细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子: 0.81
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1007-8738
- 国内刊号: 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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小鼠间质性肺病循环纤维细胞的水平与肺部炎症和纤维化有关
目的 研究博来霉素(BLM)诱导的间质性肺病(ILD)和胶原蛋白诱导关节炎联合博来霉素诱导的间质性肺病(CIA-ILD)小鼠模型肺部病变的发展、病理特点及其与循环纤维细胞(CF)消长的相关性.方法 90只C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组(S)组、BLM诱导(B)组和CIA联合BLM诱导(CB)组.分别于BLM处理后第2、7、14、21、28天,HE染色观察肺组织急性炎症,天狼星红染色观察肺组织纤维化情况,免疫组织化学染色观察α-平滑肌肌动蛋白的表达,流式细胞术检测外周血CF(CD45+ Col1+细胞)并与病变的程度进行相关性分析.结果 2组小鼠肺组织病理变化均呈现为肺泡炎至纤维化的动态改变,B组在BLM刺激后第7~14天炎性病变明显,第21、28天病变趋于好转;CB组第14天开始出现肺泡结构明显破坏伴有胶原沉积,病变逐渐加重至第28天达高峰;与B组相比,CB组肺组织羟脯氨酸含量在第14天后明显增加(P<0.05);2组外周血CF均在给药后出现先增高后下降的趋势,且CB组在第14、21、28天明显高于同一时间点B组的CF数量(P<0.05);免疫组化结果显示,CB组亦在第14天至第28天有大量肌纤维母细胞聚集;外周血CF数量与肺部炎症、纤维化评分及肺组织羟脯氨酸含量呈正相关(r =0.847、0.826、0.735,P<0.01).结论 CIA-ILD小鼠模型更为接近RA-ILD病理过程,循环纤维细胞可能参与了肺部炎症和纤维化病理进程.
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EGCG联合盐酸吉西他滨通过下调PAR-2诱导胰腺癌细胞凋亡
目的 评价表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)联合盐酸吉西他滨对胰腺癌PANC-1细胞凋亡及对蛋白酶活化受体2(PAR-2)表达的影响.方法 培养PANC-1细胞,分为不添加任何药物的对照组、60 μg/mL EGCG处理组、20 μg/mL吉西他滨处理组、60 μg/mL EGCG联合20 μg/mL吉西他滨处理组.Annexin Ⅴ-FITC/PI联合染色结合流式细胞术检测各组PANC-1细胞凋亡情况,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组PANC-1细胞PAR-2 mRNA的表达.Western blot法检测各组PANC-1细胞PAR-2蛋白的表达.结果 联合处理组对PANC-1细胞凋亡的诱导作用强,依次为EGCG处理组、吉西他滨处理组.各组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01).qRT-PCR和Western blot法结果表明联合处理组的PAR-2 mRNA和蛋白的相对表达量低于对照组(P<0.01或P<0.05).结论 EGCG可以增强盐酸吉西他滨对胰腺癌PANC-1细胞凋亡的诱导作用,该作用与下调细胞PAR-2表达有关.
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力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原相关因子表达的影响
目的 探讨力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原表达的影响.方法 根据不同的处理方法将C2C12细胞分成对照组、EGTA、A23187、钙调蛋白抑制剂calmidazolium chloride、钙调蛋白(calmodulin)、一氧化氮合成酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、硝普钠(SNP)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-2抑制剂1、重组肝细胞生长因子(HGF)、抗HGF抗体、肝细胞生长因子受体C-met和抗C-met处理组.用Western blot法检测不同处理条件下NuRD脱乙酰酶复合物可重构成分(Mi-2)、组氨酰-tRNA合成酶(HRS)、DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)和Ku-70蛋白的表达变化.结果 与对照组相比,A23187、calmodulin组、SNP、重组HGF组、重组C-met处理后,自身抗原表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),EGTA、calmidazolium chloride、L-NAME、抗HGF兔多克隆抗体、抗C-met兔多克隆抗体处理后,自身抗原蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).MMP-2组的自身抗原蛋白水平表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05).结论 细胞外钙离子和钙调蛋白、L-NAME和SNP、HGF、C-met参与介导成肌细胞自身抗原的表达.
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小鼠神经母细胞瘤N2a细胞脑啡肽酶基因的表达与启动子区甲基化和组蛋白修饰相关
目的 研究小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a(N2a)细胞中脑啡肽酶(NEP)基因表达的表观调控机制,探讨DNA甲基化与组蛋白乙酰化之间的相互作用.方法 体外培养N2a细胞,以3μmol/umol/L、5μmol/L DNA甲基化酶抑制5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dc)及(300、500、700) nmol/L组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)分别处理N2a细胞48 h和24 h.采用逆转录PCR(RT-PCR)、Western blot法分别检测NEP的mRNA、蛋白表达;亚硫酸氢盐测序聚合酶链反应(BSP)法检测NEP基因启动子区DNA的甲基化水平;染色质免疫共沉淀(ChIP)法检测NEP基因启动子区组蛋白H3的乙酰化水平.结果 5-Aza-dc和TSA均能剂量依赖地提高NEP基因的表达(P<0.01);5-Aza-dc可诱导NEP基因去甲基化(P<0.01);TSA可增高NEP组蛋白H3乙酰化水平(P<0.05),但不能明显改变NEP基因DNA的甲基化水平(P>0.05).结论 在小鼠神经母细胞瘤N2a细胞中NEP基因的表达受DNA甲基化及组蛋白乙酰化的调控,组蛋白乙酰化水平并不影响DNA甲基化状态.
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间充质干细胞通过诱导髓系来源CD11b+Gr1+细胞的抑制功能促进小鼠乳腺癌进展
目的 探讨间充质干细胞(MSC)诱导骨髓来源的CD11b+Gr1+细胞免疫抑制功能对肿瘤的影响.方法 将骨髓中CD11b+Gr1+细胞与MSC共培养后,通过流式细胞术测定CD11b+Gr1+细胞免疫表型,通过T细胞抑制性实验分析T细胞活化情况,采用小鼠4T1乳腺癌模型观察MSC通过CD11b+Gr1+细胞对肿瘤生长的影响.结果 MSC能够促进骨髓中CD11b+Gr1+细胞的存活和生成,同时可诱导正常小鼠骨髓中CD11b+Gr1+细胞对T细胞的抑制作用.动物实验结果显示,MSC处理后的骨髓CD11b+Gr1+细胞可以促进肿瘤的生长,加速小鼠的死亡.结论 MSC可以通过促进骨髓来源的CD11b+Gr1+细胞的抑制作用加速肿瘤的生长进程.
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激活TLR2通过促进神经细胞死亡诱导假激酶表达诱导肺上皮细胞凋亡
目的 探讨特异性激活Toll样受体2(TLR2)对于小鼠MLE-12肺上皮细胞发生细胞凋亡的影响及其潜在的分子机制.方法 应用(0、1、3.3、10、33) ng/mL的TLR2特异性配基PAM3CYS4处理24h或用33 ng/mL PAM3CYS4处理0、8、16、24、36、48 h,激活肺上皮细胞MLE-12的TLR2,使用Western blot法检测神经细胞死亡诱导假激酶(NIPK)和活性caspase-3的蛋白表达,用TUNEL凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡的情况.结果 与正常培养的MLE-12细胞相比,特异性激活TLR2可以促进NIPK和活性caspase-3的表达增加,细胞凋亡的阳性细胞数目增加;使用siRNA技术特异性抑制NIPK的表达后,显著抑制活性caspase-3表达,凋亡细胞数减少.结论 特异性激活TLR2可增加NIPK的表达,促进肺上皮细胞发生凋亡.
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黄芩素通过抑制ERK通路下调HeLa细胞中基质金属蛋白酶的表达
目的 观察不同浓度黄芩素处理宫颈癌细胞后,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)与基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9 mRNA及蛋白水平表达的变化.方法 体外培养HeLa细胞株,分为空白对照组、100 μmol/L、200 μmol/L黄芩素处理组,培养24h.明胶酶谱法检测上清液中MMP-2、MMP-9的活性变化.反转录PCR法检测ERK1/2及MMP-2、MMP-9的mRNA水平的表达变化.Western blot法检测ERK1/2、p-ERK1/2及MMP-2、MMP-9的蛋白水平的表达变化.结果 黄芩素处理24 h后,与空白对照组相比较,MMP-2、MMP-9的活性变化逐渐降低,且呈浓度依赖性(P<0.05).ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白表达随着黄芩素浓度的增强逐渐降低(P<0.05).结论 黄芩素通过激活ERK1/2信号通路下调MMP-2、MMP-9的表达.
