细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子: 0.81
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1007-8738
- 国内刊号: 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠免疫耐受的机制
目的 探讨可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠免疫耐受的机制.方法 将EAE小鼠随机分为MOG肽治疗组、卵清蛋白(OVA)处理组和对照组,分别于EAE诱导的第6~16天腹腔注射MOG肽、OVA肽和同等剂量的PBS,通过比较各组小鼠临床评分,脾脏(SP)大小,脾脏和中枢神经系统(CNS)的脑和脊髓浸润淋巴细胞数,流式细胞术分析T细胞表型及其功能,探讨T细胞迁移在可溶性MOG肽诱导的EAE免疫耐受中的作用;流式细胞术分析脾脏、CNS浸润CDllb+抗原提呈细胞(APC)的成熟,免疫荧光技术分析成熟APC与效应性CD4+T细胞的相互作用,研究成熟APC在T细胞迁移中的作用.结果 腹腔注射可溶性MOG肽可抑制脾脏内的效应性T细胞向CNS迁移,并诱导脾脏APC成熟,抑制CNS浸润APC成熟;MOG肽诱导的成熟APC可与MOG反应性CD4+T细胞相互作用并聚集在一起,进而抑制效应性T细胞的迁移.结论 可溶性MOG肽通过诱导脾脏APC成熟,成熟APC与MOG-T细胞相互作用,抑制脾脏MOG-T细胞向CNS迁移,诱导EAE免疫耐受.
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Sestrin2(SESN2)通过激活蛋白激酶B促进肝癌细胞索拉非尼原发性抵抗
目的 探讨sestrin 2 (SESN2)在肝癌细胞索拉非尼原发性抵抗中的作用和机制.方法 实时定量PCR和Western blot法检测Bel-7404、SNU-398、HLE、HLF、Hep3B肝癌细胞系中SESN2 mRNA和蛋白水平,免疫组织化学染色检测肝癌组织中SESN2的表达.分别用(0、2、5、10、15、20、25) μmol/L索拉非尼处理上述肝癌细胞24h,采用CCK-8法检测肝癌细胞增殖活性并计算索拉非尼半数抑制浓度(IC50),(0、2、4、6、8)μmoL/L索拉非尼刺激Bel-7404、SNU-398肝癌细胞24h,检测癌细胞SESN2 mRNA和蛋白水平;采用SESN2的特异性小干涉RNA(siSESN2)敲低Bel-7404、SNU-398肝癌细胞的SESN2水平,再分别用(0、8) μmol/L索拉非尼刺激24h,CCK-8法检测细胞增殖活性、流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测蛋白激酶B(A KT)、磷酸化AKT(p-AKT)水平.结果 与正常肝细胞和癌旁肝组织相比,肝癌细胞系和肝癌组织中SESN2水平升高,且癌细胞中SESN2水平与索拉非尼IC50呈正相关;索拉非尼刺激Bel-7404、SNU-398肝癌细胞后,癌细胞SESN2水平升高,AKT信号活化;敲低Bel-7404、SNU-398肝癌细胞的SESN2水平,可进一步抑制细胞增殖活性、促进细胞凋亡、抑制AKT磷酸化.结论 SESN2可通过激活AKT信号促进肝癌细胞索拉非尼原发性抵抗.
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一氧化氮抑制大鼠T淋巴细胞TNF-α和IL-6的释放并下调连接子蛋白40(Cx40)水平
目的 探讨一氧化氮(N0)对淋巴细胞上连接蛋白40(Cx40)表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)释放的影响.方法 取WKY大鼠腹主动脉外周血,收集淋巴细胞进行体外培养,分为对照组、伴刀豆球蛋白A(ConA)处理组、ConA联合NO处理组.ELISA检测培养基上清中TNF-α和IL-6水平,免疫荧光技术检测淋巴细胞Cx40的表达和分布,流式细胞术检测淋巴细胞Cx40表达频率的变化,Western blot法检测淋巴细胞Cx40的蛋白水平.结果 与对照组相比,ConA处理组TNF-α和IL-6水平升高,ConA联合NO处理组较ConA处理组降低;Cx40表达在淋巴细胞的细胞质和细胞核,与对照组相比,Cx40蛋白表达水平和表达频数均增加,与ConA处理组淋巴细胞相比,ConA联合NO处理组Cx40蛋白表达水平和表达频数均明显降低.结论 NO抑制促炎因子TNF-α和IL-6释放,同时伴随下调淋巴细胞上Cx40的表达,提示Cx40可能参与NO的抑炎作用.
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靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
目的 制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用.方法 将scFv基因插入至pFuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯化系统纯化;将纯化的Met-scFv进行功能性检测:ELISA检测Met-scFv亲和力;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色检测Met-scFv识别并结合肺腺癌细胞的特性;CCK-8法检测Met-scFv对细胞增殖的影响;通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC),用乳酸脱氢酶(LDH)释放试剂盒检测Met-scFv对靶细胞A549细胞的毒性影响.结果 ELISA结果提示,Met-scFv与c-Met呈量效关系;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色实验结果提示,与对照组相比,Met-scFv组信号呈阳性,提示Met-scFv与A549细胞特异性结合;Met-scFv抑制A549细胞增殖并产生细胞毒性,且毒性大小与Met-scFv剂量呈正相关.结论 制备出靶向c-Met蛋白的Met-scFv,并可在体外识别并介导杀伤A549细胞.
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MALAT1抑制Aβ25-35诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖并促进细胞凋亡及其机制
目的 探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)神经细胞的细胞周期、细胞增殖凋亡的影响.方法 利用β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)处理人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y建立AD细胞模型.将AD SH-SY5Y细胞随机分为对照组、pCDH空载体(pCDH-EV)组、MALAT1过表达(pCDH-MALAT1)组、抑制表达空载体(pSICOR-EV)组、抑制MALAT1表达(pSICOR-shMALAT1)组.噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测转染48 h后的细胞周期和细胞凋亡率,Western blot法检测细胞BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的PI3K (p-PI3K)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化的mTOR(p-mTOR)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、磷酸化的GSK3β(p-GSK3β)蛋白水平.结果 成功构建AD细胞模型和过表达及敲低MALAT1的表达载体.敲低MALAT1水平后,显著抑制AD模型细胞的增殖、细胞阻滞于G1期、促进细胞凋亡.同时上调BAX、caspase-3蛋白水平,下调Bcl2、p-PI3K、p-mTOR、p-GSK3β蛋白水平.过表达MALAT1则可逆转以上作用.结论 敲低MALAT1水平可阻断PI3K/mTOR/GSK3β通路抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞增殖,促进细胞凋亡.
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NLRP1炎性体促进高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡
目的 研究含pyrin结构域NOD样受体家族1(NLRP1)炎性体对高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡(pyroptosis)的调控作用.方法 将培养的人肾小球系膜细胞(HRMC)分为4.5 mg/mL葡萄糖处理的高糖组和10 μg/mL胰岛素处理的高胰岛素组,分别处理0、12、24、48、72、96 h.在各时间点,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞焦亡,实时定量PCR检测HRMC的NLRP1、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TTNF-α)和胱天蛋白酶1前体(pro-caspase-1)的mRNA水平,Western blot法检测NLRP1、IL-1β、TNF-α、caspase-1的蛋白水平;高糖高胰岛素培养的HRMC中转染NLRP1小干涉RNA(siNLRP1),采用以上方法检测上述指标的变化情况.结果 高糖高胰岛素处理48 h后,HRMC增殖能力下降、焦亡细胞数目显著增加,NLRP1、pro-IL-1β、TNF-α和pro-caspase-1 mRNA和NLRP1、IL-1β、TNF-α和caspase-1蛋白水平均显著增加;siNLRP1下调HRMC中NLRP1水平后,高糖高胰岛素培养的HRMC细胞焦亡减少,IL-1β、TNF-αt和caspase-1表达显著降低.结论 高糖高胰岛素处理促进NLRP1的激活从而增加肾小球系膜细胞焦亡和炎症反应,下调NLRP1的表达可抑制高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡和炎症反应.
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抑制Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)通路加重鲍曼不动杆菌感染大鼠的炎症
目的 利用Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242处理大鼠,检测鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染过程中TLR4的作用.方法 将健康雄性SD大鼠分为正常对照组、TAK-242处理组、A.baumannii接种组以及TAK-242和A.baumannii联合处理组.TAK-242处理组大鼠通过尾静脉注射TAK-242(1 mg/kg),感染大鼠通过气道接种方法接种A.baumanniio于接种后72 h,取肺组织匀浆后接种至LB培养基,进行肺组织细菌计数;HE染色观察肺组织炎症变化.收集支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平.分离外周血单个核细胞(PBMC),Western blot法检测PBMC中磷酸化核因子κBp65(p-NF-κBp65)的蛋白水平.结果 免疫功能正常的大鼠感染A.baumannii72 h后,肺内细菌基本被清除,而TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后,肺中细菌计数显著增加;正常大鼠感染后,肺部有轻微炎症,TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后肺部炎症较为明显;TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后,TNF-α和IL-6增加幅度小于正常感染组大鼠;正常大鼠感染A.baumannii 72 h后,PBMC中p-NF-κBp65蛋白水平升高,而经过TAK-242处理的大鼠感染后,PBMC中p-NF-κBp65的水平升高不明显.结论 抑制TLR4/NF-κB通路引起大鼠A.baumannii感染加重.
