血液保存液枸橼酸盐检测标准品稳定性的探讨

枸橼酸和枸橼酸钠作为血液保存液的主要成分已被广泛应用.其中枸橼酸盐的含量是保存液的关键影响因素之一,不同的血液保存液中的枸橼酸盐的含量各不相同,枸橼酸盐的含量通过公式[(被测溶液OD值/标准品OD值)×标准品中枸橼酸盐含量]得出.因此,标准品是否稳定(OD值)直接影响被测溶液中枸橼酸盐的含量.为保证被测样品含量正确,笔者对保存条件(浓度、温度、时间)进行了观察,现报告如下.1 材料与方法1.1 材料砒啶(AR,苏州第二化工研究所,批号910729);乙酸酐(AR,上海试剂一厂,批号981101);31℃电热恒温水温箱(上海跃进医疗器械厂);7230分光光度计(上海分析仪器厂).

金标试纸血清法与全血法筛选献血者HBsAg比较

随着非固定采血点无偿献血的开展,金标法试纸筛选HBsAg已经在许多血站得到广泛的应用,但由于试纸种类的不同及操作方法所限,存在一定的漏检,笔者采用金标法与ELISA 法的对比试验,对不同种类试纸进行对比研究并对漏检原因进行了初步探讨.1 材料与方法

二次离心辅助判断Polybrene法交叉配血试验结果

凝聚胺(Polybrene)技术敏感性高、操作简便、快速[1,2],各地血库已广泛采用Polybrene法进行交叉配血.但经典 Polybrene法交叉配血试验假凝集率较高, 笔者按经典Polybrene法交叉配血试验操作后进行二次离心判断试验结果,假凝集率明显降低. 1 材料与方法

用微柱凝胶试验进行交叉配血

近年来,微柱凝胶试验(NGT)在国外输血领域已逐渐作为常规应用[1～7].自1999 年4月,笔者对本院部分需大量输血、反复输血或标本不易抽取的患者采用MGT"LISS/Coombs"(DiaMed -ID)进行配血,共计6838人次,对部分微柱凝胶试验阳性的标本用试管间接抗球蛋白法重复试验对照比较,现报告如下.1 材料与方法

柱层析吸附法去除人血白蛋白的热原

人血白蛋的热原污染一再困挠着生产厂家[1],热原泛指起临床发热反应的生物活性物质,主要是细菌内毒素,其去除方法较多[2,3],对于蛋白制品的热原,较为成功的方法为吸附法.对于不同来源内毒素,不同吸附方法所能起到的作用亦不相同,笔者采用离子交换吸附凝胶去除人血白蛋白中的内毒素[4,5],报告如下.

利用血液回收机术中自体输血

为了节约血源,减少输血并发症,笔者对大手术中出血>500ml(不含心脏体外循环)的患者使用血液回收机施行自体输血,报告如下.1 材料与方法1.1 临床资料 1999年11月～2000年6月入本院手术患者24名.男性21例,女性3例.年龄21～7

血细胞计数仪用于机采浓缩血小板计数

随着成分输血的逐步推广,机采浓缩血小板的应用越来越多.机采浓缩血小板在临床上的止血效果与输注的血小板数量直接相关.而机采浓缩血小板产品的浓度较大,可达4×10 12/L,远远超出血细胞计数仪的检测范围,不能直接用血细胞计数仪进行检测,用人工计数误差又大,如何准确地检测机采浓缩血小板产品中血小板的浓度已成为质量控制中的难点.笔者就如何应用血细胞计数仪对机采浓缩血小板产品进行计数的方法作如下探讨.

白细胞清除术加用联合化疗治疗高白细胞急性白血病

高白细胞急性白血病(HLAL)通常是指外周血白细胞＞100ⅹ109/L的急性白血病.由于

抗-Jkb引起急性输血反应的部分生化指标分析

抗-Jkb引起的输血反应在临床上笔者少见,而且常表现为迟发性的输血反应[1～3 ]. 笔者对1例抗-Jkb引起急性溶血性输血反应前后乳酸脱氢酶(LDH)和γ-羟丁酸(HBDH)增高及部分生化指标变化进行了观察和分析,具有一定的临床意义.

附子理中汤配合人血白蛋白输注治疗肝硬化腹水

自1990年以来，笔者采取口服中药附子理中汤配合静脉输注人血白蛋白治疗肝硬化腹水患者20名，取得较好疗效，报告如下。

bFGF改善脐血CD34+细胞移植效率的实验研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)改善脐血CD34+细胞植入经大剂量化疗预处理的成人骨髓基质细胞(hBMSC)的能力(移植效率)及其作用机制.方法采用h BMSC体外长期培养,光镜和电镜及流式细胞术等技术,观察5-氟尿嘧啶(5-FU)对hBMSC的损伤及损伤后加入bFGF对hBMSC动力学的影响,以及bFGF改善脐血CD34+细胞对受损hBMSC的粘附能力.结果 5-FU作用hBMSC 3h后,细胞形态及DNA周期时相发生显著改变,电镜表现为细胞核裂解,伪足形态改变,流式细胞仪显示基质细胞G0/ G1期前出现明显的亚二倍体峰,G0/G1期和G2/M期显著低于正常对照组(P＜0.05),而S期则明显高于正常对照组.(P＜0.05) 植入脐血CD34+细胞2h后,加入bFGF的干预组与损伤组比,脐血CD34+细胞在基质细胞粘附层的比例有明显提高,分别为12%和29%,但仍未达到正常对照组的比例(36% ).结论 5-FU 可使体外培养的hBMSC 形态和DNA合成受损;bFGF在短期内具有对受损hBMSC的修复和明显改善人脐血CD34+细胞与hBMSC粘附能力的作用.

徐州汉族人ABO血型及HAB分泌型基因分型研究

目的研究徐州汉族人群ABO血型及HAB分泌型基因多态性分布特征并用于解决临床输血中血型血清学鉴定难题.方法用快速盐析法提取外周血标本中的DNA,用P CR-SSP扩增ABO 血型、HAB分泌型等位基因.结果 104名健康、无血源关系的徐州汉族人A BO血型基因频率分别为A1:0.1538,A2:0.0962,B:0.2452,O1:0.5048,O2:未检测到 (χ2=6.7323,P>0.25 ,符合Hardy-Weinberg公式);HAB分泌型基因频率分别为分泌基因Se:0.9808,非分泌基因se:0.0192(χ2=0.0421,P>0.75,符合Hardy-Weinberg公式).1份用血清学方法不能确定ABO血型的标本,用基因分型定为BO1型.结论 PCR-SSP是一种方便、可靠的血型基因定型技术,与血型血清学方法相比本文非分泌基因se 的频率显著偏低,4例血清学定为非分泌型个体用该方法鉴定基因型为Se/Se,间接提示G44 7A和G757A突变不能完全覆盖我国汉族人群的非分泌基因se.

国内静注丙种球蛋白 Fc 段生物学功能研究

目的建立静注丙种球蛋白(IVIG)制品Fc段生物学活性检测方法,了解国内不同生产工艺生产的IVIG制品Fc段生物学功能及IVIG制品的二级结构.[ HTH〗方法采用激活补体方法、抑制抗体依赖细胞介导细胞毒方法(ADCC)检测国内7种工艺生产的IVIG制品,用圆二色谱和傅里叶变换红外光谱法检测IVIG制品的二级结构.结果在制品激活补体和抑制ADCC的活性方面,低pH 制品平均高于中性IVIG制品,差异有极显著意义(P＜0.01);低pH孵放与低pH孵放加纳米膜过滤制品差异无显著意义(P＞0.05).结论低pH IVIG制品在保持IVIG Fc段生物学活性方面可能比中性IVIG制品有更好的稳定性;低pH孵放法与低pH孵放加纳米膜过滤双重灭活/去除病毒方法相比对IVIG制品的活性无影响;在低pH孵放法病毒灭活工艺中,是否加入稳定剂对IVIG制品的活性无影响 ;有稳定剂条件下巴氏消毒加低pH孵放双重病毒灭活方法对IVIG制品的生物学活性无影响;无稳定剂条件下进行巴氏消毒加低pH孵放双重法灭活病毒的某厂家生产的IVIG制品几乎没有Fc段生物学活性,圆二色谱和傅里叶变换红外光谱测定表明其制品的二级结构发生改变.

血液病毒标志物两次检测模式的探讨

目的探讨血液两次检测的意义和作用.方法调查统计部分采供血机构1999年7 ～12月常规血液检测的结果,并追踪随访两次检测结果不一致的献血者,采集其半年后的标本复检, 对可疑标本用NAT作进一步的检测.结果总两次检测不一致率为0.63%, 绝大部分两次检测结果不一致的标本为假阳性.结论目前通过两次检测不能显著提高血液质量.应通过提高试剂总体质量和实施NAT检测来进一步显著提高输血安全.

海南省中心辐射型采供血网络的建立与实践

海南省是我国小的省份,1989年组建的省血液中心(以下简称中心)是全省唯一的采供血机构及自收自支的公益性事业单位.结合海南省情 ,于1996年6月建立的"中心辐射型采供血网络”,经过几年实践,使中心从小到大、迅速发展,较好地完成了全省的采供血任务.现将该网络及其运作情况介绍并就教于同仁.1 问题的缘起

血站的全面质量管理及意义的探讨

血液的检测、采集、加工、贴签和运输等过程应严格执行GMP要求和规定,把IS09000等标准作为现代管理理论,树立血站行业产品生产中的全面质量管理观念,进一步防范临床输血风险. 1 与血站管理有关的GMP和ISO9000标准族 GMP和ISO9000系列基于的思想完全相同:即全面质量管理思想、不断改进的思想.两者虽有区别,但相互之间更多的则是表现为内容上的互补性和终极目标上的一致性[1].血站行业借鉴GMP,以TQM为方向,开展ISO9000认证,将从根本上提高本行业质量管理和保证水平.

罕见的Lewis血型系统抗体1例

献血者,男,37岁.血型初步定为"AB”型,复查时,反定型Ac、Bc、Oc均凝集.经 进一步检查,献血者DAT阴性,血清中有两种抗体存在,一种是Lewis血型系统同种抗-Le a,另一种抗体可被Le(a-b+)和Le(a+b-)细胞吸收并放散而不被Le(a -b-)细胞及自身细 胞吸收,所针对的抗原决定簇既存在于Le(a+)细胞上也存在于Le(b+)细胞上, 而不存在于L e(a-b-)细胞上,笔者认为这后一种抗体为一罕见的Lewis血型系统抗体,现报告如下.

全血置换辅助救治重度有机磷中毒

患者，女，21岁。因口服有机磷农药约2h后送我院急诊科救治。入院时患者流涎，抽搐，瞳孔缩小，呼吸困难，双肺均可闻及水泡音，

浙江畲族Kidd 、Duffy血型基因型的调查

Kidd、Duffy血型系统是比较重要的血型系统之一,可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应 等,其抗原的分布具有种族多态性[1].笔者用基因分型方法对浙江畲族人群的 Kidd、Duffy血型的基因型进行了调查,现报道如下.1 材料与方法1.1 检测对象共90例,男40例,女50例,年龄26～83 岁,皆为3代无血缘关系的健康的浙江省景宁畲族自治县境内的畲族人.

辽南地区39名RhD(-)汉族无关供血者中RH基因检测

笔者采用PCR-SSP和血清学方法,对比分析辽南地区汉族人中Rh血型的基因构成.1 材料与方法1.1 血标本来源随机选取39名本血液中心注册且祖居辽南地区的RhD(-)汉族献血者血样.

浙江汉族Kidd血型基因分型

?Kidd血型的鉴定多采用间接抗人球蛋白试验,且抗血清价格不菲.1994年,Oliv es等[1,2]克隆了编码尿素转移因子的HUT11 cDNA,并证实此即为编码Kidd血型系统抗原的Jk 基因.Jk基因位于18q12～21,Jka和Jkb在基因水平为G838A 变异,在蛋白质水平为Asp28 0Asn变异.笔者根据这一多态性,应用基因分型方法对浙江汉族Kidd血型基因频率进行了调查,现报道如下.1 材料与方法

部分地区献血人群HBsAg、抗-HCV、抗-HGV、抗-HIV、ALT、梅毒抗体检测结果综合报道

人乙型肝炎免疫球蛋白原料血浆抗-HBs水平的检测

人乙型肝炎免疫球蛋白是用于阻断乙型肝炎传播的重要血液制品,与乙型肝炎疫苗联合使用能阻断乙型肝炎的母婴垂直传播,这已得到国内外预防医学界的共识[1].为了顺应血液制品市场的发展,积极开发新产品,笔者开展了献浆者乙型肝炎疫苗强化免疫及高效价抗-HBs 血浆收集与检测工作,报告如下.1 材料与方法

HLA与慢性粒细胞白血病相关性调查

HLA抗原是重要的遗传标志, 自20世纪60年代HLA与疾病相关性研究以来,涉及疾病已达数百种.有关白血病与HLA关联的报道较少,且多为欧美人群的调查:急性髓性白血病及慢性粒细胞白血病患者A19频率明显下降[1];儿童白血病的长期存活与HLA-DR5相关[2]; 慢性淋巴细胞性白血病与Cw6强相关[3];在慢性粒细胞白血病(CML)患者HLA-B5和B 17[4]

低pH孵放对静注免疫球蛋白纯度的改善

众所周知静注免疫球蛋白(IVIG)制品的纯度是该制品的一项重要质量指标,采用低温乙醇法分离所得到的IVIG半成品IgG含量一般在97%～98%,通过低pH孵放灭活病毒 [1,2] 过程后,可使IVIG中杂蛋白(主要是白蛋白)部分降解,从而使制品纯度提高约1%～2%. 在 IVIG半成品中加入一定量人血白蛋白经低pH孵放后也证实了这一作用,现将结果报告如下. 1 材料与方法

生产工艺对静注丙种球蛋白Fc段生物学功能的影响

静注丙种球蛋白(IVIG)制品Fc段在IVIG临床应用中发挥着重要的生物学功能,因而 IV IG制品Fc段生物学活性是考核制品质量的关键指标.不同的生产工艺和病毒灭活/去除工艺是否影响IVIG制品Fc段生物学功能? 现综述如下.1 病毒灭活工艺对IVIG Fc段活性的影响

去白细胞输血基础和临床应用研究进展

血液作为一种组成复杂的组织已经常规应用了一个世纪,自1818 年发现其种属特异性和1900年发现红细胞抗原主侧配血以来的半个世纪,人们主要关注输血后白细胞引起的各种效应[1].20世纪70年代报道用离心法去白细胞以减少输血副作用后,去白细胞也逐渐常规应用于制备各种血液制品,去白细胞的红细胞和血小板在欧美国家广泛应用[2].近年来去白细胞输血基础和临床应用都表明,去白细胞具有三项已得到国内外输血界公认的减少同种异体输血副作用的效果:减少非溶血性发热反应的发生率和严重程度;防止HLA同种免疫和血小板输注无效;降低传播白细胞相关传染性病原体(CMV、HTLV-I/Ⅱ)的危险性.有资料显示在以下几方面也可能有效:①防止输血传播C MV、HTLV-Ⅰ/Ⅱ以外的病毒,清除细菌和寄生虫;②防止或消除输血相关免疫抑制综合征;③防止输血后GVHD(PTGVHD);④降低传播克劳伊氏病(CJD)和新型变异克劳伊氏病(nvCJD)的危险性.正是后一点促使英国在19 99年底制定了常规去白细胞输血政策.

脐血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血的临床进展

造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation ,HSCT)是目前根治重型β-地中海贫血有效的方法,它包括骨髓造血干细胞移植(BMT)、外周血干细胞移植 (PB SCT),脐血干细胞移植(CBSCT).相对而言,脐血干细胞具有增殖快、可以扩增、集落形成高,对异基因刺激反应轻,CBSCT所需细胞数比BMT、 PBSCT者少,且来源广泛等优点,已成为干细胞的重要来源之一.现将其有关CBSCT治疗重型β-地中海贫血的临床进展作一综述.1 历史回顾

PCR法筛查混合血浆中病毒的可行性

目前,血液及血液制品的安全性主要依靠严格的献血者选择(献血前询问及使用敏感的抗体 /抗原试剂对献血者血液进行输血相关病毒的筛查)和使用有效的去除/灭活病毒程序对血液制品进行处理.高敏感性和特异性的HBV、HCV和HIV第2代和第3代ELISA检测试剂的使用大大降低了输血及血液制品带来的病毒感染[1～4],但是,输血导致的病毒感染仍时有发生[1,4],这主要是因为有诊断窗口期的存在--窗口期之内,已经遭受病毒感染的献血者体内尚未产生足够的、可以检测到的抗体复合物[1,3～5],ELISA试剂的检测结果显示为阴性. 如果使用高度敏感的核酸扩增(PCR)技术直接检测病毒的核酸,就可以大幅度地缩短阳转前的窗口期,减少病毒传播的可能性.Schreiber等证明,使用PCR检测技术可以使HCV、HBV和HIV的窗口期分别缩短到59d,29d和11d[1].同时美国的研究者们也证明,多次献浆者经PCR检测后,其传播3种病毒(HCV、HBV和HIV)的危害性分别降低72%,4 2%和50%. 在过去的10年中,PCR技术迅速发展起来,并且在许多项目的诊断和应用方面商业化,将它应用于减少输血病毒感染是采供血机构的目标.然而,这项技术尚未能在采供血机构中广泛应用是基于一些技术上和经济上的原因:① PCR技术的实现,需要一些在分子生物学技术和设备方面接受过特别训练的人员;②为了防止样本扩增时出现交叉污染,试剂准备、样本处理、病毒扩增和检测均需要在单独隔离的房间里进行,对实验室的空间和洁净程度要求较高;

减除血液成分中白细胞及其临床意义

S/D法用于人凝血因子Ⅷ病毒灭活效果验证

人凝血因子Ⅷ(FⅧ)浓制剂是用于甲型血友病治疗的血液制品,患者需终身输注.本所用低温乙醇法制备了纯度>3IU/mg蛋白的FⅧ浓制剂,为减少该剂品传播病毒的危害并保证制品的质量,在制作过程中采用了Solvent/detergent (S/D) 法[1]进行病毒灭活.S/D法是由美国纽约血液中心[2]于20世纪8 0年代中期开发的,采用有机溶剂和表面活性剂进行协同处理,用于灭活血浆制品中的脂包膜病毒而不影响蛋白质的性质,已获得美国FDA认可.为验证该方法的效果,笔者对制品在处理前后的活性和理化性质进行了比较,采用HIV、VSV、Sindbis 3个指示病毒对S/D处理人凝血因子Ⅷ进行病毒灭活验证.1 材料与方法

几种血液制品病毒灭活工艺的验证和评价

自1994年开始,我国各血液制品生产厂家均在血液制品病毒灭活工艺方面进行了研究和探索.笔者对不同厂家、不同制品和不同工艺进行了病毒灭活效果的验证,现对这些结果做一总结和评价.1 材料与方法

竞争性RT-PCR定量检测VSV核酸的竞争子的制备

RT-PCR是检测病毒灭活过程中病毒RNA核酸链损伤的一种方法.常规的RT-PCR方法只能检测到病毒核酸受损伤的趋势,但不能精确地对损伤程度进行定量分析[1].笔者以竞争性RT-PCR方法, 通过构建一条与待扩增的目的基因具有相同扩增效率的竞争子片段,实现了对水泡性口膜炎病毒(vesicular stomatisis virus,VSV)核酸的初步定量,现将竞争子的制备方法介绍如下.1 材料与方法

献血者血液因素对机采血小板采集量影响的多因素分析

近年来,机采血小板因输注效果好、输血不良反应发生率低,临床应用日益普遍.国内许多血站也相继引进了国外较先进的血细胞分离机(如美国Bexter公司CS-3000Plus、COBE公司 s pectra和Haemonetics公司MCS3P、MCS+等).过去,许多实验对其采集浓缩血小板的效率和影响因素作了一些有益的研究,但这些研究大多集中在对机器本身因素的分析上,而对献血者因素的影响涉及较少[1～3].笔者采用多因素的分析方法就献血者血液因素对机器采集血小板效果的影响作一初步探讨,供同行参考.1 材料与方法

国际生物制品及其安全性会议简介

2000年6月20～23日由美国IBC在华盛顿市,组织召开了国际生物制品及其安全性学术会议,参加会议的各国科学家近200人左右,分血浆产品, 病毒清除两个会场进行交流.笔者主要参加了血浆产品的学术会议,下面主要就血浆蛋白产品及重要的病毒技术等议题作一简要介绍.1 世界上血浆蛋白产品的销售趋势