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白细胞介素17对结核病患者中性粒细胞凋亡的影响
目的 探讨白细胞介素-17(IL-17)对结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)凋亡的影响以及可能涉及的信号通路.方法 取结核病患者和健康人外周血PMN培养0~24 h,annexinⅤ染色后流式细胞术检测PMN凋亡率;或加不同浓度IL-17刺激培养24 h再检测PMN凋亡率;或用MAPK特异性抑制剂U0126预处理30 min后,再加IL-17培养24h后检测PMN的凋亡.结果 结核病患者和正常人PMN凋亡率均随培养时间延长而增加(P<0.05),结核病患者PMN在0、6、12、24h时的annexin Ⅴ+细胞分别为(4.49±1.39)%、(21.89±2.90)%、(39.96±4.15)%、(68.35±7.01)%,均分别高于正常人组的(2.65±0.75)%、(11.00±1.72)%、(25.84±3.90)%,(45.59±4.10)% (P <0.05).而经IL-17刺激后,结核病患者与正常人PMN的凋亡率,在IL-17 0.5 μg/L组,分别为(59.81±7.19)%和(34.65±4.79)%;在IL-17 5 μg/L组,分别为(51.62±6.91)%和(29.04±3.62)%;均低于未加IL-17对照组(68.35±7.01)%和(45.59±4.10)% (P <0.05);而在IL-17 50 μg/L组,凋亡率则分别达到(76.04±5.59)%和(53.24±4.62)%,明显高于对照组(P<0.05).预先用U0126处理,可大部分阻断IL-17对结核病患者和正常人PMN凋亡的抑制作用.结论 结核病患者和正常人PMN凋亡率均随培养时间延长而增加,且结核病患者PMN凋亡率高于正常人.IL-17较低浓度延迟凋亡,较高浓度促进凋亡.IL-17抑制PMN凋亡的作用和ERK途径有关.
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细胞表面黏附分子介导机械性牵张力诱导的小鼠颈总动脉HL-60细胞黏附
目的 比较血管内皮细胞表面黏附分子-1(VCAM-1)及P-选择素在机械性牵张力诱导HL-60细胞向小鼠颈总动脉内皮细胞黏附中的作用.方法 使用分离的小鼠颈总动脉血管在一定压力下灌流HL-60细胞,使之与血管内皮相互作用后洗去未黏附细胞,镜下统计每个视野中黏附的细胞数.首先观察不同强度牵张力刺激对于HL-60细胞向血管内皮细胞黏附的影响.再利用针对VCAM-1、P-选择素的特异性中和抗体以及非特异性IgG预处理血管条,比较VCAM-1和P-选择素在牵张力引起的HL-60细胞黏附中的差别情况.结果 随着施加在颈动脉的静水压增大,HL-60细胞黏附逐渐增多,说明牵张力引起的HL-60细胞黏附是强度依赖性增加的.非特异IgG预处理血管条后,黏附的HL-60细胞数目无明显变化.然而与此对照,VCAM-1与P-选择素预处理组都导致了黏附的HL-60细胞显著减少(P<0.05),但2组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 牵张引起的颈总动脉HL-60细胞黏附呈现压力强度依赖性关系;VCAM-1与P-选择素在机械性牵张力诱导小鼠颈总动脉HL-60细胞黏附中起一定作用.
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ERK5和JNK参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化
目的 研究细胞外信号调节激酶5(ERK5)和c-Jun N端激酶(JNK)在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化中的作用.方法 利用重组腺病毒将BMP9基因导入C3H10T1/2细胞,Western blot法检测加入BMP9及不同浓度ERK5特异性抑制剂BIX02189或JNK特异性抑制剂SP600125后ERK5和JNK的激活情况;实时定量PCR(qRT-PCR)检测BMP9诱导1周后心肌特异性基因肌细胞增强因子2C (MEF2C)、GATA结合蛋白4(GATA4)表达;Western blot法检测经BMP9诱导3周后心肌特异性蛋白缝隙连接蛋白43 (CX43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达和免疫荧光技术检测CX43、cTnT在细胞内的表达.结果 在转染效率达50%左右的情况下,BMP9可过度激活ERK5和JNK,使其磷酸化水平显著增高(P<0.05);BIX02189抑制ERK5激活后,BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的心肌分化标志物MEF2C、GATA4、CX43、cTnT均受到显著抑制(P<0.05),JNK特异性抑制剂SP600125也可抑制MEF2C、GATA4、CX43、cTnT表达,但对MEF2C及GATA4的抑制不如BIX02189显著(P<0.05).结论 ERK5和JNK的过度激活参与了BMP9诱导的C3H10T1/2细胞向心肌样细胞的分化.
