细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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Twist促进乳腺癌细胞BT-549乳腺细胞小球形成及其迁移
目的 探讨Twist基因功能缺失对乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及其迁移的影响.方法 采用shRNA干扰技术构建Twist基因敲减的BT-549乳腺癌细胞株(BT-549-shTwist细胞株)和阴性对照细胞株BT-549-shVec;采用实时荧光定量PCR和Westem blot法验证干扰效率;长程无血清悬浮培养方法富集具有干细胞特性的乳腺癌细胞小球(mammosphere);TranswellTM法检测乳腺癌细胞小球的迁移能力.结果 采用shRNA干扰技术成功构建Twist基因敲减的BT-549乳腺癌细胞株BT-549-shTwist 细胞株;BT-549-shTwist细胞株的mammosphere富集能力和迁移能力减弱.结论 Twist促进BT-549乳腺癌乳腺细胞小球形成及其迁移.
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硫化氢对大鼠缺血/再灌注心肌损伤的保护作用及机制
目的 探讨硫化氢(H2S)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)的保护作用及其相关机制.方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和H2S处理组,每组10只.通过结扎冠状动脉左前降支40 min再灌注2h建立MIRI模型;H2S处理组分别于缺血前、再灌注前腹腔注射14 μmol/kg的硫氢化钠(NaHS).再灌注24h后,从腹主动脉中取血、分离血清,剥离心脏,HE染色观察心肌病理学改变.通过试剂盒测定血清磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平及心肌匀浆液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,ELISA检测心肌组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Westem blot分析心肌细胞质内Keap1表达及核因子E2相关因子2(Nrf2)、核因子κB p65(NF-κB p65)表达.结果 H2S明显减轻心肌组织病理形态学损伤.模型组血清CK-MB、LDH、cTnI水平、心肌MDA活性、细胞核Nrf2、NF-κB p65表达水平及心肌IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量较对照组增加,而心肌SOD、GSH-Px、CAT活性及细胞质Keap 1表达水平较对照组降低.与模型组比较,经H2S处理后,血清CK-MB、LDH、cTnI水平、心肌MDA活性、细胞质Keap1表达水平、心肌IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量及细胞核NF-κBp65水平下降;心肌SOD、GSH-Px、CAT活性及细胞核Nrf2水平升高.结论 外源性H2S对MIRI大鼠产生良好的保护作用,其机制可能与增强抗氧化能力及减少炎症因子的释放有关.
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IL-8通过上调Bcl-2的表达和下调caspase-3的表达抑制MCF-7乳腺癌细胞凋亡
目的 探讨白细胞介素8(IL-8)对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响及其机制.方法 Westem blot法检测MCF-7细胞IL-8受体CXC趋化因子受体1(CXCR1)、CXCR2的表达;反转录PCR、Western blot法检测(0、20、40、80、160) ng/mL IL-8对MCF-7细胞Bcl-2、caspase-3表达的影响;CCK-8法检测(0、40、80) ng/mL IL-8对MCF-7细胞增殖的影响;相差显微镜下观察80 ng/mL IL-8处理MCF-7后细胞形态的变化;Western blot法检测80 ng/mL IL-8联合信号通路抑制剂10 μmol/L PD980590、10 μmol/L LY294002或50 μmol/L AG490[分别为丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)、磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PBK/AKT)、Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)信号通路抑制剂],共同处理MCF-7细胞后,细胞内Bcl-2蛋白表达的变化;Western blot法检测(0、20、40、80、160) ng/mL IL-8对MCF-7细胞磷酸化p-AKT表达的影响;流式细胞术、反转录PCR以及Westem blot法分别检测80 ng/mL IL-8联合10 μmol/L LY294002共同处理MCF-7细胞后,细胞凋亡以及细胞内Bcl-2、caspase-3表达的变化.结果 IL-8受体CXCR1、CXCR2在MCF-7细胞中均有表达;在IL-8的作用下,MCF-7细胞Bcl-2表达升高,caspase-3表达下降,抗凋亡能力明显增强;IL-8能显著上调MCF-7细胞中p-AKT的表达;PBK/AKT信号通路抑制剂LY294002能显著抑制IL-8抗MCF-7细胞凋亡的作用,且减少Bcl-2并增加caspase-3的表达.结论 IL-8可显著抑制MCF-7细胞的凋亡,其机制可能与IL-8激活PI3K/AKT信号通路而上调Bcl-2、下调caspase-3的表达有关.
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哮喘大鼠肺组织中Wnt5a/JNK信号通路相关分子表达增强
目的 研究Wnt5a/JNK信号通路相关分子在哮喘大鼠肺组织中的表达.方法 将实验大鼠随机分为正常组和哮喘组,成功复制哮喘模型后,通过HE染色观察气道病理改变,实时荧光定量PCR检测肺组织和血液中Wnt5a mRNA的表达,Western blot法检测肺组织中磷酸化的c-Jun (p-c-Jun),磷酸化的c-Jun N端激酶(JNK)蛋白的表达.结果 与正常组相比,哮喘组支气管黏膜增厚,褶皱增多,管腔狭窄;气管和血管周围有炎细胞的浸润.气道壁与平滑肌层显著变厚.哮喘组大鼠肺组织和血液中Wnt5a mRNA与对照组比较表达上调,p-c-Jun,p-JNK蛋白表达增加.结论 哮喘大鼠的Wnt5a、p-JNK、p-c-Jun表达增强.
