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细胞与分子免疫学

细胞与分子免疫学杂志

Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 影响因子: 0.81
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1007-8738
  • 国内刊号: 61-1304/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 52-184
  • 曾用名: 单克隆抗体通讯
  • 创刊时间: 1985
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《细胞与分子免疫学杂志》编辑部
  • 出版地区: 陕西
  • 主编: 杨安钢
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • C57BL/6小鼠γδT细胞的组织器官分布和功能特点

    作者:黄俊;罗雪平;陈殿慧;方会龙;谢红艳

    目的 比较C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结中γδT细胞占所分离的淋巴细胞及其CD3+T细胞的百分比、表型和功能的特点.方法 分离正常C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的淋巴细胞,应用细胞表面分子染色的方法,使用流式细胞仪观察γδT细胞占从不同组织分离的淋巴细胞及CD3+T细胞的百分比及其表型的特点.细胞经PMA和离子霉素刺激后,应用细胞内细胞因子染色的方法,通过流式细胞仪观察γδT细胞产生IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17细胞因子的情况.结果 γδT细胞占分离淋巴细胞中的百分含量在肝脏明显高于肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结(P<0.05),而γδT细胞在肠系膜淋巴结CD3+T细胞的百分含量要显著的低于其他脏器(P<0.05).不同组织器官中γδT细胞以CD4-CD8-表型为主,还存在少量CD8+ γδT细胞.在肠系膜淋巴结γδT细胞中CD4+细胞的量明显高于其他器官,且明显可见一群CD4+ CD8+细胞.不同组织中γδT细胞中IL-17+的细胞量要明显高于IFN-γ+和IL-4+细胞.γδT细胞基本不分泌IL-9.肺脏的γδT细胞分泌细胞因子的能力强,其IL-17+细胞的量达到(26.6±12.1)%.IFN-γ+细胞的量在肝脏和肺脏中较高,分别为(1.36±0.37)%和(1.6±0.7)%.结论 C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结γδT细胞的含量、表型和功能方面存在显著性差异.

  • 基膜聚醣基因过表达对肺腺癌细胞A549增殖的影响及可能机制

    作者:周坤;葛明建

    目的 为探讨基膜聚糖(lumican)基因对肺腺癌细胞A549增殖能力的影响以及可能机制.方法 以携带人lumican基因的重组慢病毒感染A549细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选法构建稳定细胞株;荧光定量PCR和Western blot法检测lumican mRNA及蛋白的表达.采用MTT法、流式细胞仪检测细胞生长曲线、倍增时间、增殖指数,在体动物实验检测其成瘤情况,Western blot法检测RhoC、p-Akt蛋白的表达.结果 成功构建lumican基因过表达的A549细胞株;与空载体组或对照组比较,实验组细胞生长速度变快(P<0.05)、倍增时间缩短(P<0.05)、增殖指数增大(P<0.05)、皮下瘤体积、瘤体质量及分裂相细胞均增加(P<0.05),RhoC及p-Akt的蛋白表达量均增高(P<0.05);以上各参数比较对照组与空载体组之间均没有明显差异(P>0.05).结论 Lumican基因能促进肺腺癌细胞A549的增殖,其机理可能与RhoC及p-Akt蛋白增高有关.

  • 转基因表达HBV抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞受体

    作者:吴静;王琳;刘妍;叶海燕;丁宁;刘永明;徐东平

    目的 通过逆转录病毒介导HBV抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的T细胞受体(TCR)转基因表达,初步观察其结合活性.方法 从HLA-A2阳性急性乙肝患者外周血中诱导、分选、克隆和扩增HBV抗原特异性CTL;提取细胞RNA,用RT-PCR、5'-RACE和OVER-LAP PCR等方法获取TCR的α和β链编码基因;构建TCR重组逆转录病毒,介导特异性TCR分别在人Jurkat T细胞和HLA-A2阳性健康人CD8 T淋巴细胞上表达.结果 从1例HLA-A2阳性急性乙肝患者样本中分别获得了2组TCR Vα、Vβ配对,分别命名为α21β13、α15β13,包装的重组逆转录病毒滴度为(1.5 ~5.0)×105 IU/mL,用针对目标TCR的特异性Vβ链抗体(抗Vβ13 TCR-PE)和HLA-A2限制性表位特异性五聚体(pentamer)进行免疫荧光染色,重组TCR在T细胞表面获得表达:其中在Jurkat细胞上转入的Vβ13链表达细胞占1.06% ~2.25%,在HLA-A2阳性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer阳性细胞分别占到1.03% ~2.06%和1.05% ~1.12%,在HLA-A2阴性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer 阳性细胞均低于0.05%.结论 通过逆转录病毒介导可以使HBV特异性CTL TCR获得转基因表达,具有结合HLA-A2限制性表位的活性.

