细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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氯沙坦抑制大鼠主动脉血管钙化的机制
目的 观察血管紧张素Ⅱ受体1 (AT1R)阻断剂氯沙坦对大鼠主动脉血管钙化的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 SD大鼠分对照组、模型组和治疗组,给予华法林和维生素K1皮下注射连续2周建立大鼠主动脉血管钙化模型,治疗组于第1周末给予氯沙坦(10 mg/kg)皮下注射,连续1周.HE染色观察血管壁形态学变化、茜素红染色观察钙盐沉积情况;反转录PCR检测骨形成蛋白2(BMP2)和Runt相关转录因子2(RUNX2) mRNA水平,Western blot法检测BMP2、RUNX2蛋白水平,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测平滑肌细胞(SMC)凋亡,免疫荧光组织化学染色观察AT1R的定位.结果 华法林和维生素K1可诱导主动脉血管钙化;与模型组相比,氯沙坦治疗组BMP2、RUNX2 mRNA和蛋白质表达显著下调,血管壁SMC凋亡和AT1R表达显著性减少.结论 AT1R阻断剂氯沙坦抑制SMC凋亡、降低AT1R表达,下调RUNX2、BMP2表达抑制血管钙化.
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肠道菌群失调增加小鼠肠上皮内T淋巴细胞活化和促炎细胞因子分泌
目的 探讨肠道菌群失调对小鼠小肠上皮间淋巴细胞(iIEL)功能的影响.方法 口服给予广谱抗生素头孢曲松钠造成菌群失调小鼠模型,用乙二胺四乙酸(EDTA)和二硫苏糖醇(DTT)消化上皮细胞,流式细胞术鉴定iIEL表型和T细胞亚群的比例,ELISA检测肠腔冲洗液中白细胞介素2(IL-2)、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)水平,采用选择性培养基以及PCR检测肠道细菌的类别.结果 与正常组相比,给予头孢曲松钠后小鼠肠道内细菌明显减少,真菌和酵母菌增多;iIEL中T淋巴细胞亚群的比例发生变化,其中γδT细胞比例明显升高;CD3+T细胞、CD8+T细胞以及T细胞受体(TCR)γδ+T细胞活化增加,肠腔内IL-2、IL-6、IFN-γ水平显著升高.结论 肠道菌群失调导致定植抗力下降,真菌增多,微生物屏障功能被破坏,引起iIEL中T细胞活化增加,促炎细胞因子分泌增加,可能是菌群紊乱引起炎症性肠病的原因之一.
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嵌合γδ TCR结构域的αβ TCR分子的同源建模及真核表达
目的 设计并构建嵌合γδ TCR类免疫球蛋白(Ig)结构域的αβ TCR分子,并在Jurkat T细胞中观察其表达.方法 通过生物信息学分析确定TCR △Ig分子的融合位点;应用同源建模模拟嵌合TCR α和TCR β蛋白的三维结构,并应用组合扩展方法(CE)对TCR △Ig分子与野生型TCR分子的蛋白骨架以及抗原识别活性部位进行空间结构比对和分析.采用重叠PCR法分别在TCR α △Ig和TCR β △Ig的末端融合增强型青色荧光蛋白(ECFP)和增强型黄色荧光蛋白(EYFP),并分别克隆入质粒pIRES2-EGFP内部核糖体进入位点(IRES)的上下游.后将重组表达质粒pIRES-TCR β △Ig-EYFP/TCR α△Ig-ECFP转染Jurkat T细胞,共聚焦显微镜扫描分析该嵌合TCR分子的表达.结果 TCR α △Ig和TCR β △Ig的同源建模及三维结构比对结果显示,相比于野生型TCR,该嵌合TCR的可变区(V)结构无改变并且抗原识别活性中心结构保持稳定.重组表达质粒经PCR鉴定及测序分析证明载体构建成功;并且共聚焦显微镜扫描结果显示嵌合TCR分子能定位于T细胞膜表面并正常表达.结论 该嵌合TCR分子设计合理,能在Jurkat T细胞表面正常表达.
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沉默Bmi-1表达可促进MCF-7乳腺癌细胞凋亡并抑制其侵袭
目的 探讨B细胞特异的Moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因沉默对细胞增殖与侵袭的影响及可能的分子机制.方法 收集经病理确诊的乳腺癌及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测Bmi-1的表达差异;采用Lipofectamine(R) RNAiMAX转染试剂将靶向Bmi-1基因的小干扰RNA (siRNA)转染MCF-7细胞,流式细胞术检测Bmi-1沉默后细胞周期和凋亡的改变,Western blot法检测凋亡相关基因P21、Bax、Bcl-2的表达变化.TranswellTM侵袭实验检测MCF-7细胞侵袭力变化,Western blot法检测上皮钙黏素(E-cadherin),神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达水平.结果 乳腺癌组织Bmi-1 mRNA表达量高于癌旁组织,沉默Bmi-1基因可使MCF-7细胞周期阻滞于G1期,凋亡细胞增多;与空白对照组、阴性对照siRNA转染组相比,Bmi-1-siRNA组中P21与Bax的表达水平明显上调,Bcl-2明显下调.沉默Bmi-1基因表达可抑制MCF-7细胞的侵袭力,与对照组相比,下调Bmi-1可增强E-cadherin的表达,减少N-cadherin、vimentin的表达.结论 下调Bmi-1的表达可引起MCF-7细胞G1期阻滞,促进细胞凋亡,与P21表达上调,Bax/Bcl-2比率升高有关;下调Bmi-1水平可抑制MCF-7细胞侵袭性,与抑制肿瘤细胞上皮间质转化有关.