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CXCL12α和CXCL12β促进培养的LX-2肝星状细胞迁移
目的 探讨C-X-C趋化因子配体12α(CXCL12α)和CXCL12β对肝星状细胞迁移的影响.方法 体外培养LX-2肝星状细胞,分为正常对照组、10 ng/mL血小板衍生生长因子BB (PDGF-BB)组、(50、100、200) ng/mL CXCL12α组、(50、100、200) ng/mL CXCL12β组.采用TranswellTM法检测CXCL12α和CXCL12β对LX-2细胞迁移能力的影响;外源性CXCL12刺激LX-2细胞,用Westem blot法检测C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达.结果 TranswellTM实验结果显示各组迁移的LX-2细胞个数分别为:正常对照组(66.33 ±11.43)、PDGF-BB组(127.47 ±31.68)、50 ng/mL CXCL12α组(106.13±12.94)、100 ng/mL CXCL12α组(125.87± 17.00)、200 ng/mL CXCL12α组(137.07±21.03)、50 ng/mL CXCL12β组(103.80±11.26)、100 ng/mL CXCL12β组(122.33±19.46)、200 ng/mL CXCL12β组(124.40 ±15.16).CXCL12α和CXCL12β均可促进LX-2细胞迁移;且随着CXCL12α和CXCL12β浓度增加,LX-2细胞迁移增强.LX-2细胞可表达CXCR4蛋白,外源性CXCL12刺激LX-2细胞后,CXCR4蛋白表达无变化.结论 CXCL12α和CXCL12β均可促进肝星状细胞迁移.
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U0126对间歇低氧大鼠学习记忆及海马区认知相关蛋白表达的影响
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hyponea syndrome,OSAHS),是一种严重的常见睡眠呼吸疾病之一,已证实OSAHS的患者存在不同程度认知功能障碍,主要表现在学习和记忆能力方面的认知功能减退.故对于间歇低氧后脑损伤导致认知障碍的机制越来越引起人们的关注.Tau蛋白过度磷酸化后,失去了对微管的稳定作用,造成神经元变性坏死,从而失去了生物学的功能[1].丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是引起Tau蛋白磷酸化的重要蛋白激酶之一,其下游细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路在慢性间歇性缺氧时被激活并且与OSAHS引起的神经系统损伤密切相关.U0126是一种蛋白激酶阻滞剂,可以阻断ERK信号通路,抑制MAPK级联反应参与细胞凋亡[2].海马是公认的与空间学习、记忆密切相关的大脑区域,且海马对缺氧特别敏感.本实验通过模拟OSAHS的典型病理生理特征,建立间歇低氧大鼠模型,给予ERK信号转导通路的特异性抑制剂U0126阻断ERK信号通路,观察各组大鼠学习与记忆认知功能情况与海马区ERK1/2、磷酸化Tau蛋白表达变化关系,以进一步探讨ERK通路对OSAHS患者引起认知障碍的相关机制,以便我们可能采用有效的治疗方法来避免或减缓OSAHS患者并发症的发生.
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间歇低氧促进大鼠海马神经细胞低氧诱导因子1和存活素的表达
目的 通过模拟阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的发病特征,建立大鼠间歇性低氧(IH)模型,观察慢性IH早期大鼠海马CA1区低氧诱导因子1(HIF-1)、存活素(survivin)的表达及细胞凋亡情况.方法 72只雄性Wistar大鼠随机均分为对照组和间歇低氧(50 mL/L IH)组,对照组向低氧箱内持续注入压缩空气,间歇低氧组分别暴露于间歇性低氧条件下(暴露时间每天7h,持续时间分别为3、7、14、21 d).免疫组织化学染色检测海马CA1区HIF-1、survivin蛋白的表达,原位末端标记法检测神经细胞凋亡.结果 与对照组比较,海马CA1区神经细胞凋亡指数在间歇低氧3d时无明显差异,间歇低氧7、14、21 d组凋亡指数均明显高于对照组,于21 d达高峰.与对照组比较,间歇低氧组HIF-1、survivin蛋白的表达在各时间点均增加,14 d达峰值后逐渐下降,两者表达呈正相关关系(r=0.836).结论 早期间歇低氧可诱导海马CA1区HIF-1、survivin蛋白的表达,二者在神经细胞凋亡的调控中可能有一定作用.
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重组腺病毒pAd/Pri-miR-21可促进HeLa细胞和树突状细胞及Raw264.7细胞增殖
microRNA在肿瘤细胞的发生、发展过程中均发挥着重要作用,包括控制其增殖与凋亡[1-2].microRNA-21(miR-21)是具有自主转录单位的微小RNA[3],已有研究表明肿瘤组织miR-21的高表达与疾病的预后呈负相关[4].为深入发掘miR-21其他的靶基因及其生物学作用,前期的研究中我们构建了可高表达miR-21小分子的重组腺病毒载体[5],本研究拟通过包装并扩增获取重组腺病毒颗粒,分别感染HeLa细胞、树突状细胞(dendritic cells,DC)、Raw264.7小鼠巨噬细胞,通过细胞增殖实验,以期发现miR-21对3种细胞生长的影响,为深入研究miR-21的生物学功能选择理想的细胞模型.
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黄芩素对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制
目的 探讨黄芩素对骨肉瘤细胞增殖、侵袭的影响及其相关机制.方法 以骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,分别加入20 μL的培养液(对照组)或(0、100、200) μmol/L黄芩素溶液处理细胞48 h,应用MTT法分析细胞增殖情况,通过TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,荧光实时定量PCR测定ezrin mRNA表达,采用Western blot法检测ezrin蛋白及磷酸化ezrin(p-ezrin)蛋白表达,利用原位末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数(AI).结果 (100、200) μmol/L黄芩素组细胞增殖抑制率较0 μmol/L黄芩素组升高,且200 μmol/L黄芩素组细胞增殖抑制率明显高于100μmol/L黄芩素组.随着黄芩素浓度的增加,平均穿膜细胞数以及ezrin mRNA、ezrin蛋白、p-ezrin蛋白表达水平逐渐降低,而AI逐渐增加,与对照组和0 μmol/L黄芩素组比较,差异均有显著降低,而0 μmol/L黄芩素组与对照组相比无明显变化.结论 黄芩素能够抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭,其机制可能与抑制ezrin蛋白表达和活性及促进肿瘤细胞凋亡有关.
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痰热清注射液可增强Lewis肺癌化疗小鼠的免疫功能
目的 研究痰热清注射液对Lewis肺癌化疗模型小鼠免疫功能的影响,探讨该药对肺癌小鼠的免疫调节作用.方法 构建小鼠Lewis肺癌模型,分为模型对照组、单独痰热清治疗组、单独化疗组、联合痰热清化疗组,另设正常对照组.每组8只.取各组小鼠外周血后,引颈处死小鼠,取瘤组织、股骨、脾脏和胸腺用于后续实验.观察各组小鼠瘤组织质量、体积,流式细胞术检测各组瘤细胞凋亡水平及瘤组织CD3+T细胞、CD3-NK1.1+细胞浸润情况,HE染色观察胸腺组织结构,计算胸腺指数,并检测外周血淋巴细胞计数及股骨有核细胞总数、MTT法检测脾细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性.反转录PCR技术检测小鼠瘤组织表达γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA的水平.结果 化疗后,联合痰热清化疗组小鼠胸腺指数、外周血淋巴细胞计数及股骨细胞总数均明显高于单独化疗组.化疗后,联合痰热清组小鼠瘤组织CD3+T细胞及CD3-NK1.1+细胞浸润程度均明显强于单独化疗组.化疗后,联合痰热清组小鼠瘤组织表达IFN-γ及TNF-α mRNA水平明显高于单独化疗组,脾CTL杀伤活性明显高于单独化疗组.结论 痰热清注射液对肺癌化疗造成的机体的免疫功能损伤有明显保护作用,并对机体抗肿瘤免疫力有明显的促进作用.
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红霉素可抑制弹性蛋白肽诱导的CD4+T细胞向Th17细胞分化
目的 探讨红霉素对弹性蛋白肽暴露下CD4+T细胞向Th17细胞分化的影响.方法 从小鼠脾脏经免疫磁珠分选出CD4+T细胞,随机分为空白对照组、弹性蛋白肽组和弹性蛋白肽加红霉素干预组.弹性蛋白肽组和弹性蛋白肽联合红霉素处理组加入终浓度30 μg/mL的弹性蛋白肽,弹性蛋白肽联合红霉素处理组在弹性蛋白肽处理的基础上,另外加入100 μg/mL的红霉素.3组细胞在无血清培养液培养24h,用流式细胞术检测Th17的百分比,荧光定量PCR检测维甲酸相关孤儿核受体γt(RORγt) mRNA表达,Westem blot法检测核因子κB(p65)[NF-κB(p65)]及信号转导子和转录激活子3(STAT3)蛋白相对含量.结果 弹性蛋白肽组CD4+ IL-17+细胞的百分比为(11.32 ±2.34)％、对照组为(5.21±1.36)％;qRT-PCR发现RORγtmRNA表达比对照组明显增加,Western blot法检测发现NF-κB(p65)和STAT3蛋白表达比对照组增强.与弹性蛋白肽组比较,弹性蛋白肽联合红霉素处理组的CD4+ IL-17+细胞的百分比、RORγt mRNA表达、NF-κB(p65)和STAT3蛋白表达明显减少.结论 红霉素可抑制弹性蛋白肽诱导CD4+T细胞向Th17分化.
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大黄素抑制小鼠移植宫颈癌生长及其机制
目的 观察大黄素对小鼠宫颈癌U14细胞移植瘤生长的影响,并初步探讨大黄素的抗肿瘤作用机制.方法 建立615近交系小鼠U14细胞移植瘤模型,随机分为对照组(二甲基亚砜)、低剂量大黄素组(20 mg/kg)、高剂量大黄素组(40 mg/kg)、顺铂组(3 mg/kg),每组10只.接种后第26天处死全部小鼠,检测肿瘤体积及质量,计算抑瘤率;通过CD34免疫组织化学染色检测肿瘤组织微血管密度(MVD),采用荧光实时定量PCR和Western blot法检测肿瘤组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的mRNA及蛋白表达,原位末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数(AI),通过Western blot法检测肿瘤组织Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 大黄素低、高剂量组及顺铂组抑瘤率分别为15.83％、46.92％、51.22％,后2组的抑瘤率高于低剂量大黄素组.与对照组及低剂量大黄素组比较,高剂量大黄素组和顺铂组肿瘤体积、肿瘤质量、MVD及HIF-1α、VEGF、MIF、Bcl-2表达水平明显降低,而AI、Bax表达水平则升高,但低剂量大黄素对上述参数无明显影响.结论 大黄素可能通过减少肿瘤血管形成、降低MIF表达以及促进肿瘤细胞凋亡抑制小鼠宫颈癌的生长.
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耐5-氟尿嘧啶的人结肠癌HT-29/5-FU细胞株的建立及其生物学特性
目的 建立耐5-氟尿嘧啶人结肠癌细胞株(HT-29/5-FU)并观察其生物学特性.方法 采用5-FU持续接触浓度递增法诱导;观察细胞形态变化和克隆形成率;MTT法测定生长曲线和药物敏感性;Western blot法分析胸苷酸合成酶(TS)、二氢嘧啶脱氢酶(DPD)的表达情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡.结果 HT-29/5-FU的耐药指数为3.59;与HT-29细胞相比,HT-29/5-FU细胞形态发生改变、生长缓慢、克隆形成率降低,TS和DPD高表达;S期细胞比例增多,更能耐受5-FU诱导的细胞凋亡.结论 HT-29/5-FU细胞株生物学性状的改变可能是5-FU化疗耐药机制的重要组成部分,有助于阐明肿瘤潜在耐药机制和逆转肿瘤耐药.
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乳鼠间充质干细胞可以被诱导表达胰岛素
目的 在乳鼠骨髓间充质干细胞(MSC)定向诱导成产胰岛素细胞过程中,检测胰十二指肠同源性盒因子1(PDX-1)和nestin的表达.方法 通过细胞培养方法分离培养MSC,加入10 μg/L人表皮生长因子(EGF)、10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10μg/L肝细胞生长因子(HGF)、10 μg/L人B细胞调节素、20 mmol/L烟酰胺和20 g/L B27进行诱导.诱导后,采用反转录PCR检测胰岛素、PDX-1和nestin的mRNA的表达,并以免疫荧光细胞化学染色检测胰岛素、PDX-1和nestin蛋白表达.结果 在乳鼠MSC分化为产胰岛素细胞过程中,胰岛素和PDX-1 mRNA的表达上调,nestin mRNA表达下降;nestin、PDX-1和胰岛素蛋白能在产胰岛素细胞中共表达.结论 MSC可以定向诱导而表达胰岛素.
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汉黄芩素对胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制
目的 探讨汉黄芩素对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭的影响及其相关机制.方法 U87细胞随机分为对照组(加入20μL的培养液)、(0、50、100) μmol/L汉黄芩素处理组;细胞培养48 h,应用MTT法检测细胞增殖情况,通过TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,荧光实时定量PCR测定ezrin mRNA表达,Western blot法检测ezrin、Bcl-2、Bax蛋白表达及ezrin蛋白磷酸化水平,用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数(AI).结果 与0 μmol/L汉黄芩素组以及对照组相比,(50、100) μmol/L汉黄芩素组细胞增殖抑制率增加,且100 μmol/L汉黄芩素组细胞增殖抑制率明显高于50 μmol/L汉黄芩素组.随着汉黄芩素浓度的增加,平均穿膜细胞数以及ezrin mRNA、ezrin蛋白、ezrin蛋白磷酸化水平、Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低,而Bax蛋白表达水平、AI逐渐增加;0μmol/L汉黄芩素组与对照组相比,无显著性差异.结论 汉黄芩素能够减少胶质瘤U87细胞增殖、侵袭,下调ezrin蛋白表达和磷酸化活性,并诱导细胞凋亡.
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香烟烟雾提取物下调小鼠C2C12成肌细胞组蛋白去乙酰化酶2表达并增强炎性细胞因子释放
目的 观察香烟烟雾暴露后,小鼠C2C12成肌细胞内炎症介质、组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)和核因子κB(NF-κB)的变化.方法 培养小鼠C2C12成肌细胞,用香烟烟雾提取物(CSE)进行处理.采用MTT法观察CSE对细胞生长的影响,以确定作用于细胞的合适浓度.将培养6～7d的C2C12细胞接种到6孔板,分为对照组和(6.25、12.50、25.0) mL/L CSE组,培养24h.ELISA测定各组细胞上清液白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;实时定量PCR (qRT-PCR)检测各组细胞HDAC2 mRNA的表达;Western blot法检测各组细胞中HDAC2的蛋白相对表达量;免疫共沉淀技术检测细胞内HDAC2/NF-κB复合物.结果 MTT结果提示终浓度为50 mL/L的CSE抑制C2C12细胞的生长;CSE刺激24h后,C2C12细胞IL-8和TNF-α释放增加,HDAC2的mRNA及蛋白相对表达量减少,并在一定程度上具有浓度依赖性;免疫共沉淀技术证实存在HDAC2/NF-κB复合物.结论 CSE下调C2C12细胞HDAC2表达,引起炎症因子释放增加.
