中国病原生物学杂志
Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지
- 主管单位： 中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位： 中华人民共和国卫生部
- 影响因子： 1.21
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-5457/R
- 国内刊号： 王利磊
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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西宁市猪小肠结肠炎耶尔森菌病原学研究
目的 了解西宁市屠宰场生猪小肠结肠炎耶尔森菌分布及病原学特征. 方法 从猪咽拭子和回盲部肠内容物标本中提取细菌基因组DNA,进行小肠结肠炎耶尔森菌保守基因foxA的PCR检测,对阳性标本进行细菌分离,阳性菌株进行血清学分型、生物分型和毒力基因检测. 结果 400份标本PCR扩增foxA基因阳性72份,其中49份培养分离出小肠结肠炎耶尔森菌,检出率为12.25％(49/400);49株小肠结肠炎耶尔森菌经生化鉴定主要为3个生物型:1A型(占16.33％)、3型(占79.59％)和4型(占4.08％);血清型以O∶3、O∶5、O∶8、O∶9为主,其中O∶3血清型39株(占79.59％),O∶5血清型5株(占10.20％),O∶8血清型2株(占4.08％),O∶9血清型1株(占2.04％),血清不确定型2株(占4.08％).毒力基因分布特征为ail+、ystA+、ystB-、yadA+、virF+占73.46％(36/49),ail+、ystA+、ystB-、yadA-、virF-占10.20％(5/49),其他毒力基因型占16.33％(8/49). 结论 西宁市生猪携带的小肠结肠炎耶尔森菌主要为致病性菌株,应加强对本地生猪小肠结肠炎耶尔森菌的监测.
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过继转移日本血吸虫感染鼠DC调控IL-13抑制过敏性哮喘黏液分泌的机制研究
目的 探讨过继转移日本血吸虫感染鼠DC对IL-13细胞因子调控抑制过敏性哮喘黏液分泌的作用机制.方法 采用MACS磁珠分选方法从日本血吸虫(SJ)感染小鼠及健康对照小鼠脾脏中提取DC,分别过继转移给BALB/c小鼠,并用OVA诱发哮喘.4周后处死小鼠,提取肺组织总RNA并制作病理切片,采取qRT-PCR和PAS染色方法等检测IL-13 mRNA以及蛋白水平.建立DC与CD4+T细胞共培养体系,检测IL-13的表达情况. 结果 肺组织病理学检查显示,与OVA单纯哮喘组比较,过继转移SJ感染DC组(SJ+OVA)过敏性哮喘被抑制.qRT-PCR显示,过继转移SJ感染DC组IL-13 mRNA表达受到抑制.PAS染色显示SJ感染DC组黏液分泌减少,免疫组化检查该组IL-13的表达量降低.DC与CD4+T细胞共培养结果显示SEA处理DC能抑制CD4+T细胞IL-13的表达. 结论 过继转移日本血吸虫感染鼠DC通过下调CD4+T细胞中IL-13细胞因子的释放而抑制过敏性哮喘的黏液分泌.