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鲍曼不动杆菌通过活化血小板激活因子受体引起感染人支气管上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡
目的 探讨血小板激活因子受体(PAFR)在鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染人支气管上皮(HBE)细胞过程中的作用.方法 HBE细胞分为对照组、银杏内酯B(GB)处理组、A.baumannii感染组、A.baumannii感染联合GB处理组.使用临床分离的A.baumannii感染HBE细胞,GB处理组分别用1×103 CFU/mL、1×105 CFU/mL和1×107 CFU/mL的A.baumannii感染HBE细胞,A.baumannii感染联合GB处理组则先用10 μmol/L GB阻断PAFR活性而后进行1×103 CFU/mL A.baumannii感染.采用Western blot法检测HBE细胞PAFR、磷酸化的Janus激酶1(p-JAK1)、磷酸化的信号转导子与转录激活子1(p-STAT1)的蛋白水平,使用CCK-8法检测细胞增殖能力,使用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测各组细胞氧化应激水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡.结果 与对照组相比,A.baumannii感染的HBE细胞中PAFR蛋白水平显著升高,细胞活力显著下降,细胞内MDA水平和细胞凋亡明显增加,p-JAK1和p-STAT1蛋白水平增加.结论 A.baumannii感染的HBE细胞PAFR活化,激活JAK1/STAT1信号通路促进HBE细胞的氧化应激和细胞凋亡.
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严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)人源性单链抗体文库的构建
目的 构建人源性严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)单链抗体(scFv)文库,并用SFTSV颗粒对文库进行初步筛选.方法 提取8例SFTS恢复期患者外周血淋巴细胞的总RNA,逆转录为cDNA;并以此为模板PCR扩增人源抗体轻链库(Vκ和Vλ)和重链库(VH),再经过重叠PCR随机拼接成scFv基因文库,后克隆入噬菌粒载体pComb3XSS中,将重组噬菌粒电转化感受态XL1-Blue细胞,得到SFTSV抗体文库,检测文库库容及多样性,并用SFTSV颗粒作抗原对抗体文库进行初步筛选.结果 构建的人源SFTSV抗体文库的库容为2.8×10 7,测序结果表明文库多样性好,经过初步筛选获得21个克隆的人源化scFv,具有与SFTSV颗粒结合的活性.结论 成功构建了人源抗SFTSV的scFv文库.
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结核分枝杆菌α晶体蛋白(Rv2031c)的T、B细胞抗原表位在线分析
目的 预测结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白α晶体蛋白(Rv2031c)的抗原表位.方法 BLAST在线分析Rv2031c与人类蛋白的同源性;利用DNAStar软件包中的Protean模块预测其B细胞和T细胞抗原表位;RANKPEP和SYPEPITHI在线预测辅助性T(Th)细胞抗原表位;SYFPEPI、BIMAS和NetCTL方法在线预测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位.结果 Rv2031c与人类蛋白同源性较低,有8个潜在的B细胞抗原表位,7个候选Th细胞抗原表位和3个候选CTL表位.结论 Rv2031c含有较多潜在的人类B细胞、Th细胞和CTL抗原表位,可作为新的结核病疫苗研发的候选靶蛋白.
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抗人球蛋白试验在疑难交叉配血中的应用价值分析
目的 分析抗人球蛋白试验在疑难交叉配血中的应用价值.方法 对96例疑难交叉配血患者血标本进行ABO及RhD血型复检、直接和间接抗人球蛋白试验(抗筛),对直接抗人球蛋白试验阳性的血标本再进行免疫球蛋白分型,对间接抗人球蛋白试验阳性的血标本进行抗体特异性鉴定,查找引起交叉配血不合的原因及处理方法.结果 在96例疑难交叉配血患者血标本中,主侧凝集73例,次侧凝集23例;直接抗人球蛋白试验阳性40例,间接抗人球蛋白试验(抗筛)96例均为阳性,自身对照阳性38例.96例疑难交叉配血患者血标本经抗人球蛋白试验确定为不规则抗体56例,IgG型自身温抗体23例,IgM型冷凝集素15例,未确定特异性2例.结论 抗人球蛋白试验结果显示,不规则抗体、自身温抗体及冷凝集素是引起交叉配血不合的主要原因,不规则抗体以Rh血型抗体为主,采用Rh血型抗原同型输血可降低输血不良反应的发生率.