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人羊膜间充质干细胞抑制异体淋巴细胞增殖并减少γ干扰素的分泌
目的 观察人羊膜间充质干细胞(hAMSC)对体外培养的淋巴细胞功能的影响.方法 通过酶消化法分离培养hAMSC,采用荧光团标记的小鼠抗人单克隆抗体结合流式细胞术鉴定细胞表面抗原;免疫荧光染色检测培养细胞波形蛋白(vimentin)和阶段特异表达抗原4(SSEA-4)的表达;分离培养hAMSC和外周血单个核细胞(PBMC),将刀豆蛋白(ConA)刺激的淋巴细胞与1×104、5×104、1×105个hAMSC进行共培养.CCK-8法测定淋巴细胞增殖,ELISA测定细胞上清液中IFN-γ的水平.结果 5 μg/mL ConA能够引起淋巴细胞增殖;共培养条件下,hAMSC能够抑制ConA引起的淋巴细胞增殖,且随着hAMSC的数量增加,抑制效果更明显.培养72 h后,CCK-8法结果表明,单纯ConA刺激后淋巴细胞数显著高于共培养细胞.选择抑制效果佳的组别1×106个淋巴细胞与1×105个hAMSC共培养,ELISA测定1×105个hAMSC对淋巴细胞抑制72 h后,上清液中IFN-γ分泌,共培养细胞上清液中IFN-γ水平显著低于单纯ConA刺激细胞.结论 hAMSC能在体外抑制ConA引起的淋巴细胞增殖并减少IFN-γ分泌.
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己烯雌酚导致小鼠睾丸GATA-4阳性Sertoli细胞减少
目的 分析己烯雌酚(DES)对幼年雄性小鼠睾丸GATA-4阳性Sertoli细胞的影响.方法 将24只4周龄幼年雄性小鼠分成4组,每组4只.对照组注射生理盐水,实验组连续7 d(1次/d)经腹腔分别注射(3.3、33.0、330.0) μg/kg己烯雌酚,后一次注射24h后取右侧睾丸,多聚甲醛固定、石蜡切片、免疫组织化学法检测Sertoli细胞GATA-4的表达,并对GATA-4阳性Sertoli细胞进行计数.结果 与对照组相比,33.0μ g/kg和330.0 μg/kg的DES处理后,导致GATA-4阳性的Sertoli细胞数量显著减少,3.3μ g/kg组小鼠的Sertoli细胞数量与对照组相比,无显著性差异.结论 较高剂量的DES可致幼年雄性小鼠GATA-4阳性的Sertoli细胞数量减少.
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生长激素和胰岛素对肝组织和HepG2细胞AKT、STAT5磷酸化的调节
生长激素(growth hormone,GH)在机体生长和代谢方面起到重要作用,在临床的使用日益广泛[1-4].GH介导的Janus激酶/信号转导子和转录活化子(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路参与细胞的增殖、 分化、迁移及凋亡等重要生物学过程[5].GH和细胞膜上的GH受体(growth hormone receptor,GHR)相互作用后激活JAK2和GHR,进一步活化STAT5,STAT5转移到核内与其调节基因的启动子特殊序列结合,从而激活下游基因的转录[6].胰岛素是一种调节代谢和生长的重要激素,主要用于糖尿病的治疗.胰岛素与胰岛素受体(insulin receptor,IR)结合促进胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)的磷酸化,磷酸化的IRS和磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide-3-kinase,PDK)的调节亚基p85结合,进一步活化PDK.激活的PI3K可以通过活化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B(serine-threonine protein kinase B,AKT)进而调控细胞代谢、增殖、分化与凋亡[7].GH和胰岛素在促进生长和调节代谢方面都有着重要作用,激素间的相互作用对生命的稳态具有重要的意义.然而,GH和胰岛素之间的相互作用有待更多地了解.研究表明GH和胰岛素存在着信号通路间相互作用[8-9].本研究在同样的技术背景条件下,同时研究2个激素间的相互作用对信号通路的影响.
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谷氨酰胺诱导nestin阳性大鼠骨髓间充质干细胞分化为施万细胞样细胞
组织工程技术的发展为外周神经损伤提供了新的治疗方法[1],尤其在较长的外周神经缺损中可以解决自体神经移植供源不足的问题.近些年研究表明,施万(Schwann)细胞在外周神经发育和促进外周神经的再生和修复中起着重要的作用[2-3].施万细胞作为外周神经组织工程中重要的种子细胞之一,但是自体来源的施万细胞数量和增殖能力有限,不能满足组织工程化的需要,因此获得充足的细胞用于移植成了问题的关键.骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)作为一种易于获得的多能干细胞,是重要的种子细胞来源.众多研究表明,在体内外均可以分化为类施万细胞[4-9].
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卵巢癌患者血清和腹水中树突状细胞相关miRNA水平分析
目的 观察卵巢癌患者血清标本中与树突状细胞分化发育调控有关的miRNA水平及其与临床特征的关系,探讨血清中miRNA的检测在卵巢癌免疫状态及预后判断中的价值.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测39例卵巢癌患者腹水和血清及20例健康女性成年人血清中miRNA的水平.结果 卵巢癌患者血清中miR-21、miR-222和miR-142-3p水平显著高于健康对照组,在临床Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者血清中miR-21水平高于Ⅰ～Ⅱ期,病理分级高的卵巢癌患者血清中miR-142-3p水平低于低级别的患者,而且患者腹水中miR-21和miR-222的水平高于外周血.结论 卵巢癌患者血清和腹水miR-21、miR-222和miR-142-3p水平升高,与临床分期病理分级有关.
