中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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糖皮质激素升高因子在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用
目的:观察外周血中糖皮质激素升高因子(GIFs)水平在GIF-HPA反馈回路及实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)形成中的作用,探讨AITD发病机理.方法:采用EAT易感的Lewis大鼠和非易感的Wistar大鼠,均用Tg免疫诱发EAT形成,观察免疫后不同时间(初次抗原免疫后3～4小时和8～12小时及EAT形成时),其甲状腺组织炎症反应和血清中皮质醇、GIFs(IL-1β,IL-6)和TPOAb水平.结果:诱发EAT的Lewis大鼠甲状腺炎发病率及甲状腺炎细胞浸润程度,均明显重于Wistar大鼠.Tg免疫后3～4小时,Lewis大鼠血清中皮质醇水平呈轻度升高, 而Wistar大鼠明显升高.两种大鼠血清中GIFs(IL-1β,IL-6)水平动态变化与各自皮质醇水平的变化类似,免疫后Wistar大鼠血清中两种细胞因子水平的升高水平均明显高于Lewis大鼠.免疫后(3～4小时组除外)Lewis大鼠血清中TPOAb水平明显高于Wistar大鼠.结论:可以认为个体免疫应答生成的IL-1β、IL-6等细胞因子水平会影响GIF-HPA反馈回路,其异常反应也是构成AITD发病的因素.
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多发性硬化患者外周血CD4+CD25high T细胞上4-1BB和GITR的表达
目的:以往研究表明4-1BB和GITR均可表达于CD4+CD25+调节T细胞(regulatory T cell,Tr),在由该细胞群维持的自身耐受中起着重要作用.另有研究报道人外周血CD4+CD25high T细胞与该Tr的功能活性更为接近,且在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)患者中的效应功能明显降低,但目前对其是否与上述两类分子的表达有关尚不清楚,因此我们检测了MS患者外周血CD4+CD25high T细胞上4-1BB、GITR的表达,旨在发现该调节T细胞群是否有上述分子的异常表达.方法:用流式细胞仪检测了未治疗MS、其他神经系统疾病患者、正常对照组外周血CD4+CD25high T细胞表面4-1BB、GITR的表达.结果:与正常对照比较,MS患者CD4+CD25highT细胞4-1BB的表达明显减少(P＜0.05),而在CD4+CD25-T细胞的表达则与正常对照无明显差别(P＞0.05).三组间CD4+CD25high T细胞及其GITR的表达亦无显著差别(P＞0.05).结论:本研究发现MS患者CD4+CD25highT细胞上4-1BB的表达减少,而GITR的表达则较正常对照组则无显著差别,我们的结果提示该细胞群免疫活性的降低可能与其4-1BB的表达下调有关,而GITR则在CD4+CD25high T细胞的免疫调节过程中可能发挥着次要或精细调节的作用.
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人胸腺基质淋巴细胞生成素(hTSLP)的结构与免疫调节作用
TSLP是1994年被发现的一种细胞因子,它主要由上皮细胞表达,其生物学作用尚未充分阐明.近来对其研究集中于过敏性皮炎与哮喘的发病机制中,本文拟综述这方面的研究进展.
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人NK细胞亚群与生物学功能关系的研究进展
NK细胞是机体免疫系统的重要组成部分,在抗病毒感染免疫、肿瘤免疫、移植的排斥反应以及在免疫的调节中起着十分重要的作用.长期以来的研究表明,NK细胞并不是一个均一的细胞群体,根据表面标志和功能的不同,可以将NK细胞分为不同的亚群.
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Fas/FasL与妊娠免疫耐受及病理妊娠研究进展
Fas属于TNFR/NGFR(肿瘤坏死因子受体/神经生长因子受体)超家族的Ⅰ型跨膜蛋白,胞内区有一段80个氨基酸的序列与细胞的凋亡信号传递有关,称为死亡功能区.
