中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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再生障碍性贫血外周血和骨髓免疫活性分子变化及临床意义
目的:研究免疫活性分子异常在再生障碍性贫血(AA)发病中的作用及临床意义.方法:应用ELISA测定AA患者骨髓(BM)及外周血(PB)白介素-2(IL-2)、Flt3配体(FL)、可溶性Fas配体(sFasL)的含量变化.结果:AA患者BM及PB中IL-2含量均显著升高;与正常对照相比,该种变化在急性AA尤为明显(P＜0.01),绝大部分患者sFas-L含量增加;FL水平升高尤为显著,达正常水平的25倍以上,且PB与BM的浓度无区别,经治疗有效者IL-2、sFasL和FL明显下降,但sFasL和FL水平不能恢复正常,动态测定表明IL-2、sFas-L和FL的含量与临床疗效密切相关.结论:AA患者PB和BM中免疫活性分子增多是其自身反应性T细胞的异常活化原因之一,定期测定IL-2、sFasL和FL有助于预后判断.
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肺癌患者外周血单个核细胞Th1/Th2反应状态及黄芪的调节作用
目的:探讨肺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2免疫反应状态,观察中药黄芪(AG)对其作用.方法:采集并分离肺癌患者和健康志愿者的PBMCs,各分为4组:其中1组即刻冻存待测,其余3组分别为不加药对照组、加10%AG、20%AG组,培养48h,收集细胞.以IL-2、IFN-γ代表Th1型细胞因子,IL-4、IL-6、IL-10代表Th2型细胞因子,用RT-PCR方法检测肺癌患者PBMC中Th1/Th2型细胞因子mRNA的表达.结果:肺癌患者PBMC中,IL-4、IL-6和IL-10表达阳性率显著高于正常对照(P＜0.05),而IL-2无1例表达(0/23),IFN-γ仅1例表达;经与黄芪培养后(2种浓度),肺癌患者Th2型因子与未加AG培养组相比,IL-4、IL-6和IL-10的表达率下降(P＜0.05);而IL-2的表达率显著提高(P＜0.05).结论:肺癌患者外周血的免疫细胞呈现Th2型免疫反应优势状态;黄芪对于肺癌宿主PBMCs Th1/Th2的状态有良好的调节作用,可使肺癌患者PBMCs的Th2型优势免疫反应向Th1方向逆转.
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组胺对T细胞IL-2产生及增殖活性影响的实验研究
目的:了解组胺对CD4+和CD8+T细胞IL-2产生和细胞增殖活性的影响.方法:密度梯度离心及吸附法分离PBMC和PBLC,采用抗CD4+和CD8+抗体分别制备CD8+和CD4+T细胞进行培养,然后采用ELISA法和MTT比色法测上清液IL-2含量及增殖活性.结果:①组胺+CD4+(CD8+)培养上清液中IL-2水平及MTT增殖指数与T细胞自然培养孔比较明显降低(P＜0.05).②组胺+CD4+(CD8+)+西咪替丁培养孔上清液中IL-2水平及MTT增殖指数明显高于未加西咪替丁孔(P＜0.05).③CD4+T细胞自然培养孔上清液中IL-2水平显著高于GD8+T细胞自然培养孔.结论:组胺可抑制T细胞IL-2产生及增殖.西咪替丁可阻断组胺对T细胞的抑制作用.GD8+T细胞也可产生IL-2,但其功能较CD4+T细胞为低.
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束缚应激小鼠脾淋巴细胞功能的改变
目的:探讨束缚应激(IMS)对小鼠脾淋巴细胞功能的影响.方法:用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测膜IL-2受体(mIL-2R)和细胞增殖周期,用荧光指示剂Fura-2/AM检测细胞内[Ca2+],将IMS后的结果与正常组进行比较.结果:IMS后细胞增殖反应的低点在IMS结束后0,24h后接近正常.在IMS后0 h,mIL-2R较正常组显著降低,细胞增殖可能受阻于G2/M期,细胞内[Ca2+]显著增高(P＜0.05).结论:IMS可以引起淋巴细胞功能障碍,从而导致免疫抑制.