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包虫病诊断抗原分子Eg-00512的筛选、重组表达及抗原性鉴定
目的 筛选细粒棘球绦虫原头蚴抗原分子Eg-00512,并进行重组表达、纯化及免疫特性鉴定,以期作为棘球蚴病特异性诊断抗原. 方法 对国家人类基因组南方研究中心(CHGCS)发表的细粒棘球绦虫4个不同发育阶段的表达谱数据进行差异比较分析,筛选仅在原头蚴阶段特异表达的基因Eg-00512;利用DNAStar软件包对其编码蛋白Eg-00512进行抗原表位分析;选取合适的序列片段作为目的片段,构建基因工程菌株Eg-00512/pET-24a/BL-21,经诱导表达、纯化获得重组蛋白rEg-00512.将BALB/c小鼠随机分为免疫组、佐剂对照组、PBS对照组,分别经皮下多点注射重组蛋白、PBS+弗氏佐剂和PBS,2周后加强免疫一次.分别于免疫前,第一次免疫后2、4周每组小鼠尾静脉采血,免疫后5周摘眼球法采血,采用ELISA检测各时间点血清中特异性IgG抗体水平变化;以该血清为一抗,采用Western blot分析重组蛋白的免疫反应性. 结果 筛选出仅在细粒棘球蚴原头蚴阶段高表达的Eg-00512基因.该基因编码203个氨基酸,分子质量单位为23 ku,其抗原表位主要位于1-15、55-93、111-119、126-149、166-194和199-202氨基酸残基及其附近.成功构建基因工程菌株Eg-00512/pET-24a/BL-21,经IPTG诱导表达重组蛋白rEg-00512.重组蛋白rEg-00512纯化后免疫小鼠诱导产生特异性IgG抗体,其中免疫5周时抗体达高水平A450值为1.807±0.767,与佐剂对照组0.111±0.014和PBS对照组0.132±0.0246比较差异有统计学意义(P＜0.01).Western blot显示,该重组抗原可被免疫鼠抗血清及细粒棘球蚴原头蚴感染鼠血清识别,而不与正常小鼠血清反应. 结论 成功筛选并获得重组蛋白rEg-00512,该蛋白具有较好的抗原性,可作为棘球蚴病免疫诊断候选抗原.
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埃博拉病毒核蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立
目的 建立快速而准确的检测蝙蝠埃博拉病毒(EBOV)核蛋白抗体ELISA方法. 方法 合成大肠埃希菌系统密码子优化的扎伊尔埃博拉病毒核蛋白羧基端序列,构建含His标签的原核表达载体pET-28(a)-Z-NP,并转化BL21(DE3)感受态细胞,用1.0 mmol/L IPTG诱导表达目的蛋白,目的蛋白经亲和层析纯化后进行SDS-PAGE和Westernblot鉴定,以纯化蛋白为包被抗原建立抗体间接ELISA方法. 结果 成功构建原核表达质粒pET-28 (a)-Z-NP,可溶表达的目的蛋白纯化后经Western blot检测,能与His单抗和已知阳性血清特异性反应.建立的ELISA方法检测轮状病毒、来宾病毒、汉城病毒、玄松病毒感染蝙蝠血清均无交叉反应,已知阳性血清稀释至1∶1 600仍为阳性,试验的批内及批间变异系数均＜10％.用此方法检测采自云南省西双版纳地区的15份棕果蝠血清,其中2份阳性,且与Westernblot验证结果一致. 结论 建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,可用于蝙蝠扎伊尔埃博拉病毒核蛋白抗体的检测.
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贵州省结核分枝杆菌临床分离株MIRU-VNTR位点基因分型研究
目的 了解贵州省结核分枝杆菌临床分离株的数目可变串联重复序列(MIRU-VNTR)基因多态性及近期传播情况. 方法 收集2014年贵州省结核分枝杆菌临床分离株185株(耐多药菌株57株,全敏感菌株97株),采用MI-RU-VNTR 12个位点分析法进行PCR检测,应用NTsys2.10软件对全部基因型数字化结果进行非加权组平均法(UP-GMA)聚类分析. 结果 185株结核分枝杆菌临床分离株分为5个基因群(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ),呈现156个基因型,其中135个为独特基因型,其余50株为16簇,大簇包含10株菌,小簇包含2株菌,成簇率为27.03％,近期感染小估计为18.37％,Ⅰ群结核分枝杆菌为147株,占79.46％,为优势菌群,在MIRU12个位点中,26、31位点多态性较高(h＞0.60),4、10、23、27、39、40位点呈中等程度的多态性(0.3≤h≤0.60),2、16、20、24位点多态性较低(h＜0.30).结论 贵州省结核分枝杆菌具有基因多态性,其主要的流行群为Ⅰ群,MIRU26和MIRU31呈高等程度多态性,MIRU2、MIRU20和MIRU24、MIRU27呈低等程度多态性.