  • 慢病毒和质粒作为shRNA载体沉默人卵巢癌RhoA基因效果的比较

    作者:杨文娟;康佳丽;王小霞;刘启才;聂妙玲

    目的 研究慢病毒和质粒作为RNA干扰载体在沉默卵巢癌RAS同源基因家族成员A(RhoA)基因表达方面的差异.方法 分别将慢病毒及质粒载体携带的针对RhoA基因的siRNA序列感染或转染卵巢癌HO8910细胞,经过嘌呤霉素筛选建立稳定沉默RhoA基因的细胞株.通过荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR、Western blot法、血管形成实验、细胞划痕实验研究两种载体随着细胞培养代数的增加在抑制卵巢癌RhoA基因表达及侵袭和转移能力上的差异.结果 采用质粒载体及慢病毒载体分别建立人RhoA基因稳定沉默卵巢癌细胞株,通过荧光显微镜观察,质粒组细胞绿色荧光蛋白的表达率随培养代数的增加而下降;第15代、第25代时表达率分别为70%、45%,而慢病毒组细胞绿色荧光蛋白表达率维持在95%以上,实时荧光定量PCR及Western blot法发现质粒组和慢病毒组细胞在第3代时RhoA mRNA及蛋白的表达无明显差异;随培养代数的增加,慢病毒组RhoA mRNA及蛋白持续低表达,而质粒组RhoA mRNA及蛋白的表达逐渐增高;细胞划痕实验及血管形成实验表明慢病毒较质粒作为载体介导siRNA对RhoA基因沉默更能持续稳定地抑制卵巢癌细胞的侵袭、转移(P<0.05).结论 慢病毒较质粒作为载体介导RNA干扰能更好沉默目标基因的表达.

  • 金黄色葡萄球菌对Bcap-37细胞TLR2和IL-1β、TNF-α以及NF-kB表达的影响

    作者:张爱莲;喻艳坤;刘赋佩;王丹阳;周浩;张富春

    目的 观察金黄色葡萄球菌对Bcap-37细胞Toll样受体2(TLR2)的表达以及对促炎性细胞因子、核因子κB (NF-κB)的影响.方法 用金黄色葡萄球菌处理Bcap-37细胞,采用RT-PCR检测TLR2 mRNA的表达,流式细胞术检测TLR2蛋白的表达,ELISA分别检测IL-1 β和TNF-α的分泌,Western blot检测NF-κB的表达变化.结果 金黄色葡萄球菌作用于Bcap-37细胞后,TLR2 mRNA和蛋白水平的表达量随着作用时间延长而逐渐增高,分别在4h和6h达到高峰,之后又逐渐下降(P<0.05).IL-1β、TNF-α的表达呈现明显的时间依赖性增高(P<0.05),IL-1β在12 h到达峰值后下降,TNF-α在16 h表达仍然很高.NF-κB的表达随着刺激时间的延长也呈现时间依赖性增高,在12 h时表达量高,14 h开始下降.结论 金黄色葡萄球菌能上调Bcap-37细胞TLR2 mRNA和蛋白的表达,激活Bcap-37细胞NF-κB的表达,促进IL-1β和TNF-α的分泌.

  • 细胞周期相关新基因CACUL1对培养的结直肠癌细胞凋亡的影响

    作者:孔莺;亓小改;白沛松;南克俊

    目的 研究细胞周期相关新基因细胞周期素依赖激酶2相关性Culin结构域1(CACUL1)对肿瘤细胞凋亡的影响,探讨CACUL1与细胞凋亡调控的关系.方法 用紫外线及化疗药物诱导细胞周期的阻滞,研究CACUL1在细胞DNA损伤状态下表达情况;同时用p53野生型及敲除的结直肠癌细胞,应用Western blot、Northern blot等方法检测了CACUL1蛋白及mRNA表达与p53的关系.结果 与细胞凋亡的调控有关,在紫外线及化疗药物诱导的DNA损伤情况下,CACUL1蛋白的表达在2h达高,随着时间的逐渐延长,CACUL1的表达逐渐减低,而这种表达的增高是p53非依赖性的,Northern blot结果显示CACUL1的表达增高是转录后调控机制.CACUL1的高表达能够抑制紫外线及化疗药物诱导的细胞凋亡.结论 CACUL1在细胞凋亡中的作用是以一种转录后调控的p53非依赖方式帮助细胞跨过G1/S检控点,利于细胞生存.

  • 大蒜素对体外培养宫颈癌U14细胞增殖及荷瘤小鼠免疫功能的影响

    作者:刘巍;王智新;汤艳文;刘旭

    宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,发病率仅次于乳腺癌,严重危害妇女的生命健康.目前的化疗药物由于副作用大、干扰机体的免疫功能,使其在临床应用中受到限制.大蒜素是从大蒜的鳞茎中提取出的一种含硫化合物[1],已有研究证实其能抑制人宫颈腺癌HeLa细胞和鳞癌Caski细胞的增殖[2],但对荷瘤小鼠机体免疫功能的作用尚无报道,本研究观察了大蒜素对体外培养宫颈癌细胞增殖及对荷瘤小鼠机体免疫的影响.

  • β-hCG蛋白在大肠杆菌系统的表达、纯化及活性鉴定

    作者:王伟;殷小涛;李云奇;田仁礼;吴昊;阎瑾琦;高江平;于继云

    目的 获得β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)融合蛋白β-hCG/GST并验证其抗原活性.方法 利用PCR法扩增β-hCG全长基因,将其克隆至原核表达载体pET-42a中,构建重组质粒pET-42a-β-hCG,将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析,亲和层析法纯化融合蛋白,目的蛋白用Western blot法鉴定,ELISA检测纯化得到的融合蛋白的抗原活性.结果 测序结果证实成功扩增出目的基因β-hCG;酶切和测序结果证实pET-42a-β-hCG原核表达载体构建成功;转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白;Western blot法及ELISA检测证实纯化后的β-hCG/GST融合蛋白具有良好的免疫原性.结论 成功获得β-hCG/GST融合蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性,为以β-hCG为靶位的抗肿瘤主动免疫治疗研究奠定了基础.

  • 噬菌体随机肽库筛选动脉粥样硬化相关多肽

    作者:肖智;赵序雯;赵明;杨高红

    目的 利用噬菌体展示技术筛选动脉粥样硬化疾病相关多肽,并验证所筛选的阳性噬菌体以及合成蛋白片段结合活性.方法 以动脉粥样硬化患者血清为靶分子,噬菌体12肽库亲和筛选与之结合的阳性噬菌体.经过3轮筛选,从滴度测定平板上随机挑取10个阳性克隆,ELISA鉴定其亲和性.提取阳性噬菌体单链DNA并测序得到12肽序列,通过生物信息学查找相似天然蛋白,合成24肽,后鉴定其结合活性.结果 ELISA显示阳性噬菌体均与患者血清有较强的结合力,序列为GPRPPSAPNMPL,合成24肽也呈现出较高的结合活性.结论 噬菌体展示可以获得动脉粥样硬化相关多肽序列,为该病的免疫研究奠定了基础.

  • 人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达

    作者:王沂;张秀军;刘青;余源;慈雅丽;王洋

    目的 构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定.方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot法鉴定TRAF3IP3基因的表达情况.结果 经限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,成功构建了TRAF3IP3真核表达质粒,荧光显微镜观察可见转染了重组质粒的HEK293细胞有绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot结果证实TRAF3IP3蛋白高水平表达.结论 成功构建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表达质粒,为TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基础.

  • HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达

    作者:王琳;王宇;吴昊;朱晓明;于继云;蒋建利;阎瑾琦

    目的 构建HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,并验证其在293T细胞中的表达.方法 以含有HBV融合抗原的质粒pVAX1-HBV为模板,PCR扩增该融合基因.PCR产物经纯化后,将其克隆至载体pMD18-T中,构建pMD18-T-HBV质粒,经酶切和测序鉴定后,将其定向克隆入真核表达载体pIRES-neo,获得真核表达质粒pIRES-neo-HBAg.将该重组表达质粒瞬时转染人293T细胞,采用Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证HBV融合抗原的表达.结果 成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原能够在293T细胞中表达.结论 成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg.

