细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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重组新疆出血热病毒S和M基因疫苗诱导小鼠免疫应答的评价
目的 选取新疆出血热病毒M基因(编码糖蛋白Gn,Gc)和S基因(编码核蛋白NP)部分基因片段,并进行部分片段的嵌合,分别插入至真核表达载体PVAX1中构建重组质粒,并将重组质粒分别免疫小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答的效果.方法 将NP(aa1 ～ 482)、NP2(aa170 ～ 305)和糖蛋白Gn(aa529 ～820)、Gc(aa1050～1697)片段,及Gc-NP2片段分别构建到真核表达载体PVAX1上构建重组质粒,用重组质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA对免疫效果进行评价.结果 经双酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确.pVAX1-NP2实验组小鼠的血清抗体效价可以达到1∶6 400,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,两组的IFN-γ的表达水平也高达(865.15±6.29)pg/mL及(1727.21±33.93) pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01).pVAX1-NP2及pVAX1-Gn实验组IL-4的表达水平为(19.11±1.20) pg/mL和(20.07±1.67)pg/mL,都显著高于对照组的(9.35±1.82)pg/mL(P＜0.05).结论 成功构建了多个重组真核表达载体,免疫小鼠后获得了效价高,特异性好的抗体.各重组质粒都激起了较强的体液免疫及细胞免疫,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗.
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嗅球和嗅黏膜来源的嗅鞘细胞对脊髓损伤小鼠的治疗效果比较
目的 体外分离、培养不同来源的嗅鞘细胞,并鉴定其生物学特性,比较不同来源的嗅鞘细胞生物活性,评价其对脊髓损伤模型小鼠的疗效的差异.方法 差速贴壁法分别培养嗅球和嗅黏膜来源的嗅鞘细胞,免疫荧光染色检测该细胞特异性蛋白S100、P75的表达,并对二者生长曲线及在不同代次、不同浓度梯度条件下神经营养因子分泌情况进行检测,实时定量PCR(qRT-PCR)鉴定二者脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)、神经营养因子3(NT-3)、神经营养因子4(NT-4)、轴突膜蛋白生长相关蛋白43(GAP-43)、微管相关蛋白(MAP-2)基因表达,并分别将两种细胞移植入脊髓横断小鼠模型中,以小鼠神经功能评分及脊髓内移植细胞分布情况进行评估.结果 所获得不同来源的嗅鞘细胞呈双极、三极样形态生长,且S100、P75蛋白表达均为阳性,嗅黏膜来源细胞不表达MAP-2,高表达GAP-43,嗅球来源的细胞低表达MAP-2和GAP-43,嗅球来源细胞生长活性大于嗅黏膜来源的细胞,其中嗅黏膜细胞来源分泌营养因子高于嗅球来源的细胞,小鼠神经功能评分显示嗅黏膜来源细胞治疗脊髓损伤模型效果明显高于嗅球来源的嗅鞘细胞.结论 两种来源的嗅鞘细胞存在生物学差异,嗅黏膜来源细胞治疗脊髓损伤效果高于嗅球来源的嗅鞘细胞,可以作为临床应用的种子细胞.
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调节性T细胞与Th17细胞相关因子在实验性自身免疫性肌炎小鼠淋巴结中的表达及意义
目的研究调节性T细胞(Treg)、Th17细胞的相关细胞因子在实验性自身免疫性肌炎小鼠淋巴结中表达的作用及意义.方法雌性BALB/c小鼠12只,随机分为正常对照组和模型组,模型组采用肌球蛋白诱导实验性自身免疫性肌炎(EAM).采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组小鼠淋巴结中与Treg和Th17细胞分化及功能相关的细胞因子Foxp3、IL-10、TGF-β、RORγt、IL-6、IL-17、IL-23的mRNA表达.结果 与正常小鼠相比,肌炎组小鼠淋巴结中Treg的转录因子Foxp3表达降低,相关的细胞因子IL-10、TGF-β mRNA表达水平增高；Th17的转录因子RORγt及相关的细胞因子IL-6、IL-17、IL-23 mRNA表达有不同程度的升高(P＜0.05).结论 实验性自身免疫性肌炎中Treg表达降低,而Th17及其相关因子表达升高,提示Treg和Th17之间的失衡在肌炎发病机制中起一定作用.