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牛支原体P81蛋白的表达及纯化
目的 构建3种牛支原体P81蛋白原核表达质粒,分析其在大肠埃希菌中的表达情况,并纯化P81蛋白. 方法 根据GenBank发表的牛支原体P81基因序列(GenBank登录号:AY627040.1),密码子优化后合成P81全基因序列.构建原核表达质粒pET28a-P81、pET32a-P81和pGEX-6P-1-P81,经IPTG诱导后采用SDS-PAGE电泳分析P81蛋白在原核表达系统中的表达情况;应用Ni-NTA对目的蛋白进行纯化. 结果 pET28a-P81、pET32a-P81和pGEX-6P-1-P81均高效表达分子质量单位为78 ku左右的P81蛋白.表达产物进行Ni-NTA亲和层析,得到纯化的P81蛋白.结论 构建的重组原核表达质粒pET28a-P81、pET32a-P81、pGEX-6P-1-P81能在大肠埃希菌中高效表达牛支原体P81蛋白,为进一步分析该蛋白的抗原性奠定了基础.
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细粒棘球绦虫myophilin的抗原表位预测
目的 应用生物信息学软件预测细粒棘球绦虫亲肌肉蛋白myophilin的二级结构及B、T细胞抗原表位,为其保护性抗原表位筛选提供依据. 方法 从Genbank中获取myophilin的氨基酸序列,采用SOPMA软件预测其二级结构;采用LEPS和ABCpred软件联合预测其B细胞抗原表位;采用IEDB和SYFPEITHI软件联合预测其T细胞抗原表位. 结果 α螺旋、β折叠、无规则卷曲和β转角在myophilin二级结构中所占的比例分别为47.89％、10.00％、30.53％和11.58％;潜在的B细胞抗原表位分别为19～27、41～48、92～101、110～118、128～137和155～162;潜在的T细胞抗原表位为9～18、140～148和157～165氨基酸序列. 结论 myophilin蛋白可能有6个B细胞抗原表位和3个T细胞抗原表位,有望用作免疫诊断抗原和疫苗候选抗原.
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5种高危型HPVE7蛋白B细胞表位的预测
目的 预测并分析我国人群常见人乳头瘤病毒HPV16、18、33、52与58亚型E7蛋白的线性B细胞表位.方法 在NCBI数据库中获取5种高危型HPVE7蛋白氨基酸序列,采用ClustalX2软件进行多序列比对;运用ExPASY服务器SOPMA和GOR4法预测二级结构,采用Kyte-Doolittle方案和Hopp-Wood方案预测亲水性;运用Bepipred和ABCpred软件预测B细胞表位,辅以抗原性指数,综合评判几率较大的B细胞优势表位. 结果 综合多参数分析,5种HPV亚型的B细胞表位均集中在蛋白质的N端2-50位附近,其中预测的HPV16与52亚型的第16-21位氨基酸序列一致性为100％,均为QPETTD;HPV16型第28-41位(LNDSSEEEDEIDGP)与HPV52型第28-38位(LGDSS-DEEDTD)的氨基酸序列一致性为78％;HPV16型第42-50位(AGQADEPRA),HPV33型第31-46位(SSDEDE-GLDRP),HPV52型第36-46位(DTDGVDRPDGQ)和HPV58型第73-78位(TTTDVR)为各自的特异B细胞表位.结论 生物信息学方法预测5种HPV的B细胞表位均集中在蛋白质的N端2-50位附近,同时具有特异的B细胞表位(18型除外),可为宫颈癌的诊断、预防和新型疫苗的研制提供参考.
