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细胞与分子免疫学

细胞与分子免疫学杂志

Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 影响因子: 0.81
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1007-8738
  • 国内刊号: 61-1304/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 52-184
  • 曾用名: 单克隆抗体通讯
  • 创刊时间: 1985
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《细胞与分子免疫学杂志》编辑部
  • 出版地区: 陕西
  • 主编: 杨安钢
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • p53基因249M和273H突变在肝癌细胞系HepG2中与热休克蛋白70定位关系的研究

    作者:刘振锋;王茜;杨守京

    目的:定点突变合成p53基因突变子,构建绿色荧光蛋白表达载体,进而观察其在HepG2细胞中与内源性热休克蛋白70的共定位关系.方法:以野生型p53为模板,采用PCR体外定点突变技术通过重叠延伸法2次PCR扩增得到目的基因片段,进一步将其克隆到绿色荧光蛋白载体pEGFP-C3中.将构建好的载体转染到HepG2 细胞中,利用免疫荧光染色法检测内源性热休克蛋白70的表达,利用荧光显微镜观察hsp70与p53的共定位关系.结果:测序结果显示片段插入正确,在预期位点发生了点突变,249位氨基酸由AGG突变为AGC,273位氨基酸由CGT突变为CAT.载体成功构建.转染后观察到热休克蛋白70与273H p53共同定位于肝癌细胞系HepG2的胞质,而wt p53与249M p53均定位于细胞核.结论:热休克蛋白70与不同点突变的p53在肝癌细胞系HepG2中的共定位关系与之前我们在肝癌组织中发现的hsp70与p53共定位关系不同,这些提示在hsp70与p53的共定位关系和相互作用上存在某种尚未阐明的机制.

  • Myostatin基因疫苗动物免疫效果的初步研究

    作者:吴守振;陈素兰;贺丽清;张阔;唐量;秦鑫;张英起

    目的:检测Myostatin基因疫苗的免疫效果,观察其对免疫动物的影响,为Myostatin基因疫苗的应用提供实验研究.方法:以Myostatin基因疫苗pVAC-TT-Ms免疫小鼠,ELISA法测定其免疫小鼠血清的抗体滴度,通过全自动生化分析仪检测血清指标.以组织化学染色(HE)染色检测Myostatin基因疫苗对免疫小鼠骨骼肌的影响.利用Scion Image 4.02 分析Myostatin基因疫苗对免疫小鼠肌纤维横截面积的影响.结果:基因疫苗Myostatin能够诱导小鼠产生针对Myostatin的抗血清.与正常对照组比较,基因疫苗pVAC-TT-Ms免疫的动物平均体重增加了9.8%,股四头肌、腓肠肌和胸大肌分别增加了24.1%、10.9%和20.3%.结论:基因疫苗Myostatin能够诱导小鼠产生针对Myostatin的特异性中和抗体.Myostatin基因疫苗免疫的动物体重增加,肌细胞有肥大现象,肌肉质量明显增加.

  • 胶原诱导的关节炎小鼠脾脏单个核细胞TLR8的表达及其与相关细胞因子的关系

    作者:毛飞;许文荣;钱晖;朱伟;严永敏;高硕;许化溪

    目的:观察Toll样受体8(TLR8)在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达及其与IL-10等细胞因子表达的关系.方法:12只DBA/1J小鼠随机分成造模组和阴性对照组.造模组小鼠采用鸡Ⅱ型胶原诱导,在诱导后的第27天出现关节红肿时处死所有小鼠.用ELISA测定小鼠外周血的TNF-α,HE染色观察小鼠关节的炎症变化,Real-time PCR检测脾脏单个核细胞表达IL-10、IL-17A、IL-1β及TLR8的水平.结果:HE染色结果显示,造模组小鼠关节部位与阴性对照组相比出现明显的炎症细胞浸润;造模组小鼠的外周血血清TNF-α水平较阴性对照组明显升高(P< 0.01);模型小鼠脾脏单个核细胞表达IL-10、IL-17A、TLR8和IL-1β的水平也明显高于阴性对照组(P<0.01或P<0.05).相关性分析表明,TLR8的表达与IL-10的表达呈负相关(r=0.945;P<0.01),而与IL-17A、IL-1β无明显相关性(P>0.05).结论:TLR8在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达水平明显升高.尽管IL-10的表达水平也高于对照组,但其与TLR8的表达呈现明显负相关.

  • HIV-1 pol抗原HLA-A*0201限制性低亲和性CTL表位预测及改造分析

    作者:黄豫晓;李英辉;赵亚;韩荣霞;刘忠湘;毛张翔;薛采芳

    目的:初步筛选HIV-1 pol抗原的HLA-A*0201 限制性低亲和性CTL表位,预测并初步鉴定修饰后的表位与HLA-A*0201之间亲和性的变化.方法:采用超基序、蛋白酶解、HLA结合力等预测相结合的办法筛选HLA-A*0201限制性低亲和性CTL表位,通过氨基酸置换适当修饰,并以T2细胞检测HLA-A*0201分子与肽的亲和力和稳定性来评价修饰后表位.结果:筛选出的低亲和性CTL候选表位,经修饰后与HLA-A*0201 之间的亲和性均有不同程度的提高.其中,YVSLSFPQI (pol52-60Y1),YVSQIIEQL(pol673-681Y1),YIQKETWEA(pol548-556Y1)HLA-A*0201呈高亲和力结合,同时肽-HLA-A*0201复合物半数解离时间(Dissociation Complex50,DC50)均大于8 h.结论:预测的pol抗原表位经过修饰可能会成为潜在的HLA-A*0201限制性表位.

    关键词: HIV-1 CTL 表位
  • PTD-HBcAg融合蛋白经树突状细胞诱导特异性CTL抑制HBV的体外研究

    作者:陈小华;潘庆春;余永胜;汤正好;臧国庆

    目的:探讨经PTD-HBcAg融合蛋白致敏的树突状细胞(DCs)体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTLs)对HBV的抑制作用.方法:体外分离培养小鼠髓源性DC,加入融合蛋白刺激DC成熟后与T淋巴细胞共培养,ELISA 法检测T淋巴细胞上清中IL-2、IL-4、IL-10和INF-γ的分泌水平,流式细胞术检测胞内细胞因子水平,乳酸脱氢酶释放试验检测特异性CTL活性,并对HepG2.2.15细胞上清中HBsAg及HBV DNA水平进行检测.结果:经不同融合蛋白刺激的DCs能有效促进T淋巴细胞的细胞因子分泌,同时融合蛋白PTD-HBcAg组中IL-2(552.7±117.5 ng/L)和INF-γ(150.6±7.945 ng/L)明显高于HBcAg组中IL-2(420±12.47 ng/L)和INF-γ(107.5±12.19 ng/L)分泌.流式细胞计数术检测的PTD-HBcAg融合蛋白诱导CTL细胞水平明显高于对照组.经PTD-HBcAg融合蛋白诱导的CTL比HBcAg有明显的特异性杀伤作用(P<0.05),同时对HBsAg及HBV DNA水平有明显的抑制作用.结论:经PTD-HBcAg融合蛋白致敏的DCs能有效刺激T淋巴细胞分泌细胞因子及增加细胞毒T淋巴细胞的表达,并增强特异性CTL活性及对HepG2.2.15细胞上清中HBsAg及HBV DNA水平的抑制.

  • 脂肪分化相关蛋白在巨噬细胞和泡沫细胞中的表达

    作者:宋越;李航;张丽英;叶菁;李青

    目的:观察脂肪分化相关蛋白(ADRP)在单核细胞向巨噬细胞和泡沫细胞分化过程中的表达变化.方法:体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞和泡沫细胞,应用Real time RT-PCR和Western blot测定ADRP在基因水平和蛋白水平的表达.结果:单核细胞分化为巨噬细胞时ADRP的表达水平无明显变化,当进一步分化为泡沫细胞时,ADRP的mRNA和蛋白表达水平均显著增加.结论:单核细胞向巨噬细胞分化时对ADRP的表达无影响,而由巨噬细胞进一步向泡沫细胞分化时ADRP的表达升高.

  • IPS-1基因缺失突变体对IFN-β诱生作用及抗HSV-1病毒作用的影响

    作者:马安;肖建华

    目的:初步研究缺失300-444位氨基酸突变体△IPS-1对IFN-β诱生作用及抗HSV-1病毒作用的影响,进而确定该部位对IPS-1发挥正常功能的作用.方法:通过重叠延伸PCR法获得缺失300~444位氨基酸的△IPS-1,构建突变重组质粒pEF-BOS-FLAG-△IPS-1,并经酶切及测序鉴定.采用磷酸钙体外转染HEK293T真核细胞.经Western blot检测蛋白的表达;ELISA检测细胞上清中IFN-β分泌量;HSV-1病毒感染分别转染了pEF-BOS-FLAG/IPS-1、pEF-BOS-FLAG/△IPS-1质粒的HEK293T细胞,空斑检测各转染细胞组不同时间段细胞上清的病毒滴度.结果:成功构建了缺失300~444位氨基酸的IPS-1基因重组真核表达载体pEF-BOS-FLAG/△IPS-1;与转染pEF-BOS-FLAG/IPS-1质粒组相比转染了pEF-BOS-FLAG/△IPS-1的细胞在不同时间段其上清中IFN-β分泌量有一定量的减少;空斑测定结果表明转染了pEF-BOS-FLAG/△IPS-1质粒组细胞中病毒滴度明显高于pEF-BOS-FLAG/IPS-1质粒组.结论:△IPS-1与IPS-1相比能使HEK293T细胞IFN-β分泌量明显减少,△IPS-1不能完全抑制HSV-1感染细胞产生的细胞病变效应,该突变体抗HSV-1病毒作用有一定程度的减弱.

    关键词: IPS-1 △IPS-1 IFN-β CPE
  • 橙皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响

    作者:周玉英;曾耀英;黄秀艳;宋兵

    目的:研究橙皮素(Hes)对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并探讨其作用机制.方法:用ConA刺激小鼠淋巴结来源的淋巴细胞,以不同终浓度Hes与T细胞共培养,利用荧光标记抗体双染色结合流式细胞术(FCM),检测各药物浓度Hes对ConA诱导的小鼠T细胞表达早期活化抗原CD69的作用;以酶标仪结合MTT比色法检测Hes药物的细胞毒性和对ConA诱导的小鼠淋巴结来源的淋巴细胞增殖的影响;以羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色结合FCM检测Hes对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的作用,并应用ModFit软件分析其增殖指数(PI).结果:淋巴细胞的存活率说明0.2 mL/L DMSO和25~75 μmol/L范围内的Hes对小鼠T淋巴细胞无毒副作用;MTT法、CFDA-SE法、双抗体染色法检测Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化结果均显示,终浓度为25、50、75 μmol/L的Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化均有抑制作用且呈剂量依赖关系.结论:有望通过进一步的研究将Hes发展为免疫抑制药物.

  • LY333531对高糖所致心肌微血管内皮细胞通透性上调的拮抗作用

    作者:尹志勇;魏丽萍;郝媛媛;张荣庆;李聪叶;王海昌

    目的:观察LY333531对高糖所致心肌微血管内皮细胞通透性上调的拮抗作用,并探讨其机制.方法:将分离培养并鉴定后的大鼠心肌微血管内皮细胞分为正常组,高糖组(葡萄糖浓度25 mmol/L),高糖(葡萄糖浓度25 mmol/L)+LY333531(10 μmol/L)组,高糖(葡萄糖浓度25 mmol/L)+生理盐水组,通过离体血管通透性检测试剂盒检测单层细胞通透性,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫荧光和Western blot法检测PKCβⅡ的表达.结果:与正常组比较,高糖组单层细胞通透性明显上调(400.0±20.00 vs 223.3±25.17;P<0.01),凋亡率升高(55.00%±5.000% vs 2.333%±1.155%;P<0.01),PKCβⅡ的表达增加(0.4767±0.07506 vs 0.1733±0.02082;P<0.01);LY333531可明显降低PKCβⅡ的表达(0.2800±0.070 vs 0.4767±0.07506;P<0.01)并拮抗上述病理性通透功能上调(360±17.32 vs 400.0±20.00;P<0.05)和凋亡率升高(25.00%±5.000% vs 55.00%±5.000%;P<0.01),而生理盐水对细胞通透性、凋亡率和PKCβⅡ表达的影响不明显.结论:高糖损害心肌微血管内皮细胞的通透功能,LY333531可拮抗此损伤作用.

  • 脂肪储存小滴蛋白5基因的克隆与原核表达

    作者:刘芳;李青;叶菁;张静;张丽英;李烦繁;李航;谷雨

    目的:克隆脂肪储存小滴蛋白5(LSDP5)基因,并在大肠杆菌中表达.方法:利用PCR技术从小鼠肝脏cDNA中扩增LSDP5基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行测序.同时,通过疏水性和二级结构分析,将LSDP5的片段克隆到原核表达载体pEGX-4T-1,构建GST融合表达质粒pEGX-LSDP5,在大肠杆菌BL21中进行表达.结果:成功地克隆了LSDP5基因,DNA测序证实,与GenBank公布的序列一致.含LSDP5片段的pGEX-LSDP5基因表达质粒在大肠杆菌经IPTG诱导后,能够表达相对分子质量(Mr)40 000的融合蛋白.结论:获得了LSDP5全长基因,成功构建了原核表达质粒pEGX-LSDP5,并在大肠杆菌中得到表达,为其相关研究奠定了一定的基础.

