中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠海马区胆碱乙酰基转移酶表达的影响
目的:探讨参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑保护作用及对海马区胆碱乙酰基转移酶(ChAT)表达的影响.方法:采用结扎双侧颈总动脉制备脑缺血模型,参龙健脑胶囊低、高剂量组和吡拉西坦组剂量分别为0.4,1.2,0.45 g·kg-1,ig 1次/d.ig 28 d后观察神经功能并评分、脑病理组织切片并应用免疫组织化学染色法观察ChAT在缺血脑损伤大鼠海马区的表达.结果:模型组大鼠神经功能缺损明显(P＜0.05),海马区ChAT表达减少(P＜0.01)；与模型组相比,参龙健脑胶囊治疗组大鼠的神经功能缺损改善(P＜0.05),大鼠海马区ChAT表达显著增加(P＜0.01,P＜0.05).结论:参龙健脑胶囊对脑组织损伤的保护作用与其促进脑组织ChAT表达密切相关.
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骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞转化及一贯煎的影响
目的:观察体外诱导骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化及一贯煎的影响.方法:骨髓间充质干细胞分离、培养和鉴定,取第3代细胞加入转化生长因子(TGF-β1 5μg·L-1)诱导定向分化.骨髓间充质干细胞随机分为正常组、TGF-β1诱导组,TGF-β1诱导加一贯煎组,2周后通过免疫荧光、实时定量PCR法检测骨髓间充质干细胞分化情况及一贯煎的影响.结果:骨髓间充质干细胞鉴定结果显示CD44强阳性表达,CD29弱阳性表达.TGF-诱导后,免疫荧光及实时定量PCR均显示TGF-β1诱导组细胞α-SMA阳性表达,一贯煎组细胞α-SMA表达显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:经体外诱导骨髓间充质干细胞可以向肌成纤维细胞分化,一贯煎可阻止骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化.
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云南白药抑制新生血管生成活性部位筛选
目的:探讨云南白药不同提取部位对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响.方法:应用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,分别以生理盐水和苏拉明为空白和阳性对照,以小血管个数为主要观察指标,比较云南白药不同提取部位抑制新生血管生成作用.结果:云南白药的乙酸乙酯部位和95％,80％,60％乙醇部位小血管个数与空白组比较有极显著差异(P＜0.01).结论:云南白药的乙酸乙酯部位、乙醇部位(95％,80％,60％)对CAM新生血管有抑制作用.
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乳香没药对细胞色素P450活性的影响
目的:考察乳香没药对细胞色素P450活性的影响.方法:56只小鼠分为对照组和乳香+没药3.15,2.10,1.05 g·kg-1剂量组,连续ig给药7 d；48只小鼠分为对照组和乳香、没药、乳香+没药组,ig给药3.15 g·kg-11次.所有小鼠末次药后30 min ip给予戊巴比妥钠,观察乳香没药对P450的影响.40只大鼠分为对照组、乳香组、没药组、乳香+没药组,以3.00g·kg-1连续ig给药14d,取肝脏制备各组动物肝微粒体,并用cocktail探针法考察乳香没药对大鼠CYP1 A2,CYP2E1,CYP3 A4的影响.结果:乳香+没药3.15,2.10,1.05 g·kg-1剂量连续给药7d均可使戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠率降低(P ＜0.05,P＜0.01),而单次给药3.15g· kg-1有使戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠率升高的趋势.乳香、没药及乳香+没药混合物组大鼠肝微粒体体外对非那西丁、氯唑沙宗代谢率显著高于对照组,而氨苯砜无明显差异.结论:乳香、没药连续用药均使CYP1A2,CYP2E1活性增强,而对CYP3A4则无显著影响.
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苍术类药材提取物体外对成骨细胞增殖及酶活性的影响
目的:观察不同产区苍术的不同提取部位体外对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响.方法:分别以苍术生药量1×10-4,1×10-6 g·mL-12个质量浓度进行新生大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖和碱性磷酸酶活性测定.结果:茅苍术对大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖的效果比北苍术好；在挥发油、水煎液、醇提液3个不同提取部位比较中,发现水煎液的效果较好,且道地产区茅苍术的效果佳,对成骨细胞、MG-63细胞株增殖率分别是11.27％,13.57％；大鼠成骨细胞的ALP活性测定,以茅苍术的水煎液和挥发油的碱性磷酸酶活性高,均为5.22 U·L-1.结论:苍术类药材对骨质疏松症的治疗有一定的疗效,且茅山地区产茅苍术水煎液对MG-63细胞株、成骨细胞增殖效果佳.
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雷至胶囊对嘌呤霉素氨基核苷肾病的减毒增效作用
目的:探讨雷至胶囊(雷公藤多苷10 mg·kg-1+女贞子、墨旱莲4 g·kg-1)在治疗嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病的减毒增效作用.方法:80只雄性大鼠随机分为8组:空白组、模型组、雷至胶囊高、低剂量组、雷公藤多苷高、低剂量组、雷公藤甲素组和缬沙坦组,每组10只.颈静脉注射PAN 100 mg·kg-1建立PAN肾病模型.空白组颈静脉注射等量生理盐水.其余各治疗组造模后第2天开始每日分别ig给药,持续10 d.第11天,处死大鼠,摘取肝肾,用于光镜、免疫荧光及透射电镜检测.结果:一般情况:模型鼠第5天尿量减少、腹水,而浮肿不明显,体重下降.第7～10天腹水明显,24 h尿蛋白增加,死亡率30％(3/10).病理改变:模型鼠肾小管上皮细胞变性,电镜下,可见足细胞足突融合、消失,而空白组足细胞结构正常.各药物治疗组24 h尿蛋白、血生化、血红蛋白均有不同程度改善,各治疗组血尿素氮轻度升高(P＜0.05).雷至胶囊及雷公藤多苷10 mg·kg-1组降蛋白尿、改善贫血、降低AST疗效优于其余各组,电镜下,雷至胶囊高剂量组足突融合减轻,足突明显恢复.结论:雷至胶囊可能通过降低PAN肾病大鼠蛋白尿、改善贫血、降低AST、减轻足细胞足突融合及肾小管上皮细胞变性等发挥减毒增效作用.
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基于钙调磷酸酶-活化T细胞核因子3信号转导通路探究四逆汤治疗心力衰竭的分子机制
目的:分析钙调磷酸酶-活化T细胞核因子3(CaN-NFAT3)信号转导通路在四逆汤治疗心衰过程中的分子机制.方法:取SPF级SD大鼠60只,分10只作为空白对照组外,余50只采用连续ip盐酸阿霉素(0.0025 g·kg-,每周1次,连续6周)方法复制大鼠心力衰竭模型,待造模成功后将动物分为模型对照组与四逆汤高、中、低剂量(5.6,2.8,1.4 g·kg-1)治疗组,用四逆汤水煎液治疗8d后,分别检测CaN的活性、心肌钙含量、去磷酸化NFATc蛋白的相对表达.结果:四逆汤水煎液高、中剂量治疗组CaN活性均明显低于模型组(P＜0.01)、钙含量明显升高(P＜0.01)、大鼠心肌组织中去磷酸化NFATc/β-actin吸光度比值较模型对照组显著降低(P＜0.01).结论:CaN-NFAT3信号转导通路的抑制为四逆汤治疗心力衰竭的关键分子机制.