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大鼠白细胞介素10(IL-10)cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达
目的:克隆大鼠白细胞介素10(IL-10)cDNA的全长序列,并使其在大肠杆菌中表达,为其分子生物学利用奠定基础.方法:无菌条件下切取大鼠的脾脏,收获脾细胞,用LPS刺激培养4 h;提取细胞的总RNA,用RT-PCR技术克隆IL-10cDNA的全长序列;经测序后将IL-10cDNA插入表达载体pJW2,转染DH5α细胞后进行热诱导表达并对表达蛋白进行测定.结果:脾细胞经LPS刺激后IL-10转录水平增加,从提取的RNA易反转录并扩增出期望的PCR产物,测序结果表明得到的IL-10cDNA序列与基因库报告的序列完全一致.将其插入表达载体pJW2后经热诱导顺利表达出蛋白分子量与文献报道一致.Westem-blot分析表明表达的条带可与小鼠抗大鼠IL-10抗体特异性结合.结论:大鼠的IL-10 cDNA全长序列被成功克隆,克隆序列能够在大肠杆菌中表达.
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hCGβ与鼠补体片段C3d的连接及其在真核细胞中的表达
目的:构建含新型分子佐剂C3d的hCGβ真核细胞表达质粒,以提高hCGβ的免疫原性.方法:用PCR方法在hCGβcDNA3'端引入BamHI位点,然后利用酶切位点的互补性,与C3d3cDNA连接,构建了pBS-hCGβ-C3d3质粒,后插入真核细胞表达质粒pcDNA3的CMV启动子下游,以产生pcDNA3-hCGβ-C3d3.将此融合质粒转染瞬时表达系统COS-7细胞表达相应产物.其无血清培养上清液用免疫亲和层析法纯化重组蛋白.Raji细胞免疫细胞化学技术鉴定表达产物准确性.结果:真核细胞瞬时表达系统COS-7细胞经转染了pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒后,可分泌hCGβ重组蛋白.1.0×105个COS-7细胞转染了pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒,经72 h培养后,可产生152ng的hCGβ重组蛋白,且表达量随时间延长而增高.在有血清培养基中的分泌量明显高于无血清培养基.同时,用Raji细胞免疫细胞化学分析表达产物显示,纯化的表达产物既有C3d结合受体活性,亦有hCGβ抗原性.结论:利用新型分子佐剂C3d与hCGβ的连接,构建了pcDNA3-hCGβ-C3d3真核细胞表达质粒,为提高hCGDNA免疫避孕疫苗的免疫原性及抗生育作用奠定了基础.
关键词： hCGβ C3d3 COS-7 -
小鼠GM-CSF基因真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定
目的:构建小鼠GM-CSF基因的高效真核表达载体,筛选导入该载体后高水平表达GM-CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA,并探讨转GM-CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法.方法:PCR扩增小鼠GM-CSF cDNA 3'端770 bp的片段,将其插入真核表达载体pcDNA3;用电穿孔法将构建的载体导入小鼠淋巴瘤细胞系RMA,有限稀释法制备单个细胞克隆,经RT-PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达GM-CSF的RMA克隆,该克隆细胞经丝裂霉素灭活后免疫小鼠以诱导其产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力.结果:构建的重组质粒含有预期片段,插入方向正确,核酸序列无误;且获得了高表达GM-CSF的RMA克隆,将其用丝裂霉素灭活免疫小鼠后使它们产生了抗肿瘤免疫保护力.结论:转GM-CSF基因瘤苗可能作为有效的抗T淋巴细胞瘤瘤苗.
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TRAIL胞外段基因克隆及其表达与纯化
目的:克隆TNF相关的诱导凋亡配体胞膜外段基因(the extracellular region of the human TRAIL cDNA,TPAILex),构建表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达有生物学活性的TRAIL蛋白胞膜外段.方法:抗CD3McAb刺激正常人外周血淋巴细胞,用RT-PCR、巢式-PCR方法从活化的淋巴细胞中获得人TRAIL基因及其胞膜外段cDNA,并克隆到pGEM-T Easy载体中,DNA测序鉴定.将TRAIL的胞膜外段基因插入表达载体pGEX-2T,构建重组表达质粒pGEX/TRAILex,用IPTG诱导表达TRAIL蛋白的胞膜外段,GST-Agarose 4B层析柱纯化GST-TRAILex融合蛋白,Westem-blot鉴定纯化产物.结果:抗CD3 McAb能诱导正常人外周血单个核细胞TRAIL的高表达,成功地克隆了TRAIL胞膜外段基因,构建了重组表达载体pGEX/TRAILex,IPTG诱导后得到高效表达的TRAIL蛋白胞膜外段,经12%SDS-PAGE分析,可观察到一分子量和理论值相符(约54kD)的诱导表达带.Kodak软件分析表面GST-TRAIL胞膜外段融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的28%,进一步分析证实TRAIL蛋白的胞膜外段主要以可溶性的形式表达,用GST-Agarose4B层析柱纯化超声破菌后的上清,每升细菌培养液可得到9.8 mg纯度的95%以上的GST-Tex.Western-blot结果证实54KD的表达带可与鼠抗TRAIL McAb起特异性反应.结论:成功地克隆了人TRAIL基因,并应用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人TRAIL蛋白的胞膜外段,为进一步研究TRAIL的功能及其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础.
