细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子: 0.81
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1007-8738
- 国内刊号: 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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Twist基因逆转录病毒载体的构建及其诱导正常乳腺上皮细胞发生上皮间质转化
目的 构建Twist基因逆转录病毒载体,研究其对人正常乳腺上皮细胞MCF10A的影响.方法 酶切pcDNA3/myc-Twist获得myc-Twist,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组质粒pB AB E-myc-Twist.通过酶切、测序鉴定Twist基因正确后,在体外将质粒pBABE-myc-Twist和其对照分别与包装质粒pAmpho共同转染人胚肾上皮细胞系293T细胞,进行逆转录病毒的包装,并感染人正常乳腺MCF10A上皮细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选,获得成功转入Twist的MCF10A-Twist细胞和MCF10A-Vector对照细胞.通过RT-PCR和Western blot法验证Twist细胞在MCF10A-Twist和MCF10A-Vector细胞内的表达.免疫荧光技术和Western blot法检测细胞内上皮间质转化(EMT)标志蛋白的表达.Transwell(R)法检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 重组逆转录病毒载体质粒pBABE-myc-Twist经酶切和测序鉴定构建正确;Twist基因被逆转录病毒成功导入MCF10A细胞,并在靶细胞内稳定表达,RT-PCR检测到Twist mRNA在MCF10A-Twist细胞中表达,Western blot法检测发现myc-Twist蛋白在MCF10A-Twist细胞中表达;免疫荧光和Western blot法检测显示在MCF10A-Twist细胞中E-cadherin表达显著下调、vimentin表达明显上调;与MCF10A-Vector细胞相比,Transwell(R)法检测发现MCF10A-Twist细胞迁移和侵袭能力明显增加(P<0.01).结论 Twist诱导MCF10A细胞发生EMT转化,并促进其迁移和侵袭.
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FBXO6基因真核表达载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达
目的 构建F盒蛋白6(FBXO6)基因真核表达载体.方法 采用PCR方法合成含有EcoR Ⅰ和Bgl Ⅱ双酶切位点的FBXO6 cDNA全长.分别构建载体pEGFP-C1-FBXO6和pEGFP-C1-anti-FBXO6,采用菌落PCR、双酶切鉴定以及测序证实cDNA片段大小和序列正确.将载体pEGFP-C1-FBXO6和pEGFP-C1-anti-FBXO6分别转染HEK293T细胞,Western blot法检测FBXO6蛋白的表达.结果 pEGFP-C1-FBXO6和pEGFP-C1-anti-FBXO6包含大小、序列正确的FBXO6片段;FBXO6蛋白在转染pEGFP-C1-FBXO6的293T细胞中高表达;在转染pEGFP-C1-anti-FBXO6的HEK293T细胞中表达降低.结论 成功构建FBXO6基因正义真核表达载体pEGFP-C1-FBXO6和反义真核表达载体pEGFP-C1-anti-FBXO6.
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CD4+CD25+调节性T细胞在多脏器功能障碍综合征中的变化及药物干预
目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠外周血中的变化及乌司他丁和血必净的干预效果.方法 以内毒素(LPS)建立MODS模型,并以乌司他丁和血必净注射液干预.应用流式细胞仪检测Treg水平变化.结果 模型组、乌司他丁组和血必净组CD4+CD25+Treg的百分比明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);乌司他丁组和血必净组的水平又明显高于模型组(P <0.05或P<0.01),但二组相比无统计学差异(P>0.05).结论 CD4+CD25+Treg在大鼠MODS中的百分比升高,并参与了MODS的病情调节;乌司他丁和血必净能调升CD4+CD25+Treg的相对含量.
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补体C1q与C3c在脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织中的表达
目的 观察脑缺血再灌注(L/R)损伤大鼠脑组织中补体C1q与C3c的表达,探讨补体反应与小胶质细胞在脑I/R损伤中的作用及其机制.方法 48只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、假手术组、I/R模型24h、72 h、7d、15 d组,线栓法建立局灶性大脑中动脉闭塞再灌注模型.尼氏体染色观察神经元结构,免疫组化法检测CD11b以及C1q、C3c的表达水平.结果 与sham组相比,I/R 24 h组脑组织尼氏体染色加深,随后染色反应减弱,尤以I/R 72 h组减少为显著;I/R 24 h组脑组织CD11b表达增多且在I/R 72 h组达到峰值,随后逐渐减少,与sham组比较,全部模型组差异显著(P<0.05);I/R24 h组脑组织C1q与C3c急剧增多且在I/R7 d组达到峰值,随后见下降趋势,全部模型组与sham组比较差异显著(P<0.05).结论 脑I/R损伤大鼠脑组织中C1q、C3c与CD11b的表达呈正相关.提示脑I/R损伤后,启动了脑内固有免疫反应,补体C1q与C3c活化,同时激活小胶质细胞,在脑I/R损伤中起到保护或损伤作用.
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hHCN2基因转染的脂肪组织来源的成体干细胞可分化为起搏样细胞
目的 大鼠脂肪来源的成体干细胞(ADSC)转染人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2(hHCN2)基因,观察其作为起搏细胞的可行性.方法 取生长良好的ADSC转染hHCN2基因,通过RT-PCR、Western blot分析、免疫荧光技术检测hHCN2基因及蛋白的表达,用膜片钳技术检测细胞的电生理特征并记录其内向电流.将转染hHCN2基因的ADSC与心室肌细胞共培养,观察其对心室肌细胞自发性搏动的影响.结果 hHCN2基因修饰的大鼠ADSC能表达较强的hHCN2基因及蛋白,还能够产生超级化激活内向离子流.将其与心室肌细胞共培养,能使心室肌细胞的自发性搏动明显增快增强.结论 将hHCN2基因转染ADSC能够使其分化为具有起搏功能的起搏样细胞,为进一步优化生物起搏器的研究提供了材料.
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复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化TGF-β1/Smads信号通路的影响
目的 探讨复方三七饮(CPNG)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常组、模型组、醋酸泼尼松组、CPNG大、中、小剂量组[CPNG(H、M、L)],每组10只.经气管内注入BLM(5mg/kg)制备大鼠肺纤维化模型.造模第2天,治疗组分别灌服醋酸泼尼松3.33 mg/(kg ·d)、CPNG大、中、小剂量(100、50、25) mg/(kg·d),正常组和模型组大鼠灌服等体积的蒸馏水,1次/d.28 d后处死大鼠,HE染色和Masson染色进行肺组织病理学观察;碱水法测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;Western blot法检测TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白的表达水平.结果 与模型组大鼠比较,肺组织的病理组织学HE和Masson染色显示CPNG能明显减轻大鼠肺泡炎和肺纤维化程度(P<0.01);CPNG各剂量组大鼠肺组织中HYP降低(P <0.01);CPNG各剂量组TGF-β1、Smad2蛋白的表达水平降低(P<0.01),Smad7蛋白表达水平升高(P<0.01).结论 复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化具有一定的防治作用,可能与调节TGF-β1/Smads信号通路有关.
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槲皮素调节葡萄糖氧剥夺损伤的星形胶质细胞细胞周期基因的表达
目的 研究槲皮素对葡萄糖氧剥夺损伤星形胶质细胞基因表达的影响及作用机制.方法 将原代培养成熟的星形胶质细胞分为单纯葡萄糖氧剥夺组和葡萄糖氧剥夺联合槲皮素处理组(槲皮素处理组),用基因芯片筛查缺血缺氧4h后的槲皮素处理对星形胶质细胞基因表达变化的影响,并用实时定量PCR(qRT-PCR)对差异表达基因进行了验证.结果 与单纯葡萄糖氧剥夺组相比,槲皮素处理组基因表达谱芯片筛查出的31个基因与细胞周期及其相关调控密切相关,其中上调基因为5个,下调基因26个.用qRT-PCR对其中6个基因进行了验证,检测结果和基因芯片分析结果一致.结论 槲皮素能调控葡萄糖氧剥夺损伤的星形胶质细胞细胞周期相关基因的表达.
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肠道菌群失调促进小鼠肺树突状细胞成熟并增强TLR2和TLR4表达
目的 观察卵清蛋白(OVA)雾化吸入激发对抗生素所致肠道菌群失调小鼠肺组织中树突状细胞(DC)成熟度和Toll样受体2(TLR2)、TLR4表达的影响.方法 将64只3周龄雌性BALB/c小鼠随机分为4组,菌群失调组、菌群失调加激发组、激发组、对照组,每组16只.于实验第14天用流式细胞术检测肺组织中DC成熟度(MHC-Ⅱ类分子)及其膜表面TLR2、TLR4的表达水平,采用免疫组织化学法检测肺组织中转化生长因子p1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1、IL-6的产生水平.结果 与对照组和激发组比较,菌群失调组及菌群失调加激发组小鼠肺组织中DC细胞膜表面MHC-Ⅱ类分子及TLR2、TLR4的表达均增加,但这些分子在上述2组中的表达无差异(P>0.05).与其他3组比较,菌群失调加激发组小鼠肺组织及BALF中TGF-β1、IL-6水平增高.结论 肠道菌群失调使肺部DC成熟度增高,TLR2、TLR4表达增强.
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复方雷公藤凝胶剂对大鼠佐剂型关节炎的疗效及肝毒性研究
目的 探讨不同剂量复方雷公藤凝胶剂(TWCG)外用对佐剂型关节炎(AA)大鼠的治疗作用及其对肝功能的影响.方法 以弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠关节炎模型,用不同剂量TWCG对其外敷治疗,以扶他林乳胶剂为阳性对照,以凝胶基质为空白对照.观察各组大鼠关节肿胀度;ELISA测定大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)的含量;免疫组织化学方法检测踝关节软骨中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的含量;以全自动生化分析仪检测大鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平来观察其肝毒性.结果 与空白对照组相比,扶他林乳胶剂组及不同剂量TWCG组均能显著减轻大鼠关节肿胀度(P<0.05);能明显降低血清中TNF-α的含量并增加血清中IL-4含量(P<0.05),能显著降低关节组织中MMP-3的含量(P<0.05),且中、高剂量TWCG组效果明显优于扶他林及小剂量TWCG组(P<0.05);但各组大鼠之间ALT、AST差异无统计学意义(P>0.05).结论 TWCG对AA大鼠有明显的抗炎消肿作用,能有效保护关节软骨组织,同时无明显的肝脏毒性.
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脑脊髓损伤大鼠局部Th1/Th2细胞相关因子的表达及意义
目的 分析大鼠急性脑脊髓性损伤后脑脊髓中Th1和Th2细胞相关因子的表达水平,探讨其在持续性二次损伤中可能的作用.方法 制备SD大鼠急性脑脊髓性损伤模型,随机分为损伤组和脂多糖(LPS)处理组,各组又分别对脑和脊髓进行实验处理.用荧光定量PCR分别检测不同组别大鼠脑脊髓中Th1和Th2细胞相关因子,并进行相关性分析.结果 与对照组相比,损伤和LPS处理的脑组织Th1细胞相关的细胞因子IFN-γ表达明显增高(P<0.05),而T-bet的表达并无明显改变;在损伤和LPS处理的脊髓中,IFN-γ和转录因子T-bet、HLX的表达均显著升高(P<0.05).无论是脊髓损伤组还是LPS处理组,细胞因子IL-4和转录因子GATA3均与对照组无异,呈低表达状态.结论 脑脊髓损伤后呈现不同程度的Th1细胞相关因子上调,尤以可溶性的细胞因子IFN-γ为显著,脊髓损伤时出现T-bet与HLX表达上调.
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肿瘤靶向性RGD-IFN-α2a融合蛋白在原核细胞中的表达与纯化
RGD肽是一类含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp)的短肽,作为整合素和其配体相互作用的识别位点,能与肿瘤细胞或肿瘤组织新生血管特异性高表达的某些整合素如αV β3结合,从而将治疗效应分子靶向性地导入肿瘤部位,有效减少肿瘤治疗中对正常组织细胞的损害,提高药物本身疗效[1].干扰素(interferon,IFN)是一类重要的细胞因子,具有抗病毒、抑制某些细胞生长、免疫调节、抑制和杀伤肿瘤细胞等多种作用,在临床上已被广泛用于恶性肿瘤与病毒疾病的治疗[2-3].增强型绿色
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血清基质金属蛋白酶3对类风湿性关节炎患者骨关节损伤和疗效评估的价值
目的 研究血清基质金属蛋白酶3(MMP3)在类风湿性关节炎(RA)患者骨关节损伤和临床疗效评价中的价值.方法 纳入RA患者109例及健康志愿者23例,搜集患者所有临床信息,并检测血清MMP3、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸多肽(CcP)抗体含量.结果 RA患者血清RF、抗CCP抗体和MMP3含量均明显高于健康志愿者,活动期RA的血清RF和MMP3含量显著高于稳定期RA(P <0.05).随着RA患者骨关节损伤逐渐加重,血清CRP、抗CCP抗体与MMP3的表达都逐渐增高,但仅MMP3的增加有统计学意义(P <0.05);RA患者的血清MMP3与CRP、RF有较强的正相关,并与关节损伤程度呈正相关.TNF拮抗剂与甲氨蝶呤联合治疗后,RA患者DAS28评分、血清CRP、抗CCP抗体和MMP3含量较治疗前均显著降低(P<0.05),MMP3降低幅度为明显.结论 血清MMP3用于评估RA患者骨损伤程度和治疗效果优于其他传统的、常规实验室指标.
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系统性红斑狼疮患者外周血CD4+和CD8+T细胞PD-1的表达和意义
目的 探讨程序性死亡分子1 (PD-1)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+和CD8+T细胞上的表达及临床意义.方法 应用流式细胞仪检测51例SLE患者和38例健康对照者外周血T细胞亚群表面PD-1表达水平,比较SLE稳定组、活动组和健康对照组以及狼疮肾炎组和无狼疮肾炎组之间CD4+和CD8+T细胞表面PD-1表达的百分比,并分析其与临床表现及实验室检查数据的相关性.结果 SLE活动组CD4+T细胞PD-1表达水平高于健康对照组和不活动组,差异均有统计学意义(P<0.05).SLE活动组、稳定组CD8+T细胞PD-1表达水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05).狼疮肾炎患者CD4+PD-1+和CD8+PD-1+T细胞分别高于无狼疮肾炎患者(P<0.01).SLE患者中抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗核小体抗体阳性组外周血CD4+和CD8+T细胞PD-1表达水平均高于对应阴性组.SLE患者CD4+和CD8+T细胞PD-1表达百分率与SLE疾病活动度指数(SLEDAI)、尿蛋白定量呈正相关,与补体C3呈负相关.结论 SLE患者外周血CD4+和CD8+T细胞PD-1表达异常,与SLEDA1和自身抗体产生有明确的相关性.
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HAb18G/CD147在多种恶性肿瘤中的表达及其临床意义
目的 探讨HAb18G/CD147表达与食管癌、结肠癌、宫颈癌、肺癌、卵巢癌和肝细胞癌的临床相关性.方法 应用免疫组织化学SP染色法分析上述6种恶性肿瘤及其癌旁组织和淋巴结转移灶标本中CD147基因表达和定位,并对CD147表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况进行分析.结果 相对于癌旁组织,CD147在6种肿瘤中的表达均明显生升高.CD147表达与肿瘤的分化程度、浸润深度和淋巴结转移均显著正相关.结肠癌、宫颈癌以及食管癌中,CD147在浸润深的组织中的表达显著升高(P<0.05);宫颈癌、食管癌、肺癌以及卵巢癌中,CD147在淋巴结转移灶中的表达显著升高(P<0.05),但在结肠癌中差别不显著;结肠癌、宫颈癌、食管癌以及肺癌中,CD147在分化差的组织中的表达显著升高(P<0.05).结论 CD147表达在分化差、浸润深以及淋巴结转移的组织中明显升高,提示CD147可能是恶性肿瘤的预后指标.
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急性脑梗死患者外周血调节性T细胞相关因子Foxp3和IL-10的动态表达
脑梗死以其致残率、病死率高,易复发的特点,是严重危害人类健康的常见病、多发病.急性脑梗死后的炎症反应产生的炎性介质是缺血半暗带和周围神经元损害的重要机制之一.调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)在小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型中具有保护作用[1],AS后出现的炎性免疫反应是导致脑梗死的重要因素之一.脑梗死后受损脑组织产生较多的白细胞浸润和炎性因子,参与了急性脑缺血神经细胞损害的病理过程[2-4],Treg以及相关因子叉状头-翅膀状螺旋转录因子3 (forkhead/winged helix transcription factor 3,Foxp3)和IL-10在此过程中发挥了重要作用.本研究观察了急性脑梗死患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中Foxp3 mRNA及血清中IL-10水平的动态变化.
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人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备
目的 表达人乳头瘤病毒16型(HPV16) E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清.方法 采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21 b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物.经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白.免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化.结果 酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功.表达蛋白相对分子质量(Mr)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性.小鼠抗血清效价升高,CD4+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高.结论 成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清.
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人前蛋白转化酶枯草溶菌素9的cDNA克隆和表达及多克隆抗体的制备
目的 构建人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)的原核表达载体并诱导其表达,制备其蛋白的多克隆抗体.方法 聚合酶链式反应扩增人工合成的pcsk9 cDNA序列;扩增产物经TA克隆、双酶切、连接,构建pET-28b-pcsk9表达载体;将重组质粒转化人大肠杆菌表达菌BL21(DE3)的感受态细胞中,诱导表达;用纯化检测过的目的蛋白免疫新西兰兔,后采集全血收集血清,获得多克隆抗体,并对该抗体进行免疫印迹及效价测定.结果 PET-28b-pcsk9原核表达载体构建成功,用诱导表达的目的蛋白免疫动物,收集血清获得多克隆抗体.对多克隆抗体进行纯化,免疫印迹检测结果证明自制多克隆抗体特异性良好,效价测定为1∶13 200.结论 成功构建了pcsk9原核表达载体pET-28b-pcsk9,且获得了其蛋白的多克隆抗体.
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关中黑猪IL-5 cDNA的克隆表达与多克隆抗体制备
目的 克隆关中黑猪IL-5 cDNA,构建该基因的不同表达质粒,获得表达的IL-5并制备其多克隆抗体.方法 提取佛波酯(PHA)刺激的关中黑猪外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR克隆猪IL-5基因(sIL-5),鉴定后将sIL-5基因分别克隆到pQE30、pET-32a和pEGFP-N1中,构建重组表达质粒pQE-sIL-5和pET-sIL-5及pEGFP-sIL-5,将pEGFP-sIL-5瞬时转染PK-15细胞,将pQE-sIL-5和pET-sIL-5分别转化JM109和BL21,用1 mmol/L IPTG诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot法鉴定表达蛋白后,通过镍柱纯化目的蛋白.用纯化的BL21表达的IL-5免疫小鼠,制备其多克隆抗体,用纯化的JM109表达的IL-5通过优化的间接ELISA检测抗体效价.结果 成功获得关中黑猪的IL-5基因(登录号KC660157),大小405 bp,与GenBank中猪IL-5参考序列同源性99.75%,仅25位的T变成C,但编码的氨基酸完全相同;荧光显微镜观察发现pEGFP-sIL-5 在PK-15细胞中得到表达;SDS-PAGE结果显示JM109表达的目的蛋白的相对分子质量(M,)约15 000,而BL21表达的目的蛋白Mr约30 000,Western blot法检测结果表明,表达的目的蛋白均具有良好的反应原性;免疫小鼠后获得了IL-5的多克隆抗体,抗体效价高可达1∶12 800.结论 克隆了关中黑猪IL-5基因片段并成功表达,获得了IL-5的多克隆抗体.
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封闭N-cadherin解整合素金属蛋白酶水解位点的单链抗体的制备及鉴定
目的 制备封闭神经型钙黏素(N-cadherin)解整合素金属蛋白酶水解位点(ADAM)的单链抗体(scFv),并进行鉴定.方法 首先利用RT-PCR技术从分泌抗N-cadherin的ADAM水解位点单克隆抗体(mAb)细胞株中扩增出重链(VH)和轻链(VL)可变区基因片段,然后通过重叠延伸PCR法(SOE-PCR),构建成scFv基因片段.再将其克隆入原核表达载体pET-28a中,在大肠杆菌中诱导表达,通过镍柱纯化和复性后,用SDS-PAGE、ELISA和Western blot法等测定重组蛋白的生物学活性.结果 PCR、酶切和测序表明scFv片段长744 bp,编码248个氨基酸.scFv基因表达载体转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达出相对分子质量(Mr)约29 000的目的蛋白,主要为包涵体形式,经变性,纯化和复性后,获得纯度达90%以上的scFv蛋白,ELISA和Western blot法检测表明可溶性scFv可以与N-cadherin的ADAM水解位点序列多抗原短肽和全长N-cadherin结合.结论 成功构建并表达封闭N-cadherin的ADAM加工位点单链抗体.
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体外诱导生成血小板的研究进展
血小板是大量存在于哺乳动物血液中的无核盘状小细胞,它来源于骨髓造血组织中的巨核细胞,具有止血、凝血,促进伤口愈合及参与免疫炎症反应等重要作用.本文主要是对体外条件下诱导干细胞生成血小板以及诱导培养体系中细胞因子的作用进行综述.
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MicroRNA-21在自身免疫性疾病中的调节作用与机制
MicroRNAs(miRNAs)是一类具有调控功能的小分子非编码RNA,其介导的基因表达对于维持正常细胞的增殖、分化、凋亡以及维持免疫系统的稳定有着重要作用.大量研究结果表明,miR-21通过Toll样受体(TLR)信号途径参与了固有免疫应答和炎症调节,而且它还可以通过多种方式对免疫细胞的生长、分化等产生影响.近年来,关于miR-21在自身免疫性疾病中的作用及其机制研究备受关注,本文对miR-21调节免疫反应及其对几种常见自身免疫性疾病的调节作用进行了综述.
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树突状细胞参与免疫调节的相关受体及其介导的信号转导通路研究进展
树突状细胞(DC)是体内重要的抗原递呈细胞(APC),具有摄取、处理和提呈抗原至T细胞的功能.DC通过其模式识别受体(PRR)能够识别区分不同类别的病原体,PRR与病原相关分子模式(PAMP)相结合,诱导适应性免疫反应.DC表达的PRR主要包括:Toll样受体(TLR)、C型凝集素受体(CLRs)、NOD样受体(NLR)等.这些受体可以通过启动信号转导通路参与免疫调节.现就DC参与免疫调节的主要相关受体及其介导的信号转导通路研究进展进行综述.
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细胞因子佐剂对核酸疫苗免疫效果的影响及作用机制
细胞因子佐剂包括白细胞介素、干扰素、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、趋化因子等,其作为佐剂可显著增强抗原的免疫原性,调节机体的体液免疫和细胞免疫应答水平.在核酸疫苗的研究中,细胞因子佐剂已被证实具有重要的调节作用.现就细胞因子佐剂对核酸疫苗免疫效果的影响及作用机制进行综述.
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潜伏结核感染的分子机制研究进展
潜伏结核感染是活动性结核病的主要来源,也是结核病防控的关键,但是潜伏结核感染的机制尚未完全明确.近年来,在分子水平上对潜伏结核感染所做的大量研究表明,许多重要分子参与了潜伏结核感染的发生过程,进一步阐释了潜伏结核感染的发生机制,为潜伏结核感染诊断、治疗及新疫苗的研发开辟了新方向.现就结核潜伏感染的分子机制研究进展进行综述.
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拟步甲科昆虫不同抗冻蛋白的免疫交叉性分析
目的 利用甲虫小胸鳖甲的抗冻蛋白MpAFP698制备抗血清,分析拟步甲科不同种类昆虫抗冻蛋白的免疫同源性.方法 通过DNA疫苗初次免疫-蛋白质加强的策略免疫新西兰大白兔,先以重组质粒pcDNA3-Mpafp698作为DNA疫苗免疫接种2次,再以融合蛋白His-MpAFP698进行蛋白质加强免疫2次.采用ELISA检测MpAFP698抗体的效价,Western blot法检测抗体的特异性及不同昆虫抗冻蛋白与MpAFP698抗体的免疫交叉反应.结果 兔抗血清的效价可达1∶40万,Western blot结果显示抗血清分别与His-MpAFP698及GST-MpAFP698蛋白有特异性结合,与小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP149、MpAFPS77以及来自不同昆虫的抗冻蛋白ApAPAFP914、OcAFP4有特异性结合.结论 荒漠地区不同甲虫的抗冻蛋白具有相同的抗原表位,可以发生免疫交叉反应.
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表达HIV-1 gag蛋白重组乳酸乳球菌株的建立及其在小鼠体内定植的研究
目的 构建表达HIV-1 gag的重组乳酸乳球菌,并分析重组菌在小鼠体内的定植情况.方法 将HIV-1 gag克隆至原核表达质粒pMG36e,重组质粒pMG36e-gag电转乳酸乳球菌,SDS-PAGE和Western blot法检测其在乳酸乳球菌中的表达.以109个重组菌给小鼠口服,对照组口服PBS.口服后第1、3、5、7、9、11天分别取小鼠的胃、小肠和大肠,采用稀释滴种法测定小鼠胃、肠道内重组菌的数量.结果 酶切和DNA测序表明gag已克隆入pMG36e.SDS-PAGE在预期位置检测到蛋白条带,Western blot分析证实其为gag蛋白.重组菌定植实验表明,第1、3天在胃肠均有一定量重组菌,且大肠中重组菌数量多于胃和小肠,随后胃肠中重组菌均迅速减少,仅在大肠中仍有一定量的重组菌,第11天时胃肠仅分离到极少量的重组菌.结论 本研究获得胞内表达HIV-1 gag前体蛋白Pr55的重组乳酸乳球菌,其可在胃肠中短期存活,可作为预防HIV-1感染的候选疫苗.
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猪纤维蛋白原免疫原性研究
目的 研究猪纤维蛋白原的免疫原性和免疫效果,为该药物安全评价和进一步优化提供实验依据.方法 建立生物素-亲和素系统改良的ABC-ELISA检测抗体;新西兰白兔创伤试验考察血清抗体效价及其动态变化;免疫器官质量及脏器指数分析、噻唑蓝(MTT)比色法检测脾淋巴细胞增殖、氯化硝基四氮唑蓝(NTB)还原法检测中性粒细胞吞噬能力,揭示猪纤维蛋白原对小鼠免疫系统的影响.结果 1周后新西兰白兔血清即可检测出抗体,且第2周抗体含量达到峰值后下降至较稳定水平,抗体效价也呈现相同的变化趋势;小鼠免疫器官质量及脏器指数均未发生明显改变;与对照组相比,各实验组小鼠淋巴细胞增殖指数无明显差异;实验组小鼠中性粒细胞吞噬能力显著性增强.结论 猪纤维蛋白原刺激新西兰白兔机体后产生体液免疫应答,但在小鼠体内未表现出特异性免疫反应.
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国产流行性感冒病毒疫苗免疫原性研究的meta分析
目的 评价国产流行性感冒(简称流感)病毒疫苗的免疫原性.方法 通过文献检索搜集2012年9月前发表的有关国产与进口流感病毒疫苗免疫原性比较研究的文献,利用Stata10.0软件进行meta分析.结果 共有20篇符合标准的文献纳入本研究.结果显示:国产流感病毒疫苗B型抗体阳转率显著高于进口流感病毒疫苗(P=0.036,RR=1.036,95% CI:1.002~1.070),未发现国产流感病毒疫苗3个亚型的保护率及H1N1和H3N2抗体阳转率与进口流感病毒疫苗存在显著差异(P>0.05).进一步的亚组分析发现:国产流感全病毒灭活疫苗B型抗体阳转率(P=0.024,RR=1.040,95%CI:1.005~ 1.077)及保护率(P=0.031,RR =1.059,95%CI:1.005~1.116)、H3N2抗体(P=0.019,RR=1.053,95% CI:1.009 ~1.098)保护率均显著高于进口流感病毒疫苗.结论 国产流感病毒疫苗具有较好的免疫原性.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 |
1995 | 01 02 03 |
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1992 | 01 02 03 04 |
1991 | 01 02 03 04 |
1990 | 01 02 |
1989 | 01 02 03 04 |