细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
miR-204通过下调Bcl-2和Sirt1表达抑制肝癌细胞生长
目的 探讨微小RNA 204 (miR-204)在肝细胞癌中的表达、临床意义及可能分子机制.方法 收集手术切除的60例肝细胞癌及对应癌旁肝组织,实时定量PCR (qRT-PCR)检测miR-204在肝癌及癌旁组织中的表达,免疫组织化学染色检测miR-204下游潜在靶点Bcl-2与组蛋白脱乙酰酶1(Sirt1)的表达;用人工合成的miR-204模拟物转染人SMMC-7721肝癌细胞,MTT法及流式细胞术检测SMMC-7721细胞的增殖、凋亡的情况,qRT-PCR、Western blot法分别检测Bcl-2与Sirt1的mRNA和蛋白表达.结果 miR-204在肝癌组织中表达水平显著低于对应癌旁组织;肝癌组织中miR-204低表达与肿瘤大小、肿瘤个数、肿瘤TNM分期显著相关;miR-204低表达组Bcl-2与Sirt1蛋白表达显著高于miR-204高表达组,相关性分析结果显示肝癌组织中miR-204与Bcl-2、Sirt1蛋白表达呈显著负相关;miR-204可显著抑制SMMC-7721细胞的增殖并促进其凋亡,并下调Bcl-2与Sirt1的mRNA与蛋白表达水平.结论 miR-204在肝癌组织中表达下调并与肝癌恶性临床病理特征有关,miR-204抑制肝癌细胞增殖、促进其凋亡的作用可能与下调Bcl-2和Sirt1表达有关.
-
转录因子T-bet、GATA-3在马尔尼菲青霉病小鼠肺组织表达的实验研究
马尔尼菲青霉病(Penicilliosis marneffei,PSM)是由马尔尼菲青霉菌(Penicillium marneffei,PM)感染所引起的一种深部真菌感染性疾病[1].本病常见于获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiencysyndrome,AIDS)患者及合并免疫受损的人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)阴性患者[2].近年来,临床上越来越多非HIV感染的免疫功能正常者患此病.已有研究表明,参与机体抗PM免疫反应的细胞主要是T淋巴细胞及巨噬细胞[3-4].
-
人ATG4B的表达及蛋白纯化和鉴定
目的 构建含His标签的自噬相关蛋白4同源物B(ATG4B)重组质粒以得到His-ATG4B蛋白,初步鉴定其生物学活性.方法 利用PCR技术从人乳腺文库中扩增出ATG4B基因的编码序列,插入pET-28a(+)载体中得到重组质粒,经酶切鉴定后转化Rossate菌,挑选小量诱导出的His-ATG4B菌液进行His-ATG4B蛋白的纯化,SDS-PAGE和Western blot法检测His-ATG4B蛋白的纯化效果,GST pull-down技术对蛋白生物学功能进行鉴定.结果 用PCR技术从人乳腺文库中扩增得到大小约1100 bp的目的片段,插入pET-28a(+)载体中构建出His-ATG4B重组质粒,酶切鉴定及测序结果均表明His-ATG4B质粒构建成功;转化Rossate菌并小量诱导,表达鉴定成功后纯化蛋白,得到相对分子质量(Mr)约为47 000的His-ATG4B蛋白,且SDS-PAGE检测蛋白纯化效果较好;GST pull-down实验证实His-ATG4B蛋白可以和LC3B蛋白在体外相互作用,生物学活性良好.结论 本实验成功得到His-ATG4B蛋白,为研究ATG4B在自噬中的作用机制奠定实验基础.
-
胡桃醌抑制宫颈鳞癌SiHa细胞增殖并诱导其凋亡
目的 探讨胡桃醌对宫颈鳞癌SiHa细胞增殖及凋亡的影响.方法 选取对数生长期的SiHa细胞将其分为空白对照组和(10、20、50、80、100) μmol/L胡桃醌组.采用MTT法观察胡桃醌对SiHa细胞增殖的抑制作用,并计算出半数抑制浓度(IC50),依据IC50确定胡桃醌的有效浓度;annexin V-FITC/PI双染色结合流式细胞术测定20μmol/L胡桃醌对SiHa细胞凋亡的影响,Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达.结果 MTT试验显示,与对照组比较,各胡桃醌浓度对细胞增殖均有明显抑制作用,IC50为20.4 μmol/L;流式细胞术检测表明,正常生长的SiHa细胞早期凋亡率为(2.46±0.37)％,经20μmol/L的胡桃醌处理细胞12 h,早期凋亡率增加至(18.47±2.26)％;与正常对照组相比,Western blot法检测显示20 μmol/L胡桃醌使细胞中Bcl-2表达明显降低而Bax表达明显增加.结论 胡桃醌可以抑制SiHa细胞的增殖,并诱导细胞凋亡.
