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细胞与分子免疫学

细胞与分子免疫学杂志

Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 影响因子: 0.81
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1007-8738
  • 国内刊号: 61-1304/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 52-184
  • 曾用名: 单克隆抗体通讯
  • 创刊时间: 1985
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《细胞与分子免疫学杂志》编辑部
  • 出版地区: 陕西
  • 主编: 杨安钢
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 过表达人细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)促进MCF-7乳腺癌细胞生长及S期细胞增加

    作者:杨成成;南克俊;秦思达

    目的 构建带FLAG标签的细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因真核表达载体pcDNA3-FLAG-Skp2并检测其对MCF-7乳腺癌细胞生长及细胞周期的影响.方法 采用反转录PCR从MDA-MB-231乳腺癌细胞中扩增Skp2基因,构建重组真核表达载体pcDNA3-FLAG-Skp2.酶切及测序鉴定重组质粒正确后,脂质体介导转染至MCF-7乳腺癌细胞中.采用Western blot法检测FLAG-Skp2的表达,Alamar blue比色法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞周期.结果 PCR扩增片段与预期片段大小相符,测序结果与GenBank结果一致.Western blot结果显示质粒转染48 h后,细胞成功表达融合蛋白FLAG-Skp2.过表达Skp2的MCF-7乳腺癌细胞较对照组生长速度明显加快,S期细胞显著增多.结论 成功构建人Skp2真核表达载体pcDNA3-FLAG-Skp2.过表达Skp2的MCF-7细胞生长加快,S期细胞增多.

  • IL-37抑制体外培养的SMMC-7721肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移

    作者:张国庆;汤成泳;谭婧宇;刘锐;周密;吴忠均

    目的 探讨白细胞介素37 (IL-37)对SMMC-7721肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制.方法 SMMC-7721肝癌细胞分为重组人IL-37(rhIL-37)处理组和对照组,处理组给予(50、100、200、500) ng/mL rhIL-37,对照组给予等体积培养液.CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,TranswellTM实验检测细胞侵袭能力;Western blot法检测信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的水平.结果 CCK-8实验结果显示rhIL-37可抑制SMMC-7721肝癌细胞的增殖;划痕实验结果证明rhIL-37抑制SMMC-7721肝癌细胞的迁移;TranswellTM实验结果显示,rhIL-37可抑制SMMC-7721细胞的侵袭.Western blot结果表明,rhIL-37处理可下调SMMC-7721细胞p-STAT3、MMP-2的水平.结论 IL-37可抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖、侵袭、迁移,可能与下调p-STAT3、MMP-2表达有关.

  • miR-135b促进肝癌细胞侵袭和转移

    作者:张彦兵;王妍华;郭亚焕;廖子君;徐瑞;阮之平

    目的 探讨miR-135b对肝癌细胞浸润转移的影响及其分子机制.方法 分别在肝癌细胞系中过表达和下调miR-135b,通过TranswellTM实验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力,利用肝癌移植瘤模型检测肝癌细胞的体内增殖能力和成瘤能力;采用Western blot法结合双荧光素酶基因报告系统预测miR-135b的下游靶基因.结果 miR-135b在高侵袭性的MHCC97肝癌细胞系中高表达;过表达miR-135b能够增强HepG2和Bel-7402肝癌细胞的体外侵袭和转移能力,促进肝癌细胞的体内转移能力;通过靶向miR-135b的干扰载体pcDNA-miR-135 b-Sponge下调miR-135b的表达,MHCC97肝癌细胞的体外侵袭转移能力及移植瘤的转移能力明显受到抑制;双荧光素酶基因报告系统和Western blot实验结果显示miR-135b能够靶向Hippo信号通路中的关键分子,包括大型肿瘤抑制因子同源蛋白2 (LATS2)、含β转导素重复序列蛋白(β-TrCP)、N-myc下游调节基因2(NDR2)和亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)等.结论 miR-135b可能通过靶向Hippo信号通路相关基因促进肝癌细胞的侵袭和转移.

  • 红景天苷对低压低氧诱发大鼠脑损伤的保护作用

    作者:董小铷;张向楠;李丹;李彬;王基野;孟姗姗;骆文静;张文斌

    目的 观察红景天苷对低压低氧暴露大鼠脑损伤的保护作用,初步探讨红景天苷预防低压低氧脑损伤的可能机制.方法 利用低压低氧小动物模拟实验舱,模拟海拔6000 m急性暴露,制备低压低氧脑损伤大鼠模型.检测各组大鼠呼吸频率改变,利用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠海马齿状回(DG)区细胞凋亡情况,利用Western blot法检测海马DG区Ras同源分子家族成员A(RhoA)的表达和磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK)、c-Jun氨基端激酶(p-JNK)的水平变化.结果 模拟海拔6000m急性暴露后,大鼠呼吸频率显著增加,低压低氧脑损伤引起大鼠海马DG区神经元发生凋亡,大鼠海马DG区组织中RhoA表达下降,ERK和JNK蛋白磷酸化水平下降;红景天苷干预可显著减少海马DG区神经元凋亡,并逆转RhoA蛋白表达和ERK和JNK蛋白的磷酸化水平.结论 急性低压低氧暴露引起海马DG区神经细胞凋亡,红景天苷对低压低氧暴露诱发神经细胞凋亡起到保护作用.

  • 富硒板桥党参合剂增强衰老小鼠的免疫功能

    作者:詹光杰;杨年安;肖本见

    目的 研究富硒板桥党参(RSBCP)合剂对衰老小鼠免疫功能的影响.方法 昆明种小鼠60只,雌雄各半,随机分为RSBCP合剂高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组及对照组,每组12只.对照组按500 mg/(kg·d)腹腔注射生理盐水,其他各组注射等量D-半乳糖.RSBCP合剂高、中、低剂量组在注射D-半乳糖的同时按(100、50、25) g/(kg·d)RSBCP合剂灌胃,模型组、对照组等量蒸馏水灌胃.30 d后,处死小鼠.测定胸腺指数、脾脏指数,ELISA检测各组小鼠血清中IgG、IgM、C3、C4、白细胞介素2(IL-2)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,采用细胞流式术分析脾细胞主要T细胞亚群.结果 与对照组相比,模型组胸腺指数、脾脏指数明显下降,IgG、IgM及C3、C4、IL-2、IL-6含量显著减少、TNF-α含量明显增加;与模型组比较,RSBCP合剂各组胸腺指数、脾脏指数显著增大,IgG、IgM及C3、C4、IL-2、IL-6含量显著增加、TNF-α含量减少;与对照组相比,RSBCP高剂量组胸腺指数、脾脏指数增大显著,IgG、IgM及C3、C4、IL-2、IL-6含量明显增加、TNF-α含量减少;中、低剂量RSBCP组胸腺指数、脾脏指数、IgG、IgM及C3、C4、TNF-α与对照组无显著性差异.与对照组相比,模型组CD3+T细胞、CD4+T细胞及CD44+T细胞有明显减少,CD8+T细胞明显增加;与模型组相比,RSBCP合剂各组CD3+T细胞、CD4+T细胞及高、中剂量RSBCP组CD44+T细胞显著增加,CD8+T细胞明显减少.结论 RSBCP合剂对衰老小鼠胸腺、脾脏萎缩有一定的延缓作用,能显著提高衰老小鼠血清中IgG、IgM、C3及C4含量,提升IL-2、IL-6水平,降低TNF-α水平,影响T细胞亚群的比例,对增强免疫功能有作用.

  • 亚单位流感疫苗对小鼠哮喘模型的影响

    作者:张翊玲;张正玲;许梅;刘维佳;叶贤伟;张湘燕

    目的 探索亚单位流感疫苗对哮喘模型小鼠的影响.方法 将45只6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为PBS对照组、哮喘对照组、亚单位流感疫苗组.哮喘对照组与亚单位流感疫苗组小鼠于第0、7、14天,腹腔注射50 μg鸡卵清蛋白(OVA)与2 mg氢氧化铝混合乳液,PBS对照组给予相同体积的PBS.第21、28天,亚单位流感疫苗组小鼠分别被肌注0.1mL及滴鼻40 μL亚单位流感疫苗.此后,第42、43、44天,哮喘对照组、亚单位流感疫苗组小鼠被OVA雾化激发连续3d.后1次雾化48 h,眼球取血后处死小鼠并进行肺泡灌洗,收集的肺泡灌洗液(BALF)用于细胞计数及分类;取肺组织进行HE染色检测病理学变化,ELISA测定血清IgE及BALF中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-5、IL-13水平.结果 与PBS对照组相比,哮喘对照组及亚单位流感疫苗组均出现明显的炎症反应、黏液分泌增多、血清及BALF中IFN-γ、 IL-4、IL-5、IL-13水平均显著增高.然而,哮喘对照组与亚单位流感疫苗组间无显著差异.结论 亚单位流感疫苗接种于哮喘小鼠,不会加重哮喘症状,是相对安全的.

  • Toll样受体2(TLR2)和TLR4在沙眼衣原体生殖道感染介导的免疫应答

    作者:王振辉;常晓彤;郝敏;宋桂芹;朱晓波;张颖骞

    目的 探讨Toll样受体2(TLR2)和TLR4在小鼠沙眼衣原体生殖道感染中的作用.方法 用1×104包涵体形成单位的MoPn沙眼衣原体小鼠肺炎株经生殖道感染野生型(WT)小鼠(n=11)、TLR2基因缺陷(TLR2-/-)小鼠(n=14)和TLR4-/-小鼠(n=11),复制生殖道沙眼衣原体感染模型.在感染后第3、7、10、17、24、31、38、45天取阴道棉拭子,免疫荧光法检测衣原体包涵体数量,ELISA检测白细胞介素1α(IL-1α)、IL-6和巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平.感染后第70天,采用免疫荧光法分析血清抗体类型和效价;用MoPn沙眼衣原体感染无菌分离的腹腔巨噬细胞,培养24h,ELISA测定上清液中IL-1α、IL-6和MIP-2含量;体外用紫外线灭活的衣原体抗原刺激无菌分离的脾细胞,培养72 h,ELISA测定上清液中γ干扰素(IFN-γ)、IL-17、IL-4和IL-5水平.结果 与WT小鼠相比,TLR2-/-或TLR4-/-小鼠在各时间点的生殖道带菌量无差异、且带菌持续时间相同,感染后第38天,所有小鼠均清除了下生殖道感染的衣原体.TLR2-/-小鼠巨噬细胞产生的IL-1 α、IL-6和MIP-2水平均明显低于WT小鼠,而TLR4-/-小鼠巨噬细胞产生的3种炎症细胞因子水平均与WT小鼠无显著性差异;TLR2-/-小鼠棉拭子标本具有较低水平的炎症细胞因子.所有小鼠脾细胞均产生高水平的IFN-γ和IL-17、较低水平的IL-4和IL-5、血清IgG2a/IgG1比值均大于1,但各组间无显著性差异.结论 TLR2而不是TLR4介导了沙眼衣原体生殖道感染的早期免疫应答,但沙眼衣原体诱导的适应性免疫应答可能既不依赖于TLR4,也不依赖于TLR2.

  • 模拟失重对IL-2诱导的人NK细胞生物活性的影响

    作者:刘文利;朱霞;赵莉;杨喜玲;曹菲;黄勇;穆沛红

    目的 明确模拟失重对白细胞介素2(IL-2)诱导的人自然杀伤(NK)细胞活性的影响.方法 回转细胞模拟失重条件培养人NK细胞,CCK-8法检测NK细胞增殖活性、异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、ELISA检测γ干扰素(IFN-γ)产生水平,反转录PCR检测NK细胞IL-12β1和IL-12β2受体mRNA水平.结果 与正常重力组相比,模拟失重培养24h和48 h后,IL-2诱导的NK细胞增殖水平分别下降13.6%和31%,凋亡率分别增加8%和19%,IFN-γ分泌水平分别降低25.2%和47.8%,杀伤活性分别下降7%和18%,IL-12刺激IL-2预处理NK细胞产生IFN-γ的水平分别降低21.8%和58.8%,同时,NK细胞IL-12β1和IL-12β2受体mRNA水平显著降低.结论 模拟失重抑制IL-2诱导的NK细胞增殖、IFN-γ产生和杀伤活性,并进一步通过下调IL-12受体mRNA表达抑制IL-12诱导的IFN-γ产生.

  • 新型免疫佐剂环二鸟苷酸的制备与纯化

    作者:丛晓燕;朱小玲;孙文博;于江;郭立辉;杜以军;王金宝

    目的 制备新型免疫佐剂环二鸟苷酸(c-di-GMP)并进行纯化.方法 利用前期重组构建并在大肠杆菌中成功表达的霍乱弧菌VCA0956蛋白(含有GGDEF结构域)作为合成酶,在反应体系中采用酶促反应将2分子鸟苷酸GTP催化缩合成一分子c-di-GMP.利用反相液相色谱仪分离纯化粗产物中的c-di-GMP,柱温25℃,流动相为乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(体积比为5:95逐渐变为30:70),流速1mL/min.结果 c-di-GMP从反应粗产物中被有效的分离纯化,同时,经质谱分析仪分析鉴定,获得高纯度的c-di-GMP.结论 成功从酶促反应体系中分离并纯化了c-di-GMP.

  • 类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞中膜联蛋白A2磷酸化修饰增强基质金属蛋白酶9的活性

    作者:赵薇;穆楠;舒震;张昭;张伟

    目的 研究膜联蛋白A2(ANXA2)磷酸化修饰对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9水平及活性的影响.方法 原代培养RAFLS,构建包装ANXA2干涉慢病毒,制备ANXA2显著下调的FLS(siANXA2/FLS)及同型对照作为细胞模型,采用2型胶原蛋白刺激法间接磷酸化RAFLS中的ANXA2.实时定量PCR(qRT-PCR)分析ANXA2磷酸化对RAFLS细胞中MMP-2和MMP-9表达的影响,明胶酶谱实验观察ANXA2活化对RAFLS中MMP-2和MMP-9活性的影响.结果 qRT-PCR结果提示ANXA2磷酸化修饰对RAFLS中MMP-2和MMPO的水平无显著影响,明胶酶谱实验显示ANXA2磷酸化修饰能够增强MMP-9的活性.结论 通过胶原蛋白刺激法间接促进RAFLS中ANXA2的磷酸化修饰,显著增强MMP-9的活性.

  • Wnt7b/β-catenin信号通路分子在肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化过程中的变化

    作者:马金帅;刘秀香;杨建英;万彬;李淑兰;刘俊燕

    目的 探讨Wnt7b邝联蛋白(β-catenin)信号通路分子在胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(fAEC2)分化过程中的变化.方法 取孕19 d胎鼠肺组织,分离、纯化得到fAEC2.培养细胞48、72、96 h,倒置显微镜观察fAEC2形态变化,免疫荧光染色观察β-联蛋白(β-catenin)的表达,实时定量PCR检测细胞中Wnt7b、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、表面蛋白C(SP-C)和水通道蛋白5(AQP5)的mRNA变化,Western blot法检测cyclin D1、细胞核β-catenin、SP-C、AQP5蛋白的表达.结果 fAEC2培养48 h,β-catenin在细胞膜表达;培养72 h,β-catenin在细胞膜的表达较前减弱,在细胞质、细胞核中表达增强;培养96 h,全细胞β-catenin表达下调.Wnt7b、cyclin D1 mRNA的表达在72 h时显著增高,96 h时下降明显;SP-C mRNA的水平随培养时间的延长逐渐下降,AQP5 mRNA的水平逐渐升高.Cyclin D1、细胞核β-catenin蛋白在72 h时表达上调,96 h时表达下调;SP-C蛋白的表达量逐渐降低;AQP5蛋白的水平逐渐升高.结论 Wnt7b/β-catenin信号通路可能在fAEC2转分化中起重要作用.

  • 应用人工转录因子技术抑制乙型肝炎病毒复制

    作者:李中堂;罗伟;付愚;蒋清虎;刘济铭;吴忠均

    目的 设计与构建特异性结合乙型肝炎病毒增强子1(HBV Enh1)的锌指蛋白人工转录因子(ZFP-ATF),检测在HepG2.2.15细胞内的表达、对细胞生长影响及观察其抑制HBV DNA复制与表达的作用.方法 构建含结合结构域ZFP与抑制性效应结构域Krüppel相关盒(KRAB)的人工转录因子(ATF),进行相关修饰、优化后,将人工合成ATF核酸序列插入真核表达质粒载体pcDNA3.1(+),测序鉴定其正确性,X-tremeGENEHP转染HepG2.2.15细胞,共聚焦显微镜下观察ATF蛋白表达情况,CCK-8法检测ATF对细胞生长的影响,ATF转染24、48、72 h后,采用实时定量PCR、ELISA、Western blot法检测对HBV DNA复制与表达的抑制作用.结果 成功构建pcDNA3.1-ATF(nls-ZFP-KRAB-FLAG)真核表达载体,ATF在HepG2.2.15细胞中能正常表达,且对细胞生长无明显的影响,ATF具有抑制HBV DNA复制与表达的作用,在转染72 h后抑制作用达高,抑制率达68.0%.结论 构建的ATF在HepG2.2.15细胞中能够正常表达且无毒性作用,可特异性结合HBV Enh1靶序列并具有抑制HBV DNA复制与表达的作用.

  • 蛛网膜下腔出血引起模型大鼠大脑感觉皮层S1区胶质细胞活化

    作者:姜珊;修彬华;邢国祥;刘璟;郑刚;邹志浩;闫志强

    目的 研究蛛网膜下腔出血(SAH)对大鼠大脑感觉皮层S1区胶质细胞的影响.方法 利用单丝尼龙线穿刺大脑中动脉(MCA)法制备大鼠SAH模型,通过神经功能评分判断大鼠神经系统损伤程度,采用实时定量PCR检测大鼠大脑感觉皮层S1区肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA水平,利用EHSA检测大鼠皮层S1区TNF-α和IL-1β蛋白水平,采用免疫组织化学染色检测大鼠皮层S1区小胶质细胞/巨噬细胞标志物离子钙结合接头蛋白分子1(Iba-1)以及星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 SAH导致大鼠神经功能严重受损,SAH手术同侧的大脑皮层S1区TNF-α和IL-1 β水平增加,对侧有轻度增加,免疫组织化学染色可以观察到SAH手术可以导致大脑皮层S1区Iba-1和GFAP表达明显增强.结论 MCA穿刺法制备的SAH模型可以引起大鼠大脑皮层S1区胶质细胞活化和TNF-α、IL-1β水平增加.

  • 低剂量γ射线照射提高外周血单个核细胞IL-12分泌并降低IL-10的分泌

    作者:詹文华;刘长虎;闫钢;黄晓峰

    目的 探讨低剂量γ射线照射对外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10及IL-12的影响.方法 分离人PBMC,经17 Gy/minγ射线照射后进行体外培养.采用吖啶橙染色鉴定细胞存活情况,ELISA检测培养0、20、40、60、80 h的PBMC上清中IL-10和IL-12的水平.结果 与未照射PBMC相比,低剂量γ射线照射的PBMC在体外培养24h后,吖啶橙染色显示照射后的PBMC存活细胞略有减少;ELISA检测结果表明培养上清中IL-10含量显著降低,而IL-12含量明显增加.结论 低剂量γ射线照射PBMC可引起IL-12水平升高、IL-10水平降低.

  • 不同淋巴组织淋巴细胞培养上清诱导Caco2细胞向微皱褶样细胞转分化

    作者:王丽虹;罗霞;郑冬生;周联;朱远洪;吴秀

    目的 复制微皱褶(M)样细胞体外诱导模型,从功能和基因水平两方面鉴定M样细胞,同时观察不同淋巴组织活化的淋巴细胞的培养上清对Caco2细胞向M样细胞转化的影响.方法 用3μg/mL伴刀豆球蛋白A(Con A)刺激Peyer结(PP)、肠系膜淋巴结(MLN)和脾脏(Sp)的淋巴细胞3d,收集细胞培养上清后,将其并与Caco2细胞共培养.在TranswellTM上室加入微球,收集下室的培养液,流式细胞术分析荧光微球数量;反转录PCR检测M样细胞相关基因CC趋化因子配体20 (CCL20)、密封蛋白基因4(CLDN4)、肿瘤坏死因子受体超家族成员9(TNFRSF9)、Ets家族转录因子Spi-B mRNA的水平,观察不同淋巴组织淋巴细胞培养上清对Caco2细胞向M样细胞转化的诱导率的影响.结果 与空白对照组相比,PP、MLN和Sp淋巴细胞培养上清诱导后,诱导后的Caco2细胞转运的微球数量和CCL20、CLDN4、TNFRSF9、Spi-B的mRNA水平均显著增加;与未刺激组相比,Con A刺激后,诱导后的Caco2细胞转运的微球数量和CCL20、CLDN4、TNFRSF9、Spi-B的mRNA水平均显著增加.结论 Con A刺激和未刺激的淋巴细胞培养上清,均可以诱导Caco2细胞向M样细胞转分化.

  • 资木瓜总苷抑制体外培养的原代小鼠骨髓源性肥大细胞脱颗粒

    作者:贾云莉;李世刚;柳蔚;喻玲玲;曾小威

    目的 研究资木瓜总苷对小鼠骨髓来源的肥大细胞(BMMC)脱颗粒影响.方法 从C57 BL/6小鼠股骨获得骨髓细胞,用含100 mL/L胎牛血清、20 ng/mL IL-3和40 ng/mL干细胞因子(SCF)的RPMI1640培养基,培养4周;流式细胞术检测CD117、FcεRIα双阳性细胞的比例,甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度.资木瓜总苷与诱导成功的BMMC共培养,CCK-8法检测资木瓜总苷对BMMC的毒性作用,荧光分光光度法定量检测β-己糖胺酶释放量,并计算其释放率,ELISA检测类胰蛋白酶释放量.结果 原代培养诱导4周后,CD117和FcεRIα双阳性细胞比例大于95%,且核被染蓝色,胞质为紫红色,呈现肥大细胞特性.(0.01、0.03、0.10) mg/mL的资木瓜总苷作用12 h,对BMMC无毒性作用.与空白对照组相比,资木瓜总苷与交联牛血清白蛋白的二硝基苯半抗原(DNP-BSA)、A23187刺激的BMMC作用后,细胞的β-己糖胺酶释放率和类胰蛋白酶的释放量均显著降低.结论 资木瓜总苷对不同抗原刺激原代培养的小鼠BMMC脱颗粒具有显著抑制作用,且存在量效关系.

  • 干扰CD326可抑制VCaP细胞雄激素受体表达并降低细胞的增殖、侵袭及迁移能力

    作者:杨帆;周幸春;李晓晴;赵永军;杜双宽;袁建林;徐永刚

    目的 干涉前列腺癌细胞系VCaP细胞的CD326的表达,观察其对雄激素受体(AR)、前列腺特异性抗原(PSA)的表达以及前列腺癌细胞表型的影响,明确CD326与雄激素抵抗性前列腺癌发生之间的相关性.方法 构建CD326短发夹RNA(CD326shRNA)稳定感染的VCaP细胞株.Western blot法检测稳定感染细胞株中AR及PSA的水平变化,ELISA检测VCaP细胞培养上清中的PSA分泌水平.MTT法检测细胞增殖、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和AlexaFluor(R) 488标记的膜联素V/碘化丙锭(annexin V-Alexa Fluor(R) 488/PI)双染法检测细胞凋亡、细胞划痕实验检测细胞迁移、TranswellTM实验检测细胞侵袭能力.结果 下调VCaP前列腺癌细胞株中CD326表达后,VCaP细胞中AR及PSA的表达水平显著降低,细胞上清中PSA的分泌水平也显著降低,同时伴随细胞增殖、抗凋亡、侵袭以及迁移能力的显著降低.结论 下调VCaP细胞CD326水平可降低AR的表达,使前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力降低.

  • CD326在前列腺癌组织高表达且与患者预后负相关

    作者:杨帆;周幸春;党珊;杜双宽;任伟;袁建林;王福利;徐永刚

    目的 在正常前列腺、前列腺增生及前列腺癌组织中检测CD326的表达差异及与前列腺癌预后的相关性.方法 采用免疫组织化学技术检测组织芯片(含6例正常前列腺组织、24例前列腺增生组织以及210例前列腺癌组织)的CD326的表达,Western blot法检测4例前列腺癌及癌旁组织中CD326的表达.统计学分析组织芯片中CD326的表达水平与前列腺癌患者的总生存期及无转移生存期的相关性.结果 免疫组织化学染色结果显示:与正常前列腺及前列腺两性增生的组织相比,前列腺癌组织中CD326的表达显著增强,Western blot结果进一步证实CD326在前列腺癌组织中的水平显著高于癌旁组织中的水平.CD326在前列腺癌组织中的表达与前列腺癌的临床分期、转移及血清前列腺特异性抗原(PSA)水平呈显著正相关,CD326高表达的前列腺癌患者其总生存期和无转移生存期显著低于CD326低表达的患者.结论 CD326在前列腺癌组织中高表达且与前列腺癌患者的血清PSA水平及预后负相关.

  • 外周血标本处理方法和时间影响可溶型CD100的水平

    作者:刘志佳;张春梅;李琦;肖漓;孔祥瑞;许晓东;石炳毅

    目的 观察血清和血浆标本不同处理方法和时间对外周血可溶型CD100(sCD100)水平的影响.方法 用未加促凝剂血清采血管、含硅化涂层促凝管以及肝素抗凝管、乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管和枸橼酸钠抗凝管,分别在凝血1、4、8h,分别收集2种血清收集管内血清标本.采用ELISA检测标本中sCD100水平,比较不同标本和时间处理对sCD100检测水平的影响.结果 不同抗凝剂处理后的血浆标本中,sCD100检测结果无明显差异.血清标本sCD100水平明显高于血浆标本.使用促凝剂血清sCD100水平高于无促凝剂血清sCD100水平.在室温条件下,血清标本随着凝血时间的延长,sCD100水平逐渐升高.结论 血清中sCD100水平显著高于血浆,处理时间延长可引起血清sCD100水平进一步增高.在定量检测白细胞和血小板膜分子的可溶型标志物时,应注意标本收集过程中的标准化.

  • 哮喘患者急性加重期滤泡辅助型T细胞的分化水平及临床意义

    作者:耿爽;高山;胡红玲;胡轶;喻隼锋;赵苏

    目的 观察滤泡辅助型T细胞(Tfh细胞)在支气管哮喘患者急性发作期和治疗后的分化水平,探讨Tfh细胞是否在哮喘中存在分化异常及其临床意义.方法 采用流式细胞术检测健康志愿者、哮喘患者急性发作期及治疗后外周血单个核细胞中CD4+ CXCR5+T细胞、CD4+ ICOS+T细胞、CD4+ CXCR5+ ICOS+T细胞的比例;反转录PCR法检测CD4+T细胞中Bcl-6mRNA的水平;ELISA检测血浆白细胞介素21(IL-21)的水平;采用直线回归统计学分析IL-21与患者第一秒用力呼气容积/用力肺活量百分比(FEV1/FVC)及第一秒用力呼气容积/预计值百分比(FEV1/Pre)之间的相关性.结果 哮喘患者CD4+CXCR5+细胞、CD4+ CXCR5+ ICOS+T细胞比例、Bcl-6 mRNA表达水平、IL-21水平均显著高于正常对照组;治疗后哮喘患者CD4+ CXCR5+细胞、CD4+ ICOS+细胞、CD4+ CXCR5+ ICOS+T细胞表达比例、Bcl-6 mRNA表达水平、IL-21水平均显著低于急性发作时;哮喘患者IL-21表达水平与患者FEV1/FVC、FEV1/Pre存在负相关.结论 Tfh细胞在哮喘急性期存在分化增强,治疗后Tfh细胞分化减弱,提示Tfh细胞可能参与哮喘的炎症反应,其水平可能反映哮喘患者气道受限程度.

  • 巨细胞病毒感染下调肾移植受者NK细胞CD226和CD16的表达

    作者:刘志佳;于涛;孙曙;王爽;肖漓;李州利;蔡明;石炳毅

    目的 探讨肾移植术后巨细胞病毒(CMV)感染对自然杀伤(NK)细胞活化性受体CD226以及CD16表达的影响.方法 采用流式细胞术分别检测肾移植术后CMV感染期和稳定期、肾移植术后稳定期受者和健康对照者NK细胞CD226和CD16的表达.结果 肾移植受者发生CMV感染者与CMV感染恢复期、稳定受者组和健康对照组NK细胞占淋巴细胞比例均无明显差异.但CMV感染组外周血CD226+ NK细胞占NK细胞比例为(75.06±13.65)%,显著低于健康对照的(88.28±11.98)%和肾功能稳定组的(87.53 ±6.43)%;感染恢复期患者CD226+ NK细胞比例恢复至(88.37±8.91)%,与稳定受者组和健康对照组均无显著差异.CMV感染组的NK细胞CD226平均荧光强度(MFI)与稳定受者组和健康对照组均无显著差别,而CMV感染恢复期患者NK细胞CD226的MFI明显高于上述3组.CMV感染组CD16+ NK细胞占NK细胞比例下降为(75.06±13.65)%,显著低于稳定受者组的(88.28±11.98)%和健康对照的(90.35±10.07)%,而恢复期CD16+ NK细胞比例回升到(86.30±14.01)%,与稳定受者组和健康对照组无显著性差异.NK细胞CD16的MFI在感染期和恢复期与稳定受者组和对照组均未见显著性差异.结论 CMV感染可引起NK细胞CD226和CD16表达下调,而在感染恢复期CD226和CD16表达恢复,提示CD226和CD16参与肾移植受者NK细胞抗CMV感染的过程.

  • 慢性乙型肝炎患者外周血CD14+HLA-DR-/low髓源性抑制细胞的频数与炎症反应负相关

    作者:张浩;管世鹤;杨凯;叶珺;晏开力;潘颖;吴园园;王爱华;孙蓓蓓

    目的 分析CD14+ HLA-DR-/low髓源性抑制细胞(MDSC)在慢性乙型肝炎患者外周血中的频数以及与患者生化特征、病毒载量和肝脏病理的关系.方法 采用流式细胞术检测96例乙型肝炎患者和20名健康体检者外周血中CD14+ HLA-DR-/lowMDSC的频数,同时对96例乙型肝炎患者血清和肝穿组织分别进行生化特征、病毒载量和病理分析.各组数据之间的相关性采用Spearman相关性分析.结果 96例慢性乙型肝炎患者外周血CD14+ HLA-DR-/low MDSC的频数为(6.03±0.09)%,明显高于20名健康体检者的频数(1.87±0.05)%,且乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性患者外周血CD14+ HLA-DR-/lowMDSC的频数显著高于HBeAg阴性患者.外周血CD14+ HLA-DR-/low MDSC的频数与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量呈负相关,而与病毒载量无相关性.慢性乙型肝炎患者外周血CD14+ HLA-DR-/low MDSC的频数随着肝脏炎症分级增高而逐步降低,而与肝脏纤维化分期并无明显关系.结论 CD14+ HLA-DR-/low MDSC频数与慢性乙型肝炎的炎症反应负相关.

  • 急性髓细胞白血病患者血清UL16结合蛋白3(ULBP3)水平升高并抑制NK细胞的杀伤活性

    作者:蒋茜;牟笑;毛朝明;许铖铖;郑婷婷;孙鹏

    目的 检测急性髓细胞白血病(AML)患者血清可溶性UL16结合蛋白3(sULBP3)的水平,探讨其对AML患者免疫细胞功能的调节作用.方法 通过时间分辨免疫荧光技术检测健康对照组(n=20)、AML初发组患者(n=30)及AML完全缓解组患者(n=30)血清中sULBP3的水平;通过细胞杀伤实验(乳酸脱氢酶释放法)分析sULBP3对自然杀伤(NK)细胞杀伤活性的影响;通过异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/7-氨基放线菌素D(annexin V-PE/7-AAD)双染色结合流式细胞术分析NK细胞凋亡率.结果 与对照组相比,AML初发组患者血清中sULBP3水平明显增高;AML完全缓解组患者血清中sULBP3水平也增高,但较初发组患者则明显降低.AML初发组患者血清中sULBP3水平与NK细胞比例呈负相关,与γδ T细胞比例不相关.体外实验显示,添加外源性ULBP3蛋白增加NK细胞的凋亡率,抑制NK细胞对靶细胞的杀伤率.结论 AML患者血中sULBP3水平增加与NK细胞比例有关,sULBP3通过增加细胞凋亡抑制NK细胞的杀伤活性.

  • 川崎病患者CD4+T细胞中血清和糖皮质激素诱导的激酶1(SGK1)表达上调且与RORC及IL-17A正相关

    作者:吴守振;张晓燕;周南

    目的 检测血清和糖皮质激素诱导的激酶1(SGK1)在川崎病(KD)患者CD4+T细胞中的表达,探讨SGK1与维甲酸相关孤儿核受体C(RORC)及白细胞介素17A的相关性.方法 收集KD患者30例,正常同年龄对照30例,同年龄感染性疾病(ID)患者25例.利用流式细胞术检测Th17细胞占CD4+T细胞的比例;实时定量PCR检测CD4+T细胞中SGK1和RORCmRNA的表达;ELISA检测血清IL-17A和IL-6水平.结果 与健康儿童和ID患者相比,KD患者中Th17细胞比例明显升高.与ID患者和健康儿童相比,KD患者血清中IL-17A和IL-6水平明显升高,SGK1和RORC mRNA水平升高.SGK1在KD冠状动脉损害(CAL)组的表达高于冠状动脉正常(CAN)组.静脉内注射免疫球蛋白(IⅥG)治疗后,SGK1的表达明显下降;其中,CAL组下降高于CAN组.KD患者中,SGK1 mRNA的表达与RORC及血清IL-17A水平呈正相关,而与血清IL-6水平不相关.结论 KD患者CD4+T细胞中SGK1 mRNA表达升高,与RORC和IL-17A正相关.

  • 果蝇再生蛋白(rgn)多克隆抗体的制备及鉴定

    作者:李哲;柳宗琳;金丽华

    目的 制备具有高度特异性的抗果蝇再生蛋白(rgn)的多克隆抗体.方法 利用PCR技术从果蝇W1118 cDNA中获得rgn基因片段,构建重组质粒;将其转入JM109(DE3)菌株中诱导rgn融合蛋白表达,再利用Ni-NTA superflow层析柱法将其纯化;经Western blot法检测后,利用制备的抗原免疫SD大鼠,从血清中获得高纯度的抗rgn多克隆抗体,利用Western blot法和免疫组织化学染色法对抗体特异性进行鉴定.结果 构建的pRSETA-rgn表达载体成功表达6×His-rgn蛋白,融合蛋白在大肠杆菌中大量表达并纯化后,作为抗原免疫SD大鼠,获得了抗rgn的多克隆抗体;免疫组织化学染色技术证实rgn定位在果蝇三龄幼虫血细胞的细胞质.结论 成功获得了特异性较高的大鼠抗rgn多克隆抗体.

  • 淀粉样前体蛋白β位点单链抗体抑制β淀粉样肽的分泌

    作者:黄巍;周丽荣;李小鸥;孙红霞;周婷;黄晓刚;刘桥

    目的 观察淀粉样前体蛋白(APP) β位点单链抗体(scFv)对APP的α和β代谢的影响,为其作为APPβ分泌酶特异抑制剂奠定基础.方法 以APP β位点scFv 2H10基因序列为模板,通过PCR引入Igκ轻链信号序列和myc标签,与真核表达载体pcDNA3.1hyg(+)相连,转染过表达人瑞典突变型淀粉样前体蛋白695(APP695)的CHO细胞株(APP695 sw/CHO),经潮霉素B筛选出稳定转染细胞株,用夹心ELISA检测稳定转染细胞株培养上清中Aβ40和分泌型APPα(sAPPα)的含量,并分别比较两者的变化.结果 经PCR、酶切和测序鉴定证明,获得引入Igκ分泌信号和myc标签的APP β位点scFv基因片段,且与真核表达载体正确相连.转染APP695 sw/CHO细胞后,经潮霉素B筛选得到稳定转染株;Western blot法可检测到目的蛋白表达,ELISA结果显示,与对照相比,稳定转染细胞培养上清Aβ40分泌量约下降30.4%、sAPPα水平上升23.1%.结论 APP β位点scFv在抑制Aβ分泌的同时还可能有利于APP的α代谢,可作为β分泌酶高特异性抑制剂.

  • 白细胞介素17在移植物抗宿主病中的作用

    作者:黄文发;谢玮鑫;涂三芳;李玉华

    移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植后主要的并发症,是造成移植后非复发死亡的主要原因,限制了异基因造血干细胞移植广泛应用.白细胞介素17(IL-17)及其受体在感染、自身免疫性疾病以及肿瘤的发生发展中起着重要作用,但IL-17及其受体在GVHD的进程中的作用却仍无定论.IL-17在小鼠和移植患者的血清和GVHD损伤组织中均表达增多,募集中性粒细胞和T细胞等炎症细胞,介导炎症反应,从而损伤靶组织和器官.本文综述了GVHD、IL-17及其受体的一般特性及在GVHD中的作用.

  • Tim3/HMGB1在肿瘤免疫逃逸中的机制研究进展

    作者:辛燕;张峰波;马秀敏;朱玥洁;丁剑冰

    T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 (Tim-3)是一种1型膜表面蛋白分子,主要在Th1细胞表达,与天然型配体半乳糖凝集素9 (galectin-9)反应参与适应性负性免疫调节.此外,Tim-3也在单核-巨噬细胞、自然杀伤细胞以及树突状细胞(DC)表达,参与免疫调节.Tim-3在肿瘤浸润DC高表达,并可与配体高迁移率族蛋白1(HMGB1)结合,通过阻断Toll样受体3(TLR3)、TLR7、TLP9及细胞质中DNA和RNA相关的免疫反应,来抑制核酸介导的固有免疫反应,导致肿瘤免疫逃逸,减弱DNA预防治疗及化疗的效果.本文就Tim-3在肿瘤浸润DC高表达以及Tim-3与配体HMGB1结合参与肿瘤免疫逃逸方面进行综述.

  • 营养信号通路调节细胞自噬的研究进展

    作者:沈晓燕;王建六

    营养缺乏的主要细胞反应之一是自噬上调.营养相关信号如细胞内氨基酸、ATP和氧含量等与细胞内合成和分解代谢过程的平衡密切相关.关键营养敏感激酶雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)和单磷酸腺苷依赖蛋白激酶(AMPK)是营养相关自噬的主要信号通路.细胞内的营养情况通过失调51样激酶(ULK)和磷脂酰肌醇3激酶3型催化亚基(VPS34)激酶复合物的协调调节自噬.mTORC1、AMPK、ULK和VPS34之间的广泛交叉和反馈环在自噬诱导和保持细胞稳态中具有重要作用.本文主要描述细胞内营养状态(氨基酸、糖和氧)发生改变时自噬调节的研究进展.

  • IL-12用于肿瘤基因治疗的研究进展

    作者:赵桐;杨安钢;温伟红

    白细胞介素12(IL-12)是细胞免疫应答过程中的关键调节因子,具有重要的生物活性.IL-12能够激活自然杀伤细胞、巨噬细胞和T细胞,促进其分泌大量的IFN-γ,还能促进树突状细胞成熟以及抑制肿瘤血管的生成.因此,IL-12被认为是有效的抗肿瘤细胞因子之一,利用IL-12进行抗肿瘤治疗逐步成为研究的热点.但是,由于直接注射IL-12蛋白的毒副作用很强,所以常利用携带IL-12编码基因的载体或病毒进行肿瘤的基因治疗或联合治疗.多种基于IL-12的抗肿瘤基因治疗策略在实验中取得了良好的疗效,部分已经进入2期临床试验.本文综述了IL-12的生物学功能及基于IL-12的抗肿瘤基因治疗的研究进展.

  • 细胞自噬在自身免疫性疾病中的调控作用研究进展

    作者:王丹;韩晓蕾;郝晟瑜;李秋婷;邱春红

    细胞自噬是细胞器和细胞内蛋白被封闭然后递送至溶酶体降解或再循环的过程,在炎症和免疫的多个方面都起重要的调控作用.自噬还可以调控吞噬作用,调节免疫自稳.自噬功能的缺陷不仅可能会增加对传染病的易感性,还可能增加慢性炎症性疾病和自身免疫性疾病的易感性.本文主要就自噬在Crohn病、系统性红斑狼疮、多发性硬化症和类风湿性关节炎等自身免疫性疾病中发挥的重要作用进行总结.

  • 髓系来源抑制细胞的功能及其与自身免疫性疾病关系的研究进展

    作者:赵聪;郭俊;李宏增

    髓系来源抑制细胞(MDSC)是一群具有异质性的髓系细胞,在肿瘤、感染、创伤和自身免疫性疾病等病理状态下,会异常扩增并发挥免疫抑制作用.MDSC主要通过上调诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶(Arg)的表达,增加一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)和过氧化硝酸盐(ONOO-)浓度,诱导调节性T细胞(Treg)分化等途径抑制获得性免疫;通过削弱自然杀伤(NK)细胞功能等途径抑制固有免疫.近年来MDSC在自身免疫性疾病中的作用日渐受到关注,参与了多发性硬化等多种自身免疫性疾病的免疫调控.现就MDSC及其与自身免疫性疾病关系的研究进展进行综述.

  • 外泌体在免疫抑制性肿瘤微环境形成中的作用

    作者:王运刚;王胜军

    外泌体(exosome)是细胞内多胞体与质膜融合后分泌到细胞外环境中的一种膜性囊泡.Exosome来源于晚期内体,是活细胞分泌而来,几乎所有的细胞都能分泌,广泛存在于各种体液中.Exosome参与细胞重要生理功能的调控,在免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应及肿瘤发生发展等过程中均有作用.Exosome可以作为多种疾病的早期诊断标志物,也能作为靶向药物的载体对疾病进行治疗.Exosome来源多样、成分复杂,既可以活化免疫系统,也可以促进免疫耐受.Exosome作为囊泡的一种,exosome在调节性T细胞、髓源性抑制细胞和肿瘤相关巨噬细胞等细胞的扩增方面具有重要作用,在免疫抑制性肿瘤微环境形成中发挥重要作用.现就exosome的生物学特性、免疫调节作用及其在免疫抑制性肿瘤微环境形成过程中的作用进行综述.

细胞与分子免疫学分期目录
期数
2018 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2015 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2008 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2006 01 02 03 04 05 06
2005 01 02 03 04 05 06 z1
2004 01 02 03 04 05 06
2003 01 02 03 04 05 06
2002 01 02 03 04 05 06
2001 01 02 03 04 05 06
2000 01 02 03 04 05 06
1999 01 02
1995 01 02 03
1994 01 02
1993 01 02 03 04
1992 01 02 03 04
1991 01 02 03 04
1990 01 02
1989 01 02 03 04

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