中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子: 0.92
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1000-484X
- 国内刊号: 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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活动性类风湿关节炎病人血清VEGF水平测定
目的:为了解血管内皮细胞生长因子(VEGF)在类风湿关节炎(R A)病人中的水平。方法:ELISA双抗夹心法VEGF试剂盒定量测定,同时采用Beckman Array 360检测血清RF水平。结果:32例活动性RA病人血清VEGF水平较健康对照组有明显增高(P <0.01)。结论:提示VEGF参与了RA的发病,测定血清VEGF水平是一种无侵入性、 实用的监测RA病情的方法。
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老年人淋巴细胞IL-2Rγ链的表达及其意义
目的:为探讨IL-2Rγ链在衰老免疫机制中的作用。方法:选择了正常青年人8名,健 康老年人17名作为研究对象,青年组年龄18~35岁(平均24.9±5.8岁),老年组年龄65 ~79 岁(平均69.4±4.2岁),观察了其外周血淋巴细胞对PHA应答增殖程度,CD132、CD45R阳 性 细胞百分率及时间动力学的变化,同时用自己设计合成的引物采用RT-PCR法对IL-2Rγ链 的 基因表达进行研究。结果:显示老年人淋巴细胞对PHA应答增殖能力低于青年人,分别为0. 199±0.055,0.279±0.054,P=0.001 2;活化的淋巴细胞表面表达IL-2Rγ链减 少,老年人为 46.2%±7.7%,青年人为68.0%±11.8%,P<0.001;RT-PCR的结果证实此种改变发 生在转录水 平;老年人IL-2Rγ链表达的时间动力学曲线与青年人有差异。结论: 认为IL-2Rγ链对老年人免疫功能衰退可能起了重要的作用。
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猴实验性变应性脑脊髓炎血和脑脊液淋巴细胞亚群的动态研究
慢性实验性变应性脑脊髓炎(EAE)是多发性硬化(MS)的较 理想模型[1]。为了研究MS的发 病机制,我们动态观察猴EAE血和脑脊液的淋巴细胞亚群的变化,以阐明淋巴细胞亚群在EAE 发病机制中的作用。
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VEGF、IFN-γ及NO与糖尿病视网膜病变的初步研究
近年来研究证实,生长因子与视网膜多种细胞生长增殖密切相关[1],而细胞生长 因子可能是通 过一氧化氮(NO)的介导而导致血管内皮细胞的损坏[2]。我们选用血管内皮生长因 子(VEGF)、γ -干扰素(IFN-γ)和NO浓度变化作为指标,探讨糖尿病(DM)患者VEGF、IFN-γ、NO变化及 其在糖尿病视网膜病变(DR)发病机制中的重要作用。
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特发性血小板减少性紫癜患儿血清IL-8、IL-6、IFN-α、TNF-α及CIC检测
特发性血小板减少性紫癜(ITP)是儿童常见的出血性疾病,其发病机制尚未完全清楚,目 前认为与免疫紊乱密切相关,其中细胞免疫紊乱与ITP的关系近来受到重视[1-3] 。 我们对24例急性ITP患儿血清进行了白细胞介素8和6(IL-8、IL-6)、干扰素α(IFN-α)、 肿瘤坏死因子α(TNF-α)及循环免疫复合物(CIC)系列检测,探讨其在ITP发病中的意义。
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系统性红斑狼疮患者血清IL-18和sFas/sFasL的变化及相关性研究
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是典型的自身免疫性疾病,免疫学特 征为体内大量自身抗体的产生。近越来越 多的研究表明这些自身抗体的产生与SLE病人体内淋巴细胞凋亡紊乱有关。Fas和FasL作为凋 亡的抑制因子和诱导因子,IL -18则可直接增强FasL介导的Th1细胞毒效应,参与T淋巴细胞的凋亡发生。本研究采用ELIS A检测了45例SLE患者血清中IL-18和sFas及sFasL水平,以探讨IL-18和Fas/FasL在SLE发病 中的作用机制及IL-18和Fas/FasL相关性。
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EAN中神经抗原P2蛋白有效表位的鉴定及其与空肠弯曲菌LPS抗原性比较