  • 肝X受体激动剂对脂多糖诱导的炎症反应相关因子IRAK-4和NF-κB的影响

    作者:王丁;苗春木;龚建平

    目的:观察在枯否细胞中人工合成的肝X受体激动剂在脂多糖(LPS)诱导的炎症反应中,对白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)和核因子NF-κB的影响.方法:雄性昆明小鼠,用胶原酶原位灌注法分离和培养肝脏Kupffer细胞,获得的细胞随机分为正常对照组、 LPS处理组、 LXR人工合成激动剂T0901317处理组和LPS+T0901317共同处理组.实时-聚合酶链式反应和蛋白Western blot检测各组细胞LXR、 IRAK-4和NF-κB的 mRNA和蛋白表达水平;凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活性水平.结果:LXR mRNA和蛋白在T0901317组表达都是高的,而在LPS处理组低.IRAK4和NF-κB的mRNA和蛋白水平在LPS处理组高,联合处理组要低于LPS处理组.NF-κB的活性在LPS高,联合处理组和T0901317处理组都较LPS组降低.结论:LXR激动剂能有效的上调LXR基因和蛋白水平,同时抑制TLR4信号通路中IRAK-4和NF-κB的mRNA水平和蛋白表达水平,并且能抑制NF-κB的活化.

  • 肾细胞癌中IGF-IR和COX-2的表达及相关性以及与细胞增殖关系的研究

    作者:孙航;王禾;秦卫军;杨波;王苏春;简百录

    目的:探讨胰岛素样生长因子-1受体(IGF-IR)基因表达与环氧化酶2(COX-2)表达的关系,以及两者与肾细胞癌增殖能力的关系.方法:采用免疫组化法检测64例肾细胞癌中IGF-IR、COX-2和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:IGF-IR和COX-2的表达阳性检测率分别为60.9%和51.6%.IGF-IR和COX-2的阳性表达与肾细胞癌肿瘤大小、临床分期相关,与组织学分类无关,IGF-IR表达与病理分级相关,COX-2与病理分级无关.IGF-IR表达与COX-2及PCNA表达呈正相关,COX-2与PCNA表达无相关性.结论:IGF-IR和COX-2基因在肾细胞癌的发生、发展中可能起着协同的作用.它们的检测可能对肾细胞癌恶性程度的判定、预后和进一步治疗提供有用的依据.

  • Eotaxin处理的黑色素瘤小鼠的肿瘤组织及细胞因子研究

    作者:叶顺兰;马兴铭;邓英

    目的:探讨嗜酸性粒细胞(EOS)趋化因子局部注射后观察小鼠的肿瘤生长情况,肿瘤组织细胞因子的变化.推测EOS和肿瘤之间的相互关系.方法:用BALB/c小鼠建立黑色素瘤小鼠模型,并在种瘤部位附近局部注射eotaxin(EOS趋化因子,100 μg/L),隔天注射1次.于第16天处死小鼠,取其肿瘤组织做HE染色,观察肿瘤组织局部形态结构的变化.以放射免疫法检测黑色素瘤小鼠血清以及肿瘤组织匀浆中TNF-α和IL-10的含量.结果:(1)非EOS趋化因子组和EOS趋化因子组肿瘤称重显示组间无统计学意义.(2)HE染色显示,EOS趋化因子组镜下观察到在肿瘤组织间质周围可见大量的坏死组织和炎症细胞浸润,在肿瘤组织内有较多嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞浸润.而在非EOS趋化因子组肿瘤组织内及周围EOS浸润较少,巨噬细胞也较少.(3)放射免疫法结果显示EOS趋化因子处理组肿瘤组织匀浆中TNF-α、IL-10含量明显高于非EOS趋化因子处理组肿瘤组织匀浆中TNF-α、IL-10含量.而血清中两个组的TNF-α、IL-10含量无明显差别.结论:用EOS趋化因子局部注射后,在肿瘤组织中EOS和巨噬细胞浸润明显增加,EOS对肿瘤生长无明显抑制作用.

  • 载TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体体外肿瘤细胞抑制的研究

    作者:薛敦;何剪太;彭健;赵劲风;张阳德

    目的:研究载TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体体外肿瘤细胞抑制特性.方法:以RT-PCR方法鉴定其在各细胞系中mRNA水平上的表达状况.采用MTT法研究载TK基因纳米颗粒体外抑制肿瘤细胞的生长作用.结果:PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体能有效的转染pAFP-TK进入AFP阳性的HepG2细胞,并在细胞内得以正常表达.MTT法显示,AFP阳性的细胞在转染pAFP-TK后对GCV的敏感性大大提高,细胞存活率明显下降.结论:PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体能高效转染pAFP-TK质粒进入细胞,并在AFP阳性肝癌细胞中获得特异性表达,加用GCV后,还可高效杀伤AFP阳性肝癌细胞.

  • 哮喘急性发作期患儿外周血Th17水平及其功能初步研究

    作者:陈杰华;刘恩梅;陈坤华;何云;邓昱;谢晓虹;李欣;王莉佳

    目的:观察哮喘急性发作期患儿外周血Th17水平和功能状态,初步探讨Th17在儿童哮喘发病中的作用.方法:以正常儿童(对照组,n=20)为对照,流式细胞术(FCM)检测哮喘急性发作期患儿(哮喘组,n=26)外周血Th17以及Th1,Th2细胞百分率,ELISA方法检测外周血单个核细胞(PBMC)体外培养上清IL-17,IFN-γ以及血浆IL-17,IL-23,IgE水平.结果:(1) 哮喘组和对照组外周血CD4+T中CD4+IL-17+T比例[(1.25±0.66)% vs (1.27±0.66)%(P>0.05)];CD4+IL-4+T比例[(2.40±2.55)% vs(2.52±1.26)%(P>0.05)];两组比较无统计学意义.哮喘组CD4+IFN-γ+T比例低于对照组[15.79±7.48 vs 24.10±12.70(P<0.05)].(2) PHA活化的PBMC体外培养72 h上清中,哮喘组IL-17水平为17.53(0~245.57)ng/L,低于对照组101.74(25.12~500.60)ng/L(P<0.01);IFN-γ水平与对照组比较无统计学意义[3507±2788 ng/L vs 3027±2737 ng/L];两组血浆中IL-17均<2 ng/L,IL-23均<15 ng/L.(3) 哮喘组血浆总IgE 499.26(2.3~945.1)IU/mL,高于对照组54.57(1.7~318.26)IU/mL(P<0.001);IgE阳性(>150 IU/mL)和阴性(<150 IU/mL)哮喘患儿体外PBMC培养上清中IL-17,IFN-γ水平比较无统计学意义.结论:哮喘急性发作期患儿外周血Th1细胞以及PHA活化的IL-17表达水平降低,Th1水平和Th17功能异常的机制及其在儿童哮喘发病中的作用值得进一步研究.

    关键词: 哮喘 Th17 IL-17 IL-23 IgE
  • 黄芪对反复呼吸道感染患者体内SIL-2R、IL-8及Ig的影响

    作者:聂琼芳;易屏

    目的:探讨黄芪治疗反复呼吸道感染(RRI)过程患者体内白介素-2 受体(SIL-2R)、白介素-6(IL-6) 和免疫球蛋白(Ig) 的变化.方法:将60例RRI患者随机分为2组,2组均给予抗感染及对症治疗,治疗组在此基础上加用黄芪注射液治疗,采用双抗体夹心ELISA 法测定60例RRI患者血清SIL-2R 和IL-6;速率散射比浊法测定Ig.结果:RRI患者SIL-2R,IL-8水平明显高于正常组(P<0.01),Ig 水平低于正常组,治疗后2组SIL-2R、IL-8均下降(P<0.05),两组间比较有统计学意义(P<0.05),治疗前后,治疗组Ig水平明显上升,对照组则无明显变化,两组比较有统计学意义(P<0.01).结论:SIL-2R、IL-8及Ig参与了RRI 的免疫发病机制,黄芪可提高RRI患者的免疫力.

  • hTERT、c-myc、Ki-67在肝癌组织中的表达及意义

    作者:范永卫

    目的:探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)、c-myc、Ki-67与肝癌临床病理特征的关系以及3个因子之间的相互关系.方法:采用免疫组织化学方法检测37例肝癌组织、5例正常肝组织中hTERT和c-myc、Ki-67的表达,并进行对比研究.结果:肝癌组织中hTERT、c-myc、Ki-67阳性表达率明显高于正常肝脏组织,差异均具有统计学意义(P<0.05);hTERT、c-myc、Ki-67在肝癌组织中的表达强度均与年龄、性别、转移及肿瘤体积无关(P>0.05),而三者表达强度均随肝癌组织学分化程度下降而明显增强;hTERT的表达强度分布与c-myc表达强度分布不相关;hTERT与 Ki-67的表达强度相关,随hTERT表达强度增加,Ki-67强度随之增加;c-myc与Ki-67的表达强度相关,随c-myc表达强度增加,Ki-67表达强度随之递增.结论:hTERT、c-myc、Ki-67的高表达在肝癌的发生发展过程中起重要作用;三者在肝癌组织中的表达关系密切.

  • 重症肌无力患者胸腺组织CMTM8、CKLF1及相关趋化因子的表达

    作者:李倩如;杜英;赵航;高峰;张清勇;张钦宪

    目的:比较重症肌无力(MG)患者与非自身免疫对照组胸腺组织CMTM8、CKLF1、相关趋化因子及受体的表达,为揭示MG胸腺异常及其发生机制提供理论依据.方法:用基因芯片筛选差异表达的趋化因子基因,采用RT-PCR和实时荧光定量PCR方法分别检测正常胸腺和MG胸腺中CMTM8 mRNA的表达,用免疫组织化学方法对CKLF1蛋白的表达和分布进行检测.结果:增生型MG 胸腺组织中CMTM8 mRNA的表达明显高于正常人胸腺(2-△△Ct=8.3),差异有统计学意义;CKLF1蛋白在正常胸腺、MG胸腺中的均有广泛的表达,阳性细胞主要为胸腺基质细胞;CXCR6、CCL2、CCL8、 CX3CL1、CXCL10和CCR1在 MG患者胸腺表达水平显著低于对照组;CCL22、CCL3、CXCL12、CCR5、CCR7和CCR9基因在MG患者胸腺表达水平显著高于对照组.结论:CMTM8及多种趋化因子基因在增生型MG胸腺的表达明显高于对照组胸腺,可能在MG患者T细胞异常发育的某些阶段起重要作用.

  • RNAi沉默VEGF的表达及其治疗肺癌的初步研究

    作者:张泳;谷仲平;周勇安;王云杰

    目的:以RNAi干涉的方法沉默VEGF在肺癌细胞中的表达,为肺癌的RNAi基因治疗提供实验依据.方法:以VEGF为靶点,利用siRNA设计原则,设计VEGF-siRNA,构建pSilencerTM-3.1-VEGF的干涉载体,稳定转染入肺癌细胞株A549中,检测VEGF在细胞中的表达及稳定转染pSilencerTM-3.1-VEGF肺癌细胞系A549对内皮细胞血管形成的影响,体内观察pSilencerTM-3.1-VEGF肺癌细胞荷瘤小鼠的肿瘤生长情况.结果:pSilencerTM-3.1-VEGF-2明显抑制了肺癌细胞系A549中VEGF的表达,稳定转染pSilencerTM-3.1-VEGF-2的肺癌细胞株A549体外生长没有发生变化,但是其对内皮细胞的血管生成有明显的抑制作用,体内荷瘤小鼠结果显示,与肺癌细胞株A549荷瘤小鼠比较,pSilencerTM-3.1-VEGF-2-A549荷瘤小鼠中肿瘤的生长明显缓慢(P<0.05),生存期明显延长(P<0.05).结论:我们成功构建了pSilencerTM-3.1-VEGF的干涉载体,稳定转染pSilencerTM-3.1-VEGF的肺癌细胞株A549中能够明显抑制VEGF的表达,抑制内皮细胞小管形成,延长了荷瘤小鼠的生存期.

    关键词: RNAi VEGF 肺癌 基因治疗
  • 白眉蝮蛇蛇毒细胞毒素对胃癌细胞的杀伤作用及对细胞超微结构的影响

    作者:鲁珏;徐飞鹏

    目的:从白眉蝮蛇蛇毒中提取细胞毒素H1,探讨其对体外培养胃癌细胞的杀伤作用及超微结构的影响.方法:采用DEAE-Sephadex A-50、TSKgel Pheny柱层析从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化出电泳纯细胞毒素H1;采用MTT法检测细胞毒素H1对胃癌细胞用细胞BGC-823的杀伤作用,并用透射电镜观察细胞毒素对癌细胞超微结构的影响.结果:提纯后细胞毒素H1可达到电泳纯,对体外胃癌细胞杀伤力较强,透射电镜观察发现细胞毒素处理癌细胞后其细胞表面微绒毛减少,细胞膜破损,线粒体肿胀并形成空泡,核被膜消失,核浓缩集靠置之脑后呈块状或新月状凋亡小体.结论:从白眉蝮蛇蛇毒中提取的细胞毒素H1可有效地杀伤胃癌细胞.

  • 索拉非尼对耐药肝癌细胞株BEL-7402/FU逆转作用的研究

    作者:魏莉;苏宁;曹梦苒;郑大勇;李爱民;严晓;吕成伟;罗荣城

    目的:研究索拉非尼对肝癌耐药细胞系BEL-7402/FU多药耐药性的逆转作用及可能机制.方法:采用流式细胞术检测罗丹明123(Rho123)的表达,免疫组化法观察细胞膜上P-gp的表达,荧光定量PCR法检测多药耐药基因mdr1 mRNA水平的变化,Western blot法检测mdr1基因蛋白产物P-gp表达水平的变化.结果:经4 μmol/L索拉非尼处理后,增加了BEL-7402/FU对Rho123的蓄积并减缓其外排作用,使细胞表面P-gp的表达明显下降,mdr1 mRNA较用药前下降了35.4%,并可明显抑制mdr1基因蛋白产物P-gp的表达水平,比BEL-7402/FU细胞减少14.3%.结论:索拉非尼可以抑制mdr1基因蛋白产物P-gp的表达,增加细胞内化疗药物的浓度,从而逆转了肝癌细胞的多药耐药性.

  • 华蟾素诱导膀胱癌细胞凋亡的实验研究

    作者:苏劲;许志坚;叶木石

    目的:探讨华蟾素对人膀胱癌细胞株BIU87细胞凋亡的影响.方法:采用MTT法测定华蟾素对体外膀胱癌细胞的抑制作用,倒置显微镜、TUNEL法观察细胞形态变化,用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化;半定量RT-PCR法检测凋亡相关基础Bcl-2、bax、caspase-3mRNA表达的变化,比色法测定caspase-3活性变化.结果:MTT法显示,华蟾素对膀胱癌细胞有显著的增殖抑制作用与华蟾素的浓度和作用时间有关,0.2 mg/L华蟾素作用72 h可以杀死50%以上的细胞;可诱导BIU87细胞凋亡,细胞周期停滞在S-和G2期;凋亡相关基因Bcl-2表达减少,bax无明显变化,caspase-3表达及活性增高.结论:华蟾素在体外有较强的抗膀胱癌作用,细胞凋亡的发生可能与细胞周期阻滞,Bcl-2和caspase-3基因表达及活性变化有关.

  • 兔抗人APE1多克隆抗体的制备及鉴定

    作者:曹晓静;戴楠;易维京;李增鹏;杨宇馨;王东;胡川闽

    目的:制备兔抗人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶多克隆抗体并进行鉴定.方法:以纯化的全长APE1蛋白为抗原, 采用改良的快速免疫法制备兔抗人APE1多克隆抗体并进行特异性亲和纯化, ELISA、Western blot和免疫组化检测制备抗体的效价和特异性.结果:ELISA检测显示该抗体的效价达到1:128 000, 相对亲和力常数为8.96×10-6 mol/L.Western blot显示该抗体能与APE1蛋白特异性结合, 免疫组化检测显示阳性反应产物主要定位于细胞核.此外, 该抗体还可用于小鼠和大鼠组织APE1蛋白的检测.结论:制备的多克隆抗体特异性和效价良好, 不仅为今后深入研究人APE1蛋白的性质与功能提供了有用的实验工具, 还可用于检测小鼠和大鼠组织中APE1蛋白的表达.

  • 釉成熟蛋白Amelotin抗体的制备和初步鉴定

    作者:孙岩;张娟娟;韩婷婷;李东亮;曹雪梅;李武修;高玉光

    目的:表达并纯化小鼠釉成熟蛋白(Amelotin), 制备多克隆抗体, 并进行初步鉴定.方法:RT-PCR获得Amelotin成熟肽片段, 构建pET32a-Amelotin, IPTG诱导表达Amelotin, 纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体, ELISA检测抗体滴度.Western blot和免疫组织化学鉴定抗体特异性.结果:成功构建了Amelotin重组表达载体pET32a-Amelotin,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔, 得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可以达到1:12 800.Western blot分析表明该抗体能特异结合Amelotin, 免疫组化分析表明自制的抗体能特异的与Amelotin相互作用.结论:以纯化的Amelotin为免疫原, 成功地制备了效价及特异性较高的兔抗Amelotin抗体,为进一步建立简便的Amelotin检测方法及研究Amelotin生物学功能奠定了良好的基础.

  • 与过敏性哮喘发生有关的细胞信号转导通路

    作者:夏维;李莉

    过敏性哮喘,是一类包括气道平滑肌异常,气道炎症以及气道可逆性狭窄改变的慢性炎症性疾病,以血清中IgE水平升高、气道周围嗜酸性粒细胞(EOS)浸润、支气管黏膜损害以及气道高反应性等为特征.

  • B细胞免疫应答在HIV-1感染过程中的作用研究进展

    作者:徐向升;张政;王福生

    人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1,以下简称HIV)感染过程中会造成包括B细胞在内的广泛而重度的免疫功能缺损,终造成严重的淋巴细胞功能耗竭,使二次感染和机会性感染的易感性增加.更好地了解HIV感染过程中B细胞异常的致病机制,将能为提高HIV患者抗体应答,控制机会性感染提供更好的策略.现对近年来HIV感染过程中B细胞功能缺陷及其病理机制的研究进展作一介绍.

  • 乙肝疫苗佐剂研究的新进展

    作者:杨明;尹文;汪爱勤

    乙肝病毒 (hepatitis B virus,HBV)感染是一个严重威胁人类健康的全球性公共卫生问题,免疫接种是阻止HBV传播引起严重后果为有效的方法,HBV疫苗接种为防止感染提供了长期有效的保护.

    关键词: 乙肝疫苗 免疫佐剂
  • 趋化因子受体CXCR3在HCC中的作用

    作者:丁小霞;王健

    肝细胞癌(HCC)是一种由肝细胞增生和凋亡比例失调而致的多因素、多阶段的恶性肿瘤.肝细胞在细菌脂多糖或γ-IFN刺激下可分泌IP-10、Mig等趋化因子,其本身也可表达CXCR3.CXCR3是一种7次跨膜G蛋白耦联受体,3个N-糖基化位点分别结合IP-10、Mig及I-TAC,介导炎症反应及血管生成等.在很多肿瘤中均可见CXCR3异常表达,在肝细胞癌发生发展中,CXCR3对机体的免疫调节及肿瘤血管生成起重要作用.

  • 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体研究进展

    作者:刘李登;向军俭

    碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是由Gospodarowiz等[1]于1974年在牛脑垂体中发现的,因对3T3细胞有强烈的促增殖和有丝分裂作用,且等电点为9.6而得名.此次发现展开了对成纤维细胞生长因子的鉴定,纯化及测序等研究的序幕.

  • 不同分离纯化法原代培养小胶质细胞的生物学差异

    作者:李锐;郭民侠;李晓青;种莉;刘红艳;乐卫东

    目的:比较两种分离方法原代培养所获小胶质细胞的的生物学差异.方法:分别采用振摇法和温和消化法从胶质细胞/神经元的混合培养体系中分离纯化小胶质细胞,通过1,1'-己二酸双酯-3,3,3',3'-四甲基吲哚菁标记的低密度脂蛋白活体标记显示小胶质细胞的形态学变化,分别用Griess反应和酶联免疫吸附法测定培养小胶质细胞经脂多糖刺激后释放的一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度.结果:温和消化法小胶质细胞的得率是振摇法的5.7倍,且其获得小胶质细胞的纯度(99.9±0.1)%远高于后者.温和消化法所获的小胶质细胞转化为静息状态需要的时间较振摇法明显缩短;经脂多糖刺激后,振摇法所得的小胶质细胞释放NO和TNF-α的水平均较温和消化法者高.结论:温和消化法在小胶质细胞的得率、纯度以及与静息状态的相似性方面明显优于振摇法,因此应在与小胶质细胞有关的实验室研究工作中得到推广.

  • 检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立

    作者:童铁钢;白宇;张维军;王群;刘光亮;徐树兰;吴东来

    目的:建立检测马白细胞介素-18(equine interleukin-18,EIL-18)的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法.方法:将识别不同表位的EIL-18的2株单克隆抗体(mAb)B1G1和S6A3纯化后,利用生物素标记试剂盒对B1G1株mAb进行标记,以重组马白细胞介素-18(rEIL-18)为捕获抗原进行ELISA检测来建立EIL-18双抗体夹心ELISA.结果:经过方阵滴定试验确定捕获抗体的佳浓度为4 mg/L,检测抗体的工作效价为1:2 000.建立的方法可检测马血清中的EIL-18,与猪、牛和羊血清中的IL-18不发生交叉性反应,此方法检测敏感度达到15 ng/L,特异性良好. 结论:成功建立了EIL-18的双抗体夹心ELISA,为马细胞免疫学研究提供了方法,也为下一步EIL-18 ELISA试剂盒的商品化开发奠定了坚实基础.

  • 135 Hz极低频电磁场对HepG-2细胞内Ca2+浓度的影响

    作者:黄小军;曲萍;张勇;黄晓峰;王春梅;刘芳娥;陈健康;梁向艳;刘利兵

    目的:研究135 Hz(电场强度为80 V·m-1)极低频电磁场(ELF)暴露对HepG-2细胞内Ca2+浓度的影响.方法:采用荧光探针Fluo-3/AM标记细胞内Ca2+,135 Hz ELF照射HepG-2细胞1 h后,利用激光扫描共聚焦显微镜技术测定细胞内Ca2+浓度,加入L-型Ca2+通道拮抗剂硝苯地平,探讨135 Hz ELF影响HepG-2细胞内Ca2+浓度变化的具体机制.结果:未暴露组细胞荧光强度较弱,ELF暴露组细胞荧光强度增高,与未暴露组有统计学意义(P<0.01);用硝苯地平干预组细胞荧光强度减弱,与未干预组有统计学意义(P<0.01).结论:135 Hz ELF可能通过引起L-型Ca2+通道的开放造成HepG-2细胞发生Ca2+超载.

细胞与分子免疫学分期目录
期数
2018 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2015 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2008 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2006 01 02 03 04 05 06
2005 01 02 03 04 05 06 z1
2004 01 02 03 04 05 06
2003 01 02 03 04 05 06
2002 01 02 03 04 05 06
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2000 01 02 03 04 05 06
1999 01 02
1995 01 02 03
1994 01 02
1993 01 02 03 04
1992 01 02 03 04
1991 01 02 03 04
1990 01 02
1989 01 02 03 04

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