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敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)降低氧糖剥夺再复氧神经元的存活
目的 观察敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)对氧糖剥夺再复氧(OGD/R)神经元存活的影响.方法 小胶质细胞采用PRDX6-siRNA慢病毒感染,同时培养基中加入非Ca2+依赖性磷脂酶A2(iPLA2)活性抑制剂MJ33,24 h后与原代神经元共培养,并进行OGD/R处理.实验分为正常组、OGD/R组、阴性对照siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA联合MJ33处理的OGD/R组.Western blot法检测小胶质细胞PRDX6蛋白的表达,实时定量PCR检测小胶质细胞PRDX6 mRNA的表达.ELISA检测iPLA2活性;MTS、乳酸脱氢酶(LDH)法检测神经元的存活率;采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以反映神经元的氧化应激水平.结果 与OGD/R组比较,PRDX6-siRNA处理的神经元存活率降低,MDA增加、SOD降低、氧化应激损伤加重;与PRDX6-siRNA组比较,同时加入iPLA2活性抑制剂M J33组神经元存活率增加,MDA降低、SOD增加、氧化应激水平下降.结论 小胶质细胞PRDX6对神经元氧糖剥夺损伤有保护作用,而iPLA2活性对PRDX6的作用有影响.
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过表达miR-26b抑制MKN-45人胃癌细胞的增殖
目的 构建miR-26b过表达载体,观察其对MKN-45人胃癌细胞增殖的影响.方法 合成miR-26b DNA寡聚核苷酸单链,经退火形成双链;用限制性内切酶EcoR Ⅰ和HindⅢ对pcDNATM6.2-GW-miR真核表达载体进行双酶切(大片段),纯化后与之前退火形成的DNA双链连接,转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α,扩增后提取质粒,经DNA测序和BLAST比对,验证其是否构建成功;将成功构建的pcDNATM6.2-GW-miR-26b载体瞬时转染MKN-45人胃癌细胞,采用实时定量PCR检测miR-26b的表达水平,Western blot法检测细胞分裂周期蛋白6(CDC6)蛋白,MTT法检测细胞增殖的变化.结果 通过DNA测序BLAST比对结果显示成功构建了miR-26b的真核表达载体;瞬时转染MKN-45细胞后,实时定量PCR结果显示miR-26b的表达水平显著增加;Western blot结果表明过表达miR-26b明显抑制CDC6蛋白的表达,MTT法显示过表达miR-26b能显著抑制MKN-45细胞的增殖.结论 过表达miR-26b可抑制MKN-45人胃癌细胞的增殖.
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胰岛素和表皮生长因子刺激引起的蛋白激酶B磷酸化与PTEN突变的关系
目的 研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)突变对人鼻咽癌细胞系CNE-1中蛋白激酶B(Akt)的磷酸化的影响.方法 CNE-1细胞用含100 mL/L胎牛血清RPMI1640培养基培养,并分别转染野生型PTEN(wtPTEN)质粒、突变型PTEN C124S质粒和突变型PTEN G129E质粒.各组细胞加刺激前用无血清RPMI1640培养基饥饿过夜,用0.15 IU/mL胰岛素或0.3 μg/mL重组人表皮生长因子(rhEGF)刺激,Western blot法检测Akt的磷酸化水平.结果 胰岛素和rhEGF刺激均可导致CNE-1细胞Akt信号激活;wtPTEN可抑制胰岛素或rhEGF刺激引起的Akt信号激活;PTEN C124S突变体可激活胰岛素刺激引起的Akt信号,但不可激活rhEGF刺激引起的Akt信号;PTEN G129E突变体抑制胰岛素刺激引起的Akt信号激活.结论 wtPTEN可抑制胰岛素或rhEGF刺激引起的Akt信号激活,但PTEN C124S和G129E突变体不能一致性激活Akt信号表达.这表明PTEN基因突变可能与Akt信号表达无关.
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选择性激动黑皮质素4型受体(MC4R)通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号途径对抗大鼠脓毒症致急性肝损伤
目的 观察选择性激动黑皮质素4型受体(MC4R)对脓毒症致急性肝损伤大鼠的影响.方法 64只雄性SD大鼠随机分假手术组(假手术后用PBS处理)、盲肠结扎穿孔(CLP)组(采用CLP建立脓毒症模型)、Ro27-3225处理组(CLP后用Ro27-3225处理)和Ro27-3225假手术对照组(假手术后用Ro27-3225处理),每组16只(10只大鼠观察术后一般状态和72 h生存率,另外6只大鼠于术后24h采集血液及肝组织标本).各组分别于术后30 min腹腔注射PBS或Ro27-3225(180 μg/kg),术后24h测定大鼠心率(HR)及平均动脉压(MAP)、大鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平.动物处死后,HE染色观察肝组织病变,反转录PCR检测肝组织中Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)和caspase-3 mRNA水平,免疫组织化学染色检测肝细胞中核因子κB(NF-κB) p65的表达,并分析NF-κB p65核阳性率.结果 与假手术组相比,CLP组大鼠72 h生存率和MAP降低,血清中AST和ALT水平明显升高,肝索排列紊乱,肝细胞水肿,有明显炎性细胞浸润,肝组织中TLR4、HMGB1和caspase-3 mRNA水平明显升高,肝细胞中NF-κB p65核阳性率明显升高.与CLP组相比,Ro27-3225处理组大鼠72 h生存率和MAP明显升高,血清中AST和ALT水平明显降低,肝组织结构损伤明显减轻,肝组织中TLR4、HMGB1和caspase-3 mRNA水平降低,肝细胞中NF-κB p65核阳性率明显降低.结论 脓毒症能引起肝损伤,选择性激动MC4R可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号途径,减轻炎症反应,降低脓毒症引起的肝损伤.
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参芪扶正注射液促进环磷酰胺处理小鼠肠道相关淋巴组织B细胞数量的恢复
目的 考察参芪扶正注射液(SQFZ)对环磷酰胺(Cy)处理后小鼠肠道相关淋巴组织(GALT)B细胞数量恢复的影响.方法 将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、Cy组和SQFZ组.Cy组和SQFZ组小鼠均腹腔注射Cy(100mg/kg),对照组给予等量生理盐水;24h后,SQFZ组小鼠灌服SQFZ 1 mL/只,其余2组给予等量的生理盐水,每天灌胃1次连续10 d;每天记录小鼠体质量.给药第10天处死小鼠,测定胸腺指数和脾指数;流式细胞术检测肠系膜淋巴结(MLN)和Peyer集合淋巴结(PP)淋巴细胞中B细胞比例及股骨骨髓细胞周期.体外实验中,小鼠淋巴细胞经SQFZ处理后,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测B细胞表达CD86分子水平;羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记法检测B细胞增殖.结果 SQFZ减少Cy处理小鼠体质量的下降,促进胸腺指数、脾指数、MLN和PP中B细胞数量恢复,但未见明显改善骨髓抑制状态.体外实验结果表明SQFZ可以增加小鼠淋巴细胞活性,提高小鼠B细胞活化和增殖比例.结论 SQFZ促进Cy处理后小鼠GALT中B细胞数量恢复,可能通过促进B细胞增殖而发挥作用.
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生长相关蛋白43(GAP43)基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对大鼠视网膜变性疾病的治疗作用
目的 探讨生长相关蛋白43(GAP43)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对治疗视网膜变性(RP)疾病的前景.方法 采用贴壁法进行分离培养BMSC,经慢病毒载体将GAP43基因导入BMSC得到GAP43基因修饰的BMSC.将63只皇家外科学院(RCS)大鼠按随机数字表随机分为3组:实验组、阴性对照组和空白对照组.实验组接受视网膜下注射GAP43基因修饰的BMSC混悬液,阴性对照组组接受视网膜下注射BMSC混悬液,空白对照组接受视网膜下注射PBS.移植后30 d,通过光学相干断层扫描(OCT)检测视网膜厚度,通过Western blot法检测视紫红质在RCS大鼠视网膜中的表达.结果 与空白对照组和阴性对照组相比,GAP43基因修饰的BMSC移植30 d后,实验组视网膜厚度显著增加,视网膜视紫红质明显增强.结论 GAP43基因修饰的BMSC移植能增加光感受细胞的存活数,延缓视网膜变性.
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小鼠肝脏原代Kupffer细胞的分离和纯化
目的 利用低速离心和差速贴壁的特性,探索一种高效分离纯化BALB/c小鼠Kupffer细胞(KC)的方法.方法 采用0.5 g/L4型胶原蛋白酶原位灌注和消化肝脏组织,低速分离肝脏的细胞后差速贴壁分离纯化KC,与Percoll密度梯度离心分离方法比较KC的产量和活性,应用F4/80免疫荧光染色鉴定细胞形态、流式细胞术检测F4/80的表达、墨汁吞噬实验进行吞噬功能鉴定.构建KC缺氧/复氧模型,流式细胞术检测主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ、CD40、CD68和CD86的表达,ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达.结果 每只小鼠肝脏可获得(5.83±0.54)×106个KC,细胞存活率达92％,Percoll密度梯度分离仅能获得(2.19±0.43)×106个KC,F4/80免疫荧光染色显示贴壁后KC呈梭形或棘状,流式细胞术鉴定F4/80阳性细胞占比接近90％,吞墨实验可见胞质内大量被吞噬的碳颗粒.KC在缺氧复氧模型下MHC-Ⅱ、CD40、CD86分子表达增多,并分泌TNF-α参与炎症反应.结论 成功建立了BALB/c小鼠KC分离纯化的方法.
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阻断KIR2DL4(CD158d)增强NK细胞的杀伤功能
目的 利用抗体阻断人原代培养的自然杀伤(NK)细胞表面的杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL4(KIR2DK4),抑制其与配体人白细胞抗原G(HLA-G)的结合,观察对NK细胞杀伤功能的影响.方法 用免疫磁珠法分离人NK细胞并培养,流式细胞术检测所得NK细胞的纯度;流式细胞术检测NK细胞表面KIR2DK4的表达水平和人乳腺癌SK-BR-3细胞表面HLA-G的表达水平;将NK细胞与SK-BR-3细胞共培养,并加入KIR2DL4的阻断抗体,ELISA检测NK细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)的水平,利用流式细胞术检测NK细胞表面CD107a的表达水平,以检测其脱颗粒情况.结果 分离得到的人原代NK细胞纯度可达90％以上;共培养实验发现,KIR2DL4的阻断抗体可促进NK细胞分泌IFN-γ,且NK细胞表面CD107a的表达水平也明显提高,提示其脱颗粒能力增强.结论 阻断KIR2DL4信号可明显促进NK细胞的杀伤功能,KIR2DL4在NK细胞杀伤靶细胞的过程中发挥抑制性作用.
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下调miR-18a和miR-328抑制肺腺癌A549细胞的侵袭和迁移
目的 分析miR-18a和miR-328在肺腺癌A549细胞中的表达,并探讨下调miR-18a或miR-328的表达对其侵袭和迁移能力的影响.方法 用荧光定量PCR检测A549细胞中miR-18a和miR-328的表达;通过转染miR-18a抑制物(miR-18ainhibitor)或miR-328 inhibitor,下调miR-18a或miR-328的表达,采用TranswellTM侵袭、迁移实验分析A549细胞侵袭和迁移能力的变化.结果 A549细胞中miR-18a和miR-328均呈高表达;而转染相应抑制物后miR-18a、miR-328表达下降,A549细胞的侵袭、迁移能力均明显降低.结论 下调A549细胞miR-18a或miR-328水平可有效抑制肿瘤细胞的侵袭、迁移.
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γ干扰素处理对树突状细胞生物学特性及功能的影响
目的 研究γ干扰素(IFN-γ)处理对C57BL/6小鼠树突状细胞(DC)生物学特性及功能的影响.方法 在DC培养过程的早期(第2天)或晚期(第5天)加入20 ng/mL IFN-γ进行处理,第7天加入脂多糖(LPS)刺激DC成熟,流式细胞术检测细胞表面分子CD11c、CD80、CD86的表达.为检测DC功能,将其与BALB/c小鼠来源的淋巴细胞进行共培养,5,6-羧基荧光黄二乙酸盐N-琥珀酰亚胺酯(C FSE)标记法检测其刺激异基因淋巴细胞增殖的能力、流式细胞术检测其诱导调节性T细胞(Treg)产生的能力.结果 与对照组相比,早期IFN-γ处理组的DC数量减少、分化受到抑制;虽然表面共刺激分子的表达无明显变化,但是却明显拮抗LPS刺激其成熟;刺激异基因淋巴细胞增殖的能力明显减弱;诱导产生更多的Treg.与对照组相比,晚期IFN-γ处理的DC数量及分化无变化;表面共刺激分子CD86及CD80表达升高;LPS刺激DC成熟及同种异体混合淋巴细胞反应的结果相似,但是诱导Treg产生的能力增加.结论 早期IFN-γ处理组和晚期IFN-γ处理组的DC生物学特性及功能明显不同.