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细粒棘球绦虫成虫相关基因EgM123的克隆、表达及鉴定
目的 构建细粒棘球绦虫成虫相关基因EgM123基因原核表达载体,诱导表达并鉴定EgM123蛋白. 方法 提取pET41b-EgM123重组质粒,以此为模板PCR扩增EgM123基因片段,克隆至原核表达载体pET28a中,经限制性内切酶双酶切和测序鉴定.将重组菌质粒转化大肠埃希菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的基因表达,采用SDS-PAGE对表达蛋白进行分析,Western blot鉴定其免疫反应性. 结果 PCR扩增EgM123基因片段长度为594 bp,经酶切分析和测序鉴定证明pET28a-EgM123原核表达载体构建正确.重组质粒转化BL21在37℃条件下,经IPTG(终浓度为0.4 mmol/L)诱导3h,获得分子质量单位约为29 ku的EgM123蛋白,与理论值相符.该蛋白能被EgM123-GST免疫兔抗血清识别. 结论 成功构建了pET28a-EgM123原核表达载体,表达蛋白具有免疫反应性,为研制包虫病疫苗奠定了基础.
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贵州省黑线姬鼠钩端螺旋体分离株MLVA分型研究
目的 采用多位点可变数目串联重复序列分析技术(MLVA)分析贵州省黑线姬鼠钩端螺旋体(简称钩体)分离株的分子流行病学特征,为贵州省钩体病的防控提供依据. 方法 采用硅胶膜型TM细菌基因组DNA提取试剂盒提取56株致病性钩体DNA,选择7个可变数目串联重复序列VNTR位点进行PCR扩增,扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳后用凝胶成像系统成像并计算各VNTR位点的扩增长度,分析菌株各VNTR位点的重复数目;采用BioNumerics软件分析,用UPGMA系数分析分离株与参考菌株间的聚类关系. 结果 MLVA分析结果显示,56株钩端螺旋体有VNTR4、VNTR36、VNTR50位点出现重复数目差别,被分为6个MLVA型(A1 、B1 、B2、B3、B4、B5型).聚类分析显示56株钩端螺旋体与参考菌株黄疸出血群56601株聚类关系较近,与其他参考株聚类关系较远. 结论 贵州省近年黑线姬鼠钩端螺旋体分离株均为黄疸出血群,MLVA型别具有多样性.
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Mtb感染对BALB/c小鼠B细胞亚群分布的影响
目的 探讨结核分枝杆菌(Mtb)感染对小鼠B淋巴细胞亚群分布的影响. 方法 用Mtb大理临床分离株感染BALB/c小鼠.取不同感染阶段的小鼠腹腔细胞、脾脏细胞和淋巴结细胞,采用FACSCalibor检测分析Mtb感染早期及晚期小鼠的B细胞亚群变化. 结果 与对照组比较,小鼠感染Mtb临床分离株早期及晚期脾脏B细胞(CD45R+)百分率均降低[(8.11±3.08)％,t=3.031,P=0.013;(8.35±2.61)％,t=2.251,P=0.048],淋巴结B细胞(CD19+)百分率均升高[(41.20±8.25)％,t=-3.22,P=0.009;(36.29±6.99)％,t=-2.935,P=0.005];B1细胞百分率在感染早、晚期均无明显改变,B1b细胞(B220Int IgD CD5CD11+)百分率在早、晚期均降低[(4.89±3.43)％,t=2.248,P=0.048;(12.07±5.52)％,t=2.338,P=0.041],B1a细胞(B220IntIgDCD5+ CD11+)百分率在感染早期升高(50.58±9.50)％,t=-2.259,P=0.047;FO B细胞(B220+CD23+ CD21int)升高(28.35±5.56)％,t=-2.571,P=0.028;MZ B细胞(B220+ CD23-CD21hi)降低(15.80±6.10)％,t=3.142,P=0.01. 结论 Mtb感染可影响小鼠B细胞及其亚群的分布,使机体更有利于抗结核感染.