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新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定
目的:对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定.方法:采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性.结果:B7-2-PE40KDEL经12%SDS-PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算,其相对分子量为72 628,与理论预测值69 561相比误差在5%之内;全波长扫描分析显示该目的蛋白分别在225 nm和276 nm处各有一吸收峰;MALTI-TOF-MS质谱测定共获得15个与理论预测值相符的肽段,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明,在分子量为60 000～80 000的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白,证明本融合蛋白为全新蛋白,与我们预测的目的蛋白相符;Western blot实验显示B7-2-PE40KDEL能与人B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT杀伤活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28+的人T淋巴瘤细胞系Jurkat产生特异性杀伤,而对不表达的CD28-淋巴细胞系Raji无任何杀伤.结论:重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白为一全新的具有靶向B7:CD28细胞杀伤活性的蛋白质.
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Annexin V/PI双标记检测高电压脉冲电场诱导K562细胞凋亡的研究
目的:探讨高电压脉冲电场诱导红白血病细胞K562和淋巴细胞凋亡的佳参数.方法:调节电场强度和脉冲频率分别作用K562细胞和淋巴细胞后,用Annexin V/PI Kit标记凋亡细胞,流式细胞术检测凋亡细胞的百分比;设计正交试验确定电场诱导K562细胞凋亡的优参数组合; 电场作用K562细胞与淋巴细胞(1∶ 1)混合悬液进行选择性诱导凋亡;MTT法检测电场作用后的K562细胞与淋巴细胞的增殖.结果:K562细胞的凋亡率随着脉冲频率的增加而升高,当脉冲频率为30 Hz时,凋亡率高达79.13%;K562细胞和淋巴细胞的凋亡率均随着电场强度的增加而升高,在电场强度达到30 kV/cm时,二者的凋亡率分别达82.40%、57.08%.诱导K562细胞凋亡的优参数组合为脉冲宽度1 μs、电场场强25 kV/cm、脉冲个数为12个.K562细胞与淋巴细胞混合液在电场作用下发生凋亡的细胞百分比具有显著性差异(P＜0.05);K562细胞与淋巴细胞经相同条件的电场作用后,二者生存率比较,差异显著(P＜0.05).结论:利用高电压脉冲电场使癌细胞选择性失活是可行的.
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hTSHR188-403bp基因免疫BALB/c小鼠建立Graves'病动物模型
目的:构建pcDNA3.1/hTSHR(188～403 bp)重组质粒,并将其基因免疫BALB/c小鼠建立Graves'病动物模型.方法:RT-PCR扩增hTSHR膜外区188～403 bp,与pcDNA3.1载体连接,构建重组质粒pcDNA3.1/hTSHR,用酶切、PCR及测序方法进行鉴定.于1、4、7、9、10周将重组体免疫实验组小鼠,对照组注射生理盐水,0、6、11周取血,检测血清TRAb、T4、TSAb、TBAb.取甲状腺常规病理切片,HE染色镜检.结果:构建的重组质粒经酶切、PCR鉴定证明插入方向正确,测序结果与GeneBank中hTSHR的相应片段序列相同.免疫组T4、TRAb和TSAb水平均从第6周开始显著升高(P＜0.05),TBAb差异无统计学意义(P＞0.05),对照组差异均无统计学意义(P＞0.05).实验组甲状腺病理检查结果,显示滤泡增生,胶质浓缩等Graves'病的病理表现,对照组形态正常.结论:构建了重组质粒pcDNA3.1/hTSHR(188～403 bp),成功建立了类Graves'病动物模型.
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骨髓间充质干细胞体外对T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4功能的影响
目的:探讨间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)对T淋巴细胞分泌功能的调节作用.方法:体外分离培养、扩增人骨髓MSCs,并通过形态学特征及流式细胞术检测其表面标志加以鉴定.将不同数量的MSCs(5×103、1×104、5×104个细胞/孔)分别与PHA激活的T细胞和混合淋巴细胞反应(MLR)体系共培养,并将不同浓度(25%、50%、75%)的MSCs培养上清和MLR体系共培养.应用ELISA分别检测各培养上清液中T细胞分泌IL-2、IL-4的水平.结果:骨髓MSCs能抑制PHA作用下的T细胞分泌IL-2、IL-4(P＜0.05),并呈MSCs数量相关性(P＜0.05),且对IL-2的抑制作用更显著;也可抑制MLC体系中T细胞分泌IL-2、IL-4(P＜0.05),但各数量组的MSCs的抑制作用无显著性差异(P＞0.05).不同浓度的MSCs培养上清均可抑制MLC体系中T细胞分泌IL-2、IL-4(P＜0.05),但不同浓度的MSCs培养上清组对IL-4抑制作用无显著性差异(P＞0.05).结论:骨髓MSCs及其培养上清均可抑制PHA或异体抗原作用下的T细胞分泌IL-2、IL-4,提示MSCs可能是直接作用于T细胞或通过分泌可溶性因子调节 Th1/Th2反应平衡而发挥免疫调节作用的.
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转染IL-27基因的食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用
目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性.方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌.将Eca109/IL-27移植裸鼠腹腔,观察瘤细胞的成瘤性和裸鼠的生存期.用RT-PCR检测IL-27基因在裸鼠体内瘤组织中的表达,用流式细胞仪检测CD204表达、细胞周期和细胞凋亡变化.结果:成功建立了表达IL-27基因的人食管癌细胞株Eca109/IL-27,该细胞培养上清中IL-27含量为(137.73±7.00)pg/ml,而Eca109/LXSN和Eca109细胞培养上清中未检出IL-27(P＜0.01),但Eca109/IL-27与Eca109/LXSN和Eca109细胞周期和细胞凋亡率无明显差异(P＞0.05).将Eca109/IL-27、Eca109/LXSN 和Eca109细胞分别接种裸鼠腹腔15天后,各组裸鼠均于腹腔形成多数瘤结节,Eca109/IL-27组明显少于Eca109/LXSN 和Eca109细胞组(P＜0.05);Eca109/IL-27组裸鼠的生存期(35天时均无死亡)明显长于Eca109/LXSN 和Eca109细胞组[分别为(23.33±1.52)、(24.00±1.37)天](P＜0.01);Eca109/IL-27组肿瘤组织中有p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109/LXSN 和Eca109细胞组瘤组织中未见表达(P＜0.01);其CD204表达水平、细胞凋亡率也明显高于接种Eca109/LXSN与Eca109细胞组(P＜0.05);G0/G1和G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少,与接种Eca109/LXSN和Eca109细胞组比较均有显著差异(P＜0.05).结论:IL-27可于体内促进肿瘤细胞凋亡,阻滞细胞周期发展,提高CD204的表达,延长生存期,发挥抗肿瘤免疫活性.
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WWOX基因调控Lewis肺癌细胞免疫抑制效应研究
目的:探讨WWOX基因调控Lewis肺癌细胞免疫抑制效应.方法:将已构建的真核表达载体pCDNA4.0/myc-WWOX转染到Lewis肺癌细胞中,采用MTT法检测转染前后肿瘤细胞培养上清对鼠脾细胞增殖的影响;半定量RT-PCR法检测肿瘤生长相关因子mRNA的表达.体内肿瘤局部注射pCDNA4.0/myc-WWOX质粒,计算抑瘤率并采用MTT法检测NK、CTL杀伤活性和淋巴细胞增殖能力.结果:WWOX基因转染细胞的培养上清对鼠脾细胞的增殖抑制作用与对照组比较显著下降(P＜0.05);WWOX基因转染后TGF-β、VEGF、FasL三种肿瘤生长相关因子的mRNA表达降低;WWOX基因体内注射后能够抑制肿瘤生长,抑瘤率可达71%;NK、CTL的杀伤活性和淋巴细胞转化能力与对照组比较,具显著差异(P＜0.05).结论:WWOX基因转染Lewis肺癌细胞具有抑瘤作用与免疫抑制效应,提示WWOX基因可能通过降低肿瘤生长相关因子的mRNA表达、促进淋巴细胞增殖、提高NK和CTL的杀伤活性,实现其对Lewis肺癌细胞免疫抑制效应的调控.
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苦杏仁甙与人淋巴细胞产生细胞因子效应的初步观察
苦杏仁甙免疫活性的研究已见较多报道,但未见有对人免疫功能影响的相关研究.本文观察了苦杏仁甙对人淋巴细胞增殖及其分泌细胞因子的影响,以期为临床应用提供实验基础.
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加味小柴胡颗粒及其组方对ITP模型小鼠免疫功能的影响
目的:观察加味小柴胡颗粒及其组方对ITP模型小鼠免疫器官和免疫功能的影响.方法:建立ITP模型小鼠,将之分为5组:(1)正常组;(2)模型组;(3)加味小柴胡颗粒组;(4)小柴胡颗粒组;(5)丹参三七颗粒组.于造模后第7天开始分组给药,给药体积为30 ml/kg体重,每日给药一次,共14天.造模21天眼球取血,流式细胞仪测定外周血T 淋巴细胞亚群,双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测外周血血小板抗体,放射免疫法(RIA)测定外周血淋巴细胞因子IL-2、IL-10;处死后,取出胸腺、脾脏称重,计算免疫器官指数.结果:ITP模型小鼠免疫器官脾脏肿大,指数上升;外周血血小板抗体水平增高;T淋巴细胞亚群失调,CD8升高,CD3、CD4下降,CD4/CD8下降;Th1类细胞因子IL-2亢进,Th2类细胞因子IL-10受抑;与正常组比较有显著差异(P＜0.05).加味小柴胡颗粒组与小柴胡颗粒组脾脏指数下降,血小板抗体水平下降,CD3、CD4、CD4/CD8上升,CD8下降,下调IL-2 ,上调IL-10,与模型组相比有显著差异(P＜0.05),而丹参三七颗粒组无差异(P＞0.05).结论:ITP模型小鼠免疫器官及功能异常,加味小柴胡颗粒及小柴胡颗粒有调节作用,丹参三七颗粒则无影响.
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过敏原对支气管哮喘患者Th1/Th2作用影响的研究
目的:通过测定哮喘患者外周血及外周血单个核细胞(PBMC)受特异性过敏原刺激后细胞因子IFN-γ/IL-4、转录因子T-bet/GATA-3的表达变化,探讨Th1、Th2与过敏性哮喘之间的关系.方法:①采用ELISA法检测发作期过敏性哮喘患者血浆IFN-γ/IL-4及PBMC在粉尘螨(Df)刺激下产生IFN-γ/IL-4的水平,并以正常人为对照.②采用半定量RT-PCR反应检测过敏性哮喘患者PBMC受过敏原刺激前后T-bet mRNA、GATA-3 mRNA的表达水平,并以正常人为对照.结果:①哮喘患者血浆IL-4水平较正常人升高(P=0.001 7),IFN-γ与正常人无明显差异(P=0.760 0),IFN-γ/IL-4的比值显著低于正常人(P=0.000 1).②经过敏原刺激后,哮喘患者PBMC产生的IL-4、IFN-γ水平均较正常人显著升高(t=3.564 4,P=0.001 0;t=3.350 0,P=0.002 0),但哮喘患者IFN-γ/IL-4的比值仍显著低于正常组(t=6.364 0,P=0.000 1). ③哮喘患者PBMC中GATA-3的表达量较正常人显著增高(t=2.274 3,P=0.028 0),而T-bet的表达量与正常人比较无显著变化(t=0.382 3,P=0.704 4),哮喘患者T-bet/GATA-3比值与正常人也未见显著差异(t=1.115 2,P=0.283 4). ④经过敏原刺激后,哮喘患者PBMC中T-bet、GATA-3表达水平较正常人显著增高(t=2.298 2,P=0.027 6;t=3.788 7,P=0.000 6),但T-bet/GATA-3的比值与正常人比较仍无显著差异(t=1.195 9,P=0.249 1).结论:在细胞因子及转录因子水平上,过敏性哮喘患者不仅存在着Th2反应增强,也存在着Th1反应的增强,因此用Th1/Th2平衡失调学说尚不能满意解释过敏性哮喘的发病机制.