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弱激光照射对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化的调控作用
目的 研究不同能量参数的810 nm弱激光照射对于巨噬细胞极化状态的影响.方法 体外分离、培养BALB/c小鼠来源的骨髓巨噬细胞,应用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)条件性培养基培养的骨髓细胞,流式细胞术检测F4/80表达鉴定培养结果.脂多糖-γ干扰素(LPS-IFN-γ)刺激进行M1细胞极化诱导,反转录PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)、CD86 mRNA水平,Western blot法检测iNOS和Arg1蛋白水平.应用(1、2、3、4)J/cm2的810 nm弱激光对体外培养的M1细胞进行照射,MTT法检测细胞增殖,免疫荧光细胞化学染色检测iNOS、Arg1的表达,反转录PCR检测M1细胞iNOS、Arg1 mRNA水平,Western blot法检测M1细胞iNOS、Arg1蛋白水平.结果 流式细胞术结果证明分离细胞的F4/80阳性率达99.9％.骨髓源性巨噬细胞在LPS-IFN-γ刺激下,高表达iNOS和CD86 mRNA.Western blot法检测发现,给予极化刺激后,骨髓源性巨噬细胞高表达iNOS和CD86蛋白.不同能量的弱激光照射M1型巨噬细胞,MTT法检测发现,(1、2、3)J/cm2弱激光刺激时,M1细胞活力与对照组比较无显著性差异;4 J/cm2刺激时,M1细胞活力降低.免疫荧光细胞化学染色显示,与对照组比较,(1、2) J/cm2照射时,M2型巨噬细胞标志物Arg1阳性细胞数无明显差异,照射剂量为(3、4) J/cm2时,Arg1阻性细胞数显著增多,M1型巨噬细胞标志物iNOS阳性细胞数显著减少.与对照组比较,照射剂量为(1、2)J/cm2时,iNOS及Arg1 mRNA和蛋白表达水平无明显变化,在照射剂量为(3、4) J/cm2时,iNOS mRNA和蛋白水平表达下降,Arg1 mRNA和蛋白水平表达升高.结论 (1、2) J/cm2的810 nm弱激光对于M1型巨噬细胞活力及极化无影响.照射剂量为3 J/cm2时,M1型巨噬细胞可向M2型巨噬细胞极化,且细胞活性无明显变化.但照射能量为4 J/cm2时,M1型细胞虽然可向M2型细胞极化但同时伴有细胞活性降低.
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过氧化氢处理的脐静脉血管内皮细胞miR-125b-5p水平降低但Smad4表达增加
目的 探讨miR-155、miR-125b-5p、miR-210及其靶基因蛋白在氧化应激血管内皮细胞中的表达和作用.方法 分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并通过免疫荧光染色法检测内皮细胞Ⅷ因子相关抗原、流式细胞术检测CD31的表达进行鉴定;将分离的HUVEC进行原代培养,采用子痫前期患者血清和H202建立氧化应激的血管内皮细胞的模型,实验分为正常妊娠血清组、子痫前期血清组、0 μmol/L H2O2组、100 μmoL/L H2O2组;实时定量PCR检测造模后24h细胞内miR-155、miR-125b-5p、miR-210的水平;Western blot法检测细胞内miR-125b-5p靶基因Smad4蛋白的水平;免疫荧光染色法检测细胞内Smad4蛋白的表达;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 与0μmol/L H2O2组相比,100 μmol/L H202处理的内皮细胞miR-125b-5p显著降低、Smad4蛋白显著增加、细胞凋亡率和坏死率显著增加.与正常孕妇血清组相比,子痫前期血清处理的内皮细胞凋亡率和坏死率显著增加,但miR-125b-5p及Smad4蛋白变化不明显.结论 H202处理的HUVEC miR-125b-5p降低,Smad4蛋白增加.
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新风胶囊通过抑制miR-155/NF-κB信号通路改善强直性脊柱炎活动期患者高凝状态
目的 新风胶囊(XFC)对强直性脊柱炎(AS)活动期患者miR-155、核因子κB(NF-κB)信号通路、高凝状态的影响,探讨其可能的机制.方法 采用随机数字表法将56例AS活动期患者分为新风胶囊组(XFC组)和柳氮磺吡啶组(SASP组).实时荧光定量PCR检测miR-155.反转录PCR检测核因子κB激活蛋白1(Act1)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、IκB激酶β(IKKβ)、NF-κB p65、NF-κB p50 mRNA的水平,Western b1ot法检测NF-κB P65、NF-κB P50蛋白表达,ELISA检测血清血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列环素F1(6-keto-PGF1)、血小板颗粒膜蛋白(GMP140)、血小板活化因子(PAF)、纤溶酶原激活抑制剂(PAI-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)、IL-10、IL-17.同时评价XFC对AS患者临床疗效.结果 XFC组Bath AS疾病活动指数50％达标率(BASDAIS0)显著高于SASP组.与SASP组治疗后相比,XFC组治疗后血小板(PLT)、纤维蛋白原(FBG)、D-D二聚体(D-D)、TXB2、GMP140、PAF、PAI-2、IL-17、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、视觉模拟评分(VAS)、Bath AS疾病活动指数(BASDAI)、Bath AS功能指数(BASFI)、Bath AS总体指数(BAS-G)降低更明显,且其可明显升高6-keto-PGF1、IL-4、IL-10;与SASP治疗后相比,XFC治疗后IKKβ、IκBα、NF-κB p65、NF-κB p50 mRNA及NF-κB P65、NF-κB P50蛋白、miR-155表达水平更低.结论 XFC能有效改善AS活动期患者的高凝状态,可能与抑制miR-155、抑制NF-κB信号通路活化有关.
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系统性红斑狼疮患者血清25羟基维生素D3水平与γ干扰素及白细胞介素6水平呈负相关
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者机体淋巴细胞功能失调,产生多种自身抗体,发病机制复杂[1].维生素D属于类固醇激素,在血中主要形式是25羟基维生素D3[25 (OH) VD3],在肾脏1α羟化酶作用下生成活性形式1,25二羟基维生素D3[1,25 (OH)2 VD3],1,25 (OH)2VD3可通过淋巴细胞影响机体免疫系统[2-3].由于25 (OH)VD3含量在血液中相对较高,半衰期也较长,临床上一般检测血清25(OH)VD3来了解机体维生素D水平[4].细胞因子γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)和IL-6在机体免疫应答和炎症反应中起重要作用[5].
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载脂蛋白M基因多态性与兰州地区汉族人群风湿性疾病易感的相关性分析
目的 研究载脂蛋白M(ApoM)基因多态性与兰州地区汉族人群类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)和强直性脊柱炎(AS)等疾病易感的相关性.方法 针对ApoM基因的2个单核苷酸多态性(SNP)位点rs805296和rs805297设计引物,建立聚合酶链式反应-高分辨率融解曲线分析(PCR-HRM)基因分型方法,对599例RA、194例SLE、179例AS患者和273例健康对照进行病例对照研究,分析其与风湿性疾病易感的相关性.结果 rs805296位点在RA组、SLE组、AS组和健康对照组的基因型频率分别为AA 87.0％、AG 12.7％、GG 0.3％;AA 84.5％、AG 15.0％、GG 0.5％;从91.6％、AG 7.3％、GG1.1％;AA 85.0％、AG 15.0％、GG 0％.rs805297位点在RA组、SLE组、AS组和健康对照组的基因型频率分别为GG 38.2％、GT 51.8％、TT 10.0％;GG44.3％、GT 45.4％、TT 10.3％;GG 37.4％、GT 47.5％、TT 15.1％;GG 40.7％、GT 46.1％、TT13.2％.统计学分析发现只有rs805296位点的基因型分布仅在AS组与健康对照组之间有明显差异,在显性模型下,rs805296位点G基因携带者(杂合突变型AG和纯合突变型GG)患AS的风险明显降低.结论 本研究建立的PCR-HRM基因分型方法能够成功实现rs805296和rs805297位点的临床标本分子诊断,并发现rs805296位点与兰州地区汉族人群AS易感密切相关.
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急性冠脉综合征患者CD4+CD28-T细胞表面OX40和4-1BB表达上调
目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者CD4+ CD28-T细胞表面OX40和4-1BB的表达及其临床意义.方法 采用流式细胞术检测57例ACS患者、46例稳定性心绞痛(SA)患者和60例健康体检者(HC)外周血CD4+ CD28-T细胞表面OX40和4-1BB的表达.结果 HC组、SA组和ACS组,三组相比CD4+ CD28-T细胞表面OX40的表达水平依次升高;HC组、SA组和ACS组,三组相比CD4+ CD28-T细胞表面4-1BB的表达水平依次升高.结论 ACS患者外周血CD4+ CD28-T细胞表面OX40和4-1BB表达上调.
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细胞毒T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)基因多态性与非霍奇金淋巴瘤易感性的meta分析
目的 探讨细胞毒T淋巴细胞相关蛋白4 (CTLA4)等位基因多态性与非霍奇金淋巴瘤(NHL)易感性的关系.方法 计算机检索PubMed、MEDLINE、中国知网、万方及维普等数据库,收集1990-01-01/2016-05-25期间CTLA4基因多态性与NHL易感性关系的研究资料.采用SATA(v12.0)软件进行meta分析,计算比值比(OR)及其95％可信区间(CI)并行敏感性分析和发表偏倚评估.结果 共纳入6项研究,涉及CTLA4+49A/G、-318T/C、CT60 A/G 3个等位基因,NHL患者803例,对照共1254例.这3个等位基因多态性与NHL的易感性无相关性(Pz＞0.05或95％ CI包含1).在CTLA4 +49A/G基因多态性的亚组分析中却发现携带AA是HNL混合型的危险因素(AA vs GG:OR=4.181,95％CI:1.362～12.833;AA + AG vs GG:OR=3.217,95％CI:1.055～9.810;AA vs AG+ GG:OR=2.827,95％CI:1.345 ～5.940),然而在B细胞淋巴瘤中是保护因素(AA vs GG:OR =0.465,95％ CI:0.251～0.863;AAvs AG +GG:OR =0.534,95％CI:0.362～0.788);携带AA也是意大利人的危险因素(AA vs GG:OR=4.181,95％ CI:1.362～12.833;AA+ AG vs GG:OR=3.217,95％ CI:1.055～9.810;AA vs AG+ GG:OR=2.827,95％CI:1.345～5.940),但在中国人中是保护因素(AA vs GG:OR=0.643,95％ CI:0.417～0.992;AA vs AG+ GG:OR =0.601,95％ CI:0.395～0.913).结论 CTLA4 +49A/G、-318T/C、CT60 A/G3个等位基因多态性与NHL易感性无明显关联性.
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miR-141的过表达抑制MHCC-97H肝癌细胞的增殖和侵袭迁移
目的 观察肝细胞癌组织中miR-141的表达水平,通过上调MHCC-97H肝癌细胞中miR-141的水平观察对MHCC-97H细胞增殖、侵袭及迁移的影响.方法 实时定量PCR检测miR-141在肝癌及癌旁组织中的表达水平,并分析miR-141表达水平与临床病理指标的关系及生存率.利用人工合成的miR-141模拟物,瞬时转染MHCC-97H细胞.MTT法检测MHCC-97H细胞的增殖,TranswellTM实验检测MHCC-97H细胞的侵袭及迁移,Western blot法及免疫组织化学检测miR-141下游潜在靶点肝细胞产生的促红素受体A2(EphA2)的表达.结果 miR-141在肝癌组织中表达水平显著低于相应癌旁组织;肝癌组织中miR-141低表达与TNM分期、门静脉侵犯及Edmondson分级显著相关;低表达miR-141患者3年生存率明显低于高表达组;miR-141模拟物转染可上调MHCC-97H细胞miR-141水平,上调miR-141可显著抑制MHCC-97H细胞的增殖、侵袭及迁移,并下调EphA2的蛋白水平;miR-141低表达组EphA2蛋白水平明显高于miR-141高表达组,相关性分析显示肝癌组织中miR-141与EphA2蛋白表达呈显著负相关.结论 miR-141在肝癌组织中表达下调且与EphA2表达呈显著负相关,其低表达与肝癌恶性临床病理特征有关,上调miR-141表达可抑制EphA2的表达抑制肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力.
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人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达及活性鉴定
目的 构建人源性抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体(scFv)的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,对其生物学活性进行鉴定.方法 将人源性抗PSMA scFv的基因克隆入原核表达载体pET302,将其转化入大肠杆菌BL21后用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,摸索不同诱导条件使scFv呈可溶性表达,经SDS-PAGE和Western blot法确认表达后,利用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白.利用流式细胞术检测scFv与PSMA阳性和阴性细胞的结合情况.结果 成功构建人源性抗PSMA scFv的原核表达载体;在30℃、IPTG终浓度为0.05 mmol/L时,可实现目的蛋白的可溶性表达;经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后获得纯度较高的抗PSMA scFv蛋白;流式细胞术结果显示该scFv可与PSMA阳性的LNCaP前列腺癌细胞特异性结合,而不与PSMA阴性的PC-3细胞结合.结论 在大肠杆菌成功表达了可溶性人源性抗PSMA scFv,获得的抗PSMA scFv能够特异性地与PSMA阳性前列腺癌细胞结合.
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运用表位嵌合型3型腺病毒载体制备肠道病毒71型单克隆抗体
目的 制备针对肠道病毒71型(EV71)的单克隆抗体(mAb).方法 将六邻体中同时嵌入EV71 SP55与SP70两个中和表位的重组人3型腺病毒作为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备mAb.用病毒微量中和实验、间接ELISA、Westernblot法和直接免疫荧光染色法进行鉴定.结果 获得了4株分泌EV71特异性mAb的杂交瘤细胞,D2C9、2C4、I2G2、I12C3,其中D2C9株腹水间接ELISA实验效价为1∶8000000,其余3株为1∶500 000;Western blot法和ELISA结果表明4株mAb均识别EV71病毒VP1蛋白.D2C9针对SP70表位,2C4、I12C3、I2G2针对SP55表位;直接免疫荧光实验结果显示4株mAb均能与EV71特异性结合,而与柯萨奇病毒16型(CoxA16)不结合.结论 获得了对EV71亲和力高、特异性好并且与CoxA16无交叉反应的mAb.
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PD-1/PD-L1信号通路及其抗体在肿瘤免疫治疗中的研究进展
肿瘤免疫治疗已成为肿瘤治疗的重要研究领域和突破点,细胞免疫方面,嵌合抗原受体(CAR)T细胞在治疗血液肿瘤的临床试验已取得实质突破,抗原特异性T细胞受体(TCR)基因转导T淋巴细胞在黑素瘤等肿瘤治疗中显示出巨大潜能;抗体应用方面,细胞毒性T淋巴细胞蛋白4(CTLA4)抗体在2011年获得美国食品和药品监督管理局(FDA)批准.抗程序性死亡蛋白1(PD-1)抗体和抗PD-1配体(PD-L1)抗体则成为肿瘤免疫研究中新的热点,PD-1抑制剂Opdivo治疗晚期肺鳞状细胞癌和现行金标准多西他赛相比,持续显示生存期疗效优势,18个月总生存率是标准疗法的2倍.本文总结了PD-1/PD-L1信号通路及其抗体研究进展.
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调节性T细胞的分化和作用机制研究进展
调节性T细胞(Treg)是一类增殖能力较低,发挥多种免疫抑制功能的T细胞亚群,在维持机体自身的免疫稳态中有着不可忽视的作用,Treg分化或功能异常均能够引发自身免疫性疾病,并与器官移植后的急性免疫排斥反应及肿瘤免疫有关.对Treg生物学特征、数量及功能调控机制的全面了解有助于为临床提供新的治疗思路方法.转录因子Foxp3对于Treg的分化、发育及成熟后的功能维持具有关键性作用.其他多种分子参与Treg的产生、分化及免疫抑制功能.本文总结了Treg的分子标志、分化及作用机制等方面的研究进展.
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高迁移率族蛋白1(HMGB1)与类风湿性关节炎发病的关系
类风湿性关节炎(RA)是一种以关节滑膜慢性炎症为主要特征的难治性自身免疫性疾病.高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一种染色体结合蛋白,在致病因子刺激下可释放至胞外成为炎症因子诱发炎症反应.HMGB1在RA中起重要作用,通过与相应受体如Toll样受体2(TLR2)、TLR4等结合后启动炎症反应链,可促使巨噬细胞分泌炎性因子,导致关节软骨破坏;同时,HMGB1可促使缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子等表达升高,造成血管翳形成,加重关节滑膜的炎性增生;另外,其可增强增生的滑膜组织侵袭能力,进一步造成损伤.因此,HMGB1及其受体通路在当前RA诊疗研究领域日渐受到重视.本文总结了近年来RA研究中HMGB1的致病机制以及其治疗研究进展.
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结缔组织病相关钙质沉着的研究进展
钙质沉着是结缔组织病(CTD)常见的临床表现之一,常出现于结构受损、血管异常或缺血后的组织中,在系统性红斑狼疮(SLE),系统性硬化(SSc),皮肌炎等自身免疫性疾病中表现显著.本文总结了CTD相关钙质沉积的分类、病理特点、临床表现和治疗手段.因钙质沉着的发病机制未明,病理学特征不典型且临床表现也不尽相同,到目前为止,钙质沉着的治疗仍然是一个重大挑战.因此,CTD相关钙质沉着的规范化诊断和治疗还需要更加全面和系统的临床试验与验证,这对于优化治疗疗效,降低治疗成本,提高患者的生存率和降低复发风险具有重要的意义.
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滤泡辅助性T细胞在器官移植免疫中的研究进展
滤泡辅助性T(Tfh)细胞是从人类扁桃体中发现的一类辅助性T(Th)细胞,Tfh细胞通过分泌白细胞介素21(IL-21)促进B细胞分化为浆母细胞,产生免疫球蛋白并促进生发中心形成.抗体介导的体液排异反应是移植物功能丧失的重要原因,而抗体的产生有赖于Tfh细胞的辅助,并且IL-21受体的抑制剂抑制Tfh细胞和B细胞在同种异体反应中的功能.本文将对近年来Tfh细胞在分化、亚型及器官移植中在抗体介导的排异反应中的作用进行综述,并推测其在未来移植后发生体液免疫排异患者中的意义.
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系统性红斑狼疮的B细胞相关靶点的研究进展
深入研究系统性红斑狼疮(SLE)的发病机制对于临床探索新的治疗方式和新药研发有重要意义,目前仍以糖皮质激素类和大剂量免疫抑制剂冲击治疗为主要治疗手段.然而,它们的严重副作用和并发症不容小觑,这使得人们开始寻找更加特异有效及较低毒副作用的治疗方法和药物.目前的研究热点是B淋巴细胞靶点与SLE发病机制之间的关系,现临床常用的特异性生物制剂主要靶向B细胞表面分子CD20、CD22、B细胞活化因子(BAFF)和调节性B细胞分泌的IL-10,本文主要综述了这几个靶点在SLE中的调节作用及其相关生物制剂的临床应用.
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调节性T细胞促进胃癌发生的研究进展
胃癌(GC)发病因素和机制复杂,GC和机体免疫系统中的调节性T细胞(Treg)密切相关.Treg是一群具有免疫抑制功能的细胞,在维持机体免疫稳态中有重要调节功能,Treg在肿瘤中的作用已成为研究热点.GC患者体内Treg上调,从而抑制机体的抗肿瘤免疫.因此,Treg参与GC的发生发展过程,针对Treg的免疫疗法对于治疗GC具有广阔前景.本文着重就Treg促进GC的作用以及Treg作用机制的研究进展进行综述.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