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E盒锌指结合蛋白1基因沉默抑制结肠癌HCT116细胞增殖并促进其凋亡
目的 使用针对E盒锌指结合蛋白1(ZEB1)的siRNA在结肠癌HCT116细胞中下调ZEB1的表达,研究其对HCT116细胞增殖和凋亡的影响.方法 根据人ZEB1的mRNA序列设计并合成2对针对ZEB1的siRNA,瞬时转染HCT116细胞后,利用实时荧光定量PCR,Western blot法分别在mRNA和蛋白水平检测siRNA对ZEB1的抑制效果；利用MTT法检测细胞增殖；Annexin Ⅴ-FITC/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,针对ZEB1的siRNA可在mRNA和蛋白水平有效抑制ZEB1的表达,ZEB1的表达下调可有效抑制HCT116细胞的增殖,并促进细胞凋亡.结论 ZEB1对结肠癌细胞的生存和增殖具有重要作用,可能参与结肠癌的发生发展过程.
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DNA聚合酶δ相互作用蛋白1能促进GFP蛋白的降解
目的 证明过表达DNA聚合酶δ相互作用蛋白1(PDIP1)能否促进外源性GFP蛋白的降解.方法 将HEK293细胞共转染表达质粒pEGFP-C3与pCMV-myc-PDIP1,利用荧光显微镜检测细胞绿色荧光强度,然后利用Western blot法检测GFP与PDIP1蛋白表达量的关系,再利用氯化铵与MG132分别进行干预,并检测GFP与PDIP1蛋白表达量的关系.结果 共转染表达质粒pEGFP-C3与pCMV-myc-PDIP1的HEK293细胞绿色荧光强度明显低于单转pEGFP-C3质粒的细胞；随着PDIP1蛋白表达量的增大,GFP蛋白的表达量减少；利用MG132干预可以明显抑制PDIP1对GFP的降解,而氯化铵干预没有显示明显的效应.结论 过表达PDIP1可以促进外源性GFP蛋白的降解,且这一降解是通过蛋白酶体途径进行的,提示PDIP1可能参与细胞内某些蛋白的泛素化降解.
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红霉素上调组蛋白去乙酰化酶2表达减轻氧化应激下THP-1细胞的糖皮质激素抵抗
目的 探讨红霉素(EM)对氧化应激下人THP-1单核细胞糖皮质激素抵抗的作用及机制.方法 EM预孵育THP-1细胞后予烟草烟雾提取物(CSE)刺激细胞,用质粒脂质体法将构建好的组蛋白去乙酰化酶2沉默RNA(HDAC2-siRNA)转染细胞,EUSA检测细胞培养上清白细胞介素8(IL-8)的含量,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Westem blot法分析HDAC2表达情况.结果 EM组的IL-8抑制率明显高于CSE组,而低于对照组(P＜0.05),EM组地塞米松半数抑制浓度(IC50-Dex)低于CSE组,而高于对照组(P＜0.05).EM组HDAC2蛋白的表达高于CSE组,而低于对照组(P＜0.05).除此之外,应用HDAC2-siRNA转染细胞后HDAC2 mRNA及HDAC2蛋白的表达均明显低于对照组及空转组,而加用EM后其表达明显升高(P＜0.05).结论 CSE刺激下的THP-1细胞对地塞米松的敏感性明显降低,EM可通过上调HDAC2蛋白的表达减轻氧化应激下THP-1细胞的糖皮质激素抵抗.
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溶酶体相关膜蛋白2A shRNA对乳腺癌细胞株紫杉醇耐药的影响
目的 制备针对人溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)的shRNA重组慢病毒,获得稳定低表达LAMP2A的MDA-MB-231乳腺癌细胞株,观察LAMP2A分子下调对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性的影响.方法 通过对LAMP2A的mRNA序列分析,设计了4条shRNA,通过基因重组技术构建pGLV-EGFP-shRNA慢病毒表达质粒,并测序鉴定.将构建的表达质粒和包装质粒共转染人胚肾HEK293T细胞包装产生慢病毒,测定病毒滴度.将构建的shRNA慢病毒表达载体感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株后,Western blot法检测LAMP2A表达,验证蛋白表达抑制效果.采用1nmol/L、10 nmol/L、100nmoVL的紫杉醇处理LAMP2A低表达乳腺癌细胞株后,用MTT法观察LAMP2A低表达组和对照组之间增殖效率的差异.结果 测序结果显示重组慢病毒质粒构建正确,病毒滴度达2×108 TU/mL.乳腺癌稳定细胞株中LAMP2A蛋白表达量显著降低.在10 nmol/L、100nmol/L紫杉醇处理后,LAMP2A低表达乳腺癌细胞株对紫杉醇耐药性明显降低(P＜0.05).结论 成功构建了人的LAMP2A基因shRNA慢病毒载体,获得了稳定低表达LAMP2A的乳腺癌细胞株,证实LAMP2A下调能够降低乳腺癌细胞株对紫杉醇的耐药性.
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microRNA-93过表达促进A172脑胶质瘤细胞增殖并抑制其凋亡
目的 探讨微小RNA-93(miR-93)对胶质瘤细胞A172增殖和凋亡的影响,观察miR-93对胶质瘤生物学行为的影响.方法 通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测2例正常人脑组织、10例胶质瘤样本和5种胶质瘤细胞系中miR-93的表达；利用人工合成miR-93 mimic瞬时转染脑胶质瘤A172细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-93的表达水平；采用MTT比色法检测A172细胞增殖情况；流式细胞术检测A172细胞周期与凋亡.结果 胶质瘤样本及胶质瘤细胞系中miR-93的表达量较瘤旁与正常胶质细胞系高,miR-93 mimic上调了A172细胞中miR-93的表达水平,促进了A172细胞的增殖能力.miR-93转染细胞后,进入S期细胞显著增加,而G1期细胞则明显减少,同时A172细胞的凋亡数量减少.结论 miR-93在胶质瘤样本及胶质瘤细胞系中高表达,过表达miR-93有效促进了A172细胞的增殖,S期细胞增加G1期减少、细胞凋亡降低,提示miR-93可能成为胶质瘤诊断和治疗的新靶点.
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阿托伐他汀通过下调线粒体融合素2表达抑制大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡
目的 研究阿托伐他汀对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤后细胞凋亡及线粒体融合素2表达的影响.方法 选取雄性SD大鼠32只,随机分为假手术组(sham),缺血再灌注组(L/R),阿托伐他汀1组(statin1)和阿托伐他汀2组(statin2),每组8只.Statin 1组术前7d开始每日给予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃,statin 2组药物剂量为40 mg/(kg·d),I/R组以等体积蒸馏水灌胃,随后制备心肌I/R损伤模型.各组于再灌注3h后剪取心脏I/R损伤区域,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达,免疫组化法检测线粒体融合素2的表达.结果 与sham组相比,I/R组及statin 1组、statin 2组心肌细胞凋亡显著增加,p-Akt表达显著下降,线粒体融合素2表达显著增加(P＜0.01)；与I/R组相比,statin 1组、statin 2组心肌细胞凋亡和线粒体融合素2表达均显著降低(P＜0.05),而p-Akt表达显著增高(P＜0.05),且statin 2组较statin 1组变化更显著(P＜0.05).结论 阿托伐他汀可抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤后的细胞凋亡,其作用可能与抑制线粒体融合素2表达有关.
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IL-17A促进博来霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织的炎症形成
目的 研究IL-17A在肺纤维化发病机制中的作用.方法 20只雌性Wistar大鼠,随机分为生理盐水(NS)组和博来霉素(BLM)组,NS组大鼠气管内灌注NS,BLM组大鼠气管内灌注BLM,两组分别于气管内灌注药物后第7天和第28天各处死一半动物.HE和Masson染色观察肺组织病理变化；免疫组织化检测肺组织IL-17A表达；收集支气管肺泡灌洗液(BALF),一部分行细胞数测定并进行分类分析,ELISA检测BALF中IL-17A的含量,另外一部分行分离、纯化得到肺泡巨噬细胞(AM),对其进行培养得到AM培养上清液(AMS),ELISA检测上清液IL-17A的含量,反转录PCR(RT-PCR)检测AM IL-17A mRNA表达.结果 与NS组相比,BLM第7天组肺泡炎较明显,BALF中细胞总数增加,AM减少、中性粒细胞增加；第28天组肺泡炎减轻,而肺纤维化程度较重.与NS组比较,BLM第7天组和第28天组肺组织IL-17A表达明显增加(P＜0.05),第28天较第7天的表达有所降低.与NS组比较,BLM组BALF中细胞总数第7天明显增高(P＜0.05),第28天恢复至正常水平；BLM组BALF中IL-17A含量第7天和第28天明显增高,但第28天时较第7天降低；与NS组比较,BLM第7天组和第28天组AM培养前12h、前24 h,前48 h上清液中IL-17A的含量均明显增加(P ＜0.05)；RT-PCR结果显示,与NS组比较,BLM第7天组和第28天组各时间点AM IL-17A mRNA表达均明显增加(P＜0.05).结论 IL-17A促进了肺纤维化大鼠肺组织的炎症形成,进而参与了肺纤维化.
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早期母爱剥夺致F1代子鼠免疫功能下降
目的 探讨经过早期母爱剥夺的F1代子鼠免疫学功能的变化.方法 建立母爱剥夺模型,交配产子后以F1代子鼠作为研究对象.检测免疫器官质量及指数,腹腔巨噬细胞吞噬实验检测巨噬细胞吞噬功能,MTT法检测T淋巴细胞增殖能力,ELISA检测血清中白细胞介素2(IL-2)的水平.结果 母爱剥夺使后代子鼠胸腺、脾脏指数下降,巨噬细胞吞噬功能下降,T淋巴细胞增殖能力下降,IL-2水平下降.结论 早期母爱剥夺的母鼠,F1代子鼠免疫功能下降.
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KATP通道Kir6.2亚基点突变体Kir6.2AAA在大鼠心肌细胞中的表达
目的 制备含KATP通道亚基点突变的重组腺病毒,并将其在大鼠心肌细胞中表达.方法 针对Kir6.2位点的引物,利用Overlap PCR的方法定点突变Kir6.2的GFG氨基酸变成AAA,并将其克隆到pShuttle载体中进行序列分析,经PmeⅠ线性化、连接到腺病毒表达载体pAdEasy-1中,将pAdEasy-1包装进脂质体、转染入大鼠原代心肌细胞,并利用反转录PCR和Western blot法进行检测.结果 成功制备了携带大鼠Kir6.2AAA及EGFP基因的重组腺病毒,病毒的滴度为2.64×1011 VP/mL.荧光显微镜下可见Kir6.2AAA重组体腺病毒感染后的大鼠心肌细胞表达EGFP而发出绿色荧光,反转录PCR证实重组腺病毒载体Ad-Kir6.2AAA感染的心肌细胞中Kir6.2AAA的表达显著上调,Western blot法证明Kir6.2AAA在大鼠心肌细胞中过表达.结论 成功构建了携带EGFP基因的Kir6.2AAA重组腺病毒载体并将其在大鼠心肌细胞中正确表达.
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美洛昔康对大鼠急性放射性脑损伤的保护作用
目的 探讨美洛昔康对大鼠急性放射性脑损伤的保护作用.方法 54只SD大鼠随机分为空白对照组、20Gy照射组、治疗组(20 Gy照射后用10 mg/kg美洛昔康治疗).用6 MeV电子束对大鼠进行20Gy全脑单次垂直照射,分别于照射后1、3、7d用HE染色法进行形态学观察,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析海马组织环氧合酶2(COX-2) mRNA的表达,免疫组织化学方法观察COX-2蛋白表达.结果 HE染色结果显示,与空白对照组相比,照射组不同时间点都出现神经细胞肿胀、血管内皮细胞水肿、毛细血管周围间隙扩大,治疗组神经细胞肿胀和血管内皮细胞损伤均较照射组轻.照射后1d,照射组和治疗组COX-2 mRNA和蛋白表达明显增强(P＜0.05),与照射组相比,治疗组COX-2 mRNA、蛋白表达明显减少(P＜0.05)；在照射后3d、7d,三组间COX-2 mRNA、蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 早期使用美洛昔康可减轻放疗引起的脑组织损伤,其保护作用可能与减轻血管内皮细胞损伤及COX-2表达下调有关.
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纳米微粒偶联抗OX40/抗AFP抗体在细胞毒性T细胞抗肝癌中的作用
目的 探讨乳酸-羧基乙酸共聚物(PLGA)制备的纳米微粒偶联抗OX40及抗AFP抗体(抗OX40/抗AFP-NP)对甲胎蛋白AFP158-155抗原肽特异性细胞毒性T细胞(CTL/AFP158-166)体外杀伤肝癌细胞的影响.方法 用溶剂蒸发法制备纳米微粒(NP),并与抗OX40和抗AFP共价偶联.用扫描电镜观察所制得PLGA-NP纳米颗粒的形态；ZetaPlusTM粒度测定仪检测纳米微粒的粒径及电荷；用BCA蛋白定量方法检测纳米微粒偶联抗体的效率；用人外周血单核细胞诱导形成树突状细胞(DC),用AFP158-166抗原肽负载DC诱导AFP特异性的CTL/AFP158-166；分别用2-(4-碘苯)-3-(4硝基苯)-5-(2,4-磺苯基四氮唑)-2H-四唑单钠盐-1法(WST-1)法、ELISA及乳酸脱氢酶(LDH)法分别检测抗OX40/抗AFP-NP对CTL/AFP158-166细胞增殖能力、分泌IL-2和IFN-γ及杀瘤活性的影响.结果 所制得的PLGA-NP为圆形,大小较均一,粒径约为(300±42)nm,带负电荷,约为-(25.12 ±5.34) mV.蛋白定量显示每mg的PLGA-NP偶联约100μg抗体,偶联效率为25％；增殖和活化实验显示偶联有抗OX40的纳米微粒能显著刺激CTL的增殖、IL-2和IFN-γ的分泌；杀伤实验显示,抗OX40/抗AFP-NP能显著增强AFP特异性CTL/AFP158-166细胞对HepG2细胞特异性杀伤作用,而对SMMC-7721杀伤作用无明显效果.结论 抗OX40/抗AFP-NP能刺激CTL/AFP158-166细胞的增殖、细胞因子的分泌并增强CTL/AFP158-166细胞对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤作用.
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shRNA沉默HBx下调HepG2.2.15细胞基质金属蛋白酶2的表达
目的 探讨HBx小发夹RNA(shRNA)对HepG2.2.15细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响.方法 采用psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞,反转录PCR评估沉默效率；MTT法检测转染后HepG2.2.15细胞增殖情况；实时定量PCR(qRT-PCR)检测MMP-2 mRNA表达；Western blot法检测MMP-2蛋白表达的变化.结果 反转录PCR检测HBx基因的沉默效率为53.6％；MTT检测结果显示转染24、48、72 h后HepG2.2.15细胞的增殖受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜ 0.05)；psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞后,qRT-PCR和Western blot检测结果显示,HepG2.2.15细胞中MMP-2基因的mRNA水平和蛋白水平表达分别有不同程度的下调,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 RNA干扰技术抑制HepG2.2.15细胞中HBx基因的表达,可抑制细胞增殖,下调HepG2.2.15细胞中MMP-2的表达.
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具有CCCH锌指结构域的蛋白12D在大鼠肠缺血再灌注肺损伤时表达下调
目的 通过建立大鼠肠缺血再灌注肺损伤(IIRI)模型,观察急性肺损伤(ALI)时大鼠肺组织中具有CCCH锌指结构域的蛋白12D(Zc3h12d)表达水平的变化.方法 健康成年的雄性SD大鼠40只,随机分成对照组(contro1)、缺血再灌注30 min组(IR30 min)、缺血再灌注60 min组(IR60 min)和缺血再灌注120 min组(IR120 min),每组10只.对照组(contro1)行假手术,4个缺血再灌注组缺血60 min后分别再灌注30、60、120 min,在相应时间点处死大鼠,获取血清及肺组织.术后各样本行肺湿干质量比(W/D)检测、HE染色观察肺组织病变,ELISA检测血清及肺匀浆中TNF-α及IL-1β含量,实时定量PCR(qRT-PCR)检测肺组织Zc3h12d mRNA的表达,免疫组化、Westem blot法检测肺组织Zc3h12d蛋白的表达.结果 与对照组比较,再灌注损伤组病理切片可见肺泡壁增宽,肺泡腔内出血,肺湿干质量比值(W/D)显著增大(P＜0.05),qRT-PCR、免疫组化和Western blot法显示再灌注损伤组肺组织Zc3h12d的mRNA和蛋白表达水平在再灌注120 min时明显降低(P＜0.05).结论 小肠缺血再灌注肺损伤时肺组织中Zc3h12d基因表达下调,提示在肺损伤时Zc3h12d蛋白可能起保护作用.
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硫辛酸抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞细胞因子及趋化因子的表达
目的 探讨硫辛酸(LA)对脂多糖(LPS)激活的星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10及相关趋化因子的影响.方法 分离并鉴定新生C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,1μg/mL LP刺激第2代星形胶质细胞,100 μs/mL LA进行干预,Griess法检测NO的分泌,ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10炎性因子的含量,反转录PCR检测炎症趋化因子CC亚族趋化因子配体20(CCL20),单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)mRNA的表达.结果 与正常组比较,LPS刺激星形胶质细胞后,NO、TNF-α、IL-1β、IL-6分泌显著升高,IL-10分泌下调(P ＜0.05)；LA能抑制LPS诱导的NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,增加IL-10的分泌,与LPS组相比差异有统计学意义(P＜0.05).LA能显著下调LPS所致的CCL20、MIP-1 α、MCP-1 mRNA的分泌.结论 LA能抑制LPS激活星形胶质细胞所致的炎性反应,其作用与抑制炎性因子及趋化因子的分泌有关.
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棘球蚴病患者血清中可溶性PD-1/PD-L1与相关细胞因子的水平变化
目的 检测包虫患者血清中可溶性程序性死亡分子1(sPD-1)及其配体sPD-L1,Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-6以及Th17细胞因子IL-17的分泌水平,探讨它们在包虫病感染过程中的相关作用.方法 采用细胞因子磁珠阵列测定(CBA)法检测包虫患者血清中Th1、Th2、Th17细胞因子的分泌水平；ELISA检测可溶性PD-1、PD-L1的表达水平.结果 与健康对照组相比,棘球蚴病患者血清中可溶性PD-1的浓度略升高但低于sPD-L1,sPD-L1浓度升高明显,Th2、Th17细胞相关细胞因子的分泌水平明显升高(P＜0.01),而Th1细胞相关细胞因子分泌水平未见明显变化(P＞0.05).结论 棘球蚴病感染过程中存在Th1/Th2的表达失衡,而炎性细胞Th17细胞参与机体免疫调节.sPD-1与sPD-L1通过动态平衡参与机体免疫调控,促进棘球蚴免疫逃逸.
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银屑病与皮肌炎患者血清中3种抗磷脂抗体的检测
目的 检测银屑病和皮肌炎患者血清中3种抗磷脂抗体的水平.方法 应用ELISA检测银屑病和皮肌炎患者血清中的抗磷脂抗体,并分析与患者临床病理特征的关系.结果 与正常人相比,银屑病和皮肌炎患者3种IgG型抗磷脂抗体的吸光度(A值)均显著升高；而银屑病的3种IgM型抗磷脂抗体的A值均显著降低,皮肌炎患者的3种IgM型抗磷脂抗体的A值均显著升高.结论 红斑鳞屑性疾病银屑病与自身免疫性疾病皮肌炎在IgG型抗磷脂抗体表达上趋势相同,推测二者在发病机制上可能存在共同之处.
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外周血红细胞和中性粒细胞CD55/CD59表达在贫血诊断中的意义
CD55、CD59表达缺陷是诊断阵发性睡眠血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)的主要特征,但文献报告健康人及常见的其他贫血性疾病也存在不同程度的表达下降[1],鉴于贫血的种类繁多,病因复杂,诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义.为此,对襄阳市中心医院204例各类贫血患者外周血红细胞和中性粒细胞CD55和CD59免疫表型进行了比较分析.
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Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌组织中的表达及其临床意义
目的 检测Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌组织中的表达情况,并分析Notch1的表达与临床病理特征的相关性.方法 利用免疫组织化学染色,Western blot法和实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测肾细胞癌组织及对应的癌旁正常肾组织中Notch1的表达,用qRT-PCR检测Notch下游靶分子Hes1的表达,并用SPSS17.0软件分析Notch1的表达水平与临床病理特征的相关性.结果 免疫组织化学染色,Western blot法和qRT-PCR结果均显示Notch1在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织,qRT-PCR结果显示Hes1在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织,且Notch1的表达与肿瘤Fuhrman分级和AJCC分期呈负相关.结论 Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌的发生发展过程中可能具有肿瘤抑制基因的作用.
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SAMD9在食管鳞癌中的表达及其意义
目的 研究SAMD9(sterile alpha motif domain-containing 9)在食管癌中表达和临床意义.方法 选取72例手术切除食管癌及癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测SAMD9在食管癌及癌旁组织表达差异,并分析其在食管癌组织表达临床意义.另外选取3例手术时已发生转移及3例手术时未发现任何转移的食管癌组织,Western blot法检测SAMD9在2组中表达差异.结果 SAMD9在食管癌组织及癌旁食管鳞状上皮细胞中表达无明显差异；SAMD9在食管癌组织中表达水平与患者淋巴管浸润及淋巴结转移密切相关(P＜0.05),而与患者性别、年龄、分化及T分期无明显相关性(P＞0.05).Western blot法结果显示SAMD9在转移性食管癌组织中表达水平显著强于非转移性食管癌组织(P＜0.01).结论 SAMD9在食管癌组织中表达水平与转移密切相关.
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福氏志贺菌5a型M90T株GAPDH蛋白多克隆抗体的制备和鉴定
目的 制备高效的福氏志贺菌5a M90T3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的多克隆抗体,并对其特异性进行评价.方法 提取M90T的全基因组,采用PCR法扩增M90T中的基因gapA克隆到原核表达载体pET-24中,重组质粒转入到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,条件优化后纯化GAPDH-His融合蛋白.以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备该蛋白的多克隆抗体.Western blot法、ELISA鉴定获得的抗血清.结果 成功构建了原核表达载体pET24a-gapA,通过一系列诱导条件的优化,确定可溶性条件为30℃、1mmol/L IPTG诱导2h.用纯化的融合蛋白GAPDH-His作为抗原免疫小鼠制备多克隆抗体,Western blot法、ELISA证明多克隆抗体制备成功.结论 成功制备了福氏志贺菌5a M90T特异性的小鼠多克隆抗体.
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肿瘤坏死因子α诱导蛋白家族与疾病的关系
肿瘤坏死因子(TNF)-α主要由活化的单核/巨噬细胞产生,能杀伤和抑制肿瘤细胞、促进中性粒细胞吞噬、抗感染、引起发热,诱导肝细胞急性期蛋白合成、促进髓样白血病细胞向巨噬细胞分化、促进细胞增殖和分化,是一种重要的炎症因子,而且参与某些自身免疫性疾病的病理损伤.肿瘤坏死因子α诱导蛋白(TNFAIP)是一个包含有多种蛋白的蛋白质家族,与多种自身免疫性疾病、肿瘤等有关,对TNFAIP家族的研究可以为临床多种疾病的诊断和治疗提供重要的帮助.
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胶质细胞:帕金森病致病中的两面派
帕金森病是一类常见的病因不明的神经退行性疾病,普遍认为是由多种致病因素混合导致,其中由胶质细胞所介导的神经炎症日益受到重视.神经胶质细胞主要包括星形胶质细胞,小胶质细胞和少突胶质细胞,目前的研究主要集中在前两者,生理状态下,这两种胶质细胞协同维护着神经系统的稳态,当受到各种内外刺激而过度活化后,在继续发挥保护作用的同时,又可以通过各自不同的分子机制加重周围神经元的损害.明确具体的分子机制,就可以通过药物靶向干预来充分发挥胶质细胞的保护作用并抑制其损害作用,达到治疗帕金森病的目的.现就这一领域的研究进展进行综述.
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CD100的分子生物学及其与疾病的关系
CD100是第1个被发现有免疫功能的脑信号蛋白分子,又称脑信号蛋白4D (Sema4D),在神经系统和免疫系统中发挥着重要作用.近年来随着对其研究的深入,发现CD100还与很多疾病的发生发展有重要关系,例如免疫性疾病、肿瘤、心血管疾病、肾炎、皮肤损伤等.本文主要综述了CD100的分子结构、受体、在免疫反应中的功能及与疾病的关系.
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Toll样受体信号介导细胞凋亡的研究进展
细胞凋亡在病毒、细菌等感染的过程中和肿瘤等疾病的发生发展中起至关重要的作用.Toll样受体(TLR)存在于巨噬细胞、肿瘤细胞等细胞表面,能直接识别并结合病原微生物和宿主细胞表面的病原相关分子模式,然后通过髓样分化因子88/Fas相关死亡结构域/caspase-8、TIR结构域接头蛋白/蛋白激酶/干扰素调节因子和核因子κB路径等信号途径对巨噬细胞、肿瘤细胞等细胞的凋亡起调节作用.随着对TLR介导的细胞凋亡中Fas相关死亡结构域、TIR结构域接头蛋白等多种信号分子的深入研究,有助于了解它们在细胞凋亡中的作用,并为感染和肿瘤等疾病的分子靶向治疗提供新的目标.
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肝再生过程中Notch信号通路的研究进展
肝脏再生能力在各种病理状态下会受到不同程度影响,因此研究肝再生有助于解决肝源短缺的问题.肝再生过程受到多种信号通路的调控,其中Notch信号通路是进化中高度保守的信号转导通路,其调控细胞增殖、分化和凋亡的功能涉及几乎所有组织和器官.已有研究证实Notch信号通路在肝再生过程中可能具有重要作用,现就Notch信号通路在肝再生作用中的研究进展进行综述.
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流式细胞术检测CD4+T细胞内p24抗原辅助诊断HIV-1的感染
目的 探讨流式细胞术(FCM)检测CD4+T淋巴细胞内p24抗原对人免疫缺陷病毒1(HIV-1)感染的辅助诊断价值.方法 通过FCM检测HIV-1感染者和正常人(阴性对照)CD4+T淋巴细胞内HIV-1 p24抗原,建立方法.收集HIV-1早期感染者样本,用FCM检测CD4+T淋巴细胞内p24抗原,ELISA检测血浆p24抗原以及nest-PCR检测核酸,比较3种方法的检测结果.结果 感染者p24+ CD4+T淋巴细胞比例明显高于相应阴性对照(P＜0.01)；感染者组p24+ CD4+T淋巴细胞比例95％百分位数为1.92％,确立阴阳界值为2.00％.CD4+T淋巴细胞计数≤350个/μL的感染者p24+ CD4+T淋巴细胞比例明显高于相应CD4+T淋巴细胞计数＞350个/μL的感染者(P＜0.05).FCM检测HIV-1早期感染者CD4+T淋巴细胞内p24抗原结果显示,该方法的检验效能优于ELISA检测血浆p24抗原,和核酸检测相当.结论 FCM检测CD4+T淋巴细胞内p24抗原能及时发现HIV-1早期感染,在HIV-1感染的辅助诊断方面有一定的应用价值.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