目的:EAN中神经抗原(P2蛋白)的有效表位的鉴定以及将其与 空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,Cj)LPS抗原性比较。方法:采用噬菌体呈现技术对8个EAN模型血清抗体进行肽库筛选,并将 获得的克隆用ELISA方法进行阳性鉴定,以及将阳性克隆与空肠弯曲菌LPS相似性进行比较。结果:33个阳性克隆的亲和性均显著高于阴性对照(P<0.01),说 明它们是具有特异性的克隆;C.J.LPS与血清的亲和力显著高于对照组(P<0.01), 与阳性克隆的OD值相差不显著,C.J.LPS与阳性克隆之间存在相似性。结论:噬菌体呈现技术可筛选出与P2蛋白具有相同表位的噬菌体克隆; 空肠 弯曲菌LPS与P2蛋白之间存在表位模拟,C.J.LPS可能是启动GBS自身反应性免疫应答的重 要因素。
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人血管内皮生长因子受体Flt-1胞外区2-3loop在Pichia.pastoris酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究
目的:研究人Flt-1胞外区2-3loop cDNA在Pichia.pastoris酵母中的表达,获得高 效 表达的具有生物学活性的重组Flt-1(2-3)。方法:采用PCR扩增 Flt-1(2-3)基因,经DNA序列 分析后,插入含AOX1 启动子和α分泌信号肽序列的Pichia.pastoris酵母表达载体中,构 建 重组质粒pPIC9K/Flt-1(2-3),转化酵母宿主菌GS115,筛选His+Muts表型转化子,摇 瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。表达产物经CM-Sepharose FF阳离子交换层析和Sephacryl S-100分子 筛 层析纯化后,测定其生物学活性。结果:SDS-PAGE分析显示,表达产物以可溶性分子形式存 在于上清中,诱导4 d的表达量达上清总蛋白的60%以上。ELISA及Western blot实验表明, 表 达产物具有良好的抗原性和特异性。经CM-Sepharose FF阳离子交换层析和Sephacryl S-1 00 分子筛层析纯化后,Flt-1(2-3)纯度达到90%以上。生物学活性检测证实其具有结合hVEGF 16 5的能力和抑制hVEGF165对HUVEC的促增殖功能。结论: 获得了具有生物学活性的可溶性重组F lt-1受体胞外区2-3loop小片段,为进一步的动物实验和临床应用打下了基础。
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促炎症细胞因子刺激人类关节滑膜B型细胞表达粘附分子
目的:透析相关性淀粉样变(DRA)病人关节滑膜组织粘附分子表达增强,并与局 部炎细胞浸润密切相关。旨在探讨DRA时诱导滑膜细胞粘附分子表达上调的机制。 方法:分离正常人关节滑膜B型细胞,与晚期糖基化终产物修饰的β2微球蛋白(AGE-β2m) 、天 然β2m、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β( IL-1β)在体外共同培养 ,用荧 光单克隆抗体染色,流式细胞仪检测定量分析滑膜B型细胞表面细胞间粘附分子-1(ICAM- 1 )、血管细胞间粘附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)的表达。结果:正常关节 滑膜B型细胞表达ICAM-1、VCAM-1,但不表达E-selectin。IL-1β、TNF-α能以时间和 剂量 依赖的方式上调滑膜B型细胞ICAM-1、VCAM-1的表达,但无诱导E-selectin表达的作用。 AG E-β2m和β2m对B型细胞粘附分子的表达无直接影响。结论: DRA时关节组织存在的促炎 症细胞因子可能上调滑膜细胞粘附分子的表达,从而促使局部的单核细胞浸润。
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CEA重组痘苗病毒免疫治疗CEA阳性肿瘤机制的研究
目的:探讨癌胚抗原重组痘苗病毒(rV -CEA)治疗癌胚抗原(CE A)阳性肿瘤的机制。方法:使用我室构建的rV-CEA腹腔接种供体C57/BL小鼠后取其脾细胞 过继转移给经60Coγ射线亚致死量照射的荷CEA+-HePa肝癌细胞的C57/BL小鼠 ,并同时检测该供体小鼠脾细胞体外杀瘤细胞效应。结果:接种了rV-CEA的供体小鼠的脾细胞过继免疫给受体,具有明显 抑制CEA阳性肿瘤细胞生长的作用。结论:本研究提示rV-CEA对CEA阳性肿瘤的抑制作用可能主要是通过CE A特异的免疫反应激活T细胞而实现的,其机制值得进一步研究。