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黄芪不同有效部位配伍对骨髓抑制模型小鼠粒系调控因子的影响
目的:考察黄芪不同有效部位配伍对骨髓抑制模型小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、肿瘤坏死因子-β(TNF-β)的影响.方法:BALB/c小鼠实验第1,3,5天ip环磷酰胺100 mg·kg-1复制骨髓抑制模型.分为正常组、模型组、黄芪饮片组、酮苷组、糖苷组、糖酮组、糖苷酮组.造模当日给药,正常组、模型组按10 mL· kg-1ig蒸馏水；黄芪饮片组按10 g·kg-1 ig黄芪水煎液；各有效部位配伍组按黄芪生药量10 g·kg-1分别ig相应治疗药物(酮苷组0.227 g·kg-1,糖苷组0.610 g·kg-1,糖酮组0.514 g·kg-1,糖苷酮组0.678 g·kg-1).连续ig15 d.ELISA法检测小鼠骨髓细胞GM-CSF,G-CSF,TNF-β含量.结果:糖苷组、糖酮组GM-CSF含量明显增加(P＜0.05)；糖苷组、糖酮组G-CSF含量明显增加,且优于黄芪饮片组(P＜0.05)；黄芪不同有效部位配伍组TNF-β含量均明显减少,且糖苷组减少TNF-β含量优于酮苷组、糖酮组、糖苷酮组(P＜0.05).结论:黄芪有效部位可能通过调控细胞因子调控粒系造血；黄芪多糖与皂苷、黄酮配伍后促进粒系造血效果较优.
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丹龙胶囊对脑缺血模型动物的保护作用
目的:研究丹龙胶囊对脑缺血模型动物的保护作用.方法:SD大鼠随机分6组,空白、模型对照组,丹龙胶囊低、中、高剂量(分别含生药0.252,0.504,1.008 g·kg-1)组、阳性对照药血栓心脉宁胶囊(含胶囊1.08 g·kg-1)组.均ig 10 d,于末次给药30 min后,采用大鼠大脑中动脉栓塞性脑缺血模型,观察丹龙胶囊对大鼠行为学及脑缺血面积的影响；昆明种小鼠随机分5组,空白对照组,丹龙胶囊低、中、高剂量(分别含生药0.364,0.728,1.456 g·kg-)组、血栓心脉宁胶囊(含胶囊1.56 g·kg-1)组.ig 7 d后,采用小鼠断头缺血模型,观察丹龙胶囊对小鼠呼吸次数及呼吸持续时间的影响.结果:丹龙胶囊可使大脑中动脉栓塞性脑缺血模型大鼠行为学评分明显降低,脑缺血面积明显减小；使断头缺血模型小鼠喘息次数明显增多、呼吸持续时间明显延长.结论:丹龙胶囊对脑缺血模型动物具有较好的保护作用.
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柴胡疏肝散干预卒中后抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的机制研究
目的:探索柴胡疏肝散干预卒中后抑郁(PSD)模型大鼠海马神经细胞凋亡的机制及肝气郁结证与海马神经细胞凋亡的相关性.方法:健康雄性SD大鼠100只,随机分为3组:柴胡疏肝散组和PSD模型组各40只,正常对照组20只；除正常组外,其余2组先用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,手术1周后开始复合制备PSD大鼠模型,同时柴胡疏肝散组给予柴胡疏肝散7.875 g·kg-1 ig,PSD模型组给予蒸馏水ig,均21 d；免疫组化法检测大鼠海马组织Bcl-xs,Bcl-xl蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,PSD模型组Bcl-xs蛋白表达升高,Bcl-xl蛋白表达下降(P＜0.01)；与PSD模型组比较,柴胡疏肝散组Bclxs蛋白表达下降(P＜0.01),Bcl-xl蛋白表达升高(P＜0.01).结论:柴胡疏肝散对PSD模型大鼠海马Bcl-xs,Bcl-xl基因表达的调节作用可能是其干预海马神经细胞凋亡的机制之一；肝气郁结证是PSD的主要证型,且与海马神经细胞凋亡具有相关性.
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三桠乌药叶片中挥发油成分及抑菌活性研究
目的:研究三桠乌药叶片中所含挥发油成分及抑菌活性.方法:采用水蒸气蒸馏法提取三桠乌药叶片中所含挥发油,并用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,分析挥发油的化学成分.用滤纸片固相扩散法和平板连续稀释法进行挥发油抗菌活性试验和小抑菌浓度(MIC)研究.结果:首次提取了三桠乌药叶片中所含挥发油,成功鉴定出46种化合物,并对其抑菌活性进行了研究,发现其具有广谱抗菌性.结论:三桠乌药叶片中所含挥发油主要成分为醇类化合物、萜类化合物和少量氧化物、酯类化合物及其他物质.其对供试菌的抑菌强度由大到小为金黄葡萄球菌＞表皮葡萄球菌＞粪肠球菌＞大肠埃希菌＞桔青霉＞白色葡萄球菌＞枯草芽孢杆菌＞白色念球菌＞黑曲霉＞绿脓杆菌.
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臭常山根水提物对家兔离体肠肌自发活动的影响
目的:观察臭常山根(Orixae japonicae)对家兔离体肠肌自发活动的影响,并探讨其作用机制.方法:以家兔离体肠肌收缩强度为指标[即以肠肌舒缩活动的张力(g)、收缩幅度及收缩频率为指标],观察不同浓度的臭常山根水提物对家兔离体肠平滑肌收缩的影响.结果:不同浓度的臭常山根水提物(终质量浓度按生药量计为0.25,0.5,1 g·mL-1)均能显著抑制家兔正常离体十二指肠的自发活动,但不是完全抑制肠肌的自发活动,能使家兔正常离体肠肌舒缩活动的张力减小,收缩力减弱,紧张性下降；对乙酰胆碱和BaCl2引起的肠肌强直收缩均有显著拮抗作用,并且能使先用阿托品紧张性降低的离体家兔肠肌进一步松弛,且随剂量增加抑制作用增强.结论:臭常山根水提物能显著抑制家兔离体十二指肠的自发活动,使收缩力减弱,紧张性下降,能拮抗乙酰胆碱和BaCl2引起的肠肌痉挛,并能协同阿托品抑制肠肌的收缩,呈量效关系,其抑制效应可能通过胆碱能受体介导或对肠平滑肌直接起作用.
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衍生颗粒的主要药效学研究
目的:验证衍生颗粒的主要药理作用.方法:使用温热药建立小鼠阴虚模型,观察衍生颗粒对该阴虚模型小鼠症状的影响,以及对该阴虚模型小鼠痛阈、体液免疫功能的影响；使用甲状腺素建立小鼠阴虚模型,观察衍生颗粒对该阴虚模型小鼠症状的影响；使用D-半乳糖和左旋甲状腺素钠建立老年阴虚大鼠模型,观察衍生颗粒对该阴虚模型大鼠症状的影响.结果:衍生颗粒对不同方法致阴虚模型动物的阴虚症状均有一定的改善作用,主要表现为明显减少阴虚小鼠的自主活动次数,降低其血浆环磷腺苷(cAMP)的含量、痛敏感性,提高免疫力,提高体重增长率,有效降低因服用甲状腺片而引发的胸腺、脾脏增长,明显改善老年阴虚大鼠低切变率下的全血黏度.结论:衍生颗粒对不同方法致阴虚模型的动物的阴虚症状均有一定的改善作用.
