞免疫化学检测均有部分细胞呈阳性, 但差别不显著.结论 HBsAg第145位甘氨酸→精氨酸的突变体的真核表达载体表达产物具有良好的抗原性, 能够与抗-HBs结合, 但与野生型相比结合力明显降低.

  • 应用噬菌体肽文库筛选mAb F3特异性结合肽

    作者:王长军;唐家琪;王登高;陶开华;李先富;潘秀珍;郭恒彬

    目的应用噬菌体展示肽文库筛选可与汉坦病毒囊膜蛋白中和性单抗(mAb) F3特异性结合的配体肽. 方法以F3 mAb为筛选配基, 对噬菌体展示的随机12肽文库进行3轮生物亲和淘选; 用夹心ELISA和竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性, 并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析.结果通过3轮生物淘选, 能被抗体捕获的噬菌体克隆为21/22. ELISA测定显示, 筛选到的噬菌体短肽能与F3 mAb特异性结合. 序列分析表明, 7个阳性克隆氨基酸序列相同, 均为-MHGPTKNQMWHT; 同源性分析显示, 该序列与HTNV/SEOV M蛋白G2区第750~759位氨基酸有较高的同源性.结论本研究为基于表位水平的HFRSV特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要的依据.

  • 抗人大肠癌单链抗体的构建、表达及其体内外生物学活性的检测

    作者:方瑾;宋今丹

    目的将抗人大肠癌单克隆抗体ND-1(mAb)的VH和VL基因进行重组, 构建和表达ND-1scFv, 并对其在体内外的生物学活性进行检测.方法采用RT-PCR技术, 从能够分泌mAb ND-1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH和VL基因, 通过重叠延伸拼接PCR在VH和VL基因间引入连接短肽, 体外构建ND-1scFv基因, 并在大肠杆菌中表达.采用间接免疫荧光(IFA)及ELISA法测定ND-1scFv的免疫学活性.用99Tcm标记ND-1scFv后, 将偶联物给予荷瘤裸鼠, 观察其在动物体内的显像及生物学分布.结果 SDS-PAGE显示, 重组蛋白Mr为30 000, 同预期结果一致.IFA及ELISA检测表明, ND-1scFv保留了与亲本抗体相近的免疫学活性, 对表达相应抗原的靶细胞具有特异结合活性.体内放射免疫实验显示, 99Tcm- ND-1scFv在荷瘤小鼠体内的生物学分布, 呈明显的肿瘤积聚趋向, 注入体内1 h血中T/NT即达2.61.结论获得免疫学活性良好的ND-1scFv, 对荷瘤动物体内肿瘤的定位快速、准确, 可望成为有效的肿瘤诊断和治疗的导向载体.

  • 9.1C3/LAIR-1的真核表达、纯化及单克隆抗体的制备和鉴定

    作者:薛江楠;欧阳为明;贾卫;张新海;谢鑫;曹云新;宁双飞;李琦;金伯泉

    目的表达并纯化9.1C3/LAIR-1胞膜外区与人的IgG1 Fc段的融合蛋白, 制备针对9.1C3/LAIR-1胞膜外区的单克隆抗体(mAb).方法构建真核表达载体pIg/3C-9.1C3/LAIR-1, 表达并纯化9.1C3/LAIR-1-Fc融合蛋白.以9.1C3/LAIR-1-Fc融合蛋白免疫BALB/c小鼠, 制备.以间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性, 以竞争结合实验鉴定mAb识别 LAIR-1的表位.结果表达并纯化了9.1C3/LAIR-1-hIgFc融合蛋白, 以其免疫BALB/c小鼠, 获得1株针对9.1C3/LAIR-1胞膜外区的mAb 4H7.4H7对HL-60细胞和经9.1C3/LAIR-1 cDNA转染的COS7细胞上的表位识别, 与已报道的抗9.1C3 mAb体不同.结论成功地构建了9.1C3/LAIR-1胞膜外区基因的真核表达载体, 并表达纯化了9.1C3/LAIR-1-hIgFc融合蛋白.获得一株针对9.1C3/LAIR-1胞膜外区的mAb, 为进一步研究9.1C3/LAIR-1分子的结构和功能提供了新的手段.

  • 生物传感器对抗戊型肝炎病毒单克隆抗体部分特性的研究

    作者:顾颖;张军;李少伟;葛胜祥;何志强;朱子恒;鲜阳凌;李益民;夏宁邵

    目的应用生物传感器对新制备的抗戊型肝炎病毒单克隆抗体(mAb)的亲和力、Ig亚类(型)及抗原结合的动力学进行研究. 方法用HEV ORF2区基因工程重组蛋白NE2, 免疫BALB/c小鼠, 经杂交瘤技术制备mAb, 采用ELISA、Western blot和生物传感器鉴定其有关特性.结果获得12株可稳定分泌抗NE2 mAb的杂交瘤细胞系.用ELISA及生物传感器等鉴定各株mAb, 分别为IgM和IgG1、IgG2a, 轻链均为κ型.其中在用ELISA法对mAb 3F5亚类鉴定过程中, 发现其与HRP-GAM IgG2a和HRP-GAM IgM均有反应, 生物传感器鉴定其为IgM.Western blot验证各株mAb的特异性, 同时各株mAb对于不同聚合形式的NE2蛋白的反应性有一定的差别.应用生物传感器测定了4株mAb的KD值, mAb 8C11为4.36×10-7, mAb 8H3为1.53×10-5, mAb 13D8为1.21×10-6, mAb 16D7为8.03×10-7.从生物传感器测得的各株mAb与NE2的结合、解离过程中发现, mAb 8H3与NE2可快速结合、快速解离, 其它3株mAb结合稳定.结论经多种方法鉴定, 所获得的12株杂交瘤细胞分泌的抗体, 为抗HEV ORF2区段的特异性抗体.

  • 脂多糖结合蛋白的分离、纯化及其多抗的制备

    作者:李永旺;张德明;麻莉;毛宝龄;钱桂生;徐剑铖;侯一峰

    目的分离纯化大鼠脂多糖结合蛋白(LBP), 并制备兔抗大鼠LBP多抗.方法大鼠血清先通过硫酸铵盐析, 再依次以Bio-Rex70阳离子交换层析和MonoQ阴离子交换层析进行纯化, 纯化产物采用SDS-PAGE鉴定.用提纯的LBP免疫制备兔抗大鼠LBP的抗血清.用饱和硫酸铵盐析纯化后, 经Westernblot鉴定其纯度.结果分离纯化到较高纯度的LBP.用纯化的LBP免疫制备的兔抗LBP多抗与LBP具有良好的结合活性. 结论分离纯化到高纯度的LBP并制备出兔抗大鼠LBP多抗.

    关键词: LBP 内毒素 抗体
  • 甘露糖受体在免疫调节中的作用

    作者:徐明;郭宁

    甘露糖受体(MR)属于多凝集素(multilectin)受体, 可识别细胞表面或病原体细胞壁上的多种糖分子, 通过参与受体介导的内吞作用(receptor-mediated endocytosis)和吞噬作用(phagocytosis), 来维持内环境的稳定, 并将先天性免疫与获得性免疫联系起来, 组成机体的一种免疫防御系统.本文对近几年来甘露糖受体的结构和功能等方面的研究进行综述, 主要介绍甘露糖受体在维持机体组织内环境稳定、参与非特异性免疫防御、诱导特异性免疫应答和调节免疫反应等方面的重要生物学作用.

  • 人类NK细胞的亚群及其特征

    作者:庄然;金伯泉

    自然杀伤细胞(natural killer cell, NK细胞)是固有免疫系统中一类十分重要的淋巴细胞, 约占淋巴细胞总数的15%.NK细胞通过发挥细胞毒作用和分泌细胞因子, 在机体抗感染、抗肿瘤、 免疫调节和造血调控等方面发挥着重要的免疫功能.