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抗幽门螺杆菌牛奶的制备及鉴定
目的:制备用于防治H pylori感染的抗H pylori免疫牛奶.方法:用全体活H pylori作为抗原,采用皮下多点注射免疫的方法免疫健康奶牛,经过若干次免疫,获得抗H pylori的多克隆免疫牛奶.结果:用直接凝集法和双向琼脂扩散法测得免疫牛奶高效价分别达到了1:2 048和1:32.结论:所制备的免疫牛奶具有多克隆性和很高的效价.
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电鳐乙酰胆碱酯酶标记第二抗体酶联免疫吸附测定法
目的:以电鳐乙酰胆碱酯酶标记二抗,建立该酶的酶联免疫吸附方法.方法:采用改良高碘酸钠氧化法.结果:标记过程中对AChE的酶活性影响较大的因素有pH值,温度以及NaIO4浓度.AChE酶标记的羊抗小鼠IgG的效价至少高于HRP酶标记的羊抗小鼠IgG一个数量级.结论:制备的乙酰胆碱酯酶标记第二抗体在酶联免疫吸附测定法中高效地取代辣根过氧化物酶及碱性磷酸酶标记第二抗体.
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丙型肝炎病毒(HCV)荧光PCR(F-PCR)试剂盒的研制及与免疫学方法的比较
目的:用荧光PCR(Fluorescence PCR,F-PCR)方法研制丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)RNA检测试剂盒,通过临床验证,考核其性能,并与免疫学方法比较.方法:F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法.由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏度.结果:设计合成了HCV F-PCR诊断试剂盒.检测了512份临床血清标本,以美国Abbott公司的HCV ELISA诊断试剂盒和美国Biotronics公司的HCV荧光RT-PCR诊断试剂盒(B-PCR)为对照.阳性率30.5%,灵敏度97.3%,特异性98.1%.结论:F-PC的灵敏度显著优于ELISA,也高于B-PCR;三者的特异性无统计学差异.F-PCR试剂盒可以检测HCV的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义.
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冷冻和TNF-α基因修饰肿瘤疫苗的研究
目的:探索用TNF-α基因修饰联合冷冻法制备更高效能的抗肝癌疫苗的可能性.方法:分别用冷冻和60Co照射处理或者单独用60Co照射处理TNF-α基因修饰的H22细胞,分别制备疫苗.比较这2种疫苗的抗小鼠接种性肝癌的作用.结果:用冷冻和60Co照射处理TNF-α基因修饰的H22细胞制成的疫苗,其提高小鼠的抑瘤率、脾淋巴细胞IL-2和TNF诱生水平及脾脏NK细胞杀伤活性的作用,均明显优于单独用60Co照射处理TNF-α基因修饰的H22细胞制成的疫苗.结论:冷冻处理TNF-α基因修饰的H22细胞,可提高该细胞的免疫原性,从而可提高疫苗的抗小鼠接种性肝癌的效能.
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基因工程人催乳素(rhPRL)对人NK细胞免疫活性的调节作用
目的:探讨rhPRL对NK细胞系增殖状态及细胞毒活性的调节作用.方法:利用MTT比色法结合细胞计数法观测了rhPRL对三种NK细胞系(NKL、NK-92、YT)增殖活性和细胞毒活性的影响;RT-PCR法、直接免疫荧光法和FACS技术检测了PRL-R和CD25在不同细胞系的表达状况以及rhPRL对CD25表达强度的影响.结果:MTT结果表明,在低剂量IL-2存在的条件下,rhPRL浓度为12和100 ng/ml时对NK-92和NKL表现出佳刺激效应,该反应呈双峰型曲线.相反,YT细胞的增殖状态和细胞毒效应均无明显改变.当有足量IL-2(100U/ml)存在时,rhPRL对三种NK细胞系均无明显刺激作用.RT-PCR和直接免疫荧光结果显示,三种细胞系均有PRL-R表达,其表达量以NKL细胞高,NK-92和YT荧光强度较弱.FACS结果表明CD25在NKL表达量高约90%,NK-92次之约为50%,YT低为10%,rhPRL刺激后其表达明显上调.结论:rhPRL能促进NK细胞系(NK-92和NKL)的增殖活性和杀伤活性,该效应可能部分是通过IL-2受体表达并参与其下游信号呈递通路实现的.
关键词： PRL NK细胞系 RT-PCR -
怀牛膝抗着床作用与子宫肥大细胞的关系
目的:探讨怀牛膝苯提取物的抗着床作用与子宫肥大细胞(mast cell,MC)的关系.方法:孕鼠自孕1 d起连续灌服怀牛膝苯提取物5 d(2g/L×2 ml/d×5 d);取其孕3～7 d子宫做冰冻切片;用组织化学和免疫组织化学双重染色技术检测MC的数量、胞内TNF-α和表面ICAM-1的表达状况.结果:灌药后,孕3～7 d子宫MC总数较对照组显著增多(P＜0.001);TNF-α免疫反应阳性MC(TNF-α+MC)数也显著多于对照鼠(P＜0.001),MC中的TNF-α阳性率(TNF-α+MC/MC总数)由对照组的约10%提高到30%左右;ICAM-1免疫反应阳性MC(ICAM-1+MC)较对照组也显著增加,但ICAM-1阳性率有不同程度下降.结论:怀牛膝可使孕鼠子宫MC数量显著增多、表达TNF-α的能力大幅度提高,这可能是怀牛膝抗着床的免疫学机制之一.
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人绒毛膜促性腺激素诱导JEG-3细胞TGF-β3的表达
目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)对绒癌细胞系表达转化生长因子(TGF-β3)的影响.方法:以绒癌细胞来源的JEG-3细胞系为研究对象,采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,观察HCG对JEG-3细胞表达TGF-β3mRNA的影响.结果:分别用0、50、500、5 000、25000 mU/ml hCG处理48h后,JEG-3细胞中TGF-β3mRNA的含量逐渐被诱导增多,并表现出一定的浓度效应--随hCG作用浓度增高而显著;另外,分别检测受25000 mU/ml hCG处理0、6、12、24、30、36、48h的JEG-3细胞中TGF-β3mRNA的表达情况,发现TGF-β3表达受hCG的诱导在30 h时强,之后逐渐减弱.结论:hCG可能通过调节TGF-β3在滋养细胞或滋养细胞来源的绒癌细胞中的表达,进而影响细胞的浸润转移.
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β连环素和表皮生长因子受体在非小细胞肺癌中表达的临床研究
目的:探讨β连环素和表皮生长因子受体在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组化法回顾性研究了58例非小细胞肺癌标本β-catenin和EGFR的表达,并分析其表达与病理类型、分化程度和淋巴结转移的关系.结果:58例肺癌标本中β-catenin强阳性表达23例(36.66%);EGFR强阳性表达27例(46.55%),弱阳性表达19例(32.76%);β-catenin和EGFR的表达与病理类型均无关;β-catenin的表达与分化程度有关;β-catenin和EGFR的表达均与有无淋巴结转移密切相关;β-catenin与EGFR的表达呈负相关关系(r=-0.331 7,P=0.0110).结论:β-catenin与EGFR的表达与非小细胞肺癌的生长分化、淋巴转移等恶性行为密切相关,EGFR的高表达可能与β-catenin表达水平降低有关.
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CD44v6和Bcl-2蛋白在甲状腺癌中的表达及相关性研究
目的:探讨甲状腺癌组织中CD44v6和Bcl-2蛋白的表达与肿瘤发生和转移的关系,并探讨CD44v6和Pcl-2表达的相关性.方法:应用催化信号放大系统免疫组化技术,检测50例甲状腺癌、45例甲状腺腺瘤和20例癌旁正常甲状腺组织中CD44v6和Bcl-2蛋白表达.结果:在甲状腺癌CD44v6和Bcl-2表达阳性率分别为64.0%和46.0%,均显著高于甲状腺腺瘤和癌旁正常甲状腺组织(P＜0.05),CD44v6和Bcl-2阳性率均与甲状腺癌淋巴结转移相关(P＜0.05).CD44v6和Bcl-2表达呈正相关.结论:CD44v6和Bcl-2表达对预测甲状腺癌转移和评估预后是一种重要参考指标.