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糖肾清1号对糖尿病肾病大鼠肾组织AngⅡ及TGF-β1转录表达的影响
目的:观察中药糖肾清1号对糖尿病肾病肾组织局部AngⅡ及TGFβ1 mRNA转录表达及蛋白表达水平的影响.方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,设空白组、模型组、阳性药对照组(卡托普利24 mg·kg-1 ·d-1)、糖肾清1号甲、乙、丙、丁的高、中、低剂量治疗组(甲组给药糖肾清1号有效成分A,高剂量组94 mg·kg-1·d-1,中剂量组47 mg·kg-1 ·d-1,低剂量组23.5mg·kg-1·d-1.乙组给药糖肾清1号有效成分B,高剂量组94 mg-kg-·d-1,中剂量组47 mg·kg-1·d-1,低剂量组23.5 mg·kg-1·d-1.丙组用药为1/2A与1/2B配成,高剂量组94 mg·kg-1 ·d-1,中剂量组47 mg·kg-1·d-1,低剂量组23.5 mg·kg-·d-1.丁组为糖肾清1号生药制剂,高剂量组用药为195 mg-kg-1·d-1,中剂量为97.5 mg·kg-1·d-1,低剂量组48.75 mg·kg-1 ·d-1),每组10只.分别采用RT-PCR,Western blot,ELISA等方法检测大鼠AngⅡ,TGF-β1 mRNA转录及蛋白表达水平,进行组织形态学观测.结果:糖肾清1号呈量效依赖性下调AngⅡ,TGF-β1 mRNA转录和蛋白表达(P＜0.01或0.05),减少细胞外基质的沉积(P＜0.05).结论:糖肾清1号可通过调控AngⅡ,TGF-β1 mRNA转录和蛋白表达,抑制肾组织纤维化的发生发展.
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女贞子醇提物不同极性部位的体外抗氧化活性研究
目的:研究女贞子乙醇提取物不同极性部位的体外抗氧化活性,旨在为女贞子抗氧化相关有效成分的分离提供依据.方法:在体外化学模拟的条件下,采用1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基法、邻苯三酚法测定其对DPPH自由基和对超氧阴离子自由基的清除能力.结果:女贞子醇提物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇3个萃取部位抗氧化结果显示,相同浓度下女贞子乙酸乙酯部位抗氧化效果强,其次是正丁醇部位、石油醚部位.结论:测定了女贞子醇提物不同溶剂提取物的抗氧化活性,初步确定女贞子中抗氧化相关活性成分主要存在于女贞子醇提物的乙酸乙酯部位.
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当归补血汤表征参数与其益气补血功效的关系初探
目的:研究当归补血汤理化表征参数与其益气补血功效的关系,探索利用理化参数表征中药汤剂质量的可行性.方法:采用4种提取工艺(8倍量水提取1次,每次1 h;8倍量水提取3次,每次2h；10倍量水提取3次,每次1.5h；12倍量水提取3次,每次1h)制备当归补血汤,测定其25℃时的表面张力,pH,电导率和渗透压；将77只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和当归补血汤1,2,3,4号组,每组11只,给药8 d(10 g·kg-1·d-1),第5天开始ip环磷酰胺40 mg·kg-1 ·d-1,连续3d,第8天ip环磷酰胺80 mg·kg-1,末次给药1.5h后测定小鼠体温和外周血象；将55只小鼠随机分为正常组、模型组和当归补血汤高中低剂量组,研究高中低剂量(20,10,5 g·kg-1·d-1)对环磷酰胺所致血虚小鼠的体温和外周血象的影响；后,关联理化参数、药效和主要活性组分含量,并对试验数据进行统计和回归分析.结果:经过多项式回归分析,理化参数值与组分含量和药效的综合评分之和、药效综合评分的相关系数均大于0.920 0,说明当归补血汤的理化表征参数、组分含量和益气补血药效3者的相关性显著.结论:当归补血汤理化参数与其益气补血功效相关性强,初步表明可利用上述特征参数来表征当归补血汤体系的内在质量.
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金铃子散不同配比方对大鼠肝药酶CYP4503A4活性的影响
目的:通过比较金铃子散不同配比方对肝细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,简称CYP 3A4)活性的影响,探讨其配伍规律.方法:按L9(34)正交表,设计9个不同配比组方.体外实验采用大鼠肝微粒体孵育体系,测定不同配比方对CYP 3A4的半数抑制浓度(IC50)；体内实验采用大鼠,口服给予金铃子散不同配比方5d后注射探针药物睾酮,通过微透析探针采集肝脏部位样品,HPLC测定6-β-羟基-睾酮和原型物睾酮浓度,二者浓度之比作为CYP 3A4酶活性指标.结果:川楝子、延胡索单味提取物和配比方1～9体外对肝药酶CYP 3A4的IC50分别为(2.59±0.33),(0.87±0.30),(1.14±0.20),(1.00±0.13),(1.19±0.10),(2.33±0.15),(1.39±0.19),(1.14±0.20),(1.29±0.14),(1.43±0.32),(1.49±0.28)mg-L-1;体内实验结果显示:与正常对照组比较,金铃子散不同配比方、川楝子和延胡索单味提取物处理组大鼠CYP 3A4的酶活性均降低,金铃子散配比方抑制CYP 3A4酶活性的强弱顺序:方1(方4)＞方7＞方2(方5)＞方8＞方3＞方9.结论:不同配比方对CYP 3A4酶的活性均有影响,川楝子和延胡索配伍显示出协同抑制作用.
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清络通痹颗粒含药血清对破骨细胞骨吸收的影响
目的:确定清络通痹颗粒(QLT)含药血清的制备方法并观察其对体外培养破骨细胞的活性和骨吸收的影响.方法:选用高效液相色谱外标一点法测定,QLT含药血清中青藤碱的含量以确定含药血清的制备条件；乳鼠破骨细胞l × 108/mL加入96孔板,将QLT 3.6,7.2,14.4 g·kg-1给药的大鼠含药血清1∶10稀释,分别加入各孔培养48 h,观察其对破骨细胞增殖、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性及破骨细胞形成的骨吸收陷窝的影响.结果:QLT 7.2,14.4 g·kg-1给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的增殖能力和吸收陷窝面积(P ＜0.05,P＜0.01),QLT 3.6,7.2,14.4g·kg-1给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的TRAP活性(P＜0.05,P＜0.01).结论:QLT含药血清可抑制破骨细胞增殖、TRAP活性和骨吸收能力,对破骨细胞引起的骨质破坏产生抑制作用.
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家蝇幼虫乙醇提取物的抗炎解热作用及机制
目的:研究家蝇幼虫乙醇提取物(MDE)对酵母致炎发热大鼠的解热作用及机制.方法:利用干酵母致炎大鼠发热动物模型,设立生理盐水组:ig等体积生理盐水；模型组:ig等体积生理盐水+大鼠背部sc 15％干酵母20 mL·kg-1;阿司匹林组:ig阿司匹林0.3 g·kg-1；给药组:分别ig MDE(1,0.5,0.25 g·kg-1),qd,预防性连续给药7 d(n=10),观察MDE对发热大鼠直肠温度的影响,测定给药后不同时间的体温变化,并采用放免法测定下丘脑中前列腺素E2(PGE2)和环磷腺苷(cAMP)含量.结果:1,0.5,0.25 g·kg-1MDE具有不同程度的退热作用；并能减少致热大鼠下丘脑中PGE2及cAMP的含量,高剂量组(126.86±24.89)ng·g-1,(9.72 ±1.11)nmol·g-1;中剂量组(180.12±34.58)ng·g-1,(10.05±0.26)nmol·g-1;低剂量组(203.54±30.46)ng·g-1,(10.79±0.57)nmol·g-1；与模型组(253.70±43.96)ng·g-1,(12.15±3.11)nmol·g-1比较具有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05).结论:MDE具有解热作用,其作用机制与降低下丘脑中PGE2以及cAMP有关.
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双参宁心方的正常与心肌缺血模型大鼠血清对缺氧/复氧H9C2细胞作用的比较
目的:比较大鼠在正常状态与心肌缺血状态下制备的双参宁心方(SSNX)空白及含药血清对体外缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力的影响.方法:分别设立正常组、心肌缺血模型组.大鼠心肌缺血模型由冠状动脉结扎法建立,术后缝合伤口继续喂养.术后2h除正常空白、模型空白、模型假手术组给予生理盐水外,均按高、中、低剂量(180,90,45 mg· kg-1)分别ig给予SSNX 5日.末次给药后30,90,150 min分批处死大鼠,分别制备正常及模型血清.将其作用于缺氧/复氧H9C2细胞.MTT法检测H9C2细胞活力.结果:正常空白血清与模型空白血清对缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力影响差异明显(P＜0.05),正常动物SSNX含药血清与心肌缺血模型动物SSNX含药血清均有提高缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力的作用,分别与正常动物空白血清及模型动物血清比较(P＜0.05)；各时间点正常含药血清与相应时间点模型含药血清相比更显著提高了H9C2心肌细胞活力.结论:2种方法制备的SSNX血清对体外缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力的作用趋势一致,但强度有一定差异.
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利用属性距离矩阵研究《局方》方剂功效倾向性
目的:研究《太平惠民和剂局方》中大量缺乏功效说明古方的功效倾向性.方法:以组方药物的各种属性为基础,构建方剂功效属性距离矩阵,通过功效属性距离矩阵计算元组矢量的属性权重,利用平均值法、陡峭下降法、拉格朗日中值法、信息量法从药物归纳方剂的功效.结果:为量化结果比较,利用“准确率”标准评价上述4种方法对《局方》方剂进行属性约减的准确性.通过实验得到上述4种方法的属性约减准确率分别为:61.5％(平均值法),79.2％(陡峭下降法),68.2％(拉格朗日中值法),70.8％(信息量法).结论:平均值法结果繁杂,陡峭下降法结果简约,拉格朗日中值法具有较好的折中性,信息量法结果受阈值影响可变动.几种方法可相互参照,相互补充.
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蠲痛饮对大鼠子宫内膜异位症微血管密度的影响
目的:探讨蠲痛饮对大鼠子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)微血管密度(microvessel density,MVD)的影响和抗血管形成作用.方法:采用自体子宫内膜移植法建立EMS大鼠模型,将60只大鼠分为正常组、模型组、蠲痛饮低、中、高剂量组、丹那唑组6组,分别给予蠲痛饮高、中、低剂量(42.9,14.3,4.8 g·kg-1)和丹那唑(0.021 5 g·kg-1)ig,模型组及空白组按照10 mL·kg-1给予生理盐水ig,持续用药28 d,SP免疫组化法检测各组EMS大鼠在位内膜和异位组织灶中MVD的表达.结果:丹那唑组和高、中、低剂量蠲痛饮减小大鼠异位组织体积分别为(32.96±15.38),(15.75±8.36),(38.16±17.32),(42.91±19.54)mm3,与模型组(89.23±26.27)mm3比较差异有统计学意义(P＜0.05).丹那唑组和高、中、低剂量蠲痛饮降低EMS大鼠异位内膜MVD的计数(18.61±5.89,12.24±4.82,14.36±4.13,16.53±4.56),与模型组(26.43±6.75)比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:蠲痛饮对子宫内膜异位症大鼠异位组织中MVD的表达和新生血管形成均有抑制作用,作用呈剂量依赖性.
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枸杞多糖对大鼠小肠缺血再灌注氧化应激的抑制作用
目的:探讨枸杞多糖对大鼠小肠缺血再灌注氧化损伤的影响.方法:将30只Wistar大鼠随机分为3组(假手术组、模型组、枸杞多糖组),每组10只.枸杞多糖组:枸杞多糖按6 g·kg-1 ig,假手术组和模型组予同体积生理盐水,连续5d后,检测各组大鼠小肠黏膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6水平(IL-6),以及小肠黏膜和血液中的抗氧化物酶活力和丙二醛(MDA)的含量.结果:模型组与假手术组比较,大鼠小肠黏膜中TN F-α,IL-6水平明显升高(P＜0.01),小肠黏膜和血液中抗氧化酶活力明显下降(P＜0.01),MDA水平明显升高(P＜0.01)；而枸杞多糖组与模型组比较,大鼠小肠黏膜中TNF-α,IL-6水平明显下降(P＜0.01),抗氧化酶活力明显升高(P＜0.01),MDA水平明显下降(P＜0.01).结论:枸杞多糖对大鼠小肠缺血再灌注氧化损伤有明显的保护作用.
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大鼠腹腔肥大细胞与RBL-2H3细胞脱颗粒方法的建立及其在中药注射剂安全性评价上的应用
目的:建立大鼠体外肥大细胞以及RBL-2H3细胞脱颗粒试验的方法,评估2种细胞脱颗粒方法对中药注射剂(traditional Chinese medicine injections,TCMI)引起脱颗粒的可行性.方法:提取大鼠腹腔肥大细胞(rat peritoneal mast cell,RPMC),优化实验条件,用阳性药物C48/80和各种TCMI等与其共培养,通过甲苯胺蓝染色法计数腹腔MC脱颗粒率；通过RBL-2H3细胞与TCMI共同培养,底物显色法检测β-氨基己糖苷酶释放率.结果:阳性对照品C48/80的浓度与RPMC脱颗粒有一定的量效关系；参麦、冠心宁、痰热清、清开灵和生脉5种TCMI能显著引起细胞脱颗粒,并与药物浓度有一定的正相关性；RBL-2H3细胞脱颗粒方法中参麦、黄芪、银杏、痰热清、丹香冠心、清开灵和生脉7种TCMI能是β-氨基己糖苷酶释放率升高.结论:一些TCMI能引起体外RPMC和RBL-2H3细胞脱颗粒,2种细胞脱颗粒方法在评价一些TCMI可能引起类过敏反应方面具有一定的互补性与可行性.