  • B7-CD28/CTLA- 4协同刺激通路与支气管哮喘

    作者:周林福;殷凯生

    T细胞的激活需要两个不可或缺的刺激信号[1]: 即由T细胞受体(TCR)与抗原提呈细胞(APC)提呈的MHC-抗原多肽复合物相结合所产生的第一信号(识别信号), 和由APC表面协同刺激分子与T细胞表面对应受体分子相结合所产生的第二信号(协同刺激信号/激活信号).识别信号有抗原特异性、受MHC的限制, 而激活信号无抗原特异性、不受MHC的限制.

  • 以CCR5为作用靶点的抗艾滋病药物的研究进展

    作者:马新锋;张先恩;胡勤学

    1 简介艾滋病在1981年被首次发现, 至今人类仍然没有找到治疗艾滋病的有效方法.

  • Toll 样受体及其信号转导

    作者:王国兴;王伯瑶

    天然免疫系统作为宿主第一道防线, 主要在获得性免疫系统被活化前发挥抗感染作用, 它依赖胚系基因编码的识别系统对病原微生物起反应.

  • 昆虫杆状病毒表达系统的研究进展

    作者:朱帮福;卢兹凡;陈南春;陈苏民

    体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统.原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞, 它操作简便、周期短、收益大及表达产物稳定, 但是表达基因的相对分子质量(Mr)有限, 不宜过大, 且不能对表达产物进行一些翻译后加工、修饰.真核细胞系统包括CHO等哺乳动物细胞、酵母细胞和昆虫细胞等.昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)具有独特的生物学特性, 日益受到人们的重视.

    关键词: 杆状病毒 表达系统
  • 整合素信号对离子通道的影响

    作者:韩捷;范云

    整合素受体具有一次跨膜结构, 膜外部分可识别配体(如纤维黏连蛋白、层黏连蛋白等)或细胞外基质上(ECM)的精氨酸-氨基乙酸-门冬氨酸(RGD)结构并与之结合, 而胞内端除可与细胞骨架等结构蛋白结合外, 还可与多种信号蛋白如局部黏附蛋白(FAK)、整合素连接激酶(ILK)、蛋白激酶C(PKC)等结合[1-2], 因此其不仅仅具有将细胞与细胞外基质、细胞与细胞物理连接的作用, 还被认为是理想的信号转导分子, 在细胞内外信号转导中发挥重要作用[3-4].当与配体结合后, 整合素受体可兴奋而发生聚集, 引起多种信号分子在其周围分布, 并通过识别、激活双重作用使信号物质放大或产生,激发蛋白酪氨酸磷酸化等信号转导通路.

  • 调节免疫耐受的新靶点蛋白激酶Cθ

    作者:杨清玲;孙晗笑

    随着分子生物学技术的广泛应用, 人们对免疫应答及免疫调节机制的研究逐步上升到分子水平, 抗原受体及其它细胞膜分子介导的信号传递过程的研究,已成当代免疫学研究的主要前沿领域.

  • 巨噬细胞集落刺激因子在神经系统中的作用

    作者:屈素清;王亚奇

    巨噬细胞集落刺激因子 (macrophage colony stimulating factor, M-CSF or CSF-1)是早被发现的细胞因子之一.近年研究表明, M-CSF分布广泛, 作用多样, 其功能作用已远远超出传统的免疫细胞因子的范畴, 是一种兼具多种功能的因子[1].

  • 抗独特型抗体在抗肿瘤免疫中的研究现状

    作者:宋文冲;陈超

    抗独特型抗体(Ab2β)作为肿瘤抗原的"内影像", 能够模拟肿瘤抗原、打破患者对肿瘤的免疫耐受, 故越来越受到人们的重视, 已成为肿瘤免疫治疗研究的热点之一.本文拟就其近年有关Ab2β在肿瘤免疫治疗中的研究动态进行综述.

