细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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重组人白细胞介素-24及其联合顺铂对卵巢癌细胞体外生长的影响
目的 探讨重组人白细胞介素24(rhIL-24.)对SKOV3卵巢癌细胞株、卵巢癌顺铂(DDP)耐药SKOV3/DDP细胞株的抑制效应,并观察rhIL-24对卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡和细胞周期的影响.方法 用rhIL-24、DDP及rhIL-24联合DDP作用于SKOV3、SKOV3/DDP细胞,以CCK-8法检测细胞增殖、用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化.结果 rhIL-24对体外培养的卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞的生长有明显抑制作用,rhIL-24联合DDP对SKOV3/DDP细胞株抑制率为30.7％,与单用DDP组抑制率6.5％相比有显著性差异,流式细胞仪检测rhIL-24、DDP和rhIL-24.联合DDP各组凋亡率分别为14.95％、12.99％和16.32％,与阴性对照组凋亡率1.32％比较具有显著性差异;细胞周期检测中,SKOV3细胞周期变化显示rhIL-24组G2、S期增多,联合用药组出现S期增多;SKOV3/DDP细胞中,rhIL-24组处理出现G2期增多,联合用药组出现G1期增多.结论 rhIL-24对卵巢癌细胞DDP敏感和耐药株都具有抑制作用,联合用药可增强DDP的效应;rhIL-24对卵巢癌细胞的抑制作用通过诱导细胞凋亡实现,rhIL-24处理细胞后周期变化出现G2期阻滞,联合用药组出现G1期阻滞.
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嗜肺军团菌mip基因联合疫苗诱导的小鼠免疫应答
军团病主要由嗜肺军团菌引起,嗜肺军团菌共有15个血清型,其中血清1型在人军团菌病中常见,约占80％[1],可引起严重肺炎[2].军团菌污染的水源通过加湿器、喷雾器、淋浴器、水龙头等载体形成气溶胶.人体吸入气溶胶后引起军团菌感染[3-4].随着人们生活水平的提高,人工冷热水系统、空调等现代化设施进入千家万户,军团菌爆发的机率也随之增大.因此军团菌的预防显得尤为重要.
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单羧酸转运蛋白基因过表达对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学行为的影响
目的 研究单羧酸转运蛋白(MCT)基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期、侵袭和转移能力的影响.方法 将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT及空质粒pcDNA3.1分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞.采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别检测转染后细胞内MCT基因的表达.Annexin V-FITC/PI染色和PI单染色结合流式细胞术检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期的影响,Transwell(R)实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响,划痕实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力的影响.结果 实验组MCT的mRNA和蛋白水平明显高于转染空质粒的阴性对照组和未处理组;MCT过表达能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡,G2期细胞减少、S期细胞增多,同时能抑制癌细胞的侵袭和迁移能力.结论 MCT基因过表达能促进MDA-MB-231细胞的凋亡、调节细胞G2/M期检控点,抑制细胞的侵袭和迁移能力.
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FGFR2Ⅲc在膀胱癌化疗耐药细胞株中的表达及意义
目的 探讨成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)的剪切突变体FGFR2Ⅲc对多柔比星耐药的膀胱癌细胞间质-上皮转化的调节作用.方法 通过浓度递增法建立人膀胱癌253J细胞系的多柔比星耐药253J/DOX细胞株.分别用MTT实验、Western blot法和实时定量PCR (qRT-PCR)比较253J细胞和253J/DOX细胞对多柔比星的敏感性、P-糖蛋白表达水平和FGFR2Ⅲc表达水平的差异.Western blot法检测253J细胞和253J/DOX细胞E-cadherin和vimentin表达.划痕愈合实验比较253J细胞和253J/DOX细胞迁移能力的差异.结果 与亲代细胞相比,253J/DOX细胞P-糖蛋白表达上调并对多柔比星明显耐药(P＜0.05).FGFR2Ⅲc mRNA在253J/DOX细胞的表达明显高于253J细胞.同时,与亲代细胞相比,253J/DOX细胞E-cadherin表达上调,vimentin表达下调,体外迁移能力下降.结论 FGFR2Ⅲc在化疗耐药的膀胱癌细胞表达上调,可能通过诱导间质-上皮转化促进肿瘤迁移灶形成.
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党参水煎剂对D-半乳糖致免疫衰老小鼠胸腺功能的影响
衰老又称老化,通常是指在正常状态下生物发育成熟后,随着年龄增加,自身机能减退,组织环境稳定能力与应激能力下降,组织结构逐步退行性变,趋向死亡的不可逆转的现象[1].近几年来,关于衰老机制的研究,中西医学分别建立了不同的衰老学说.中医脾虚衰老学说和现代衰老学说中的免疫学说占有重要地位.现代医学证实中医学的“脾”与机体的免疫功能息息相关[2-4],脾虚衰老理论与免疫衰老学说之间有着必然的联系.免疫衰老学说认为免疫系统从根本上参加了正常脊椎动物的老化过程,是该过程的主要调节系统之一.
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槲皮素抑制人胚肺成纤维细胞ERK1/2的激活和PDGF的表达
目的 探讨槲皮素对人胚肺成纤维细胞(HELF)表达血小板源性生长因子(PDGF)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的调节作用.方法 以支气管肺泡灌洗法收集硅肺患者肺泡巨噬细胞(AM),在体外用含有Si02(50 μg/mL)的DMEM培养基和不含SiO2的DMEM培养基培养18 h,收集AM上清液,加入不同浓度槲皮素.用组织贴块法获取培养HELF,将HELF分为5组:空白对照组、AM组、SiO2联合AM处理组、槲皮素(10、20、40)μmol/L组.WST-1法检测HELF增殖情况,Western blot法检测HELF中PDGF的表达,免疫细胞化学法检测HELF中p-ERK1/2的表达.结果 与SiO2联合AM处理组、AM组相比,各浓度槲皮素组都能抑制HELF增殖,且随浓度增大抑制作用增强,差异有统计学意义(P＜0.01).各种浓度槲皮素均能降低HELF中PDGF的表达、减少HELF中p-ERK1/2的量,呈现剂量-效应关系,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 槲皮素可以抑制人胚肺成纤维细胞PDGF表达和ERK1/2的激活.
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Fasudil通过TLR4通路抑制脂多糖诱导的小鼠BV-2小胶质细胞TNF-α和IL-1β的表达
目的 探讨Fasudil对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞系促炎细胞因子表达中的作用.方法 体外培养BV-2小胶质细胞系,实验分为PBS对照组、LPS刺激组、LPS联合Fasudil干预组,ELISA检测细胞TNF-α、IL-1β的释放,Griess法检测NO释放水平,流式细胞术检测Toll样受体4(TLR4)、TLR2蛋白表达.结果 LPS刺激BV-2细胞可导致TNF-α、IL-1β和NO的释放明显增加,还可导致炎性信号通路中的受体TLR4表达明显增加.Fasudil能明显抑制炎性因子的释放和TLR4的表达.结论 Fasudil可抑制LPS诱导的小胶质细胞NO、TNF-α和IL-1β释放,其作用机制可能与Fasudil下调TLR4通路有关.
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人补体受体2-Fc融合蛋白真核表达载体的构建与表达
目的 构建人补体受体2 (CR2)-Fc融合蛋白基因表达载体,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达人CR2-Fc蛋白.方法 将人CR2片段和IgG1 Fc片段进行连接,克隆入PCI-neo表达载体.脂质体法将测序正确的重组真核表达载体转染CHOK1细胞进行蛋白表达,采用SDS-PAGE、Western blot法对蛋白表达进行检测和鉴定.结果 利用双酶切及基因测序结果证实CR2-Fc基因序列正确,重组真核表达载体构建成功;SDS-PAGE检测纯化产物的相对分子质量(Mr)与预期结果一致,Westernblot法在同样位置检出条带.结论 成功构建了CR2-Fc重组真核表达载体,获得了有活性的融合蛋白.
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雌激素缺乏致骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞通过分泌MCP-1影响T淋巴细胞趋化及凋亡
目的 探讨卵巢摘除术(OVX)所致雌激素缺乏骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)与假手术(sham)组BMSC单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的改变,并研究其对诱导T淋巴细胞趋化及凋亡的组间差异,揭示BMSC在骨质疏松症发生中的可能作用.方法 建立OVX模型及sham模型,micro-CT检测证明动物模型建立成功.ELISA检测OVX组及sham组BMSCMCP-1的表达,并对OVX组来源BMSC给予梯度浓度雌激素,观察不同浓度雌激素作用下BMSC表达MCP-1的变化.两组来源BMSC分别与T淋巴细胞共培养后,检测不同组间BMSC诱导T淋巴细胞趋化能力及凋亡的改变,同时观察外源性雌激素对这一改变的扭转作用.结果 在雌激素缺乏所致骨质疏松症中,BMSC MCP-1表达能力下降,同时其诱导T淋巴细胞趋化及凋亡能力随之下降.当外源性给予一定浓度雌激素后,该下降趋势得到一定程度的扭转.结论 BMSC可能通过自身MCP-1的表达从而调控T淋巴细胞的趋化及凋亡,其免疫调节特性使其在骨质疏松症发生发展中起重要作用.
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mTOR抑制剂RAD001通过c-Raf/ERK1/2通路介导胰腺癌耐药的机制
目的 研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂RAD001介导胰腺癌细胞耐药的分子机制,探索逆转该耐药性的可行性方案.方法 Western blot法检测RAD001对胰腺癌细胞中相关蛋白的影响;Western blot法验证RAD001与c-Raf抑制剂索拉菲尼联合用药对相关信号通路蛋白的抑制;磺酰罗丹明B(SRB)比色法、平板克隆形成实验观察RAD001与索拉菲尼联合用药时对细胞增殖和生长的影响;构建胰腺癌荷瘤裸鼠模型,验证联合用药对肿瘤生长的抑制作用.结果 RAD001可有效抑制mTOR下游效应蛋白,但同时诱导c-Raf的激活;RAD001与索拉菲尼联合用药可以有效抑制c-Raf/ERK1/2的激活;同时可有效逆转胰腺癌细胞的耐药,与RAD001单独用药组相比较,具有明显的协同抑制作用;体内抑瘤实验进一步证实该联合用药方案可有效抑制移植瘤的生长.结论 c-Raf的激活上调参与胰腺癌对mTOR抑制剂RAD001的耐药,以c-Raf为靶点可改善RAD001对胰腺癌的靶向治疗效果.
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人IL-10真核表达载体的构建及其在体内外的高效表达
白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)是一种多效细胞因子,在免疫调控中发挥了重要作用,其在病毒持续性感染中的作用也日益受到关注.有研究显示HBeAg阳性患者血清高水平的IL-10和IL-12与早期自发的HBeAg血清转换相关[1],也有研究结果显示IL-10与病毒感染的持续与清除相关[2].IL-10在肝脏疾病中还显示出抗炎和抗纤维化作用[3].HepG2.2.15细胞是HBV稳定持续表达的肝癌细胞系,是可以在一定程度上代表HBV慢性感染的细胞模型.在前期研究中,我们发现该细胞模型能分泌表达IL-10蛋白[4],研究肝细胞IL-10的表达在HBV感染中所发挥的作用也许能为HBV感染后肝细胞在免疫应答中发挥的作用提供新的观点.因此,本研究旨在构建IL-10的真核表达载体,使其在肝细胞系HepG2及小鼠模型中表达,为后续的功能及其他相关研究奠定基础.
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透明质酸对树突状细胞肿瘤抗原提呈效应的调节
目的 观察透明质酸负载的树突状细胞(DC)肿瘤抗原提呈的生物学行为的变化,探索透明质酸对DC肿瘤抗原提呈效应的调节.方法 构建B16黑素瘤鼠模型,随机分成3组,即生理盐水组,DC悬液组和由透明质酸介导的DC组.小鼠股骨骨髓干细胞用GM-CSF和IL-4诱导形成DC,实验组用透明质酸孵育24h.随后将单纯生理盐水、未处理的DC和用透明质酸孵育的DC (HA-DC)悬液(注射前1d均加入BrdU,并调整细胞密度为1×106/mL),注射到小鼠移植瘤周围皮下.利用阳性胶体铁染色法,检测蛋白多糖在不同处理组中的表达;利用免疫组织化学法,观察HA-DC和DC在肿瘤组织中的分布及对肿瘤细胞的杀伤作用.结果 HA-DC组比DC治疗作用更明显(瘤体缩小).BrdU标记的HA-DC细胞主要分布于癌巢边缘区,局部淋巴结的被膜下窦和副皮质区,HA-DC组蛋白多糖的表达明显高于对照组和DC组(P＜0.05).结论 骨髓干细胞来源的DC细胞负载透明质酸后大量增殖,抗原呈递能力增强,调节淋巴细胞的增殖活化,激发CTL免疫应答.
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左旋甲基色氨酸在小鼠母胎界面诱发免疫耐受失衡
目的 探讨是左旋-1-甲基色氨酸(1-L-MT)还是右旋-1-甲基色氨酸(1-D-MT)在小鼠母胎界面诱发母胎免疫耐受失衡.方法 雌性BALB/c小鼠与雄性C57BL/6J小鼠交配后,自妊娠第6.5天起分别给予1-L-MT、1-D-MT、有机溶剂,共10 d,于妊娠第16.5天处死孕鼠,应用高效液相色谱法检测胎盘组织中哚胺2,3-二氧化酶(IDO)活性,流式细胞技术检测蜕膜组织中IFN-γ/IL-4比率,并对比妊娠结局.结果 1-L-MT给药组胎盘组织中IDO活性明显低于1-D-MT组及对照组,而1-D-MT组与对照组间无统计学差异;蜕膜组织中IFN-γ/IL-4比率高于1-D-MT组及对照组,而1-D-MT组与对照组间无统计学差异;胎鼠数量及体质量明显低于1-D-MT组及对照组,而1-D-MT组与对照组间无统计学差异.结论 1-L-MT而非1-D-MT通过抑制IDO活性在小鼠母胎界面诱发母胎免疫耐受失衡.
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Toll样受体4在β2GPI诱导小鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中的作用
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白Ⅰ(β2 GPI)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)成熟过程中的作用.方法 体外联合使用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)诱导TLR4正常(C3H/HeN)及TLR4缺陷(C3H/HeJ)小鼠的骨髓细胞为未成熟树突状细胞(iDC).用β2GPI或LPS(阳性对照)对iDC进一步刺激后,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞术分析细胞表面分子变化,ELISA测定细胞因子IL-12和TNF-α的分泌水平.结果 同C3H/HeJ小鼠相比,C3H/HeN小鼠iDC经β2GPI或LPS刺激后,细胞突起较多,形态上更成熟;细胞表面分子CD11c和MHC-Ⅱ的表达量更高(P＜0.05);细胞因子IL-12和TNF-α的分泌更强(P＜0.01).结论 TLR4在β2GPI诱导小鼠骨髓细胞来源的树突状细胞成熟过程中起重要作用.
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miR-508-5P慢病毒过表达载体的构建及对S期激酶相关蛋白2靶向调控作用
目的 构建miR-508-5p慢病毒过表达载体,探讨其对SKP2基因的靶向调控作用.方法 基于化学法合成miR-508-5p茎环结构RNA,将其克隆入线性化的pSicoR质粒中,经双酶切及测序鉴定,将阳性重组体转染至HEK293T细胞;同时构建与miR-508-5p互补靶基因SKP2的3 '非翻译区(3'UTR),将其克隆入线性化的pMIR-Report载体中.通过相对荧光素酶活性、Western blot法及实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法验证miR-508-5p与SKP2 3'UTR的靶向调控关系.结果 经PCR、酶切及测序结果证明成功构建了pSicoR-miR-508-5p及pMIR-Report-SKP2-3'UTR重组质粒,并通过实验证实miR-508-5p过表达明显抑制SKP2的蛋白表达水平及mRNA相对含量(P＜0.05);抑制miR-508-5p的表达,则明显上调SKP2的蛋白表达水平及mRNA相对含量(P＜0.05).结论 成功构建pSicoR-miR-508-5p慢病毒过表达载体,证实通过靶向作用于SKP2-3' UTR的特异序列直接抑制SKP2基因的表达.
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iASPP和caspase-9在食管癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨p53凋亡刺激蛋白家族抑制成员(iASPP)和caspase-9在食管癌中表达与食管癌临床病理特征的关系.方法 收集临床食管癌标本85例及30例癌旁正常组织,采用免疫组织化学SP染色法和反转录PCR(RT-PCR)法检测iASPP和caspase-9在食管癌组织和癌旁正常组织中蛋白和mRNA表达情况,分析iASPP和caspase-9表达与食管癌临床病理特征之间的相关性.结果 SP法染色显示iASPP在食管癌组织和正常组织中的阳性表达率分别为72.9％ (62/85)、16.7％ (5/30),caspase-9在食管癌组织和正常组织中的阳性表达率分别为18.8％(16/85)、76.7％ (23/30),二者差异均具有统计学意义(P＜0.01).RT-PCR显示在食管癌中iASPP高表达和caspase-9低表达与食管癌的浸润深度、淋巴结转移、临床TNM分期相关(P＜0.05),而与食管癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织类型均无相关性(P＞0.05),在食管癌组织中,iASPP和caspase-9的表达呈负相关(P＜0.05).结论 iASPP和caspase-9在食管癌中的不同表达与食管癌的浸润深度、淋巴结转移、临床TNM分期显著相关,且二者呈负相关.
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慢性淋巴细胞白血病患者骨髓中CD200表达及与预后的关系
目的 初步探讨慢性淋巴细胞性白血病(CLL)患者骨髓中CD200的表达及其与免疫表型、染色体核型的关系和与预后相关性.方法 采用流式细胞术检测40例初诊CLL患者骨髓中CD200的数量.以CD19+ CD200+表达低于50％为CD200low组(18例),大于或等于50％的为CD200high组(22例).结果 CD200low组(18例)年龄、男性人数、初次白细胞(WBC)数量、初次淋巴细胞(LY)数量、初次LY％、淋巴结发生率显著低于CD200high组(22例)(P ＜0.05);CD200low组初次血红蛋白(HB)量高于CD200high组(P＜0.05).CD200low组CD19+、CD19+ CD23+、CD19+ CD160+抗原表达的平均百分数及Zeta链相关蛋白-70(ZAP-70)阳性率明显低于CD200high组(P＜0.05).Binet分期中,CD200low组A期概率多于CD200high组,CD200high组大部分处于C期,差异有统计学意义(P＜0.05).Rai分期中,CD200low组患者大部分处于Ⅰ期,CD200high组大部分处于Ⅲ期,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD200对诊断疾病、预后判断、实施个体化治疗、延长患者生存期等具有重要意义.
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系统性红斑狼疮患者B细胞激活后FcγRⅡb1向脂筏信号域转移减少
目的 观察系统性红斑狼疮(SLE)患者B细胞激活后FcγRⅡb1信号分子向脂筏信号域转移的改变.方法 收集SLE患者和正常人外周血并分离出B细胞,分别用抗人μ链的F(ab’)2片段[F(ab’)2anti-μ]单独刺激B细胞抗原受体(BCR),或用抗人μ链的完整IgG(IgG anti-μ)激活B细胞、同时实现BCR与FcγRⅡb1的交联;采用密度梯度超速离心法提取B细胞膜脂筏;免疫沉淀及Western blot法分别检测膜脂筏中FcγRⅡb1的分布、脂筏FcγRⅡb1酪氨酸残基磷酸化水平、及脂筏FcγRⅡb1对含SH2结构域的肌醇磷酸酶(SHIP)的招募.结果 SLE患者B细胞经F(ab’)2 anti-μ单独刺激BCR后,胞膜脂筏部位FcγRⅡb1的分布、脂筏FcγRⅡb1酪氨酸残基磷酸化水平、以及脂筏FcγRⅡb1对SHIP的招募,与正常对照组比较均无明显改变,但经IgG anti-μ激活B细胞以实现BCR与FcγRⅡb1的交联后,以上指标均显著低于正常对照组.结论 SLE患者B细胞经IgG anti-μ激活后,转移至膜脂筏部位的FcγRⅡb1、脂筏FcγRⅡb1酪氨酸残基磷酸化水平、以及脂筏FcγRⅡb1对SHIP的招募均显著减少.
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分泌型毕赤酵母人全长抗体库的构建与鉴定
目的 基于N-糖基化部分改造毕赤酵母构建表达分泌型人全长抗体库.方法 基于酵母分泌型表达载体pPICZαA构建双启动子串联表达重链和轻链恒定区基因的载体pPICZoαA-CH-CL,经基因序列分析和Western blot分析验证.设计44对简并引物经逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增获得轻链可变区VL和重链可变区VH基因库.通过PCR将其插入上述恒定区表达载体构建全长抗体表达库pPICZαA-VH-CH-VL-CL.将该库电转化N-糖基化部分改造后宿主菌株GS115Y.随机挑取20个平板克隆进行菌液PCR鉴定、基因分析,并提交IgBLAST-imgt数据库鉴定抗体库正确性与多样性.结果 获得表达重链和轻链恒定区的表达载体pPICZαA-CH-CL,并在此基础上初步获得全长抗体表达库pPICZαA-VH-CH-VL-CL,库容量为105.结论 成功构建了分泌型N-糖基化毕赤酵母人全长抗体库.
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鸡肺表面活性蛋白A的表达及其多克隆抗体的制备
目的 表达鸡肺表面活性蛋白A(cSP-A)重组蛋白,并制备鼠抗cSP-A多克隆抗体.方法 人工合成cSP-A的凝集素糖识别区(CRD)基因(cSP-A-CRD),亚克隆到pGEX-6P-1载体中进行原核表达,对表达产物进行鉴定.切胶纯化法纯化重组蛋白,并免疫小鼠制备抗cSP-A多克隆抗体,ELISA检测抗体效价,Western blot法、免疫荧光组织化学染色和ELISA鉴定该抗体的特异性和适用范围.结果 获得鼠抗cSP-A血清,效价达到105;Western blot法结果表明多抗血清具有良好的特异性和反应性,并可用免疫荧光组织化学技术检测鸡肺上皮细胞表达的cSP-A和用间接ELISA检测鸡肺灌洗液中存在的水溶性cSP-A蛋白.结论 成功表达了cSP-A重组蛋白并制备了小鼠抗cSP-A多克隆抗体.
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抗人CA15-3单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光检测体系的建立
目的 获得抗人CA15-3单克隆抗体(mAb),建立CA15-3双抗体夹心化学发光检测体系.方法 人CA15-3糖抗原免疫小鼠后,通过细胞融合,筛选到阳性杂交瘤细胞.杂交瘤细胞扩大培养后,纯化获得抗CA15-3的mAb.对抗体进行纯度、效价、表位和亚型的鉴定并建立双抗体夹心检测CA15-3化学发光体系,对该体系进行准确度、低检测限、线性、重复性与特异性评估.结果 获得5株阳性信号较强的杂交瘤细胞(分别为#3-1-3、#5-2-2、#11-2-2、#12-1-3和#16-1-3).其分泌的抗体效价均大于10-8 g/mL,轻链均为κ链,重链#3-1-3为IgG2a、#5-2-2与#12-1-3为IgG2b、#11-2-2与#16-1-3为IgG3.双抗体夹心体系在(0～300) U/mL范围内线性关系良好,其准确度的回收率为97.45％;低检测限为0.59 U/mL;线性相关系数为0.9978;低高值的变异系数(CV)均小于10％;与肿瘤标志物AFP、CEA、CAS0、CA19-9和CA72-4均不交叉.结论 成功制备了抗人CA15-3 mAb,建立了双抗体夹心检测CA15-3化学发光体系.
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microRNA对免疫细胞的调节作用
微小RNA(microRNA,miRNA)是一类可以直接作用于目的基因mRNA以调节相应功能蛋白的表达进而参与各种生理反应的小分子RNA,近年来受到广泛关注.本文主要综述了miRNA对免疫细胞的调节作用,包括造血干细胞、固有免疫细胞和适应性免疫细胞.miRNA不仅可以调节造血干细胞的发育,还可以调节巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞的发育和功能.此外,miRNA还能参与病毒感染、癌症、肿瘤和自身免疫性疾病的发生.
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β-葡聚糖免疫调节作用的研究进展
环磷酰胺是一种烷化剂类抗肿瘤药,在较高剂量下对机体免疫力起着一定程度的抑制作用.研究显示了环磷酰胺对机体免疫力的抑制作用以及β-葡聚糖对这种抑制作用解除的机制.β-葡聚糖能显著恢复接受环磷酰胺的小鼠外周血液中白细胞、淋巴细胞数量,调控与免疫相关的基因的表达水平,提高某些细胞因子含量,在一定程度上解除环磷酰胺对免疫功能以及造血功能的抑制.β-葡聚糖所具备的免疫学活性还包括:激活免疫细胞(如:巨噬细胞,树突状细胞,单核细胞),诱导NO的合成,调控与免疫反应相关的细胞信号传递,降低电离辐射对机体免疫力的损伤,促进免疫球蛋白的合成等.
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Notch信号调控巨噬细胞激活分子机制的研究进展
巨噬细胞是机体抗感染免疫的主要效应细胞,是一类具有异质性的细胞亚群.因其解剖位置和功能表型上的差异,巨噬细胞可分为两类:组织定居巨噬细胞和炎性巨噬细胞.其中,炎性巨噬细胞的产生是巨噬细胞激活的表现形式,也是抵抗病原体入侵和重构组织稳态的一种免疫应答方式.巨噬细胞主要存在两种激活方式:经典激活和替代激活,激活后的巨噬细胞分别行使特定的功能.Notch信号通路可调控体内多种免疫细胞发育和功能,并通过多种分子机制调控巨噬细胞的激活.本文拟从巨噬细胞的类型、激活方式和Notch调控巨噬细胞激活的分子机制方面进行综述.
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树突状细胞在结节病免疫发病机制中的作用
结节病是一种病因未明的累及全身的系统性肉芽肿性疾病,其主要发病机制是某种未知抗原在具有遗传易感性的宿主引起的异常免疫反应.树突状细胞(DC)是目前已知的功能强大的抗原递呈细胞,目前很多研究证实DC在结节病的免疫发病和肉芽肿形成中起到了十分重要的作用,DC及其亚型在结节病患者外周血、肺泡灌洗液、皮肤及淋巴结的分布、含量、发育成熟阶段及免疫刺激功能的变化与结节病的免疫发病密切相关.本文就近年来有关DC在结节病免疫发病机制中的作用的研究进展进行综述.
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炎症小体的活化及调控机制研究进展
炎症小体(inflammasome)是细胞内模式识别受体(PRR)参与组装形成的大分子蛋白复合体,是参与机体固有免疫的重要成分.宿主细胞可通过PRR识别病原体相关分子模式(PAMP),组装成炎症小体,激活下游的信号通路,诱导炎症因子分泌,在抵抗病原菌入侵及维持机体免疫系统稳定中起重要作用.本文主要综述了炎症小体的活化及调控机制研究进展.
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绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离培养与鉴定
目的 探索绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离和培养方法,并进行鉴定.方法 采用胰蛋白酶和胶原酶两步消化法分离培养滋养层细胞,倒置相差显微镜观察滋养层细胞的形态学特点;应用常规HE染色和免疫组织化学染色,透射电镜技术进行绵羊多核绒毛膜滋养层细胞鉴定.结果 倒置相差显微镜下,滋养层细胞为双核及多核细胞,细胞形态为上皮样,呈片状铺展生长;绵羊胎盘子叶与培养的滋养层细胞爬片的细胞角蛋白免疫组织化学染色均显示多核滋养层细胞胞质为棕色阳性信号,透射电镜可见滋养层细胞表面微绒毛发达,胞质内有较多膜包小泡及丰富的微丝和脂滴.结论 建立了胰蛋白酶和胶原酶两步消化法分离培养绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的方法,获得了较高纯度的具有生物学活性的多核绵羊绒毛膜滋养层细胞.
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137Cs γ-射线诱导小鼠胚胎成纤维细胞衰老模型的建立
随着老龄人口的增加,各种老年疾病随之而来,如何延缓衰老已经成为世界各国学者研究的热点.研究衰老机制,建立衰老模型尤为必要.有学者根据衰老的自由基理论,利用一定剂量的γ射线照射建立衰老模型[1-5],但检测的衰老相关指标较少.为此采用137 CS γ射线照射小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF),探讨衰老模型的建立.
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商品化酶联免疫HCV抗体诊断试剂盒性能评估
HCV抗体酶联免疫法诊断试剂目前已经发展到第3代,其灵敏度和特异性较1代和2代试剂均有很大改善,现广泛应用于血液制品、献血员的筛选和丙型肝炎病毒感染的辅助诊断.由于HCV感染者血液循环中存在针对HCV不同蛋白的抗体,且具体针对某种蛋白的抗体是否出现、出现的时间、持续时间长短均有所差异[1].因此,ELISA测定HCV抗体时所使用的包被抗原必须全面,才能有效地检出所存在抗体,但在实际检验过程中由于不同的抗HCVELISA试剂盒生产厂家所使用HCV抗原的来源、质量及包被浓度不同,使得在检测中对同一份标本,尤其是对较弱阳性的样本或仅出现针对HCV单个蛋白成份的抗体样本,所测定的结果有时会出现很大的差异,所以对国内外不同厂家试剂盒性能水平进行评估具有很大意义.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
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| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