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髓系来源的Gr-1+CD11b+抑制细胞参与实验性自身免疫性脑脊髓炎的免疫调节
目的 探讨Gr-1+ CD11b+髓系来源的抑制细胞(MDSC)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的数量变化及功能.方法 30只健康雌性C57BL/6小鼠随机分为EAE诱导组和对照组,借助MOG35-55多肽免疫诱导制备EAE小鼠模型,采用HE染色和Luxol快蓝染色评估发病动物的脊髓病理变化.流式细胞分析和免疫荧光染色技术确定2组小鼠脾脏和脊髓组织中Gr-1+CD11b+ MDSC的数量变化,体外细胞共培养检测来自EAE小鼠的Gr-1+ CD11b+ MDSC对CD4+T细胞及CD8+T细胞体外增殖能力的影响.结果 EAE造模成功率为80%(12/15),HE染色显示炎症细胞广泛浸润于EAE小鼠脊髓组织,Luxol快蓝染色在炎性浸润灶内发现多处脱髓鞘区域.EAE诱导组小鼠脊髓组织切片中可见大量Gr-1+CD11b+ MDSC,而对照组未发现任何阳性细胞.EAE小鼠的脾质量显著大于对照组[(146.5 ±12.4) mg vs (67.2±8.7) mg,P<0.01],其中Gr-1+ CD11b+ MDSC比率明显增高(P<0.01).与免疫荧光染色结果一致,流式细胞术分析在EAE小鼠脊髓中亦可见明显增多的Gr-1+ CD11b+ MDSC.体外细胞共培养实验显示,EAE小鼠脊髓中Gr-1+ CD11b+ MDSC可显著抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞的分裂增殖.结论 EAE诱导了Gr-1+ CD11b+ MDSC在脾脏和脊髓中的扩增和聚集,后者参与了EAE疾病的免疫调节过程.
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去甲斑蝥素和吴茱萸碱联合处理对HepG2人肝癌细胞生长的抑制作用
目的 研究去甲斑蝥素(NCTD)与吴茱萸碱(EVO)联合处理对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法 以不同浓度的NCTD和不同浓度的EVO分别组成单药处理组和NCTD、EVO联合处理组,另设不加药的对照组,作用于HepG2细胞.MTT法检测NCTD、EVO单药及联用对HepG2细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期,annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测药物对HepG2细胞凋亡的影响.Western blot法检测Bak、Bcl-2蛋白的表达.结果 MTT法证明NCTD和EVO对HepG2细胞的生长有抑制效果,两药联合处理具有明显的协同抑制作用(合用指数CI<1);与单一处理组相比,NCTD联合EVO上调G2/M期阻滞率(P<0.05),G2/M期阻滞率分别为EVO(36.13±1.63)%、NCTD(10.67±0.89)%、联合处理(73.42±1.92)%;此外,两药联合处理的肝癌细胞凋亡率由EVO(15.78±3.08)%、NCTD(11.47±1.60)%,显著上升到联合处理的(21.86 ±2.70)% (P<0.05);Western blot结果显示,与单独处理相比较,联合处理组Bax蛋白表达水平增高,Bcl-2表达降低(P<0.05).结论 NCTD和EVO联合处理抑制肝癌细胞增殖并促进细胞凋亡.