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Rh缺失型-D-表型的血型血清学检测及其临床意义分析
目的 探讨Rh缺失型-D-表型被检者的血型血清学特征,分析Rh缺失型-D-表型检测及其临床意义.方法 对2例孕妇产前血型血清检测中疑似Rh缺失型-D-表型被检者的血型血清学检测结果及其免疫史进行分析.结果 2例被检者中ABO血型为A型1例、0型1例,Rh血型均为Rh缺失型-D-表型.2例被检者血清抗体筛选、主侧配血在盐水法中不凝集,在微柱凝胶法及抗人球蛋白法中均出现2+ ~3+凝集;与自身细胞及次侧配血在盐水法、微柱凝胶法及抗人球蛋白法中均不凝集.2例被检者中有过流产史或其子女中发生过Rh血型不合新生儿溶血病史,经系列血型血清学检测证实为Rh缺失型-D-表型.结论 Rh缺失型-D-表型可能与RhCE基因异常或基因重组有关,其血清产生的抗Hro抗体可造成流产和新生儿溶血病,在输血相容性检测中也可引起抗体筛选阳性及交叉配血不合.采用血型血清学试验确认Rh缺失型-D-表型及其血清中是否存在不规则抗体对防治新生儿溶血病和输血安全有重要意义.
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兔抗人copine-8蛋白多克隆抗体的制备
目的 制备人源copine-8(CPNE8)蛋白的多克隆抗体.方法 反转录PCR扩增HBE人支气管上皮细胞的CPNE8基因(编码CPNE8蛋白)并克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,所得的重组载体转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白.谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析纯化目的蛋白并基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF)鉴定.以纯化的CPNE8蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.用ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色法检测抗体的效价和特异性.结果 成功构建了pGEX-4T-1-CPNE8表达载体,重组CPNE8蛋白在大肠杆菌中高效表达.ELISA检测结果显示抗体的效价达1∶64 000;此多克隆抗体可经Western blot特异性识别原核表达的CPNE8蛋白,并可适合免疫组织化学技术检测该蛋白在人正常肺组织和肺癌组织中的分布.结论 成功制备具有较好结合特异性的CPNE8蛋白多克隆抗体.
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小鼠抗EV71衣壳蛋白VP1单克隆抗体的制备
目的 制备肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VP1特异性小鼠单克隆抗体(mAb)并检测其特异性.方法 合成编码EV71-VP1的基因并克隆入原核表达质粒pET21a;采用重组表达的VP1免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合并采用ELISA筛选可分泌抗VP1的mAb的杂交瘤细胞株;将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔,采用蛋白G亲和层析法从腹水中纯化mAb,并采用SDS-PAGE和Western blot法检测mAb的纯度和特异性;EV71感染Vero细胞,采用间接免疫荧光细胞化学染色和Western blot法评估所制备mAb识别EV71的能力.结果 成功表达了EV71-VP1,制备出了4株杂交瘤细胞(6E、8D、9F和10C),杂交瘤细胞所分泌的小鼠mAb均可识别EV71.结论 成功制备了小鼠抗EV71衣壳蛋白VP1的mAb.
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多发性骨髓瘤的嵌合抗原受体T细胞治疗研究进展
多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞恶性肿瘤,目前仍无法治愈.嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法是一种前景乐观的MM治疗方法,其作用机制与标准MM治疗方法完全不同.CAR是一种包含抗原识别域和T细胞信号域的融合蛋白,通过基因改造后表达CAR的T细胞可以特异性识别抗原.理想的CAR靶向抗原要求仅在恶性细胞上表达,而正常细胞缺失或少量表达.目前正在研究的作为CAR靶向的MM抗原包括B细胞成熟抗原、CD138、CD38、淋巴细胞激活信号分子7(SLAMF7)、K轻链以及CD19等.MM基因和表型的异质性,使得对MM进行有效治疗的CAR-T需要靶向多个抗原;CAR-T联合其他骨髓瘤治疗也是未来研究的一个重要领域.MM的CAR-T疗法尚处于早期发展阶段,但有望改善MM的治疗.
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嵌合抗原受体NK细胞(CAR-NK)的研究进展
自然杀伤(NK)细胞是一类重要的固有免疫细胞,也是人体抵御病原体入侵和细胞恶变第一道防线的重要组成部分.嵌合抗原受体(CAR)基因修饰细胞是近年来免疫治疗领域的研究热点,关于CAR-T免疫治疗的临床试验已取得了很好的疗效,但也存在一些弊端.CAR介导的NK细胞抗肿瘤活性已有很多报道,包括NK细胞系,从外周血中分离出的NK细胞,以及从人多能干细胞中衍生出的NK细胞.目前也已有CAR-NK临床研究获得批准.我们总结了CAR-NK的相关研究进展.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 |
1995 | 01 02 03 |
1994 | 01 02 |
1993 | 01 02 03 04 |
1992 | 01 02 03 04 |
1991 | 01 02 03 04 |
1990 | 01 02 |
1989 | 01 02 03 04 |