-
血清应答因子抑制剂CCG-1423减轻单侧输尿管结扎大鼠肾小管间质纤维化
目的 探讨血清反应因子(SRF)抑制剂CCG-1423对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响.方法 将72只无特定病原体(SPF)级SD大鼠中54只行单侧输尿管结扎术(UUO组),另外18只为假手术组(sham组).UUO组54只大鼠又均分为不注射抑制剂组(空白对照组)、注射0.015 mg/(kg·d)CCG-1423低剂量组[腹腔注射CCG-1423,0.015 mg/(kg·d)]、0.03 mg/(kg·d)CCG-1423高剂量组[腹腔注射CCG-1423,0.03 mg/(kg·d)].每组分别于术后第3、7、14天,各处死6只大鼠并留取肾脏组织,应用Masson染色检测肾脏纤维化程度,免疫组织化学染色检测肾小管上皮细胞中血清应答因子(SRF)、磷酸化的血清应答因子(p-SRF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转录因子Snail、上皮性钙黏素(E-cadherin)的表达变化.结果 在UUO大鼠模型中随着时间延长纤维化程度逐渐加重,SRF、p-SRF、α-SMA、Snail的表达逐渐增强,E-cadherin的表达逐渐下降.在腹腔注射CCG-1423后Masson染色显示肾脏纤维化减轻,SRF、p-SRF、α-SMA、Snail表达下降,E-cadherin表达增强.结论 CCG-1423可抑制UUO大鼠肾组织中SRF的表达,并可减轻肾小管间质纤维化.
-
威灵仙总皂苷抑制佐剂性关节炎大鼠JAK2/STAT3信号通路
目的 研究威灵仙总皂苷(TSC)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的JAK2/STAT3信号通路的作用机制.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只.除正常组外,采用Freund完全佐剂诱导AA大鼠模型.造模第12天,灌胃给予相应药物,1次/d,连续16 d,观察药物对AA大鼠体质量及足肿胀度的影响;取固定部位踝关节组织,HE染色观察病理学改变;实时荧光定量PCR法测定滑膜细胞中Janus激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3) mRNA表达;Western blot法检测磷酸化JAK2及非磷酸化JAK2(p-JAK2、JAK2)、磷酸化STAT3及非磷酸化STAT3(p-STAT3、STAT3)的蛋白表达.结果 TSC可有效缓解AA大鼠体质量减轻及明显抑制AA大鼠足肿胀,明显改变炎细胞浸润,减少血管翳生成,减轻组织增生,有效抑制JAK2、STAT3 mRNA表达及降低p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3的相对表达.结论 TSC降低AA大鼠JAK2、STAT3 mRNA表达并抑制p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3相对表达,抑制JAK2/STAT3信号通路.
-
miR-144通过靶向Atg4a调控卡介苗和雷帕霉素诱导的RAW264.7细胞自噬
目的 研究卡介苗(BCG)对RAW264.7细胞中与细胞自噬相关的miRNA(miR-21、miR-181a、miR-155和miR-144)表达的影响,并以miR-144为研究对象,验证miR-144对自噬相关基因Atg4a的靶向调控关系,探究其在结核分枝杆菌感染宿主细胞过程中调控细胞自噬途径的作用机制.方法 分别对RAW264.7巨噬细胞进行饥饿处理12 h、50 ng/mL雷帕霉素作用2h、10 nmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用12 h;BCG刺激RAW264.7巨噬细胞12 h、24h、48 h后,收集细胞,提取总RNA;利用实时定量PCR (qRT-PCR)检测miR-21、miR-181a、miR-155及miR-144的表达水平;构建pMIR-Report-Atg4a及pMIR-Report-Atg4a mut重组质粒,利用双萤光素酶报告系统、qRT-PCR及Western blot法验证miR-144与Atg4a的靶向作用关系.结果 BCG刺激RAW264.7巨噬细胞后,可使miR-21、miR-155及miR-144表达上调,miR-181a表达下调;经雷帕霉素诱导的细胞自噬,4种miRNA表达量与正常组相比分别上调约64倍、52倍、14倍、1倍;与正常组相比,3-MA处理细胞组,miR-21、miR-144、miR-155、miR-181a的表达量分别下调1.22倍、1.05倍、1.54倍及12.5倍;双萤光素酶报告系统及Western blot法证实,miR-144可靶向作用于Atg4a-3' UTR并抑制其表达.结论 miR-144可靶向抑制自噬相关基因Atg4a的表达,参与调控RAW264.7巨噬细胞的自噬过程.
-
瘦素通过抑制PPARγ的表达抑制RAW264.7巨噬细胞向破骨细胞分化
目的 探讨瘦素对可溶性核因子κB配体的受体活化因子(sRANKL)诱导RAW264.7巨噬细胞向破骨细胞分化的影响及其机制.方法 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测瘦素对sRANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化的形态学影响;实时荧光定量PCR检测TRAP及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达;Western blot法检测TRAP及PPARγ的蛋白表达.结果 瘦素和sRANKL联合处理组与单独sRANKL组相比,TRAP染色破骨细胞数目明显减少;TRAP的mRNA和蛋白表达量明显降低;PPARγ的mRNA和蛋白表达量明显降低,且与瘦素浓度呈梯度相关.结论 瘦素可能通过抑制PPARγ的表达来抑制RAW264.7细胞向破骨细胞分化.
-
新疆出血热病毒重组核蛋白及糖蛋白片段能诱导小鼠免疫应答
目的 研究重组表达的新疆出血热病毒(XHFV)核蛋白和糖蛋白截短片段在刺激机体免疫应答中的作用.方法 采用基因重组技术和亲和层析技术对XHFV截短的核蛋白(NP2)、糖蛋白片段(Gc和Gn)进行表达和纯化,并通过蛋白免疫及核酸初次免疫、蛋白加强免疫的方式免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测鼠血清抗体效价,采用T淋巴细胞增殖试验检测细胞免疫应答的效果,对上述表达产物刺激小鼠免疫应答的作用进行初步评价.结果 利用原核表达系统成功表达纯化出XHFV核蛋白和糖蛋白截短片段.重组蛋白免疫BALB/c小鼠后能刺激机体产生IgG(效价为1∶12 800以上),并能与相应的抗XHFV核蛋白及糖蛋白的多克隆抗体发生特异性反应.各组均能有效地激发较强的细胞免疫应答,其中pVAX1-Gc联合rGc实验组小鼠脾脏淋巴细胞增殖明显,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 获得的重组XHFV核蛋白、糖蛋白片段能有效刺激小鼠的体液和细胞免疫应答.
-
Apogossypol增强SGC7901胃癌荷瘤小鼠的免疫功能并抑制肿瘤生长
目的 探讨新型棉酚衍生物apogossypol对胃癌SGC7901移植瘤抑制及免疫功能之间的关系.方法 体外培养扩增SGC7901胃癌细胞,接种裸鼠,建立小鼠移植瘤模型.计算肿瘤的抑瘤率,测定自然杀伤(NK)细胞活性,腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)的产生量,NK细胞活性,T淋巴细胞增殖能力及白细胞介素-2(IL-2)的活性.结果 Apogossypol可明显提高荷瘤小鼠吞噬细胞的功能并抑制肿瘤的增殖,NO产生量增加并可显著促进IL-2分泌,进而影响淋巴细胞的活性,终导致NK细胞功能增强.结论 Apogossypol可增强荷瘤小鼠的免疫功能,抑制肿瘤的生长.
-
草鱼出血病灭活疫苗上调草鱼脾细胞主要免疫分子的表达
目的 探讨草鱼出血病灭活疫苗对草鱼脾脏中IgM、主要组织相容性复合体Ⅰ (MHC Ⅰ)、1型干扰素(IFN1)、补体3(C3)、白细胞介素1β(IL-1β)、内凝集素(intelectin)相关基因表达的影响.方法 用草鱼肾细胞系(CIK)培养草鱼呼肠孤病毒(GCRV),并制备草鱼出血病灭活疫苗,用生理盐水稀释成50倍和100倍,包括未稀释组及生理盐水对照共4组.分别腹腔免疫注射健康草鱼,各组分别于免疫后0、6、12、24、72 h,取脾脏并抽提总RNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测上述6种免疫相关基因mRNA表达.结果 与生理盐水对照组相比,免疫注射不同剂量的草鱼出血病灭活疫苗均能刺激草鱼脾脏中6种主要免疫分子不同程度的表达上调,表明疫苗刺激草鱼机体启动了非特异性和特异性免疫应答.在3个疫苗免疫组中,intelectin、MHC Ⅰ、IL-1β、C3基因的相对表达量都随着时间的推移出现先表达上调,后表达下调;基因IFN1的相对表达量在免疫后6h达到峰值,之后下降至正常水平;IgM的相对表达量在所检测时间内呈逐渐上调的趋势.结论 草鱼出血病灭活疫苗均能诱导草鱼脾脏中免疫相关分子基因的表达上调.
-
肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤
目的 探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体4/髓样分化因子88 (TLR-4/MyD88)信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用.方法 30只成年SD大鼠行经口气管插管,给予40 mL/kg潮气量通气240 min,建立呼吸机相关性肺损伤模型,机械通气结束后,使用4℃ PBS经气管导管缓慢注入并回收支气管肺泡灌洗液(BALF),提纯肺泡巨噬细胞.收集并培养肺泡巨噬细胞,随机分为3组:PBS刺激组(CON组);TNF-α刺激联合PBS组(STI组);TNF-α刺激联合抗TLR4单克隆抗体(mAb)干预组(ANT组);每组8个样本.CON组细胞用PBS结合2h后,继续用PBS培养16 h;STI组细胞用PBS结合2h后,采用20 ng/mL TNF-α培养16 h;ANT组细胞用PBS液及TLR4 mAb结合2h后,用20 ng/mL TNF-α培养16 h.ELISA检测各组上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的表达;反转录PCR检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、髓样分化因子88 (MyD88)、核因子κB (NF-κB)的mRNA表达,Western blot法检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、MyD88、NF-κB的蛋白表达.结果 与CON组比较,STI组及ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显增高;STI组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κBmRNA表达水平与蛋白表达水平明显增高;ANT组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平无明显变化.与STI组比较,ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显降低;肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平明显下调.3组TLR9 mRNA与蛋白表达水平相近.结论 炎症因子刺激可调节TLR4、MyD88、NF-κB分泌增加,肺泡巨噬细胞TLR4-MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤.
-
生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶1从而负调控细胞因子分泌
目的 观察生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMP)能否诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶1(HO-1),从而影响细胞因子的产生.方法 体外培养胎盘滋养层细胞,用0.5～5μg/mL LAMP作用4～12h.实时定量PCR和Western blot法分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达以及核因子相关因子2(Nrf2)的核转位;2',7'-二氯二氢荧光黄二乙酸酯(H2DCFDA)检测活性氧(ROS)产生;采用N-乙酰半胱氨酸(NAC)或Nrf2 siRNA处理滋养层细胞,观察其对HO-1表达的影响.采用HO-1的激动剂钴原卟啉(CoPP),抑制剂锌原卟啉(ZnPP)或HO-1 siRNA处理细胞,ELISA检测处理前后LAMP对诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)分泌的影响.结果 LAMP能诱导滋养层细胞HO-1 mRNA和蛋白表达,并能诱导其产生ROS以及促进Nrf2核转位.ROS抑制剂NAC预处理后,可明显降低HO-1的表达水平以及细胞核内Nrf2含量.同时,Nrf2siRNA转染后,HO-1表达显著减少.采用ZnPP处理滋养层细胞,或RNA干扰HO-1表达后,可促进LAMP诱导滋养层细胞分泌TNF-α和IL-1β,而CoPP处理能进一步降低TNF-α和IL-1β水平.结论 LAMP能通过ROS/Nrf2诱导滋养层细胞表达HO-1,从而抑制细胞因子的过度分泌.
-
鸡白痢沙门菌SpiC蛋白的原核表达及其应用
目的 进行鸡白痢沙门菌SpiC蛋白原核表达并建立以SpiC蛋白为检测抗原的间接ELISA.方法 以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板,PCR扩增384 bp的spiC基因.将spiC基因克隆至原核表达载体pET30a中,构建重组原核表达质粒pET30a-spiC,再转化到表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot分析鉴定,纯化His-SpiC蛋白,建立SpiC蛋白为检测抗原的间接ELISA并检测临床血清样品.结果 通过对诱导后重组菌裂解产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,重组菌可以表达相对分子质量(Mr)约19 200的可溶性重组蛋白His-SpiC.重组蛋白GST-SpiC免疫无特定病原体鸡,所获得的高免血清能识别重组蛋白His-SpiC,表明体外表达的重组蛋白His-SpiC有良好的免疫反应原性.所建立的以重组蛋白His-SpiC介导的间接ELISA有较好的特异性,能够区分spiC基因缺失型疫苗候选株免疫与野生菌自然感染.结论 重组蛋白His-SpiC呈可溶性表达,具有良好的免疫原性,以重组蛋白His-SpiC建立的间接ELISA,可以作为区分感染和免疫动物(DIVA)鸡白痢疫苗免疫的鉴定方法.
-
中性粒细胞弹性蛋白酶的过表达促进K562细胞增殖并抑制其凋亡
目的 利用AdEasy系统构建携带人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)基因的重组腺病毒表达质粒,并感染K562细胞,观察其对K562细胞增殖和凋亡的影响.方法 以急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株HL-60的RNA为模板,经反转录PCR得到NE基因的编码区并克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV,得到pAd-NE,经HindⅢ、EcoR V酶切鉴定和测序正确后,将其转化入pAdEasy-1-BJ5183进行同源重组,得到重组子Ad-NE,经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞进行包装.14 d之后收获原代病毒,经5轮扩增后,测定病毒滴度,进行PCR鉴定.感染K562细胞后,荧光显微镜初步观察感染效率,同时用流式细胞术检测感染效率;Western blot法进一步鉴定NE是否表达上调;CCK-8法测定细胞增殖情况;流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期变化.结果 酶切鉴定及测序结果表明重组穿梭质粒pAd-NE构建成功;酶切鉴定显示同源重组成功,得到重组子Ad-NE;荧光显微镜表明病毒包装成功;经过5轮扩增后,病毒滴度达到1.64×1012 pfu/mL;感染K562细胞后,荧光显微镜观察感染效率达80％左右;Western blot法检测到NE表达上调;CCK-8实验显示NE表达上调后K562细胞增殖能力增强;流式细胞术显示S期细胞明显增多并且细胞凋亡减少.结论 过表达NE可促进K562细胞增殖并抑制其凋亡.
-
瘦素促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞的转分化
目的 探讨瘦素对肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化的影响及其作用机制.方法 体外培养HFL-1人胚肺成纤维细胞,用(0～200) ng/mL重组人瘦素(rHL)干预或联合转化生长因子β1(TGF-β1)处理HFL-1细胞,Western blot法测定α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)的表达.CCK-8法测定细胞增殖,ELISA测定细胞上清液1型胶原蛋白含量.结果 (50、100、200) ng/mL的rHL处理HFL-1细胞48 h,α-SMA的蛋白表达水平均较对照组明显上调;与200 ng/mL rHL或5 ng/mL TGF-β1单独处理的细胞相比,200 ng/mL rHL和5ng/mL TGF-β1联合处理HFL-1细胞48h,HFL-1细胞α-SMA蛋白表达水平显著上调.rHL能够上调HFL-1细胞p-AKT的表达,LY294002可抑制rHL对HFL-1细胞α-SMA表达的诱导作用.与对照组相比,(12.5、25、50、100、200) ng/mL作用72 h,细胞存活率无显著性差异.(50～200) ng/mL rHL作用48 h,细胞上清液中1型胶原蛋白含量明显升高.结论 瘦素能够促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化,其作用机制与激活PI3K/AKT信号通路有关.
-
烟曲霉感染时NADPH氧化酶通过诱导活性氧活化巨噬细胞自噬
目的 研究NADPH氧化酶(NOX)参与烟曲霉孢子诱导巨噬细胞自噬及其作用机制.方法 取对数生长期的RAW264.7细胞,随机分为3组:以烟曲霉孢子刺激的处理组、烟曲霉孢子联合NOX抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(DPI)的处理组和无处理的空白组.细胞作用2h后荧光显微镜观察细胞内二氯荧光黄亮度以检测活性氧(ROS)水平,免疫印迹法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达量,免疫荧光技术观察LC3的表达与定位.结果 烟曲霉孢子刺激后RAW264.7细胞的ROS与LC3BⅡ表达水平显著升高,同时LC3呈斑点状聚集并与烟曲霉孢子共定位;以DPI抑制后ROS与LC3 BⅡ表达量与空白组相比无明显变化,并且LC3在细胞内弥散分布.结论 烟曲霉感染时NOX通过产生ROS活化巨噬细胞自噬.
-
塞来昔布与顺铂联合应用抑制顺铂耐药性鼻咽癌细胞的生长并诱导其凋亡
目的 观察塞来昔布(celecoxib)与顺铂(DDP)联合处理对DDP耐药的鼻咽癌TW03/DDP细胞生长的影响.方法 用(0.05～1.00)μg/mL的DDP梯度培养TW03/DDP细胞,经反转录PCR和Western blot法证明TW03/DDP细胞肺耐药相关蛋白(LRP)高表达后,采用siRNA干扰TW03/DDP细胞LRP蛋白表达;Celecoxib与DDP联合或单独处理不具耐药性的鼻咽癌TW03细胞、TW03/DDP细胞和TW03/DDP-siRNA细胞.CCK-8法检测细胞的生长抑制率,annexin V-FITC/碘化丙锭(PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 Celecoxib与DDP单独使用均能抑制TW03/DDP细胞和TW03细胞的生长并诱导凋亡,但DDP对TW03/DDP细胞作用弱;Celecoxib与DDP联用对2个细胞株的生长都有抑制作用,其生长抑制率和凋亡率均大于二者单独应用的效果;Celecoxib处理TW03/DDP细胞可使其LRP的mRNA和蛋白水平下降.结论 Celecoxib和DDP联合应用可抑制LRP的表达,显著抑制TW03/DDP细胞的生长并诱导其凋亡.
-
IL-23在食管鳞癌组织中高表达并抑制食管癌细胞核因子κB表达
中国是食管癌高发区域,其组织类型90％为食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)[1-2].恶性肿瘤的发生与炎症反应密切相关,肿瘤微环境中存在的炎症因子对恶性肿瘤发生、发展有促进作用和免疫抑制作用[3],针对炎症因子的治疗对抗恶性肿瘤的发展提供了新的思路[4].白细胞介素23(interleukin-23,IL-23)是一种异二聚体细胞因子,由特异性的p19亚基和与IL-12共有的p40亚基组成[5],主要由抗原刺激活化的树突状细胞和巨噬细胞分泌.
-
急性髓细胞白血病患者外周血淋巴细胞亚群的特征及临床意义
目的 通过检测急性髓细胞白血病患者外周血各淋巴细胞亚群的分布,探讨该类患者免疫功能状况.方法 通过流式细胞术检测健康对照组(n=20)、急性髓细胞白血病初发患者(n=31)及完全缓解期患者(n=31)外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞、TCRγδ+T细胞、CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)、CD16+ CD56+ NK细胞比例;通过细胞杀伤实验分析NK细胞和γδT细胞的杀伤活性以及与Treg的关系.结果 与对照组相比,初发白血病患者和完全缓解患者外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞比例无明显差异,但CD4+ CD25+ Treg比例明显增高,TCRγδ+T细胞和CD16+ CD56+ NK细胞比例明显下降.初发病患者NK细胞和γδT细胞具有杀伤活性,但Treg能明显抑制其杀伤活性.结论 急性髓细胞白血病患者外周血γδT和NK细胞虽具有杀伤功能,但比例明显下降,Treg对其杀伤功能具有抑制作用.
-
结直肠手术后认知功能障碍患者血清细胞因子的差异表达
目的 应用高通量细胞因子抗体芯片筛查结直肠手术后认知功能障碍(POCD)患者血清差异表达的细胞因子并进行验证.方法 80例择期行结直肠手术患者,根据认知功能测试量表判定POCD,于手术前1d、术后4h取血分离血清,高通量细胞因子芯片筛查120个血清细胞因子,差异5倍以上因子经ELISA验证.结果 77例患者完成认知量表和血样采集,术后第7天,19例发生POCD.POCD患者在年龄、麻醉风险ASA分级、糖尿病发病率、受教育程度与非POCD患者有明显差异.高通量筛查出的5倍以上差异表达血清细胞因子9个,经ELISA验证结果显示:POCD患者术前白细胞介素17 (IL-17)、Fas、巨噬细胞炎性蛋白3 α(MIP-3 α)水平明显高于非POCD患者,瘦素(lenin)明显低于非POCD患者;术后4h血清IL-6、IL-11、IL-17、甲基受体趋化蛋白3(MCP3)、骨髓造血祖细胞抑制因子(MPIF-1)、MIP-3α明显高于非POCD患者,脑源性神经营养因子(BDNF)明显低于非POCD患者.POCD患者术后4h的IL-6、IL-17、MCP3、MPIF-1明显高于术前;非POCD患者术后4hIL-6、IL-17明显高于术前,Fas、BDNF明显低于术前.结论 结直肠手术POCD的发生伴随的血清细胞因子IL-6、IL-11、IL-17、Fas、MPIF-1、MIP-3α、MCP3、leptin、BDNF的差异表达.
-
乳腺癌原发灶胸腺基质淋巴细胞生成素表达与预后相关
目的 分析胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达对早期乳腺癌术后患者的预后预测价值,以及与辅助化疗远期疗效的关系.方法 回顾性收集2000-01-01/2002-12-31期间在解放军总医院接受手术的130例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,用免疫组织化学法检测乳腺癌原发灶TSLP的表达.用类流式组织细胞定量分析仪(FACS-like tissue cytometeranalysis system)对免疫组织化学染色切片行计算机全切片扫描,并用HistoQuest软件对肿瘤区域阳性信号进行半定量分析.分析TSLP在乳腺癌原发灶的表达情况与乳腺癌预后的关联性以及与临床病理特征的相关性,还分析了TSLP表达与辅助化疗远期疗效的相关性.结果 在COX多因素生存分析中,间质TSLP阳性细胞百分比是无病生存(DFS)的独立保护性预后因素.在接受过辅助化疗患者的COX多因素分析中,间质TSLP阳性细胞百分比是DFS、总生存(OS)的独立保护性预后因素.在TSLP间质阳性细胞百分比较高(≥39.14％)患者的LOG-RANK单因素生存分析中,接受辅助化疗的患者的OS较无辅助化疗组患者OS显著延长.结论 乳腺癌原发灶间质细胞TSLP表达强度与预后及辅助化疗疗效相关.
-
血清可溶性髓样细胞触发受体1对活动性肺结核的早期预警和预后判断价值
目的 检测活动性肺结核(ATB)患者血清可溶性髓样细胞触发受体1(sTREM-1)含量并分析其临床意义.方法 收集东莞市慢性病防治院确诊的ATB患者78例和健康志愿者40例,全自动血球分析仪检测外周血中性粒细胞和单核细胞绝对值,ELISA检测血清sTREM-1含量,Pearson相关分析其相关性.结果 ATB患者外周血中性粒细胞绝对值,单核细胞绝对值和血清sTREM-1含量均显著增高,且痰涂片结核分枝杆菌(MTB)阳性患者显著高于痰涂片MTB阴性患者,常规抗结核药物治疗前显著高于治疗后.以528.14 pg/mL为血清sTREM-1含量检测截断点时,痰涂片MTB阳性的结核确诊率为100％.Pearson相关性分析显示ATB患者外周血中性粒细胞和单核细胞绝对值均与患者血清sTREM-1含量呈正相关.结论 sTREM-1对ATB的早期预警及预后有重要参考价值.
-
肝癌组织Bcl-2的检测及小干扰RNA抑制
目的 探究肝癌组织中Bcl-2的表达与肝癌临床病理特征、患者预后之间的关系;观察siRNA抑制Bcl-2表达后,SMMC-7721增殖能力的变化.方法 通过反转录PCR、免疫组织化学SP法以及Western blot法检测68例肝癌组织中Bcl-2的表达;根据Bcl-2表达水平的高低进行分组,比较不同组中肝癌临床病理特征及患者预后;通过siRNA抑制Bcl-2在SMMC-7721细胞中的表达,应用MTT法检测细胞增殖能力的变化.结果 相较于癌旁组织,Bcl-2肝癌中表达明显升高;Bcl-2在肝癌组织中表达水平与肝癌临床病理特征存在明显相关性,Bcl-2表达水平较高的患者预后较差;siRNA抑制SMMC-7721细胞中Bcl-2的表达后细胞增殖能力显著降低.结论 Bcl-2的表达在肝癌组织中异常增高,且与肝癌临床病例特征及患者预后存在相关性;抑制Bcl-2的表达可降低肝癌细胞的增殖能力.
-
结核分枝杆菌抗原和TCRγδ抗体诱导人γδT细胞分化并产生IL-17
目的 探讨结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)和抗T细胞受体γδ单克隆抗体(TCRγδ mAb)在刺激人γδT细胞诱导分化产生IL-17中的作用.方法 健康人外周血单个核细胞经过免疫磁珠分选得到纯化的γδT细胞后,加入MTB-HAg或包被的TCRδ mAb,再加或不加CD28 mAb进行刺激,同时加或不加IL-17极化细胞因子组合(CK)(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23),极化诱导培养10～12 d.然后收集诱导极化培养的γδT细胞,经佛波醇酯和离子霉素再刺激6h后,用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数.结果 经刺激和诱导分化培养的γδT细胞用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数发现,TCRγδ mAb联合CK组与TCRγδ mAb组相比明显增加,TCRγδ mAb联合CD28 mAb组与TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组相比明显减少.TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组与TCRγδ mAb联合CK组相比明显增多.MTB-Hag同时联合CD28 mAb和CK组与TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组相比显著减少,但与MTB-HAg联合CD28 mAb组相比明显增多.结论 诱导Th17分化的CK(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23)也能诱导人γδT细胞分化产生IL-17,TCRγδ mAb刺激γδT细胞增殖后诱导分化产生IL-17的活性比MTB-HAg更强.另外,CD28在TCRδ mAb激活γδT细胞诱导产生IL-17的过程中也有重要作用.
-
制备GP73多克隆抗体并建立GP73胶乳增强免疫比浊法
目的 运用胶乳微球标记抗高尔基体蛋白73(GP73)抗体,并初步建立GP73的胶乳增强免疫比浊法.方法 用人工重组GP73蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,并将纯化成功后的抗体蛋白共价偶联到胶乳微球上;优化偶联条件,制备免疫胶乳,建立GP73胶乳增强免疫比浊测定法.结果 制备的纯化抗GP73多克隆抗体的效价达到16000,用其致敏的胶乳微球在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐(EDAC/NHS)浓度为10 mg/mL、反应溶液为PBS (pH =6)、室温反应3h,偶联率高.所建立的颗粒增强免疫比浊法灵敏度和特异性良好,线性范围在(6.25 ～200) ng/mL,检测下限在10 ng/mL.结论 成功纯化出GP73多克隆抗体,制备GP73免疫胶乳微球颗粒,建立GP73胶乳增强免疫比浊法.
-
两株抗幽门螺杆菌特异性卵黄抗体的制备及性能
目的 分别制备抗幽门螺杆菌(H.pylori)全菌(SS1株)和尿素酶I和尿素酶B的重组蛋白(rIB)的特异性卵黄抗体(IgY),纯化后研究其体外抑菌效果.方法 分别以超声破碎SS1菌液和rIB为抗原免疫来杭鸡,用水稀释法和硫酸铵沉淀法纯化获得相应特异性IgY(SS1-IgY、IB-IgY).将特异性IgY与SS1混合作用后共培养检测其抑菌效果,快速脲酶试验检测其抗尿素酶作用.结果 成功制备2种特异性IgY:SS1-IgY和IB-IgY,效价超过1∶12 800,纯度超过80％.SS1-IgY和IB-IgY均有体外抗尿素酶活性和抑菌作用.结论 SS1-IgY和IB-IgY均具有在体外抑制H.pylori尿素酶活性和抑制H.pylori生长的作用.
-
半乳糖凝集素3对树突状细胞及T淋巴细胞功能影响的研究进展
半乳糖凝集素3(Gal-3)是半乳糖凝集素家族成员之一,它是半乳糖凝集素家族中唯一的嵌合型凝集素,存在于正常细胞和肿瘤细胞的胞核、胞质和细胞外基质中,能调节树突状细胞(DC)和T淋巴细胞的免疫功能,调节机体免疫应答和炎症反应.研究发现DC分泌Gal-3具有抑制自身凋亡、调节细胞因子生成以及调节T细胞应答等多种功能.同时Gal-3位于胞外和胞内对T淋巴细胞分别具有相反作用,胞外Gal-3诱导T细胞凋亡,胞内Gal-3抑制其凋亡.此外Gal-3在调节炎症反应中的起重要作用.
-
Sj(o)gren综合征发病机制及Na+/K+ATP酶在其发病中的作用
Sj(o)gren综合征是一种自身免疫性疾病,主要表现为腺体分泌量减少进而引发相应临床表征,严重影响患者生活质量.因此,对于其治疗方法的探索尤为重要.然而,对此病的治疗和干预基于病因和发病机制的明确.B细胞活化后产生抗体影响Sj(o)gren综合征患者腺体中的Na+/K+ ATP酶活性,并认为此机制是导致腺体分泌障碍的重要原因之一.因此本文将从唾液本身的重要性、Na+/K+ ATP酶在正常唾液分泌中的作用、Sj(o)gren综合征的病因及临床表现、发病机制及Na+/K+ ATP酶在发病机制中作用几方面的研究进展进行论述.
-
H因子结合蛋白作为B群流脑候选疫苗抗原的研究进展
脑膜炎奈瑟菌表面蛋白H因子结合蛋白(fHBP),是脑膜炎奈瑟菌的外膜蛋白和重要毒力因子,能与补体调节蛋白H因子结合.结合于脑膜炎奈瑟菌表面的H因子,能下调补体系统的激活作用,使脑膜炎奈瑟菌逃避补体系统的攻击.fHBP能诱导机体产生高水平的保护性抗体,抗fHBP抗体与fHBP结合后可阻止fHBP与H因子的结合,从而使细菌易于被补体系统杀灭和清除.因此,fHBP已成为B群流行性脑脊髓膜炎理想的疫苗候选抗原之一.现就fHBP的结构、基因的表达与调节、作为B群脑膜炎奈瑟菌疫苗候选抗原的作用、应用策略、安全性和有效性等新研究进展进行综述.
-
microRNA在多发性硬化症中的研究进展
多发性硬化症(MS)是一种累及中枢神经系统的自身免疫性疾病,发病机制复杂,免疫系统的失调在MS的发病过程中起着重要作用.小RNA(miRNA)是一类短序列、非编码小分子单链RNA,主要通过转录翻译抑制参与基因表达调控,miRNA作为核内关键调控分子参与多种机体细胞的增殖、分化、凋亡等生物学行为.近来研究发现miRNA参与MS的发病过程,主要作用于MS患者的中枢神经细胞和免疫细胞.miRNA有望成为一个新的生物诊断和治疗靶点,现就miRNA生物学特性及在MS中研究进展进行综述.
-
Th17细胞及其相关因子在银屑病发病中的作用及其分子机制
银屑病是一种自身免疫性疾病,表现为以T细胞为主的免疫功能紊乱.Th17细胞是一种能分泌白细胞介素17(IL-17)的T细胞亚群,参与多种自身免疫性疾病的免疫调节.研究发现银屑病患者外周血中存在IL-23和Th17类细胞因子的显著升高,IL-23/Th17细胞轴在银屑病发病机制中有重要作用.除Th17细胞本身,在银屑病患者皮损处,IL-17、IL-22、IL-21等Th17相关细胞因子亦发生改变.调节性B细胞在银屑病的发病过程中有可能通过产生IL-10发挥负向免疫调节功能.本文主要从Th17细胞及其相关因子与银屑病,调节性B细胞和Th17细胞在银屑病发病机制中的拮抗作用几个方面进行综述.
-
肾细胞癌免疫治疗的临床研究进展
肾细胞是常见的泌尿系肿瘤之一,对于转移性的肾细胞癌靶向药物已经成为标准治疗方案,但是靶向药物的完全缓解率非常低,大多数的患者在初治疗有效后很快发生肿瘤进展.因此肾细胞癌的免疫治疗随着肿瘤免疫学机制研究的发展再次成为研究的热点.本文总结了已经完成临床试验的肾细胞癌免疫治疗方法,根据免疫治疗的原理主要从T细胞调节剂、细胞过继免疫治疗、疫苗以及免疫治疗与其他治疗联合应用等方面介绍了肾细胞癌免疫治疗的临床研究进展,分析了免疫治疗在肾细胞癌治疗领域基本状况、需要解决的问题以及未来的发展趋势及应用前景.
-
细菌毒素-抗毒素系统研究进展
毒素-抗毒素系统(TA)普遍存在于细菌和古细菌的染色体和质粒中,包括人类致病菌如结核分枝杆菌等,此系统由2个共表达的基因组成,分别编码毒素蛋白和抗毒素,毒素通常抑制细菌生长,而抗毒素则可中和毒素的毒性对细菌起保护作用.根据抗毒素的性质和TA的组成,目前已经发现有5型TA,TA中毒素对细菌发挥毒性作用的机制不同,不同TA之间又存在着错综复杂的交互作用,而且此系统在细菌中发挥的作用也一直是近年来学者们研究的热点.现对细菌TA的研究现状进行综述.
-
利用科技期刊学术论文检测系统检测稿件的复制和抄袭
目的 为提高医学期刊论文的质量,尊重他人的学术成果,维护学术论文的出版规范化,《细胞与分子免疫学杂志》编辑部对所有投稿论文进行了学术不端检测,以便有效预防学术不端行为.方法 利用中国知网“科技期刊学术不端文献检测系统”,对投稿《细胞与分子免疫学杂志》的学术论文的全文进行了学术不端检测.结果 在投稿论文检测中,发现不同程度的学术不端行为.结论 经过学术不端系统的检测,规范了学术论文的写作,提高了投稿质量,减少了剽窃他人的学术成果的几率.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