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盐酸吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织TLR4表达的影响
目的 研究盐酸吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 57只雄性SD大鼠,分为实验组(n=48)和正常对照组(n=9).实验组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)50 mg/kg建立糖尿病大鼠模型,正常对照组注射等剂量无菌枸橼酸钠缓冲液.建模成功的45只大鼠随机分为5组,每组9只.吡格列酮5 mg/(kg·d)、吡格列酮10 mg/(kg·d)组、吡格列酮5 mg/(kg·d)联合TLR4特异性抑制剂Eritoran 5 mg/(kg·d)、吡格列酮10 mg/(kg·d)联合TLR4特异性抑制剂Eritoran5 mg/(kg·d),未干预组.吡格列酮采用灌胃的方法给药,对照组给予等量生理盐水灌胃.联合应用TLR4特异性抑制剂Eritoran组于第5周给予腹腔注射Eritoran 5 mg/(kg·d),连续6周.于第8周末各组大鼠留24h尿液测量尿微量白蛋白,采用Western blot法检测肾组织中TLR4表达水平.心尖部取血2 mL,测空腹血糖、血CRP.免疫组织化学染色检测各组大鼠肾组织中TLR4及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达.结果 与对照组相比,实验组大鼠24h尿微量蛋白、血CRP含量显著增高;肾组织TLR4的表达明显增加,治疗前与治疗后比较存在差异(P<0.05);与未干预组相比,各干预组大鼠24h尿微量白蛋白、血CRP含量下降,肾组织TLR4的表达亦减弱,差异有统计学意义(P<0.05);10 mg/(kg·d)吡格列酮组与5 mg/(kg·d)吡格列酮组比较,肾组织TLR4的表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05); 10 mg/(kg·d)吡格列酮联合5 mg/(kg·d)Eritoran组与5 mg/(kg·d)吡格列酮联合5 mg/(kg·d)Eritoran组比较,肾组织TLR4的表达均明显减弱,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 吡格列酮下调糖尿病大鼠肾脏组织TLR4表达,调节促炎和抗炎之间平衡,发挥抗炎作用.
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p53AIP1基因转染对PC-3M人前列腺癌细胞生物学特性的影响
目的 观测p53调节的凋亡诱导蛋白1 (p53AIP1)对PC-3M人前列腺癌细胞的增殖、细胞周期、凋亡、侵袭及迁移的影响.方法 构建真核载体pDC316-p53AIP1,并进行双酶切及PCR鉴定.在LipofectamineTM 2000介导下转染至体外培养的PC-3M人前列腺癌细胞系中,Western blot法检测其表达,CCK-8法检测PC-3M细胞增殖情况,流式细胞术分析PC-3M细胞周期变化和annexinV-FITC/PI结合流式细胞术凋亡情况,TranswellTM实验检测p53AIP1对细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 成功构建了pDC316-p53AIP1真核表达载体,重组质粒转染PC-3M细胞后,Western blot法检测p53AIP1在PC-3M细胞中有表达,CCK-8结果显示表达的p53AIP1能抑制PC-3M细胞增殖(P<0.05),流式细胞术检测细胞周期阻滞在S/G2-M期(P<0.05)且p53AIP1能促进PC-3M细胞凋亡,TranswellTM侵袭和迁移实验显示p53AIP1使细胞侵袭迁移能力均降低(P<0.05).结论 p53AIP1抑制PC-3M细胞的周期、增殖、侵袭及迁移,并能促进其凋亡.
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慢性阻塞性肺疾病患者和吸烟肺功能正常者体内HIF-1α表达及意义
目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者和吸烟肺功能正常者肺组织和血清中表达及其临床意义.方法 肺组织标本取自手术治疗的周围型肺癌患者,共32例,检测术前肺功能,将其分为吸烟COPD稳定期组(COPD组,n=10),吸烟肺功能正常组(n=12),不吸烟肺功能正常组(n=10).术前清晨空腹取血清,术后取癌旁肺组织,ELISA检测血清和肺组织匀浆HIF-1α含量,免疫组织化学方法检测肺组织HIF-1α的表达,并分析HIF-1α表达水平与肺功能指标的相关关系.结果 COPD稳定期组、吸烟肺功能正常组、不吸烟肺功能正常组患者血清HIF-1α含量分别为(73.25 ±6.12) pg/mL、(60.30±8.00)pg/mL、(47.03±8.43) pg,/mL;吸烟肺功能正常组和COPD组明显高于不吸烟肺功能正常组(P<0.01),COPD组明显高于吸烟肺功能正常组(P<0.01).COPD稳定期组、吸烟肺功能正常组、不吸烟肺功能正常组患者肺组织匀浆HIF-1α含量分别为(2.04 ±0.24) pg/μg、(1.67 ±0.34) pg/μg、(1.12±0.33) pg/μg;吸烟肺功能正常组和COPD组明显高于不吸烟肺功能正常组(P<0.01),COPD组明显高于吸烟肺功能正常组(P<0.01).HIF-1α广泛表达于COPD组肺泡和气道上皮细胞、肺小动脉壁的炎症细胞以及巨噬细胞中.血清和肺组织匀浆中HIF-1α含量均与第1秒用力呼气容积与用力肺活量比(FEV1/FVC)、第1秒钟用力呼气容积占预计值百分比(FEV1% pred)呈显著负相关.结论 COPD患者和吸烟肺功能正常者肺组织和血清HIF-1α的表达增加,与气流受限有关.
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急性冠脉综合征患者血清IL-8、hs-CRP及oX-LDL的变化
急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)是一组由急性心肌缺血引起的临床综合征,包括急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)及不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,UAP),冠状动脉内斑块的破裂而导致血栓形成是ACS的主要原因[1].其早期的诊断及对疾病的严重程度的了解对于临床有效的治疗起着积极的作用.本实验通过对ACS患者定量检测血清IL-8,高敏C反应蛋白(high-sensitive C-reactive protein,hs-CRP)及氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)水平,探讨其与ACS的关系.
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IL-18和IL-8在类风湿性关节炎患者血清中的表达及其与抗CCP相关性的研究
类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以侵犯骨关节为主要特征的自身免疫性疾病,主要临床表现是四肢小关节对称性慢性滑膜关节炎和关节外病变[1].目前发病机制尚未清楚.研究显示细胞因子的分泌异常在RA发病中起着重要作用,白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、IL-8等细胞因子都直接或间接地参与了RA的免疫反应、炎性反应和免疫损伤[2-4].
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慢性丙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗前后自然杀伤细胞CD100表达水平变化
目的 观察慢性丙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗前后外周血中NK细胞、NK细胞亚群百分率及活化因子CD100表达水平变化.方法 流式细胞术检测慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者外周血中NK细胞、NK细胞亚群频率及膜型CD100表达水平;ELISA检测血清中可溶性CD100水平;采用Spearman相关检验分析CD100与谷丙转氨酶(ALT)、HCV-RNA之间的相关性.结果 与健康对照组相比,慢性HCV感染患者CD56dim NK亚群百分率降低,而CD56neg亚群比率升高(P<0.05);抗病毒治疗后获得早期病毒学应答(EVR)者,CD56bright亚群百分率升高,CD56neg亚群比率显著降低(P<0.05);停药后获得持续性病毒学应答(SVR)者,总NK细胞及亚群频率恢复正常.与健康对照组相比,慢性HCV感染患者血清中sCD100水平显著降低(P<0.05);膜型CD100表达轻度降低,但无统计学差异;经抗病毒治疗获得EVR者,sCD100及膜型CD100水平均显著升高(P<0.05),获得SVR者又降至正常水平.Spearman相关性分析发现,NK细胞CD100表达与ALT水平呈正相关,与HCV-RNA滴度呈负相关(P<0.05).结论 CD100表达降低与HCV持续感染有一定关系,并参与NK细胞对HCV清除.
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直接免疫荧光法在儿童呼吸道感染病毒病原学分析中的应用
呼吸道病毒感染是儿科常见的疾病,引起的症状多变,给临床诊断和治疗造成很大的困难.近年来,分子生物学技术的发展使得越来越多的新病毒被发现,使得呼吸道病毒的检测对于儿童呼吸道感染的诊疗越发重要[1-2].一般实验室常用的病毒检测方法包括免疫学方法和核酸扩增技术[3].核酸扩增检测技术有聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)等,其中qRT-PCR可以同时检测多种病毒,具有较好的应用前景,但是实验条件要求较高,要避免引起假阳性,成本也较高[4].
