中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子: 0.92
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1000-484X
- 国内刊号: 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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MICA 第5外显子微卫星多态性与食管癌相关性研究
目的:研究MICA第5外显子微卫星多态性与食管癌相关性.方法:采用PCR-STR 微卫星基因分型技术检测103 例食管癌患者和84 例正常对照MICA 基因5 外显子多态性.构建食管癌标本中高频率出现的MICA等位基因的真核表达载体,转染293T细胞株,LDH法检测NK细胞对不同MICA等位基因转染的293T细胞的杀伤作用,效靶比20∶1.ELISA法检测转染的293T细胞上清中sMICA含量.结果:食管癌患者第5 外显子检测到5种等位基因,频率分别为:MICA-A4(9.71%),MICA-A5(22.3%),MICA-A5.1(40.8%),MICA-A6(15.5%),MICA-A9(11.7%),其中MICA-A5.1 与对照组对比差异有统计学意义(P<0.05).MICA等位基因转染293T细胞株后,相对于其他第5外显子A5.1组对NK杀伤的敏感性较低[(30.4±6.3)%,P<0.05],上清可溶性MICA分泌增加(135.7±6.2)pg/ml.结论:食管癌与MICA 第5外显子多态性A5.1 显著性相关,其危险性高于其他等位基因.
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CD244与活动性肺结核患者CD56brightNK细胞表型及功能的关系研究
目的:探索CD244与活动性肺结核患者CD56brightNK细胞表型及功能的关系.方法:用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMCs),用流式细胞术检测活动性肺结核患者与正常对照者CD56brightNK细胞表面CD244、CD94、NKG2D表达差异,进一步检测活动性肺结核患者CD56brightNK细胞CD244与Tim3、CD27、CD62L、CCR7、CD107a、IFN-γ表达的关系.结果:不经过结核菌抗原刺激的外周血中的CD56brightNK细胞表面CD244表达在活动性肺结核患者和正常对照中并没有显著性差异;经过结核菌抗原刺激的活动性肺结核患者CD56brightNK细胞表面CD244表达显著高于正常对照者;CD56brightNK细胞表面CD94和NKG2D表达,在活动性肺结核患者与健康对照者之间无显著性差异;活动性肺结核患者CD244+CD56brightNK细胞表面Tim3+细胞显著性升高,而细胞表面CD62L显著性降低,细胞内IFN-γ显著性降低;然而CD244+CD56brightNK细胞和CD244-CD56brightNK细胞之间CD107a表达无显著性差异.结论:在活动性肺结核患者PBMCs中CD56brightNK细胞表面高表达CD244,可能与抑制受体Tim3协同抑制IFN-γ的表达,但是与NK细胞的脱颗粒作用无关.
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Th22细胞及其功能分子IL-22在狼疮性肾炎中的作用研究
目的:观察狼疮性肾炎(LN)患者外周血中的Th22细胞及其功能分子白细胞介素(IL)-22的表达,并探讨其意义.方法:选择系统性红斑狼疮患者(无肾脏受累)38例,狼疮性肾炎患者32例,健康志愿者10例,分别作为SLE组、LN组和健康对照组(HC组).应用流式细胞仪检测其外周血中Th22细胞,酶联免疫吸附实验检测患者血清中IL-22的水平.比较三组Th22细胞和血清中IL-22水平差异,分析LN组Th22细胞和IL-22与SLE 疾病活动指数评分(SLEDAI)的相关性.结果:SLE组和LN组患者外周血中Th22细胞较健康对照组明显升高(P<0.01),血清中IL-22水平也较健康对照组明显升高(P<0.01);Th22和IL-22在LN组较SLE组要稍微高表达,但差异均无统计学意义(P>0.05);LN组患者Th22细胞比例和IL-22水平与对应患者的疾病活动性评分SLEDAI呈正相关.结论:Th22细胞和其功能分子IL-22参与SLE和LN的发病和进展.
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RA患者外周血和关节炎大鼠破骨细胞miRNAs异常表达谱比较及特征性miRNA功能分析
目的:筛选类风湿关节炎(RA)患者外周血与关节炎大鼠破骨细胞的miRNAs异常表达谱,分析RA的特征性miRNAs及其功能.方法:采用miRNAs芯片,筛选RA患者与正常人外周血、共培养诱生的关节炎大鼠破骨细胞与正常基质细胞的miRNAs表达谱的差异;Real time PCR对芯片结果进行验证;生物信息学方法对关键miRNA进行功能分析.结果:与正常人相比,RA患者外周血中具有差异表达的miRNAs有189个;与单核细胞比较,破骨细胞中具有差异表达的miRNAs有211个,其中miR-15b-5p等10个miRNAs在RA患者外周血及大鼠破骨细胞中均异常表达.Real time PCR验证结果与芯片检测结果具有一致性.生物信息学分析结果显示特征性miRNA的靶基因显著富集在VEGF,MAPK信号通路等信号通路.结论:部分miRNAs在RA患者外周血及关节炎大鼠破骨细胞中的异常表达具有一致性,其可能作为RA的特征性miRNAs,通过调控相关信号通路干预破骨细胞分化等病理过程.
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活化蛋白-1在急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠海马的表达变化
目的:观察急性一氧化碳中毒后不同时间点大鼠海马AP-1的表达变化.方法:腹腔注射一氧化碳的方法制备一氧化碳中毒迟发性脑病模型,HE染色观察大鼠海马区病理变化,免疫组化及Western blot法检测AP-1的表达水平,TUNEL染色计数海马CA1区凋亡神经元.结果:HE染色,空气组(AC组)、空白组(BC组)各时间点海马区细胞形态正常;一氧化碳组(CO组)海马区细胞肿胀、细胞数目减少,排列紊乱,细胞间隙扩大,细胞核碎裂、深染、固缩.免疫组化:CO组各时间点AP-1表达量均高于AC组及BC组,3 d达峰值,组内第3天与其余各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05).Western blot:AP-1表达在时间分布趋势上与免疫组化结果一致.TUNEL染色:CO组各时间点凋亡指数均较AC组、BC组多,于毒染后7 d达高峰差异有统计学意义(P<0.05).结论:大鼠海马区AP-1表达增高,可能进一步导致细胞凋亡和炎症免疫反应,成为DEACMP发病的重要机制之一.
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中国甘肃汉/回族人群C1GALT1、DEFA基因多态性与IgA肾病易感性的关系
目的:探讨β-1,3-半乳糖基转移酶(C1GALT1)基因rs1008898位点及α防御素(α-defensin,DEFA) 基因rs2738081位点多态性与中国甘肃省汉族人群和回族人群IgA肾病易感性的关系,筛查预测IgA肾病的分子标记.方法:本研究选取甘肃地区患IgA肾病的汉族个体146例、回族个体83例作为实验组,另选取健康汉族个体180例、健康回族个体100例作为对照组.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP) 方法以及PCR产物基因测序法对单核苷酸多态性基因位点进行基因分型,采用卡方检验比较各基因型、等位基因在病例组和对照组中的分布差异,评价各基因型、等位基因与IgA肾病发病风险的关系.结果:①汉族IgA肾病患者rs1008898位点的GG基因型频率与健康对照组之间有统计学差异(OR=2.489,95CI:1.259~4.922,χ2=7.037,P=0.008),且G等位基因可能增加患IgA肾病的风险(OR=1.268,95%CI:1.056~1.523,χ2=6.709,P=0.01).②回族IgA肾病患者rs1008898位点的多态性与健康对照组之间差异无统计学意义(P>0.05).(3)rs2738081位点多态性在汉族、回族IgA肾病患者及其健康对照组之间的分布差异无统计学意义(P>0.05).结论:rs1008898位点G等位基因可能增加甘肃地区汉族人群患IgA肾病的风险.
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血清Cyfra21-1、SCCA和TK1基线水平与肺癌预后关系的巢式病例对照研究
目的:探讨Cyfra21-1、SCCA和TK1水平与肺癌预后关系.方法:采用巢式病例对照研究方法,以2010年1月至2013年1月首诊无远处转移的721肺癌患者为基线队列,以随访期间(2年)死亡或脑(或多处)转移的364例患者为病例组,其他357例纳入对照组.检测两组血清Cyfra21-1、SCCA和TK1水平,分析三者与肺癌预后关系.结果:两组间体重指数、吸烟情况、病理类型、临床分期、淋巴转移、合并慢性疾病等,差异有统计学意义(P<0.05),两组胸腔积液、综合治疗情况等,差异无统计学意义(P>0.05);两组Cyfra21-1、SCCA和TK1基线水平,差异有统计学意义(P<0.05);两组间Cyfra21-1、SCCA、SCCA和TK1的分布情况,差异有统计学意义(P<0.05);不同临床分期肺癌患者Cyfra21-1基线水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),SCCA和TK1差异无统计学意义(P>0.05);不同病理类型肺癌患者Cyfra21-1、SCCA基线水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),TK1差异无统计学意义(P>0.05).多因素Logistic分析显示Cyfra21-1、SCCA和TK1水平肺癌预后不良的OR值(95%CI)分别为7.235(1.674~14.613)、5.009(0.973~10.778)、5.816(0.879~16.235).结论:Cyfra21-1基线水平与肺癌预后有关,可增加预后不良的危险性,SCCA和TK1水平变化与肺癌预后无关.
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HCV感染男性吸毒者血浆CCL19及CCL21浓度变化分析
目的:分析丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染男性吸毒者血浆CCL19及CCL21浓度变化.方法:采用定量ELISA法检测血浆CCL19和CCL21浓度,ELISA法检测血浆抗HCV,Real-time RT-PCR法检测HCV RNA,以国家哨点监测HCV感染的391名男性吸毒者为研究对象,60名健康男性为对照,分析不同抗HCV/HCV RNA状况男性吸毒者血浆CCL19和CCL21浓度变化.结果:391名男性吸毒者中,180名感染HCV,感染率为46.04%.未感染HCV男性吸毒组血浆CCL19及CCL21浓度较健康男性组升高(P≤0.001).吸毒抗HCV(-)/HCV RNA(+)组血浆CCL19和CCL21浓度低,与其他组差异明显(P≤0.05);吸毒抗HCV(+)/HCV RNA(-)组的高,与健康男性组差异显著(P<0.05).结论:吸毒可使男性血浆CCL19和CCL21浓度升高.血浆CCL19和CCL21浓度升高可能有助于HCV自发清除;血浆CCL19和CCL21浓度降低可能预示着病程持续转归较差.
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布病抗生素治疗的Meta分析
目的:系统评价目前常用布病疗法的有效性和安全性.方法:检索PubMed和Cochrane协作网的CENTRAL数据库中1985年至今全部有关布病治疗的英文文献以及CBM数据库中所有有关布病的中文随机对照试验.使用Cochrane协作网推荐的随机对照实验偏倚风险评估工具评估纳入研究质量.使用固定效应模型M-H法合并和分析不同抗生素组合治疗布病的复发率,总体治疗失败率和不良反应率.结果:共纳入随机对照实验17篇.比较了DR、DS、QR、DG等抗生素联合治疗方案.DS治疗方案总体治疗失败率(RR合并:2.53,95%CI:1.51~4.23)和复发率(RR合并:2.69,95%CI:1.46~4.98)低于DR方案,不良反应率二者无显著差别(RR合并:1.40, 95%CI:0.97~2.01);QR组和DR组的复发率(RR合并:1.24,95%CI:0.67~2.30)和总体治疗失败率(RR合并:1.41,95%CI:0.86~2.32)并无显著差异.不良反应方面,QR组低于DR组(RR合并:1.79,95%CI:1.17~2.74).结论:DS治疗方案治疗布病优于DR;QR组与DR组疗效相差无几,但QR方案不良反应更少;双抗治疗的基础上再增加一种抗生素可以提高治疗效果,不良反应率没有明显升高,但仍需更多临床证据证明.
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抗PD-1及PD-L1在肿瘤治疗中的进展
程序性死亡受体-1(PD-1)与其配体(PD-L1、PD-L2)对T淋巴细胞的抑制、"耗竭"以及诱导免疫耐受发挥着至关重要的作用.在肿瘤患者体内,PD-1/PD-L1的高表达能够增强肿瘤的转移能力、导致患者死亡率上升,抑制PD-1/PD-L1信号通路成为新近研究的热点.美国食品及药品管理局(FDA)相继批准PD-1抑制剂Keytruda(pembrolizumab)、Opdivo(nivolumab);PD-L1 抑制剂 Tecentriq(Atezolizumab)用于恶性肿瘤的治疗.目前,在FDA批准的临床试验中,抗PD-1、PD-L1单克隆抗体在转移性肾癌、膀胱癌、头颈癌、非霍奇金淋巴瘤、结直肠癌等肿瘤中亦取得显著疗效.本文现将抗PD-1及PD-L1在肿瘤治疗中的进展作一综述.
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肿瘤化疗放疗协同免疫治疗的分子机制
对于晚期癌症而言,传统化学和放射性治疗本身并不足以去除所有的肿瘤细胞.化学治疗和放射性治疗主要是为了控制局部肿瘤增长而诱发肿瘤细胞直接死亡.在大多数临床研究中,传统化学治疗通过采用大耐受剂量(Maximum-tolerated dose,MTD)大规模杀死肿瘤细胞.这些传统治疗方法具有多方面缺点,比如:非特异性靶向,影响包括免疫细胞在内的正常细胞;促进具有药物和化学治疗抗性癌细胞的产生;以及产生毒性等.这些治疗方案可能会引发淋巴细胞减少症,并抑制宿主反应.为了克服这些缺点,许多研究致力于癌症发生相关信号通路研究,进而发展靶向治疗.例如,依据导致化学治疗和放射治疗失败的病例,寻找潜在的癌症信号通路,设计靶向这些信号或者基因的小分子化合物[1].
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组蛋白修饰在天然免疫应答及炎症反应中的调控作用
在机体中,天然免疫应答和炎症反应均受到精准的调控,终使免疫系统保持稳态.组蛋白修饰是一种表观遗传修饰,它通过调控基因的表达在众多生理过程中起着重要的作用.组蛋白修饰异常与多种疾病如类风湿性关节炎、多发性硬化症和肿瘤等的发病密切相关,并逐渐成为疾病诊断治疗研究的新靶点,然而关于组蛋白修饰在天然免疫应答中发挥的作用目前不是非常清楚.因此,需要进一步探索组蛋白修饰与天然免疫应答及炎症反应之间的关系.
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痘病毒锚蛋白重复序列蛋白对NF-кB信号通路的影响
痘病毒科(Poxviridae)病毒是在细胞质中复制的双链DNA病毒,拥有130 kb~> 350 kb的基因组.分为两个亚科:脊椎动物痘病毒亚科(Chordopoxvirinae)和昆虫痘病毒亚科(Entomopo-xvirinae).脊椎动物痘病毒亚科包含10个属.痘病毒间的基因组结构有很高的相似性,病毒DNA复制和转录所必需的基因以及涉及病毒粒子形态和结构的基因位于基因组高度保守的中间区域.基因组的末端区域在不同的属间呈现很大的多样性,包括一些属或种特异性基因以及感染和毒力相关基因[1].
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蛋氨酸脑啡肽的免疫调节作用及应用新进展
蛋氨酸脑啡肽(Methionine enkephalin,MENK)早在1975年被Hughes发现,由前脑啡肽衍生而来的5个氨基酸组成的内源性阿片肽[1],正常体内含量极低,每毫升血浆含50~150 pg[2].对MENK的早期研究是将其作为镇痛剂和神经递质来进行的,随着内分泌和免疫系统关系的研究发现,当抗原或有丝分裂原刺激免疫细胞时,淋巴细胞、巨噬细胞和自然杀伤细胞等免疫细胞可以分泌产生MENK,MENK还可以调节某些细胞因子的分泌水平[3],阿片受体在中枢神经系统和免疫系统及某些肿瘤组织和正常组织细胞中均有分布;随着神经化学和分子生物学技术的发展,尤其是基因剔除鼠的应用,许多研究证实阿片肽与细胞表面不同的受体结合后可以产生不同的生物效应,如调节免疫功能,抑制肿瘤细胞生长等,这些结果说明MENK参与免疫和神经内分泌系统的调节,具有免疫调节作用,也是一类重要的细胞因子.MENK的生物学功能使其在免疫系统相关疾病和肿瘤疾病的治疗上发挥重要的作用,并取得了一定的进展[4].
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NETs在自身免疫性疾病发病机制中的作用研究进展
中性粒细胞作为人体固有免疫系统的哨兵,在血液的非特异性细胞免疫系统中起着十分重要的作用,它们由骨髓分化发育成熟后,进入血液或组织,当微生物病原体特别是化脓性细菌入侵、炎症发生时,在多种炎症和细胞因子的介导下,它们便会被迅速招募并趋化至炎症部位,通过分泌细胞因子、脱颗粒和吞噬作用等杀灭并清除病原体.在2004年,Zychlinsky等研究发现12-豆蔻酸-13-乙酸佛波醇(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)可诱导中性粒细胞活化并释放出包裹着组蛋白、弹性蛋白酶等多种胞内物质的网状DNA纤维结构,该结构具有包裹、限制及杀伤病原菌的作用.这一中性粒细胞释放的防御反应性网状DNA纤维结构被命名为NETs[1,2].随着NETs在病原微生物所致的感染炎症性疾病的抗病作用机制逐渐阐明的同时,NETs释放引起胞内成分外露、清除缺陷及随后反应过程的调节失衡在诸如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、脉管炎等多种自身免疫性疾病病程中的致病作用也不断被人们揭示.目前对NETs导致自身免疫性疾病发病和进展的具体机制仍不明确,本文就NETs特点及其产生机制和NETs在自身免疫疾病发病机制中的作用方面的研究进展进行综述.
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肥大细胞和脑神经炎症相关疾病
1890年,Neumann[1]首次在多发性脑硬化患者的脑硬化斑块边缘发现肥大细胞(Mast cells,MCs)[2].大量实验表明脑部MCs分泌或活化释放的物质参与脑内炎症反应以及神经系统炎症的病理过程,如自闭症谱系障碍、多发性脑硬化和阿尔兹海默症[3,4].自闭症谱系障碍(Autism spectrum disorder,ASD)是一种和神经炎症有关的神经发展性障碍,患者的交流和行为存在缺陷.根据2012 年美国疾病控制中心的调查统计,68名儿童中就有1名患有ASD[5].多发性脑硬化(Multiple sclerosis,MS)是一种中枢神经系统的慢性炎症疾病,病症特点有脱髓鞘多灶斑块、免疫细胞浸润轴索损害等[6,7],是导致年轻人致残率高的神经疾病之一[8].
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间充质干细胞治疗系统性硬化症研究进展
系统性硬化症(Systemic sclerosis,SSc)是一种以炎症、血管病变、纤维化为特点的慢性自身免疫性疾病.临床表现主要以皮肤紧硬和雷诺现象为主,随着病程的进展会出现胃肠功能紊乱及心肺功能不全等相关并发症.由于病因复杂,尚无有效的治疗方法,在自身免疫性疾病中致残率和死亡率都较高.近年来,随着对SSc认识的提升,SSc发病机制及治疗方法都有了长足的进展,特别是在间充质干细胞治疗SSc方面,具有可观的前景.
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热休克蛋白90α荧光免疫层析检测方法的建立
目的:建立人血清中热休克蛋白90α(HSP90α)的荧光免疫层析定量检测方法.方法:采用荧光免疫层析技术,对荧光微球制备、佳反应时间、线性范围、精密性、回收率、临床检测等方面进行系统研究.结果:确定了各反应条件,佳反应时间为5 min.线性范围0.39~100 ng/ml.精密性质控品高值(30 ng/ml)CV=8.14%;低值(10 ng/ml)CV=9.26%,高、中、低值血清的回收率为100.56%、99.76%、94.1%;与国外试剂盒(ELISA检测方法)平行检测40份临床血清,结果显示两者相关系数为0.968 5.结论:初步建立的方法具有良好的精密性和线性,临床符合率能满足临床检测技术要求,有望完善后报批用于临床.
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HCV多中和抗原表位嵌合病毒样颗粒免疫获得血清内中和抗体评价
目的:纯化的HCV多中和抗原表位及HCV包膜蛋白E2嵌合的HBV S抗原病毒样颗粒免疫新西兰兔,测定免疫血清内的中和抗体.分析中和抗体对HCVpp感染Huh7.5的中和作用.方法:纯化的HCV多中和抗原表位及包膜蛋白E2嵌合的HBV S抗原病毒样颗粒(VLPs-MEpS、VLPs-E2S)10 μg皮下接种新西兰兔,间隔2周共免疫3次,采集不同时间免疫兔血清,ELISA方法测定血清内的抗体,PBS组作为对照;制备1b型HCVpp,观察血清抗体对HCVpp感染Huh7.5的中和作用,对免疫血清保护性进行初步评价.结果:免疫后血清中产生一定水平的中和抗体,血清中和抗体测定VLPs-MEpS明显高于VLPs-E2S(P<0.05).VLPs-MEpS与VLPs-E2S组均显著高于对照PBS组(P<0.01).对HCVpp抑制作用,VLPs-MEpS高于VLPs-E2S组(P<0.05),高中和率可达61.49%,二者均高于对照组(P<0.01).结论:嵌合病毒样颗粒免疫新西兰兔后产生一定水平中和抗体,该中和抗体具有保护作用,为研发中和抗体表位疫苗奠定基础.
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miR-34a通过Snail诱导肺癌EMT及促进其转移的分子机制
目的:探讨miR-34a在肺癌组织中的表达情况以及miR-34a在肺癌细胞侵袭和迁移过程中的作用及其机制.方法:qPCR检测肺癌和正常肺组织中miR-34a的表达情况;使用miR-34a-mimic和miR-34a-inhibitor过表达和沉默miR-34a,qPCR检测沉默和过表达效果;Western blot检测沉默和过表达miR-34a后Snail蛋白的表达情况;荧光素酶报告基因检测miR-34a与Snail的相互作用;Transwell侵袭实验检测miR-34a的表达对肺癌细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-34a的表达对肺癌细胞迁移能力的影响;Western blot检测E-Cadherin、Vimentin和Twist蛋白的表达情况.结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中miR-34a表达明显降低;且晚期、低分化和有淋巴结转移的肺癌组织miR-34a表达明显较早期、高分化和无淋巴结转移的肺癌组织低;miR-34a-mimic和miR-34a-inhibitor可以有效抑制和过表达miR-34a的表达;miR-34a能与Snail的3′ UTR特异性结合;miR-34a可以调控肺癌H1650细胞的侵袭迁移能力;过表达miR-34a上调E-Cadherin,同时下调Vimentin和Twist蛋白的表达,沉默miR-34a则相反.结论:miR-34a在肺癌中表达明显降低,且跟肺癌分期分级以及淋巴结转移与否密切相关,同时miR-34a可以通过上皮间质转化调节肺癌细胞侵袭和迁移能力.
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骨髓间充质干细胞分离鉴定及在糖尿病大鼠肾脏保护中的机制研究
目的:观察骨髓间充质干细胞分离、鉴定方法及在糖尿病大鼠肾脏保护中的机制.方法:取大鼠31只,1只大鼠采用贴壁培养法分离大鼠骨髓间充质干细胞,利用相差显微镜观察细胞形态,Real-time PCR检测培养细胞表面分子量.30只大鼠采用链脲佐菌素腹腔注射构建糖尿病大鼠模型.根据处理方法不同分为对照组(n=15)和干细胞治疗组(n=15).对照组大鼠采用胰岛素联合普罗布考治疗,干细胞治疗组植入干细胞治疗,治疗前、后检测2组大鼠空腹血糖、24 h尿蛋白排泄、肌酐清除率、肾重比体重;采用PAS染色观察2组肾组织情况;采用Western blot检测肾脏组织相关基因和蛋白水平.结果:原代骨髓间充质干细胞培养24 h后换液时可见细胞分布不均匀,在培养瓶呈分片聚集,形态不规则.培养7 d后细胞集落多,细胞规则,呈长梭形、椭圆形,折光性强,细胞间相互融合铺满瓶底;骨髓间充质干细胞传代培养后细胞形态均一,呈长梭形,轮廓清除,折光性强,生长迅速,部分细胞呈漩涡状;Real-time PCR检测结果显示:SH2、CD44、CD31呈阳性表达,CD34呈阴性表达;观察组治疗后空腹血糖、24 h尿蛋白排泄、肌酐清除率、肾重比体重,显著低于对照组(P<0.05);干细胞治疗组大鼠肾脏组织PAS染色结果显示:肾小球结构清晰,形态规则,肾小球内细胞排列规则,基底膜和包曼氏囊清晰.对照组大鼠肾小球体积增大,系膜区增宽,基质明显增多;干细胞治疗组治疗后Bcl-2蛋白水平得到显著提高,Bax和Caspase-3蛋白水平得到显著下降.对照组Bcl-2蛋白水平得到显著降低,Bax和Caspase-3蛋白水平得到提高(P<0.05).2组治疗前氧化应激ROS、MDA、SOD指标差异无统计学意义(P>0.05);干细胞治疗组治疗后氧化应激ROS、MDA、SOD指标,低于对照组(P<0.05).结论:利用贴壁培养法能分离大鼠骨髓间充质干细胞并利用绿色荧光蛋白进行体外标记,植入骨髓间充质干细胞能保护机体肾脏,抑制糖尿病肾脏的氧化应激反应.
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蛋白酪氨酸激酶6对TNF-α诱导的人气道上皮屏障功能减损的影响
目的:探讨蛋白酪氨酸激酶6(PTK6)对TNF-α诱导的人气道上皮屏障功能减损的影响及相关机制.方法:体外培养人气道上皮16HBE细胞,予TNF-α刺激,分别转染PTK6 siRNA和recombined PTK6,以转染Scramble siRNA和Empty vector为对照.四甲基偶氮唑盐法(MTT) 检测细胞活性;跨皮细胞组抗仪检测细胞跨皮细胞阻抗(TER);辣根过氧化物酶(HRP)流量法反应细胞通透性;RT-PCR检测ZO-1、Occludin mRNA水平;Western blot检测PTK6、ZO-1、Occludin、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化c-Jun氨基端激酶1/2(p-JNK1/2)和磷酸化p38(p-p38)蛋白水平.结果:TNF-α刺激后,细胞ZO-1、Occludin转录及蛋白水平、TER值显著降低,细胞通透性增高,同时PTK6、p-ERK1/2、p-JNK1/2和p-p38蛋白水平显著增高(P<0.05);上调PTK6使ZO-1、Occludin转录及蛋白水平和TER值进一步降低,细胞通透性和p-JNK1/2、p-p38蛋白水平也进一步增高(P<0.05),但下调PTK6后上述指标呈相反变化(P<0.05);上调或下调PTK6对p-ERK1/2无明显影响.结论:下调PTK6可以降低JNK1/2、p38MAPK磷酸化水平,进而改善TNF-α诱导的气道上皮屏障功能减损.
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TLR4基因敲除对小鼠内脏脂肪组织免疫细胞及脂肪因子的影响
目的:探讨TLR4基因敲除对小鼠免疫细胞及脂肪因子的影响.方法:取20周龄的雄性野生型C57BL/6小鼠和TLR4-/-小鼠的脾脏和附睾脂肪组织,分离细胞,用流式检测F4/80、CD11b、CD11c、CD3、CD4、CD8分子的表达;qPCR检测附睾脂肪组织内IL-6、HMGB1、TNF-α、脂联素和抵抗素的表达.结果:与野生型C57BL/6小鼠相比,TLR4-/-小鼠脾脏和附睾脂肪组织中M1型(F4/80+CD11b+CD11c+)巨噬细胞比例上升(P<0.05),M2型(F4/80+ CD11b+ CD11c-)巨噬细胞比例下降(P<0.05),这种趋势在附睾脂肪组织中表现更为显著.同时发现附睾脂肪组织中CD4+T细胞比例下降(P<0.05),CD8+T细胞比例上升(P<0.05);IL-6、HMGB1、抵抗素表达升高(P<0.05);TNF-α和脂联素表达降低(P<0.05).结论:TLR4基因敲除可导致内脏脂肪组织脂肪因子和免疫细胞的紊乱.
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毒力因子乙酰基转移酶抑制金黄色葡萄球菌感染引起的巨噬细胞死亡
目的:探讨毒力因子OatA在金黄色葡萄球菌感染中的作用.方法:在体外应用金黄色葡萄球菌野生菌株USA300、OatA基因缺失菌株和OatA基因回补菌株感染小鼠骨髓来源巨噬细胞,检测细胞死亡情况;在体内应用滴鼻的方式构建金黄色葡萄球菌肺部感染模型,分离肺泡巨噬细胞,检测细胞死亡情况.结果:体内和体外实验均显示,相比野生菌株和回补菌株,OatA基因缺失菌株能诱导显著的巨噬细胞死亡.结论:在金黄色葡萄球菌感染中,OatA能抑制金黄色葡萄球菌感染引起的巨噬细胞死亡.
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过表达Oct4B1诱导结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化
目的:探讨Oct4B1基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制.方法:用带G418抗性的Oct4B1基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),转染成功后用G418筛选建立稳定转染的细胞株,对两种稳定转染细胞进行如下检测:① RT-qPCR检测Oct4B1的mRNA水平;②划痕实验和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;③Western blot检测EMT相关标记物E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达;④RT-qPCR和Western blot检测EMT转录因子Twist的mRNA及蛋白表达. 结果:稳定转染细胞株建立后,实验组与对照组比较:Oct4B1基因表达水平明显升高(P<0.01);细胞迁移明显增强(P<0.01);细胞侵袭能力明显提高(P<0.01);上皮标记物E-cadherin蛋白表达量明显下降(P<0.01);而间质标记物N-cadherin及Vimentin蛋白表达量明显上调(P<0.01);Twist 的mRNA及蛋白表达量均明显升高(P<0.01).结论:过表达Oct4B1基因可诱导人结直肠癌SW480细胞发生EMT,增强细胞迁移及侵袭能力,其分子机制可能与提高Twist表达有关.