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从哈佛大学医学免疫学理论课的教学内容和形式想到的
毫无疑问,学校教育的永恒主题和核心是教学质量.因此,如何围绕免疫学知识体系的特点不断地进行教学改革、充实和完善学生对这一学科的知识积累,培养学生独立学习、分析及解决问题的能力,进一步提高学生的科学素质,自然成为免疫学教学的关键.
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原因不明习惯性流产患者主动免疫前后IL-4、IL-12变化的研究
目的:探讨原因不明习惯性流产(UHA)患者主动免疫治疗前后外周血IL-4和IL-12 mRNA水平的变化.方法:用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例正常非孕妇女和30例UHA妇女的外周血单个核细胞内IL-4和IL-12mRNA表达水平的相对含量(%).结果:①UHA组妇女外周血单个核细胞上IL-4 mRNA的相对含量,明显低于正常非孕组妇女(P＜0.01).而IL-12 mRNA的相对含量明显高于正常非孕组妇女(P＜0.05).②主动免疫治疗后,UHA组妇女外周血单个核细胞上IL-4 mRNA的相对含量较治疗前明显升高(P＜0.05),而IL-12 mRNA的相对含量较治疗前明显降低(P＜0.01).③主动免疫治疗后,UHA组妇女上述细胞因子mRNA的相对含量与正常非孕组妇女相比无显著差异.④主动免疫治疗后,妊娠成功者其外周血单个核细胞上IL-4 mRNA的相对含量较治疗前明显升高(P＜0.05),IL-12 mRNA的相对含量较治疗前明显降低(P＜0.05);而妊娠失效者IL-4和IL-12 mRNA的相对含量与治疗前无显著差异.结论:IL-4和IL-12的表达异常与UHA的发生密切相关,主动免疫治疗可上调IL-4的表达及下调IL-12的表达,可能进一步诱导TH2分化和抑制TH1分化,从而促使TH1/TH2型细胞因子平衡向TH2为主的模式转换,并使妊娠获得成功.
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Ⅰ型糖尿病人来源胰岛细胞抗原2特异性T细胞克隆的建立及其细胞毒性研究
目的:为了研究Ⅰ型糖尿病中细胞介导的自身免疫损伤因子.方法:采用有限稀释法建立糖尿病病人自身抗原IA2抗原特异性的T细胞克隆,51Cr释放细胞毒性试验测定T细胞激活的HLA限制性和IA2肽段中小的抗原表位,并用流式细胞仪分析其表面凋亡相关的肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)家族细胞因子Fas配体(Fas Ligand,FasL)、TNF凋亡诱导配体(Tumor Necrosis Factor Apoptosis-InducingLigand,TRAIL)、TNFα表达和细胞内的Perforin和Granzyme B的表达.结果:建立了IA2抗原特异性的T细胞克隆JDM IA2A2,其为HLA DR5限制,IA2小抗原表位在IA2(838-846),其表面没有FasL表达,39.3%细胞表达TRAIL,29.23%细胞表达TNFα,细胞内没有Perforin,但59.16%细胞有Granzyme B.结论:TRAIL、TNFα、GranzymeB可能参与T细胞介导的胰岛β细胞损伤.
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应用微囊化转基因细胞进行小鼠腹腔移植的实验研究
目的:探讨微囊化转基因细胞用于异体细胞移植治疗的可能性.方法:使用静电液滴技术制备海藻酸钠-壳聚糖微胶囊,包埋转入癌胚抗原部分基因的人成纤维样骨髓基质细胞,进行实验小鼠腹腔移植.结果:微囊化人源细胞移植到小鼠腹腔3个月内,细胞可以继续生长、增殖并提高小鼠的免疫功能.结论:海藻酸钠-壳聚糖作为成囊材料具有良好的生物相容性、囊膜强度和免疫隔离作用;微囊化细胞移植有助于扩大异体移植的细胞来源,并为构建微囊化转基因细胞疫苗治疗恶性肿瘤的研究提供了可靠的依据.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