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乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α表达与患者预后相关
目的 本研究旨在探讨乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α(FAP-α)表达与临床病理特征以及预后的关系.方法 回顾性收集2000-01-01/2002-12-31期间在解放军总医院手术的130例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,免疫组织化学染色检测乳腺癌原发灶FAP-α表达,分析FAP-α表达与转化生长因子β1(TGF-β1)表达强度的关系,并分析FAP-α表达与乳腺癌预后的关联性以及与临床病理特征的相关性.结果 FAP-α表达在肿瘤细胞和间质成纤维细胞的细胞质,FAP-α阳性纤维细胞密度与TGF-β1阳性间质细胞密度正相关.FAP-α肿瘤细胞质强度与TGF-β1阳性肿瘤细胞质表达正相关.在雌激素受体和孕激素受体均阴性患者中,FAP-α阳性纤维细胞密度是无病生存(DFS)和总生存(OS)的独立不良预后因素;FAP-α阳性肿瘤细胞质强度是DFS和OS的独立不良预后因素.结论 激素受体阴性乳腺癌患者中,原发灶FAP-α高表达与不良预后相关.乳腺癌原发灶TGF-β1的表达与FAP-α的表达正相关.
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阿糖胞苷与顺铂联用对耐药鼻咽癌细胞的生长抑制作用增强且细胞凋亡增加
目的 研究抗肿瘤药物阿糖胞苷(Ara-C)与顺铂(DDP)联用,或单独使用抗肿瘤药物,作用于具有顺铂耐药性的TW03/DDP鼻咽癌细胞,探讨细胞生长抑制和凋亡的差异及可能机制.方法 体外培养TW03/DDP细胞,运用实时定量PCR和Western blot法检测细胞中肺耐药相关蛋白(LRP)的表达;Ara-C与DDP联用或单独使用处理TW03/DDP细胞和不具耐药性的TW03鼻咽癌细胞后,运用CCK-8法检测其生长抑制率,流式细胞术检测其凋亡率.结果 相对于TW03细胞,TW03/DDP细胞中LRP蛋白表达升高;Ara-C与DDP单独使用均能抑制TW03/DDP细胞和TW03细胞的生长并诱导凋亡,但DDP对TW03/DDP细胞作用弱;Ara-C与DDP联用可抑制以上两种细胞的生长,抑制率和凋亡率均大于二者单独应用的效果.结论 Ara-C与DDP联用可以增强对耐药性鼻咽癌细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用.
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脑脊液细胞中结核早期分泌性靶抗原6的检测及其早期诊断价值
目的 探讨免疫荧光染色法检测脑脊液细胞中结核早期分泌性靶抗原6 (ESAT-6)对结核性脑膜炎诊断的价值.方法 收集36例确诊结核性脑膜炎患者的脑脊液为病例组,45例非结核性脑膜炎患者脑脊液为对照组.用双盲法对2组脑脊液细胞进行ESAT-6免疫荧光染色,统计分析灵敏度和特异度等.结果 病例组ESAT-6存在于中性粒细胞、单核细胞及淋巴细胞中,对照组脑脊液细胞中无ESAT-6表达.灵敏度为88.89％、特异度为93.33％;阳性预测值为91.43％、阴性预测值为91.30％;阳性似然比为13.33、阴性似然比为0.12;Youden指数为82.22％,ROC曲线下面积为0.94.结论 免疫荧光染色检测脑脊液细胞中ESAT-6的灵敏度及特异度均较高,是结核性脑膜炎诊断的有效方法.
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CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞在视神经脊髓炎患者外周血中的数量及意义
目的 检测视神经脊髓炎(NMO)患者外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞的比例,探讨CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞能否作为NMO和多发性硬化(MS)鉴别诊断的生物标志物.方法 采用流式细胞术检测44例NMO患者,38例MS患者和30例健康正常人外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞的比例.采用间接免疫荧光法检测NMO患者水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)的表达情况.结果 NMO患者外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞占CD19+B细胞及淋巴细胞的比例较MS患者和健康正常人明显减低,而MS患者与健康正常人比较,差异无统计学意义.AQP4-Ab阳性NMO患者较AQP4-Ab阴性NMO患者CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞占CD19+B细胞及淋巴细胞的比例明显减低.结论 外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞数量是NMO和MS鉴别诊断的一种生物标志物.
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新风胶囊可以调节类风湿性关节炎患者的免疫功能和改善心功能
目的 观察益气健脾化湿通络中药新风胶囊(XFC)对活动期类风湿性关节炎(RA)患者心功能、血清白细胞介素17(IL-17)、IL-10及B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)的影响.方法 将60例活动期RA患者采用抽签的方式分为2组:治疗组30例口服XFC(3粒/次,3次/d);对照组30例口服甲氨蝶呤(10 mg/次,1次/周).2组均治疗30 d为1个疗程,连续观察3个疗程.另设正常对照(NC)组20名.以超声心动图测量2组治疗前后心功能相关参数的变化,比较2组临床疗效,ELISA检测血清IL-17、IL-10含量,流式细胞术检测T细胞亚群BTLA水平,观察XFC对RA患者心功能、血清IL-17、IL-10及BTLA的影响.结果 与NC组相比,RA患者E峰显著降低、A峰显著升高,E/A比值、左心室内径缩短率(FS)均显著降低.与对照组相比,治疗组A峰、红细胞沉降率(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血尿酸(UA)、IL-17显著降低,E/A比值、CD4+ BTLA+T细胞、CD8+ BTLA+T细胞显著升高.相关性分析表明T细胞亚群BTLA表达与ESR、IL-17呈正相关,与IL-10无明显相关性.结论 RA患者心功能下降与致炎细胞因子及抑炎细胞因子失衡有关;XFC能够改善RA患者的心功能;与上调IL-10、增加CD4+ BTLA+T细胞、CD8+ BTLA+T细胞,下调IL-17、UA、ESR、hs-CRP水平,降低免疫炎症反应有关.
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九江地区1672例呼吸道感染患者呼吸道病原体的IgM的检测和分析
目的 了解九江地区呼吸道感染患者病原体流行及分布情况.方法 采用间接免疫荧光法检测2013-05-01/2014-06-30期间九江学院附属医院呼吸道感染患者血清嗜肺军团菌(LP)、肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸合胞病毒(RSV)、流感病毒A(INFA)、INFB和副流感病毒(PIV)、柯萨奇病毒A(COXA)、COXB、ECHO病毒(ECV)的IgM,分析感染情况及季节性变化.结果 共检测1672份血清,病原体的IgM阳性率为62.97％(1053/1672);不同病原体抗体可在同一患者中检出,随种类增多数量减少.被检患者中,INFA阳性率高,达31.64％,其次为CP(19.62％)、INFB(12.08％)及MP(10.77％).4种病原体IgM四季均可检出,其中INFA和INFB冬春季的阳性率高于夏秋季,CP夏季的阳性率显著高于冬季.结论 INFA和CP是引起九江地区呼吸道感染的重要的病原体;感染可呈现多重性,多种病原体呈现季节性流行.
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抑制和激活蛋白1(Rap1)单克隆抗体的制备和鉴定
目的 制备并鉴定人端粒相关蛋白抑制和激活蛋白1(Rap1)的单克隆抗体.方法 用重组原核人Rap1蛋白免疫BALB/c小鼠;细胞融合后,间接ELISA筛选阳性杂交瘤,建立分泌抗人Rap1蛋白单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株,并进行效价测定和特异性鉴定.结果 制备并获得1株稳定分泌抗人Rap1蛋白mAb的杂交瘤细胞株.ELISA测定腹水效价高达1∶10 000以上.Western blot法、免疫沉淀和免疫荧光染色证实该mAb能特异性识别人Rap1蛋白并可用于上述不同检测.结论 成功制备获得了亲和力高、特异性好的抗人端粒相关蛋白Rap1的mAb.
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β2糖蛋白1多肽抗体的制备与应用
目的 利用人工合成β2糖蛋白1(β2GP1)多肽制备针对人源、鼠源β2GP1的多克隆抗体,并鉴定抗体的特异性及致病性.方法 应用Fmoc法化学合成β2GP1 N端第35 ～51位氨基酸的多肽,将合成后的多肽与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,免疫新西兰大白兔制备抗血清,蛋白G纯化得到抗β2GP1多肽抗体,利用ELISA和Western blot法鉴定其效价和特异性.体外实验使用抗β2GP1多肽抗体/β2GP1复合物刺激C3 H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞一定时间,收集细胞总RNA和总蛋白,实时定量PCR、Western blot法分别检测细胞组织因子(TF) mRNA和蛋白表达;Western blot法检测细胞p38、磷酸化p38、核因子κB p65(NF-κB p65)及磷酸化NF-κB p65表达情况;体内实验采用C3H/HeN小鼠腹腔注射抗β2GP1多肽抗体建立实验性抗磷脂综合征(EAPS)模型,检测小鼠外周血抗β2GP1抗体滴度及部分凝血活酶时间(APTT).结果 化学合成β2GP1多肽的纯度为94％,达到免疫用抗原标准.偶联KLH后免疫新西兰大白兔,其抗血清效价大于1∶32 000.Western blot结果显示抗β2GP1多肽抗体可特异性识别人源和鼠源β2GP1条带,双抗夹心ELISA检测表明该多肽抗体可与β2GP1隐蔽表位特异性结合.体外实验显示抗β2GP1多肽抗体/β2GP1复合物能够增强小鼠腹腔巨噬细胞p38、NF-κB p65磷酸化,诱导细胞TF mRNA及蛋白表达.体内实验成功建立EAPS小鼠模型,小鼠外周血抗β2GP1抗体滴度大于1∶3200,APTT明显缩短.结论 所制备的抗β2GP1多肽抗体可识别人源和鼠源β2GP1分子,能与β2GP1隐蔽抗原特异性结合且具有致病效应.
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Kupffer细胞在非酒精性脂肪性肝病中的作用
众所周知,巨噬细胞在先天免疫应答中发挥着重要的作用.在肥胖和经常饮酒的人群中,肝脏会出现不同程度的损伤,并且随着生活条件的改善,上述肝损伤在人群中出现的比例逐年上升.在这种肝损伤中,发挥主要作用的先天免疫细胞就是定居在肝脏的Kupffer细胞,Kupffer细胞可表现出不同的极化状态,所发挥的功能也有所不同,所以针对Kupffer细胞在肥胖或者酒精导致的肝损伤中功能的研究为近年的研究热点.本文主要介绍了Kupffer细胞在不同因素导致的肝损伤中所发挥的功能,重点关注酒精性肝病和非酒精性脂肪性肝病.通过对Kupffer细胞在上述肝损伤中发挥的功能的研究,有助于我们设计解决相关肝脏疾病的治疗策略.
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巨噬细胞极化与细胞代谢的相互调控
巨噬细胞极化对于机体抵抗病原微生物感染及组织修复等过程中发挥着重要作用.γ干扰素(IFN-γ)和脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞称之为经典活化的巨噬细胞(M1),而白细胞介素4(IL-4)和IL-13诱导巨噬细胞的替代激活(M2).巨噬细胞的极化受到细胞代谢调控,M1型巨噬细胞主要为糖酵解、戊糖磷酸代谢途径供能,而M2型巨噬细胞主要为氧化磷酸化途径参与.本文在总结了巨噬细胞极化对细胞代谢影响的基础上,重点探讨了糖、脂、氨基酸、铁离子、氧化还原反应等代谢通路对其巨噬细胞表型和功能的调节作用.
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Graves病免疫相关机制的研究进展
Graves病(GD)是一种器官特异性自身免疫性疾病,发病机制涉及体液免疫和细胞免疫,但具体机制仍未完全阐明.近年的研究热点集中在T细胞免疫表型、各亚群功能及NK细胞的免疫调节作用等方面,有些研究成果已应用于临床.CD4/CD8、Th1/Th2比例失衡可导致免疫紊乱;Th17细胞数量及分泌的细胞因子影响GD的发展,且与疾病严重程度相关;滤泡辅助性T细胞通过分泌IL-21,诱导B细胞增殖、分化,产生抗体;调节性T细胞数量和或功能改变,与GD发展的不同阶段相关;NK细胞杀伤及分泌活性减弱参与GD的发生、发展.以上免疫机制均与GD发病相关,本文将分别对T细胞亚群及NK细胞在GD中的作用进行综述.
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钙网蛋白与肿瘤免疫关系的研究进展
钙网蛋白(CRT)是一种高度保守的内质网Ca2+结合伴侣蛋白,除了维持细胞内Ca2+平衡及负责糖蛋白的折叠外,还参与线粒体代谢、基因表达和细胞凋亡等过程.蒽环类化疗药物处理时,肿瘤细胞引起的内质网应激能导致肿瘤细胞内CRT的外翻,外翻的CRT可有效增强抗原提呈细胞对肿瘤细胞的识别与吞噬,由此引发抗同种肿瘤细胞的免疫杀伤效应,诱导肿瘤免疫原性细胞进入凋亡程序.由此说明,CRT是引起肿瘤细胞免疫原性凋亡的关键因子,其在肿瘤免疫治疗过程中具有潜在的应用价值.现就CRT在肿瘤免疫中的作用进行综述.
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结肠炎相关结直肠癌的发病机制研究进展
炎症性肠病与结直肠癌的发生密切相关.核因子κB和环氧合酶2、前列腺素通路的持续激活,释放促炎细胞因子,增强活性氧和活性氮水平导致炎症反复发作.炎症信号进一步增加氧化应激,促进DNA诱变,导致肿瘤的发生;激活上皮细胞促存活和抗凋亡途径,促进肿瘤的发展;创造肿瘤微环境,支持血管生成、迁移与肿瘤细胞浸润,促进肿瘤进展和转移.本文通过复习文献,主要综述了结肠炎相关结直肠癌的可能发病机制.
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肿瘤标志物外周血microRNA的研究进展
小RNA(miRNA)是一类长度约为21个核苷酸的非编码小分子RNA,其主要参与调控个体发育、细胞增殖和分化等生命活动.研究发现肿瘤患者miRNA异常表达,与肿瘤的发生发展密切相关.miRNA的异常表达可反映肿瘤的存在及生长,是潜在的肿瘤标志物.不仅在肿瘤组织中存在miRNA的异常表达,而且在外周血中也存在异常表达.外周血检测方法多样,具有无创伤、易于检测,可重复性高等优点,因而外周血miRNA可作为肿瘤早期诊断的标志物,本文综述了外周血miRNA作为肿瘤标志物的研究进展.
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非酒精性脂肪性肝病中Toll样受体活化与microRNA调控的研究进展
小RNA(miRNA)作为细胞内一类非编码RNA参与了细胞内多种生物功能的调节.研究发现,与正常人相比,非酒精性脂肪性肝病患者体内的多种miRNA表达异常,并且发现这种异常表达会促使患者由单纯的肝脏脂肪变性向非酒精脂肪性肝炎转变.在这个转变过程中,作为启动机体免疫应答的一类模式识别受体,Toll样受体(TLR)的激活以及其介导的下游炎性因子的表达促使非酒精性肝炎的发生,而持续的炎性反应会引起肝脏发生纤维化,继而导致肝脏功能障碍,甚至发展成肝癌.本文简述了miRNA在非酒精性脂肪性肝病患者体内的差异性表达,及其与TLR信号通路的激活以及疾病恶化的关系.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
