细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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肠道病毒71型(EV71)通过网格蛋白介导的内吞途径入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞
目的 研究肠道病毒71型(EV71)入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的内吞机制.方法 利用氯丙嗪(CPZ)、制霉菌素(NT)分别预处理SK-N-SH细胞,实时定量PCR(qRT-PCR)检测靶细胞中EV71 mRNA水平,免疫荧光细胞化学染色检测靶细胞病毒蛋白1 (VP1)蛋白表达水平;EV71感染SK-N-SH细胞后,激光共聚焦显微镜检测EV71与入侵途径标志分子网格蛋白的共定位.结果 CPZ能抑制靶细胞内EV71 mRNA和VP1蛋白的表达,而NT对其无影响;激光共聚焦显微镜发现EV71与网格蛋白共定位.结论 EV71是通过网格蛋白介导的内吞途径入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞.
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槲皮素通过抑制肺巨噬细胞的M1极化减轻海水吸入诱导的小鼠急性肺损伤
目的 研究槲皮素对海水诱发性急性肺损伤(SW-ALI)的保护作用,并探索该作用与M1型巨噬细胞极化及其介导的炎症的相关性.方法 雄性C57BL/6小鼠随机分成正常对照组、槲皮素处理组、SW-ALI模型组、SW-ALI联合槲皮素治疗组,每组15只.SW-ALI模型组小鼠采用10 g/L戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,经口咽插管按4mL/kg剂量匀速将海水注入肺中;SW-ALI联合槲皮素治疗组于海水注射前0.5h给予槲皮素(200 mg/kg)腹腔注射;正常对照组、槲皮素处理组经腹腔注射等量PBS或槲皮素.各组小鼠在造模0.5、1、2、3、4h后,于麻醉状态下行腹主动脉取血1 mL进行血气分析;3d后,取1/3肺脏制备常规冰冻切片、HE染色观察肺组织病变;1/3肺脏称湿质量,80℃恒温箱烤48h至干质量恒定,计算干/湿质量比(D/W);采用Western blot法检测肺组织中M1型巨噬细胞标志蛋白诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的水平,实时定量PCR检测肺组织中iNOS及肿瘤坏死因子a(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-4及IL-10的mRNA水平.结果 槲皮素能明显减轻肺组织病理改变;降低二氧化碳分压(PaCO2)并增加氧分压(PaO2)和肺组织D/W;减少iNOS蛋白水平,下调TNF-α及IL-1β的水平且上调IL-4及IL-10的mRNA水平.结论 槲皮素可通过抑制M1型巨噬细胞极化及其介导的免疫反应显著改善SW-ALI后气体交换功能、减轻肺组织病变.
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程氏蠲痹汤加减方降低佐剂关节炎大鼠滑膜组织前列腺素E受体4(PTGER4)的水平
目的 研究程氏蠲痹汤加减方对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜T细胞受体前列腺素E受体4(PTGER4)水平的影响.方法 通过大鼠足跖部皮下注射Freund完全佐剂配合冰水浴和吹风制作AA模型,检测各组大鼠关节肿胀度和关节炎指数,实时荧光定量PCR检测程氏蠲痹汤加减方对滑膜组织PTGER4mRNA水平的影响.结果 程氏蠲痹汤加减方能显著减轻AA模型大鼠关节、滑膜组织的破坏;高剂量(生药含量4 g/mL)处理的大鼠滑膜样本中PTGER4 mRNA水平明显降低.结论 程氏蠲痹汤加减方能够降低大鼠AA滑膜组织PTGER4mRNA水平.
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茶多酚增强表柔比星诱导膀胱癌T24细胞凋亡和抑制其自噬的机制
目的 研究表柔比星(EPI)诱导人膀胱癌T24细胞发生自噬的分子机制,探讨茶多酚(TP)联合EPI对T24细胞的影响及其机制.方法 将T24细胞分成对照组、EPI组、TP组、TP联合EPI组.分别处理8h,用透射电镜观察各组细胞自噬体形成情况,Western blot法检测T24细胞中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、p62水平.处理24h后,用异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinV-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Western blot法检测T24细胞中活化的胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、活化的多腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)水平.用自噬通路抑制剂氯喹、3-甲基腺嘌呤联合EPI处理T24细胞8h,Western blot法检测T24细胞LC3Ⅱ水平,再将TP与c-Jun氨基端激酶(JNK)通路抑制剂SP分别联合EPI处理8h后,检测2组细胞LC3Ⅱ及磷酸化的JNK(p-JNK)水平.结果 TP联合EPI组T24细胞自噬体数量及LC3Ⅱ含量明显少于EPI组;JNK通路抑制剂SP能显著降低EPI引起的LC3Ⅱ表达,p-JNK水平与EPI呈时间依赖性增强;TP联合EPI能降低JNK通路活性;联合组细胞凋亡率及c-caspase-3和c-PARP蛋白水平明显高于EPI组.结论 TP通过抑制JNK通路活性抑制膀胱癌T24细胞自噬并增强其对EPI敏感性.
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高氧调节早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞CCAAT增强子结合蛋白α和肺泡表面活性蛋白的表达
目的 探讨高氧状态下早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)中CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)和肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、SP-B、SP-C、SP-D的表达及两者相关性.方法 原代培养早产大鼠AEC2,利用950 mL/L O2建立高氧细胞损伤模型,随机分为空气对照组和高氧实验组.分别于空气及高氧暴露后24、48、72 h,收获各组细胞.采用倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化,实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测C/EBPα和SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA及蛋白水平;CCK-8法检测细胞增殖.结果 随培养时间延长,空气组细胞C/EBPα mRNA及蛋白表达逐渐降低,SP-A、SP-B、SP-C、SP-DmRNA和蛋白水平及AEC2增殖逐渐升高.高氧组细胞C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA和蛋白水平及AEC2增殖呈先递增后递减趋势.与空气组相比,高氧组细胞C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA和蛋白水平及AEC2增殖在高氧48 h明显增加.高氧组细胞C/EBPα蛋白水平与SP-A、SP-B、SP-C、SP-D蛋白水平及AEC2增殖呈正相关(r=0.96、0.98、0.92、0.97、0.90).结论 高氧暴露早期,C/EBPα可促进肺泡表面活性蛋白分泌,参与机体保护性调节作用,但随高氧暴露时间延长,丧失代偿保护作用.
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金黄色葡萄球菌促进奶牛乳腺上皮细胞NOD2的表达
目的 研究金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)表达的影响.方法 采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液刺激BMEC,金黄色葡萄球菌以感染复数(MOI) 100∶1感染细胞0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4h,以MOI 10∶1、20∶1、40∶1、100∶1感染细胞2h;用(0、104、105、106、107、108)集落形成单位(CFU)/mL热灭活的金黄色葡萄球菌菌液刺激细胞后,实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测NOD2 mRNA和蛋白水平.结果 金黄色葡萄球菌在感染细胞0.5～4h,NOD2 mRNA和蛋白含量较未感染组显著升高,不同MOI的金黄色葡萄球菌感染细胞后,随着MOI的增加,NOI2 mRNA和蛋白水平也显著升高;与对照组相比,不同剂量的热灭活的金黄色葡萄球菌菌液处理细胞的NOD2 mRNA和蛋白含量无显著变化.结论 金黄色葡萄球菌促进BMEC NOD2的表达.
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高糖下调小鼠永生性MPC5肾小球足细胞α-Klotho水平
目的 研究α-Klotho在小鼠永生性MPC5肾小球足细胞系中的表达及高糖刺激下α-Klotho的水平变化.方法 采用30 mmol/L葡萄糖刺激MPC.5足细胞,与空白组及高渗对照组比较,反转录PCR检测MPC5足细胞α-Klotho mRNA水平,Western blot 法和免疫荧光细胞化学染色检测MPC5足细胞α-Klotho蛋白的水平和定位.结果 免疫荧光细胞化学染色结果显示,空白组及高渗对照组细胞α-Klotho表达丰富,模型组α-Klotho表达极少.正常足细胞α-Klotho mRNA和蛋白高表达,高糖作用后24、48h后,足细胞α-Klotho mRNA和蛋白水平较正常组显著降低,与24h模型组相比,高糖作用48 h的足细胞α-Klotho mRNA和蛋白水平也显著降低.结论 MPC5足细胞中α-Kloth存在一定量的表达,葡萄糖可下调足细胞α-Klotho水平.
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中和抗体阻断FcγRⅠ降低脂多糖诱导的大鼠PC12细胞凋亡
目的 探讨IgG Fc受体Ⅰ(FcγR Ⅰ)在脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡中的作用.方法 将PC12细胞接种于培养板中,用(50、125、250、500、1000) μg/mL LPS处理24h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,选取合适的LPS剂量.待细胞处于对数生长期,采用随机数字表法分为空白对照组:不进行任何处理,继续培养24h;LPS组:培养液中加入500 μg/mL LPS,孵育24h;LPS联合FcγR Ⅰ中和抗体组:培养液中加入500μg/mL LPS和0.2 μg/mL FcγR Ⅰ中和抗体,孵育24h.处理结束后,实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组FcγR Ⅰ mRNA和蛋白含量,异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin V-FTTC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫组织化学染色法检测各组细胞caspase-3、Bcl-2和BAX的蛋白水平.结果 随着LPS剂量的增加,PC12细胞的活力逐渐下降;与对照组相比,LPS处理组FcγR Ⅰ mRNA和蛋白水平增加,caspase-3、Bcl-2和BAX蛋白水平增加,细胞凋亡率增加;与LPS组相比,LPS联合FcγR Ⅰ中和抗体组FcγR Ⅰ mRNA和蛋白水平降低,caspase-3、BAX蛋白水平显著降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白水平增加.结论 FcγR Ⅰ参与LPS诱导的PC12细胞凋亡.
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miR-34a降低人骨肉瘤肿瘤干细胞的自我更新能力并抑制其成瘤和迁移
目的 确定从入骨肉瘤U2OS细胞群中分离培养的肿瘤干细胞中微小RNA-34a(miR-34a)的水平变化,并确定其在肿瘤干细胞成瘤性、干性维持中的作用.方法 采用无血清培养法从U2OS细胞系中富集具有自我更新能力的肿瘤干细胞亚群,实时定量PCR检测miR-34a的水平;转染miR-34a模拟物(miR-34a mimics)或SOX2短发夹RNA (shRNA)后,Western blot法检测miR-34a靶蛋白性别决定区Y盒2(SOX2)蛋白水平,肿瘤干细胞微球形成实验检测自我更新能力,软琼脂成瘤实验检测miR-34a对肿瘤干细胞体外成瘤能力的影响,TranswellTM迁移实验检测miR-34a对肿瘤干细胞迁移能力的影响.结果 骨肉瘤肿瘤干细胞中miR-34a水平降低;转染miR-34a mimics和转染SOX2 shRNA(shSOX2)均降低SOX2蛋白水平,并降低肿瘤干细胞的自我更新能力、体外成瘤活性及迁移能力.结论 骨肉瘤肿瘤干细胞中的miR-34a具有降低干细胞自我更新能力、成瘤性和迁移能力的作用.
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过表达Klotho抑制小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化
目的 探讨过表达Klotho (KL)对可溶性核因子κB受体激活蛋白配体(sRANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响.方法 实验分为过表达KL组(Ad-KL组)、空载体组(Ad-GFP组)与空白对照组.倒置荧光显微镜观察重组腺病毒转染RAW264.7细胞情况,实时荧光定量(qRT-PCR)和Western blot法检测KL的mRNA或蛋白水平;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测过表达KL对sRANKL诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化的形态学影响;qRT-PCR和Western blot法检测各组破骨细胞成熟标志物TRAP、组织蛋白酶K(CTSK)的mRNA或蛋白水平.结果 与Ad-GFP组和空白对照组比较,Ad-KL组细胞KL mRNA和蛋白水平显著升高;TRAP染色显示,Ad-KL组TRAP阳性细胞数量显少于Ad-GFP组和空白对照组,体积也更小;与Ad-GFP组和空白对照组比较,Ad-KL组TRAP和CTSK mRNA和蛋白水平也明显降低.结论 过表达KL抑制RAW264.7细胞向破骨细胞分化.
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HER2抑制上皮钙黏素表达促进人乳腺上皮细胞迁移
目的 研究原癌基因人表皮生长因子受体2 (HER2)对MCF10A人乳腺上皮细胞形态和迁移能力的影响及机制.方法 通过慢病毒包装及感染MCF10A人乳腺上皮细胞,建立HER2过表达细胞,用TranswellTM法研究细胞迁移能力变化,结合Western blot法、实时定量PCR和免疫荧光染色检测细胞中上皮钙黏素(E-cadherin)的表达.结果 过表达HER2的乳腺上皮细胞呈分散型生长,细胞迁移能力增强,E-cadherin蛋白表达受到抑制,细胞膜上E-cadherin表达也显著降低,重新过表达E-cadherin能抑制HER2诱导的细胞迁移和分散.结论 HER2能通过抑制E-cadherin促进人乳腺上皮细胞迁移.
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贝纳柯克斯体重组抗原Com1和急性Q热抗原A(adaA)的纯化和鉴定
目的 原核表达并纯化2种贝纳柯克斯体(C.burnetii)抗原主要外膜蛋白质Com1和急性Q热抗原A(adaA),并对重组Com1和adaA进行质谱鉴定以及抗原性鉴定.方法 全基因合成编码Com1和adaA的基因序列,并将其分别构建到原核表达载体pET-20b(+),将构建好的载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组Com1和adaA.通过镍亲和柱层析纯化重组Com1和adaA,切取纯化的蛋白质条带进行质谱鉴定.将纯化的重组Com1和adaA与Q热阳性牛血清进行Western blot分析,检测其免疫反应特性.结果 构建了原核表达载体pET-20b(+)-Com1以及pET-20b(+)-adaA,重组抗原Com1和adaA均以可溶形式得到了高效地表达和纯化,SDS-PAGE结果显示其相对分子质量(Mr)分别为27 000与25 000,质谱鉴定结果确证其为C.burnetii的抗原蛋白Com1和adaA.重组Com1和adaA与Q热阳性牛血清均有阳性反应条带,条带Mr大小与SDS-PAGE结果一致.结论 成功高效表达了可溶重组Com1和adaA并证实其免疫反应特异性.
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敲低维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)抑制全反式维甲酸诱导的NB4急性早幼粒白血病细胞的分化
目的 探讨慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)敲低NB4急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)对全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞分化的影响及其机制.方法 将含有人RIG-I基因shRNA序列(RIG-I-shRNA)及含绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒感染NB4细胞,实时定量PCR (qRT-PCR)及Western blot法分别检测ATRA诱导前后NB4细胞RIG-I mRNA和蛋白水平;流式细胞术观察慢病毒感染效率和RIG-I-shRNA对ATRA诱导NB4细胞分化的影响;Western blot法检测敲低RIG-I水平后,ATRA处理对蛋白激酶B308位苏氨酸(AKT-Thr308)磷酸化的调控效应.结果 含RIG-I-shRNA序列的慢病毒可成功感染NB4细胞,下调ATRA诱导的RIG-I水平;敲低RIG-I后,明显抑制ATRA诱导NB4细胞分化,同时上调AKT-Thr308磷酸化水平.结论 敲低NB4细胞RIG-I蛋白可上调AKT-Thr308磷酸化水平抑制ATRA诱导的急性早幼粒白血病细胞分化.
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小鼠自发乳腺癌模型中肿瘤相关巨噬细胞的表型检测与分析
目的 通过检测巨噬细胞极化标志性分子表达水平变化分析自发乳腺癌进程中肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的表型转化.方法 通过基因型鉴定获得自发乳腺癌模型小鼠,并通过检测其肿瘤总体积变化,将小鼠分为肿瘤早期组及晚期组;通过机械法获得肿瘤组织单细胞悬液并通过流式细胞分选获得不同病程的TAM;利用实时定量PCR检测M1型巨噬细胞白细胞介素1β(IL-1β)、IL-27、IL-6、CD80、CD86和M2型巨噬细胞标志性分子精氨酸酶1(Arg1)、IL-10、白细胞介素4受体α(IL-4Rα)、巨噬细胞甘露糖受体1(Mrc1)、几丁质酶样分子3(Chil3/Ym1)水平;通过对比早期与晚期肿瘤组织巨噬细胞极化标志性分子的表达倾向性,分析TAM在肿瘤不同时期的表型.结果 早期肿瘤的TAM高表达部分M1型巨噬细胞标志性分子IL-1β、CD80、CD86,晚期肿瘤的TAM高表达IL-6及部分M2型巨噬细胞极化标志性分子Arg1、IL-10、IL-4Rα.结论 肿瘤进程中,TAM经历表型转换过程,靶向TAM的表型转换有可能为乳腺癌提供新的治疗方案.
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敲低高尔基体α甘露糖苷酶2(GM2)增强BGC-823人胃癌细胞的黏附及机制
目的 通过敲低高尔基体α甘露糖苷酶2(GM2)基因的表达,探讨其对BGC-823人胃癌细胞黏附能力的影响.方法 设计并构建3个针对GM2基因的短发卡RNA(shRNA)质粒表达载体,同时合成阴性对照载体,并将其转染至BGC-823细胞,实时定量PCR和Western blot法检测转染后BGC-823细胞GM2mRNA及蛋白表达水平,筛选出敲低效果佳的质粒;再分别运用同质细胞黏附试验、细胞-基质黏附实验、内皮细胞黏附实验观察GM2基因敲低后对BGC-823细胞黏附能力的影响;同时采用Western blot法检测GM2基因敲低后上皮钙黏素(E-cadherin)、CD44v6、细胞间黏附分子1(ICAM-1)及P选择素(P-selectin)等黏附分子的蛋白水平.结果 与空白对照组及转染GM2-shRNA-NC组相比较,GM2-shRNA-2质粒可有效敲低GM2基因的表达;敲低GM2表达水平后,BGC-823细胞同质细胞之间黏附数目明显增加,而与基质和血管内皮细胞之间的黏附数目明显减少.敲低GM2基因表达后E-cadherin蛋白表达明显增加,P-selectin蛋白表达明显降低,而CD44v6和ICAM-1表达水平未见明显变化.结论 敲低GM2基因表达水平后,胃癌BGC-823细胞间的黏附能力增强,而与细胞外基质和血管内皮细胞之间的黏附能力减弱,可能与敲低GM2后E-cadherin表达上调,而P-selectin的表达下调有关.
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人线粒体转录终止因子2(MTERF2)在Caski宫颈癌细胞的表达和定位
目的 构建人线粒体转录终止因子2(MTERF2)基因真核表达载体,并在人Caski宫颈癌细胞中过表达,观察其编码蛋白质在Caski细胞中的定位.方法 从Caski细胞中提取总RNA,采用反转录PCR扩增人MTERF2基因可读框序列,将其重组于p3×FLAG-CMV-14载体中,利用PCR和DNA测序鉴定重组子正确性;并用脂质体法转染至Caski细胞,转染24、32、48 h,采用Western blot法检测MTERF2蛋白水平,通过免疫荧光细胞化学染色观察其亚细胞定位情况.结果 经过PCR和DNA测序鉴定,人MTERF2基因可读框正确地插入到真核表达质粒中,大小为1158 bp,表达的蛋白相对分子质量(Mr)为44 000,与预计大小相符.转染p3×FLAG-MTERF2质粒的Caski细胞培养24h,可检测到目的蛋白表达,该蛋白主要定位于线粒体中.结论 在Caski细胞成功表达了MTERF2蛋白并证实其定位于线粒体.
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青年和老年小鼠脑缺血再灌注心肺损伤的机制
目的 研究小鼠脑缺血再灌注心肺组织损伤情况及机制.方法 按5～6月龄和20～ 21月龄,将C57BL/6J小鼠分为青年和老年组.实验组设立假手术组,模型组为缺血1h再灌注1、12、24、48 h组.取各灌注时间点的小鼠心肺组织,HE和TUNEL染色观察形态学改变,化学比色法检测心脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶变化,称重法计算肺指数,Western blot法分别检测心肺组织中核因子κBp65 (NF-κBp65)、磷酸化NF-κBp65 (p-NF-κBp65)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)水平,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,比色法测定一氧化氮(NO)水平.结果 青年和老年小鼠分别在再灌注24h和再灌注1h发生肺部炎症反应,而分别于再灌注24 h和再灌注12 h可见心脏出血,肺对再灌注刺激的反应比心脏组织更早.同时在对Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、肺指数、NF-κB信号通路与炎症因子的测定发现,这些指标在青年和老年小鼠组上的变化与其病理组织变化时程一致.结论 老年小鼠脑缺血再灌注后会引起心肺组织的损伤,能量代谢和炎症级联反应为其损伤的主要机制.
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上皮细胞黏附分子(EpCAM)在干燥综合征患者唇腺组织上皮细胞的表达与病情严重程度相关
目的 探索上皮细胞黏附分子(EpCAM)在干燥综合征(SS)唇腺组织中的表达情况以及其与临床指标的相关性.方法 收集57例SS患者及25例健康对照组的唇腺组织,采用免疫组织化学染色法检测唇腺组织中EpCAM细胞外结构域(EpCAMEX)及胞内结构域(EpCAMICD)的表达情况,分析其与临床指标的相关性;重组人肿瘤坏死因子α (rhTNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡后,采用流式细胞术检测其EpCAMEX及EpCAMICD的表达.结果 正常对照组腺上皮细胞膜EpCAMEX高表达,胞质内低表达,胞核不表达;随SS患者病情加重EpCAMEX胞膜表达降低,胞质内EpCAMEx、EpCAMICD表达增高,且唇腺形态学改变较为突出;EpCAMEX、EpCAMICD染色评分与SS疾病严重程度呈正相关.且诱导上皮凋亡后,其EpCAMEX表达降低,而EpCAMICD表达增高.结论 SS患者唇腺组织上皮细胞EpCAMEX、EpCAMICD的表达与SS患者病情严重程度相关,且EpCAMEX、EpCAMICD的表达与凋亡相关.
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IFN-γ通过激活STAT3促进甲状腺上皮细胞分泌CXC趋化因子配体10(CXCL10)
目的 探讨γ干扰素(IFN-γ)对甲状腺细胞分泌趋化因子的作用及机制.方法 HE染色检测桥本甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润情况,免疫组织化学染色检测IFN-γ的表达.用500 U/mL IFN-γ处理Nthy-ori 3-1甲状腺细胞后,利用Western blot法检测信号转导子及转录激活子3(STAT3)及磷酸化的STAT3的水平.用STAT3抑制剂Stattic处理后,ELISA测定CXC趋化因子配体10(CXCL10)的变化,TranswellTM法检测淋巴细胞的迁移能力.结果 与正常甲状腺组织比较,桥本甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润较多,IFN-γ表达水平较高.与对照组比较,IFN-γ处理增加甲状腺细胞p-STAT3水平,增加CXCL10分泌和淋巴细胞迁移,而Stattic处理后CXCL10分泌减少,淋巴细胞迁移减少.结论 IFN-γ激活STAT3促进甲状腺上皮细胞分泌趋化因子,增加淋巴细胞的迁移.
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多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)高表达与类风湿性关节炎患者甲氨蝶呤耐药有关
目的 研究类风湿性关节炎(RA)患者甲氨蝶呤(MTX)耐药性与外周血单个核细胞(PBMC)多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)的表达的相关性.方法 根据符合纳入标准的RA患者依据服用MTX后28个关节疾病活动度评分(DAS28)的情况,将RA患者分为MTX敏感组及耐药组,健康人群为正常对照组.采用实时定量PCR检测mdr1 mRNA的表达,流式细胞术检测PBMC的P-gp的水平及功能,比较mdr1/P-gp在各组中的表达情况.结果 与正常对照组相比,MTX敏感组及MTX耐药组P-gp表达及功能增强;与MTX敏感组相比,MTX耐药组mdr1 mRNA水平增加,且P-gp表达及功能增强.结论 RA患者mdr1/P-gp高表达与MTX耐药相关.
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13例高球蛋白血症对ABO血型鉴定和交叉配血结果的干扰及处理方法
目的 探讨高球蛋白血症血标本对ABO血型鉴定和交叉配血试验的干扰因素及其处理方法.方法 采用微柱凝胶法对患者血标本进行ABO血型正反定型及PhD抗原检测,对出现弱凝集±～弱于2+(2+w)者引起ABO血型正反定型不一致和交叉配血不合的血标本,采用滴加生理盐水及其置换,对凝集仍不散开者,将血标本置37℃孵育15 min,2次离心分离血清采用试管法进行复检、不规则抗体筛查及间接抗人球蛋白试验.结果 13例血标本在ABO血型反定型中出现假凝集强度为±～1+者9例,为2+w者4例;在交叉配血中主侧出现假凝集强度为1+ ～2+w者13例.球蛋白值在(32～94) g/L之间,凝集强度与球蛋白值有相关性,球蛋白值在(32～65) g/L,凝集强度为±～1+,球蛋白值在(76～94) g/L,凝集强度为2+w.凝集强度为±～1+者,滴加盐水假凝集可散开,凝集强度为2+w需采用盐水置换或将血标本置37℃孵育15 min,2次离心去除高球蛋白后假凝集才能消散.结论 球蛋白增高的血标本可引起ABO血型正反定型不一致和交叉配血不合,采用盐水置换、血标本置37℃孵育及2次离心等方法,可去除高球蛋白血症对试验的干扰,提高检测结果的准确性.
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HLA-B27抗原检测与基因检测在强直性脊柱炎诊断中的应用
目的 研究强直性脊柱炎(AS)中HLA-B27抗原表达与基因亚型分布特点,探讨HLA-B27抗原和基因检测在AS诊断中的应用价值.方法 收集103例AS患者及105例健康人群对照静脉全血,分别采用流式细胞术(FCM)及基于序列分析的PCR分型法(PCR-SBT)检测HLA-B27.结果 FCM检测HLA-B27诊断AS的灵敏度和特异度分别为97.09％和92.38％,PCR-SBT诊断AS的灵敏度和特异度为96.12％和97.14％.AS组HLA-B位点等位基因检出频率以B27高.结论 HLA-B27抗原和基因检测对AS诊断均具有较高价值.FCM检出灵敏度略高于PCR-SBT,但特异度低于PCR-SBT.
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糖尿病肾病患者Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2)活性增强参与代谢综合征多组分聚集状态形成
目的 探讨终末期2型糖尿病肾病(DN)患者Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2)活性及其与代谢综合征(MS)多组分聚集状态的关系.方法 募集维持性血透治疗超过3个月病情稳定的DN患者30例、单纯2型糖尿病(T2D)患者30例和健康对照30例.Ficoll-泛影葡胺密度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),实时荧光定量PCR检测ILC2相关的视黄酸受体相关孤核受体α(RORα)、白细胞介素17受体B(IL17RB)、IL-33受体T1/ST2、IL-5、IL-13的mRNA水平;流式细胞术检测PBMC中ILC2的百分比;ELISA检测血浆IL-5、IL-13水平;计算3组受试对象MS发生率、组分个数;Pearson法分析各组分与ILC2相关因子的相关性.结果 单纯T2D和DN患者的腰围、空腹血糖、收缩压、舒张压、甘油三酯及MS组分数均升高,MS发生率分别为46.67％和86.67％.DN患者ILC2的比例增加,ILC2相关转录因子RORα及膜受体T1/ST2的mRNA表达水平均升高,且与IL-5和IL-13的表达水平呈正相关.此外,DN患者PBMC的IL-13 mRNA水平与收缩压、血浆总胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇水平呈正相关,ILC2膜受体T1/ST2与低密度脂蛋白-胆固醇水平也呈正相关.结论 维持性血透治疗的DN患者比单纯T2D患者存在更明显的MS多组分聚集现象,ILC2活性增强可能通过对血压及脂质代谢的影响参与糖尿病肾病患者MS状态的形成.
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小鼠抗人FOXO3保守区多克隆抗体的制备和鉴定
目的 纯化叉头盒蛋白O3(FOXO3)基因保守区蛋白,并制备其多克隆抗体.方法 利用生物信息学分析预测FOXO3蛋白的保守区,通过PCR扩增编码FOXO3蛋白第290～ 472位氨基酸DNA片段并克隆至pET28a原核表达载体中,转化到大肠杆菌BL21,诱导表达并获得可溶性蛋白,经镍离子柱亲和纯化,免疫小鼠制备抗血清,随后采用ELISA、Western blot法和免疫沉淀实验检测抗体的效价、特异性以及应用范围.结果 成功构建表达载体pET28 a-FOXO3 (aa290-472),实现可溶性FOXO3蛋白的表达和抗体制备.SDS-PAGE和Western blot实验结果证实,FOXO3蛋白与预期结果一致,抗血清能够特异性地识别原核、真核FOXO3蛋白以及其天然抗原表位.结论 成功制备了小鼠抗人FOXO3的多克隆抗体,且抗体对内源性FOXO3具有较好的反应性和特异性.
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肝内巨噬细胞在糖脂代谢调节中的作用
免疫细胞参与机体糖脂代谢的调节,特别是组织内巨噬细胞的活化和募集,参与肥胖状态下组织炎症和胰岛素抵抗的发生和发展.肝脏是机体糖脂代谢的重要器官,肝内巨噬细胞与肝脏内的糖脂代谢紊乱存在直接关系.无论肝脏固有的库普弗细胞还是循环中募集而来的巨噬细胞的活化、极化和自噬等改变,都会通过激活炎症信号通路抑制胰岛素信号转导,影响肝脏胰岛素敏感性,造成糖脂代谢异常改变.深入了解肝内巨噬细胞在糖脂代谢中的作用机制,有助于探索相关代谢性疾病新的治疗方向.
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小鼠B细胞亚群增龄变化的研究进展
机体的免疫包括固有免疫和适应性免疫,适应性免疫占据很重要的地位,主要有B和T细胞参与,其中B细胞在适应性免疫中发挥重要的作用.随着对B细胞研究的深入,发现不同月龄的小鼠中,B细胞数量、亚群及功能随月龄的改变表现出特征性的动态变化,这些动态变化主要通过细胞和分子水平导致B细胞分化受损,影响机体的免疫功能.小鼠B细胞亚群在衰老过程中的变化,为特异性免疫应答功能的进展等研究提供了基础,也为人类疾病治疗与预防发挥着越来越重要的作用.
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结核分枝杆菌调控宿主细胞自噬的分子机制研究进展
自噬是真核细胞在进化上较为保守的一种胞内降解系统,能够有效清除衰老细胞器、错误折叠的蛋白、入侵的病原微生物等.结核分枝杆菌(MTB)是结核病的病原菌,为胞内寄生菌,可逃避宿主免疫防御屏障而在巨噬细胞中存活.自噬信号的缺乏和抑制是MTB逃逸巨噬细胞免疫识别和杀伤的关键因素之一.MTB的脂类、蛋白质、核酸以及宿主免疫应答产生的抗MTB因子均参与调控巨噬细胞自噬.
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泛素样含PHD和环指域蛋白1(UHRF1)的功能及其参与肿瘤发生发展机制的研究进展
泛素样含PHD和环指域蛋白1(UHRF1)是UHRF家族的重要成员.生理情况下,UHRF1参与调节淋巴细胞的发育和功能,并在维持子细胞的甲基化状态、细胞生长以及维持基因组稳定等方面也发挥重要作用.UHRF1在多种肿瘤中呈高表达,且其表达与患者的临床病理特征及不良预后密切相关.UHRF1可通过表观遗传学机制对多种肿瘤抑制基因的表达调控而实现对肿瘤细胞的生长、侵袭转移、氧化应激及DNA损伤修复等特性的调节.鉴于UHRF1在肿瘤中的特异性高表达及对细胞生长的重要作用,UHRF1有望作为抗肿瘤治疗的有效靶点.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
