中国病原生物学杂志
Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지
- 主管单位： 中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位： 中华人民共和国卫生部
- 影响因子： 1.21
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-5457/R
- 国内刊号： 王利磊
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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PI3K/AKT/mTOR在华支睾吸虫感染小鼠肝纤维化模型中的表达及意义
目的 探讨脂酰肌3激酶一蛋白激酶B-雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)在华支睾吸虫感染小鼠致肝纤维化作用. 方法 6周龄雌性C3H/HeN小鼠随机分为正常对照组和华支睾吸虫感染组,感染组每只小鼠经口灌胃45个华支睾吸虫囊蚴,对照组每只小鼠经口灌入等量的生理盐水,感染28 d后取出小鼠肝脏组织,Masson染色,观察病理变化;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α-SMA和p-mTOR蛋白的定位与表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测小鼠肝脏组织中α-SMA、COL1和TGF-βmRNA表达水平;Western blot法检测小鼠肝脏组织中TGF-β、α-SMA、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR的蛋白水平. 结果 成功建立小鼠肝纤维化模型.与对照组相比,感染组小鼠肝脏的胶原沉积显著增加,α-SMA及p-mTOR阳性细胞数量显著增多(t=-8.374,P＜0.01;t=-9.545,P＜0.01),α-SMA、COL1、TGF-βmRNA(t=-3.553,P＜0.01;t=-3.448,P＜0.01;t=-3.052,P＜0.01)以及α-SMA、TGF-β、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR的蛋白表达水平显著升高(t=-7.076,P＜0.01;t=-5.054,P＜0.01;t=-6.941,P＜0.01;t=-8.123,P＜0.01;t=-7.445,P＜0.01). 结论 PI3K/AKT/mTOR在华支睾吸虫感染小鼠肝脏高度表达,因此推测该信号通路在华支睾吸虫感染致肝纤维化中发挥重要作用.
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虎纹捕鸟蛛Kunitz型毒素基因的分子改造和表达
目的 构建HW11c40突变体,寻找合适的表达系统表达HW11c40突变体和HWTX-Ⅺ(虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅺ),解决HWTX-Ⅺ来源问题和HW11c40改造后毒素难于获取的难题,为合适HW11 c40突变体的筛选和治疗急性胰腺炎高效新药的研制奠定基础. 方法 用PCR定点突变的方法突变HW11c40相关氨基酸残基,构建HW11c40突变体.HW11c40突变体和HWTX-Ⅺ基因经PCR扩增后插入到pET-40b(+)载体,基因5'端插入肠激酶切割位点,再重组到大肠埃希菌BL21 (DE3)进行原核周质表达,获得相应的融合蛋白并进行SDS-PAGE鉴定,用镍柱纯化融合蛋白.融合蛋白用肠激酶酶切,释放出的目的蛋白用Tricine-SDS-PAGE进行鉴定,用镍柱分离目的蛋白,进行高效液相色谱进行进一步分离纯化后作质谱鉴定.对HW11c40突变体和HWTX Ⅺ的表达时间、温度和IPTG浓度进行优化. 结果 成功获得HW 11 c40的4个突变体,并正确构建HW11c40突变体和HWTX-Ⅺ的原核表达载体.经SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE鉴定,重组质粒转化菌在无IPTG诱导的情况下成功表达所有HW11c40突变体和HWTX-Ⅺ的融合蛋白,经肠激酶酶切均获得对应的目的蛋白,其中HWTX-Ⅺ表达量为3.4 mg/L. 结论 成功构建出HW11c40突变体和HWTX-Ⅺ的重组质粒并在原核细胞内高效表达出相应的目的蛋白,开辟了基因工程表达HWTx-XⅪ的新途径,同时解决了 HW11c40改造后毒素获取难题,突破了整个系列研究的瓶颈,为突变体的筛选及治疗急性胰腺炎高效新药的研制奠定了基础.
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细粒棘球蚴转化生长因子βⅡ型受体胞外域基因的克隆、表达及抗血清制备
目的 构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)转化生长因子β Ⅱ型受体胞外域(Extracellular Domain of Transforming Growth Factor beta type Ⅱ receptor of Eg,EgTβRⅡ-E)原核表达载体,诱导表达融合蛋白并制备其特异性抗体. 方法 采集羊源Eg原头蚴,Trizol法提取总RNA,RT-PCR扩增EgTβRⅡ-E基因,构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,PCR、限制性内切酶双酶切和测序鉴定正确的阳性质粒转入BL21E.coli感受态细胞,IPTG诱导EgTβRⅡ-E融合蛋白表达并免疫小鼠,制备抗血清. 结果 成功构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,经0.6mmol/L IPTG诱导表达18 ku的EgTβRⅡ-E融合蛋白.用融合蛋白免疫小鼠,获得高效价(1∶256 000抗血清). 结论 制备的EgTβRⅡ-E融合蛋白具有抗原性,免疫小鼠获得高效价的抗血清,为研究EgTβRⅡ的生物学功能奠定了基础.
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2013-2015年河南省甲型副伤寒沙门菌分子分型与耐药研究
目的 了解河南省人群感染甲型副伤寒沙门菌的耐药状况与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子型别特征,为甲型副伤寒的疾病监测及其防治策略提供基线数据. 方法 对2013-2015年河南省监测哨点医院分离的67株甲型副伤寒沙门菌采用K-B纸片法检测对13种抗生素敏感性,并进行PFGE分子分型分析. 结果 67株甲型副伤寒沙门菌对8类13种抗生素均有不同程度的耐药,有63株为多重耐药菌株(占94.0％),其中耐2～3种9株(占13.4％),耐5～8种42株(占62.7％),耐9～10种8株(占11.9％),耐11～12种4株(占5.9％).菌株对头孢类、喹诺酮类等5类抗生素耐药率总体呈逐年上升趋势.经XbaⅠ酶切与PFGE电泳分析,67株甲型副伤寒沙门菌共获得10种带型,每种带型包含菌株数1～48株不等,相似度94.31％～100％. 结论 河南省甲型副伤寒沙门菌分离株耐药状况严重,PFGE带型呈多样性且具有一定的优势带型特点,同一PFGE菌株的耐药谱较为接近.
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多维液相色谱质谱组合体系在志贺菌蛋白质组学研究中的应用
目的 建立多维液相色谱质谱组合体系,用以获得福氏志贺菌更完整的蛋白质组信息. 方法 对福氏2a志贺菌301株(Sf2a301)全菌蛋白进行预分离,顺序抽提胞浆蛋白和膜蛋白.应用二维液相色谱基质辅助激光解吸附飞行时间串联质谱(2D LC-MALDI-TOF/TOF)和二维液相色谱电喷雾串联质谱(2D LC-ESI-MS/MS)构成的多维液相色谱质谱组合体系进行蛋白分离和鉴定,分别应用MASCOT和SEQUEST软件搜索NCBI上Sf2a301的蛋白质数据库,并对两种串联质谱的互补性及组合后优势进行分析. 结果 MALDI-TOF/TOF和ESI-MS/MS分别鉴定到Sf2a301株的960个蛋白和729个蛋白,总共鉴定1 231个蛋白;两种技术方法鉴定蛋白质的平均氨基酸序列覆盖率分别为14.3％和13.9％,组合鉴定后覆盖率升高为15.7％.MALDI和ESI两种离子化方式具有互补性,表现为MALDI更倾向于离子化分子质量偏小、碱性、胰酶消化后羧基末端为精氨酸的肽段;ESI更倾向于离子化分子质量偏大、疏水、胰酶消化后羧基末端为赖氨酸的肽段. 结论 应用2D LC-MALDI-TOF/TOF和2D LC-ESI-MS/MS鉴定Sf2a301全蛋白质组,既互相确认又相互补充.多维液相色谱质谱组合体系无论在蛋白质鉴定数量还是可信程度上都优于单一串联质谱,可作为复杂样品的蛋白质组学研究技术平台.
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弓形虫Rhomboid-IL-2基因重组卡介苗的构建及其对犬的免疫效果
目的 构建弓形虫Rhomboid以及犬白介素2基因重组卡介苗,并观察其对免疫犬的免疫效果. 方法 将鉴定正确的弓形虫Rhombiod基因和犬IL-2基因一起克隆到大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体和整合表达载体中,构建重组质粒pMV261(361)-IL2-Rho.将重组质粒转入卡介苗中,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析及Western blot鉴定.分别用重组卡介苗pMV261(361)-IL2-Rho和pMV261 (361)-Rho经皮下免疫犬,检测免疫犬体液及细胞免疫水平变化并观察其存活时间. 结果 成功构建pMV261(361)-IL2-Rho重组质粒,弓形虫Rhomboid基因在重组卡介苗中稳定表达46 ku的目的蛋白,Western blot显示该蛋白能被弓形虫感染鼠血清识别.动物实验表明,rBCGpMV261(361)-IL2-Rho能诱导产生较强的体液免疫和Th1型细胞免疫应答反应,rBCGpMV361-IL2-Rho免疫组感染弓形虫后的存活时间组为(14.40±4.50)d,rBCGpMV261-IL2-Rho免疫组感染弓形虫后的存活时间组为(13.00±4.75)d,较BCG对照组存活时间(8.20±5.45)d有所延长. 结论 rBCGpMV261 (361)-IL2-Rho蛋白具有免疫原性.该重组卡介苗对犬弓形虫感染有一定保护效果.
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内含肽介导的天蚕素AD基因工程表达、其酰胺化及应用
目的 设计、合成天蚕素AD(CAD)基因序列,与内含肽(Intein)融合表达后通过重组蛋白自剪切作用获得C端酰胺化的CAD,并与抗生素配伍使用. 方法 根据大肠埃希菌密码子偏好性对CAD基因序列进行改造,人工合成目的基因,构建重组质粒pCold-SUMO-CAD-Intein,转化大肠埃希菌,诱导表达重组蛋白,经镍柱亲和层析纯化,后用DTT及肠激酶切割,利用分子筛纯化获得酰胺化CAD,并进行电泳及质谱鉴定.采用微量肉汤法检测重组CAD抑菌活性及其与不同抗生素按不同比例配伍使用的抑菌活性. 结果 PCR扩增目的基因片段为132 bp,与预期一致.质谱显示表达的CAD分子质量单位为3.949 ku,与理论值相符.所得CAD抗菌肽对常见革兰阴性菌抗菌力强,配伍抗生素使用能发挥协同抑菌作用. 结论 成功构建CAD基因重组质粒pCold-SUMO-CAD-Intein,通过与内含肽(Intein)融合表达,经分子内的自剪切作用直接获得C末端酰胺化的抗菌肽,与抗生素配伍使用,能显著降低抗生素用量,具有作为抗生素替代物的应用潜力.
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曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)的原核表达、纯化及其免疫原性分析
目的 原核表达、纯化曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白(Sm TCTP),并分析其免疫原性. 方法 构建曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白重组表达质粒pGEX-4T-1-Sm TCTP,转化大肠埃希菌BL21菌株后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达TCTP蛋白,用GST树脂纯化表达产物,并进行SDS-PAGE电泳分析,通过Western blot鉴定重组蛋白的免疫原性. 结果 PCR、双酶切、测序结果均表明pGEX-4T-1-Sm TCTP重组质粒构建成功,并在大肠埃希菌中表达可溶性目的蛋白,经GST树脂纯化后获得高纯度的重组目的蛋白.SDS-PAGE分析表达产物为GST融合蛋白,分子质量单位为45 ku,与Sm TCTP和GST融合蛋白理论分子质量相符.Western blot显示重组融合蛋白能被相应大鼠抗血清识别. 结论 成功进行了Sm TCTP的原核表达并获得纯化的重组蛋白,重组蛋白具有良好的免疫原性,为研究Sm TCTP的功能奠定了基础.
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欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗猪免疫试验效果评价
目的 评价欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18猪体免疫效果. 方法 用鉴定正确的重组腺病毒进行猪免疫试验,通过淋巴细胞亚群检测、细胞因子检测和免疫组化检测分析其免疫效果. 结果 猪淋巴细胞亚群检测显示重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18刺激CD4+和CD8+表达量在21 d、35 d、49 d分别为PBS组的1.53、1.84、1.90倍和1.41、1.76、1.53倍,差异有统计学意义(P＜0.05);ELISA检测pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18免疫猪血清IL-4和IFN-γ水平在14d时的表达量分别是PBS组的1.45和1.46倍(P＜0.05),而在35d时分别是PBS组的1.81和1.79倍(P＜0.05).免疫组化检测免疫猪肺、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴组织病毒量相对于野毒组和PBS组显著减少. 结论 重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18疫苗,具有良好的免疫原性,能提高猪细胞免疫和体液免疫水平.
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单克隆抗体和基因工程抗体在感染性疾病病原体检测中的应用
感染性疾病病原体的准确检测对于其有效防控极为重要,也是合理用药、有效治疗的前提.抗体因其高度的特异性和亲和力,已经成为免疫诊断中一个关键性的分子.其类型多样,从多克隆抗体到单克隆抗体,再发展到基因工程抗体,而基因工程抗体又包括单链抗体、双特异性抗体和多特异性抗体等.各类型抗体在感染性疾病的免疫诊断方面均有应用.本文就单克隆抗体和基因工程抗体在感染性疾病免疫学诊断方面的应用作一综述.
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蝇类携带病原体研究进展
蝇类如家蝇,舍蝇,黑腹果蝇等可机械性传播多种病原体,它们可从污浊的环境如人类粪便、动物排泄物和尸体及垃圾场等地将霍乱菌、志贺菌、沙门氏菌等其他病原体传给人类,引起疾病流行.本文对蝇类机械性和生物性传播细菌、病毒等病原体进行了综述.
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医院常见病原菌双组分系统在耐药机理方面的研究进展
双组分作为细菌体的重要调控系统,帮助细菌适应外界环境变化以保证自身正常生长和繁殖,在细菌生活中意义重大.医院常见病原菌在医院环境中分布广泛,其自身耐药性使抗生素类药物疗效显著降低,导致病原性感染治疗难度加大.文章着重介绍医院常见病原菌双组分系统的结构特征和功能特点,结合文献总结其对耐药性作用机制的新研究进展,发现双组分系统通过特殊调控机制对细菌耐药性有强烈影响,同时对菌体其他生命活动作用显著,在病原菌生活史中占据重要地位.为今后科研人员研究双组分系统对医院常见病原菌耐药性影响提供一定参考和帮助.
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人间布病抗菌治疗效果及其影响因素分析
目的 了解当前布病的治疗效果,并分析其影响因素,为布病控制措施和治疗方案的改进提供依据. 方法 以济宁市2014-2015年确诊的布病患者为对象,通过确诊后问卷调查和下一年初的电话随访了解病例的流行病学史和治疗效果等,并分析影响治疗效果的因素. 结果 2014-2015年共完成确诊布病患者问卷调查393例,随访313例,随访应答率79.64％;治愈272例,治愈率为86.10％.经统计学分析,发病-确诊间隔时间、服药天数和布病治疗效果存在统计学关联.与发病-确诊间隔时间超过45 d的病例相比,间隔时间少于15d的病例治疗效果更好(OR=3.339,95％CI:2.064～5.402).另外,确诊后服药时间是影响布病治疗的重要因素,坚持较长时间服药比短期服药效果更佳(OR=0.992,95％CI:0.986～0.998). 结论 济宁市布病患者治疗效果较好,及时诊断和足疗程治疗是影响布病治疗效果的重要因素.加强对布病高危人群的宣传教育,提高医生诊疗水平,是今后布病防控工作的重点.
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广西地区女性人乳头瘤病毒感染及HPV16型致癌蛋白变异情况调查
目的 研究广西地区女性人乳头瘤病毒感染情况及HPV16型致癌蛋白变异情况. 方法 收集广西地区2012年1月-2015年12月8 062例女性就诊患者宫颈拭子标本,采用Premier5.0软件依据Genbank基因库设计引物,PCR扩增HPV基因,反应完成后放置水浴,进行HPV导流杂交,肉眼观察见蓝紫色圆点为阳性,并根据HPV分型图进行分型.PCR产物纯化后双向测序,与标准株进行比对. 结果 8 062例患者中有1 524例感染HPV,共计分离出的2058株HPV病毒.其中分离出高危型病毒1 667株,占81.00％;低危型391株,占19.00％.1524例HPV感染者中单一HPV感染1 053例,占69.09％;双重感染411例,占26.97％;三重感染57例,占3.74％;四重感染3例,占0.20％.将患者按年龄分为≤30岁、31-40岁、41-50岁和≥51岁4个年龄组,感染例数和感染率分别为412例和16.27％,656例和22.19％,342例和16.09％,114例和25.39％.569例患者的宫颈拭子标本扩增出HPV致癌蛋白E6基因,其中351株发生基因位变,占61.69％,涉及到15个碱基位16种碱基发生突变,导致11种氨基酸突变;569株扩增出 HPV致癌蛋白E7基因,其中307株发生基因位变,占53.95％,涉及到14个碱基位14种碱基发生突变,导致9种氨基酸突变.讨论 不同HPV亚型编码外壳蛋白基因有较大区别,具有科目特异性,且在不同亚型间无相互交叉保护性抗体.因而不同HPV亚型可诱发多重感染,并导致疾病发生.
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2012-2014年海南省乙型肝炎流行病学特征分析
目的 分析海南省2012-2014年乙型肝炎的流行病学特征,为乙肝防治工作提供科学依据. 方法 应用SPSS19.0和Excel2003软件,对2012-2014年海南省乙肝疫情资料进行描述性流行病学分析. 结果 2012-2014年海南省累计报告乙型肝炎15 362例,2012-2014年报告发病率分别为55.93/10万、56.88/10万和58.80/10万;乙型肝炎年均发病率为57.21/10万.患者年龄以15～44岁年龄组为主,共8 492例,占55.28％,男女性别比为1.98:1;以农民为主,共7 694例(占50.08％);2012-2014年15岁以下人群报告病例数分别为192、110和72例,病例数呈逐年下降趋势,其年报告发病率从2012年的2.16/10万(192例)下降到2014年的0.80/10万(72),其余年龄组的发病率均逐年上升;海南省一年四季均有病例报告,乙肝发病无明显的季节性. 结论 海南省乙肝患者主要为中青年男性农民,儿童乙肝发病率呈逐年下降趋势,而成年人发病率呈逐年上升趋势.加强乙肝防治知识宣传教育、乙肝疫苗预防接种和监测是海南省乙肝防控工作的重点.
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癫痫型脑囊尾蚴病的临床护理
目的 分析癫痫型脑囊尾蚴病的临床护理措施效果. 方法 对2013-2015年收治的癫痫型脑囊尾蚴病患者实施心理护理、症状护理等护理手段,观察护理效果. 结果 163例癫痫型脑囊尾蚴病患者经心理、精神护理,其中132例(占80.98％)相应症状得到明显改善;经3～4个疗程的规范抗囊治疗和相应的症状护理,118例患者的癫痫发作症状得到有效控制,达到临床治愈标准;40例患者的癫痫发作时症状明显减轻,发作次数减少,达到临床好转标准.治疗总有效率为96.9％. 结论 对癫痫型脑囊尾蚴病患者实施心理护理、症状护理等护理手段能显著提高抗囊尾蚴治疗效果,提高患者的生活质量.
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叉头蛋白和下调因子在幽门螺杆菌相关胃癌中的表达研究
目的 研究叉头蛋白(Fox M1)和下调因子(GDDR)在幽门螺杆菌相关胃癌中的表达. 方法 收集和选取2012年1月-2015年12月本院胃镜活检和手术后胃组织标本150份,其中包含正常胃黏膜组织30份,幽门螺杆菌相关慢性胃炎、肠化生、异物增生、胃癌组织各30份,利用TriZol提取试剂提取RNA并进行逆转录,采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测FoxM1基因及FoxM1和GDDR在各疾病阶段表达的情况. 结果 实时荧光定量PCR检测正常胃组织,慢性胃炎、肠化生、异物增生和胃癌组织FoxM1的mRNA表达水平分别为15.51±2.65、32.68±3.81、41.32±4.09、59.88±6.21和88.65±7.92,免疫组织化学法检测FoxM1相对表达量分别为7.62±1.72、23.21±3.11、33.67±3.91、51.35±5.01和79.56±7.05.GDDR表达评分分别为:正常组织＞6分,由幽门螺杆菌引起的胃癌评分＜4分,其中＜2分(27份)占90％.在由正常组织受到幽门螺杆菌感染向胃癌转化过程中,GDDR表达呈下降趋势. 讨论 幽门螺杆菌是消化性溃疡和慢性胃炎的主要致病菌,也是引发胃癌的一个重要危险因素.FoxM1和GDDR在正常胃组织,幽门螺杆菌引发的胃炎以及胃癌中组织表达存在差异,检测FoxM1和GDDR可作为幽门螺杆菌引发胃癌的重要依据.
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输入性50例恶性疟的临床特征与护理分析
目的 探讨从本院收集的50例恶性疟疾的临床特征与护理特点. 方法 选取从2013年7月～2016年3月份在本院接受治疗的输入性恶性疟患者50例的临床资料进行回顾性分析. 结果 50例输入性恶性疟的血液涂片均见到恶性疟原虫;临床表现以发热50例(占100％),呕吐25例(占50％),腹泻19例(占38％),咳嗽20例(占40％),抽搐8例(占16％),意识障碍10例(占20％),头痛,全身疼痛20例(占40％),黄疸4例(占8％),心悸气短9例(占18％),失语1例(占2％);临床体征以贫血45例(占90％),脾肿大30(占60％),肝肿大35例(占70％),脑膜刺激征17例(占34％),湿性罗音1例(占2％),心动过速50例(占100％),心动过缓1例(占2％),昏迷10例(占20％),颈部抵抗7例(占14％),病理征阳性8例(占16％).50例均接受青蒿琥酯作为对疟疾的综合治疗药物,其中治愈50例,死亡0例. 结论 输入性恶性疟临床表现复杂,临床特征不典型,易误诊,及时抗疟治疗并结合有效的护理是提升本病治疗的有效措施.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