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C215抗原基因转染的瘤苗联合单抗与超抗原的融合蛋白C215Fab-SEA的抗肿 瘤作用初步研究
目的:研究抗C215单抗与超抗原——金黄色葡萄球菌肠 毒素A(SEA)的融合蛋白C215Fab-SEA与C215抗原基因转染的瘤苗共同激发的抗 肿瘤效应。方法:以脂质体法将人大肠癌相关C215抗原的基因转染B16小鼠 黑色素瘤细胞系制备成瘤苗,建立C57BL/6小鼠黑色素瘤荷瘤模型,观察其与融合蛋白C 215Fab-SEA对肿瘤生长的抑制作用。结果:融合蛋白与瘤苗联合治疗组小鼠的抑瘤率明显高于单用融合蛋白 组和单用瘤苗组(P<0.01)。结论:融合蛋白C215Fab-SEA与C215抗原基因转染的瘤苗 ,两者的抗肿瘤效应能相互增强,其共同激发的免疫应答能控制荷瘤动物肿瘤的生长。
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外源性LIF和IL-1对围着床期小鼠子宫内膜整合素β3亚基表达的调节
目的:研究外源性LIF及IL-1对围着床期子宫内膜整合素β 3表达的调节,探讨LIF参与着床的具体机制。方法:给孕2~4 d的小鼠注射不同浓度的白血病抑制因子、白介素- 1或白介素-1受体拮抗剂,应用免疫印迹法和RT-PCR法测定子宫内膜整合素β3的蛋白及 mRNA表达水平。结果:注射LIF、IL-1子宫内膜整合素β3的表达水平升高(P<0 . 05),且高剂量时升高更明显(P<0.01)。注射IL-1ra整合素β3水平下降(P<0 .05)。结论:细胞因子IL-1及LIF对围着床期子宫内膜表达整合素β3有促 调节作用,二者参与着床与调节细胞粘附分子表达有关。
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自身免疫性卵巢功能损伤与TH1/TH2型细胞因子表达关系的研究
目的:探讨TH1/TH2型细胞因子的表达与自身免疫性卵巢功能损伤机理关系。方法:分别用猪卵透明带(PZP)、猪卵透明带单克隆抗体靶抗原(17D3mAb-ZP)和PZP的抗独特型 抗体(Ab2)免疫小鼠,并测定各免疫组IL-2、IL-4水平,观察卵巢组织形态学改变。结果:Ab2免疫组主要介导TH2型免疫应答,而PZP和17D3mAb-ZP免疫组主要介导TH1型免疫应 答,PZP和17D3mAb-ZP免疫组对卵巢组织形态的影响较明显。结论:自身免疫性卵巢功能损伤与TH1型免疫应答有关。
关键词: 卵巢早衰 猪卵透明带 IL-2 IL-4 -
受体外周血IgG、MΦ、NK、CD4、CD8及MLR的变化与异种移植物存活的关系
目的:探讨受体外周血IgG、MΦ、NK、CD4、CD8及MLR的变化与异种移植物存活 的关系。方法:选用小鼠移植于大鼠耳后心肌组织模型,按实验所设Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组:在 术前12、8、4、0 d及10、6、2、0 d分别将小鼠脾细胞1×108个及抗脾细胞血清0.2 ml 静注 大鼠, 术日始 CsA 10 mg/(kg*d),Cy 20 mg/(kg*d),CD4 McAb、CD8 McAb、MΦ McAb、NK mAb均为250 μg/(kg*d),CCV 0.2 mg/(kg*d)腹腔注射至术后6 d。结果:Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组移植小鼠 心肌存活延长,尤以Ⅳ组存活时间达21 d左右(P<0.05),术后7 d外周血MΦ、NK细胞 显著增 多(P<0.01),并维持至术后21 d;移植术后7 d CD4、CD8稍增多,术后21 d显著增加( P<0.05 );术后7 dⅡ、Ⅲ、Ⅳ组IgG显著下降(P<0.05);术后7,21 d动态MLR比较无显著 差异(P>0.05)。结论: 外周血IgG、MΦ、NK细胞的变化可作为监测异种移植细胞性排斥反应的 指标,异种移植物存活时间延长,将面对宿主T 细胞免疫应答。
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胰岛移植用免疫隔离微胶囊的牢固度、生物相容性和通透性研究