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青藤碱抗肝癌作用机制研究
目的:探讨青藤碱对HepG2人肝癌细胞株的增生和转移能力的多靶向作用机制.方法:运用噻唑蓝还原法(MTT)来检测青藤碱对HepG2人肝癌细胞株的抗增殖作用,而同时运用Transwell 法来检测药物对于细胞转移能力的作用变化;间接荧光标记法测定经过不同浓度的青藤碱作用后,细胞内活性氧水平的变化;利用酶抑制动力学方法,研究青藤碱对逆转录酶的抑制作用;再通过逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹的实验来检测HepG2细胞中凋亡蛋白水平的变化.结果:青藤碱对HepG2人肝癌细胞株具有抗侵袭及转移的治疗作用.MTT检测结果显示青藤碱对于HepG2人肝癌细胞抗增殖作用明显,半抑制浓度IC50为(15.35±2.43)μmol/L;而Transwell法的结果显示青藤碱对癌细胞有较好的抗转移能力;青藤碱是一种有效的逆转录酶抑制剂,IC50为(21.32±2.43)μmol/L;荧光标记法检测细胞内活性氧水平随青藤碱呈浓度依赖性升高;蛋白水平测定显示青藤碱上调HepG2人肝癌细胞CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达. 结论:青藤碱可能是通过上调CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达,进而抑制人肝癌细胞的增殖和转移,调节相关信号通路,终在分子水平证明青藤碱对HepG2人肝癌细胞的抑制作用.
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黄连乙醇提取物与盐酸小檗碱体外抗炎对比研究
目的:比较黄连乙醇提取物与盐酸小檗碱体外抗炎活性,探索体外抗炎机制.方法:通过脂多糖体外刺激小鼠单核巨噬细胞建立细胞炎症模型,给药干预后,LPS长时间刺激RAW264.7细胞,MTT比色法分析黄连乙醇提取物及盐酸小檗碱对RAW264.7细胞生长活性的影响.酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、前列腺素E2 (PGE2)含量.实时荧光定量RT-PCR法检测iNos、HO-1、TNF-α mRNA表达.结果:在5~80 mg/L范围内,黄连乙醇提取物及盐酸小檗碱对RAW264.7细胞无抑制作用;各浓度给药组IL-6、IL-1β、TNF-α、NO、前列腺素E2 (PGE2)含量与LPS刺激模型组比较均有显著性(P<0.01),且浓度与剂量无效应相关.实时荧光定量RT-PCR结果显示,各浓度给药组均明显降低iNos、HO-1、TNF-α mRNA表达(P<0.05,P<0.05,P<0.01),且与浓度不呈效应关系.结论:黄连乙醇提取物具有体外抗炎作用,抗炎活性优于盐酸小檗碱,其作用机制可能与抑制TNF-α、NO等炎症因子的活化,进而影响花生四烯酸(AA)代谢有关.
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HIF-1α、ALDH1和Hedgehog信号通路协同促进三阴性乳腺癌中癌症干细胞活化的相关性研究
目的:探讨HIF-1α、ALDH1和Hedgehog信号通路在三阴性乳腺癌中癌症干细胞活化的相关性及其临床意义.方法:采用免疫磁珠法从三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞中分选出ALDH1+乳腺癌干细胞和ALDH1-乳腺癌细胞,采用qRT-PCR方法比较HIF-1α和Hedgehog信号传导通路主要分子SHH、PTCH1、SMO、GLI1在这两种细胞中的表达差异;采用免疫组化方法了解HIF-1α和ALDH1在三阴性乳腺癌组织中的表达以及与干细胞信号传导通路Hedgehog的相互关系.结果:HIF-1α mRNA、SMO mRNA和GLI1 mRNA在ALDH1+乳腺癌干细胞中的表达均明显高于ALDH1-乳腺癌细胞,差异具有显著统计学意义(P均<0.05).在三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织中HIF-1α的阳性表达率分别为90.0%和70.0%,ALDH1的阳性表达率分别为93.3%和66.7%,差异均具有显著统计学意义(P均<0.05).在三阴性乳腺癌组织中HIF-1α和ALDH1的表达呈正相关(r=0.53,P<0.01).HIF-1α的表达与三阴性乳腺癌的淋巴结转移和TNM分期有关(P均<0 .05),ALDH1的表达与组织学分级和TNM分期有关(P均<0.05).HIF-1α与Hedgehog信号通路分子SHH(r=0.584,P<0.01)、SMO(r=0.467,P<0.01)和GLI1(r=0.439,P<0.05)的表达呈正相关,ALDH1与SHH(r=0.426,P<0.05)和GLI1(r=0.394,P<0.05)的表达呈正相关.结论:HIF-1α和Hedgehog信号通路在ALDH1+乳腺癌干细胞中活化,HIF-1α、ALDH1与Hedgehog信号传导通路可能相互协同激活癌症干细胞从而促进三阴性乳腺癌的恶性进展.
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下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat 凋亡相关分子的影响
目的:探讨下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响.方法:运用RNAi慢病毒为载体下调急性T系白血病Jurkat 细胞株CD59的表达;激光共聚焦观察转染效率及CD59分子的定位;Real-time-PCR、Western blot筛选下调效果好的一组细胞,用其做后续的分子生物学水平的实验;Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Survivin蛋白表达量的变化;ELISA检测各组的细胞培养上清中IL-3、TNF-β的表达. 结果:激光共聚焦观察到转染各组的转染效率在90%以上,CD59分子主要位于细胞膜;Real-time-PCR筛选得出下调A组的转染效果好;Western blot结果显示下调A组的CD59蛋白的表达量减少明显,将RNAi-CD59-A定义为RNAi-CD59作为实验组进行后续实验;实验组能增强Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),抑制Bcl-2、Survivin蛋白的表达(P<0.05);ELISA结果显示下调组IL-3 表达水平降低(P<0.05), TNF-β的表达水平升高(P<0.05).结论:下调D59基因表达可使急性T系白血病细胞株Jurkat的促凋亡分子表达增高,促增殖分子表达降低.
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人外周血γδT细胞免疫治疗裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤的体内实验研究
目的:研究不同剂量的人外周血γδT细胞对裸鼠人肝癌细胞(SMMC-7721)移植瘤模型的免疫治疗作用.方法:①用人肝癌细胞株SMMC-7721接种BALB/c裸鼠皮下,建立肝癌裸鼠模型.②从健康人外周血中提取单核细胞,体外特异性扩增γδT细胞.③将已建立的肝癌裸鼠模型随机分为5组,阳性对照组为5-氟尿嘧啶(5-Fu),阴性对照组为生理盐水,治疗组用不同剂量的γδT细胞(1×105、5×105及25×105)分别注入裸鼠尾静脉,阳性对照组用5-Fu裸鼠腹腔注射,阴性对照组用生理盐水裸鼠尾静脉注射.观察不同剂量的γδT细胞对肿瘤的抑制效果,包括治疗前后的体重、食物摄取量及生长状况等,并与阳性对照组和阴性对照组比较肿瘤体积(TV)、相对肿瘤体积(RTV)和相对肿瘤增殖率[T/C(%)]变化.结果:不同剂量的γδT细胞对裸鼠移植瘤的生长有不同程度的抑制,RTV与生理盐水阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与5-Fu阳性对照组比较,TV增长明显低于5-Fu阳性对照组,RTV各剂量组抑制程度相似,均略高于5-Fu阳性对照组,T/C(%)各剂量组比5-Fu对照组的相对肿瘤增殖率稍低,但无显著性差异.结论:人外周血γδT细胞对肝癌裸鼠移植瘤具有显著的抑瘤作用,为建立肝癌免疫治疗新方法提供实验依据.
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建立符合临床医学专业特色的免疫学实验课新体系
目前免疫学实验课的体系和内容是按照医学一级学科各专业统一授课设计的,包括临床医学、护理、口腔、预防、信息等专业,缺少针对临床医学专业学生培养所需要的特色.主要存在的问题是:①在教学内容上,缺少与临床实际应用的联系;②在教学模式上,缺少自主学习和独立思维能力的训练;③在考核方式上,只有单一的实验报告,缺少综合评价体系[1].因此,本研究旨在以免疫学实验技术教学为平台,从临床医学实践中常用的免疫学技术为切入点,将临床案例与免疫学技术有机结合,并以学生课堂讨论、自主设计实验并实施的授课方式,以学生完成实验设计、自讲自评的考核方式,建立和尝试符合临床医学专业特色的免疫学实验课新体系.
关键词: -
基于文献综述提高研究生学位论文写作水平
文献综述是基于某一专业领域的某一课题搜集大量相关资料,通过广泛阅读、逻辑分析、归纳整理,凝练出当前课题的研究热点、主要研究成果、新进展、研究动态、前沿问题,并予以综合性分析的一种学术论文[1].研究生一般是具有本科学历、通过严格的选拔考试或推荐以择优录取的"高材生",但新入学研究生多为独生子女,如何在导师指导下尽早、较好地融入学术化、专业化课题研究,文献综述起着至关重要的作用.近年来,我国研究生招生规模持续扩大,新生质量良莠不齐,迫切需要探索一条规范性提高研究生教育质量的新途径.本文以文献综述为切入点,在导师指导下,通过提高研究生对文献资料的归纳、分析、综合运用能力,增强提出问题、解决问题、独立开展科学研究的能力,现将结果报道如下.
关键词: -
胃肠道肿瘤免疫逃逸
全球癌症患者和死亡病例呈急剧增加态势,而中国新增癌症病例高居全球首位.传统的手术、化疗、放射治疗等方法很难从根本上治愈癌症.揭示癌症发病机制和发现新靶标已成为生物医学领域面临的一场重要挑战.近年来,癌症研究的一个概念性突破是发现了慢性炎症可诱导和促进肿瘤发生发展[1].大量临床与基础研究证明,炎症特别是慢性炎症在多种肿瘤,尤其是消化道肿瘤的发生发展中起决定性的作用.譬如,幽门螺杆菌相关胃癌、结肠炎相关结肠癌等为炎症诱导肿瘤提供了重要证据[2,3].针对PD-1/PD-L1、TNF、IL-6、STAT3、NF-κB等炎性分子的靶向药物已在动物模型中获得了成功,并且一些药物已进入临床试验阶段或用于临床抗肿瘤治疗[4,5].尽管人们对于炎-癌转化过程中免疫监控与逃逸机制的理解仍然处于探索阶段,但毋庸置疑的是除了细胞自身癌变之外,与之相伴的免疫应答和免疫逃逸是肿瘤发生发展过程中极为重要的一面.
关键词:
年 | 期数 |
2019 | 01 03 04 05 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |