中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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血清抗幽门螺旋杆菌抗体和抗AQP4抗体在中枢神经系统脱髓鞘病中的相关性研究
目的:探讨血清抗幽门螺旋杆菌抗体(HP-IgG)和抗AQP4抗体在多发性硬化(MS)、视神经脊髓炎(NMO)中的相关性.方法:对33例MS患者、7例NMO患者和35例健康体检者采用间接酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中抗HP的IgG抗体,采用细胞间接免疫荧光法(CBA)检测血清标本抗AQP4抗体;分析MS、NMO患者中HP-IgG及抗AQP4抗体的阳性率,并对比抗AQP4抗体阳性与抗AQP4抗体阴性患者间HP-IgG阳性率的差别.结果:MS组、NMO组和正常对照组血清中抗血清HP-IgG抗体阳性率分别为69.70％、85.71％、42.86％,差别有统计学意义(P<0.05),其中MS组、NMO组与正常对照组血清中抗HP-IgG抗体阳性率差别均有统计学意义(P<0.05);但MS组与NMO组血清中抗HP-IgG抗体阳性率差别无统计学意义(P>0.05).MS组、NMO组和正常对照组血清中抗AQP4抗体阳性率分别为4.2％、85.71％、0％,差别有统计学意义(P<0.05).MS组和NMO患者组中抗AQP4抗体阳性患者与抗AQP4抗体阴性患者抗HP-IgG抗体阳性率分别为72.73％、79.31％,差别无统计学意义(P>0.05).结论:HP感染是引起MS及NMO疾病发生的危险因素,而与MS及NMO患者是否含有抗AQP4抗体无关.
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IL-35抑制炎症反应和T细胞反应性减轻变应性鼻炎的机制研究
目的:探讨IL-35在变应性鼻炎中对炎症反应和T细胞反应性的作用及其机制.方法:选取2012年1月至2016年1月间本院收治的37例变应性鼻炎患者(观察组)及35例行变应性鼻炎过敏原检测后排除变应性鼻炎的健康志愿者(对照组)为研究对象,采集观察组和对照组的外周血液,ELISA检测患者血清中IL-35水平.建立小鼠变应性鼻炎动物模型,收集小鼠外周血液,ELISA检测小鼠血清中IL-35及IgE水平.小鼠鼻切片后组织染色检测嗜酸性粒细胞;分离小鼠脾脏细胞后加入卵清蛋白抗原,加入或不加入IL-35至培养基中,检测卵清蛋白特异性T细胞反应性;ELISA检测T细胞培养上清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13,IL-17、 IL-23、IL-27以及TNF-α含量;荧光定量PCR(Real-time PCR)检测培养T细胞中IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-17、IL-23、IL-27以及TNF-α mRNA表达水平;Western blot 检测培养T细胞JNK、Erk1/2及p38信号途径的激活水平.结果:观察组血清IL-35水平显著低于对照组(P<0.05);变应性鼻炎组小鼠组织染色结果显示嗜酸性粒细胞浸润数量显著高于正常组(P<0.05),而血清IL-35水平则显著低于正常小鼠(P<0.05);卵清蛋白特异性T细胞反应性检测显示IL-35能显著抑制其反应性;ELISA及Real-time PCR结果均显示,IL-35能够显著下调IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-23及TNF-α的表达,上调IL-2、IL-10及IL-27的表达.Western blot结果显示,IL-35能够显著抑制卵清蛋白特异性T细胞中JNK、Erk1/2及p38信号途径的激活水平.结论:IL-35能够调控炎症反应中的炎症因子表达和T细胞的反应性,从而减轻变应性鼻炎,其机制可能是通过调控JNK、Erk1/2及p38信号途径的激活水平.