  • CD1家族在脂类抗原呈递中的作用

    作者:蔡亮;朱乃硕

    传统观点认为, 具有抗原性能引起免疫应答的物质包括: 细菌、病毒等颗粒物质、蛋白质类大分子及糖类分子等, 而核酸和脂质则不行.新研究表明, 非肽类的物质(nonpeptide antigen), 同样也能被T细胞识别, 直接引起免疫应答.这与CD1系统的作用密切相关.该系统能识别非肽类的脂类、糖脂类抗原并呈递信号, 从而引起细胞免疫反应.

  • Toll样受体在免疫学方面的研究进展

    作者:章晓联;潘勤

    天然免疫分子Toll 样受体(Toll-like receptors, TLR), 是一个广泛存在于昆虫、脊椎动物和植物中序列高度保守而古老的家族.目前, 已克隆的人类的TLR成员有10个(即TLR1~10), 它们在天然免疫中可发挥重要的抗感染免疫功能, 并与免疫耐受、特异性抗感染免疫, 以及一些疾病具有相关性.本综述介绍了有关它们在配体的识别、信号传导、免疫学方面的研究进展.

  • Granulysin的研究进展

    作者:李越;陈伟;范雄林;李元

    Granulysin(颗粒溶素, 或519基因)是位于CTL和NK细胞胞浆颗粒中的一种蛋白质, 属于SAPLIP(saposin-like protein)家族的成员之一[1].在机体免疫应答过程中, granulysin与perforin和granzyme等颗粒分子一起排出胞外, 参与抗菌、抗病毒和杀伤肿瘤细胞等免疫过程.

  • 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化的微量蛋白制备抗血清

    作者:时永全;韩者艺;王新;张宇梅;宁晓暄;翟惠虹;樊代明

    目的以SDS-PAGE纯化的微量蛋白制备抗人层粘连蛋白受体前体蛋白(LRP)的血清.方法以SDS-PAGE分离纯化原核表达的人LRP与6×组氨酸的融合蛋白, 切下并粉碎融合蛋白所在凝胶块.将含10 μg融合蛋白的凝胶颗粒与弗氏佐剂混匀后, 免疫BALB/c小鼠.以Western blot检测所获抗血清的滴度和特异性.结果以胃癌细胞总蛋白为靶抗原时, Western blot显示, 所获抗血清仅识别1条Mr约42 000的蛋白带, 将抗血清做1∶ 2 000稀释后, 仍能清晰地显示其靶抗原所在位置.结论以聚丙烯酰胺凝胶颗粒为载体, 用微量蛋白即可成功地制备抗血清.

  • 采用PCR快速检测金葡菌的mecA基因

    作者:苏明权;张建芳;樊新;刘家云;于文彬

    耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是医院内感染的重要病原之一, 除对甲氧西林耐药外, 还对临床上广泛应用的多种抗生素耐药, 其所致感染呈散发或爆发流行, 治疗困难、死亡率高, 已成为临床治疗上的一大难题. 我们根据PBP2a编码基因设计了一对mecA引物, 用16SrRNA基因作为内参照, 采用PCR法可快速检测临床分离的金黄色葡萄球菌中的mecA基因, 用于MRSA的筛选和鉴定.

  • 原发性肝癌患者HBV血清学标志与HBV DNA的关系探讨

    作者:邹菊贤;董轲;李俊祺;刘树林

    已有报道, 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)与原发性肝癌(primary hepatocellular carcinoma, PHC)密切相关, 但多局限于对HBV血清学标志物的单方面研究, 我们采用ELISA和PCR法, 同时对HBV标志物和HBV DNA进行了检测, 以探讨二者之间的关系, 为PHC的临床诊断及治疗提供实验依据.

  • 一氧化氮与白细胞精子症不育的关系探讨

    作者:杨麦贵;张竹映;郑善銮;钟立辉;王伟;皇海;郭明;樊新;于文彬

    目的探讨一氧化氮(NO)与白细胞精子症不育的关系.方法参照WHO标准方法, 进行精液常规分析.采用过氧化物酶染色法检测精液中白细胞密度.用改良的低渗肿胀法检测精子细胞膜的完整性.采用镀铜镉还原荧光法, 检测精液中NO代谢产物硝酸盐(NO 3).结果白细胞精子症不育组白细胞的密度为(1.48±0.90)×109/L, NO水平为(103.5±2.0) μmol/L, 显著高于正常生育组的(0.73±0.28)×109/L和(41.6±1.8) μmol/L(P分别为<0.05和<0.001).精子的活动率、精子速度试验(SVT)及精子头、尾部膜完整率, 均明显低于生育组(P<0.01), 而精子的死亡率则显著高于生育组(P<0.01).结论 NO水平与白细胞密度呈正相关; 与精子的活动率、SVT及精子头、尾膜的完整率呈负相关.表明当精液中的白细胞增高时, 可产生过量的NO导致精子中毒受损使精子的受精能力下降.

  • 流式细胞术和微量细胞毒法检测HLA-B27的比较

    作者:樊春梅;解慧;史战国;朱平;王彦宏

    人白细胞相关抗原(HLA-B27)分子(简称B27)的生理功能是携带提呈的细菌多肽, 并激活CD8+ T细胞.B27因与强直性脊柱炎(AS)等脊柱关节病(SPA)的关联,是所有疾病与HLA相关中为密切的, 多年来一直是风湿病学界研究的热点之一[1].分析B27的表达对AS的发病机制、诊断、预防及预后判断都有重要意义[2,3].既往采用微量细胞毒法检测HLA-B27表型, 本文采用流式细胞术进行检测, 并比较了两种方法的优缺点.

  • 组织内微量抗原的催化信号扩增法检测

    作者:闫庆国;黄高昇;王文勇;王哲;李玉松;王泊沄

    目的探讨催化信号扩增法(catalyzed signal amplification, CSA)在检测组织内微量抗原中的作用及意义.方法分别应用免疫组织化学ABC法和CSA法, 对54例霍奇金淋巴瘤(Hodgkin ' s lymphoma, HL)和1例人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)感染的对照涎腺组织中, HCMV的立即早期抗原DDG9、早期抗原CCH2和低基质蛋白抗原AAC10进行检测, 并比较阳性信号的强弱及阳性率.结果应用ABC法, 仅在1例对照组织中检测到DDG9、CCH2及AAC10的弱阳性信号, 在54例HL中, 未检测到任何阳性信号; 而应用CSA法不仅对照组织中DDG9、CCH2及AAC10均呈强阳性, 而且有6例(11.1%)HL DDG9/CCH2呈阳性, 5例(9.3%)HL AAC10呈阳性.结论 CSA是一种较ABC法敏感的免疫组织化学染色方法, 可检测出ABC法未能检测出的组织内微量抗原.

  • 加热对卵巢癌细胞系HO-8910细胞周期的影响

    作者:安晓汾;陈必良;辛晓燕;王德堂

    目的探讨加热对人卵巢癌细胞系HO-8910细胞周期的影响. 方法将卵巢癌细胞HO-8910在42℃条件下, 分别加热30、60、120 min, 与未加热的正常状态细胞相比较, 利用流式细胞仪技术, 分析各种处理后的细胞其细胞周期的变化. 结果与正常状态下的细胞相比较, 当细胞被加热到42℃时, G2期细胞所占比例明显减少, 随加热时间的延长略有增高; S期和G2期细胞的变化不明显.当加热时间为30 min时, 与正常状态下的细胞相比较, 细胞周期可发生明显的特异性改变并出现细胞凋亡峰. 结论 人卵巢细胞系HO-8910在42℃条件下, 加热不同时间, 其细胞周期的变化具有明显的差别.

