细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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维替泊芬通过下调Yes相关蛋白表达抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖及侵袭和迁移
目的 探讨维替泊芬对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 选取对数生长期的MDA-MB-231细胞,随机分为对照组和维替泊芬处理组.先采用CCK-8法确定维替泊芬对MDA-MB-231细胞增殖抑制的低抑制浓度,而后采用4 μmol/mL维替泊芬处理MDA-MB-231细胞,采用TranswellTM侵袭实验检测细胞的侵袭能力,采用划痕实验检测细胞迁移能力;采用Western blot法检测(0、4、8、12、16) μmol/mL维替泊芬对MDA-MB-231细胞中增殖相关蛋白c-MYC、细胞周期蛋白D1 (cyclin Dl)、Yes相关蛋白(YAP)及其靶基因富半胱氨酸蛋白61 (CYR61)和结缔组织生长因子(CTGE)的蛋白表达水平.结果 维替泊芬明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖,且呈剂量依赖性,低抑制浓度为4 μmol/mL.4μmol/mL维替泊芬显著抑制MDA-MB-231细胞的侵袭及迁移.维替泊芬下调MDA-MB-231细胞中增殖相关蛋白c-MYC、细胞周期蛋白cyclin D1及YAP、CYR61和CTGF的蛋白表达水平.结论 维替泊芬通过下调YAP及其靶基因CYR61、CTGF表达显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭及迁移.
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胎鼠皮肤来源肥大细胞的分离培养和鉴定
目的 分离并诱导培养胎鼠皮肤来源肥大细胞.方法 分离14～16 d胎鼠皮肤细胞并加入重组小鼠白细胞介素3(IL-3)和重组小鼠干细胞因子共同诱导其中的肥大细胞分化成熟.细胞培养14 d后,经密度梯度离心法得到成熟肥大细胞.采用甲苯胺蓝染色或类胰蛋白酶免疫荧光细胞化学染色检测判断肥大细胞纯度,流式细胞术检测IgE的高亲和力受体(FcεRI)和CD117进一步鉴定肥大细胞纯度.结果 培养14 d并纯化后,细胞经甲苯胺蓝及免疫荧光染色可见胞质内大量颗粒,FcεR I+CD117+细胞达97％.结论 成功从胎鼠皮肤分离并获得大量高纯度成熟的肥大细胞.
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18β-甘草次酸哌嗪衍生物A30抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖
目的 研究18β-甘草次酸(18β-GA)哌嗪衍生物A30抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖的机制.方法 实验分为对照组、18β-GA组、A30组,采用MTT法检测SMMC-7721细胞增殖,流式细胞术检测SMMC-7721细胞凋亡和细胞周期,Westernblot法检测胱天蛋白酶8(caspase-8)和Bcl2蛋白水平.结果 (2～ 128) μg/mL A30均可抑制SMMC-7721细胞的增殖,呈剂量依赖性.18β-GA和A30均可诱导SMMC-7721细胞凋亡,并且A30处理细胞的凋亡率显著高于18β-GA组.与对照组相比,18β-GA和A30组的G2/M期细胞显著增加,caspase-8蛋白水平均显著升高,而Bcl2水平均显著降低.结论 A30能抑制SMMC-7721细胞增殖,抑制效果强于18β-GA,与降低细胞Bcl2水平和增加caspase-8水平有关.
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金黄色葡萄球菌通过TLR2/PI3K信号诱导巨噬细胞的炎症反应和自噬
目的 探究巨噬细胞表面Toll样受体2(TLR2)在介导金黄色葡萄球菌(SA)诱导哮喘炎症反应中的分子机制.方法 通过SA刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞系建立炎症反应模型,分别用TLR2小干扰RNA(siRNA)和磷脂酰肌醇3激酶(PBK)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理.Western blot法检测细胞裂解液中TLR2、髓样分化因子88(MyD88)、PI3K、核因子κBp65(NF-κBp65)磷酸化的NF-κBp65(p-NF-κBp65)以及自噬蛋白beclin-1和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的水平,ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的分泌水平,激光共聚焦显微镜观察自噬溶酶体的数量.结果 SA刺激巨噬细胞活化TLR2等多种信号通路.TLR2 siRNA显著抑制PI3K、p-NF-κBp65以及自噬蛋白beclin-1和LC3B的表达,此外,自噬溶酶体的数量和TNF-α和IL-6的分泌也显著减少.3-MA在抑制自噬和炎症反应方面与ⅡR2 siRNA的作用效果相同.结论 TLR2通过PI3K信号通路调控金黄色葡萄球菌诱导巨噬细胞的炎症反应和自噬.
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敲低转移黏附蛋白(MTDH)基因抑制SGC7901细胞增殖及迁移
目的 通过小干扰RNA技术(RNAi)敲低胃癌SGC7901细胞转移黏附蛋白(MTDH)即星形细胞上调基因1(AEG-1),并探讨其对SGC7901细胞增殖和迁移的影响.方法 构建MDTH短发夹RNA (MTDH-shRNA)质粒并转染SGC7901细胞,Western blot法检测SGC7901细胞MTDH蛋白水平.敲低SGC7901细胞MTDH水平后,MTT法检测细胞增殖情况,TranswellTM小室检测SGC7901细胞迁移能力.结果 MTDH-shRNA转染SGC-7901胃癌细胞后,可明显敲低细胞中MTDH蛋白水平.敲低SGC7901细胞MTDH水平后,细胞的增殖和迁移能力均显著降低.结论 敲低SGC7901细胞MTDH水平可抑制SGC-7901胃癌细胞的增殖和迁移.
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丙酮酸通过抑制p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化减轻低氧对PC12细胞的损伤
目的 观察丙酮酸对低氧诱导神经细胞损伤的保护作用及机制.方法 采用丙酮酸处理PC12细胞,10 mL/L O2的低氧环境暴露12、24、48 h.MTT法观察细胞增殖情况,检测胱天蛋白酶3(caspase-3)活性观察细胞凋亡情况,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,Western blot法检测p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化的p38MAPK (p-p38MAPK)蛋白水平.结果 低氧暴露24、48 h,抑制PC12细胞增殖,caspase-3活性增强,IL-1β、IL-6、TNF-α和p-p38MAPK水平增高;丙酮酸处理可显著增加PC12细胞增殖,减少细胞凋亡,降低IL-1β、IL-6、TNF-α水平,抑制p38MAPK的磷酸化水平.结论 丙酮酸通过抑制p38MAPK的磷酸化而抑制低氧暴露引起PC12细胞炎症因子的表达,对低氧暴露导致的神经元损伤起保护作用.
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四川新康温石棉通过活性氧/c-Jun氨基末端激酶(ROS/JNK)通路诱导A549细胞凋亡
目的 研究活性氧/c-Jun氨基末端激酶(ROS/JNK)途径在四川新康温石棉诱导A549人肺上皮细胞凋亡过程的作用.方法 采用(12.5、25、50、100、200) μg/mL温石棉作用A549细胞24h,MTT法检测细胞存活率;设置ROS抑制组,异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinV-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡、JC-1标记检测线粒体膜电位、二氯二氢荧光黄乙酰乙酯(DCFH-DA)负载检测ROS水平,Western blot法检测磷酸化的c-JNK1(p-JNK1)、p-JNK2、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)蛋白水平.结果 随着温石棉剂量增大,细胞存活率下降,温石棉半数抑制剂量为223.43 μg/mL;细胞凋亡率呈现剂量-效应关系,胞内ROS水平升高,p-JNK1、p-JNK2、c-caspase-3蛋白水平明显上调,线粒体膜电位降低;与相同剂量温石棉组比较,ROS抑制剂能显著抑制细胞凋亡,降低ROS水平,减少线粒体膜电位的降低程度,并下调p-JNK1、p-JNK2和c-caspase-3蛋白的表达.结论 四川新康温石棉可能通过ROS/JNK途径诱导A549细胞发生凋亡.
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组织化学染色与免疫电镜双标记方法在检测大鼠脑干前包钦格复合体细胞色素氧化酶活性中的应用
目的 研究脑干前包钦格复合体(pre-B(o)tC)细胞色素氧化酶(COX)的活性变化.方法 采用COX的组织化学染色与pre-B(o)tC的标记物神经激肽1受体(NK1 R)纳米金-银加强免疫组织化学染色双标法,进行pre-B(o)tC特定神经核团尤其是不同亚细胞结构的COX活性检测,并进行COX活性的半定量分析.结果 光镜下NK1R免疫反应性(NK1 R-ir)产物主要分布于pre-B(o)tC神经细胞膜,清晰勾勒神经元轮廓,COX组织化学染色呈棕色,弥漫表达于NK1 R-ir神经元胞质及突起内.电镜下NK1 R-ir金颗粒主要分布于pre-Bt(o)tC神经元胞体和树突膜内表面,胞质内也可见金颗粒标记.pre-B(o)tC神经元不同亚细胞结构(胞体、轴突终末、树突)线粒体的形状和分布均有不同,在胞体和轴突终末线粒体多为圆形和椭圆形,在树突则以长杆状线粒体多见,胞体线粒体多为管泡状嵴,而板层嵴线粒体以轴突终末和树突多见.轴突终末内线粒体多聚集分布,树突内线粒体多近胞膜散在分布,但在突触部位,线粒体分布密集,且局部膨大接近突触后膜,这与突触的信息传递功能需要大量ATP产生密切相关.COX活性反应产物分布于线粒体嵴上,线粒体嵴电子密度不同表明COX活性不同.轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体.结论 pre-B(o)tC神经元不同亚细胞结构能量代谢不同,其中轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体,尤其突触部位线粒体分布密集,且表达高COX活性.将COX组织化学技术和免疫电镜技术相结合,为检测区域性COX活性,尤其是区域内不同亚细胞结构的COX活性提供了新方法.
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Raf-1磷脂酸结合结构域(Raf-1-PABD)融合蛋白的表达及其对细胞内磷脂酸的示踪作用
目的 构建示踪细胞内磷脂酸的工具.方法 人Raf-1基因磷脂酸结合结构域(Raf-1-PABD)能特异性结合磷脂酸,通过PCR和酶切Raf-1-PABD序列,并连接至带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签的载体,测序鉴定正确后,细胞转染pcDNA3.0-mitoPLD-HA质粒表达线粒体磷脂酶D(mitoPLD)产生大量磷脂酸,同时以Raf-1-PABD-EGFP融合蛋白结合产生的磷脂酸以示踪细胞内磷脂酸的量以及细胞内磷脂酸的改变.结果 重组工具载体pEGFP-C1-Raf-1-PABD(磷脂酸结合蛋白)构建并成功表达,可示踪线粒体融合过程中磷脂酸的改变.结论 成功构建了示踪细胞内磷脂酸水平的pEGFP-C1-Raf-1-PABD的载体,将其转染NIH3T3细胞进行表达,可用于细胞内线粒体中磷脂酸的示踪.
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肝癌细胞内HAb18G/CD147信号转导通路关键分子的筛选
目的 筛选肝癌细胞内HAb18G/CD147信号转导通路中差异表达的关键分子.方法 提取SMMC-7721细胞和T7721细胞(SMMC-7721经稳定转染并高表达HAb18G/CD147的肝癌细胞),应用信号转导相关基因芯片筛选两种肝癌细胞内差异表达的关键分子.结果 基因芯片结果显示共有13个差异表达的基因,在高表达HAb18G/CD147的T7721细胞系中,表达下调的基因包括:骨形成蛋白(BMP)家族的BMP-2、BMP-5,内皮素1(ET-1),结缔组织生长因子-富含半胱氨酸血管生成诱导物61-肾母细胞瘤过表达基因(CCN)蛋白家族的WISP-2(Wnt1-induced signaling proteins-2/CCN5)和富含半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich 61/CCN1),前列腺干细胞抗原(PSCA);表达上调的基因包括:白细胞介素10受体α(IL-10Rα),趋化因子家族的IL-6、IL-8和CXC趋化因子配体2(CXCL2/GROβ),线粒体超氧化物歧化酶2(SOD2),B因子(Bfactor)和转化生长因子β(TGF-β)诱导基因克隆3(βig-h3)的表达.结论 共筛选出HAb18G/CD147信号转导通路相关的13个差异表达基因,这些基因与肝癌细胞免疫微环境重塑、血管形成、增殖、侵袭和迁移等生物学过程相关.
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敲低细胞分裂周期基因20(CDC20)抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡
目的 观察细胞分裂周期基因20 (CDC20)在乳腺癌组织中的表达水平及其与肿瘤患者预后的关系,明确CDC20蛋白对乳腺肿瘤增殖和细胞凋亡的影响,分析CDC20影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制.方法 利用Oncomine肿瘤数据库分析CDC20在乳腺肿瘤与正常组织中的表达差异,利用Kaplan-Meier Plotter肿瘤预后评价数据库分析CDC20表达水平与乳腺癌患者预后的关系.采用慢病毒介导的短发夹RNA (shRNA)下调MCF7细胞和T47D乳腺癌细胞中CDC20的水平,Westernblot法分析CDC20下游分子细胞死亡Bcl2相互作用中介体(Bim)和P21表达水平的变化.MTT法检测乳腺癌细胞的增殖,Western blot法检测乳腺癌细胞裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)蛋白水平.结果 与正常乳腺组织相比,Oncomine肿瘤数据库分析结果显示CDC20在多种类型的乳腺癌样品高表达;Kaplan-Meier Plotter肿瘤预后评价数据库分析结果显示CDC20的高表达是患者预后不良的独立预测指标;敲低CDC20水平后,可明显抑制乳腺癌细胞的增殖、c-caspase-3水平增加,上调Bim和P21的表达.结论 敲低CDC20后,可上调P21和Bim蛋白水平并抑制乳腺癌细胞的增殖和诱导其凋亡.
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敲低核蛋白1(NUPR1)基因抑制人U266多发性骨髓瘤细胞增殖并促进其凋亡
目的 构建核蛋白1-短发夹RNA(NUPR1-shRNA)慢病毒载体定向敲低NUPR1基因,研究NUPR1基因下调对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖及凋亡的影响.方法 以正常浆细胞为对照,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测骨髓瘤U266细胞和RPMI8226细胞的NUPR1 mRNA水平.设计针对NUPR1基因的shRNA并包装慢病毒载体感染U266细胞,流式细胞术观察转染效率,qRT-PCR、Western blot法验证NUPR1基因干扰效果,CCK-8法及台盼(trypan)蓝染色检测细胞增殖,流式细胞术及Hoechst染色观察细胞凋亡.结果 与正常人浆细胞相比,U266、RPMI8226细胞NUPR1 mRNA水平较高;U266细胞慢病毒感染效率达80％,NUPR1-shRNA慢病毒载体构建成功.敲低NUPR1水平后,U266细胞增殖减弱,抑制率高达(58.71±1.64)％;与阴性对照组和空白对照组相比,敲低NUPR1水平后,U266细胞凋亡率明显增加.结论 敲低U266细胞NUPR1水平后,可明显抑制U266细胞增殖并促进其凋亡.
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重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)的原核表达及纯化
目的 合成重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)蛋白.方法 利用基因工程技术,克隆并重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A盒基因;利用原核表达技术,表达并纯化重组大鼠HMGB1-A盒蛋白,并利用Western blot法进行验证.结果 琼脂糖凝胶电泳分析显示HMGB1-A盒基因大小约为250 bp;重组克隆pUC-A经双酶切鉴定,产物大小约为3000bp、250 bp;重组克隆pGEX-A PCR产物大小约为250 bp.原核表达产物Mr大小约为36 000,与预期一致.结论 成功表达并纯化HMGB1-A盒蛋白.
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Toll样受体家族成员在人肝细胞癌中的表达及其与炎性体因子的相关性
目的 分析Toll样受体(TLR)家族在人肝细胞癌(HCC)中的表达模式,探讨TLR参与肝细胞癌发生发展的可能机制及临床价值.方法 从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载HCC患者的临床数据和基因表达数据,采用生物信息学方法分析TLR家族表达与HCC临床病理学参数的相关性及对预后的影响.结果 与正常组织相比,人HCC组织中除TLR5、TLR7和TLR9以外,其他TLR的表达量均下调;TLR的表达量高低对HCC患者的TNM分期及预后无显著影响.通过TLR与炎性体(inflammasome)相关因子的相关性分析,发现所有的TLR都与胱天蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素1β(IL-1β)呈明显正相关,TLR3与IL-18未显示出明显的相关性,TLR3、TLR4、TER6与含CARD结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)也无明显的相关性.结论 HCC组织部分TLR表达下调,与炎性体相关因子正相关.
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全葡聚糖颗粒促进肿瘤微环境驯化的小鼠树突状细胞成熟并抑制调节性T细胞分化
目的 体外模拟肿瘤微环境驯化免疫抑制性树突状细胞(TEDC),研究全葡聚糖颗粒(WGP)对其免疫功能的影响.方法 采用重组小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)法诱导C57BL/6小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC),同时加入白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)共培养,诱导得到TEDC,再加入WGP激发2d.磁珠分选出OT-Ⅱ小鼠淋巴结和脾脏中的CD4+T细胞,加入特异性抗原卵清蛋白(OVA),再与TEDC共培养.流式细胞术检测细胞的CD11c、CD86、CD40、CD80、MHC-Ⅱ的水平和CD4+ FOXP3+调节性T细胞(Treg)的分化情况.实时荧光定量PCR检测TEDC的肿瘤坏死因子α(TNF-αt)、IL-12p40、IL-10、IL-6、IL-4、TGF-β1 mRNA水平;ELISA检测TEDC培养上清中的TNF-α、IL-23、IL-12p70、IL-4水平.结果 WGP可以上调TEDC表面MHC-Ⅱ、CD86、CD80和CD40的表达,提高TNF-α、IL-12p40、IL-6水平,降低TGF-β1水平;抑制其诱导CD4+ FOXP3+T细胞分化能力.结论 β-葡聚糖可以改变TEDC的成熟和分化状态,改善其免疫抑制功能.
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X线辐照激活NLRP3炎性体引起损伤肺组织细胞焦亡(pyroptosis)
目的 建立放射性肺损伤模型,研究胱天蛋白酶1(caspase-1)依赖的程序性细胞死亡即细胞焦亡(pyroptosis)在放射性肺炎发病机制中的作用.方法 BALB/c小鼠胸腔15 GyX线辐照5d,处死小鼠.HE染色观察肺组织形态变化,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测辐照后肺组织细胞凋亡情况,Western blot法检测肺组织γ组蛋白2AX(γ-H2AX)、抗原KI-67(ki67)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1和含CARD结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC/TMS-1)的表达情况,实时荧光定量PCR检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18的mRNA水平,采用免疫组织化学染色检测肺组织NIRP3、caspase-1和TMS1的表达情况,使用caspase-1活性检测试剂盒检测caspase-1活性;ELISA检测血清IL-1β和IL-18水平.结果 辐照后小鼠肺泡壁毛细血管扩张充血,炎性细胞浸润,肺泡壁增厚;肺组织细胞TUNEL染色阳性指数升高,γ-H2AX和ki67的表达增强,提示细胞DNA遭到破坏且细胞增殖活性降低;肺组织细胞中IL-6、IL-8、TNF-α和MCP-1 mRNA水平增加;血清IL-1β和IL-18水平增加,肺组织NLRP3、caspase-1、ASC/TMS-1表达水平增加,caspase-1活性增强.结论 辐照后,激活小鼠肺组织NLRP3炎性体诱导肺组织的细胞发生pyroptosis.
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鸟苷酸结合蛋白2调控β-葡聚糖诱导的小鼠树突状细胞成熟
目的 研究鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)对树突状细胞(DC)成熟和功能的影响.方法 通过基因芯片和实时定量PCR研究β-葡聚糖诱导的DC基因的变化情况,转染GBP2小干扰RNA (siRNA),敲低GBP2的表达,流式细胞术检测DC表面CD11c、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)、CD80水平,ELISA检测细胞上清中白细胞介素6(IL-6)、IL-12p70、TNF-α和IL-10水平.T细胞增殖实验检测全葡聚糖颗粒(WGP)刺激的成熟DC在转染GBP2-siRNA后,对卵清蛋白(OVA)特异性CD4+T细胞的促增殖效应.结果 β-葡聚糖诱导后,DC的GBP2mRNA水平显著降低;敲低DC的GBP2水平后,其表面CD11c、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)、CD80水平降低,同时,IL-6、IL-12、TNF-α分泌下降;经WGP刺激的成熟DC在转染GBP2-siRNA后,对OVA特异性CD4+T细胞的促增殖效应降低.结论 GBP2能调控β-葡聚糖诱导的DC成熟,进一步抑制T细胞的增殖.
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白细胞介素9通过激活信号转导子和转录激活子3(STAT3)通路促进胰腺癌细胞的增殖和迁移
目的 探讨白细胞介素9(IL-9)促进胰腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移的作用及机制.方法 体外培养人胰腺癌PANC-1细胞,实验组予(5、10、20) ng/mL IL-9处理24h,对照组不予处理.采用实时定量PCR检测PANC-1细胞白细胞介素9受体(IL-9R)的mRNA水平,CCK-8法检测肿瘤细胞的增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,TranswellTM实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot法检测细胞中信号转导子与转录激活子3(STAT3)及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平.STAT3抑制剂AG490预处理前后,进行IL-9处理,再采用以上方法检测细胞增殖情况以及细胞中STAT3和p-STAT3蛋白水平.结果 IL-9处理后,PANC-1细胞IL-9R mRNA水平增高、细胞增殖、侵袭和迁移能力增强,且这种促进作用随着IL-9剂量的升高而增强,但细胞凋亡率无明显改变.与对照组相比,IL-9处理后PANC-1细胞中的p-STAT3蛋白水平显著增加,但STAT3蛋白水平无明显改变.使用AG490预处理后,IL-9对PANC-1细胞增殖的促进作用减弱,且p-STAT3表达水平显著降低.结论 IL-9促进胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移与STAT3通路激活有关.
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四联活菌制剂增加小鼠脾脏和肠系膜淋巴结多种白细胞介素mRNA合成
目的 探讨四联活菌(保加利亚杆菌、幼儿双歧杆菌、芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌)制剂对小鼠肠道免疫相关分子的影响.方法 将18只BALB/c小鼠随机分成对照组、益生菌培养上清组和菌液组.每只小鼠每天灌胃1次,连续处理1周.实时定量PCR检测脾脏和肠系膜淋巴结组织白细胞介素1α(IL-1α)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12α、IL-17A、IL-17F、IL-10、IL-18和IL-21、α干扰素(IFN-o)、IFN-β、IFN-γ肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)的mRNA水平,ELISA检测血清IL-17A、IL-21水平.结果 与对照组相比,喂食益生菌培养上清组小鼠脾脏组织各种细胞因子的mRNA水平无明显改变,但喂食四联活菌可增加IL-12α、IL-17A、IL-17F和IL-21的mRNA水平;喂食益生菌培养上清和喂食四联活菌均可增加肠系膜组织IL-12α、IL-17F和IL-21的mRNA水平;外周血中IL-17F的水平升高.结论 益生菌处理可增加机体白细胞介素水平.
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DNA羟甲基化酶10-11转位蛋白2(TET2)抑制小鼠巨噬细胞活化和极化
目的 研究DNA羟甲基化酶10-11转位蛋白2(TET2)在巨噬细胞活化和极化中的作用.方法 体外培养RAW264.7巨噬细胞并以100 ng/mL脂多糖(LPS)刺激0、1、2、4、6h,采用实时定量PCR检测TET2 mRNA表达水平;利用小干扰RNA(siRNA)敲低TET2表达,并通过实时定量PCR和Western blot法检测干涉效率;利用siRNA下调TET2表达48 h后,LPS刺激活化4h,通过实时定量PCR和ELISA检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-12的mRNA水平;下调TET2后,用LPS和γ干扰素(IFN-γ)或IL-4刺激巨噬细胞发生M1型极化或M2型极化,通过实时定量PCR检测M1型巨噬细胞极化标志物TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-12和M2型极化标志物甘露糖受体(MR)、精氨酸酶1(Arg-1)、类几丁质酶3样分子1(Ym1)的mRNA水平.结果 LPS刺激巨噬细胞后,TET2mRNA增加,并在2h达到峰值;特定siRNA能有效降低TET2的表达;敲低TET2后,LPS诱导活化的巨噬细胞TNF-α、IL-6和IL-12的mRNA水平均升高;敲低TET2后,TNF-α、iNOS、IL-12和MR、Arg-1、Ym1的mRNA水平在相应刺激后均发生上调.结论 TET2具有抑制LPS诱导的巨噬细胞活化的作用,并在巨噬细胞M1型和M2型极化中发挥抑制作用.