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手足口病柯萨奇病毒A2、A4和A5型SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
目的 建立一种快速、灵敏、特异的SYBR GreenⅠ实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)方法,以期用于检测柯萨奇病毒A2、A4和A5型. 方法 根据3种病毒vp1基因保守序列设计特异性引物,建立并优化SYBR GreenⅠ rRT-PCR方法.分别构建3种病毒的vp1部分基因的重组质粒作为病毒的体外转录标准品,分别以100～109和102～105倍稀释的标准品、其他6种肠道病毒、两种呼吸道RNA病毒及以临床诊断为手足口病的临床标本为模板,经过优化SYBR Green Ⅰ rRT-PCR反应条件,建立标准曲线和溶解曲线对其灵敏度、重复性、特异性进行评价,分析其临床应用中的效果. 结果 成功建立了3种柯萨奇病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量rRT-PCR方法及定量标准曲线,方法的灵敏度为101copies/μ1质粒标准品,变异系数均＜2％,与柯萨奇病毒A组6、10、16型,肠道病毒EV71型,诺如病毒,轮状病毒,麻疹病毒和乙型流感病毒均无交叉反应.检测84份手足口病临床标本,阳性率分别为36.9％ (CVA4)、8.33％ (CVA5)和7.14％ (CVA2),经测序验证符合率为100％. 结论 建立的检测柯萨奇病毒A2、A4和A5型的SYBR GreenⅠ rRT-PCR方法具有良好的灵敏度、重复性和特异性,可用于手足口病病原体的分型检测.
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刚地弓形虫ROP16-ROP18复合基因真核表达载体的构建
目的 构建刚地弓形虫棒状体蛋白16(TgROP16)、棒状体蛋白18 (TgROP18)复合基因真核表达重组质粒,并验证其在真核细胞中的表达情况. 方法 重组质粒pVAX1-ROP16与pVAX1-ROP18分别经EcoR Ⅰ和Not Ⅰ、NheⅠ和AflⅡ双酶切,将ROP16与ROP18基因先后克隆至双启动子真核表达载体质粒pVAXD的多克隆位点中,构建pVAXD-ROP16-ROP18重组质粒.分别用双酶切和PCR验证正确的重组质粒及对照组质粒转染Hela细胞,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板进行ROP16基因、ROP18基因与管家基因β肌动蛋白基因的RT-PCR扩增,采用间接免疫荧光法检测各自基因的表达. 结果 重组质粒pVAXD-ROP16-ROP18经PCR及双酶切鉴定构建正确.转染后经RT-PCR检测,实验组与对照组β肌动蛋白基因扩增产物均与预期大小相符,实验组ROP16基因、ROP18基因扩增产物分别为1 700 bp和2 100 bp,与预期大小相符,而对照组均未扩增出ROP16及ROP18基因.间接免疫荧光法检测显示,重组质粒pVAXD-ROP16、pVAXD-ROP18转染组细胞可见绿色荧光,空质粒及对照组无绿色荧光. 结论 成功构建了重组质粒pVAXD-ROP16-ROP18,该质粒可在真核细胞中表达.
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2013年广西分离株H9N2亚型禽流感病毒全基因组特性分析
目的 对2013年从广西分离的H9N2亚型禽流感病毒进行全基因测序,并分析其基因组和遗传进化特性,为进一步研究H9N2禽流感病毒的致病机制提供科学依据. 方法 运用RT-PCR方法克隆广西分离株H9N2亚型禽流感病毒8个基因片段,进行全基因测序,对测序结果进行序列比对和遗传进化分析. 结果 序列比对分析表明,H9N2亚型分离株的HA序列裂解位点为RSSR↓ GLF,受体结合位点为YWTNKLY且发生Q226G和G228R双重位点突变,NA耐药相关位点发生3处突变(E119V,R292W和R294G),M2蛋白跨膜区存在S31N变异;编码内部蛋白的6个基因与同年H7N9亚型分离株相似度为90.9％～97.6％.其分子遗传进化关系属于欧亚种系,其中HA基因属于Y280亚系,M基因属于G1亚系,PB2基因属于Korea亚系,PB1、PA、NA、NP和NS属于SH/F/98亚系. 结论 2013年广西分离株是由4种不同H9N2亚型禽流感病毒亚系发生自然重排的产物,属于低致病性禽流感病毒,但对抗流感药物存在一定耐药性,故应加强对禽农场中H9N2病毒流行株变异趋势和传播风险的监测.
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红树林淡紫拟青霉EPS提取物体外抗HSV-1机制研究
目的 探讨红树林淡紫拟青霉胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS)提取物体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)感染的机制. 方法 以Vero细胞为病毒感染靶细胞,以不同浓度EPS提取物作用于HSV-1感染过程的各个阶段,MTT法测定提取物对Vero细胞的毒性作用和对HSV-1的直接灭活作用及对病毒吸附和生物合成的影响;采用RT-PCR检测该提取物对病毒gD基因US6和DNA聚合酶基因UL30表达的影响. 结果 EPS提取物对Vero细胞无促进增殖作用,其对Vero细胞的半数有毒浓度(CC50)为1 300.17 μg/ml,浓度在800 μg/ml以下时细胞存活率达90％以上;在25～800 μg/ml浓度范围内该提取物可抑制HSV-1吸附和生物合成,并表现出一定量效关系;浓度为800μg/ml时抑制率高,分别为39.5％和59.7％,与病毒对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),但并不能达到完全抑制.未发现该提取物对HSV-1有直接灭活作用.RT-PCR显示该提取物可干扰病毒US6和UL30基因转录,灰度扫描分析US6 mRNA丰度与病毒对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);UL30mRNA丰度与病毒对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01). 结论 EPS提取物对Vero细胞毒性较小,使用安全.该提取物具有一定的抗病毒作用,可抑制HSV-1吸附和生物合成,还可抑制US6和UL30基因转录.
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手足口病流行病学、病原学及重症化机制的研究进展
手足口病(HFMD)是由小RNA病毒科肠道病毒属引起的急性肠道传染病,肠道病毒A组71型(EV-A71)引起的普通HFMD在临床症状等方面与柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)及其他肠道病毒引起的HFMD难以区别,且多种肠道病毒均有重症病例出现.随着人口流动性的加大,疾病传播速度的加快,传统的流行病学危险因素分析已难以实现对该病的完全防控,对其临床流行病学、分子遗传进化及重症化机制的探讨对该病的防控显得尤为重要.本文参考了国内外相关文献,对HFMD流行特征、病原学及重症化机制等进行了综述.
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应用寄生虫模型治疗多发性硬化症的研究进展
多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种严重危害人类健康的中枢神经系统的慢性脱髓鞘性炎性疾病.近年来MS的发病率越来越高,”卫生假说”认为其可能是由于患者儿童时期较少接触病原体所致.大量流行病学数据与动物研究结果表明,寄生虫作为一类较成功的病原体,可主动调节宿主免疫应答,营造抗炎的免疫环境,从而缓解MS病情.其可通过多种机制下调炎症反应,包括抑制Th1/Th17反应,促进Th2反应,诱导调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)和调节性B细胞(regulatory B cells,Breg),调节树突状细胞功能等.其中,以诱导Treg及抗炎因子IL-10、TGF-β的产生为重要.本文就寄生虫感染治疗MS的流行病学证据、免疫调节机制及应用前景进行综述.
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血餐对蜱类共生细菌多样性的影响
蜱是是自然界吸血媒介中仅次于蚊虫的第二大传播媒介,在叮咬人畜吸血的过程中传播多种病原体,引发蜱媒传染病.蜱的共生微生物种类繁多,包括细菌、真菌等,不仅影响蜱的营养、繁殖和代谢,对病原体的存活、定殖及蜱的传病能力也起着决定性作用.血餐是蜱的唯一营养来源,也是影响其共生细菌变化的主要因素.不同来源的血餐、以及血餐的消化程度等均可影响蜱的共生细菌组成和多样性.本文总结了血餐对蜱类共生细菌多样性的影响,以期为利用共生细菌开展蜱媒病的防控积累资料.
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一例儿童手足口病分离毒株特征分析
目的 了解河北地区1例儿童手足口病病原学特征. 方法 采集1例手足口病患儿支气管病理组织切片并做免疫组化分析.培养病变组织标本并分离EV71.经RT-PCR扩增EV71毒株基因及其VP1区基因,经基因测序并构建进化树,分析毒株病原特征. 结果 患儿支气管黏膜脱落,甚至发生坏死并伴有淋巴细胞浸润,局部小血管内形成小血栓.免疫组化分析,在支气管组织细胞中检测到阳性抗原信号,且主要集中在上皮细胞的胞浆内.RT-PCR扩增,EV71基因目的片段长度约为226 bp.确定EV71阳性的标本采用RT-PCR扩增EV71毒株的VP1区基因序列,目的片段大小约为839 bp.基因测序及核苷酸序列比对显示,所测序列未发生突变.构建EV71-VP1区核苷酸序列进化树,本研究中的EV71毒株属于C4亚型,其与FJ606448株的同源性达99％,未发生基因突变. 结论 本研究分离的EV71毒株未发生变异,与北京流行毒株同属于C4亚型,同源性较高,揭示人口流动对EV71病毒株传播影响的重要性,为河北地区儿童手足口病的临床防治提供指导.
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肝硬化患者肺部感染的相关因素分析
目的 分析肝硬化患者发生肺部感染的相关因素,为临床治疗提供依据. 方法 收集感染患者的一般资料、腹水情况、病原菌感染、基础疾病、抗菌药物使用情况等.用SPSS15.0进行统计分析,采用x2检验分析肝硬化患者发生肺部感染的相关因素. 结果 1 184例肝硬化患者中出现肺部感染142例,感染率为11.99％,其中男性95例,女性47例;乙肝性肝硬化98例,乙醇性肝硬化24例,原发性胆汁性肝硬化10例.142例肺部感染肝硬化患者痰液标本中检出病原菌157株,其中大肠埃希菌46株,肺炎克雷伯菌27株,金黄色葡萄球菌22株,铜绿假单胞菌14株,表皮葡萄球菌13株,肺炎链球菌11株,白色假丝酵母菌9株,其他病原菌15株.142例肝硬化肺部感染患者发生肺部感染常伴有不同的临床特征,其中发热患者占19.01％,肺部浸润患者占14.79％.肝硬化患者的性别和腹水有无情况与感染发生无关,差异无统计学意义(P均＞0.05);而肝硬化患者的年龄、住院时间、基础疾病有无、使用抗菌药物是否合理、是否接受侵入性操作与其肺部感染发生相关,差异有统计学意义(P均＜0.05). 结论 不同类型的肝硬化患者均有肺部感染发生,患者感染病原菌类型以革兰阴性为主.感染患者常伴有发热、肺部浸润、呼吸衰竭等临床症状,且感染发生与年龄、住院时间、基础疾病、使用抗菌药物以及侵入性操作相关.
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乳腺癌患者BRCA基因突变检测及P53蛋白表达分析
目的 研究乳腺癌患者BRCA基因突变及P53蛋白表达情况,为疾病防治提供指导. 方法 制作40例住院乳腺癌患者组织蜡片标本,采用PCR扩增及基因测序检测BRCA基因突变情况,采用免疫组化试剂盒检测乳腺癌组织P53蛋白表达情况. 结果 PCR扩增BRCA1基因exon10片段大小为244 bp,BRCA2基因exon10片段为247 bp,BRCA2基因exon11片段为256 bp,BRCA1基因exon11片段为266 bp.测序分析显示BRCA1基因exon 10发生碱基突变,突变类型为26位T--→C,相应氨基酸突变类型为Cys→Ser;BRCA1基因的exon 11发生的碱基突变类型较多,包括1 954位T→C、3 694位insAA、3 948位G→C、3 182位A→C以及3 538位insT,相应氨基酸突变类型为Lyn→Glu、stop1209、Ala1277Pro、Ser1021Arg以及stop1 147;BRCA2基因exon 10发生的碱基突变类型为943T→A,相应氨基酸突变类型为Cys→Ser;BRCA2基因exon 11发生的碱基突变类型为2971A→G,相应氨基酸突变类型为Asn→Asp.免疫组化检测乳腺癌病变组织表达P53蛋白. 结论 乳腺癌的发生与BRCA基因突变有关,组织中P53蛋白的表达与BRCA基因突变乳腺癌患者病程有关,临床检测BRCA基因和P53蛋白表达情况可为疾病防治提供指导.
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慢性鼻窦炎患者金黄色葡萄球菌耐药性分析
目的 了解慢性鼻窦炎患者分离的金黄色葡萄球菌耐药情况. 方法 收集慢性鼻窦炎患者标本,进行金黄色葡萄球菌培养及分离纯化,表征患者病灶部位及菌株,K-B法分析其耐药性,PCR检测耐药基因. 结果 金黄色葡萄球菌是引发慢性鼻窦炎患者发生感染的原因及主要病原菌.药敏试验显示金黄色葡萄球菌对阿米卡星、苯唑西林、四环素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、替考拉宁、克林霉素、利福平、庆大霉素的耐药率、中介率及敏感率分别为14.94％、39.08％、37.93％、59.20％、0.00％、31.03％、0.00％、47.70％、17.82％、45.98％,10.92％、0.00％、5.17％、1.72％、0.00％、2.87％、0.00％、9.20％o、0.00％、6.90％和74.14％、60.92％、56.90％、39.08％、100.00％、66.09％、100.00％、43.10％、82.18％、47.13％.PCR扩增ermA、ermC、qacA、ermB、aac(6')/aph(2")、mecA基因大小分别为421、572、629、359、220和162 bp,且其基因检出率分别为21.26％、10.92％、16.09％、35.06％、29.89％、43.10％. 结论 金黄色葡萄球菌是引发慢性鼻窦炎患者感染的主要病原菌,药敏试验显示其对万古霉素和替考拉宁敏感.
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2012-2015年妇科患者感染人乳头瘤病毒型别及相关因素分析
目的 了解妇产科就诊患者感染人乳头瘤病毒(HPV)型别分布情况,并分析感染发生相关因素,为临床抗感染治疗提供指导. 方法 选取2012-2015年医院妇产科就诊的患者5 198例,筛查患者感染HPV分型.采集患者标本提取DNA,使用HPV核酸扩增分型检测试剂盒检测分型情况,采取问卷调查方式统计受试者年龄、流产次数、性伴侣数、吸烟史及避孕方式等,对感染发生相关因素进行分析. 结果 2012-2015年收集的5 198例患者中,HPV感染1 030例,感染率为19.82％;各年度HPV感染率分别为23.20％、21.84％、19.97％和18.48％.HPV单型感染菌株333株,单型检出率为6.41％;HPV多型感染菌株867株,多型检出率为16.68％.2012-2015年患者HPV感染型别分别为HPV16、HPV52、HPV58、HPV18、HPV33、HPV11、HPV56、HPV68、HPV31、HPV51、HPV59、HPV35和HPV39型,各型别检出率分别为18.25％、15.92％、11.08％、8.92％、8.08％、6.92％％、6.08％、5.75％、5.08％、5.08％、3.92％、2.83％和2.08％.相关因素分析发现,患者年龄和避孕方式不是影响HPV感染的相关因素;流产≥3次、性伴侣数≥2个以及有吸烟史是HPV感染的危险因素(x2=112.9122、350.4139、347.1738,P均＜0.01). 结论 2012-2015年妇科患者染HPV感染率呈下降趋势,主要感染型别为HPV16、HPV52和HPV58型;且性伴侣数、流产次数以及吸烟史是影响HPV感染发生的相关因素.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