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河南华溪蟹金属硫蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备小鼠抗河南华溪蟹金属硫蛋白(MT)单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性.方法 分别利用小泛素样修饰蛋白(SUMO)融合表达系统和碱性磷酸酶(phoA)分泌表达载体制备河南华溪蟹重组蛋白SUMO-MT和His-MT,以SUMO-MT为免疫抗原、His-MT为检测抗原,利用杂交瘤技术建立抗河南华溪蟹MT mAb杂交瘤细胞株.采用间接ELISA测定mAb腹水效价,Western blot法、Dot-ELISA分析mAb的特异性.结果 成功建立了2株稳定分泌抗MT蛋白的mAb杂交瘤细胞株,分别命名为mAb-MT2和mAb-MT3,均属于IgG1亚类.腹水效价分别为1∶500000、1∶1000000,Western blot和Dot-ELISA结果证实2株mAb均能特异性识别重组MT和内源性MT.结论 成功制备了具有较高特异性的河南华溪蟹MT mAb.
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热休克蛋白16.3多克隆抗体的制备
目的 大肠杆菌表达Hsp16.3,制备其多克隆抗体.方法 设计引物,从H37Rv基因组中扩增出目的片段Hsp16.3,pET28a-Hsp16.3质粒的构建、克隆和表达.对 His-Hsp16.3进行诱导、表达和纯化.用纯化好的蛋白免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,用ELISA检测抗血清中多抗的效价,用Western blot法检测多克隆抗体的生物活性.结果 重组质粒pET28a-Hsp16.3在E.coli BL21(DE3)中成功表达,SDS-PAGE结果显示在His-Hsp16.3的相对分子质量(M)约为20 000.制备的多克隆抗体效价为1∶800,且特异性较好.结论 成功的克隆、表达、纯化出His-Hsp16.3,并且成功制备了抗Hsp16.3多克隆抗体.
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真核表达系统的抗体库技术研究进展
单克隆抗体(mAb)药物研制经历了鼠源性、人鼠嵌合、人源化改造以及全人源这4个阶段,其中全人源抗体因其免疫原性低而得到相对广泛的应用.全人源抗体的制备主要包括转基因鼠技术和抗体库技术,在抗体库技术中主要包括基于原核表达系统的噬菌体技术和基于真核表达系统的核糖体技术、酵母技术以及哺乳动物细胞技术.本文主要综述了近些年来基于真核表达系统的抗体库技术的研究发展.
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新型促炎细胞因子IL-36的免疫调节作用及其与免疫相关疾病的关系
IL-36是新的促炎细胞因子,包括IL-36α、IL-36β、IL-36γ3个成员.人类IL-36基因存在于2号染色体上,其结构模型和经典的IL-1家族相似.IL-36主要分布在皮肤、肺脏、关节、肠道、肾脏和大脑中,可由单核细胞、T淋巴细胞、角质细胞等多种细胞产生.IL-36主要通过与其相应受体结合后激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核因子κB(NF-κB)信号转导途径在固有免疫和适应性免疫中发挥着重要作用,参与了慢性炎症和自身免疫性疾病的病理生理过程.现就IL-36的基因结构、来源、受体及受体拮抗剂、作用机制、免疫调节作用及其与相关疾病的关系进行综述.
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中性粒细胞在结核病免疫中的作用及其研究进展
多形核中性粒细胞(PMN)作为机体重要的固有免疫效应细胞,是机体抵抗病原微生物感染的第一道防线.早期的研究认为PMN仅作为吞噬细胞在结核分枝杆菌(Mtb)感染的早期参与抗结核病的固有免疫应答,但近年来的研究显示PMN还参与了结核病适应性免疫的诱导和调节,对结核病免疫的发展有重要的影响.目前,人们对其在结核病免疫过程中发挥的确切功能、对结核发生发展的影响及相关机制还未完全明了,然而近年来越来越多的研究正逐步加深我们对PMN在结核病免疫中的作用的认识.现就近年来有关PMN在结核病免疫中的研究进展进行综述.
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Bmi1调节肿瘤细胞生长及放化疗敏感性的研究进展
Bmi1是多梳(PcG)蛋白家族的重要成员,它在维持造血干细胞的自我更新、胸腺细胞的发育及Th2细胞的分化中发挥重要作用.研究表明,Bmi1可通过多种机制调节肿瘤细胞的增殖和分化,也参与肿瘤细胞放化疗敏感性的调节.由于Bmi1与肿瘤的发生、发展和复发,肿瘤干细胞(CSC)的自我更新及肿瘤的放化疗敏感性密切相关,Bmi1可能是一个重要的肿瘤治疗靶点.本文综述了Bmi1在肿瘤细胞中的生物学作用,以及其与CSC和放化疗敏感性关系的研究进展.
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真菌细胞壁病原相关分子模式TLR/Dectin-1通路及相关细胞因子的免疫作用
侵袭性真菌感染(IFI)是致ICU患者死亡的重要原因之一.机体通过天然免疫重要的模式识别受体(PRR) Toll样受体(TLR)及C型凝集素受体(CLR)与病原相关分子模式(PAMP)识别后启动抗真菌免疫反应.目前明确磷脂甘露聚糖(PLM)的识别主要依赖TLR2和TLR4;β-葡聚糖经TLR2/树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)或只经Dectin-1识别.PLM和β-葡聚糖被识别后及经Dectin-1驱动获得性免疫后产生一系列下游细胞因子,一些下游细胞因子的免疫作用对不同组织有所不同、不确定或存在争议,一些免疫反应在细节上还没有详尽描述.因此,深入研究PAMP与PRR相互作用及其细胞因子对免疫调节影响,对IFI的预防治疗有重要意义.
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红鲫肥大细胞鉴别方法比较
目的 探讨红鲫(Cyprinus carpio)肥大细胞(MC)的不同鉴别方法.方法 取已被迟缓爱德华菌感染的红鲫鳃组织,用Bouin氏液固定3h,苏木精-伊红(HE)法、甲苯胺蓝(TB)法、阿利新蓝(AB)法、中性红法、Masson三色法、May-GrünwaldGiemsa (MGG)法与免疫组织化学SABC法观察MC.同时使用Wright-Giemsa染色的头肾涂片法作为补充.结果 阿利新蓝和甲苯胺蓝法显示肥大细胞良好,MGG法次之.免疫组织化学法检测类胰蛋白酶阳性肥大细胞数量较少,阳性反应弱.涂片法可将细胞分散开,并显示出不同发育阶段肥大细胞的特性.结论 组织化学染色结合涂片法和免疫组织化学染色,可以更好的识别鱼类肥大细胞.
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不同磷酸化合物扩增外周血γδT细胞的效率及条件优化
目的 研究异戊烯焦磷酸(IPP)与帕米磷酸钠(PAM)体外扩增成人外周血γδT细胞的效率及条件优化.方法 梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),分别加入(1.0、5.0、10.0、15.0) μg/mL IPP或(2.0、5.0、8.0、12.0) μg/mL PAM及(100.0、200.0、500.0) IU/mL IL-2,置于100 mL/L小牛血清的RPMI1640培养体系培养,观察并收集细胞,采用流式细胞仪检测刺激后CD3+ TCRδ2+的γδT细胞数量以及比例,并计算其扩增效率.结果 经过14 d扩增培养后,IPP组的γδT细胞数量在淋巴细胞中比例可上升为81.3%,PAM组的γδT细胞数量在淋巴细胞中比例上升为78.5%,表明IPP和PAM均能有效刺激扩增γδT细胞,2组的扩增效率无统计学差异(P>0.05).结论 PAM具有与IPP相似的体外扩增γδT细胞的能力,PAM扩增法可能成为扩增γδT细胞更为经济实用的选择.
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NK细胞可溶性KIR3DL1分子检测双夹心ELASA的建立
自然杀伤细胞(natural killer cells,NK细胞)是固有免疫中一类十分重要的淋巴细胞,约占循环淋巴细胞总数的15%.目前根据CD56和CD16的表达水平可将NK细胞分为CD56hi、CD56dim和CD56-CD16+3个亚群.由于NK细胞不表达T细胞受体(T cell receptor,TCR)和B细胞受体(B cellreceptor,BCR),如何区别“自己”和“非己”一直是个谜.直到20世纪90年代初,Ljunggren和K(a)rre[1]发现表达MHC Ⅰ类分子的细胞可避免NK细胞杀伤,而丢失或降低了MHC Ⅰ类分子的靶细胞(如病毒感染细胞或肿瘤细胞)对NK细胞的杀伤十分敏感,因此提出了“失去自我(missing self)”的假设,极大地推动了NK细胞表型的功能研究.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 |
1995 | 01 02 03 |
1994 | 01 02 |
1993 | 01 02 03 04 |
1992 | 01 02 03 04 |
1991 | 01 02 03 04 |
1990 | 01 02 |
1989 | 01 02 03 04 |