目的:为了探讨用于胰岛移植的海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA) 生物膜的免 疫隔离效果。方法:采用高压静电成囊装置,制备APA微胶囊和微囊化胰岛,微囊直径为0.2 5~0.55 mm;取空微囊,利用恒温振荡仪振荡后测定其破损率;将空微囊移植至小鼠腹腔 ,分 别于不同时间由腹腔中灌洗出微胶囊,记数并观察其形态;取一定量空微囊分别与IgG、BSA 和胰蛋白酶孵育,测量其浓度变化确定APA微胶囊的通透性。结果:采用高压静电成囊技术制 成的APA微胶囊呈球形,大小均匀、表面光滑,具有较好的生物相容性;粒径为0.25~0.3 5 m m的微胶囊其牢固度大于粒径为0.45~0.55 mm的微胶囊;葡萄糖、胰岛素等小分子物质能 够自由通过 微囊膜,胰蛋白酶也可通过,但速度较慢;大分子物质牛血清白蛋白和免疫球蛋白则不能透 入APA微囊。结论: 采用高压静电成囊技术可制备高质量粒径为0.25~0.35 mm的微胶囊;这是 具有良好免疫隔离性能的APA微胶囊。
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HCG试条定量测试技术的探索
免疫金标试条是应用抗原、抗体特异性规律及胶体金显色原理工作的。用它 做临床检验,具有直观、快速、操作简便、价格低廉等优点[1]。但目前仅能靠测 试线有否显色进行定性检测,因此应用范围受到限制。以HCG(绒毛膜促性腺素)为例,定性只能判断有否怀孕。其实妇女怀孕后,HCG浓度会按一定规律变化,若规律异常,则可根据异常情况协助医生判断是否先兆流产、难免流产、异位妊娠、葡萄胎等,同时药物引流是 否有残留,某些妇产科疾病、术后治疗过程等都需要跟踪HCG指标变化[2]。由于免疫 金标试条具有快速、可单个测试等优点,越来越受到人们的极大关注。为此,本文作者研制 一种专门仪器,以解决金标试条的定量测试问题,通过临床实验,效果良好。
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ACTH单克隆抗体的制备和鉴定
ACTH是垂体分泌的重要激素之一,测定血浆ACTH对下丘脑-垂体-肾上腺轴功能的评 价 具有重要意义。制备ACTH单克隆抗体,以期建立ACTH-IRMA方法。 ACTH或其片段与BSA经碳化二亚 胺偶联剂联接后制备免疫原,初次免疫为完全福氏佐剂乳化后在背部皮下多点注射,ACTH剂 量约40 μg,以后每隔4 w以不完全福氏佐剂乳化后在背部或腹腔交替注射4~6次,剂量减 半 。融合前3 d每天以无佐剂的ACTH联接物行腹腔注射,总剂量为60 μg。按常规方法进行细 胞融合,每周换液2至3次。阳性克隆的筛选:培养上清液抗体检测按常规RIA进行,计算结 合率,以结合率大于3倍的非特异结合率为阳性。阳性孔经有限稀释法亚克隆3~4次后获得 2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,5G2为ACTH1-28片段所得,D3为ACTH1-13片 段所得。扩增 细胞,一部分冻存,另一部分种于已致敏的BALB/c小鼠腹腔产生含抗体的腹水。收集的腹水 稀释后,以RIA法测定各稀释点抗体的结合率,计算5G2和D3腹水抗体在50%结合率时的终稀 释度分别可达1:5 000和1:2 000。以 1%琼脂双扩(梅花孔)法作抗体亚类鉴定,5G2和D3抗 体 均为IgG1类型,轻链为λ链。根据标准曲线参数,通过公式6y0/(1- y0)(2- y0)(4- y0)( 3ED50-ED25) 计算5G2和D3抗体的亲和常数分别为5.1×109和4.9 ×107 M-1。以ACT H不同片段作 交叉反应试验,进行特异性鉴定。5G2和D3抗体与ACTH1-10、ACTH1-17、 ACTH1-24的交叉反 应率分别为0.04%、8.70%、100.00%和0、35.30%、69.30%。据此推断5G2抗体识别ACTH 氨基酸序列 的17~28片段,D3抗体识别ACTH氨基酸序列的10~13片段。 以羊抗鼠IgG-Sephadex G75偶 联 物层析柱,进行腹水抗体的亲和纯化。按本室的方法将纯化的5G2和D3抗体分别包被马来酸酐 -苯乙烯共聚物塑料管,制备固化抗体管,以125I-ACTH做固相放免, 通过大结合率 确定5G2和D3抗体的饱和结合量分别为5 μg和20 μg,为建立固相IRMA奠定了基础。 ACTH是 垂体分泌的39肽分子,由于ACTH分子量小,在体内半衰期短;ACTH氨基酸序列只在第26至 33之间有3个氨基酸残基有种属差异,小鼠的免疫细胞不易识别,终导致小鼠不易产生抗 体。在本实验中只有18.3%的小鼠血清抗体阳性,而且抗体滴度不高。我们经过反复筛选获 得的2株抗体分别识别ACTH氨基酸序列的第17~28片段和第10~13片段,其亲和常数分别达 109和107 M-1, 用于液相放射免疫分析不足以达到理想的灵敏度,据文 献报道使用2个单 克隆抗体,建立IRMA方法,则灵敏度可显著提高。由于这2株单抗识别的位点不同,有望建 立ACTH-IRMA方法。
年 | 期数 |
2019 | 01 03 04 05 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |