变应性鼻炎患者血清IL-17和IL-23的表达及临床意义

目的：检测变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）患者血清IL-17和IL-23的表达水平并探讨其临床意义。方法：检测25例AR患者（观察组）血清IL-17、IL-23、sIgE（过敏原特异性IgE）的表达水平，并以23名健康体检合格者（对照组）为对照，比较两组人群血清中IL-17、IL-23、sIgE表达水平的差异，并探讨AR患者血清中IL-17、IL-23、sIgE三者间的相互关系。结果：观察组患者血清中IL-17、IL-23及sIgE水平均高于对照组（ P均＜0.01）；观察组患者血清中IL-17、IL-23、sIgE三者两两之间均呈线性正相关关系（ P均＜0.05）。结论：IL-17、IL-23参与了AR的发生发展过程，与sIgE的形成可能有关。

IL-23 R基因多态性与吉林人群强直性脊柱炎易感性的关联研究

目的：探讨吉林人群IL-23R基因rs7517847和rs10489629位点的单核苷酸多态性与强直性脊柱炎易感性的关系。方法：采用PCR-RFLP方法对188例强直性脊柱炎患者进行IL-23 R基因多态性检测，与100例健康者对照分析。结果：两个SNP位点（ rs7517847和rs10489629）各基因型频率和等位基因频率在AS组与对照组之间的分布差异均有统计学意义（P＜0.05），并在假设遗传方式下，rs7517847位点的纯合突变GG基因型与（TG＋TT）基因型比较；rs10489629位点的纯合突变AA基因型与（GA＋GG）基因型比较，其频率分布差异在AS组与对照组之间也具有统计学意义（P＜0.05）。结论：IL-23R基因rs7517847和rs10489629位点的多态性均与吉林人群AS易感性有关；携带G等位基因（或A等位基因）且为GG（或AA）基因型的个体患AS的倾向性增大，可能是患AS的易感因素之一。

类风湿关节炎并发间质性肺疾病患者血清蛋白质指纹图谱的临床价值分析

目的：应用表面加强激光解吸电离飞行时间质谱筛选出类风湿关节炎并发间质性肺疾病（ RA-ILD）患者血清中的差异蛋白，并对其临床价值进行初步分析。方法：用WCX2（弱阳离子交换芯片）蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（ Surface enhanced laser desorption／ionization time of flight mass spectrum ，SELDI-TOF-MS）检测19例RA-ILD患者，15例单纯RA、未合并间质性肺疾病患者，13例相对健康的对照组患者的血清样本，应用Biomarker Wizard软件、Biomarker Pattern软件以及SPSS13.0对测得的数据进行处理，初步构建分类树模型并随机选取部分病例进行验证。结果：患者血清中共检测出142个蛋白峰，经方差分析，发现了4个蛋白质峰差异有统计学意义，质荷比分别为3382.59、3453.39、11886.0、5825.48， Biomarker Pattern软件对所检测的所有数据分析后，发现以质荷比11689.4、2266.49、1020.22、4392.28、5074.38、2764.69为适合建立分类树模型，灵敏度为92.31％（12／13），特异度为91.18％（31／34）。随机选取RA-ILD、RA、相对健康的对照组患者的血清样本各10例进行模型验证，灵敏度为90％（9／10），特异度为90％（18／20）。结论：SELDI-TOF-MS技术可筛选出RA-ILD患者血清中差异性表达蛋白，作为生物标志物，其诊断敏感度高，特异度好，对其测定具有较好的临床应用前景。

黑色素瘤相关抗原MAGE-E1 mRNA在胶质瘤中的定量表达研究

目的：了解MAGE-E1 mRNA在胶质瘤中的表达，探讨将它用于胶质瘤免疫治疗的可能性。方法：建立实时定量PCR方法，检测47例人胶质瘤及14例正常脑组织中MAGE-E1，管家基因HPRT1作为内参，以MAGE-E1／HPRT1值计算MAGE-E1 mRNA表达量，并对MAGE-E1 mRNA表达与临床指标的关系进行分析。结果：在正常脑组织及胶质瘤中， MAGE-E1高度表达率分别为7.1％和66.0％，两者比较具有统计学差异（ P＜0.05）。 MAGE-E1 mRNA的表达与病人性别、年龄、病理类型和级别无关。结论：MAGE-E1 mRNA在胶质瘤中水平较高，提示MAGE-E1可能成为胶质瘤免疫治疗的候选靶抗原。

呼吸道病毒特异性IgM检测对儿童呼吸道感染的指导意义

目的：统计分析急性呼吸道感染患儿5种常见呼吸道病毒特异性IgM的检出情况用以指导临床。方法：2012年1月～12月我院儿科住院急性呼吸道感染患儿1609例，收集血清采用间接免疫荧光方法检测呼吸道合胞病毒（ RSV）、腺病毒（ ADV）、甲型流感病毒（ IVA）、乙型流感病毒（ IVB）、副流感病毒（ PIV）特异性IgM。结果：1609例患儿检出阳性标本263例（16.35％），IVB 检出率多，共136例（8.45％），其余依次为 IVA 63例（3.92％）、PIV 62例（3.85％）、ADV 44例（2.73％）、RSV 42例（2.61％）。不同年龄组患儿阳性标本检出率不同，差异具有统计学意义（χ2＝134.822，P＜0.01），随年龄增长阳性标本检出率逐渐增高，学龄期儿童检查率高（34.55％）；IVB、PIV、IVA阳性标本检出率在不同年龄阶段的比较差异具有统计学意义（χ2分别为102.660、86.145、39.791，均P＜0.05），IVB 和IVA以学龄期儿童检查率为高，分别达20.00％和8.64％，PIV以学龄前儿童检出率高（12.07％）。不同呼吸道病毒IgM阳性检出率在不同月份有各自的特点，IVB在3月和10月出现两个检出高峰，检出率分别达20.15％和11.11％；IVA在3月和5月出现两个检出高峰，检出率分别达10.27％和11.81％；PIV、RSV检出率在1～6月份平缓上升，在3月份检出率高，分别达7.98％和6.46％，随后检出率又平稳下降；ADV在3、4、5三个月份检出率为高，检出率达6.19％。结论：5种呼吸道病毒检出阳性率达16.35％，尤以IVB检出率为高；呼吸道病毒特异性IgM阳性检出率随年龄增长而逐渐增高，IVB和IVA以学龄期儿童感染率高，而PIV以学龄前儿童感染率高；5种呼吸道病毒感染在2012年有各自的流行特点。

美沙拉秦、蒙脱石散和酪酸梭菌对溃疡性结肠炎大鼠血细胞因子的影响

目的：研究美沙拉秦、蒙脱石散、酪酸梭菌对2，4，6三硝基苯磺酸（TNBS）／乙醇法诱导的溃疡性结肠炎大鼠IL-17、IL-23、TGF-β1、IFN-γ的影响。方法：将85只大鼠随机分为模型组、美沙拉秦组、蒙脱石散组、酪酸梭菌组、美沙拉秦联合蒙脱石散组5组，每组15只；正常大鼠为空白对照组10只，一共6组。通过TNBS／乙醇法建立溃疡性结肠炎的大鼠模型。按大鼠体表面积折算药量，分别给予相应剂量生理盐水、美沙拉秦、蒙脱石散、酪酸梭菌、美沙拉秦联合蒙脱石散治疗。12 d后处死全部大鼠，收集大鼠的血标本及结肠标本。采用ELISA法测定血清中IL-17、IL-23、TGF-β1、IFN-γ的含量，分别对比6组细胞因子的水平。结果：（1）通过TNBS／乙醇法建立大鼠模型，HE染色病理切片发现大鼠结肠远端炎症明显。（2）模型组、美沙拉秦组、蒙脱石散组、酪酸梭菌组、美沙拉秦联合蒙脱石散组较空白对照组的血清IL-17、IL-23和IFN-γ含量均升高，血清TGF-β1含量均降低，差异有统计学意义（ P＜0.05）。（ 3 ）与模型组比较，蒙脱石散组、酪酸梭菌组、美沙拉秦组的血清IL-17、IL-23和IFN-γ含量均降低，血清TGF-β1含量均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）美沙拉秦、蒙脱石散、酪酸梭菌和美沙拉秦联合蒙脱石散的治疗效果比较，美沙拉秦和美沙拉秦联合蒙脱石散疗效较好，差异有统计学意义（P＜0.05），酪酸梭菌与蒙脱石散疗效差异不明显。结论：（1）从症状体征及病理学检查表明：TNBS／乙醇法成功建立了大鼠溃疡性结肠炎模型。（2）在TNBS／乙醇法诱导的实验性溃疡性结肠炎大鼠血清中IL-17、IL-23、IFN-γ表达增高，与炎症呈正相关；结肠炎大鼠血清中TGF-β1表达降低，与炎症呈负相关。（3）美沙拉秦、蒙脱石散、酪酸梭菌、美沙拉秦联合蒙脱石散可能通过下调模型大鼠促炎因子IL-17、IL-23和调节因子IFN-γ的分泌，上调抗炎因子TGF-β1的分泌，缓解大鼠炎症症状，利于大鼠溃疡性结肠炎的修复。

小细胞和非小细胞肺癌晚期患者NK细胞表达的差异

目的：探索小细胞和非小细胞肺癌晚期患者NK细胞是否存在差异，并为治疗提供参考。方法：选取肺癌晚期患者共65例，其中包括小细胞肺癌14例，非小细胞肺癌51例以及20例健康对照。用流式细胞仪检测研究对象外周血淋巴细胞表面CD3－CD16＋CD56＋的表达情况。结果：小细胞肺癌晚期的患者较健康对照NK细胞显著升高；非小细胞肺癌晚期的患者较健康对照NK细胞无显著变化；肺癌晚期患者外周血NK细胞表达的百分比与CD4＋T细胞表达的百分比呈负相关性。结论：小细胞肺癌晚期患者NK细胞升高，天然免疫可能成为已严重受损的细胞免疫的有力补充，但有待于进一步的研究。

细胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1在Graves病发病中的作用

目的：通过检测初发Graves病（ GD）患者的IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1等4种细胞因子水平，研究Graves病的发病机制与细胞因子的关系。方法：对23例初发Graves病（ GD组）的患者和23名健康对照者（ NC组）的血清分别用ELISA法检测IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1浓度，用电化学发光法检测FT3、FT4和TSH水平，用放射受体分析法测定TrAb水平。结果：GD组与NC组之间年龄、性别均无统计学差异（ t＝0.3348，P＞0.05；χ2＝0.4107，P＞0.05）。 GD组IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1的浓度显著高于NC组，差异有统计学意义（ P均＜0.05）；4种细胞因子与FT3、FT4均呈正相关（ r＝值依次为：0.3246、0.4532、0.4310、0.4638；0.4132、0.4415、0.4362、0.4671； P 均＜0.05）；与 TSH 均呈负相关（ r＝值依次为－0.4588、－0.4828、－0.4451、-0.4930；P均＜0.05）。结论：IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1等4种细胞因子在初发GD中均高表达；可能共同参与了GD的发病过程，可作为GD免疫功能紊乱的评价指标。

本刊诚聘特约审稿人

《中国免疫学杂志》是中国免疫学会会刊，主要报道我国免疫学研究的各项国家科研课题，是全面反映中国免疫学整体水平的主流媒体。为了进一步加快审稿速度，缩短稿件刊用周期，特诚聘特约审稿人数名，组建审稿专家队伍，详情请登陆本刊网站，Web site：www．immune99．com；www．中国免疫学．中国。

非活性人细胞依赖型血型抗原的研究及应用

长期以来，在医学临床常规的血型抗体检测工作中存在抗原缺乏的困难，由于对活性细胞的依赖，使得血型相容性检测技术落后于临床上同种异型免疫性疾病的诊断、治疗的需求［1］。近年来人们已经对绝大多数血型抗原编码基因、抗原分子以及抗原载体的组成和结构等都有了十分清楚的认识，不依赖活性人血液细胞的血型抗原的研究成为血液免疫学领域的重点研究方向之一，目前主要研究项目有：①重组表达血型抗原；②化学合成血型抗原多肽；③适配体技术筛选的血型模拟抗原；④纳米磁珠细胞膜抗原等。所研制的这些血型抗原的特点是不依赖活性人细胞，但其抗原性与活性细胞上对应抗原的抗原性一致，与特异性抗体发生反应。本综述将上述四种血型抗原概括为“非活性人细胞依赖型血型抗原”，并对其研究内容和应用进展做一简单介绍。

郑重声明

吲哚胺2，3-双加氧酶在母胎免疫耐受中的作用研究进展

作为半同种移植物的胎儿，在母体内存活直至分娩得益于母胎之间的免疫耐受。母-胎界面是胚胎和母体直接接触的部位，细胞、细胞因子及细胞外基质之间构成相互作用的复杂网路，形成了母-胎界面上特有的免疫耐受状态，以维持正常妊娠。吲哚胺2，3-双加氧酶（ IDO）是分解色氨酸沿犬尿氨酸通路代谢的限速酶，通过耗竭色氨酸及产生犬尿氨酸等生物活性物质，调节T细胞、NK细胞等介导的免疫反应，发挥免疫调节作用。母-胎界面的IDO 对母-胎免疫耐受状态的维持起重要作用，与正常妊娠及复发性自发性流产均有着密切的关系。本文就近年来IDO与母-胎免疫耐受的相关研究作一综述。

记忆B细胞免疫应答机制研究进展

近年来，对疫苗接种后的免疫应答有了更清楚的认识，同时对免疫保护相关的概念亦给出了详尽的解释，这些理论上的进展主要得益于以下几个方面的研究成果：免疫系统的复杂性、天然免疫与获得性免疫之间至关重要的相互作用、少数但非常重要的细胞群，如树突细胞（ DC ）的鉴定以及体内或体外复杂的免疫反应指标的检测等［1］。

免疫分析技术在玉米赤霉烯酮检测中的应用和发展

玉米赤霉烯酮（ Zearalenone，ZEN）是一种非甾体类雌激素样活性的真菌毒素，由许多镰孢真菌如禾谷镰刀菌、木贼镰刀菌等通过聚酮化合物途径合成［1］，化学名为［6-（10-羟基-6-氧代-反式-1-十一碳烯基）-β-二羟基苯甲酸内酯］［2］， 分子式为C18 H22 O5，白色晶体，熔点为161℃～163℃，微溶于碱性溶液，不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙醚及苯等有机溶剂［3］。 ZEN主要污染玉米及其制品，对于大麦、燕麦、小麦、高粱、小米和大米的污染程度较小。ZEN通过被污染的谷物、肉及奶制品等进入人体，危害人体生殖系统的发育［4］；而且对女性乳腺肿瘤的发生及宫颈癌变也会产生一定影响［5］。 ZEN 还具有一定的雌激素作用，导致动物引发雌激素亢进症，造成动物的死胎、流产、不育甚至反情［6］。此外，ZEN还具有细胞毒性、免疫毒性、肝毒性、致畸性和致癌性等［7-9］。近几年，镰刀菌毒素特别是ZEN对谷物和饲料产生的全球性污染给养殖业造成了很大的经济损失［10］。因此，许多国家都规定了ZEN在主要粮食及饲料卫生标准中的残留限量，比如我国《粮食卫生标准》GB2761-2011规定小麦（粉）、玉米（面、渣、片）中 ZEN 含量不得超过60μg／kg［11］。《饲料卫生标准》GB13078.2-2006规定饲用小麦和配合饲料中 ZEN 大含量为500μg／kg［12］。

拟除虫菊酯类农药-抗体活性定量构效关系研究

目的：研究拟除虫菊酯类农药与其类特异性抗体的免疫识别机理。方法：采用逐步多重线性回归法研究了拟除虫菊酯类农药及其类似物和抗体活性（ IC50：半数抑制浓度）之间的定量构效关系。在计算拟除虫菊酯及其类似物结构描述符的基础上，构建了二维定量构效模型，分析筛选影响抗体活性的主要因素，并用留一法交叉验证了模型的预测能力。同时，采用偏小二乘法对计算所得拟除虫菊酯分子片段的结构参数进行了分析，建立了分子亚结构和抗体活性之间的全息定量构效模型，运用不同颜色编码来反映分子片段对抗体活性的贡献。结果：二维定量构效模型和全息定量构效模型的决定系数（ R2）分别为0.920和0.917，二者的交叉验证系数（ Q2）分别为0.875和0.660，表明两模型具有良好的预测能力。由二维定量构效模型还可得，拟除虫菊酯类农药的疏水性越小，往往和抗体的结合能力就越强。此外，在尝试了多种分子片段组合后，得到了优全息定量构效模型，其分子片段的大小在4～10之间，分子片段的长度为61，优化的主成分为4，分子片段的类型为B／C／Ch；但拟除虫菊酯类农药指纹图谱的编码结果和试验结果不完全吻合。结论：拟除虫菊酯类农药的疏水性是影响抗体识别的主要因素。

TIGIT-Fc融合蛋白的表达以及对巨噬细胞功能的影响

目的：构建携带小鼠TIGIT-Fc融合基因的慢病毒载体，稳定整合基因至小鼠H22细胞，制备并纯化TIGIT-Fc融合蛋白，探讨其对巨噬细胞功能的影响。方法：利用分子生物学方法将小鼠TIGIT胞外段与人IgG3 Fc段基因融合，构建分泌型TIGIT-Fc载体，再重组入慢病毒载体，感染小鼠H22细胞，接种至C57BL／6小鼠腹腔产生腹水，收集腹水后通过蛋白A柱纯化获得TIGIT-Fc融合蛋白，以此干预LPS处理的巨噬细胞，检测其分泌IL-10的水平。结果：TIGIT-Fc蛋白在H22细胞中以分泌形式表达，经过纯化后的TIGIT-Fc融合蛋白可在体外作用于高表达PVR受体的成熟巨噬细胞，促进其分泌抗炎症因子IL-10。结论：TIGIT可负调节成熟巨噬细胞的功能，促进其分泌IL-10。

桃拉综合征病毒VP1高变区蛋白抗体制备及初步特性分析

目的：制备高效价的桃拉综合征病毒主要结构蛋白VP1高变区蛋白抗体，分析其免疫特性，为研究免疫诊断试剂做参考。方法：将pET-VP1重组载体转化入大肠杆菌BL21，在IPTG诱导下进行表达。重组VP1蛋白纯化后免疫新西兰家兔，用琼脂扩散试验及ELISA检测抗体效价，用与VP1纯化蛋白特异性结合的单克隆噬菌体做竞争抑制试验。结果：pET-VP1重组蛋白在大肠杆菌BL21中呈可溶性高效表达。抗血清经琼扩试验鉴定效价达1∶26，ELISA效价达1∶217。与VP1蛋白特异结合的单克隆噬菌体能阻断部分抗血清与VP1蛋白的结合活性，但不影响终检测阳性的判断。结论：制备的VP1高变区蛋白抗体效价高，VP1蛋白少数区域的位点变异并不影响多克隆抗体的结合活性，可用作免疫检测诊断试剂。

鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株的构建及生物学特性

目的：为了研制更加安全的鼠伤寒沙门菌弱毒株，本研究构建了鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsipB基因缺失突变株。方法：首先构建含缺失585 bp sipB基因的重组自杀性质粒PREΔsipB，利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术，两步法筛选出SL1344的sipB缺失株。结果：PCR及测序结果表明SL1344ΔsipB构建成功。进一步生物学特性研究表明，缺失株SL1344ΔsipB保留了亲本菌株SL1344的血清型1，4，5，12：i：1，2，且能够稳定遗传缺失585 bp的sipB基因，生长速度没有发生明显改变；但是，与亲本株SL1344相比，其毒力发生明显改变，缺失株SL1344ΔsipB口服感染6周龄BALB／c小鼠的LD50为1.70×108 CFU，毒力较亲本株SL1344降低至1.4％，免疫保护效力实验显示，对6周龄BALB／c小鼠免疫后第17天，鼠伤寒沙门菌野生株攻毒有50％的保护率。在给小鼠免疫后第14天血清抗体IgG达到高。结论：结果表明，SL1344ΔsipB基因缺失株构建成功，遗传稳定，毒力明显降低，且具有较好的免疫原性，为研究鼠伤寒沙门菌sipB基因与其致病力之间的关系提供了方法，并为研制安全有效的沙门菌疫苗弱毒株奠定了基础。

Irgm1基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠CD4＋T细胞亚群的影响

目的：探讨免疫相关GTP酶1（Irgm1）基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental autoimmune en-cephalomyelitis，EAE）小鼠CD4＋T细胞的影响。方法：C57BL／6纯系小鼠与Irgm1基因敲除杂合小鼠（Irgm1＋／－）回交十代繁殖C57BL／6背景下Irgm1＋／－小鼠，用C57BL／6 Irgm1＋／－小鼠杂交获取Irgm1－／－、Irgm1＋／－、Irgm1＋／＋三种基因型小鼠，PCR扩增DNA检测基因型。用髓鞘少突胶质糖蛋白（ Myelin oligodendrocyte glycoprotein ，MOG33-55）多肽与弗氏完全佐剂等量混合制成乳剂，免疫C57BL／6野生型（Wt.）和Irgm1基因敲除（Irgm1－／－）小鼠，建立EAE模型，并进行临床评分。 MTT法测定MOG33-55免疫后7 d的EAE小鼠淋巴结细胞中MOG33-55特异性T细胞增殖分化水平。取MOG33-55免疫后14 d EAE小鼠脊髓切片，HE染色检测炎细胞浸润情况。取MOG33-55免疫后16 d的EAE-小鼠淋巴结、脊髓和脑组织，提取单个核细胞，用MOG33-55（20μg／ml）体外刺激培养7 d，收集细胞，用流式细胞仪分析EAE小鼠淋巴结、中枢神经系统浸润细胞中Th1、Th17的改变。结果：成功诱导了EAE小鼠模型；HE染色结果显示Wt.小鼠脊髓周围出现明显炎细胞浸润，而 Irgm1－／－小鼠则无明显变化；MTT实验表明Irgm1－／－小鼠与Wt.小鼠相比，淋巴结中T细胞对MOG33-55特异性增殖能力降低；流式细胞分析表明相对于Wt.小鼠，Irgm1－／－小鼠EAE模型在淋巴结及中枢神经系统浸润细胞中Th1细胞亚群比例明显增高而Th17细胞亚群比例下降。结论：Irgm1基因敲除可部分保护EAE小鼠的脊髓功能及临床症状。在EAE发病早期，Irgm1可能起到了关键性的作用，因此Irgm1有可能成为EAE治疗的重要分子靶点。

Gab2在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的：探讨Gab2在结直肠癌组织中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法检测78例结直肠癌及46例癌旁正常组织中Gab2的表达水平，并结合临床病理学资料进行统计学分析，Western blot方法检测10对结直肠癌组织及相对应的癌旁正常组织中Gab2的表达状况。结果：免疫组化检测结果显示78例结直肠癌组织中 Gab2蛋白表达阳性率为53.85％，而癌旁正常组织中Gab2蛋白多不表达或弱表达，两组结果比较差异有显著性（ P＜0．001）； Gab2蛋白在结直肠癌中的表达与肿瘤TNM分期及有无淋巴结转移呈正相关（P＜0．05），与肿瘤大小、分化程度无明显相关性（P＞0．05）；Western blot检测结果显示结直肠癌组织中Gab2蛋白表达显著高于相对应的癌旁正常组织（P＜0．05）。结论：Gab2在结直肠癌组织中过表达，可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。

丙烯酰胺对小鼠成体神经发生及GSK3β表达的影响

目的：探讨和研究丙烯酰胺对成年小鼠海马成体神经发生及GSK3β表达的影响。方法：雄性成年昆明小鼠分为丙烯酰胺处理组和生理盐水对照组，通过腹腔注射（ i.p.）进行丙烯酰胺染毒，用BrdU标记和免疫组织化学方法研究齿状回神经干细胞的增殖，BrdU／NeuN／GFAP三标的方法研究齿状回神经干细胞的存活和分化，Neuro-2a 细胞中观察GSK3β表达与分布，用Western blot方法检测小鼠海马中GSK3β的表达。结果：丙烯酰胺处理组小鼠齿状回亚颗粒细胞层（ SGZ）中的BrdU阳性细胞数量显著低于对照组，并且新生细胞向神经元分化的数量显著降低。丙烯酰胺处理小鼠SGZ区新生干细胞的存活率显著低于对照小鼠，另外，丙烯酰胺组新生干细胞向胶质细胞分化的比例显著升高。在Neuro-2a细胞中磷酸化的GSK3β表达量极显著升高，但在丙烯酰胺处理组小鼠的海马中磷酸化的GSK3β显著降低。结论：结果表明，丙烯酰胺能显著抑制小鼠齿状回成体神经干细胞增殖，降低新生干细胞的存活率并影响其分化，丙烯酰胺抑制小鼠成体神经发生可能与GSK3β有一定的关系。

上调Foxp3抑制卵巢癌细胞Skov3侵袭和迁移及其机制的研究

目的：探讨Foxp3基因对卵巢癌细胞Skov3侵袭与迁移的影响及作用机制。方法：构建Foxp3基因过表达质粒，采用脂质体转染导入Skov3细胞；以空载体转染细胞株为对照，通过细胞增殖、侵袭、RT-PCR和Western blot 实验，观察Skov3细胞Foxp3基因的表达情况，以及过表达Foxp3后细胞的侵袭与转移能力变化，检测MMP-2以及MMP-9基因表达变化。结果：导入过表达Foxp3质粒后，Skov3细胞的Foxp3表达显著升高；与空载体相比，过表达Foxp3基因显著抑制Skov3细胞的侵袭和迁移能力，并显著降低MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结论：上调FoxP3基因表达能通过下调MMP-2和MMP-9基因表达抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭、迁移行为，为深入研究Foxp3基因在体内的抑瘤作用和卵巢癌的基因治疗提供实验依据。

头孢曲松对脑损伤后海马谷氨酸及谷氨酸转运体-1的影响

目的：观察β-内酰胺抗生素头孢曲松对创伤性脑损伤大鼠海马谷氨酸（ Glutamate，Glu）及谷氨酸转运体-1（Glutamate transporter subtype-1，GLT-1）的影响。方法：将60只健康成年SD大鼠随机分三组：假手术组（Sham组）、脑创伤模型组（ TBI组）、头孢曲松组（ CTX组），采用改良Feeney法制备大鼠创伤性脑损伤模型，致伤后立即腹腔注射头孢曲松（200 mg／kg）。伤后6 h、12 h、24 h及48 h取材，采用干湿比重法测定脑组织含水量；高效液相色谱法检测大鼠海马兴奋性氨基酸Glu水平；免疫组织化学法及Western blot法检测大鼠海马组织GLT-1的分布及表达情况。结果：模型组大鼠较Sham组相比，脑组织含水量明显增加（ P＜0.05），海马区Glu水平显著升高（ P＜0.05），大鼠海马GLT-1的蛋白表达量明显下调（ P＜0.05）。与模型组大鼠比较，头孢曲松治疗组大鼠脑水肿减轻（P＜0.05），大鼠海马Glu水平明显下降（P＜0.05），GLT-1的蛋白表达量上调（ P＜0.05）。结论：β-内酰胺抗生素头孢曲松可以阻断兴奋性神经毒性，减轻脑水肿程度。

间充质干细胞对哮喘大鼠肺组织Notch信号通路的表达调控

目的：研究间充质干细胞对哮喘的调控修复，观察对哮喘大鼠肺组织Notch信号通路表达的影响。方法：30只大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和MSC移植组3组。造模结束后，制作肺组织石蜡切片进行病理学检查，实时荧光定量PCR（ RT-PCR）方法检测Notch2和Jagged1 mRNA在大鼠肺组织中的表达水平，Western检测肺组织Notch2、Jagged1蛋白的表达。结果：哮喘组大量炎性细胞浸润，管腔狭窄，与哮喘组相比，MSC移植组气道炎症和黏液分泌显著下调，管腔黏膜无增厚，上皮细胞脱落减少，正常组无炎性改变。 MSC 移植组和正常组 Notch2、Jagged1 mRNA 表达较哮喘组下调， Notch2、Jagged1蛋白表达减少（ P＜0.05）。结论：间充质干细胞能影响哮喘大鼠中Notch信号通路的表达，对哮喘的治疗发挥一定的作用。

Mcl-1短发夹RNA在Raw264.7细胞内特异性的筛选

目的：将Mcl-1shRNA转染到Raw264.7细胞内，针对shRNA对小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1表达的影响，筛选出沉默Mcl-1基因效果明显的特异性shRNA真核表达质粒。方法：将特异性shRNA经脂质体介导转染小鼠巨噬细胞系Raw264.7；半定量RT-PCR和Western blot分别检测转染24、48 h后Mcl-1 mRNA水平变化和Mcl-1蛋白表达情况，分析对应不同位点的三对特异性shRNA片段对Mcl-1的沉默效果。结果：特异性shRNA片段在24、48 h均能有效降低Mcl-1 mRNA和蛋白水平，沉默效率高于正常组、脂质体组和阴性对照组，差异具有统计学意义（ P＜0.05）；对应不同位点的三对shRNA真核表达质粒，其中Mcl-1 shRNA3对Mcl-1 mRNA和蛋白的抑制作用均强。结论：RNA干扰技术可有效下调小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1 mRNA水平，明显下调Mcl-1蛋白表达。成功筛选出了沉默Mcl-1基因效果明显的特异性shRNA真核表达质粒。

雪峰虫草对DC-CIK增殖及HepG-2细胞杀伤作用的实验研究

目的：研究雪峰虫草对DC-CIK细胞增殖及肝癌HepG-2细胞杀伤作用。方法：常规分离健康人外周血单个核细胞并诱导生成DC细胞和CIK细胞，将DC细胞与CIK细胞按1∶5共培养7 d后给药组加入不同浓度的雪峰虫草水提取物，第10天观察形态并计数各组DC-CIK细胞；收集培养第10天的DC-CIK细胞作为效应细胞，对数生长期HepG-2肝癌细胞作为靶细胞，使HepG-2∶DC-CIK靶效比为1∶5，cck-8法检测DC-CIK对HepG-2的杀伤率。结果：雪峰虫草水提物组对DC-CIK有显著的促增长作用，其作用的佳浓度为0.1 mg／ml。雪峰虫草诱导的DC-CIK细胞对肝癌HepG-2细胞的杀伤作用优于常规方法培养的DC-CIK细胞；常规方法培养的DC-CIK细胞加雪峰虫草与常规方法培养的DC-CIK细胞对肝癌HepG-2细胞的杀伤作用无显著性差异，雪峰虫草体外直接杀伤肝癌HepG-2细胞的作用不明显。结论：雪峰虫草通过促进 DC-CIK细胞增殖而增强其杀伤肝癌HepG-2细胞的作用。

双氢青蒿素对肺癌细胞株H1299增殖与放疗增敏的影响

目的：研究双氢青蒿素（ Dihydroartemisinin ，DHA）对非小细胞肺癌H1299放疗增敏的影响。方法：通过CCK-8法测定双氢青蒿素的IC10，选择低毒剂量IC10作为实验浓度，采用CCK-8法测定DHA对H1299细胞增殖的影响；流式细胞术、Hoechest33258染色分别检测DHA对细胞周期和凋亡的影响；软琼脂集落形成实验检测DHA对放疗敏感性的影响。结果：双氢青蒿素的IC10为14.87μmol／L，双氢青蒿素以剂量依赖性的方式抑制H1299细胞增殖，并使细胞阻滞在S期，增加放疗敏感性。结论：青蒿素能明显抑制细胞增殖，增加放疗敏感性。

不同时间骨髓间充质干细胞移植对大鼠矽肺纤维化形成的影响

目的：研究外源性骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）在不同时间窗的移植对大鼠矽肺纤维化的疗效。方法：体外分离、培养雄性3周龄SD大鼠BMSCs传至3代备用。将50只SD雌性大鼠随机分为5组：对照组，矽肺模型组，早期治疗组，中期治疗组，晚期治疗组（ n＝10）。采用非暴露式气管插管一次性灌注二氧化硅（ SiO2）粉尘混悬液法建立大鼠矽肺模型（50μg／ml），并分别于造模后1、14、28 d BMSCs干预治疗（1×106 ml－1），各组大鼠分别于治疗后14 d处死取材。流式细胞仪鉴定BMSCs；HE染色观察肺组织形态学变化；免疫组织化学法及Western blot 法检测MMP-9，Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的定位和定量表达。结果：矽肺模型组较对照组大鼠有明显炎症细胞浸润、矽结节形成、胶原沉积等病理改变。 BMSCs在矽肺早期（1 d）和中期（14 d）移植治疗较矽肺模型组病理改变有明显缓解（P＜0.05）；BMSCs在矽肺晚期（28 d）移植治疗无显著效果（ P＞0.05）。结论：BMSCs的移植在矽肺纤维化早中期对大鼠的病理进程起到延缓作用，晚期治疗效果不明显。

LPS预处理通过Nrf2介导对脊髓损伤的保护作用

目的：探讨大鼠经低剂量脂多糖预处理对脊髓损伤的神经保护作用及可能机制。方法：120只雌性SD大鼠随机分为空病毒（ EV）组、LPS＋空病毒（ LPS＋EV）组、Nrf2干扰病毒（ NIV）组、LPS＋Nrf2干扰病毒（ LPS＋NIV）组，每组分别30只。采用改良Allen′s打击法制备创伤性脊髓损伤（Traumatic spinal cord injury，TSCI）模型，于术后1、3、7、14、28 d进行大鼠双后肢BBB（ Basso Beattie and Bresnahan ）评分。获取脊髓损伤段组织标本，HE染色观察其组织病理变化；Nissl染色观察神经元中尼氏小体变化及神经元生存指数；免疫组化及Western blot检测Nrf2、GCLC蛋白的表达变化。结果：术后7、14、28 d，LPS＋EV组BBB评分显著高于EV组（ P＜0.05，P＜0.01）；NIV组与LPS＋NIV组之间评分无统计学差异（ P＞0.05）。与EV组比较：1～7 d时，LPS＋EV组Nrf2蛋白表达显著增高（ P＜0.05， P＜0.01） ， Nissl染色显示神经元生存指数显著升高（ P＜0.05， P＜0.01）；1～14 d，LPS＋EV组GCLC蛋白表达明显增加（ P＜0.05） ，HE染色显示其脊髓损伤组织病理结构明显改善。结论：低剂量脂多糖预处理能够促进大鼠创伤性脊髓损伤的神经功能恢复，其机制可能是通过激活Nrf2介导抗氧化应激通路来实现的。

文献阅读研讨课在医学免疫学教学中的应用

《医学免疫学》是我校临床医学、预防医学、核医学、野战外科学、预防医学、医学检验、高原医学、医学影像学、医学心理学等专业学员的必修专业基础课。医学免疫学是研究免疫系统的组织结构和生理功能的科学，它从不同的角度和水平揭示免疫系统识别并消除有害生物及其成分（体外入侵、体内产生）的应答过程和规律，并应用这些规律来阐明疾病发生发展的机制，达到防治疾病的目的。免疫学是生命科学领域发展为迅速的前沿学科之一，其与医学基础及临床医学各个学科关系极为密切，学员对《医学免疫学》这门课程的学习，将为其他医学课程的学习，以及从事与疾病的诊断和防治有关的工作奠定坚实的基础［1，2］。

固有淋巴细胞研究进展

长期以来，自然杀伤（ NK）细胞被认为是固有免疫系统中唯一属于淋巴谱系的细胞群体，然而近来研究揭示人和小鼠体内存在着多种类型的固有淋巴细胞（ ILC）。这些新发现的ILC群体主要分布于黏膜屏障部位，尽管数量较少，但在抵抗病原体入侵和维持组织器官稳态等方面发挥重要作用。 ILC发育分化早期存在着共同前体，但在后期阶段受不同转录因子调控，成为表型和功能不同的ILC成员。不同ILC亚群有着不同的细胞因子分泌谱，依据辅助性T细胞亚群的分类方法， ILC家族可以分成三类。 ILC多样性的发现极大地丰富了固有免疫的内涵，也为我们研究固有免疫和适应性免疫之间的联系开辟了新途径。