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细胞与分子免疫学

细胞与分子免疫学杂志

Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 影响因子: 0.81
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1007-8738
  • 国内刊号: 61-1304/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 52-184
  • 曾用名: 单克隆抗体通讯
  • 创刊时间: 1985
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《细胞与分子免疫学杂志》编辑部
  • 出版地区: 陕西
  • 主编: 杨安钢
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 用于IDDM基因治疗的rAAV2-GAD-Ig的研制

    作者:王仁喜;王建安;宋伦;韩根成;沈倍奋;吴小兵;黎燕

    目的: 构建重组真核表达载体pSNAV-GAD-Ig[GAD-Ig融合基因是由小鼠GAD(glutamic acid decarboxylase)基因插入到小鼠IgG3重链(Ig)基因的N端而成的], 制备含GAD-Ig融合基因cDNA的重组缺陷型腺相关病毒-2(rAAV2-GAD-Ig), 并探讨rAAV2所介导的GAD-Ig是否能诱导I型糖尿病(IDDM)动物模型-NOD(nonobese diabetic)小鼠产生特异性免疫耐受.方法: 从含GAD-Ig融合基因的中介载体BSSK(BSSK-GAD-Ig)中, 用PCR方法扩增目的基因片段, 并克隆入真核表达载体pSNAV 中, 构建重组真核表达载体pSNAV-GAD-Ig.以脂质体法将pSNAV-GAD-Ig转染到rAAV2包装细胞BHK-21中, 产生rAAV2-GAD-Ig.采用RT-PCR、 Western blot和ELISA法, 检测rAAV2-GAD-Ig感染的BHK-21细胞中目的基因的表达.应用GAD抗原体外诱导特异性T细胞的二次应答, 来检测rAAV2所介导的GAD-Ig是否能诱导NOD小鼠产生特异性免疫耐受.结果: GAD-Ig目的基因已整合到靶细胞的基因组中, 并能以分泌形式表达目的蛋白GAD-Ig.将rAAV2-GAD-Ig肌注后, NOD小鼠能产生特异性免疫耐受.结论: 获得了可用于NOD小鼠治疗研究的rAAV2-GAD-Ig.

  • 凋亡诱导配体TRAIL与细胞膜脂筏形成的关系

    作者:贾卫;庄然;李琦;曹云新;刘雪松;宋朝君;金伯泉

    目的: 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与细胞膜微结构域脂筏的关系.方法: 采用间接免疫荧光流式细胞术, 分析K562细胞表面TRAIL分子的表达.用FITC标记的霍乱毒素B亚单位(CTx)对K562细胞的脂筏进行染色; 用抗FITC单克隆抗体(mAb)交联脂筏后, 以兔抗TRAIL分子抗体及Cy3标记的羊抗兔抗体进行间接免疫荧光染色, 激光共聚焦显微镜分析TRAIL分子与脂筏微结构域的关系.结果: FITC-CTx和抗FITC mAb可使脂筏发生交联.脂筏交联的同时TRAIL分子发生聚集.动态观察表明, 抗FITC抗体作用20 min后, 脂筏发生交联, 作用30 min时交联明显; 随着脂筏的交联, TRAIL分子发生聚集. 抗FITC抗体作用40 min后, 脂筏交联程度减弱, 且TRAIL分子逐渐被排除于脂筏之外.结论: 抗FITC抗体可用于CTx-FITC脂筏染色后脂筏交联的研究.TRAIL分子可能与细胞膜脂筏微结构域有关.

  • 人工合成VEGF表位模拟7肽的生物学功能研究

    作者:向军俭;钟振东;邓宁;岑健宏;杨红宇

    目的: 检测人工合成血管内皮细胞生长因子(VEGF)表位模拟7肽特异抑制VEGF促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的活性.方法: 通过噬菌体展示技术, 筛选获得了表达模拟肽的阳性噬菌体克隆, 经测序得到VEGF表位模拟肽序列: GWYYDAX.人工合成该短肽, 用体外细胞培养的方法检测其对HUVEC的生长抑制作用.结果: 表位模拟肽 GWYYDAX可剂量依赖性抑制VEGF促进HUVEC生长的活性.结论: VEGF表位模拟肽可能模拟了VEGF的部分结构, 竞争结合HUVEC细胞VEGF受体(KDR),阻断了VEGF-VEGFR的信号传递而抑制细胞生长, 具有潜在的应用前景.

  • 热休克蛋白gp96-肽复合物诱导的抗肿瘤免疫

    作者:张天一;牛纪晓;林琳;黄晓春;顾君一

    目的: 用不同种类肿瘤提取的热休克蛋白(HSP)gp96-肽复合物纯化后免疫动物,观察其诱导抗肿瘤免疫的效应,并初步探讨其机制.方法: 从肿瘤细胞中制备HSP gp96-肽复合物, 观察其免疫诱导作用.用不同剂量及不同来源的gp96-肽复合物免疫6组小鼠后, 用H22癌细胞攻击, 观察各组小鼠的肿瘤发生率、 瘤重及瘤组织的形态学变化并与对照组相比较.观察gp96-肽复合物对小鼠腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮(NO)和杀瘤活性的影响.结果: 获得的纯化HSP gp96-肽复合物的Mr为96 000.gp96-肽复合物的免疫效果与其剂量有关, 以 18 μg/只的效果明显.交叉免疫实验证明, 免疫小鼠能抵抗同种肿瘤细胞的攻击, 而对异种肿瘤细胞的则无免疫保护作用.gp96-肽复合物可刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO同时杀瘤活性增高.结论: 从肿瘤细胞中分离纯化的HSP gp96-肽复合物免疫小鼠后, 可获得特异性的抗肿瘤作用; 其对肿瘤细胞的杀伤作用与 gp96-肽复合物能增强小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO增多有关.

  • 结核杆菌Hsp65与EGFP融合基因的构建及DC疫苗的制备

    作者:肖凌;魏雅稚;夏飞;刘胜武

    目的: 构建结核杆菌H37Rv株Hsp65与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合基因pEGHsp65, 并以其转染小鼠的树突状细胞(DC), 制备抗结核的DC疫苗.方法: 采用PCR技术, 从培养的结核杆菌H37Rv株中抽提Hsp65基因, 克隆到含有EGFP基因的质粒pEGFP-C1中, 构建pEGHsp65融合基因.以其转染Hela细胞, 在共聚焦激光扫描荧光显微镜下观测不同时间荧光表达的强弱, 并用RT-PCR检测Hsp65 mRNA的表达.以pEGHsp65融合基因转染小鼠骨髓细胞经GM-CSF和IL- 4诱导分化的DC, 用MTT比色法检测DC疫苗刺激未致敏脾细胞的增殖.结果: 用EcoRⅠ和Bgl Ⅱ双酶切鉴定证实, H37Rv株Hsp65 DNA已插入重组表达载体pEGFP-C1中.将融合基因转染入Hela细胞, 48 h转染率高; 用RT-PCR在mRNA水平上可检测到Hsp65 mRNA的表达.用MTT比色法检测表明, 融合基因转染的DC能激活并引起未致敏的脾细胞增殖.结论: 成功地构建pEGHsp65 融合基因和以其制备的DC疫苗, 为进一步观察其治疗结核病的效应奠定了基础.

  • MAPK信号转导途径在Mtb-Ag激活的γδT细胞杀伤肿瘤细胞中的作用

    作者:胡建国;侯彦强;李柏青

    目的: 探讨MAPK信号转导途径在结核杆菌抗原(Mtb-Ag)活化的γδT细胞杀伤肿瘤细胞中的作用.方法: 用Mtb-Ag刺激正常人PBMC以诱导γδT细胞扩增, 并用磁珠阳性分选法分离高纯度的γδT细胞; 用MTT比色法测定γδT细胞对肿瘤细胞系K562和Raji的细胞毒活性, 并观察MEK/Erk特异性抑制剂PD98059和p38 MAPK特异性抑制剂SB203580, 对细胞毒活性的阻断作用.用流式细胞仪检测肿瘤细胞诱导γδT细胞上CD69的表达, 并观察PD98059和SB203580对CD69表达的抑制作用.结果: 新鲜分离的PBMC, 用Mtb-Ag刺激培养第10天, 用磁珠阳性法分离的细胞中γδT细胞的比率, 分别为3.56%、 74.63%和98.20%.PD98059可抑制γδT细胞的杀瘤活性, 且对γδT细胞杀伤Fas低表达的K562细胞的抑制率(39.27%)高于对γδT细胞杀伤高表达Fas的Raji细胞的抑制率(26.58%).PD98059还能明显抑制肿瘤细胞诱导γδT细胞表达CD69; 而SB203580对γδT细胞的杀瘤活性和肿瘤细胞诱导的CD69的表达均无影响.结论: MAPK途径中的Erk通路(而不是p38通路)参与了γδT细胞对肿瘤细胞细胞毒活性的启动, 且可能对γδT细胞的颗粒外吐作用较大, 而对Fas/FasL介导的细胞毒活性的作用较小.MAPK途径的Erk通路可能还参与肿瘤细胞诱导γδT细胞的活化.

  • 汉坦病毒诱导人脐静脉内皮细胞HSP70的表达及意义

    作者:余璐;马恒;刘彦仿;杨守京

    目的: 研究人脐静脉内皮细胞(HUVEC)感染汉坦病毒(Hantavirus, HTV)后应激反应的规律及意义. 方法: 采用免疫细胞化学染色法和核酸分子原位杂交, 检测热休克蛋白70(HSP70)的表达; 用RT-PCR观察HSP70 mRNA水平变化的规律.结果: HTV感染HUVEC后, 免疫细胞化学染色法可检出HSP70呈高表达, 原位杂交发现细胞质内有HSP70 mRNA的阳性信号.感染后不同时间点RT-PCR的结果表明, 与对照组相比较, HSP70 mRNA的水平在感染后迅速升高并持续高表达(P<0.05).结论: HTV可诱导HUVEC高表达HSP70.HSP70可能具有抑制病毒复制和保护内皮细胞的作用.

  • 小鼠FasL全长cDNA的克隆与FasL腺病毒载体的构建

    作者:杨佳荟;沈茜

    目的: 克隆小鼠FasL全长cDNA, 构建FasL腺病毒载体.方法: 从经ConA(5 mg/L)刺激48 h的BALB/c小鼠脾脏单个核细胞中克隆FasL 全长cDNA, 构建以CMV启动子转录调控的含小鼠FasL全长cDNA的穿梭质粒mFasL-pAdTrack.经Pac I酶切后, 与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组.挑选阳性重组子转染HEK-293细胞, 构建CMV启动子转录调控的mFasL重组腺病毒载体.结果: 成功地克隆小鼠FasL全长cDNA, 经PCR、酶切及荧光检测等证实, 成功地构建了重组mFasL腺病毒载体.结论: 重组FasL腺病毒载体的构建为进一步研究FasL在肿瘤和自身免疫性疾病的作用奠定了基础.

    关键词: FasL 腺病毒 载体构建
  • HIV-1 Tat基因的融合构建及在大肠杆菌中的高效表达

    作者:林剑萍;王华;王玲;卫红飞;胡晓平;王丽颖;于永利

    目的: 在E.coli BL21(DE3)中高效表达Tat蛋白. 方法: 用PCR方法构建HIV-1 Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG), 以消除天然Tat蛋白的转录活性.将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同亚克隆入表达载体pET28a中, 并在E.coli中表达, 表达产物用Western blot进行鉴定. 结果: 分别通过3轮PCR, 成功地构建了Tat基因全序列.构建的重组质粒pET28a-chap10-Tat在E.coli BL21(DE3)中得到高效表达.Western blot分析表明, 在相对分子质量(Mr)为24 000处有1条特异性的带. 结论: chap10基因与 HIV-1 Tat全基因的融合构建, 使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达, 为其在爱滋病发病中作用研究奠定了基础.

    关键词: HIV-1 TAT 伴侣10 表达
  • 可用于短肽基因免疫的真核表达载体的构建及应用

    作者:徐焕宾;徐薇;储以微;王缨;张瑞华;熊思东

    目的: 构建可高效表达表位短肽的基因免疫载体, 并研究其在表位为基础的基因免疫中的免疫效应.方法: 将基因表达调控序列插入pUC19载体中, 加入KOZAK增强序列、基因克隆位点及转录起始和终止码, 构建可表达短肽的表达载体, 进一步将表位基因克隆到构建的真核载体中, 并研究其在体外的表达和体内基因免疫特性.结果: 成功地构建了高效表达短肽的真核表达载体, 并能在小鼠体内诱导表位特异性的免疫应答.结论: 本实验中构建的含PEC的载体以表位为基础的DNA疫苗研究提供了新的设计策略和工具.

    关键词: 表达 表位 基因免疫
  • 负载不同形式肝癌抗原的树突状细胞抑瘤功能的比较

    作者:贺兰湘;张桂梅;冯作化

    目的: 探讨不同形式的肝癌抗原修饰的树突状细胞(DC)的抑瘤功能.方法: 分别用肝癌H22冻融抗原、 H22小分子抗原肽和Hsp70-H22抗原肽复合物修饰DC; 用MTT比色法分析DC 激活的CTL对H22细胞的杀伤能力, 并用RT-PCR法测定脾脏T细胞中IFN-γ mRNA的表达水平; 用不同修饰的DC免疫小鼠, 观察其对H22肝癌的生长抑制作用.结果: 单独的H22肝癌抗原肽修饰的DC不能激活CTL. Hsp70-H22肽复合物修饰的DC激活CTL的能力强于H22肝癌冻融抗原修饰的DC, 对H22细胞的杀伤率分别为47.3%和18.3%.各组T细胞中IFN-γ表达水平的变化与杀伤率的变化相一致.用H22肝癌冻融抗原和Hsp70-H22肽复合物修饰的DC免疫小鼠后, 均可抑制H22细胞生长, 但后者的抑制作用更强, 成瘤率仅40%.其他各组的成瘤率均为100%.结论: Hsp70-H22肽复合物是一种DC的强致敏物, 可通过激活CTL、诱导CD4+ T细胞分化成Th1型细胞而参与肝癌的免疫排斥.

  • 系统性红斑狼疮患者血清抗核糖体P蛋白抗体的检测及其临床意义

    作者:吴振彪;朱平;王彦宏;冷南;樊春梅;张惠琴

    目的: 观察抗核糖体P蛋白抗体(抗P蛋白抗体)在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的阳性率及其意义.方法: 以含有核糖体磷酸蛋白P0、 P1、 P2全序列的合成蛋白作为抗原, 采用欧盟斑点法(EURO blot), 测定150份SLE患者血清抗核糖体P蛋白抗体的阳性率, 并分析其与其他自身抗体(抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗RNP抗体等), 以及患者的临床特征的相关性.结果: 150份患者血清中, 有36例(24%)抗P蛋白抗体呈阳性.抗P蛋白抗体阳性组肾脏损害、中枢神经系统损害的发生率显著高于阴性组, 而与皮肤、关节、 血液及肝脏的损害无关, 也与病情活动指数(DAI)不相关.抗P蛋白抗体的阳性率与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体及抗RNP抗体的阳性率相关.结论: SLE患者抗P蛋白抗体的阳性率高于欧美人群(13%).该抗体与SLE患者的肾脏及中枢神经损害具有相关性.

  • 食管癌早期病变患者天然免疫功能测定的临床意义

    作者:孙丽霞;任金荣;单保恩;何兰欣;艾军

    传统认为, 细胞免疫在机体抗肿瘤免疫中发挥着重要作用, 体液免疫的作用较小, 近几年对天然免疫的作用有了更新认识.1996年, Science杂志上发表了"天然免疫对获得性免疫应答的指导作用".

  • 以T-bet/GATA-3的比率作为评价哮喘患者Th1/Th2失衡指标的探讨

    作者:张琦;董亮;李丽珍;于钦凤;陈明

    目的: 探讨哮喘患者PBMCs中转录因子T-bet/GATA-3的比率与Th1/ Th2细胞失衡的关系.方法: 采用RT-PCR法测定30例发作期哮喘患者(哮喘组)及20例慢性阻塞性肺病患者(COPD组)及20例正常人(对照组) PBMCs中T-bet和GATA-3的活性, ELISA法测定血浆IL- 4、 IL-5、 IL-13和IFN-γ的表达水平.结果: 哮喘组PBMCs中T-bet/GATA-3的比率较COPD组和对照组明显降低, Th2细胞因子IL- 4、 IL-5、 IL-13的水平增高,与T-bet/GATA-3的比率成负相关, 而Th1细胞因子IFN-γ的水平降低,与T-bet/GATA-3的比率成正相关.结论:哮喘患者T-bet/GATA-3的比率降低,可以作为评价Th1/ Th2细胞失衡的精确指标.

  • CpG-ODN体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究

    作者:李宁;范学工;陈朝晖;朱才

    目的: 探讨CpG-ODN体外对HBV复制和HBV抗原表达的抑制作用.方法: CpG-ODN体外刺激人外周血单个核细胞(PBMC), 用ELISA检测培养液中IFN-α及IFN-γ的水平.将不同比例的PBMC培养上清与HepG2.2.15细胞共孵育2、4、6、8 d后, 用ELISA和荧光定量PCR法, 分别检测培养上清液中HBsAg、HBeAg和HBV DNA的水平.结果: CpG-ODN可诱导PBMC分泌IFN-α和IFN-γ.CpG-ODN本身虽不能直接抑制HBV的复制,但经刺激活化的PBMC的培养上清, 却能显著抑制2.2.15细胞产生HBsAg、HBeAg和HBV DNA, 在培养的第8天, 抑制率高分别达90.8%、31.3%和32.2%.结论: CpG-ODN作为一种新型的免疫调节剂, 可诱发机体的免疫效应, 抑制HBV复制和HBV抗原的表达.

  • 中国白族、佤族和拉祜族人群MBL基因启动子区SNP的研究

    作者:吕成伟;葛争鸣;李江川;马丽;陈政良

    目的: 研究中国白族、佤族和拉祜族人群甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因启动子区单核苷酸多态性(SNP).方法: 抽提人外周血白细胞基因组DNA, 建立SSP-PCR及PCR-分子灯塔实时分析技术,检测MBL基因启动子区SNP位点-550(G/C,称H/L等位基因)、-220(G/C, X/Y等位基因)和+4(C/T,P/Q等位基因),分析其单倍型及基因型频率.结果: 从71例白族、73例佤族和94例拉祜族人中, 分别检出等位基因型LYP/LYP 4例(5.6%)、4例(5.5%)和2例(2.1%); HYP/LYQ 6例(8.5%)、11例(15.1%)和12例(12.8%); LYP/LYQ 21例(29.6%)、14例(19.2%)和51例(54.3%); LXP/LXP 1例(1.4%)、2例(2.7%)和0例; LYQ/LYQ 10例(14.1%)、14例(19.2%)、7例(7.4%); LXP/LYQ 10例(14.1%)、 13例(17.8%)和15例(16.0%); HYP/LYP 4例(5.6%)、3例(4.1%)和4例(4.3%); HYP/LXP 3例(4.2%)、1例(1.4%)和0例; HYP/HYP 12例(16.9%)、11例(15.1%)和3例(3.2%).结论: 中国白族、佤族、拉祜族普通人群之间,MBL基因启动子区等位基因L/H的分布存在差异(P<0.01), X/Y和P/Q无统计学意义的差异(P>0.05); 各单倍型和各基因型的分布存在差异(P<0.01); 基因型LYP/LYQ和LXP/LYQ在3个民族均有较高的分布,其总体频率分别达36.1%及16.0%.

  • SARS患者康复期T细胞亚群、活化状态及TCR Vβ表达格局的分析

    作者:曾星;蔡萃;黄羽;欧爱华;张娴

    目的: 研究中西医结合治疗后, SARS患者康复期淋巴细胞功能状态和T细胞受体(TCR) Vβ 24个亚家族表达的格局.方法: 应用流式细胞分析技术, 观察我院76例康复期患者T细胞亚群, T、 B细胞的活化状态及CD3+和TCR Vβ1、 2、 3、 4、 5.1、 5.2、 5.3、 7.1、 7.2、 8、 9、 11、 12、 13.1、 13.2、 13.6、 14、 16、 17、 18、 20、 21.3、 22及23等24个亚家族的表达.结果: T细胞亚群中, CD3+和CD4+ T细胞的百分率均数低于参考值; CD8+ T细胞的百分率高于参考值.CD8+/CD28- T细胞(Ts)的百分率较参考值增高; 而CD8+/CD28+ T细胞(Tc) 的百分率较参考值降低, 其中有39例Tc细胞的百分率降低, 有48例Ts细胞的百分率升高.CD3+ HLA-DR+和CD3-/HLA-DR+细胞的百分率高于正常参考值, 增加的例数分别是36例和30例.TCR Vβ 24个亚家族中, TCR Vβ 14的表达高, TCR Vβ 5.3和23的表达次之, 表现出TCR Vβ呈优势表达.正常对照组TCR Vβ 24个亚家族中, 只TCR Vβ 14的表达高, 与SARS患者的结果相一致; 但TCR Vβ 24个亚家族的分布格局不一样.两组比较, Vβ1、 Vβ5.2、 Vβ5.3、 Vβ7.2、 Vβ9、 Vβ11、 Vβ13.1、 Vβ13.2、 Vβ17、 Vβ18、 Vβ22和Vβ23表达有显著性差异, 康复期SARS患者组均高于正常对照组.同时, SARS患者激素用量大于1 000 U组, TCR Vβ 4、 22和23的表达均高于未用激素组.结论: 康复期患者CD8+/CD28- T细胞数的升高可导致CD8+ T细胞数升高; Ts细胞数的增加, 因其分泌的抑制因子增多, 从而造成CD3+和CD4+ T细胞数降低.SARS患者康复期TCR Vβ 24个亚家族在T细胞上的表达不同.CD3+/HLA-DR+和CD3-/HLA-DR+ T细胞数的升高, 可能与T、 B细胞的活化较晚有关.

  • IL-15对骨髓增生异常综合征患者CD34+细胞增殖、分化的影响

    作者:叶中绿;陈铭珍;陈日玲;程涵蓉;黄秀兰

    目的: 探讨IL-15对体外培养的骨髓增生异常综合征(MDS)患者CD34+细胞增殖和分化的影响.方法: 应用单克隆抗体(mAb)免疫磁珠系统分离CD34+细胞, 将实验分为加IL-15的实验组和不加IL-15的对照组, 分别用液体培养基和甲基纤维素半固体培养基培养.计数培养后的细胞数和CFU-E、BFU-E、CFU-GM和CFU-GEMM的集落形成数,并用MTT比色法检测IL-15对MDS 患者CD34+细胞增殖的抑制作用.用流式细胞术检测上述培养的细胞上各种表型分子CD33、 CD13、 CD71、 CD19和CD3表达的变化和细胞周期的改变.结果: 11例MDS患者CD34+细胞的平均回收率为(75.4±5.2)%, CD34+细胞的纯度为(90.3±6.3)%.富集倍数为(83.1±12.5)倍.用MTT比色法检测表明, IL-15抑制CD34+细胞增殖的佳剂量为20 μg/L, 佳时间为8 d.将对照组及20 μg/L 的IL-15(实验组)分别与MDS患者的CD34+细胞共培养8 d, 进行细胞计数显示, 增殖倍数对照组为4.6倍, 实验组为6.3倍(P<0.05, n=5); 各祖细胞的集落形成率, 实验组均明显多于对照组.CD34+细胞上各种表型分子的表达率(除CD3外), 实验组均明显高于对照组.IL-15作用后, CD34+细胞的细胞周期中G1、S、G2期的比率均有明显变化, 与对照组相比较, 差异显著(P<0.05, n=7).结论: IL-15对MDS患者的CD34+细胞具有明显地促增殖和诱导分化的效应, 对MDS患者的治疗可能开阔了广大的前景.

  • 抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体可变区基因的克隆和序列分析

    作者:付建芳;黄威权;夏永娟;杨安钢

    目的: 克隆并分析抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体(mAb) VH及VL基因.方法: 从分泌抗溶藻弧菌独特型mAb的杂交瘤细胞株(AL1)中提取总RNA. 利用RT-PCR技术, 克隆抗溶藻弧菌独特型mAb VH和VL基因, 并将其重组入PMD18-T vector中进行测序分析.结果: VH基因序列全长为369 bp, 编码123个氨基酸; VL基因序列全长为339 bp, 编码113个氨基酸.通过国际联机检索及Kabat库分析, 二者均符合小鼠IgG V区基因的特征, 含有4个框架区(FR), 3个抗原互补决定区(CDR)及两个抗体特征性的半胱氨酸残基.结论: 抗溶藻弧菌独特型mAb的VH和VL基因的克隆成功, 为抗溶藻弧菌独特型mAb基因工程疫苗的构建奠定了基础.

  • 抗ARL-1单克隆抗体的制备及初步应用

    作者:单军;张建琼;金俊飞;马达;鲍海逊;缪凤琴;谢维

    目的: 制备抗醛糖还原酶相似蛋白(aldose reductase-like protein, ARL-1)的单克隆抗体(mAb)并进行初步应用. 方法: 用纯化的ARL-GST蛋白免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb.间接ELISA法、 Western blot及免疫组织化学染色法, 对mAb进行鉴定及初步应用.结果: 获得1株可稳定分泌抗ARL-1蛋白mAb的杂交瘤细胞系.mAb的Ig亚类为IgG2b, 轻链属于κ型.腹水mAb的效价为: 1∶ 4.096×105.Western blot的结果表明, ARL-1蛋白在被检测的肝癌组织中呈高表达, 而在相应的癌旁组织中不表达.免疫组织化学染色的结果表明, ARL-1蛋白在肝癌组织中呈高表达且主要定位在胞质内. 结论: 成功地制备1株抗ARL-1蛋白的mAb.初步应用的结果表明, ARL-1蛋白在肝癌组织中呈高表达, 为进一步研究ARL-1蛋白的功能, 以及其与肝癌的确切关系奠定了基础.

  • 土鳖虫对血瘀大鼠红细胞CR1活性及抗心磷脂抗体水平的影响

    作者:杨耀芳;王赛前;封美佳;宁爱华;黄昌辉

    目的: 研究土鳖虫(ESW)对地塞米松(Dex)加肾上腺素(Adr) 所致阴虚火旺慢性血瘀大鼠模型红细胞免疫功能和血清抗心磷脂抗体水平变化的影响.方法: 肌肉注射Dex(0.5 mg/kg)加Adr(0.84 mg/kg), 建立阴虚火旺慢性血瘀大鼠模型, 观察ESW对实验动物红细胞免疫黏附功能的影响.采用ELISA法检测血清抗心磷脂抗体(ACA)ACA-IgG、 ACA-IgA、 ACA-IgM的含量及血浆D-二聚体的含量.造模前后称体质量, 并取心、肝、脾、肺、肾及胸腺称质量, 计算脏器系数.结果: 肌肉注射Dex(0.5 mg/kg)加Adr(0.84 mg/kg)的大鼠, 随着"阴虚火旺"血瘀模型的建立, 大鼠红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)和红细胞肿瘤花环率(RBC-CaR)下降, 血清ACA-IgG、 ACA-IgA及ACA-IgM的水平明显升高, 血浆D-二聚体的含量明显升高; 体质量下降、脾脏及胸腺的质量减轻.ESW(5和10 mg/kg)能提高"阴虚火旺"血瘀大鼠红细胞C3b受体花环率和红细胞肿瘤花环率, 降低血清ACA-IgG、 ACA-IgA及ACA-IgM的水平, 降低血浆D-二聚体的含量, 增加脾脏的质量.结论: ESW具有提高阴虚火旺慢性血瘀模型大鼠免疫功能的作用, 抑制血清ACA水平, 降低血浆D-二聚体含量.为探讨血瘀症及活血化瘀的机制提供了新的思路和途径.

  • 抗KDR单链抗体的构建、表达及生物学活性鉴定

    作者:李容;熊冬生;许元富;邵晓枫;范冬梅;朱祯平;杨纯正

    目的: 构建并表达抗人血管内皮生长因子受体KDR单链抗体(scFv)蛋白, 并测定其生物学活性.方法: 设计合成抗KDR单抗(mAb)Ycom1D3 VH、VL引物, 通过重叠延伸拼接(splicing overlap extensive, SOE)PCR, 在VH和VL基因间引入柔性短肽(Gly4Ser)3, 构建抗KDR scFv基因并进行序列分析.将其克隆入pAYZH原核表达载体, 在大肠杆菌中诱导表达, 并以ELISA及免疫荧光结合实验测定重组蛋白的生物学活性.结果: 序列分析表明, 抗KDR scFv基因的全长为729 bp, 编码243个氨基酸.将重组体表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析显示, 融合蛋白的相对分子质量(Mr)约为30 000, 同预期的结果一致.表达产物主要以不溶性包涵体的形式存在, 表达量占菌体总蛋白的20%.表达产物经变性、纯化及体外复性后, 纯度达90%以上.ELISA和竞争性免疫荧光结合实验显示, 重组小分子scFv可与可溶性KDR抗原及表达KDR受体的人脐静脉内皮细胞特异性结合, 保留了亲本mAb的抗原结合活性.结论: 成功地构建了抗KDR scFv基因, 并在大肠杆菌中功能性表达, 为靶向诊断、 治疗及进一步基因工程改造奠定了基础.

  • 抗人CD3嵌合抗体基因的构建、表达及表达产物的初步功能研究

    作者:吕明;赖春宁;于鸣;郭宁;黎燕;沈倍奋

    目的: 构建并表达抗人CD3嵌合抗体, 以克服鼠源单克隆抗体(mAb)用于临床的局限性.方法: 采用基因工程技术, 将抗体VL、 VH基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VL Express及VH Express中.共转染COS-7细胞后, 用ELISA检测培养上清中嵌合抗体的表达水平; 采用Protein A亲和层析法纯化抗体, 并进行Western blot鉴定.用FACS检测嵌合抗体结合抗原的活性; 混合淋巴细胞培养检测抗体的功能.结果: 成功地构建了VH Express-VH及VL Express-VL表达载体并表达纯化. Western blot的结果显示, 表达的抗人CD3抗体为人鼠嵌合抗体. FACS的结果显示, 该抗体具有良好的结合抗原活性; 混合淋巴细胞培养结果显示, 该抗体具有一定的免疫抑制功能.结论: 成功地构建、表达了抗人CD3嵌合抗体, 为进一步的研究打下了基础.

  • 抗森林脑炎病毒单克隆抗体的制备及夹心ELISA的建立

    作者:宋宗明;郭新;岳立广;洪成龙;王伟;韩亮

    目的: 制备抗森林脑炎(TBE)病毒单克隆抗体(mAb), 建立夹心ELISA法检测森林脑炎病毒.方法: 以纯化的TBE病毒抗原加福氏佐剂, 免疫BALB/c小鼠, 制备鼠源性TBE病毒mAb.并用mAb建立夹心ELISA法测定病毒抗原的效价.结果: 获得了6株TBE病毒mAb杂交瘤细胞株, 它们均属于Ig亚类.mAb杂交瘤细胞培养液上清的效价为1×10-3~1×10-4; 腹水效价为1×10-6~1×10-7.结论: 获得的6株能特异性识别TBE病毒的mAb, 可用于免疫学检测, 为进一步研究TBE病毒的生物学性状奠定了基础.

  • 不同免疫方案制备抗HAb18G/CD147胞外区多克隆抗血清的比较

    作者:张思河;杨向民;邢金良;陈志南

    目的: 制备针对肝癌相关抗原HAb18G/CD147胞外区不同表位的抗血清, 比较不同免疫方案的免疫效果.方法: 以原核表达的GST-HAb18GEF融合蛋白、重组真核表达质粒pcDNA3/HAb18G及HCC细胞为免疫原, 分别采用蛋白常规免疫、 DNA肌肉免疫及pcDNA3/HAb18G-HCC booster(DNA-cell booster)免疫接种BALB/c小鼠.采用间接ELISA和细胞ELISA, 同时测定免疫血清中抗变性和天然HAb18GEF IgG抗体的滴度和Ig亚类.用Western blot检测各免疫方案制备的抗血清, 与变性HAb18GEF抗原结合的特异性.用免疫荧光法验证DNA-cell booster免疫接种法制备的抗血清, 与细胞膜上天然HAb18G抗原的结合特异性.结果: 以GST-HAb18GEF常规免疫后, 可诱导高滴度的IgG1抗体产生, 但针对的多为HAb18GEF的变性或线性表位; 以pcDNA3/HAb18G肌肉免疫后, 可诱导针对其天然表位的IgG2a抗体产生, 但滴度较低; 以DNA-cell booster免疫后, 可诱导中等滴度、针对其天然表位的IgG2a和IgG1抗体产生.结论: 不同免疫方案可诱导针对HAb18GEF不同表位、不同滴度的多克隆抗血清, 为淘筛针对其不同表位的多样性抗体奠定了基础.

  • SARS冠状病毒核衣壳蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备

    作者:王平;黄庆生;薛小平;雷迎峰;王海涛;任君萍;丁天兵;徐志凯

    目的: 表达SARS冠状病毒核衣壳蛋白(N蛋白), 并以表达产物为免疫原制备特异性单克隆抗体(mAb).方法: 采用RT-PCR方法, 从灭活的病毒抗原标本中扩增编码N蛋白的基因.测序确认后, 再亚克隆至原核表达载体中.从SDS-PAGE凝胶中回收原核表达产物后免疫BALB/c小鼠, 经融合、筛选制备特异性mAb.结果: 从标本中扩增出1 269 bp的DNA, 测序结果证实为N蛋白基因. 将该基因克隆至原核表达载体中后, 在大肠杆菌中获得了较好的表达.表达产物经SDS-PAGE后, 在Mr约为43 000处可见1条明显的诱导表达带.Western blot的结果表明, 该电泳带与SARS患者的恢复期血清呈特异的免疫反应.从SDS-PAGE凝胶中回收表达产物并免疫BALB/c小鼠, 制备出3株抗N蛋白的mAb.这些mAb与SDS-PAGE凝胶上Mr约为43 000的蛋白带也呈现很强的免疫反应.结论: 所获的重组N蛋白及特异性mAb, 将为进一步建立SARS病毒感染早期诊断的方法奠定了基础.

  • 人源抗SARS病毒噬菌体抗体库的构建及筛选

    作者:康晓平;熊伟;常国辉;祝庆余

    目的: 构建人源抗SARS病毒的Fab片段抗体基因的噬菌体表面呈现文库, 筛选抗SARS病毒特异性的噬菌体抗体.方法: 用PCR扩增人Fab片段抗体基因, 连入载体pComb3内, 构建噬菌体抗体库.以固相化的SARS抗原淘筛抗体库, 并用ELISA检测噬菌体抗体结合SARS病毒的特异性.结果: 用PCR共扩增出13条Ig基因片段. 电转化构建的噬菌体抗体库的库容为1.3×106, Fab基因的重组率为60%.以纯化的SARS抗原淘筛3轮, 特异性富集了抗SARS病毒的噬菌体抗体, 并用ELISA法从中筛选出了10个结合活性好、 特异性强的克隆.结论: 成功地构建了人源抗SARS病毒的组合抗体文库, 从中获得人源抗SARS病毒的特异性抗体.

  • HIV-1特异性CTL抗HIV-1感染的研究进展

    作者:王少扬;孙永涛

    目前全球大约有6千万人感染人免疫缺陷病毒(HIV), 其中95% HIV感染者集中在发展中国家, 每年有22万人因HIV感染而死亡.高效抗逆转录病毒疗法(HAART)虽能降低部分患者中的病毒含量, 延缓病情发展, 改善症状, 但因费用高、 药物副作用大使许多患者难以耐受, 也不能为大多数患者接受(特别是发展中国家患者), 更为重要的是HAART不能完全清除病毒[1].所以, 寻找有效HIV疫苗是目前迫切需要解决的问题.研究疫苗的首要步骤, 是了解HIV感染过程中机体抗HIV的免疫机制.目前已有大量证据证明, HIV特异性细胞毒性T细胞(CTL)在控制HIV感染的发病中起着关键作用, 故对其深入研究对于开发有效的HIV疫苗十分重要[2].我们对HIV特异性CTL在HIV感染中的作用以及HIV的免疫逃避机制进行了综述.

    关键词: HIV CTL HLA-I
  • 记忆T细胞与持续性丙型肝炎病毒感染

    作者:杨江华;孙南雄

    丙型肝炎是一种世界范围内的疾病, 目前全世界大约有2亿丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)感染者.HCV感染的显著临床特点是, 80%以上的急性患者可转变为慢性持续性感染, 而慢性HCV感染又是肝硬化和原发性肝细胞癌的重要病因[1].HCV感染慢性化的机制仍不清楚.目前研究认为, 可能与HCV的基因型及易变异的生物学特点等相关.在宿主方面, 有研究表明与不同种族、个体的遗传背景等因素有关[2,3].

  • 胰岛素对心肌缺血再灌注大鼠血清TNF-α及IL-10的双向作用

    作者:李嘉;张海锋;楠英;肖瑞平;高峰

    目的: 观察胰岛素在急性心肌缺血/再灌注(MI/R)病理过程中, 对血清TNF-α及IL-10的影响, 并探讨胰岛素在此病理过程中是否具有抗炎作用.方法: 常规制备大鼠MI/R(30 min/3 h)模型.随机分为以下4组: (1)假手术组; (2)MI+生理盐水组; (3)MI+GIK(250 g/L葡萄糖、60 U/L胰岛素及80 mmol/L KCl)组; (4)MI+GK(250 g/L葡萄糖及80 mmol/L KCl)组.观察各组大鼠再灌注后30 min、1 h、及3 h 血清TNF-α和IL-10的水平.结果: MI/R损伤可引起大鼠血清TNF-α和IL-10水平增加.与生理盐水组相比较, 再灌注后1 h、3 h时GIK降低血清TNF-α的水平, 升高IL-10的水平(n=8, P均<0.05); 而仅输注GK对血清TNF-α及IL-10的水平则无显著影响.结论: GIK中的胰岛素不仅可减少MI/R病理过程中促炎细胞因子TNF-α的产生, 还可促进抗炎细胞因子IL-10的产生, 而发挥抗炎作用, 提示胰岛素具有保护MI/R心肌抗炎作用的新机制.

  • 纳米乳剂的制备及特性鉴定

    作者:孙玉静;吴道澄;曹云新;隋延仿

    目的:制备包裹BSA-FITC的纳米乳剂(NEBSA-FITC),研究其特性以及树突状细胞(DC)和巨噬细胞对其摄取的效率.方法: 采用界面聚合法,制备包裹BSA-FITC的纳米乳剂(NEBSA-FITC),于电镜下观察其形态并测量其粒径.用凝胶层析法检测纳米乳剂的包裹率、载药量及稳定性.将小鼠骨髓DC及腹腔巨噬细胞与NEBSA-FITC共育后,用流式细胞仪检测DC及腹腔巨噬细胞摄取NEBSA-FITC的阳性率.用激光共聚焦显微镜观察DC摄取NEBSA-FITC的能力.结果:成功地制备出粒径为(25±10)nm的纳米乳剂, 其包裹率为91%,载药量为0.091 g/L, 于4℃放置6个月后性质稳定.流式细胞仪检测显示, DC和腹腔巨噬细胞摄取NEBSA-FITC的能力明显强于对游离BSA-FITC的摄取.激光共聚焦显微镜下观察到DC可摄取NEBSA-FITC.结论: 纳米乳剂具有良好的包裹率和载药量, 可有效地增强抗原递呈细胞对所载药物的摄取,有望作为肿瘤抗原疫苗的新型载体.

  • 醋酸舍莫瑞林拮抗环磷酰胺免疫抑制作用的实验研究

    作者:张李峰;马兴铭;刘燕玲;尹少甫

    醋酸舍莫瑞林(sermorelin acetate,SA)是人工合成的由29个氨基酸组成的生长激素释放素,为内源性促生长激素释放激素(GHRH)的氨基末端片段, 具有显著的调节生长的效应[1,2],其相对分子质量(Mr)为3 358.03.

  • 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定

    作者:王志杰;张华;陈学良;金文睿;丛雅琴;韩波;谷燕

    目的: 建立一种新的单细胞内IFN-γ的检测方法毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法(CEIA-LIF).方法: 选2例重型再障(sever aplastic anemia, SAA)患者及1例正常人, 用免疫磁珠法分离纯化外周血CD8+ T细胞.将其与毛地黄皂苷反应15 min, 再与FITC-抗IFN-γ单抗(mAb)反应20 min.用CEIA-LIF法进行单个细胞的连续检测, 并用倒置显微镜及激光扫描共聚焦荧光显微镜等证实本法的可行性.结果: 纯化的CD8+ T细胞内的IFN-γ, 是在不溶膜的情况下得到全部检测.2例SAA患者外周血单个CD8+ T细胞内IFN-γ的含量, 分别为(151.53±28.92)zmol和(223.72±45.23)zmol, 高出正常对照(47.47±17.97)zmol约3~4倍(P<0.01).结论: CEIA-LIF法对单个CD8+ T细胞内IFN-γ含量的测定是可行的, 有望用于临床检测.

  • 帕金森病大鼠同种异体脑内移植免疫反应的实验研究

    作者:韩洋;曾水林;王磊;雷志年

    目的: 观察帕金森病(Parkison' s disease, PD)模型大鼠同种异体脑内移植是否存在免疫反应以及免疫反应的特点.方法: 取新生SD大鼠腹侧中脑(ventral mesencephalon, VM)组织制成单细胞悬液, 借助脑立体定位仪移植到SD大鼠PD模型的纹状体内, 于2、 4、 6 wk时采用行为学检测后分批处死, 再行HE、酪氨酸羟化酶(TH)和MHCⅡ抗原免疫组化染色.结果: PD模型移植组2 wk时, MHCⅡ表达明显增高(P<0.05), 4 wk时开始下降, 6 wk以后消失; 2 wk时移植区可见少量TH阳性神经元, 4~6 wk数量显著增加(P<0.05).假手术组在2 wk时见少量MHCⅡ阳性细胞(P>0.05), 4 wk时消失, 各时间点都未见TH阳性神经元; 对照组在各时间点都未见TH阳性神经元和MHCⅡ阳性细胞.各实验组各时间点行为学检测无明显改变(P>0.05).结论: 同种异体脑内移植是存在免疫排斥反应的, 这种反应可能是由MHCⅡ抗原不同而诱发的, 免疫反应与移植物内TH神经元的存活和发育密切相关, 同种异体脑内移植加用免疫抑制剂还是必要的.

  • 一种高度敏感检测TNF的磁分离酶联免疫法

    作者:王东琳;刘雪松;李琦;宋朝君;刘振世;谢晶;金伯泉

    肿瘤坏死因子(TNF)是一种单核因子, 主要由激活的单核和巨噬细胞产生, 具有杀伤或抑制肿瘤细胞, 促进T细胞、 B细胞的增殖,参与炎症反应和免疫调节等多种生物学效应.TNF产生异常与多种疾病有关, 如类风湿性关炎和系统性红斑狼疮等[1], 患者血清TNF的水平均升高,因此, 定量检测体液中TNF的水平, 已成为临床上常用的免疫学检测指标.

  • 体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的定向分化及其鉴定

    作者:郑朝晖;朱平;王彦宏;樊春梅;丁进;尚鹏

    目的: 体外诱导骨髓间充质干细胞(MSC)向软骨细胞定向分化, 并对分化后的细胞进行鉴定.方法: 由健康成人骨髓中分离出MSC, 取第3代细胞进行实验.鉴定后, 将微小细胞团在TGF-β1、地塞米松(Dex)及维生素C(Vit C)等诱导下分化.14 d后, 细胞团经石蜡包埋、切片及HE染色后, 进行甲苯胺蓝染色及II型胶原(Col II) 的免疫组化染色.采用Western blot和RT-PCR, 分别检测诱导前后MSC中Col II及前Col II mRNA的表达.结果: HE染色显示, 诱导后细胞呈软骨细胞样形态; 甲苯胺蓝及Col II染色的细胞外基质呈阳性.Western blot和RT-PCR的结果显示, 诱导分化后的MSC可表达Col II和前Col II的mRNA.结论: MSC在TGF-β1、 Dex及Vit C等诱导后, 可分化为软骨细胞.

  • 体外诱导扩增大鼠树突状细胞及其特性鉴定

    作者:王云甫;孙圣刚;何国厚;陈吉相;杨敬宁;李罗清;曹学兵;吴雄文

    目的: 体外诱导和扩增大鼠骨髓树突状细胞(DC)的方法, 并进行生物学特性鉴定. 方法: 将大鼠骨髓细胞培养48 h后, 去除悬浮细胞, 加入IL- 4和GM-CSF培养2 wk.在光镜和透射电镜下观察培养的DC的形态学特征.应用流式细胞仪检测DC表面分子MHC-Ⅱ类分子、 B7-1、 B7-2的表达水平.将DC与同种异体T细胞混合培养, 采用MTT比色法测定不同细胞密度的DC刺激同种T细胞增殖的能力.结果: 培养的DC胞浆突起大而长, 呈树突状, 具有DC的典型形态.培养2 wk的DC表面MHC-Ⅱ类分子表达的阳性率为74.2%, B7-1、 B7-2分别为81%、 76%.培养的DC具有明显刺激同种异体T细胞增殖的能力.结论: 将大鼠骨髓细胞经贴壁去除悬浮的细胞, 加入IL- 4和GM-CSF培养, 可获得足量、较高纯度的DC, 为研究DC的功能奠定了基础.

  • 小鼠对HIV-2 gp105核酸疫苗免疫应答的研究

    作者:李子健;金宁一;江文正;张立树

    目的: 探讨HIV-2 gp105基因核酸疫苗在小鼠体内的免疫应答, 为开发HIV-2 核酸疫苗提供实验依据. 方法: 将HIV-2外膜蛋白(gp105)基因插入真核表达质粒载体pVAX1中, 构建pVAX1-gp105重组表达质粒. 将其肌注免疫BALB/c小鼠, 用ELISA法检测小鼠血清抗HIV-2抗体, 用流式细胞仪测定CD4+、 CD8+ T细胞亚群数, 以乳酸脱氢霉释放法检测脾特异性CTL的杀伤活性.结果: 重组质粒pVAX1-gp105免疫组小鼠的血清抗体滴度、脾 T细胞亚群的数量及特异性CTL的杀伤活性, 均明显高于对照组, 分别为P<0.01, P<0.05和P<0.01.结论: HIV-2 gp105核酸疫苗能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫.

  • 腺病毒介导CTLA4Ig和Iκ-Bα双基因在ECV304细胞中的表达

    作者:李宁;袁育康;吴军

    目的: 通过制备细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA4Ig)和核因子的抑制蛋白(Iκ-Bα)双基因共表达腺病毒载体, 检测重组腺病毒在ECV304细胞中的表达. 方法: 将Iκ-Bα和CTLA4Ig通过内部核糖体进入部位(IRES2)连接, 并以基因重组的形式插入腺病毒表达载体, 构建重组腺病毒, 检测 Iκ-Bα和CTLA4Ig在ECV304细胞中的蛋白表达情况及其对炎症介质TNF的调控效应.结果: (1)构建pAdTrack-CMV-CTLA4Ig-IRES2-IκBα, 与pAdEasy在BJ5183重组后转染293, 获得重组腺病毒.(2)PCR鉴定重组腺病毒正确.(3)用重组腺病毒感染体外培养的ECV304后, 该腺病毒可表达Iκ-Bα蛋白及CTLA4Ig蛋白, 且可以下调LPS攻击后TNF-α的产生. 结论: 构建人CTLA4Ig, Iκ-Bα双基因共表达腺病毒载体, 可以有效的抑制炎症因子的表达, 为进一步的CTLA4Ig免疫耐受基因治疗中的抑制, 因NF-κB的过度激活而产生的炎性反应提供研究基础.

细胞与分子免疫学分期目录
期数
2018 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2015 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
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2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2006 01 02 03 04 05 06
2005 01 02 03 04 05 06 z1
2004 01 02 03 04 05 06
2003 01 02 03 04 05 06
2002 01 02 03 04 05 06
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2000 01 02 03 04 05 06
1999 01 02
1995 01 02 03
1994 01 02
1993 01 02 03 04
1992 01 02 03 04
1991 01 02 03 04
1990 01 02
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