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树突状细胞在再生障碍性贫血患者T细胞寡克隆增生中的作用
目的:探讨树突状细胞(Dendritic cell ,DC)在再生障碍性贫血(AA)发病中的作用,尤其是对淋巴细胞异常活化的激发作用.方法:采用直接免疫荧光标记流式细胞术分析AA患者骨髓中I型DC的比例;在体外用重组人粒单细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)及白介素4(IL-4)诱导外周血单个核细胞成为DC,流式细胞仪检测DC表型,并观察经纯化人脐血CD34+细胞抗原,经可溶性人CD40配体(rhsCD40L)激发后对自体T细胞活化和扩增效应;实时定量PCR(RQ-PCR )定量测定DC载荷抗原前后T细胞TCR Vβ基因谱的改变.结果:AA患者骨髓中CD1a+CD11c+细胞和CD11c+CD83+双阳性细胞比例增多,且以CD11c+CD83+双阳性的成熟DC为主;外周血来源的DC负载人脐血CD34+细胞后对自体淋巴细胞具有明显的刺激作用,并使T细胞TCR Vβ基因谱发生取用偏移.结论:DC在AA淋巴细胞寡克隆增殖中起重要作用,但识别的何种抗原尚进一步研究.
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补肾益气方对TNF-α/IFN-γ诱导的早孕期人滋养层细胞凋亡的影响
目的:探讨补肾益气方对TNF-α/IFN-γ诱导的早孕期人滋养层细胞凋亡的调节作用.方法:TNF-α/IFN-γ和含药血清共培养细胞后,采用MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞亚二倍体峰,原位缺口末端标记法(TUNEL染色)、caspase-3活性检测试剂盒检测凋亡,Western blot 检测Bcl-2和XIAP蛋白.结果:TNF-α和IFN-γ联合给药培养后,细胞活力降低,亚二倍体细胞较未处理组明显增多,凋亡细胞数明显高于正常对照组,caspase-3酶活性明显升高,TNF-α/IFN-γ与含药血清共培养后,细胞活力升高,亚二倍体细胞数和凋亡细胞数却明显减少,caspase-3酶活性降低,Bcl-2和XIAP蛋白增加,并呈时间和剂量依赖性.结论:补肾益气方降低TNF-α和IFN-γ诱导的滋养层细胞凋亡的发生率.
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黄芪多糖对坐骨神经华勒变性大鼠细胞免疫功能的作用研究
目的:观察黄芪多糖对坐骨神经华勒(Wallerian)变性大鼠细胞免疫功能的影响.方法:Wistar 大鼠10只,制作小间隙桥接双侧坐骨神经损伤模型.实验组给予腹腔注射黄芪多糖20 mg/kg,对照组给予同体积生理盐水.连续给药7天.ELISA夹心法测定各组大鼠血清、脾细胞和巨噬细胞培养上清中IL-1β的含量.结果:实验组脾T淋巴细胞增殖能力巨噬细胞增殖能力明显强于对照组(P＜0.05).实验组脾细胞、巨噬细胞上清IL-1β水平高于对照组(P＜0.05),两组动物血清中IL-1β水平没有显著差异(P＞0.05).结论:黄芪多糖对坐骨神经华勒变性大鼠细胞免疫功能有调节作用,并可能通过此方式影响神经再生.
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HLA-DRB1等位基因与吉林地区汉族白癜风和寻常型银屑病相关性研究
目的:探讨HLA-DRB1等位基因与吉林地区汉族白癜风和银屑病的相关性.方法:采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术,对82例汉族白癜风患者和80例寻常型银屑病患者HLA-DRB1等位基因进行检测,与86名汉族健康人群进行对照.结果:①白癜风患者组HLA-DRB1*07和HLA-DRB1*12等位基因频率比对照组明显增高(P＜0.05);②银屑病患者组HLA-DRB1*07等位基因频率高于对照组,HLA-DRB1*01等位基因频率低于对照组(P＜0.05).结论:①HLA-DRB1*07和HLA-DRB1*12等位基因可能是吉林地区汉族白癜风的易感基因或与易感基因相连锁;②HLA-DRB1*07等位基因可能是寻常型银屑病的易感基因,HLA-DRB1*01可能为寻常型银屑病的保护性基因.
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环孢素A和他克莫司对肾移植受者外周血淋巴细胞活性影响的比较
目的:肾移植术后应用Calcineurin抑制剂需常规监测血清药物浓度,然而药物浓度并不能完全反应患者的免疫功能抑制状态,且药物的个体反应性差异较大,本研究旨在通过外周血单核细胞(PBMC)活性检测反应患者对Calcineurin抑制剂的敏感性.方法:采取40例肾移植受者术前抗凝血,Ficoll密度梯度离心法分离PBMC,置于RPMI1640培养基中培养,加入96孔培养板中予刀豆蛋白A刺激,并依次加入不同浓度的环孢素A(CsA)或他克莫司(TAC),之后加入二苯基四氮唑溴盐(MTT)、二甲亚砜(DMSO)裂解后于波长570 nm下测定吸光度.记录受试者肾移植后的急性排斥反应和巨细胞病毒感染等临床事件.结果:①受试者半数PBMC被抑制的药物浓度即为IC50.CsA和TAC的IC50均值分别为162.3 ng/ml、0.289 ng/ml,TAC对PBMC转化的抑制作用显著强于CsA;②Kendall相关系数分析示CsA的IC50与TAC的IC50之间有显著的相关关系(rk=0.3472,P=0.0082);③CsA治疗组急性排斥反应发生率显著高于TAC组,而两组患者巨细胞病毒感染发生率差异不明显.结论:TAC抑制人PBMC母细胞转化能力约为CsA的589.1倍,因而TAC治疗的肾移植受者术后急性排斥反应发生率显著较低.将术前淋巴细胞的体外药敏试验与术后治疗性TDM合理结合,是改进个体化免疫抑制方案的举措之一.
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重组猪戊型肝炎病毒ORF2区主要抗原域的原核表达及鉴定
目的:在大肠杆菌中表达猪戊型肝炎病毒ORF2区主要结构蛋白,并对其进行血清学鉴定.方法:通过RT-PCR技术从一份猪粪中扩增并克隆戊型肝炎病毒主要的结构基因片段,将该片段插入pET-32a表达载体,在原核系统中融合表达蛋白,Western blot和间接ELISA方法分析该蛋白的抗原性.结果:SDS-PAGE分析结果表明,获得45kD的目的蛋白,该重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,而不与阴性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性.结论:本研究获得了猪戊型肝炎病毒重组抗原,可与HEV阳性血清产生特异性的结合反应,可以作为诊断用的重组蛋白,为研制敏感、特异的HEV诊断试剂盒,行之有效的HEV基因工程疫苗及为HEV感染的预防和临床治疗提供资料.
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融合蛋白VacA-HpaA卵黄抗体的体外研究
目的:研究VacA-HpaA融合蛋白的鸡卵黄抗体(IgY)的理化特性和生物学活性,为制备集预防与治疗为一体的抗H.pylori感染的制剂奠定基础.方法:以纯化的VacA-HpaA融合蛋白免疫产蛋鸡,水稀释法获取蛋黄抗体(VacA-HpaA IgY).(1)用硫酸铵沉淀法纯化IgY后,用SDS-PAGE分析其纯度,Bradford法测定蛋白含量.(2)用间接ELISA法检测该IgY的耐热性、耐酸性及其对酶消化的耐受作用.(3)采用Western blot分析IgY的特异性并检测其效价.(4)用MTT法检测不同浓度VacA-HpaAIgY对细胞毒活性的中和作用.(5)用扫描电镜观察VacA-HpaA IgY对AGS细胞粘附的中和作用.结果:(1)该IgY 纯度为60%,蛋白浓度为22 g/L;(2)具有一定的耐热性、耐酸性和耐胃蛋白酶能力;(3)Western blot分析显示IgY的特异性,在相对分子量约27 000和30 000处出现在相应的条带;(4)该IgY对VacA细胞毒活性有中和作用,且具有量效性和时效性;(5)IgY可阻止H.pylori菌体蛋白的粘附作用.结论:该IgY具有良好的理化和生物学特性,可用于制备抗H.pylori感染的防治制剂.
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柯萨奇B3病毒感染致小鼠气道上皮细胞粘附分子和MHCⅡ类分子高表达
目的:观察小鼠雾化吸入柯萨奇B3病毒(CVB3)后气道上皮细胞粘附分子ICAM-1、VCAM-1及MHCⅡ类分子表达的变化,初步探讨CVB3感染对机体免疫系统的影响及其在气道慢性炎症和哮喘发病机制中的作用.方法:将C57BL/6N小鼠随机分为4组:生理盐水组(NS)、生理盐水+卵蛋白组(NS+O)、病毒感染组(V)、病毒感染+卵蛋白组(V+O).采用ELISA法测定血清CVB3抗体;取肺组织作常规病理制片,HE染色;甲苯胺蓝改良染色法镜下显示肥大细胞.提取气道上皮细胞采用流式细胞仪分析ICAM-1、VCAM-1及MHCⅡ类分子的表达.结果:病毒组小鼠血清中CVB3-IgM的OD值明显高于非病毒组(P＜0.01).病理检查肺组织可见:病毒组肺间质有较多炎细胞浸润,尤其肥大细胞浸润明显.V组、V+O组气道上皮细胞ICAM-1、VCAM-1和MHCⅡ类分子的表达明显增高,与NS组、NS+O组相比差异非常显著(P＜0.01);V+O组增高更加显著,与V组比较也有显著差异(P＜0.01);并可持续至少1个月.结论:小鼠雾化吸入CVB3后可致气道慢性炎症及粘附分子ICAM-1、VCAM-1和MHCⅡ类分子显著的高表达;在CVB3所致的气道炎症期间再接触过敏原两者对炎症免疫反应有协同作用.CVB感染后的炎症免疫反应在哮喘发病机制中起着非常关键的作用.
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幽门螺杆菌外膜蛋白hopX基因克隆表达及生物信息学分析
目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp) hopX 外膜蛋白编码基因的重组质粒,并进行生物信息学分析,探索筛选 Hp 疫苗的新途径.方法:应用 PCR 技术从 Hp 基因组扩增 hopX 外膜蛋白编码基因片段,TA 克隆后测序分析,用信息学软件分析其物理化学特性,并构建表达载体 hopX-pQE30 转化E.coli M15, IPTG 诱导表达, SDS-PAGE及Western blot 鉴定表达蛋白.结果:测序分析表明 hopX 基因全长为1 284 bp,与GeneBank 公布的其他Hp菌株的基因序列同源性为 96%～97%,氨基酸同源性为97%～99%,软件预测显示有多个明显的具有抗原活性的结构域.SDS-PAGE 检测表明,47 kD处有一新生的蛋白带,Western blot 检测重组蛋白具有良好的抗原活性.结论:首次获得HpNCTC11637菌株hopX基因,其表达产物为外膜蛋白生物学功能和疫苗的研究奠定了基础.
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重组人粒细胞集落刺激因子在大肠杆菌中表达的研究
人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)主要来源于激活的T、B淋巴细胞、成纤维细胞和内皮细胞等,是刺激造血前体细胞分化及增殖的细胞因子.
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pCD-Em10对泡球蚴感染小鼠免疫应答的影响
目的:探讨pCD-Em10免疫对泡球蚴感染小鼠免疫应答的影响.方法:将pCD-Em10肌肉注射免疫BALB/c鼠,免疫后8周用Em原头节进行攻击感染,感染后18周剖杀小鼠,计算减蚴率;取脾并分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的百分比;用EmAg或ConA刺激培养脾细胞,收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平;流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率,同时设有BCG和PBS对照.结果:pCD-Em10免疫组的减蚴率为71.17%,脾CD4+ T细胞亚群显著增加,IFN-γ和TNF-α水平升高,IL-4水平降低,脾细胞凋亡发生率明显低于PBS对照组.结论:pCD-Em10可诱导泡球蚴感染小鼠产生一个保护性的免疫反应.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
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| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
