中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子: 0.92
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1000-484X
- 国内刊号: 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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NF-κB信号途径在小鼠狼疮性肾炎发病中的可能作用
目的:探讨NF-κB信号途径在小鼠狼疮性肾炎发病中的可能作用.方法:选取16周龄的雄性BXSB小鼠(狼疮性肾炎模型组)和同周龄C57BL/6 小鼠(正常对照组)作为研究对象,透射电镜和PAS染色观察肾组织的超微结构形态改变;RT-PCR技术检测小鼠全血中HMGB1mRNA的表达变化.采用ELISA方法检测血清中HMGB1蛋白浓度;免疫组织化学检测肾组织中HMGB1和PCNA蛋白的表达变化;Western blot和流式细胞术检测肾组织中RAGE、p-NF-κB和 IκB蛋白的表达.结果:16周时,与正常的C57BL/6 小鼠相比,BXSB小鼠血清中BUN水平及尿中微球白蛋白水平明显升高;与正常的C57BL/6 小鼠相比,BXSB小鼠全血中HMGB1mRNA水平和血清中HMGB1蛋白浓度明显升高;16周时,与正常的C57BL/6 小鼠相比,BXSB基底膜明显增厚,部分足突融合,内皮细胞下可见团块状电子致密物沉积;与正常的C57BL/6 小鼠相比,BXSB小鼠肾组织的肾小球中可见较多的PCNA阳性表达,肾小管上皮细胞核内也可见少量的表达;BXSB小鼠肾组织中HMGB1蛋白表达升高,HMGB1蛋白尤其在细胞增生明显而肥大的肾小球呈高表达,主要位于细胞浆和细胞外;而在C57BL/6小鼠肾脏组织中以小管细胞核表达为主;与对照组相比,BXSB小鼠肾组织p-NF-κB和RAGE蛋白表达明显升高;而IκB蛋白表达明显降低;HMGB1蛋白与p-NF-κB蛋白表达呈显著正相关(r=0.833,P=0.000);p-NF-κB蛋白与RAGE蛋白表达呈显著正相关(r=0.621,P=0.018);HMGB1蛋白与RAGE蛋白表达呈显著正相关(r=0.848,P=0.000);p-NF-κB蛋白与IκB蛋白表达呈显著负相关(r=-0.759,P=0.002).结论:HMGB1在小鼠狼疮性肾炎中的致炎作用可能部分通过结合其受体RAGE,激活NF-κB信号途径,促进肾小球固有细胞的增生,从而导致增生性肾小球肾炎形成而实现的.
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核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平变化及意义
目的:探索核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者(CHB)血清sTRAIL水平变化及意义.方法:60例CHB均接受核苷类似物抗病毒药物治疗(拉米夫定或替比夫定),根据治疗24周末HBV DNA水平将患者分为完全病毒学应答组、部分病毒学应答组、无病毒学应答组,设正常对照组.采集治疗前、治疗4、12、24周末患者的血清,检测血清sTRAIL水平,同时检测IFN-γ、ALT水平.结果:患者治疗前sTRAIL、IFN-γ及ALT水平均较正常对照组升高(P<0.05或P<0.01).sTRAIL水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末下降.与治疗前比,差异均有统计学意义(P<0.05),在治疗4周末完全应答组sTRAIL水平低于同期部分应答组(P<0.05).IFN-γ水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末升高,与治疗前比差异均有统计学意义(P<0.05),但完全应答组IFN-γ水平在治疗4周末与同期部分应答组差异无统计学意义.ALT水平在三组的治疗过程中均逐步下降,各时间点间差异均有统计学意义(p<0.05).完全应答组治疗前sTRAIL水平与IFN-γ水平、ALT水平呈正相关(P<0.01),治疗后sTRAIL水平与IFN-γ水平呈负相关(P<0.05).结论:CHB血清sTRAIL水平升高;核苷类似物抗病毒治疗早期病毒学应答者血清sTRAIL水平下降,尤其是完全应答者在疗程的第4周就有明显的变化.sTRAIL在CHB免疫损伤中起重要作用,在其核苷类似物抗病毒治疗免疫恢复中也起重要作用,可作为核苷类似物治疗CHB早期应答指标预测远期疗效.
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Dex疫苗的研究现状及其在自身免疫性疾病的应用
外泌体是由活细胞分泌的直径为60~90 nm的囊状小体,在电镜下为脂质双层膜包围的扁平球体,呈特征性的杯状外型,存在于血清、尿液、唾液、乳汁等体液中~([1]_.作为一种亚细胞结构,它能代表其来源细胞行使一系列生物学功能,如肿瘤细胞来源的外泌体能介导免疫逃逸,肠上皮细胞来源的外泌体参与了口服耐受作用的发挥,胎盘绒毛膜上皮细胞来源的外泌体能介导母胎耐受等等.
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自身免疫的调控
自身免疫是机体免疫系统对自身成分产生的免疫应答,但其失控却可引发严重的自身免疫病.因此机体对自身免疫的调控是一个具有重大理论价值和实用意义的课题.
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小鼠白细胞介素23基因在毕赤酵母中的诱导表达及初步活性研究
目的:克隆小鼠白细胞介素23(mice interlecukin-23,mIL-23)基因,构建高效稳定的毕赤酵母表达菌株,并对得到的蛋白进行生物活性的初步测定.方法:采用聚合酶链式反应(PCR)技术从pcDNA3-mIL-23上分别扩增获得IL-23的两亚基p19和p40,并通过重叠PCR(over-lap PCR)技术获得含有连接子的p1940,构建pPICZαA-IL-23重组质粒;采用甲醇诱导毕赤酵母表达重组蛋白,MTT方法检测诱导表达蛋白的促淋巴细胞增殖情况.结果:SDS-PAGE分析显示在诱导24小时和36小时后的上清及24~96小时的沉淀中均可以检测到约70 kD的诱导条带.Western blot印迹法证实了重组蛋白为特异性蛋白.上清和沉淀中表达的重组蛋白IL-23能促进外周血单个核细胞的增殖,OD570 nm分别达到(0.235±0.029)和(0.216±0.035),而未刺激的对照组只有(0.135±0.008)和(0.164±0.017).结论:成功构建出mIL-23的酵母表达载体,诱导产生的蛋白可以明显地促进外周血单个核细胞的增殖.
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体外DCs在抗CD45RB抗体诱导免疫耐受中的作用机制
目的:探讨树突状细胞(dendritic cells,DCs)在抗CD45RB抗体诱导的免疫耐受中所发挥的作用,从而阐明抗CD45RB抗体诱导免疫耐受的机制.方法:采用DCs的常规诱导方法(rmGM-CSF、IL-4和LPS),在诱导过程中加入不同剂量的抗CD45RB抗体,成熟后利用流式细胞仪检测细胞表型、周期和吞噬能力,ELISA法检测IL-12分泌量,混合淋巴细胞培养检测DCs对T细胞增殖能力的影响.结果:DCs经抗CD45RB抗体处理后,CD11C和CD83表达升高,CD86表达下降,自身增殖和吞噬能力增强,但分泌IL-12和刺激T细胞增殖的能力明显下降.结论:耐受性树突状细胞(tolerogenic dendritic cells,tDCs)能显著抑制T细胞的增殖,它的产生是抗CD45RB抗体诱导免疫耐受的主要机制之一.
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IL-7对胸腺T细胞及树突状细胞体外分化发育的影响
目的:探讨IL-7对胸腺T细胞及胸腺树突状细胞分化的影响.方法:摘取15~16日龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胚胎胸腺器官培养-FTOC),分别将细胞因子IL-7和培养基滴加在胸腺小叶上,12天后收集不同条件下经FTOC培养获得的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、B220、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态,通过细胞计数检测细胞数目的变化.再将经FTOC培养获得的胸腺细胞和异源的T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况.结果:细胞计数结果表明添加外源性IL-7组的胸腺细胞数目明显减少,流式细胞仪检测结果显示其中胸腺CD4~-CD8~-双阴性细胞及CD8~+单阳性细胞比例有所增加,而CD4~+CD8~+双阳性细胞比例显著下降,CD4~+单阳性细胞比例没有明显变化;此外,B细胞和树突状细胞、NK细胞数量均有不同程度的增加.结论:IL-7在胸腺T细胞及胸腺树突状细胞的分化发育中发挥重要的调节作用.
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针对晚期氧化蛋白产物的抗体制备与应用
目的:制备特异性识别晚期氧化蛋白产物(Advanced oxidation protein products,AOPP)的多克隆抗体,为研究AOPP的致病机理及与临床病情相关性提供有效工具.方法:用次氯酸氧化家兔血清白蛋白以获得AOPP-RSA,以此为免疫原免疫家兔,亲和层析纯化免疫血清,ELISA鉴定多克隆抗体的效价及特异性,Western blot检测慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者血浆中AOPP,免疫组织化学方法检测肾组织中AOPP分布与定位.结果:获得效价达10-6的抗AOPP免疫血清,纯化抗体可特异地与不同种属来源的氧化修饰白蛋白结合,而与正常白蛋白及糖基化蛋白终产物无交叉反应.该抗体可识别人血浆中的AOPP,可特异地与大鼠CKD模型及各种炎症性CKD患者肾组织成份反应.结论:成功制备了可与不同种属AOPP结合的特异性多克隆抗体,并首次用于检测存在于CKD患者血浆、肾组织及模型动物肾组织中的AOPP,为深入研究AOPP的病理作用及其在组织定位提供了有效工具.
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消减免疫法制备抗HL60、HL60/ADR表面抗原差异抗体
目的:建立可特异识别HL60和HL60/ADR细胞膜表面差异蛋白的抗体库,制备单克隆抗体并研究其生物学活性.方法:通过Cp诱导的消减免疫法免疫BALB/c小鼠,采用传统杂交瘤技术制备可特异识别两种细胞差异膜蛋白的单克隆抗体;采用FACS和激光共聚焦显微镜鉴定其和两种靶细胞结合的特异性和差异性.结果:获得51株候选的差异抗体,成功筛选并纯化其中一株单抗(5F6).5F6与可特异稳定的识别HL60/ADR细胞,结合率扣除本底为68.2%,而该抗体与HL60细胞的结合率为17%.结论:SI结合差异筛选的方法是制备差异抗体便捷可行的方法,所获得的单克隆抗体与HL60和HL60/ADR细胞膜蛋白结合有特异性和差异性,实验中所获得的单抗是寻找肿瘤耐药的新靶点和发现肿瘤耐药新机制的工具,为研究这些问题开拓了新思路.
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Lewis肺癌细胞通过TLR9对CD4~+CD25~+Treg细胞影响的研究
目的:本研究以Lewis肺癌细胞为研究对象,探讨肿瘤细胞通过TLRs对CD4~+ CD25~+ Treg细胞的影响.方法:我们采用流式细胞术检测了Lewis肺癌细胞与脾淋巴细胞共培养系统中CD4~+ CD25~+ Treg细胞数量变化;通过RT-PCR方法检测了共培养对Foxp3和TLR1-9mRNA表达的影响;采用TLR9受体阻断剂氯喹阻断Lewis肺癌TLR9的表达.结果:与对照组相比,共培养组CD4~+ CD25~+ Treg细胞数量及Foxp3 mRNA表达均明显增高(P<0.05);Lewis肺癌细胞与淋巴细胞共培养后可影响多种TLRs表达,其中TLR9 mRNA表达与对照组相比明显增高(P<0.05),阻断Lewis肺癌细胞TLR9可明显降低CD4~+ CD25~+ Treg细胞数量及Foxp3 mRNA表达(P<0.05).结论:Lewis肺癌细胞可通过TLR9促进CD4~+ CD25~+ Treg细胞产生及功能增强,参与诱导肿瘤的免疫耐受,从而促进肿瘤的发生和发展.
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人喉癌长春新碱耐药细胞株的建立及其生物学特性
目的:建立人喉癌长春新碱多药耐药细胞系.方法:以药物浓度梯度递增法诱导筛选人喉癌Hep-2的多药耐药细胞株Hep-2/v,比较两组细胞的形态和倍增时间;MTT法确定细胞的IC50及其耐药指数;流式细胞仪检测两组细胞的细胞周期分布以及细胞内的罗丹明聚集情况;实时定量RT-PCR法检测MDR1基因的mRNA表达,Western blot法检测相应的蛋白表达情况.结果:建成的Hep-2/v耐药细胞株,其耐药性能稳定,耐药指数为45,并与顺铂及5-氟尿嘧啶有不同程度的交叉耐药性;Hep-2/v的体外群体细胞倍增时间较亲代细胞延长13.58小时;细胞周期分析结果显示其G_0/G_1期细胞升高,而S期细胞则明显降低(P<0.05);罗丹明染色显示,Hep-2细胞内的罗丹明较Hep-2/v明显升高(P<0.01);Hep-2/v细胞MDR1表达在基因及蛋白水平明显高于Hep-2细胞(P<0.01).结论:Hep-2/v细胞株具有明确及稳定的多药耐药性,是研究多药耐药机制及筛选逆转剂的良好模型.
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黄芪多糖对哮喘小鼠特异性免疫治疗的增强作用
目的:探讨黄芪多糖(Astragalus Polysaccharide,APS)对哮喘小鼠特异性免疫治疗(Specific Immune Therapy,SIT)的影响及其可能的作用机制.方法:90只4~6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机平均分为空白对照组、哮喘模型组、SIT治疗组、APS治疗组、APS和SIT单纯联合治疗、APS和OVA混合液治疗组等6组;用OVA致敏,分别用SIT、APS及两者联合等方法治疗,用1%OVA雾化吸入激发;后一次激发24小时后处死小鼠,进行BALF细胞计数;HE染色观察肺组织切片炎症细胞浸润程度;ELISA法检测血清IFN-γ、 IL-4.结果:SIT、APS及两者联合治疗组肺组织炎症细胞浸润程度减轻,BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞数减少,血清IFN-γ水平上升,IL-4水平下降,联合治疗组比分别治疗组明显.结论:APS可增强SIT的效果,其机制可能是通过影响IFN-γ、IL-4分泌水平实现.
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佛山地区无偿献血者Rh血型分布情况调查
目的:调查并分析佛山地区无偿献血者Rh 血型分布情况.方法:使用抗-D、抗-C、抗-c、抗-E和抗-e血清进行Rh血型分型,对RhD抗原筛查阴性的标本使用3批不同厂家 IgG 抗-D 血清采用抗人球蛋白法进行确认.根据实验结果,计算Rh 表现型、基因、单倍型频率,并进行Hardy-Weinberg 吻合度检验.结果:佛山地区无偿献血者Rh血型表现型频率特点为CCDee>CcDEe>CcDee>ccDEE>ccDEe>CCDEe>CcDEE>ccdee>ccDee,Ccdee>CCdee,ccdEe>CCDEE,CCdEE,CCdEe,CcdEE,CcdEe,ccdEE;单倍型频率特点为CDe>cDE>cDe>CDE;cde>Cde>cdE>CdE;基因频率特点为D>d,C>c,e>E;D(-)表型频率为0.379%,d基因频率为0.061.本文Rh血型单倍型及基因的观察值与期望值差异无统计学意义(P>0.05),Hardy-Weinberg吻合度检验良好.结论:本调查数据符合群体遗传学中的Hardy-Weinberg定律,结果可靠;佛山地区无偿献血人群的Rh血型分布,既有地域特点,也有汉族人群的共性;本研究结果对指导佛山地区科学地进行无偿献血招募及合理地储存血液,提高血站为稀有血型受血者及时供血的能力,具有重要的意义.
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肺结核患者外周血中Th细胞极化偏移及临床意义分析
目的:分析初诊肺结核患者外周血中CD4~+ T淋巴细胞及其亚型Th1和Th2细胞的改变,探讨其在肺结核病变过程中的临床意义.方法:取肝素抗凝全血,加RPMI1640培养液等体积混匀,依次加入1∶1 000稀释的PMA、1∶100稀释的Ionomycin和1∶10稀释的Monensin,混匀后于37℃,5% CO_2静置培养4小时或过夜.取100 μl培养血细胞依次加入抗人CD3-PerCP、CD8-APC、mIgG1-FITC、Rat IgG1-PE、IL-4-PE、IFN-γ-FITC抗体,按流式操作流程分别进行细胞膜和细胞浆内标记测定CD4~+ IL-4~+(Th2)、CD4~+ IFN-γ+(Th1)两种细胞的水平.结果:初诊肺结核患者外周血中Th1水平均显著低于健康对照组(P<0.01),而Th2水平则显著高于健康对照组(P<0.05).粟粒型肺结核患者外周血中Th1细胞含量显著低于浸润性肺结核患者(P<0.05),而Th2水平显著高于浸润性肺结核和结核性胸膜炎(P<0.05).CD4~+/CD3~+ T细胞比例在这三个病程中呈下降趋势,且粟粒型肺结核显著低于浸润性肺结核(P<0.05).糖尿病并肺结核患者Th1、CD4~+/CD3~+显著低于无糖尿病肺结核患者(P<0.05),Th2含量则显著升高(P<0.05).15例重度肺结核患者经结核化疗与微卡治疗三个月后Th1、CD4~+/CD3~+水平较治疗前明显升高(P<0.05),而Th2水平较治疗前显著降低(P<0.01).痰检或培养阳性与痰检阴性患者相比Th1、CD4~+/CD3~+水平呈下降趋势但无显著差异(P>0.05),Th2细胞水平显著升高(P<0.05).结论:浸润性肺结核、结核性胸膜炎、粟粒型肺结核、糖尿病并肺结核患者存在着不同程度的免疫功能抑制,对Th1、Th2细胞水平与CD4~+/CD3~+比例测定有助于临床病情的判断和疗效观察.
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腺苷对大鼠缰核神经元自发放电活动及c-fos蛋白表达的影响
目的:观察腺苷(Adenosine,Ado)对缰核(Habenula nucleus,Hb)神经元单位放电的影响及外侧缰核内c-fos蛋白表达的变化,探讨腺苷对影响睡眠的缰核神经元活动及相关基因表达的影响及可能机制.方法:脑薄片灌注、腹腔内注射、原位免疫细胞化学等.结果:脑薄片灌注腺苷,导致内侧缰核神经元自发放电活动受到抑制,而外侧缰核神经元自发放电活动明显增加;腹腔注射腺苷0.5小时后,与注射生理盐水组相比较,外侧缰核c-fos蛋白的表达量明显增加.结论:腺苷对大鼠内侧缰核神经元自发放电起抑制作用,对外侧僵核神经元自发放电则有兴奋作用,并可促进外侧缰核c-fos蛋白表达,这为腺苷在外侧缰核内可促进睡眠提供了依据.
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细胞因子调节垂体MtT/S细胞中人生长激素基因启动子的活性
目的:探讨细胞因子白介素-11(IL-11)、睫状神经营养因子(CNTF)和转化生长因子(TGF-β)对大鼠垂体MtT/S细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其与垂体特异性转录因子Pit-1蛋白的关系.方法:采用荧光素酶报告基因的方法.首先建立含hGH基因启动子(-484~30 bp)和荧光素酶融合基因的稳定转化MtT/S细胞系,然后用细胞因子刺激,检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量,反映它们对GH分泌和合成的影响;检测MtT/S细胞内荧光素酶的变化,说明细胞因子对hGH基因启动子活性的作用.将Pit-1蛋白表达质粒(pcDNA-pit-1-cDNA)单独转染或与Pit-1反义寡核苷酸(Pit-1OND)共转染于稳定转化的MtT/S细胞中,观察加入细胞因子后荧光素酶的变化,探讨细胞因子的作用与Pit-1蛋白的关系.结果:IL-11(20 nmol/L)、CNTF(10 nmol/L)能刺激大鼠垂体MtT/S细胞中GH的分泌和合成,增强MtT/S细胞中荧光素酶的表达,分别增加到对照组的134%、122%.TGF-β(5 nmol/L)能减少GH的分泌和合成,抑制荧光素酶的表达到对照组的72%.Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对细胞因子的调节作用没有影响.结论:IL-11、CNTF和TGF-β通过调节大鼠垂体MtT/S细胞中hGH基因启动子活性影响GH的合成,Pit-1蛋白可能不参与这一调节作用.
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湖南地区强直性脊柱炎患者中TNF-α-238位点的多态性研究
目的:通过分析湖南地区强直性脊柱炎汉族患者DNA中TNF-α-238位点的多态性,研究湖南地区汉族人群中TNF-α-238位点基因多态性与强直性脊柱炎发病的相关性.方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法( PCR-RFLP)对患者和正常人DNA中TNF-α-238位点进行基因分型检测,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测100例强直性脊柱炎患者和90例正常人血清中TNF-α的水平,HLA-B27分型采用流式细胞仪检测.用统计学方法分析两组中基因型、等位基因频率、TNF-α水平、HLA-B27阳性率及其组间差异.结果:100例患者中TNF-α-238位点G/G基因型95例(95%),G/A基因型5例(5%),90例正常人中TNF-α-238位点G/G基因型88例(97.8%),G/A基因型2例(2.2%).AS组的TNF-α-238位点G频率(97.5%)低于正常对照组(98.9%),A频率(2.5%)高于对照组(1.1%);两组均未发现A/A基因型;AS组患者血清中TNF-α的平均水平比正常人明显增高[(10.16±1.19) pg/ml vs.(5.64±1.18) pg/ml],且G/A基因型患者血清中TNF-α的平均水平比G/G基因型患者高[(13.49±1.27) pg/ml vs.(9.44±1.29 pg/ml)];HLA-B27阳性率在湖南地区AS组和正常对照组中的分布差异极其显著(χ~2=114.975,P=0.000).对 HLA-B27和TNF-α-238两位点的基因分析表明,与单独HLA-B27阳性比较,TNF-α-238位点基因型为G/G时比数比(OR值)明显增加.结论:湖南地区汉族人群中TNF-α-238位点多态性与强直性脊柱炎发病可能没有相关性,但基因型为G/G时AS的患病风险可能增高.
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短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡
目的:探讨短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的作用效果.方法:构建针对大鼠补体受体C5aR基因编码区的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-C5aR shRNA,采用电穿孔的方法转染RK3E细胞,经G418筛选后,形成稳定的表达C5aR shRNA的细胞系.实验分为3组,①正常对照组:未转染的RK3E细胞;②阴性对照组:转染空载体pRNAT-U6.1的RK3E细胞系;③实验组:转染C5aR shRNA 的RK3E细胞系.经脂多糖(LPS)孵育12小时后,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA的表达,γ计数仪测定~(125)I标记的C5a与RK3E的结合情况.结果:与正常对照组和阴性对照组相比,实验组的细胞凋亡率显著降低(P<0.01),C5aR mRNA水平显著降低(P<0.01),~(125)I标记的C5a与RK3E结合活性显著下降.结论:针对C5aR的特异性短发夹RNA可以明显引起靶基因的沉默,进而抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的发生.
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2009年国内外免疫学研究重要进展
2009年是国际免疫学界取得丰硕成果的一年,经过科学家们坚持不懈而卓有成效的工作,免疫学在过去的一年中取得了一系列令人振奋的突破性进展,对于帮助人们通过免疫学的视角和方法加深对疾病发生发展机制的理解及疾病防治起了积极的推动作用.
年 | 期数 |
2019 | 01 03 04 05 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |