抗白念珠菌人鼠嵌合抗体真核表达载体的构建与表达
摘要： 目的 构建抗白念珠菌人鼠嵌合抗体的真核表达载体,并实现真核表达.方法 从含有单克隆天然抗白念珠菌抗体384可变区基因的载体pMDT-V2H和pUC-VL中PCR克隆单抗384的可变区VH和VL基因,依次插入含有人免疫球蛋白к轻链恒定区基因和γ1重链恒定区基因的真核表达载体pMH-CA.经DNA序列测定正确后,电穿孔转染J558L细胞进行嵌合抗体表达,RT-PCR,ELISA方法对抗体表达进行鉴定.结果 成功构建了抗白念珠菌人鼠嵌合抗体,转染真核细胞后RT-PCR显示人鼠嵌合抗体重链和轻链mRNA的转录,ELISA证实了抗白念珠菌人鼠嵌合抗体的表达以及对白念珠菌的识别.结论 成功构建抗白念珠菌人鼠嵌合抗体的真核表达载体,并表达出具有结合活性的基因工程抗体.
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紫色毛癣菌致老年人黑点癣1例
1 临床资料患者女,76岁.6个月前出现头皮瘙痒,脱发,于外院诊断为"毛囊炎,头癣",予伊曲康唑100 mg/次,2次/d,维胺酯50mg/次治疗.5个月前患者自行停药后使用中药及外搽复方酮康唑软膏,2次/d治疗.4个月前患者头皮出现脓点并逐渐增多,遂就诊于本科.头发真菌镜检见发内孢子.患者既往体健,否认宠物接触史,否认头癣患者接触史,发病前曾在理发店理发;无高血压、糖尿病等;家族史无特殊.体检:一般情况可.心、肺、腹无异常.皮肤科情况:头皮大量黄色痂,头发在发根处折断,可见残留黑点(图1a).实验室检查:肝肾功能及空腹血糖正常.真菌检查:病发10％ KOH涂片镜检可见发内孢子(图2).真菌培养:头发接种于沙保弱培养基25℃培养1个月未见菌落生长.直接提取病发DNA及菌种鉴定:采用ITS1及ITS4真菌通用引物对病发DNA进行PCR扩增,并将产物进行纯化及测序(上海美吉生物医药科技有限公司),所得序列在GenBank中进行Blast比对,与紫色毛癣菌的同源性达99％.菌种鉴定为紫色毛癣菌.GenBank序列号为JQ699101.
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泛发性毛囊角化病1例
1 临床资料患者男,25岁,未婚.面、颈、四肢躯干部毛囊性丘疹10年.10年前无明显诱因患者前额部、鼻翼两侧、颈部出现弥漫性针尖大小坚实的毛囊性丘疹,表面覆有褐色油腻性痂皮,无自觉不适,夏重冬轻,未予以重视.后皮损范围逐渐扩大,波及胸背部、四肢等部位,且皮疹逐渐增大成疣状,以油脂分泌旺盛和摩擦部位为重.患者既往体健,否认高血压、心脏病、糖尿病病史,无智障、癫痫史,否认家族中有类似疾病者.体检:心、肺、腹、神经系统等检查均无异常.皮肤科情况:前额、鼻翼两侧、颈部可见群集分布的针头至米粒大小的棕褐色毛囊性小丘疹,表面覆以褐色油腻性痂皮(图1);手背及前臂可见多发粟粒大小褐色丘疹(图2);胸部、小腿可见弥漫性红棕色小丘疹(图3～4).
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阿维A治疗头皮鳞状细胞癌1例
1 临床资料患者女,62岁,毛发脱落40余年,头皮多发性溃殇、斑块2年.患者40余年前因眉毛、头发脱落,躯干、四肢散在红斑、丘磨,皮肤浅感觉丧失,周围神经粗大,皮损涂片抗酸染色阳性,诊断为瘤型麻风.后经过抗麻风治疗,病情得到控制,查菌阴性.但头顶部毛发逐渐完全脱落.5 年前头顶部出现多处红色或皮色、质硬的角化性丘摩,未积极治疗.
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小汗腺汗孔瘤1例
1 临床资料患者男,61岁.右肩部淡红色斑丘磨3年,渐增大.患者3 年前右肩部元明显诱因突然出现粉红色米粒大丘莎,无自觉症状,未予重视.后来皮痊渐增大,表面呈分叶状,无出血.病程中无其他不适.患者既往史、个人史和家族史无特殊.体检:系统检查未见异常.
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软纤维瘤样浅表脂肪瘤样痣1例
1 临床资料患者男,43岁.左侧臀部无痛性肿物缓慢增大10余年.患者10余年前发现左侧臀部球形肿物,开始约为绿豆大小,不伴瘙痒、疼痛,否认特殊诱因.皮损缓慢增大,从未破溃出血,患者亦未行诊治.发病以来饮食、睡眠、二便可,体重无明显变化.患者否认家族中类似病史,否认手术外伤史.体检:一般情况好,各系统检查未见异常.皮肤科情况:左侧臀部可见一直径约2cm类球形赘生物,有蒂,与皮下不相连,肤色,质软,表面有皱褶呈脑回状(图1).
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儿童水疱型毛母质瘤1例
1 临床资料患者男,9岁,右上臂屈侧红色囊性肿物3个月.3个月前,患者无明显诱因右上臂屈侧出现一粟粒大小红色丘疹,无明显自觉症状,未予重视,后缓慢增大,顶部逐渐出现囊性肿物,似水疱样外观,偶伴压痛.患者既往体健,该部位发病前无局部外伤史、感染史及家族遗传史.体检:一般情况可,全身浅表淋巴结未扪及,系统检查未见明显异常.
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播散性带状疱疹伴左上肢运动神经性麻痹1例
1临床资料患者女,74岁,左上肢无力28天,伴全身多部位疱疹及刺痛22天.患者28天前无明显诱因突然出现左上肢活动无力,伴持续性胀痛,无明显缓解因素,于本院心血管内科及骨科就诊,行相关检查后均未见明显异常.22天前,左上肢开始出现水疱,伴瘙痒及刺痛,水疱范围扩散至左侧脸颊部、胸背部及双侧大腿等处,且刺痛、烧灼感明显,遂于本院疼痛科就诊.
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手指单发角化棘皮瘤1例
1临床资料患者女,52岁.左手无名指黄豆大小肉色结节1年.1年前,患者左手无明显诱因出现一粟粒大小肉色结节,无明显不适,未予重视,后结节逐渐增大,偶有瘙痒,余无不适.体检:系统检查均未见明显异常.患者否认局部外伤史,既往史及家族史无特殊.
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皮脂腺痣合并毛母细胞瘤1例
1 临床资料患者女,25岁,头顶部斑块、结节25年.患者出生后头皮即可见黄色斑块,随着身体发育而逐渐长大,无明显的自觉症状,1个月前发现原有斑块上新发一约黄豆大黑色结节,无自觉症状,遂来本院门诊就诊.患者既往体健.家族中无类似疾病,体检:系统检查未见明显异常.皮肤科情况:头顶部可见片状淡黄色、形状不规则的斑块,境界清楚,表面粗糙,无毛发生长,斑块上可见一约0.5cm×0.5cm×0.2cm的黑褐色皮下结节,颜色不均,境界清楚,无压痛(图1).
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手术联合特比萘芬治疗着色芽生菌病1例
1临床资料患者男,48岁.右大腿外伤后斑块3年.3年前患者右侧大腿前侧中部不慎被异物刺伤,创面愈合不良,逐渐形成疣状斑块,自行反复外用药物治疗(具体用药不详),斑块渐进性增大,伴轻微疼痛及瘙痒.患者既往体健.查体:系统检查结果无明显异常.皮肤科情况:右大腿前侧中部一处直径约10cm×6cm大小的不规则浸润性斑块,境界清楚,暗红色,中央疣状隆起,部分破溃结痂,无渗血渗液及流脓,挤压无分泌物流出(图1).