  • 利用噬菌体展示技术筛选C型副鸡嗜血杆菌抗原模拟表位

    作者:沈彤;高亚萍;柳川;薛沿宁;张培君

    目的确定抗C型副鸡嗜血杆菌(Hpg C)的单克隆抗体(mAb)的抗原表位.方法利用噬菌体展示技术, 从随机12肽库中进行生物淘洗, 用ELISA进行筛选和鉴定.结果通过3轮吸附-洗脱-扩增的生物淘洗过程, 获得了抗Hpg mAb结合肽.通过ELISA和竞争抑制ELISA,获得了高亲和性和特异性的结合肽, 即Hpg的抗原表位.序列分析显示, 结合肽恒定区的序列为WIHP.结论利用噬菌体展示肽库筛选抗原表位技术, 成功地获得了Hpg C mAb的模拟表位, 它可能是线性表位, 非常有希望应用于实验性疫苗的研制.

  • 多型肝炎病毒感染状况分析

    作者:苗立群;席剑

    病毒性肝炎在我国作为一种多发病, 严重危害着人们的健康.1989年9月东京国际肝炎学术会议将病毒性肝炎分为甲、乙、丙、丁、戊5型, 目前又发现了庚型肝炎病毒(HGV)和输血传播病毒(TTV).在临床检验中, 我们常见各种病毒单独感染和几种病毒联合感染情况.

  • 胎儿骨髓间充质干细胞的分离培养及表面标志的检测

    作者:张燕;刘杰;王德文;崔雪梅;谷庆阳;董波;赵梅兰

    目的建立胎儿骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells , MSC)的分离培养方法, 并对其表面标志进行检测. 方法采用体外细胞培养技术, 分离培养胎儿骨髓MSC, 用流式细胞术对其进行鉴定, 并研究其增殖及生长特征. 结果流式细胞术证明, MSC具有间充质细胞的特征.原代及传代培养显示, 胎儿骨髓MSC具有活跃增殖的能力. 结论 胎儿骨髓MSC作为组织工程重建的种子细胞具有较强的可行性.

  • CD3/CD8设门在FCM检测Th1/Th2亚型中的应用

    作者:曹云新;金伯泉;韩卫宁

    目的探讨流式细胞术准确、灵敏检测Th1/Th2细胞的新方法.方法采用荧光mAb CD3和CD8设门, 准确找到CD4+ T细胞群, 然后进行Th1/Th2细胞分析, 并与单用CD4设门进行比较.结果以CD3/CD8设门较单用CD4设门, 对靶细胞的定位较为准确, 测量所获图形美观、清楚并有规律.结论以CD3/CD8 设门, 可提高检测Th1/Th2细胞的准确性, 同时也可应用于Tc1/Tc2细胞的检测分析, 是检测基础和临床免疫样品较理想的方法.

  • 过敏性紫癜患者T细胞亚群和体液免疫功能的检测

    作者:马玉宏;刘向萍;田蓉

    过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura, HSP)的基本病理改变是全身弥漫性小血管炎症反应.由HSP引起的肾损伤是常见的肾小球疾病, 但其发病机制尚不明确.本研究应用多色流式细胞仪, 检测了HSP患者外周血CD3+、 CD4+及CD8+ T细胞亚群的数量变化, 并对血清免疫球蛋白和补体C3、C4进行了测定, 旨在探讨其发病机制.

  • B7-CD28家族的新成员及其研究进展

    作者:邱玉华;张学光

    B7-CD28属协同刺激分子免疫球蛋白超家族成员.表达在T细胞上的CD28和表达在APC(antigen presenting cells,APC)上的B7(B7-1、B7-2)相互作用所产生的信号,是迄今公认的基本的协同刺激信号.

细胞与分子免疫学分期目录
期数
2018 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2015 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2008 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2006 01 02 03 04 05 06
2005 01 02 03 04 05 06 z1
2004 01 02 03 04 05 06
2003 01 02 03 04 05 06
2002 01 02 03 04 05 06
2001 01 02 03 04 05 06
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