细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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沉默激酶功能区受体抑制前列腺癌PC-3细胞的裸鼠体内成瘤能力
目的 研究激酶功能区受体(KDR)基因表达沉默后对前列腺癌PC-3细胞裸鼠体内成瘤能力的影响.方法 将15只5周龄BALB/c雄性裸鼠随机分为干扰组、阴性质粒组和未转染组,每组5只.分别接种构建的pSilencer 3.1-KDR siRNA表达质粒转染PC-3细胞、阴性对照质粒pSilencer3.1-NC转染PC-3细胞以及未转染的PC-3细胞于裸鼠皮下；观察各组PC-3细胞在裸鼠体内成瘤率、瘤体生长速度以及平均瘤质量等方面的变化,RT-PCR和Western blot技术检测瘤体KDR基因和蛋白表达.结果 pSilencer3.1KDR质粒转染组的裸鼠瘤体生长速度明显慢于未转染组和pSilencer3.1-NC质粒转染组；与未转染组和PSilencer3.1-NC组相比,pSilencer3.1-KDR组肿瘤的生长受到明显抑制,平均体积较小(0.28 cm3 vs 0.721 cm3,0.715 cm3,P＜0.01),平均瘤质量较轻(0.14g vs 0.648g,0.635g,P＜0.01)；裸鼠肿瘤组织中KDR mRNA和蛋白的表达明显降低.结论 RNAi介导的KDR基因沉默可显著影响PC-3细胞裸鼠体内的瘤体生长速度,KDR有可能成为肿瘤治疗的新靶点.
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HBx诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化
目的 探讨乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)能否诱导肝前体细胞(HPCs)发生上皮-间质转化(EMT).方法 将重组质粒pSEB-Flag-HBX与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组逆转录病毒,并感染小鼠肝前体细胞HP14.5,经稻瘟菌素(blasticidin)筛选,获得稳定表达HBx的HP14.5细胞.观察其形态变化,通过实时定量PCR(real time-PCR)及Western blot法检测其间质细胞标志物和上皮标志物在mRNA和蛋白水平的表达量,并采用划痕实验检测其细胞迁移能力的变化.结果 HP14.5细胞稳定表达HBx蛋白后细胞由多角形变为长梭形；与对照组相比,神经钙黏素(N-cadherin)、Snail、vimentin的mRNA和蛋白水平表达均升高,具有统计学差异(P＜0.05)而上皮性钙黏素(E-cadherin)、细胞角蛋白18(CK18)的mRNA和蛋白表达量显著降低(P＜0.05；同时其迁移能力显著升高(P＜0.05).结论 HBx能诱导肝前体细胞发生EMT,并增强其迁移能力.
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地塞米松对哮喘小鼠肺组织中GPR43表达的调节作用
目的 研究G蛋白耦联受体43(GPR43)在哮喘小鼠肺组织内的表达,同时探讨地塞米松对GPR43表达的影响.方法 30只BALB/C6小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组,每组10只；卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型；肺泡灌洗液(BALF)细胞计数；HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况；RT-PCR测定各组小鼠肺组织GPR43mRNA的表达变化；免疫组化观察肺中GPR43的表达及定位.结果 哮喘组BALF嗜酸性粒细胞(EOS)与对照组相比明显增高,地塞米松组明显低于哮喘组(P＜0.01)；HE染色提示哮喘组气道上皮出现EOS等大量炎性细胞浸润,管壁厚度较对照组明显增加(P＜0.01)；RT-PCR结果提示GPR43受体mRNA的表达量在哮喘组低,与对照、地塞米松组相比有统计学差异(P＜0.01)；免疫组化图像分析提示GPR43蛋白表达哮喘组明显降低,与对照组、地塞米松组相比均有显著性差异(P＜0.01).结论 哮喘小鼠肺组织中GPR43表达下降,地塞米松能部分上调其表达,从而减轻气道炎症反应.
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EMMPRIN在大鼠肾间质纤维化过程中的表达变化
目的 检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在大鼠肾间质纤维化模型中的表达变化.方法 64只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)和模型组(UUO组),每组16只.假手术组,仅游离输尿管不结扎,模型组,行单侧输尿管结扎术,分别于术后3、7、14 d处死大鼠并留取肾脏组织.肾脏标本行HE、Masson染色方法检测间质纤维化损伤的程度.应用免疫组织化学方法检测肾组织中EMMPRIN,α-SMA,E-cadherin的表达.结果 HE染色显示:UUO术后肾间质肾小管萎缩、扩张,胞外基质沉积,炎细胞浸润增加.Masson染色显示:UUO术后大鼠肾组织胶原纤维组织增生,出现明显的间质纤维化改变.免疫组织化学结果显示:与假手术组相比,UUO模型3d组的EMMPRIN表达显著增高,同时有α-SMA表达升高和E-cadherin表达显著下降(P＜0.05)；随着梗阻时间的延长,模型7d组EMMPRIN的表达逐渐减弱(P＜0.05).结论 EMMPRIN可能参与了UUO大鼠肾间质纤维化的早期上皮间质转分化过程,而随着纤维化程度加重,后期表达逐渐减少.
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鸟结核分枝杆菌感染巨噬细胞后的外泌体刺激巨噬细胞产生的细胞因子及其蛋白质表达改变
目的 探讨鸟结核分枝杆菌(M.avium)感染巨噬细胞后分泌的外泌体[(+)外泌体]刺激巨噬细胞后产生的分子免疫机制及其差异蛋白质成分研究.方法 冷冻高速离心法收集经鸟分枝结核杆菌感染及未感染的巨噬细胞上清中的外泌体,然后利用外泌体刺激巨噬细胞；ELISA方法检测经外泌体刺激巨噬细胞后细胞上清中IFN-γ、TNF-α的含量；流式细胞术从蛋白水平检测巨噬细胞受外泌体刺激后CD80、CD86蛋白表达情况；2-DE MALDI-TOF/TOF MS技术分析鉴定巨噬细胞受M.avium感染后分泌的外泌体中的差异蛋白.结果 IFN-γ、TNF-α在(+)外泌体刺激巨噬细胞后培养上清中含量增加；CD80、CD86蛋白在巨噬细胞受(+)外泌体刺激后表达上调.外泌体经2-DE MALDI TOF/TOF MS分析获得18个差异蛋白,且质谱成功鉴定12个.结论 (+)外泌体促进巨噬细胞TNF-α、IFN-γ的分泌从而增强巨噬细胞的炎症反应,并且可促进巨噬细胞CD80、CD86蛋白表达增强；筛选出差异蛋白的功能与细胞骨架结构、蛋白质合成与加工,炎症反应密切相关.
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表达PD-L1/PD-L2的人胎盘间充质干细胞对外周血T细胞分泌IL-17的拮抗作用
目的 探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响.方法 应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定；RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达；应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siRNA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达；密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞；细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响.结果 除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2；siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达；胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用.结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用.
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TNF-α对体外培养奶牛乳腺成纤维细胞α-SMA mRNA及蛋白表达的影响
肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)主要来源于活化的巨噬细胞、肥大细胞和T细胞等,参与炎症反应和免疫调节过程,并能够刺激成纤维细胞的增殖过程[1].TNF-α通过与细胞的肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)结合发挥作用,TNFR一般分为TNFR1 (CD120a)和TNFR2 (CD120b)两型.TNFR1分布于多种正常细胞或肿瘤细胞表面,TNFR1被认为是TNF-α的主要受体[2-3].TNF-α能促进人3～4代成纤维细胞增殖,对人皮肤成纤维细胞的增殖也有明显促进作用,并促进其Ⅰ、Ⅲ胶原和糖胺多糖合成[4].
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新风胶囊通过抑制TGF-β1-ERK1信号通路保护干燥综合症模型大鼠肺功能
目的 考察新风胶囊对干燥综合征模型大鼠肺功能的作用,及其对TGF-β1-ERK1信号通路的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和羟氯喹(HCQ)组、白芍总苷(TGP)组、新风胶囊(XFC)治疗组,每组10只,除正常对照组外,采用完全弗氏佐剂+同种鼠颌下腺抗原诱导方法,向每只大鼠两后足跖部注射与弗氏完全佐剂充分乳化后的颌下腺蛋白混合抗原0.2 mL诱发大鼠干燥综合征模型.用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,检测各组大鼠饮水量及体质量的变化、采用免疫组化法ERK1、TGF-β1的表达,采用ELISA法检测血清细胞因子(IL-17、IL-4)的变化.结果 与正常对照组(NC)比较,模型对照组(MC)大鼠体质量、血清IL-4明显降低,饮水量、颌下腺/肺指数、颌下腺病理评分、ERK1、TGF-β1积分及IL-17升高(P＜0.01或P＜0.05),肺功能参数降低(P＜0.01或P＜0.05)；与MC组比较,XFC组体质量、肺功能参数50％肺活量的大呼气流量(FEF50)、大呼气中段流量(MMF)升高,IL-4表达升高,饮水量、颌下腺/肺指数、颌下腺病理评分、血清IL-17的表达、ERK1、TGF-β1积分降低(P＜0.01或P＜0.05).与HCQ组相比,XFC组体质量、IL-17明显降低(P＜0.01),FEF25、FEF75、MMF升高(P＜0.01或P＜0.05)；与TGP组比较,XFC组肺指数、IL-17降低(P＜0.01或P＜0.05).结论 SS大鼠存在肺功能下降,可能与TGF-β1-ERK1信号通路活化相关.中药XFC能够下调TGF-β1、抑制ERK1磷酸化、降低免疫炎症反应、改善肺功能.
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人脐带间充质干细胞移植减缓大鼠局灶性节段性肾小球硬化的进展
目的 探讨人脐带间充质干细胞移植对局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)进展的保护作用.方法 贴壁法培养人脐带间充质干细胞,SD大鼠随机分为3组:对照组为正常SD大鼠,无任何干预措施；模型组及移植组大鼠分别在第1天、第8天尾静脉注射4 mg/kg、3.5 mg/kg阿霉素；移植组大鼠在第1、8、15、22天尾静脉注射HuMSCs细胞悬液(2×106个),而模型组尾静脉注射等剂量的DMEM 1 mL.结果 人脐带间充质干细胞移植后能改善阿霉素肾病的尿蛋白及低白蛋白血症、降低血胱抑素C及改善肾脏病理损伤及肾间质炎性细胞浸润,肾组织TGF-β1和结缔组织生长因子(CTGF)表达降低,且血清中IL-6及TNF-α水平明显下降.结论 人脐带间充质干细胞移植可减慢或阻止大鼠FSGS的进程.机制可能与调节炎性介质的合成、释放和抑制炎性细胞的浸润有关.
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重组腺病毒Ad5F35-IL-12感染不同单核-巨噬细胞的研究
目的 确定人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12在不同人单核-巨噬细胞中的表达.方法 将人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12分别感染人外周血单个核细胞、胸水巨噬细胞,以及THP-1和U937单核细胞株及其经佛波酯(PMA)诱导后生成的巨噬细胞；感染48 h后荧光显微镜观察对相应细胞的感染效率,RT-PCR检测IL-12双亚基p35和p40的mRNA表达情况,ELISA检测细胞培养上清中IL-12p70的分泌水平.结果 人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12可成功感染人外周血单个核细胞、胸水巨噬细胞以及THP-1和U937单核细胞株及其PMA诱导后生成的巨噬细胞,并分泌IL-12 p70蛋白,蛋白表达量从高至低依次是胸水巨噬细胞、PMA诱导后U937细胞、PMA诱导后THP-1细胞、U937细胞、外周血单个核细胞、THP-1细胞.结论 人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12可以感染不同的单核-巨噬细胞,并成功表达分泌IL-12 p70蛋白.
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重组人乙酰胆碱受体α亚单位胞外域在CHO细胞中的表达
目的 获得具有生物学活性的重组人烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α1亚基胞外域(ECD)蛋白.方法 从TE761细胞中提取人nAChR α1亚单位全长基因,以PCR法扩增nAChR α1亚基ECD1-216,酶切后装入pcDNA3.1表达载体中,脂质体转染入CHO细胞,分别在转染后6～72 h的7个时间点进行荧光实时定量PCR鉴定ECD基因的表达水平,利用125I标记的银环蛇毒素测定细胞培养上清中ECD蛋白的表达.结果 Hα1-216 PCR后所得708 bp片段大小符合预计结果,测序所得核苷酸序列与GenBank中人AChR α1序列完全一致.所构建的新载体经酶切鉴定目的基因正确插入,载体构建成功.随着细胞培养时间的延长ECD基因mRNA表达水平逐渐增加,且ECD蛋白表达水平也不断提高.结论 在CHO细胞成功表达了具有生物学活性的重组人nAChR α1胞外域蛋白.
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紫杉醇对高转移性肝癌细胞株MHCC97-H中ezrin表达的影响
目的 研究紫杉醇对体外培养的高转移性肝癌细胞株MHCC97-H中ezrin的表达的影响.方法 将体外培养的MHCC97-H分为4组,分别与不同浓度的紫杉醇共培养,然后用免疫组化、Western blot法、RT-PCR检测各组中ezrin的表达水平,Transwell穿膜实验检测肝癌细胞侵袭能力的变化.结果 正常培养的MHCC97-H中有ezrin的高表达,紫杉醇可以抑制MHCC97-H中的ezrin表达,经紫杉醇处理的肝癌细胞穿透人工膜的能力下降.结论 紫杉醇可以抑制体外培养的MHCC97-H中ezrin的表达,从而抑制肝癌细胞的侵袭能力.
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IFN-γ诱导的肾小管上皮细胞CXCL9、CXCL10和CXCL11的表达
目的 探讨IFN-γ对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11分泌的影响以及趋化因子的功能.方法 IFN-γ分别作用HK-2细胞不同时间后,用real-time PCR检测其CXCL9、CXCL10和CXCL11 mRNA的表达,以ELISA检测细胞培养上清中分泌趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11的蛋白水平,用流式细胞术检测淋巴细胞表面CXCR3表达情况,通过趋化实验检测IFN-γ作用HK-2细胞培养上清对淋巴细胞的趋化作用.结果 IFN-γ作用12h后,HK-2细胞分泌趋化因子开始升高,CXCL9 mRNA的表达在48 h达到高峰,CXCL10、CXCL11 mRNA的表达在24h达到高峰.在蛋白水平上,HK-2细胞经IFN-γ诱导12 h后,开始分泌趋化因子蛋白,CXCL9、CXCL11的分泌在IFN-γ作用HK-2细胞72 h达到高峰,CXCL10的分泌在48 h达到高峰.与新鲜分离的淋巴细胞相比活化的淋巴细胞表面的CXCR3表达明显升高.IFN-γ作用HK-2细胞培养上清对活化的淋巴细胞具有明显的趋化作用且能被抗CXCR3抗体所阻断.结论 IFN-γ能够明显上调肾小管上皮细胞趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11 mRNA表达和蛋白的分泌.
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胰岛新生相关蛋白肽在促进脐带间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞中的作用
目的 探索人脐带间充质干细胞(hUCMSC)向胰岛素分泌细胞(IPCs)分化的高效、定向诱导方案.方法 在传统诱导方案基础上,加入胰岛新生相关蛋白肽,诱导hUCMSCs分化为IPCs,并通过形态学观察、流式细胞术、荧光定量PCR、免疫荧光、ELISA鉴定IPCs.结果 改良组IPCs的C肽阳性细胞率较传统组有明显提高(P＜0.05),胰腺发育相关转录因子PDX-1、Ngn3、NeuroD1、MafA、insulin、Glut-2 mRNA表达明显提高(P＜0.05).同时,改良组蛋白C肽、PDX-1、Nkx6.1表达阳性,葡萄糖刺激试验证实胰岛素及C肽分泌能力也明显增强(P＜0.05).结论 胰岛新生相关蛋白肽可促进hUCMSCs分化为IPCs,但仍未达到正常入胰岛β细胞功能.
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模拟失重抑制荷黑素瘤小鼠的T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能
目的 研究模拟失重对小鼠T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能的影响.方法 小鼠右后肢皮下注射B16细胞建立移植性恶性黑素瘤模型,采用头低位-15°～20°尾吊小鼠模拟失重模型.观察模拟失重对荷瘤小鼠肿瘤体积和生存时间的影响；采用全自动血细胞分析仪和流式细胞仪分别检测模拟失重条件下荷瘤小鼠外周血白细胞、淋巴细胞的变化和T淋巴细胞亚群的变化；采用ELISA法和LDH释放法分别检测模拟失重对肿瘤细胞诱导T淋巴细胞产生IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平和肿瘤特异性CTL对肿瘤细胞杀伤活性的影响.结果 与对照组相比,模拟失重组荷瘤小鼠肿瘤生长速度加快,生存期缩短,外周血淋巴细胞总数降低,淋巴细胞比例降低,CD3+、CD4 +/CD3+、CD8+/CD3+T淋巴细胞所占比例降低,丝裂原诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力降低(P＜0.05或P＜0.01).模拟失重条件下,肿瘤细胞诱导产生的细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α水平降低,肿瘤特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤活性降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 模拟失重抑制小鼠T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能.
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葡萄膜炎患者外周血TCR Vα谱系多态性分析
目的 探讨葡萄膜炎患者外周血T细胞受体α链可变区互补决定区3 (TCR Vα CDR3)谱系特点及多态性.方法 采用RT-PCR扩增葡萄膜炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中TCR Vα 34个亚家族,经免疫扫描谱型技术分析34个亚家族谱型.结果 5例正常健康人PBMC TCR Vα CDR3谱型多数呈高斯分布,4例葡萄膜炎患者外周血T细胞均出现多个TCR Vα亚家族谱型的异常改变,异常峰型包括单峰、寡峰/寡峰趋势,偏峰和不规则异常蜂型.34个TCR Vα亚家族中,不同亚家族异常峰型出现的频率不同,非正态异常峰型出现频率较高的亚家族有Vα13和Vα17(均为3/4),而Vα1.1、Vα10、Vα20、Vα28和Vα28亚家族均未出现异常峰型.TCR Vα7在HLA-B27阴性的患者(U2)中出现异常峰型,在HLA-B27阳性的3个患者(U1、U3、U4)中并未出现这个亚家族的异常；TCR Vα13则相反,即在HLA-B27阳性的3个患者中均出现异常峰型,而在HLA-B27阴性的患者中正常.结论 葡萄膜炎患者PBMC TCR Vα CDR3谱系具有显著多态性特点,单/寡克隆增生的T细胞有可能是葡萄膜炎发病中的自身反应性T细胞.
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GRAMD4在肝细胞癌中的表达及临床意义
目的 检测GRAMD4在肝细胞癌中的表达情况,分析其与肝癌临床病理特征之间的相关性.方法 收集40例肝细胞癌及对应癌旁组织,运用RT-PCR、免疫组化技术检测GRAMD4在肝癌及对应癌旁组织中的表达情况,统计学分析GRAMD4mRNA表达与肝癌临床病理特征之间的相关性；应用RT-PCR技术检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞Hep3B、HepG2、SMMC-7721中GRAMD4 mRNA的表达.结果 GRAND4 mRNA及蛋白在肝癌组织中的表达显著高于对应的癌旁组织(P＜0.05)；GRAMD4 mRNA的高表达与肿瘤体积增大、高Edmonson分级和高TNM分期呈明显正相关(P＜0.05)；肝癌细胞株Hep3B、HepG2和SMMC-7721中GRAMD4 mRNA的表达较正常肝细胞LO2显著增加(P＜0.05).结论 肝癌细胞系及肝癌组织中GRAMD4表达上调,且GRAMD4的表达上调与肝癌的恶性病理特征相关.
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血管生成拟态及相关蛋白Mig-7、MMP-2在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 研究胃癌组织务管生成拟态(VM)及相关蛋白Mig-7、MMP-2的表达及临床意义.方法 采用免疫组化技术观察110例胃癌中的CD34、Mig-7和MMP-2的表达,VM用CD34、PAS双染色法确定,并结合胃癌患者的临床病理资料进行相关分析.结果 110例胃癌组织中存在35例VM,阳性率为31.82％；VM与病理分级及淋巴结转移有关(P＜0.05),中低分化组的阳性率(34％)高于高分化组(10％),有淋巴结转移组的VM阳性率高于无淋巴结转移组.110例胃癌组织Mig-7表达104例,阳性率为94.54％；Mig-7的高表达与淋巴结转移有关(P＜0.05).VM阳性组Mig-7及MMP-2高表达率均高于VM阴性组(P＜0.05).VM阳性组平均生存时间及中位生存时间均低于VM阴性组(P＜0.05).结论 胃癌组织中存在VM,Mig-7及MMP-2高表达可能协同促进VM形成；VM与胃癌的侵袭、转移以及预后差密切相关.
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细胞因子信号抑制因子在骨关节炎患者软骨细胞的表达
目的 研究细胞因子信号抑制因子(SOCS)1、2、3和细胞因子可诱导性SH2结构域1(CIS-1)的基因在正常和关节炎患者的软骨细胞表达,分析IL-1β和TNF-α对上述SOCS家族成员mRNA的表达水平的影响.方法 在晚期骨关节炎(OA)和因车祸需要置换的关节中通过胰蛋白酶、透明质酸酶和胶原蛋白酶B消化分离软骨细胞.实时定量RT-PCR检测SOCS1、2、3和CIS-1 mRNA的表达.健康的软骨细胞用或不用IL-1β和oncostatin M(OSM,2.5 ng/mL)或TNF-α (10 ng/mL)培养.用单个细胞因子处理24h和72 h后收获短期培养的细胞；用细胞因子周期性刺激长期培养维持4～5周.定量RT-PCR检测软骨细胞SOCS1、2、3和CIS-1 mRNA的表达.结果 与对照相比,OA样本中SOCS2和CIS-1 mRNA减少8倍(P＜0.01),而在OA和健康人中SOCS1和SOCS3的表达未见明显变化(P＞0.05).用IL-1β和联合OSM或TNF-α长期处理后SOCS2和CIS-1 mRNA减少5倍和3倍(P＜0.05).结论 OA患者软骨细胞中SOCS2和CIS-1表达下调,而SOCS1和SOCS3的表达未受影响.用炎性细胞因子长期处理软骨细胞可以模拟OA减少SOCS2和CIS-1的表达.
关键词： 细胞因子信号抑制因子 骨关节炎 -
抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析
目的 构建并在CHO细胞中表达抗人CD86单链抗体(CD86-scFv),研究该抗体与抗原的结合特性及介导的生物学功能.方法 从分泌鼠源CD86抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL基因,构建含有前导肽L-VH-Linker-VL抗体编码基因的表达载体并转染CHO细胞.经筛选高分泌株并扩大培养后收集上清进行纯化.流式细胞术分析CD86-scFv对不同细胞膜型CD86分子的识别及与鼠源亲本抗体1D1的竞争抑制效应.MTT法分析CD86-scFv与Raji细胞表达的CD86结合后对细胞生长的影响.结果 获得了稳定表达抗人CD86-scFv的CHO细胞株及相应抗体.CD86-scFv与CD86基因转染细胞株L929-CD86、天然表达CD86分子的人B系淋巴瘤细胞Raji和Daudi细胞的阳性结合率分别为67.0％、72.3％和80.5％.CD86-scFv对鼠源亲本抗体1D1具有竞争结合能力,将CD86-scFv(终浓度20μg/mL)加入Raji细胞共同培养72 h时的细胞生长抑制率为28.3％.结论 成功构建了稳定分泌抗人CD86-scFv的CHO细胞株(命名为SA-IV).该抗体能够识别CD86分子并具有良好的生物学活性.
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人抗凝血酶Ⅲ的表达及其抗血清的制备
目的 用大肠杆菌系统表达重组的抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ),制备其抗血清并测定效价.方法 利用基因克隆技术获得AT-Ⅲ基因片段,构建原核表达质粒pET32a(+)-AT-Ⅲ,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达、蛋白纯化并免疫兔,间接ELISA、Western blot法检测抗血清.结果 SDS-PAGE、Western blot法检测原核表达蛋白结果显示,在相对分子质量(Mr)77 000附近出现特异性条带.对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备AT-Ⅲ抗血清,间接ELISA方法检测抗血清的高效价可达到1∶12 800,Western blot分析表明抗血清可与293T、CHO细胞表达的AT-Ⅲ蛋白及AT-Ⅲ蛋白纯品特异性结合.结论 成功制备了人抗凝血酶Ⅲ抗血清.
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microRNA调控树突状细胞分化与成熟的机制
树突状细胞(DC)含有不同的异质性亚群,在获得性免疫的启动、定向激活及调节中发挥重要作用.DC的自身发育分化及功能性成熟受细胞因子及转录因子构成的复杂网络调控.近期研究发现,microRNA (miRNA)通过抑制蛋白翻译或降解mRNA转录本来调控基因表达,调节包括免疫系统在内的多种生物学过程.许多miRNA在B、T淋巴细胞、DC、巨噬细胞及其他类型免疫细胞的发育、分化、存活及功能成熟起到重要作用,部分DC相关的miRNA如miR-155和miR-146a同时参与其他免疫细胞的调节.本文综述了DC亚群的功能,靶向不同DC亚群的免疫后果及细胞表面受体的种类；同时也总结了miRNA在DC由髓系前体细胞发育并分化为特异性亚群过程以及其在DC特异性功能中所发挥的重要作用.
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多糖激活树突状细胞的免疫调节作用
树突状细胞(DC)是迄今所知的功能强的抗原提呈细胞,是固有免疫和适应性免疫的桥梁和纽带,主要参与细胞免疫和T细胞依赖的体液免疫反应,在免疫反应中处于中心位置.多糖作为一种生物免疫应答调节剂,对DC功能的影响近年来有所报道,主要包括多糖对DC表面分子的表达、细胞因子的分泌、吞噬功能、抗肿瘤免疫、多糖受体以及信号转导途径等方面的调节作用.
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趋化因子CXCL8/IL-8与急性白血病关系的研究进展
趋化因子CXCL8 (CXCL8),又称白细胞介素8(IL-8),是一种多效性细胞因子.急性白血病细胞结构性表达IL-8及其受体.全反式维甲酸(ATRA)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞向中性粒细胞分化过程中,伴有IL-8表达的变化；且当患者出现分化综合征时外周血IL-8含量显著升高；而成熟的中性粒细胞表达IL-8受体,但不表达IL-8.研究发现具有ELR序列的IL-8与肿瘤发生、发展、治疗的毒副作用及治疗效果密切相关,IL-8及其受体形成的趋化因子轴已经成为新的生物治疗热点及靶向治疗的靶点.本文综述了IL-8与急性白血病特别是急性早幼粒细胞白血病关系的研究进展.
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高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)与器官纤维化研究进展
高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为一种重要的晚期炎症因子和促炎因子,可以通过损伤/坏死细胞被动释放,也可由活化状态的细胞主动分泌至胞外介导炎症反应.一直以来,HMGB1在各种急慢性炎症中的作用研究备受关注.器官组织纤维化为持续慢性炎症的后期病理变化,近年来,HMGB1在各种器官纤维化中的作用研究越来越多.许多研究结果显示,HMGB1在肝、肺、肾、心脏等器官纤维化的发生发展中发挥重要作用.
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活化诱导的胞嘧啶核苷脱氨酶与免疫球蛋白基因多样性及免疫性疾病的关系
类别转换重组(CSR)和体细胞高频突变(SHM)是活化的B淋巴细胞在免疫球蛋白基因组中启动第2次多样化进程的2个重要过程,然而活化诱导的胞嘧啶核苷脱氨酶(AID)是CSR和SHM过程中必需的酶.研究发现,AID在免疫球蛋白基因多样性中发挥重要作用,并且与免疫性疾病有关.现就AID与免疫球蛋白基因多样性及免疫性疾病之间的关系进行综述.
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B7家族PD-L1和B7-H4的研究进展
“协同刺激信号”的提出很好地解释了免疫系统对自身和外源性抗原的不同调节机制.B7家族作为唯一能从抗原提呈细胞传递信号给T细胞的共刺激分子,其与相应配体结合在调节免疫反应、炎症及癌症中都起着重要作用.对于B7家族成员在免疫反应中的调节机制仍然不甚清楚,本文综述了程序性死亡配体1(PD-L1)、B7-H4的生物学功能及其与疾病的关系.
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ELISA、流式微球载体技术和胶体金渗滤法检测梅毒抗体的比较及评价
梅毒是由梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)引起的一种性传播疾病,近年来我国的梅毒发病率有逐年上升的趋势.梅毒特异性抗体的血清学检查是梅毒诊断的重要依据.传统血清学检测方法有梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)和梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)[1].长期以来国内外都在不断探讨更灵敏或更快速的梅毒血清学检测技术.近年来发展起来的流式微球技术(flow microbeads assay,FMA)和免疫胶体金检测技术,显示出很好的灵敏度和快速检测的优点.本试验使用ELISA、FMA和胶体金斑点免疫渗滤法(dot immune-gold filtration assay;DIGFA)定性检测梅毒抗体,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值.
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单克隆抗体组对重组乙肝表面抗原突变体的结合能力分析
世界卫生组织(WHO)报道,超过20亿的人曾经感染过HBV[1],其中有3.5亿是慢性持续感染[2],以及每年超过百万的慢性乙肝携带者死于肝硬化或肝癌[3].HBV是一种双链环状DNA病毒[4],DNA长度约为3 200 bp,是通过一RNA作为媒介进行复制的[5],主要是因为DNA聚合酶具有的逆转录酶活性.正是由于逆转录复制的错误率较高,导致了乙肝病毒基因易发生变异,倘若发生在编码表面抗原的抗体结合部位(aa124～147)的基因发生变异,将导致部分突变的抗原对野生型抗原有高亲和力的单克隆抗体(mAb)的结合力降低,从而引起乙肝表面抗原诊断试剂盒的漏检.故筛选对不同突变位点的乙肝表面抗原突变体具有高亲和力的mAb至关重要,本实验对乙肝表面抗原mAb库中的59多个mAb进行分析,并对不同类型的mAb归类,找出互补的mAb进行组合来制备和完善乙肝表面抗原诊断试剂盒.
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膜性肾病小鼠模型的建立与鉴定
目的 建立小鼠膜性肾病模型.方法 取6周龄健康雄性BALB/c小鼠20只,分为对照组和模型组.模型组小鼠皮下注射0.2 mg阳离子牛血清白蛋白(C-BSA)和等体积的完全弗氏佐剂,对照组皮下注射生理盐水和完全弗氏佐剂.2周后,模型组小鼠尾静脉注射阳离子牛血清白蛋白,每周3次,隔日注射,对照组使用生理盐水代替.模型的鉴定则采用血液生化检查和病理检查(PASM染色、IgG免疫荧光染色、透射电镜)等方法.结果 8周后12只模型组小鼠出现高蛋白尿、低蛋白血症和高胆固醇血症；PASM染色显示出类似于早期膜性肾病,IgG免疫荧光染色显示出沿毛细血管壁呈颗粒状物沉积,透射电镜下有足突的广泛融合.结论 C-BSA尾静脉注射小鼠可成功构建小鼠膜性肾病模型.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