  • 苦参素对人肺癌A549细胞增殖及caspase3/7蛋白活性的影响

    作者:李铭;廖红;程恒辉

    目的 研究不同浓度的苦参素对人肺癌A549细胞增殖及凋亡执行分子caspase3/7蛋白活性的影响.方法 体外复苏与培养人肺癌A549细胞,用不同浓度(0、0.5、1、2 g/L)的苦参素处理A549细胞24、48、72 h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测苦参素对A549细胞增殖的抑制作用,比色法检测培养液中caspase3/7活性.结果 苦参素对A549细胞的增殖抑制率呈时间、剂量依赖性;随苦参素浓度的增高及时间的延长,caspase3/7蛋白活性增强(P<0.05).结论 苦参素对人肺癌A549细胞的增殖有明显抑制作用,可能与激活caspase3/7活性,促进细胞凋亡有关.

  • 塞来昔布联合替吉奥对胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

    作者:孟翠翠;陈晓品;罗治彬

    目的 研究选择性环氧化酶-2抑制剂塞来昔布联合替吉奥对胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及可能机制.方法 建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后将裸鼠随机分为阴性对照组、塞来昔布组、替吉奥组、塞来昔布联合替吉奥组,连续给药21 d后,取材,测量肿瘤体积、计算抑瘤率,TUNEL检测肿瘤组织的凋亡率,免疫组化检测各组PCNA、Bcl-2、caspase-3的表达情况.结果 塞来昔布组、替吉奥组、联合给药组的抑瘤率分别为30.8%、50.1%、78.8%.各干预组较对照组凋亡率明显增加(P<0.01),联合给药组较单药组凋亡率明显增加(P<0.01).各干预组PCNA、Bcl-2的表达较对照组明显降低(P<0.01),联合给药组较单药组明显降低(P<0.05).各干预组caspase-3的表达较对照组明显升高(P<0.05),联合给药组表达较单药组明显升高(P<0.01).结论 塞来昔布、替吉奥均有明显的抗肿瘤作用,二者联合表现为协同作用,可能是抑制肿瘤细胞的增殖、促进凋亡所致.

  • 考尼伐坦抑制精氨酸血管加压素诱导的心脏成纤维细胞增殖及胶原表达

    作者:谢永进;孙志军;盖鲁粤

    目的 探讨大鼠心脏成纤维细胞(CFs)经精氨酸血管加压素(AVP)及其受体拮抗剂考尼伐坦(CON)干预后,细胞的增殖和细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的变化.方法 采用胶原酶Ⅱ消化法、差速贴壁法、差速脱壁法获取并纯化CFs,应用CCK-8活细胞计数试剂盒检测细胞活性,RT-PCR方法检测细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1 A1)和Ⅲ型胶原蛋白α1链(COL3A1) mRNA的变化,Western blot法检测COL1A1、COL3A1蛋白表达的变化.结果 干预培养的CFs 24 h后,10-7 mol/LAVP可显著促进CFs细胞增殖(P<0.01),而10-7 mol/L CON可显著抑制这一作用(P<0.01).干预培养的CFs 12 h后,10-7moL/L AVP可诱导CFs COL1A1、COL3A1 mRNA表达显著增加,同时蛋白表达亦显著增加,而10-7 mol/L的CON可抑制这些作用.结论 AVP可促进CFs的细胞增殖和COL1A1、COL3A1 mRNA和蛋白表达,而CON可部分抑制这种作用.

  • 食管鳞癌肿瘤微环境中miRNA与TGF-β1的相关性分析

    作者:朱龙萍;金丽艳;蒋日月;汪茜茜;蒋健;毛朝明;陈德玉

    目的 检测mir-18a-5p、mir-23a-3p、mir-24-3p、mir-25-3p和TGF-β1在食管鳞癌(ESCC)患者肿瘤微环境中的表达水平,分析它们在ESCC发生发展中的作用及相互关系.方法 收集52例ESCC患者癌组织、癌旁组织手术标本;实时荧光定量PCR检测ECA-109、TE-1细胞株、正常食管上皮细胞和52例ESCC患者手术标本的mir-18a-5p、mir-23a-3p、mir-24-3p、mir-25-3p和TGF-β1的mRNA表达水平;Western blot法检测TGF-β1在上述细胞以及组织中的蛋白表达情况.结果 与正常食管上皮细胞相比,mir-18a-5p、mir-24-3p、mir-25-3p、mir-23a-3p在ESCC细胞株ECA-109中的表达明显增高(P<0.05),其中前3种miRNA在ESCC细胞株TE-1的表达明显增高(P<0.05);TGF-β1在ESCC细胞株ECA-109、TE-1中明显低表达(P<0.05).与癌旁组织对照组相比,52例ESCC患者癌组织标本的mir-18a-5p、mir-23a-3p、mir-24-3p、mir-25-3p显著升高[上调比例分别为86.5% (45/52)、63.5% (33/52)、78.8%(41/52)、86.5%(45/52),P<0.05],TGF-β1显著降低(P<0.05).ESCC患者mir-18a-5p、mir-23a-3p、mir-24-3p、mir-25-3p的高表达和TGF-β1的低表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置等无明显关系,但mir-18a-5p、mir-23a-3p与患者癌组织分化程度相关,mir-25-3p与患者癌组织分化程度、浸润深度和范围相关(P<0.05).癌组织中TGF-β1的低表达与患者癌组织分化程度、浸润深度和范围相关(P<0.05).mir-18a-5p、mir-23 a-3p与TGF-β1的表达无相关性,mir-24-3p、mir-25-3p与TGF-β1的表达呈负相关.结论 ESCC肿瘤微环境中mir-18a-5p、mir-23a-3p、mir-24-3p、mir-25-3p和TGF-β 1可能在ESCC的发生发展中有一定作用.

  • 老年类风湿性关节炎患者血清ECE-1、ET-1、TNF-α和PBMC中PgP表达增强

    作者:李小民

    类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以对称性、多关节、小关节为主的慢性全身性自身免疫性疾病,其主要病理变化为巨噬细胞和T淋巴细胞等慢性炎症细胞浸润及大量多种细胞因子的分泌,终促使关节骨质破坏、滑膜组织渐进性损伤[1-2].内皮素转换酶(endothelin-converting enzyme1,ECE-1)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)以及TNF-α、P-糖蛋白(P-glycoprotein,PgP)与RA的发生、发展有重要关系.本研究通过ELISA检测了老年类风湿性关节炎患者血清中ECE-1、ET-1、TNF-α、Pgp水平,初步探讨老年类风湿性关节炎血清ECE-1、ET-1、TNF-α、PgP表达变化及其临床意义.

  • 无症状期HIV感染者CD4+和CD8+T细胞计数与病毒载量的关系

    作者:蒋自强;郭会军;李强;李杰;张晓伟;谢正;刘延泽

    艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染所导致的以免疫系统功能缺陷为特征的慢性高致死率传染病.CD4+T细胞是HIV损害的主要靶细胞,HIV可引起CD4+T淋巴细胞进行性丢失与功能受限[1-2].在HIV感染早期,CD8+T细胞增多并通过分泌各种细胞因子杀死被病毒感染的靶细胞,其高表达与病毒量载量呈正相关[3],而随着疾病进展,CD8+T细胞会消耗性减少.CD4+T细胞、CD8+T细胞计数与病毒载量的相关性一直为研究者关注[4-6].本研究检测了无症状期感染者,外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞计数与病毒载量并分析它们的相关性.

  • 慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞糖皮质激素抵抗的体外观察

    作者:孙雪皎;钟小宁;何志义;覃向林;张扬

    慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diease,COPD)是以气道、肺部及全身炎症为特征的疾病,吸烟及有害颗粒的吸入是导致炎症发生发展的主要原因.糖皮质激素是目前常用的治疗COPD的抗炎药物,但临床疗效不满意,可能与COPD组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)活性下降导致的糖皮质激素抵抗有关[1-2].既往的研究表明红霉素可以增加氧化应激下单个核细胞HDAC的活性,并减少NF-κB转录活性及IL-8的合成[3].因此,本实验采用分离的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),建立糖皮质激素抵抗的体外细胞模型,从而为进一步寻找有效的减轻COPD糖皮质激素抵抗的药物及其机制研究提供基础.

  • 血清补体H因子在系统性红斑狼疮早发冠心病患者中的水平及意义

    作者:张晶;郭韵;蒋莉;张晓莉;王晓非

    系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种弥漫性、全身性自身免疫病,补体活化是其发病特点之一.近年来其发病人数明显增多,有流行病学研究发现SLE人群的冠心病患病率为6% ~10%,其风险增高超过同年龄段普通人群的50倍[1].补体H因子(complete factor H,CFH)是补体系统中旁路激活途径重要的调节物质之一.

  • 类风湿性关节炎患者microRNA-146a的表达及与血清学指标的相关性

    作者:荀春华;胡志坚;韩峰;伍模鑫

    类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是常见的以关节滑膜慢性炎症为主要特征的自身免疫性疾病,其主要病理改变为关节滑膜明显增厚并有大量炎症细胞浸润,血管翳形成以及软骨组织的侵蚀与破坏[1].microRNA可被分泌释放到细胞外,参与多种炎性和自身免疫性疾病的发病过程[2].Micro-RNAs (miRNAs)是一类短的(大约20 ~ 22个核苷酸)非编码RNA,介导RNA干扰和在翻译水平抑制蛋白表达.miRNAs与自身免疫性疾病进程有关且可能参与RA新的调控机制[2-4].

  • 外周血CD4+CXCR5+滤泡辅助性T细胞与慢性乙型肝炎患者高球蛋白血症相关

    作者:马志远;谢玉梅;王宇;马力;何瑜;张颖;连建奇;郭永红;贾战生

    目的 检测外周血CD4+ CXCR5+滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)的频率及其表面标志,分析与慢性乙型肝炎(乙肝)患者高球蛋白血症的关系.方法 收集健康人、乙肝患者及乙肝高球蛋白血症患者的外周血,分离血浆及外周血单个核细胞(PBMC),ELISA检测血浆中IL-21、CXCL13和IFN-γ水平,流式细胞术检测PBMC中CD4+ CXCR5+ Tfh细胞的频率及其表面PD-1、ICOS及CD40L的表达情况.结果 乙肝高球蛋白血症患者外周血CD4+ CXCR5+ Tfh细胞占CD4+T细胞的百分比(22.6±4.7)%明显高于普通慢性乙肝患者(11.9±3.9)%及健康志愿者(6.8±3.9)%,CD4+ CXCR5+ Tfh细胞上PD-1和CD40L的表达水平升高,血清IL-21及CXCL13水平升高,而IFN-γ水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 外周血CD4+ CX-CR5+ Tfh细胞与乙肝高球蛋白血症的发病相关.

  • CD28在多发性肌炎肌肉组织中的表达及意义

    作者:胡萌萌;韩文娟;何方园;贾宏阁

    目的 研究多发性肌炎(PM)患者肌肉组织中CD28分子的表达情况,探讨CD28在PM中的作用.方法 临床和病理诊断确诊的PM患者17例,对照组为7例肌营养不良患者.采用免疫组织化学方法和实时荧光定量PCR方法检测肌肉中CD28的表达水平.结果 与肌营养不良患者比较,免疫组织化学方法观察到PM患者肌肉组织中CD28表达量减少;实时荧光定量PCR结果两组之间CD28mRNA表达有统计学差异,PM患者表达降低(P<0.01).结论 CD28的减少参与多发性肌炎的病理过程.

  • 他克莫司对肾移植受者外周血NK和NKT细胞比例的影响及临床意义

    作者:王旭珍;薛武军;田普训;丁小明;冯新顺;田晓辉;郑瑾;魏萌

    他克莫司(Tacrolimus)是一种强效免疫抑制剂,现已广泛应用于肾脏、肝脏及心脏移植,有效减低了排异反应的发生,提高了移植受者的存活率.但是他克莫司个体药代动力学差异大,不同个体对其血药浓度的敏感性及耐受性有差异,故单纯依靠血药浓度监测不能有效反映移植受者的免疫状态.因此如何了解移植受者的免疫状态,指导免疫抑制剂的个体化应用,在免疫抑制不足及免疫过度之间寻找平衡,成为困扰移植医生的问题.NK细胞(natrural killer cell)是天然免疫系统的主要效应细胞.

  • TRPM2蛋白在大肠杆菌的表达纯化和多克隆抗体制备

    作者:孙宏卫;罗海华;王妮;欧小利;温晓梨;姜勇;梅柱中

    目的 获得人瞬时受体电位M2(TRPM2)离子通道蛋白N末端的原核表达融合蛋白,制备兔抗人TRPM2多克隆抗体.方法 采用PCR扩增编码人TRPM2蛋白N末端l~334位氨基酸残基(在人与小鼠中高度保守)的cDNA序列,将其克隆至谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达质粒pGEX-4T-3上.将原核表达重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导GST-TRPM2N融合蛋白的表达,并纯化获得相对分子质量(Mr)约70 000的GST-TRPM2融合蛋白.将此融合蛋白与弗氏完全佐剂混合后采用经典的4次免疫法免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,用Western blot法对该抗体进行鉴定.结果 通过PCR扩增获得编码TRPM2蛋白N末端的cDNA片段并将其定向克隆至原核表达载体pGEX-4T3中,采用IPTG诱导、蛋白质的变性与复性纯化获得融合蛋白GST-TRPM2N,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备获得特异性抗TRPM2蛋白的多克隆抗体.结论 成功制备了特异性抗人TRPM2蛋白的多克隆抗体.

  • 膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备

    作者:高旭东;王永志;时圣凤;李忠鹏;李小宇;徐文静;张正坤;路扬;张佳诗

    目的 表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb).方法 通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21 (DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利用镍离子亲和层析纯化PAT蛋白,分析PAT蛋白活性.免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾脏与Sp2/0细胞融合,经间接ELISA筛选分泌抗PAT蛋白抗体杂交瘤细胞.结果 在大肠杆菌中以可溶形式表达出重组PAT蛋白,纯化的重组PAT蛋白具有乙酰转移酶活性,制备了9株抗PAT蛋白mAb.结论 表达的PAT蛋白可以用于除草剂解除剂研究,制备的mAb可能用于转基因产品的检测研究.

  • 降钙素原基因克隆表达及多克隆抗体的制备

    作者:谭倩;田卫群;王礼;彭威;陈凡

    目的 克隆、表达降钙素原(PCT),制备相应的多克隆抗体.方法 根据GenBank上PCT的基因序列,设计10条用于基因拼接的DNA引物,利用PCR技术扩增PCT基因并构建pGEX-KG-PCT重组质粒,在大肠杆菌中表达融合蛋白PCT-GST,然后用融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western blot法进行生物活性鉴定,并利用琼脂免疫扩散实验检测了多克隆抗体的特异性和效价.结果 成功获得PCT全长基因,重组质粒pGEX-KG-PCT在大肠杆菌中成功表达,SDS-PAGE电泳显示蛋白相对分子质量(Mr)大小为36 000左右.利用纯化的蛋白同时制备了GST和PCT-GST多克隆抗体,琼脂免疫扩散实验显示多克隆抗体可以特异性识别PCT,效价为1∶4.结论 成功克隆、表达并纯化出PCT蛋白,制备了相应的多克隆抗体.

  • 人精子肌动蛋白样蛋白7a蛋白在大肠杆菌系统的表达纯化及多克隆抗体制备

    作者:付俊;缪对英;宋伟

    目的 在大肠杆菌系统表达并纯化人精子肌动蛋白样蛋白7a(ACTL7a)的N段(1-70),制备兔抗ACTL7a多克隆抗体.方法 构建重组表达质粒pGEX-6p-1-ACTL7a(1-70),以重组质粒转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性重组菌,IPTG诱导目的蛋白表达,通过镍离子金属螯合树脂和谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B树脂两次亲和纯化和分子筛分离目的蛋白;以表达的ACTL7a(1-70)蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗ACTL7a的多克隆抗体.ELISA检测抗体效价,Western blot法鉴定抗体特异性,免疫荧光组织化学技术检测ACTL7a在曲精小管细胞的表达.结果 经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达出目的蛋白ACTL7a(1-70),纯化后免疫新西兰大白兔,成功获得抗血清.血清效价达到1∶160000以上,且具有良好的特异性.结论 成功构建了ACTL7a基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达,经纯化获得高纯度的目的蛋白;制备出兔抗ACTL7a抗体,效价及特异性均良好.

  • 1,25-二羟维生素D3的免疫调节作用新进展

    作者:孔菲菲;厉小梅

    维生素D3(VitD3)不是内分泌细胞合成的激素,但在体内经修饰活化后可成为一种重要的激素-1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3],它与靶细胞内的核受体结合后,能够影响基因转录,发挥多种生物学效应.1,25(OH)2D3以及维生素D受体在淋巴细胞的分化发育、细胞周期的进程以及细胞因子的产生方面存在广泛的影响.本文综述了1,25(OH)2D3的主要作用机制,以及在自身免疫性疾病中的潜在作用.

  • 细胞因子风暴在流行性感冒病毒感染中的作用及防治研究

    作者:张海祥;谢鑫;张科进;胡军

    流行性感冒病毒(流感病毒)感染具有较高的致病率和死亡率,其感染的严重程度和病毒引起的以过度炎症反应为特征的细胞因子风暴密切相关.本文综述了细胞因子风暴在流感病毒感染中的病理表现、作用机制及其研究进展,并对细胞因子风暴相关的流感病毒感染的防治进行了探讨.

  • 新型胶原样凝集素的研究进展

    作者:明亮;王万海

    胶原样凝集素作为脊椎动物C-型凝集素超家族内的成员,以含有胶原样结构域及糖识别结构域为其显著特征.胶原样凝集素除了“经典”成员甘露聚糖结合凝集素(MBL)、表面活性蛋白A(SP-A)和SP-D外,还发现肝胶原样凝集素1(CL-L1)、肾胶原样凝集素1(CL-K1)和胎盘胶原样凝集素1(CL-P1).在机体固有免疫系统中,这些“新”型胶原样凝集素除了同“经典”胶原样凝集素一样发挥着十分重要的作用外,它们还具有其独特的生理功能.本文综述了这些新发现的胶原样凝集素的分子结构、组织分布以及生物学功能等方面的研究进展.

  • NOD样受体蛋白炎症体亚家族研究进展

    作者:林文龙;王晓健

    炎症体作为固有免疫的一类模式识别受体,在抵抗外来病原微生物和自身非菌性炎症反应中发挥重要作用.NOD样受体(NLR)蛋白炎症体亚家族属于NLRs炎症体家族的一员,随着NLRPs炎症体生理功能的不断外延,它们不仅参与固有免疫的过程,而且参与到其他的常见生理过程,并发挥重要的调控作用.本文主要综述了近年来NLR蛋白炎症体亚家族的研究进展.

  • 检测结核分枝杆菌蛋白抗原b夹心ELISA的建立及其应用

    作者:雷蕾;宋波;李琦;史明;边婷;杨毅宁;李娜;宋朝君;赵钢

    目的 建立定量检测脑脊液中结核分枝杆菌蛋白抗原b的夹心ELISA,以便用于诊断结核性脑膜炎.方法 制备抗结核分枝杆菌蛋白抗原b鼠源性单克隆抗体(mAb)及兔多克隆抗体;以单克隆抗体为包被抗体,多克隆抗体为检测抗体,建立检测结核分枝杆菌蛋白抗原b的双抗体夹心ELISA;应用此方法检测正常人(n=6)、非结核性脑膜炎患者(n=26)及临床确诊结核性脑膜炎患者(n=42)的脑脊液标本中蛋白抗原b的含量,并分析其与结核性脑膜炎活动性感染的相关性.结果 成功建立了检测蛋白抗原b的夹心ELISA,敏感度可达0.4 μg/L.应用该方法在正常人及非结核性脑膜炎患者脑脊液中未检测到蛋白抗原b;在结核性脑膜炎患者脑脊液中蛋白抗原b含量显著升高.结论 建立了敏感、特异检测结核分枝杆菌蛋白抗原b含量的ELISA,为活动性结核性脑膜炎的诊断提供一种有效手段.

  • 制备细胞因子诱导的杀伤细胞的方法比较

    作者:鲍锋;张赫;尹彬;张建伟;邓丹

    生物治疗是目前国内外治疗恶性肿瘤常规方法即手术治疗、化疗和放疗之外的一种新型疗法.过继性细胞免疫治疗(adaptive cellular immunotherapy,ACI)是生物治疗的一种,它是一种通过将具有抗肿瘤活性的、能直接或间接介导抗肿瘤效应的免疫细胞输注肿瘤宿主体内进行肿瘤治疗的方法[1].对于促进患者免疫系统的重建、消除残留病变及骨髓净化都具有良好效果[2].细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK细胞)是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群异质细胞,具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广等优点[3-4],已广泛应用于临床,但疗效差异很大,原因可能与制备CIK细胞的方法、所使用细胞因子的种类和剂量密切相关.本研究拟采用3种方法制备CIK细胞,并比较用这3种方法制备的CIK细胞的生物学特性及其杀瘤活性,为制备高活性的CIK细胞提供方法,以提高CIK细胞临床应用的疗效.

细胞与分子免疫学分期目录
期数
2018 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2015 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2008 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2006 01 02 03 04 05 06
2005 01 02 03 04 05 06 z1
2004 01 02 03 04 05 06
2003 01 02 03 04 05 06
2002 01 02 03 04 05 06
2001 01 02 03 04 05 06
2000 01 02 03 04 05 06
1999 01 02
1995 01 02 03
1994 01 02
1993 01 02 03 04
1992 01 02 03 04
1991 01 02 03 04
1990 01 02
1989 01 02 03 04

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