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CD44表达增强促进胃腺癌组织上皮间质转化和肿瘤转移
目的 探讨胃腺癌组织中CD44、上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学Envision染色法检测95例胃腺癌组织中CD44、E-cadherin和vimentin的表达,分析其与临床病理特征的关系,通过Spearman等级相关分析确定CD44与E-cadherin、vimentin的相关性.结果 胃腺癌组织中CD44的表达明显高于癌旁正常组织,CD44的表达越强,肿瘤分化程度越低,越容易发生淋巴结转移.Spearman等级相关分析结果表明CD44的表达与E-cadherin水平呈负相关,与vimentin水平呈正相关.结论 胃腺癌组织中CD44的表达增强促进癌细胞EMT,并与肿瘤的淋巴结转移密切相关.
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微小RNA204(miR-204)低表达与肝细胞癌预后不良相关
目的 研究微小RNA204 (miR-204)在肝细胞癌中的表达及与预后的关系和可能机制.方法 选择50例肝细胞癌患者,收集手术切除后的肝癌细胞以及肝癌旁组织,采用定时定量PCR检测肝细胞癌组织及癌旁组织miR-204的表达,以miR-204表达水平中位数为分界点,观察miR-204的表达与肝细胞癌患者临床病理特征的关系.采用免疫组织化学染色检测Bcl2及SIRT1(sirtuin 1)蛋白的表达,合成miR-204转染SMMC-7721肝癌细胞,MTT法检测细胞增殖,采用PCR检测SMMC-7721细胞的SIRT1与Bcl2 mRNA的水平.结果 HCC组织miR-204水平显著降低;与miR-204低表达的患者相比,miR-204高表达的患者瘤体直径较小(在5 cm)、肿瘤数少、TNM分期较低,与患者年龄、性别、乙型肝炎病毒(HBV)感染情况无关;miR-204低表达组中Bcl2及SIRT1蛋白水平显著高于miR-204高表达组,miR-204与Bcl2及SIRT1的水平呈负相关;miR-204转染SMMC-7721细胞后,过表达miR-204的SMMC-7721细胞SIRT1与Bcl2 mRNA水平不仅显著低于转染阴性对照miRNA的细胞,也显著低于癌旁肝组织SIRT1与Bc12 mRNA水平;与阴性对照组相比,转染miR-204的SMMC-7721细胞的增殖能力明显降低.结论 miR-204低表达肝细胞癌预后不良相关,上调其表达可下调SIRT1、Bcl2水平,抑制肝癌细胞增殖、促进细胞凋亡.
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拟输血患者血型不规则抗体检测结果的回顾性分析
目的 探讨拟输血患者血型不规则抗体的检出及分布情况,以指导临床合理安全用血.方法 应用盐水法、抗人球蛋白法和微柱凝胶技术对58 565例拟输血住院及急诊患者进行血型不规则抗体检测,对阳性结果进一步采用谱细胞进行抗体特异性鉴定.结果 共检出不规则抗体阳性351例,检出率为0.60％ (351/58 565).鉴定出特异性抗体282例,检出率为0.48％ (282/58 565);自身抗体36例,检出率为0.06％ (36/58 565);无法鉴定抗体特异性共33例,占0.06％ (33/58 565).不同性别患者不规则抗体的检出率比较:女性患者222例,阳性率为0.73％(222/30 582)显著高于男性患者129例,阳性率为0.46％(129/27 983).结论 拟输血患者有必要进行不规则抗体筛查和特异性鉴定,避免免疫性输血反应的发生.
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寻常型银屑病皮损组织中存活蛋白(survivin)和STAT2的表达增强且二者呈正相关
目的 探究凋亡抑制蛋白存活蛋白(survivin)与信号转导子和转录激活子2(STAT2)在寻常型银屑病(PV)患者进行期斑块状皮损组织中的表达及其相关性.方法 临床上收集22例PV患者进行期斑块状皮损、非皮损组织以及18例正常皮肤组织.采用实时定量PCR检测皮肤组织中survivin和STAT2 mRNA水平,Western blot法检测皮肤组织中survivin和STAT2蛋白水平;采用免疫组织化学染色法检测皮肤组织中survivin和STAT2表达情况.采用Pearson相关分析确定survivin与STAT2mRNA表达的相关性.结果 银屑病皮损组织中survivin、STAT2的mRNA和蛋白水平均高于银屑病非皮损组织和正常皮肤组织,且银屑病皮损组织中survivin、STAT2的mRNA表达呈正相关(r=0.5282).结论 Survivin、STAT2在寻常型银屑病皮损组织表达增强且二者mRNA表达水平呈正相关.
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人神经菌毛素1的b1b2结构域(HuNRP1b)蛋白单克隆抗体的制备
目的 制备人神经菌毛素1的b1b2结构域(HuNRP1b)蛋白,研制抗HuNRP1b单克隆抗体(mAb).方法 将HuNRP1 b的编码基因克隆入pET22b载体,构建重组表达质粒pET-HuNRP1b,经酶切、测序鉴定正确后转化大肠杆菌并进行诱导表达,SDS-PAGE分析重组HuNRP1 b蛋白(rHuNRP1 b,His-HuNRP1 b)的表达.将获得的His-HuNRP1 b免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,以融合表达可溶性标签“触发因子”(TF)的重组蛋白TF-HuNRP1 b建立检测抗HuNRP1bmAb的间接ELISA,筛选阳性杂交瘤细胞株;以ELISA、Western blot法分析mAb的特异性,以间接免疫荧光法(IFA)鉴别mAb识别天然蛋白的能力.结果 His-HuNRP1b得到成功表达;获得2株稳定分泌抗HuNRP1bmAb的细胞株(1A10、6A2).Western blot结果显示mAb与表达rHuNRP1b的重组菌反应,分别在相对分子质量(Mr)34 000(His-HuNRP1b)及Mr89 000 (TF-HuNRP1b)处出现特异性条带,而与空载体表达菌不反应,说明mAb特异性针对rHuNRP1b;IFA结果表明,所获得的mAb能够识别乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞表面表达的天然HuNRP1蛋白,说明mAb具有识别天然的HuNRP1的能力.结论 成功制备了小鼠抗HuNRP1b mAb.
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多发性硬化发病中CD4+T细胞亚群及相关细胞因子作用的研究进展
多发性硬化(MS)是一种以中枢神经白质脱髓鞘为主要病理特点的自身免疫性疾病.既往观点认为与1型辅助T(Th1)细胞、Th17细胞及Th2细胞和调节性T细胞之间的失衡相关,目前发现Th9细胞、Th22及滤泡性辅助性T(Tfh)细胞也与MS发病相关.
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蠕虫感染通过调节免疫细胞影响炎症性肠病的研究进展
炎症性肠病(IBD)是一种慢性、反复性发作的肠道炎症反应失调性疾病.蠕虫及其虫源性蛋白对多种IBD动物模型具有预防和治疗作用,主要通过调节淋巴细胞的分化诱导2型辅助T(Th2)细胞免疫应答,并联合调节性T细胞(Treg)和调节性B细胞(Breg)抑制Th1细胞和Th17细胞免疫反应来有效抑制肠道炎症并进行组织修复.此外,蠕虫还可以调节固有免疫细胞如髓源性抑制细胞、巨噬细胞和树突状细胞(DC)的功能来影响IBD的发生及发展.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