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RSV感染幼龄大鼠肺组织TSLP与Th2反应的相关性分析
目的:通过观察当呼吸道合胞病毒(RSV)感染幼龄大鼠肺组织时胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)与IL-4、IL-10和IL-13的变化,探讨TSLP与Th2反应的相关性.方法:将18只正常Wistar大鼠随机分为模型组和正常对照组,每组各9只.应用RSV病毒液滴鼻造模,生理盐水滴鼻做对照.取大鼠肺部组织进行病理切片观察炎症反应情况;运用实时荧光定量聚合酶链式反应(q-PCR)分别检测两组大鼠不同时间点合胞病毒载量情况和肺组织TSLP在基因水平的表达情况,同时采用免疫印记法(Western blot)检测肺组织TSLP在蛋白水平的表达情况;同时应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中Th2型相关细胞因子IL-4、IL-10和IL-13的表达水平;并对TSLP与L-4、IL-10、IL-13的关系进行Spearman相关分析.结果:与正常对照组相比,模型组大鼠在滴鼻感染后出现精神状态差、毛粗糙、活动减少、呼吸短促等症状,且上述症状进行性加重;病理观察显示模型组大鼠可见肺泡壁明显增厚,肺间质可见大量的浆细胞、淋巴细胞以及嗜酸性粒细胞浸润;q-PCR法检测模型组大鼠合胞病毒载量逐渐增加,在第5天左右达到峰值,后逐渐降低;RSV感染促进大鼠体内TSLP表达水平增加,q-PCR法和Western blot法检测显示:模型组大鼠的TSLP浓度均高于对照组(P<0.05);同时ELISA检测表明模型组大鼠血清中IL-4、IL-10和IL-13的浓度均高于对照组(P<0.05);Spearman相关分析显示RSV模型组大鼠的TSLP与IL-4和IL-10表达水平均呈正相关,TSLP与IL-13表达水平无相关性.结论:RSV感染Wistar大鼠肺组织时,可诱导TSLP表达水平增加,同时促进Th2型炎症反应的发生及相关细胞因子的表达,为进一步研究RSV感染致毛细支气管炎和哮喘等喘息类疾病的作用机制及临床治疗奠定了基础.
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长链非编码H19靶向调节miR-107通过Notch通路对肺癌的侵袭迁移的影响
目的:探讨长链非编码H19靶向调节miR-107通过Notch通路对肺癌的侵袭迁移的影响情况.方法:qPCR检测肺癌和癌旁组织、不同肺癌细胞中H19的表达情况;Transwell侵袭实验检测沉默H19后肺癌细胞侵袭能力的变化;划痕实验检测沉默H19后肺癌细胞迁移能力的变化;双荧光素酶报告基因检测H19与miR-107的相互作用;qPCR检测肺癌和癌旁组织、不同肺癌细胞中miR-107的表达情况;Transwell侵袭实验检测沉默H19后miR-107对肺癌细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测沉默H19后miR-107肺癌细胞迁移能力的影响;裸鼠皮下成瘤检测沉默H19后miR-107对肺癌成瘤大小以及体积的影响.Western blot检测沉默H19后Notch通路蛋白的表达情况.结果:与癌旁组织相比,肺癌组织中H19表达明显增高;肺癌细胞A549中H19表达水平高;沉默H19可以抑制肺癌细胞侵袭和迁移能力;H19能与miR-107的3′UTR特异性结合;与癌旁组织相比,肺癌组织中miR-107表达明显降低;沉默H19后,抑制miR-107可以促进肺癌细胞侵袭和迁移能力;与H19-siRNA组相比,H19-siRNA+miR-107-inhibitor组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显增大.沉默H19后Notch通路蛋白表达情况相应下调.结论:H19在肺癌发生发展过程中起重要作用,H19可以靶向调节miR-107通过Notch信号通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移能力.
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长链非编码CDKN2B调控miR-19对慢性髓细胞白血病的影响
目的:探讨长链非编码CDKN2B调控miR-19的表达影响慢性髓细胞白血病细胞的生物学行为的方式及其机制.方法:qPCR检测不同白血病细胞中CDKN2B的表达情况;双荧光素酶报告基因检测CDKN2B与miR-19的相互作用;MTT增殖实验和流式细胞检测CDKN2B对HL-60细胞增殖和凋亡的影响;划痕愈合实验检测沉默CDKN2B后白血病HL-60细胞迁移能力的变化;Transwell侵袭实验检测沉默CDKN2B后白血病HL-60细胞侵袭能力的变化;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测沉默CDKN2B后miR-19对HL-60细胞迁移和侵袭能力的影响;鬼笔环肽染色检测沉默MEG3后细胞骨架微丝微管形态变化;Western blot检测沉默CDKN2B后PI3K/AKT信号通路蛋白的表达情况.结果:在HL-60细胞中CDKN2B表达水平低;CDKN2B能与miR-19的3′UTR特异性结合;过表达CDKN2B可以抑制HL-60细胞增殖能力,促进其凋亡行为;沉默CDKN2B可以增强白血病HL-60细胞侵袭和迁移能力;过表达CDKN2B后细胞骨架表现为伪足减少,运动能力减弱;肌动蛋白表达水平下调;过表达CDKN2B后PI3K/AKT通路蛋白表达情况相应下调.结论:CDKN2B可以靶向调节miR-19调控白血病细胞生物学行为.
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母-胎免疫调节机制在妊娠高血压综合征病理过程中的作用
目的:分析妊娠高血压综合征(PIH)患者外周血中免疫细胞因子水平变化及滋养层细胞中免疫相关转录因子的基因、蛋白表达情况,探讨母-胎免疫调节机制在妊娠高血压综合征病理过程中的作用.方法:纳入PIH患者50例作为观察组,选择同期分娩的正常妊娠妇女40例作为对照组.ELISA法检测两组孕妇外周血中IFN-γ、IL-4、IL-17及TGF-β水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白质印迹法(Western blot)分别测定两组孕妇胎盘滋养层细胞中转录因子T-bet、GATA-3、RORC、Foxp3的mRNA及蛋白表达情况.结果:①观察组外周血中IFN-γ和IL-17水平明显高于对照组,TGF-β水平明显低于对照组(P<0.05);两组间IL-4水平无明显差异(P>0.05);观察组IFN-γ/IL-4、IL-17/TGF-β比值均明显大于对照组(P<0.05).②与对照组比,观察组T-bet、RORC的mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而GATA-3、Foxp3的mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),T-bet/GATA-3及RORC/Foxp3比值均显著增大(P<0.05).结论:PIH具有明显的Th1/Th2及Th17/Treg比例失衡现象,其病理机制可能与Th细胞介导的母-胎免疫耐受机制功能紊乱有关.
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CD4+T细胞在原发性免疫性血小板减少症中作用机制的研究进展
原发性免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenic purpura,ITP)属于自身免疫性出血无序性疾病,具有器官特异性[1].该病存在血小板减少、血小板生存时间缩短及抗血小板抗体出现、骨髓巨核细胞增多伴成熟障碍等特征.
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中性粒细胞与晚期动脉粥样硬化关系的研究进展
动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种免疫系统参与的慢性炎症性疾病,常累及大中型动脉,是多种心脑血管疾病主要的共同病理基础.炎症反应和活化的免疫细胞被普遍认为是AS的驱动因素,其中单核细胞、巨噬细胞、不同亚型的淋巴细胞等免疫和炎症细胞对AS病理过程的影响已被广泛的研究[1].中性粒细胞虽然是人体固有免疫中重要的高效效应细胞,但是因其寿命短、更新迅速、表型变化、缺乏特异性标记等原因,导致在过去一段时间内中性粒细胞在AS病理过程中的作用机制未被研究者重视[1,2].
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阿司匹林的肿瘤免疫调节作用与机制
阿司匹林(Aspirin),又名乙酰水杨酸(Acetylsalicylic acid,ASA),其分子式以及分子量大小分别为C9H8O4、180,是一种非甾体抗炎药.由德国化学家Felix Hoffmann于1899发明[1],用于解热镇痛抗炎,同时也是一种抗血栓药物,能够抑制血栓素A2(TXA2)的促血小板凝集作用,从而发挥抗血栓功能[2,3].在人体中,阿司匹林发挥的作用与服用它的剂量密切相关.有研究表明,阿司匹林长期使用的低有效剂量为75~150mg/d,此范围内不仅疗效佳且不良反应少[4].
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嵌合抗原受体修饰T细胞在肿瘤免疫治疗中的策略
手术、化疗和放疗是治疗肿瘤的传统方法,但大部分情况下患者都不能获得理想的疗效.近年来,嵌合抗原受体修饰 T 细胞通过基因工程,赋予 T 细胞肿瘤靶向性、更强的杀伤活性和持久的生命力,并取得较好的临床疗效.然而,脱靶效应 、细胞因子风暴等毒性效应却极大地限制了CAR-T细胞技术的应用.本文就提高CAR-T细胞在治疗恶性肿瘤临床疗效方面进行如下综述.
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脾调节动脉粥样硬化的相关机制研究
1 概述 动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种慢性炎症反应,虽然高胆固醇血症是其产生的重要条件,但是AS一旦形成,就与炎症、免疫密切相关.无论是高胆固醇血症、炎症还是感染致使AS的产生过程都是机体免疫反应的过程[1].而脾作为机体重要的免疫器官,长期以来未得到足够的重视,甚至在长达400年的时间里,脾切除术一直在许多疾病中广泛应用.然而,研究发现在AS的经典动物模型ApoE-/-小鼠中,表现出了脾肿大、高滴度的抗核抗体和抗双链DNA抗体[2],而自身抗体滴度的升高及其长期的存在都可造成脏器组织损害[3].
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micro-RNA对树突状细胞生物学功能的影响
微小RNA(microRNA,miRNA)是一种小型、非编码RNA分子,通过作用于目的基因调控相应功能蛋白的表达从而参与各种生理反应.近年来众多文献报道了特异性miRNA在免疫学方面的作用,而树突状细胞(Dendritic cell,DC)作为重要的抗原提呈细胞(Antigen presenting cell,APC),连接着固有免疫应答和适应性免疫应答,在免疫系统中具有重要的作用.本文总结了近年来miRNA和DC的研究进展,综述了miRNA对树突状细胞生物学功能的影响,包括其成熟过程、细胞因子释放、抗原提呈能力等,为抗肿瘤免疫治疗提供新的方向.
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线性B细胞表位预测方法研究进展
在抗原抗体的结合反应中,抗体参与结合的部位称抗体的对位(Paratope),抗原参与结合的部位称抗原的表位(Epitope)[1].表位就是抗原中能被免疫细胞特异性识别的线性片段或空间构象性结构,是引起免疫应答和免疫反应的基本单位.
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脓毒症的免疫学发病机制及对策
脓毒症是感染诱发的全身严重炎症反应.脓毒症是导致危重患者死亡的首要原因,在美国每年脓毒症死亡的人数和急性心肌梗死相同,估计占住院患者病死率的30％[1].脓毒症的病理生理学特点早期主要表现为大量炎症细胞激活和促炎介质释放,随后机体由于炎症介质的耗竭及免疫细胞的凋亡而进入免疫抑制状态[2].目前针对脓毒症的治疗仍以控制感染、液体复苏及生命支持为主,尚缺乏调控炎症反应的有效手段.早人们试图通过抑制炎症因子表达来减轻脓毒症患者的炎症反应,但临床研究发现,单纯的抑制某种炎症介质的表达并不能减轻炎症反应、改善预后[3,4].越来越多的研究提示,脓毒症后期的免疫抑制是导致脓毒症患者病死率居高不下的主要原因[5,6].因此人们尝试以免疫刺激为主的免疫调节方式治疗脓毒症,并取得了一定的疗效[7].通过对免疫调节的可能机制进行回顾,总结并探索脓毒症治疗的新策略.
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检测侵染生姜的烟草花叶病毒ELISA的建立
目的:建立检测侵染生姜的烟草花叶病毒的ELISA方法.方法:用RT-PCR方法检测侵染生姜的烟草花叶病毒,挑选仅含烟草花叶病毒的生姜叶片,采用离心方法提取叶片中的烟草花叶病毒,通过12％ SDS-PAGE 和5％～20％梯度SDS-PAGE二次制备电泳分离出烟草花叶病毒的外壳蛋白CP,将含CP的聚丙烯酰胺凝胶磨细后免疫小鼠,获得抗血清.用Western blot检测抗血清特异性,ELISA检测抗血清的结合性,通过亲和层析纯化抗血清中的IgG.以待测生姜叶片液为抗原包被,纯化的抗血清IgG为一抗,羊抗小鼠 IgG为二抗,建立检测侵染生姜的烟草花叶病毒的间接ELISA.结果:抗血清中的IgG仅仅与烟草花叶病毒的CP结合,并能够结合天然烟草花叶病毒颗粒.建立的ELISA对花叶病生姜叶片的检测结果与RT-PCR检测结果一致.结论:成功地建立了检测侵染生姜的烟草花叶病毒的ELISA方法.
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检测人IL-37双抗夹心ELISA方法的建立
目的:建立定量检测人血清IL-37的双抗夹心ELISA.方法:以鼠抗人IL-37单抗作为捕获抗体,制备的兔抗人IL-37多抗作为检测抗体,HRP标记山羊抗兔IgG为二抗,重组人IL-37蛋白为标准品,建立检测人IL-37的双抗夹心ELISA方法.并对该方法的工作条件进行优化,对其灵敏度、线性范围、重复性和对登革热非结构蛋白NS1阳性患者血清IL-37的检测效果进行评价.结果:重组IL-37蛋白为标准品建立的双抗夹心ELISA法检测灵敏度为1.465 μg/L,线性范围为1.465～46.875 μg/L,批内和批间变异系数分别为6.6％和11.7％.采用此方法对诊断为登革热的患者血清进行检测,结果显示非结构蛋白NS1阳性患者IL-37水平显著高于健康人对照组.结论:成功建立了双抗夹心ELISA检测方法,可用于人血清中IL-37的检测.
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化学发光法与POCT检测降钙素原的方法比较及临床应用
1975年,Moya等[1]应用放射性氨基酸在鸡后腮腺发现降钙素(Calcitonin,CT)的合成来自于分子量为13 000(CT分子量为:3 500)的前体物质(降钙素原),鼠研究中发现CT位于PCT(Procalcitonin)编码序列的60～91,且PCT两侧有N端和羧端[2],人类PCT作为一种无激素活性的糖蛋白由11号染色体降钙素Ⅰ基因(CALC-Ⅰ)编码(1～57为N残端,60～91为降钙素,96～116为降钙蛋白),通过选择性剪接(编码1～4外显子)生成mRNA,转录后在甲状腺滤泡旁细胞粗面内质网翻译成降钙素原前体,继而在高尔基复合体及分泌囊中经一系列水解酶作用裂解形成[3,4],其在人体内的半衰期约20～24 h,稳定性好,人血清PCT含量极低,约2.5 pg/ml(运用高效液相色谱分析),在一些非甲状腺损伤如由细菌感染引起的全身炎症反应、败血症或脓毒性休克、慢性肾衰竭等患者血清PCT及其组分均显著升高.
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以乙肝病毒核心蛋白为载体制备肠道病毒71型非结构蛋白3D单克隆抗体
目的:预测肠道病毒71型(EV71)非结构蛋白3D的表位,以HBc蛋白为载体展示多肽,制备并鉴定抗EV71-3D的特异性单克隆抗体(mAb).方法:应用生物信息学方法分析预测出EV71 3D蛋白亲水性和免疫原性指数较高的多肽片段,并运用HBc颗粒型蛋白载体展示肽段,构建多肽融合蛋白,免疫BALB/c雌鼠,通过杂交瘤技术和亲和层析技术制备和纯化抗EV71-3D蛋白的特异性mAb,用间接ELISA、ELISPOT、IFA和IHC对mAb的性质进行初步鉴定.结果:构建表达分别嵌合3D蛋白34～43位氨基酸残基、 61～76位氨基酸残基、151～164位氨基酸残基的HBc重组蛋白,免疫并经过多轮克隆化筛选,获得抗EV71-3D单克隆抗体3E1,其亚类为IgG2a;免疫荧光试验、ELISPOT法和免疫组织化学染色结果显示其可与EV71特异性结合.结论:成功制备可特异性识别EV71的单克隆抗体3E1,为病毒的检测及进一步研究3D蛋白的功能奠定了基础,同时还验证了生物信息学技术与HBc颗粒型载体展示多肽技术相结合可快速高效地制备单克隆抗体.
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基于载体减毒单增李斯特菌的弧菌疫苗菌株构建
目的:利用减毒单增李斯特菌作为疫苗载体的优势,拟构建基于载体减毒单增李斯特菌的弧菌疫苗菌株.方法:使用单增李斯特菌表达载体pERL3过表达弧菌中共同的靶标抗原Ompk;利用PCR和RT-PCR技术分别对过表达菌株鉴定和抗原基因的检测.结果:PCR结果显示成功构建3株Ompk过表达菌株Lm-Ompk(L-O)、Lm-Lmo0576-Ompk(L-L-O)和Lm-P-Ompk(L-P-O);测序结果显示过表达菌株中外源基因的序列与NCBI 结果相似性为100％;RT-PCR结果显示Ompk基因在3株过表达菌株中的转录水平均极为显著(P<0.001);在抗生素条件下,Ompk基因在各过表达菌株中的表达水平显著高于在非抗性条件下的转录水平(P<0.05).结论:成功构建了3株基于载体减毒单增李斯特菌的弧菌疫苗菌株,弧菌中共同的靶标抗原Ompk在3株重组菌株中均可以稳定表达.
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抗TSLP全人源单链抗体的体外亲和力成熟
目的:对抗TSLP-scFv全人源单链抗体进行单点突变,以提高其亲和力.方法:本研究前期筛选了特异性好的抗TSLP-scFv,本研究利用Discovery Studio系统模拟TSLP和抗TSLP-scFv 三维结构,进行分子对接,对结合表位氨基酸进行随机突变,选取可显著提高其亲和力的氨基酸突变点,根据突变位点设计引物,采用重叠延伸PCR对氨基酸位点进行突变.将突变后的scFv基因与表达载体pLZ16连接,转化E.coli DH5αF′,表达后筛选亲和力提高的抗TSLP-scFv.结果:DS系统筛选出可以提高scFv亲和力的5个单点突变氨基酸位点,PCR扩增出突变后的抗TSLP-scFv DNA片段大小为1 000 bp左右.将测序正确的菌株进行表达,通过ELISA筛选出与抗原结合力提升的抗TSLP-scFv;通过生物大分子相互作用技术,测定单抗的亲和力,突变后的scFv M4亲和力较突变前提高了10倍左右.结论:成功提升了抗TSLP-scFv全人源单链抗体的亲和力.
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特异性干扰survivin基因表达对人舌癌Tca8113细胞体外增殖和侵袭性的影响
目的:探讨应用RNAi技术特异性沉默survivin基因表达对人舌癌细胞Tca8113增殖、凋亡、迁移的影响,阐明survivin在Tca8113细胞生物学行为中的作用.方法:取对数生长期的Tca8113细胞,分为干扰组、阴性对照组及空白对照组.采用RT-PCR和Western blot方法检测Tca8113细胞中survivin基因的mRNA及蛋白的表达水平;MTT法检测细胞的增殖状况;流式细胞术检测各组Tca8113细胞凋亡率;划痕实验检测Tca8113细胞的迁移状况.结果:RT-PCR 显示舌癌Tca8113细胞中survivin 的mRNA表达水平明显低于空白对照组 (P<0.05),Western blot 蛋白免疫印迹结果显示,与空白对照组比较,survivin蛋白表达水平减少(P<0.05).survivin干扰组Tca8113细胞的增殖能力降低(P<0.05);细胞划痕实验发现转染Tca8113细胞48 h 后干扰组细胞的迁移距离明显短于空白对照组(P<0.05).结论:特异性沉默siRNA-survivin的表达可有效抑制舌癌Tca8113细胞的体外迁移能力,可能与survivin表达减少有关,有望成为口腔舌癌生物治疗的潜在靶点.
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二甲双胍对U937细胞增殖、周期及凋亡的影响
目的:探究二甲双胍(metformin)对U937细胞增殖、周期及凋亡的影响.方法:以U937细胞为研究对象,予不同浓度的二甲双胍处理,分别在24、48和72 h收集细胞.CCK-8法检测细胞增殖情况,流式检测细胞凋亡及细胞周期,并使用Western blot方法检测促凋亡蛋白Bax、抑凋亡蛋白Bcl-2、p-AMPK、p53的表达情况.结果:CCK8结果显示二甲双胍抑制U937的增殖,且呈时间-剂量依赖性.流式结果显示二甲双胍处理后细胞周期停滞在G0/G1期,G0/G1期细胞比例的增加呈时间-剂量依赖性.二甲双胍可诱导细胞凋亡,且凋亡率呈剂量依赖性;二甲双胍浓度为20 mmol/L时,凋亡率呈时间依赖性.Western blot结果显示二甲双胍处理后,p-AMPK、p53、Bax的表达上调,而Bcl-2的表达下调.结论:二甲双胍能抑制U937细胞的增殖,阻滞细胞周期在G0/G1期,诱导细胞凋亡;其机制可能与其上调胞内促凋亡蛋白Bax的表达、下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达、激活AMPK/p53通路有关.
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脂质体包埋脑源性神经营养因子靶向透过血脑屏障
目的:对脂质体包埋脑源性神经营养因子进行一定的修饰,观察其透过血脑屏障的组织分布特点.方法:选取西安外事学院医学院进行实验的SD大鼠32只作为研究对象,随机数字法分为脂质体组(n=16)和对照组(n=16).建立AD大鼠模型,对照组大鼠不给予任何处理,脂质体组经大鼠尾静脉注射10 μg/kg Tf-pGFAP-BDNF-PEG,分析脂质体包埋脑源性神经营养因子靶向脂质体透过血脑屏障的组织分布特点.结果:采用24mCi99mTC标记1 ml神经生长因子,取20 μl上柱分离后采集40～50管收集液,每管0.5 ml,测定放射性技术.将峰所在的8～17管收集液混合回收,结果显示神经营养因子标记率为98.9％.脂质体组第10、14天脑源性神经营养因子免疫阳性表达细胞数,显著高于对照组(P<0.05);脂质体组大鼠脑组织中神经营养因子的基因表达第14天时,显著高于对照组(P<0.05);脂质体组大鼠存在神经营养因子表达,并且神经营养因子表达水平显著高于对照组(P<0.05).肉眼观察所采脑脊液清亮、无色、透明,且显微镜下未检出红细胞.脂质体组大鼠脑脊液便隐血胶体金检测结果显示阴性,对照组为阳性.结论:转铁蛋白联合聚乙二醇修饰的脂质体合并连接脑特异性启动子,能提高脂质体靶向性.
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黄芩素和U0126体外协同抗人膀胱癌细胞的作用及机制研究
目的:探讨黄芩素和U0126体外协同抗人膀胱癌T-24细胞的作用及机制研究.方法:用黄芩素、U0126及二者联合处理T-24细胞,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡;显微镜下计数细胞数量变化;TUNEL法检测细胞凋亡指数;实时定量PCR和Western blot分别检测T-24 细胞胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2) 、CyclinD1、GSK-3β和AKT RNA水平、蛋白水平,分析黄芩素与U0126对膀胱癌细胞凋亡和增殖的影响.结果:T-24细胞经不同浓度黄芩素处理后, 细胞凋亡率显著增加;T-24细胞经黄芩素处理24 h,G0/G1 期细胞比例明显增多,S 期细胞比例明显下降,细胞数减少,采用黄芩素联合U0126 处理T-24细胞24 h,S 期细胞比例显著降低;黄芩素或U0126单独处理T-24细胞引起明显细胞凋亡,二者联合处理凋亡更明显;利用两种药物单独或联合作用T-24细胞24 h,GSK-3β、ERK1/2、AKT磷酸化水平显著降低, ERK1/2、CyclinD1的 mRNA表达减少,联合处理作用更显著.结论:黄芩素和U0126 均可诱导T-24细胞凋亡,增加G0/G1 期细胞比例,降低S 期细胞比例,联合应用效果更明显.
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苦味类中药成份藉苦味受体途径对气道炎症过程的遏制效应
目的:探讨苦味受体(Bitter taste receptor,TAS2Rs)在苦味类中药组份治疗慢性气道炎症中的抗炎效应.方法:实验分为三组(n=8),即空白对照组、PM2.5组(雾化吸入PM2.5悬液复制大鼠慢性气道炎症模型)和PM2.5+柠檬苦素组(陈皮提取物干预),分别以ELISA、RT-PCR和Westem blot检测各组大鼠支气管/肺组织炎症因子及TAS2Rs mRNA和蛋白表达水平.结果:PM2.5刺激组炎症因子TNF-α和IL-13的mRNA和蛋白表达水平较对照组明显增高,TAS2R14的mRNA和蛋白表达变化不明显;柠檬苦素干预组炎症因子TNF-α和IL-13的mRNA和蛋白表达水平较PM2.5组降低,TAS2R14的mRNA和蛋白表达水平则明显增高.结论:苦味类中药组份吸入治疗可遏制慢性炎性气道的炎症因子产生及释放,并刺激肺部TAS2Rs的表达增加,故认为苦味类中药组份激活气道TAS2Rs可能是其发挥抗炎效应的重要机制.
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miR-218调控SNX4蛋白对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响
目的:探讨miR-218调控SNX4蛋白对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:qPCR检测乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中miR-218的表达情况;分析miR-218的表达和乳腺癌临床病理参数之间的关系;双荧光素酶实验检测miR-218和SNX4之间的关系;过表达miR-218后MTT实验和侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖和侵袭能力变化;过表达SNX4后MTT实验和侵袭实验检测SNX4对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的恢复水平;裸鼠体外成瘤实验检测miR-218对乳腺癌细胞株成瘤能力的影响.结果:miR-218在乳腺癌组织和MCF-7细胞株中表达水平较高,miR-218的表达与乳腺癌的病理分期相关以及淋巴结转移情况有关, SNX4可能是miR-218下游的作用靶点;过表达miR-21可以抑制乳腺癌细胞的增殖侵袭能力,过表达SNX4后可以逆转miR-218对乳腺癌细胞的抑制作用,过表达miR-218后可以抑制乳腺癌细胞株在裸鼠体内的成瘤能力.结论:miR-218在乳腺癌中表达上调,同时miR-218可以调控SNX4的表达而影响乳腺癌细胞增殖和侵袭能力.
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NUP88基因变化对乳腺癌细胞系BT-20增殖侵袭生物学行为的影响
目的:探讨NUP88基因表达量升高或降低对乳腺癌细胞系BT-20细胞增殖能力、凋亡能力与侵袭能力的影响.方法:构建NUP88重组腺病毒表达载体以及NUP88 RNA干扰腺病毒载体,分别转染乳腺癌BT-20细胞获得NUP88过表达BT-20细胞以及NUP88低表达BT-20细胞并检测NUP88 mRNA和蛋白表达情况,随后通过CCK-8检测各组BT-20细胞增殖能力,通过流式双染检测各组BT-20细胞凋亡情况及通过Transwell侵袭实验检测各组BT-20细胞侵袭能力,并通过Western blot检测凋亡和侵袭相关蛋白表达变化.结果:成功获得NUP88 mRNA及蛋白高表达和低表达BT-20细胞;NUP88基因过表达导致细胞增殖能力和侵袭细胞数量显著高于正常BT-20细胞水平,而凋亡率则降低(P<0.05);NUP88基因低表达导致细胞增殖能力和侵袭细胞数量显著低于正常BT-20细胞水平,而凋亡率则升高(P<0.05);NUP88基因过表达导致抗凋亡蛋白Bcl-2和黏附蛋白β-catenin水平显著高于正常BT-20细胞水平,而促凋亡蛋白Bax和黏附蛋白E-cadherin显著低于正常BT-20细胞水平(P<0.05);NUP88基因低表达导致Bcl-2和β-catenin水平显著低于正常BT-20细胞水平,而Bax和E-cadherin显著高于正常BT-20细胞水平(P<0.05).结论:NUP88基因通过调控凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2和黏附蛋白E-cadherin与β-catenin水平调控BT-20细胞的增殖、凋亡和侵袭能力.
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大班制翻转课堂在医学免疫学教学中的探索和实践
医学免疫学是一门医学基础课程,与基础医学及临床医学各个学科的关系极为密切,学生对医学免疫学课程的学习,将为其他医学课程的学习以及从事与疾病诊断和防治有关的工作奠定坚实的基础[1].这门课程概念较多、内涵丰富抽象、理论性和系统性强,很多学生感觉难以理解和掌握,无法形成一个整体的认识.如何使学生系统掌握免疫学基础理论和实验技能是教学中面临的主要问题[2].
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OSBCM与TBL相结合的教学模式在《医学免疫学》教学中的探索与实践
传统的医学教育沿用"以学科为中心"(Discipline-based curriculum model,DBCM)与"以授课为基础的学习"(Lecture-based learing,LBL)相结合的教学模式,易于教学与管理工作的实施,教师是教学的主体,主导整个教学过程,不利于学生的学习主动性和创新能力培养."以器官系统为中心"(Organ-system-based curriculum model,OSBCM)与"以团队为基础的学习"(Team based learning,TBL)相结合的新型教学模式可作为一种行之有效的教学改革方案.通过器官系统教学模式将基础与临床医学教学进行全面整合贯通,解决了理论知识和临床实践脱节的问题[1],而TBL是以团队协作为基础,兼顾学生为中心和教师为引导的教学模式,更利于培养高素质的医学人才[2].为提高医学生综合素质,也为建立OSBCM与TBL相结合的医学免疫学教学模式提供实践依据,在此以问卷调查和理论考核方式,评价其在医学免疫学理论教学中的应用效果.
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多学科甲胎蛋白异质体临床应用专家共识
甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)是目前临床应用广泛的肝癌辅助诊断血清标志物.AFP诊断肝癌的敏感性约为60％～70％.但在肝脏良性疾病,特别是肝癌高危人群,如慢性肝炎、肝硬化中也有部分患者会出现AFP升高.妇女孕期及某些生殖系统疾病AFP也会升高[1].
关键词：
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