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益肾颗粒对糖尿病肾病大鼠血清层黏连蛋白和Ⅳ型胶原含量的影响
目的:观察益肾颗粒对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用.方法:采用单侧肾切除加链脲佐菌素55 mg.kg-1一次性ip复制糖尿病肾病大鼠模型,试验分单切肾组,模型组,益肾颗粒低、高剂量组(8.1,16.2 g·kg-1),阳性对照药洛汀新组(1.5×10-3g·kg-1).ig,1次/d,连续16周,单切肾组和模型组给予等容积蒸馏水,观察药物对大鼠血清层黏连蛋白、Ⅳ型胶原含量以及肾组织超微结构的影响.结果:益肾颗粒高剂量组能明显降低大鼠血清层黏连蛋白和Ⅳ型胶原含量(P＜0.05),高、低剂量组能减轻肾小球滤过膜足细胞足突融合、基底膜的增厚以及毛细血管内皮细胞增生.结论:益肾颗粒是通过降低血清层黏连蛋白和Ⅳ型胶原含量,减轻肾小球超微结构病理性变化,从而起到保护肾脏的作用.
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毛鸡骨草醇提液对HepG2.2.15细胞乙型肝炎表面抗原及乙型肝炎E抗原的影响
目的:观察毛鸡骨草体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用.方法:采用MTT法检测毛鸡骨草对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和大无毒浓度(TC0),采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定＜TC0的5个不同浓度的毛鸡骨草醇提液对HepG2.2.15细胞株表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎E抗原(HBeAg)的影响.结果:毛鸡骨草醇提取液可有效地抑制细胞HBsAg和HBeAg的分泌；在质量浓度为4 g·L-1作用144 h对HBsAg,HBeAg抑制作用为明显,抑制率分别为33.1％,40.1％.结论:毛鸡骨草在体外有一定的抗HBV作用.
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线叶菊抗菌作用研究
目的:研究线叶菊体内、外的抗菌作用,并对其作用机制进行初步探讨.方法:体外抗菌实验采用微量稀释法测定线叶菊对12种临床常见病原菌的低抑菌浓度(MIC)和低杀菌浓度(MBC).体内抗菌实验采用小鼠ip细菌的干酵母混悬液,观察7d内动物的死亡率.利用透射电镜对部分病原菌与线叶菊作用前后的细菌形态学进行考察.结果:线叶菊对12种临床常见病原菌有不同程度的抑菌和杀菌作用,特别是对耐药金黄色葡萄球菌的MIC为0.43 g·L-1,MBC为0.86 g·L-1.体内实验高剂量组对由金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、耐药金黄色葡萄球菌和耐药肺炎克雷伯氏菌导致的感染动物均具有保护作用,呈量效关系,中剂量组对绿脓杆菌和耐药金黄色葡萄球菌仍有作用.电镜结果显示线叶菊能够消融细菌的细胞壁.结论:线叶菊对12种临床常见病原菌的体外抗菌作用均优于双黄连口服液,特别是对头孢阳性对照组无作用的耐药绿脓杆菌仍具有抑菌和杀菌作用.体内抗菌实验结果表明线叶菊对小鼠全身感染动物模型具有保护作用,特别对头孢克肟无作用的耐药金黄色葡萄球菌导致的感染动物依然具有保护作用.同时线叶菊能够破坏细菌的细胞壁.
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玄参破壁粉粒体内抗菌实验研究
目的:研究玄参破壁粉粒的体内抗菌作用.方法:金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌分别培养18 h增殖后,用5％酵母浸出粉溶液稀释成不同浓度,ip感染小鼠,选用80％ ～ 100％致死率的金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的稀释液,感染给药小鼠,观测给药小鼠在染菌后7d内的平均存活天数和死亡率.结果:玄参破壁粉粒3.5,2.8,2.1,1.4g·kg-1及其常规饮片的3.5g·kg-1剂量均能不同程度的抑制金黄色葡萄球菌小鼠的死亡率并延长平均存活天数；玄参破壁粉粒3.5,2.8g·kg-1及其常规饮片的3.5 g·kg-1剂量均能不同程度的抑制绿脓杆菌小鼠的死亡率并延长平均存活天数.结论:玄参破壁粉粒直接给药具有一定的体内抗菌作用,与常规饮片的提取液体内抗菌作用等效.
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膈下逐瘀汤抗大鼠免疫性肝纤维化的研究
目的:观察膈下逐瘀汤逆转大鼠肝纤维化的疗效和对肝损伤的保护作用.方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组.猪血清0.5 mL/只(2次/周)ip诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,在制备模型的同时膈下逐瘀汤(含生药7.37 g·kg-1)ig 干预,共12周.实验结束后处死大鼠,HE染色分析肝组织胶原纤维含量,ELISA法分析MMP胶原酶活性,分光光度法分析天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性.结果:与模型组比较,模型+膈下逐瘀汤组大鼠肝纤维化程度显著改善(U =2.57,P＜0.05),AST和ALT活性显著降低(P＜0.05),MMP胶原酶活性显著降低(P＜0.05).结论:膈下逐瘀汤对猪血清诱导的免疫性肝纤维化大鼠肝纤维化程度和肝损伤具有明显改善作用.
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罗汉果总黄酮对实验性糖尿病大鼠的治疗作用
目的:观察罗汉果总黄酮降糖作用及其作用机制.方法:用链脲佐菌素(STZ)1次性ip 70 mg·kg-1建立大鼠糖尿病模型,72 h后将血糖值≥19 mmol· L-1糖尿病大鼠按血糖值随机分成模型组、罗汉果总黄酮高、中、低剂量组(80,40,20mg·kg-1)和二甲双胍组(10 mg· kg-1),另取正常大鼠作为对照组(n=10).ig给药,每日1次,连续28 d后测定糖尿病大鼠血糖(Glu)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、血脂、胰岛素水平及胰腺病理组织学检查.结果:罗汉果总黄酮80 mg· kg-1剂量组能使STZ糖尿病大鼠Glu由(22.68±2.55)mmol· L-1降至(10.63±2.88)mmol·L-1,40mg· kg-1剂量组能使大鼠的血糖值由(23.23 ±2.52)mmol·L-1降至(12.34±3.6)mmol·L-1(P＜0.05,P＜0.01)；罗汉果总黄酮80 mg·kg-1剂量组能显著提高血清中SOD,GSH-Px活性和降低MDA含量(P＜0.05)；罗汉果总黄酮80 mg·kg-1剂量组对血脂(TC,TG)有显著降低作用(P＜0.05)；罗汉果总黄酮80 mg· kg-1剂量组显著提高血清中胰岛素水平(P＜0.05).结论:罗汉果总黄酮对STZ糖尿病大鼠有降糖及降血脂作用.
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藏党参皂苷对睾丸间质细胞的影响及作用机制
目的:本研究以藏党参的正品长花党参Codonpsis thalictrifolia Wal1.为研究对象,对藏党参皂苷对睾丸间质细胞功能的影响进行了初步研究.方法:利用不同质量浓度的藏党参皂苷对大鼠睾丸间质细胞进行体外培养,并测定细胞分泌睾酮的含量,cAMP的含量以及MTT吸光度.结果:藏党参皂苷质量浓度为0.4 g·L-1时,可以显著升高体外培养的大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的含量(P＜0.05),提高cAMP的含量(P＜0.01),并降低MTT吸光度(P＜0.01).结论:藏党参总皂苷可使单个睾丸间质细胞的分泌能力增强,可能由PKA通路介导.
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炒莱菔子饮片质量与萝卜苷含量分析
目的:考察10地市售炒莱菔子饮片质量并进行萝卜苷含量测定.方法:采用HPLC和重量法对10地市售炒莱菔子饮片萝卜苷含量和杂质,水溶性浸出物含量进行测定,并按《中国药典》检测了水分与醇溶性浸出物含量.结果:供试饮片中萝卜苷含量为8.02％～3.35％,杂质在0.3％～3.46％,水浸出物含量在17.32％ ～ 18.59％,水分与浸出物基本合格.结论:莱菔子饮片质量标准宜增加杂质检测和萝卜苷含量测定项,以有效控制其饮片质量.
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醒脑静注射液质量分析
目的:分析醒脑静注射液检验结果,比较各厂产品质量.方法:根据检验数据,进行相关分析、工艺试验,分析不合格原因；计算均值及RSD,进行聚类分析,比较各厂产品生产质量的稳定性及差异.结果:相关分析表明樟脑含量与异龙脑含量(P＜0.01)、渗透压值(P＜0.05)成正相关,与龙脑含量(P＜0.01)成负相关,pH与异龙脑含量(P＜0.05)成负相关；pH不合格与工艺控制有关；均值、RSD表明W厂产品质量控制稳定；各厂产品可通过聚类分析进行区分.结论:3家醒脑静注射液的物料、工艺控制各有特点,可根据需要选用.
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离子色谱法测定大黄药材中二氧化硫残留量的不确定度评价
目的:建立离子色谱法测定大黄药材中二氧化硫残留量的测量不确定度评价方法.方法:通过建立离子色谱标准曲线法测定含量的数学模型,分析影响其不确定度的因素来源,对各个不确定度因素进行评定,并计算合成不确定度,终给出测量结果在95％置信区间下的扩展不确定度.结果:试验的大黄药材中残留二氧化硫含量测定结果为(189.92±7.14)μg·g-1.结论:建立的不确定度评定法适用于离子色谱标准曲线法测定中药材中二氧化硫残留量的不确定度分析.
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HPLC测定清热醒脑灵片中黄芩苷
目的:建立可靠的清热醒脑灵片中黄芩苷的含量测定方法.方法:采用HPLC,Phenomenex Luna C18(2)色谱柱,流动相甲醇-0.2％磷酸(58:42,用三乙胺调节pH 3.0),柱温室温,检测波长280 nm.结果:黄芩苷的线性范围为22.18 ～110.92 mg·L-1(r =0.999 9,n=5)；平均回收率为101.72％(RSD 1.66％,n=9).结论:方法操作简便,专属性、重复性好,可用于清热醒脑灵片的质量控制.
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不同方法提取青蒿挥发油成分分析及抗菌活性比较
目的:采用不同方法对青蒿挥发油进行提取,研究提取过程的优化条件,并对所得青蒿挥发油分别进行抗菌活性研究及GC-MS分析,用于指导制药.方法:采用索氏提取法和直接蒸馏法提取青蒿挥发油,分别进行抗菌实验研,采用气相色谱-质谱分析法对两种方法得到的挥发油进行成分分析.结果:索氏提取法提取青蒿挥发油的优化条件是:料液比约为1∶7.8,提取时间为3h.直接蒸馏法提取青蒿挥发油的优化条件是:料液比为1∶7.4,蒸馏时间为5h.索氏提取法所得青蒿挥发油为青蒿油-1,直接蒸馏法所得青蒿挥发油为青蒿油-2.青蒿油-1对黑曲霉的低抑制浓度(MIC)为1.25％,菌刺孢属的低抑制浓度(MIC)为1.25％,青霉的低抑制浓度(MIC)为5.0％,马青霉的低抑制浓度(MIC)为1.25％.青蒿油-2对4种细菌低抑制浓度分别为北京棒状杆菌:0.023 5％,枯草芽孢杆菌0.023 5％,四联球菌0.005 9％,普通变形杆菌3.75％.进行GCMS分析,青蒿油-1中分离出55个峰,鉴定出48个化合物,青蒿油-2中分离出48个峰,鉴定出39个化合物.结论:青蒿油-1抗真菌作用好于抗细菌作用,可能与青蒿油-1中酮类、醚类、有机酸类具有较强的抗真菌作用(共占总量的8.25％)有关；烯类是挥发油中重要的抗菌成分,青蒿油-2的抗菌作用好于青蒿油-1,可能与青蒿油-2的烯类含量(烯类65.42％)远远高于青蒿油-1(26.49％)有关.
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炉甘石药材及饮片中氧化锌紫外-可见测定方法研究
目的:建立炉甘石药材及饮片中氧化锌的紫外-可见测定方法.方法:应用紫外-可见分光光度法测定9批药材和13批饮片中氧化锌的含量,用锌试剂显色,以标准曲线法计算含量.结果:样品的平均回收率为99.72％,RSD 1.85％.结论:该方法准确、简便,可重复性好,适用于炉甘石药材及饮片的质量控制.
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江西青霉甲醇提取物中的化学成分
目的:研究江西青霉Penicillium jiangxiense发酵菌丝体甲醇提取物的化学成分.方法:应用正相硅胶,Sephadex20,ODS等色谱技术及重结晶等方法分离纯化,通过理化性质和波谱学方法鉴别了化合物的结构.结果:从江西青霉甲醇提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为:尿嘧啶核苷(1),麦角甾醇(2),十八烷酸α-单甘油酯(3),2′-脱氧腺苷(4),胸腺嘧啶脱氧核苷(5),D-甘露醇(6),棕榈酸(7),20-hydroxydammar-24-en-3-one(8),7,22-二烯-3,5,6-三羟基-麦角甾醇(9),烟曲霉酸(10),β-单硬脂酸甘油酯(11),木犀草素(12),烟酸(13).结论:化合物4～13为首次从该真菌中分离得到.
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桔梗的HPLC-ELSD指纹图谱研究
目的:建立桔梗高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)指纹图谱的分析方法,研究不同产地桔梗药材的质量.方法:采用HPLC-ELSD,Welch Materials XB-C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％甲酸溶液,梯度洗脱,流速0.8 mL·min-,柱温30℃,ELSD检测器漂移管温度50℃,氮气流速1.2 L·min-1.结果:建立了12批桔梗的HPLCELSD指纹图谱,共找到16个共有峰,并确定了桔梗皂苷E,桔梗皂苷D3和桔梗皂苷D.结论:该方法具有良好的重复性和稳定性,为有效控制桔梗药材的质量提供了依据.
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通关藤药材C21甾体皂苷类成分特征图谱研究
目的:通过建立通关藤药材C21甾体皂苷类成分的特征图谱,为科学评价药材质量提供理论依据.方法:色谱条件:Sinochrom ODS-BP分析柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温室温,检测波长223 nm,流动相乙腈-0.1％磷酸水溶液(32:68～85:15)梯度洗脱,流速1 mL.min-1.结果:通关藤药材指纹图谱选定了17个共有峰,其中2号峰为通关藤苷A,建立了通关藤药材HPLC指纹图谱共有模式,得到不同产地通关藤药材的相似度数据.结论:建立的指纹图谱重复性好,具有较广泛的应用范围,可用于通关藤药材的HPLC指纹图谱评价其质量.
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复方紫灵胶囊化学成分的UPLC-ESI-QTOF-MS-MS分析
目的:采用超高效液相色谱-电喷雾质谱法对复方紫灵胶囊中化学成分进行分析.方法:运用ACQUITY BEH C18超高效液相色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱；质谱使用ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据；运行时间20 min.结果:通过QTOF-MS-MS正、负离子质谱信息及元素组成分析并结合对照品与相关文献数据对照,共鉴定出30个化合物.结论:该方法对复方紫灵胶囊的成分鉴定提供了一种快速准确的分析方法.
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不同颜色玉兰花瓣挥发油化学成分的GC-MS分析
目的:分析并比较白色与紫色玉兰花瓣挥发油的化学成分.方法:采用水蒸气蒸馏法提取,运用毛细管气相色谱-质谱联用法结合计算机检索对其化学成分进行分析和鉴定,用气相色谱面积归一法测定各组分的相对百分含量.结果:从白色与紫色玉兰花瓣的挥发油中分别分离出37个和41个化合物,分别鉴定出了26个和20个,已鉴定挥发油成分占总挥发油含量分别为83.97％和77.06％.结论:白色与紫色玉兰花瓣挥发油的化学成分通过分析和比较有所不同.
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仙阳壮肾胶囊微生物限度检查的方法学验证
目的:建立仙阳壮肾胶囊的微生物限度检查方法.方法:采用直接接种法和培养基稀释法测定仙阳壮肾胶囊对验证菌株的回收率,并对控制菌检查法进行验证.结果:仙阳壮肾胶囊以直接接种法检查大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌的菌回收率＞70％,采用培养基稀释法检查枯草芽胞杆菌、白色念珠菌的菌回收率＞70％.结论:该方法消除了样品的抑菌性,可用于该品种的微生物限度检查.
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HPLC测定知母-黄芪药对中芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮
目的:建立知母-黄芪中芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮3种有效成分的含量测定方法.方法:采用HPLC,Phenomenex Luna C18(4.8 mm ×250 mm,5μm)色谱柱,加预柱(Security Guard,C18,3.0 mm×4.0 mm,Phenomenex)；以乙腈-0.2％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,柱温30℃,检测波长260 nm.结果:芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮的线性范围分别为36.733 ～550.999 ng,33.376 ～166.88 ng,44.544～ 222.72 ng,相关系数(R2)均＞0.999,平均加样回收率分别为102.47％,102.38％,100.20％,其RSD分别为2.23％,2.86％,2.06％.结论:方法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于知母-黄芪中芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮的含量测定.
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益髓生血颗粒质量标准研究
目的:建立益髓生血颗粒的质量标准.方法:采用TLC对处方中的山茱萸,制何首乌,灸黄芪,当归,补骨脂和砂仁进行定性鉴别；用HPLC测定益髓生血颗粒中马钱苷的含量.结果:薄层图谱斑点清晰,阴性对照无干扰；马钱苷在0.13～0.78μg呈良好的线性关系,平均回收率为101.3％,RSD为2.02％.结论:建立的方法简便,准确,重复性好,精密度高,可用于益髓生血颗粒的质量控制.
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驴胶补血颗粒HPLC指纹图谱研究
目的:建立驴胶补血颗粒的HPLC指纹图谱,为科学评价其质量提供依据.方法:Inertsil ODS2-C18色谱柱,流动相0.1％磷酸-乙腈组成的梯度洗脱液,检测波长215 nm,柱温30℃,流速1.0 mL· min-1,分析时间95 min；对12批样品进行测定,并进行相似度评价.结果:12批驴胶补血颗粒样品的HPLC指纹图谱有25个共有峰,相似度均在0.9以上,符合规定.结论:该方法稳定,可靠,可用于驴胶补血颗粒的质量控制.
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广西产桑椹HPLC指纹图谱研究
目的:采用HPLC建立广西产桑椹的指纹图谱.方法:采用Agilent Zobax C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱；以乙腈(A)-0.1％磷酸(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长360 nm,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃.结果:检测了广西不同来源10批桑椹药材,标定了10个共有峰,相似度较高,建立的桑椹指纹图谱稳定性、重复性好.结论:桑椹HPLC指纹图谱可用于桑椹药材的鉴别及质量控制.
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五味子鲜果不同部位的化学成分比较
目的:比较五味子果实不同部位的化学成分.方法:采用HPLC梯度洗脱法进行比较,Kromasil C18柱,检测波长220,254 nm,流速1.0 mL· min-1,柱温35℃,以6个对照品指认主要色谱峰.结果:五味子水提物、醇提物的HPLC图谱以及五味子果肉、种仁的HPLC图谱有明显差异.结论:醇提物以及果仁中均以木脂素类成分为主,果肉中以极性成分居多.为五味子临床合理应用和五味子鲜果不同部位综合开发利用提供了科学依据.
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HPLC同时测定妇炎康片中芍药苷、丹酚酸B、小檗碱
目的:建立同时测定妇炎康片中芍药苷、丹酚酸B及小檗碱的含量测定方法.方法:采用HPLC,PhenomenexLuna C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(含0.1％磷酸)为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1；检测波长230,265,286 nm.结果:芍药苷的线性范围为0.077 08 ～0.770 8μg(r=0.999 7),平均回收率为98.87％;丹酚酸B的线性范围为0.1139～1.139 μg(r=0.9999),平均回收率为99.31％;小檗碱的线性范围为0.027 8～0.278 μg(r=0.999 9),平均回收率为100.65％.不同厂家妇炎康片中芍药苷、丹酚酸B、小檗碱的含量差异较大.结论:该方法简便,专属性、重复性好,可作为该制剂中芍药苷、丹酚酸B及小檗碱的含量测定方法.
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大蓟生品及炭品中多糖不同提取方法的比较
目的:通过对几种不同的提取多糖方法的比较研究,寻找提取大蓟生品及炭品多糖效果较好的方法.方法:分别采用水提醇沉法、醇提除杂法、超声辅助法、碱提取法对中药大蓟生品及炭品进行提取,用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量.结果:生品多糖4种方法测定的结果分别为1.587％,1.908％,2.283％,0.112％；炭品多糖测定的结果分别为2.142％,0.425％,2.302％,2.343％.结论:大蓟生品的多糖提取方法是超声辅助法提取的多糖含量较高,差异显著.大蓟炭的多糖提取方法是醇提除杂法提取的多糖含量较高,差异显著.
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青龙衣中二芳基庚烷类成分研究
目的:研究青龙衣中具有抗肿瘤活性的二芳基庚烷类成分.方法:采用硅胶柱色谱和大孔吸附树脂等色谱方法对药材抗肿瘤活性部位即乙酸乙酯部位和氯仿部位进行目的性分离.结果:共分离得到5个二芳基庚烷类化合物.利用核磁共振波谱方法确定了化合物的结构,分别为1-(4′-羟基苯基)-7-(3″-甲氧基-4″-羟基苯基)-4-烯-3-庚酮(1),1-(4′-羟基苯基)-7-(3″-甲氧基-4″-羟基苯基)-5-甲氧基-3-庚酮(Ⅱ),1-(4′-羟基苯基)-7-(3″-甲氧基苯基)-2-羟基-3′,4″-环氧-3-庚酮(Ⅲ),4″-epoxy-1-(4′-羟基苯基)-7-(3″-甲氧基苯基)-3′,4″-环氧-3-庚醇(Ⅳ),galleon(V).结论:其中化合物Ⅰ,Ⅱ为首次从青龙衣中分离得到的线型二芳基庚烷类化合物.
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中西医结合治疗胆汁反流性胃炎96例
目的:观察中西医结合疗法(六味安消胶囊、铝碳酸镁、吗丁啉)治疗胆汁反流性胃炎的临床疗效.方法:将192例符合入选标准的胆汁反流性胃炎患者随机分为观察组和对照组各96例.对照组口服铝碳酸镁、吗丁啉；观察组口服铝碳酸镁、吗丁啉、六味安消胶囊.两组均7d为1个疗程,治疗2个疗程后观察患者隐痛、饱胀、嗳气、反酸苦水等临床症状的改善及临床疗效.结果:观察组治愈率72.92％,总有效率95.83％；对照组治愈率50.00％,总有效率75.00％.治愈率、总有效率两组相比有明显差异(P＜0.05).两组隐痛、饱胀、嗳气、反酸苦水等指标治疗前后比较差异显著(P＜0.05),且观察组改善优于对照组(P＜0.05).两组均未发现明显的不适症状及不良反应.结论:中西医结合疗法(六味安消胶囊、铝碳酸镁、吗丁啉)治疗胆汁反流性胃炎临床疗效显著,不良反应小,可较好地改善临床症状.
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参精煎方治疗慢性疲劳综合征62例
目的:探讨对慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)有效的中医疗法.方法:选取符合纳入标准的CFS患者115例,分为两组；治疗组62例,采用中药参精煎方(由何首乌15 g,人参10 g,枸杞10g,黄芪10 g,女贞子10 g,菟丝子10g,五味子10 g,黄精10 g,淮山药10 g,益智仁15g,合欢皮10g,郁金10 g组成.本院煎药室统一煎煮,真空包装,每袋200 mL,每次1袋,分早晚2次服用).对照组53例,给予金施尔康1片,1次/d,谷维素20 mg,3次/d;连续服药3个月.观察两组神经心理学量表,包括多维疲劳问卷(multidimensional fatigue inventory,MFI-20)、治疗前后精神症状自评量表SCL-90评分、抑郁自评量表(self-rating depression scale,SDS)及焦虑自评量表(self-rating anxiety scale,SAS)等指标.结果:治疗后两组疲劳积分比较,差异有统计学意义(P＜0.01)；治疗组治疗后SCL-90各因子评分及总评分较治疗前降低(P＜0.01)；抑郁自评量表及焦虑自评量表比较,差异均无统计学意义,与治疗前比较,差异均有统计学意义(P＜0.05)；与对照组治疗后比较,差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论:中药参精煎方治疗CFS疗效明显.
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决明山绿茶的临床研究
目的:通过临床试验,考察决明山绿茶对高血压、高脂血症和肝阳上亢引起的眩晕的疗效及对人体的安全性.方法:500例高血压、高脂血症患者采用区组随机、单盲对照方法分成治疗组300例和对照组200例.治疗组使用决明山绿茶,口服,每次1袋,每日3次；对照组高血压病患者使用复方罗布麻片,口服,每次2片,每日3次；高脂血症患者使用绞股蓝总苷片,口服,每次3片,每日3次.疗程4周.结果:治疗组显效率、有效率和总有效率分别为44.67％,47.33％,92％；对照组显效率、有效率和总有效率分别为45.5％,46％,91.5％.结论:决明山绿茶治疗高血压、高脂血症和肝阳上亢眩晕具有较好的临床疗效.本品临床使用安全可靠.
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蚯蚓用于抗血栓的加工方法
目的:为干品蚯蚓的临床应用提供依据.方法:采用冷冻干燥、晒干、不同温度烘干等方法干燥,以溶栓效价的测定为指标.结果:晒干、40℃烘干、40℃减压干燥的效价与冷冻干燥品效价无差异,温度＞50℃则效价显著下降.结论:蚯蚓的干燥方法可确定为晒干或者40℃烘干.
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天龙仿生酶解制备小分子肽优选工艺
目的:优选天龙仿生酶解工艺.方法:采用福林酚比色法测定样品中小分子肽的含量,并以此为指标,分别对胃蛋白酶和胰蛋白酶的加酶量及酶解时间进行考察.结果:加5倍量去离子水,加热至沸腾,放至室温,用稀盐酸调pH 2.0,加入药材质量2.0％的胃蛋白酶,37℃保温振荡2.0h,用10％氢氧化钠溶液调pH 8.0,加入药材质量2.0％的胰蛋白酶,50℃保温振荡4.0h,放至室温,离心(5000r·min-1 ×5 min),分离上清液,微滤(0.22 μm),超滤,收集相对分子质量＜3000的滤液.结论:所优选的仿生酶解工艺稳定.
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丹葛滴丸大孔树脂精制工艺
目的:对大孔树脂富集纯化丹葛滴丸的工艺条件及参数进行优化.方法:以丹酚酸B、葛根素含量为指标,考察大孔树脂对其的吸附性能和洗脱参数.结果:终确定纯化工艺为采用AB-8型大孔树脂,树脂用量为药材2倍,树脂径高比1:6,流速1 BV.h-1上样,5 BV pH 4盐酸水溶液洗脱弃去,3 BV 50％乙醇洗脱收集.结论:用大孔树脂对丹葛滴丸进行精制,工艺简单可行,分离效果好,减少了纯化固形物的量,从而降低服用量.
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正交设计联用星点设计-效应面法优化染料木素胶束制备工艺
目的:优化改良的自乳化溶剂挥发法制备染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束的制备工艺.方法:先采用正交设计进行处方的初步筛选,确定主要影响因素.再采用星点设计-效应面法进一步优化处方,以染料木素在有机相中浓度、MePEG-PLGA在有机相中浓度、水相和油相体积比为考察因素,以包封率、载药量和平均粒径为考察指标,对结果进行多元线性回归及二项式拟合,经效应面法预测较佳工艺条件.结果:正交设计和星点设计-效应面法联用后得到的优化处方制备的样品包封率为84.43％,载药量为2.63％,平均粒径为63.7 nm.结论:正交设计联用星点设计-效应面法可以准确快速的优化染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束的制备工艺,所建立的数学模型具有较好的预测能力.
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多指标综合评分法考察金银花连翘药对佳提取工艺
目的:确定金银花连翘药对的佳提取工艺.方法:以绿原酸、木犀草苷、槲皮素和连翘脂素为考察指标,采用综合评分法,对采用乙醇回流的提取时间、提取次数、溶剂浓度和用量进行考察.结果:金银花连翘药对的佳提取工艺为8倍量60％乙醇提取3次,每次提取2h.结论:本结果可为金银花连翘药对的提取工艺研究提供参考.
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NKA-9型大孔树脂纯化蟾皮总生物碱工艺
目的:建立NKA-9型大孔树脂纯化蟾皮总生物碱的工艺条件.方法:以蟾皮总生物碱含量(5-羟色胺计)作为考察指标,优化NKA-9型大孔树脂吸附与解析的工艺条件.结果:优选出的佳纯化工艺为NKA-9型大孔树脂在25℃进行吸附,样品溶液pH 9,上样量为4 BV,吸附时间为8～10h,先用6 BV水洗,然后用3 BV70％的乙醇洗脱.结论:该工艺可用于蟾皮总生物碱的纯化.
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均匀设计法优选坤安颗粒提取工艺
目的:优化坤安颗粒的提取工艺.方法:采用均匀设计法安排试验,以加水倍量、提取时间和提取次数为主要考察因素,以芍药苷提取率及出膏率为考察指标,多指标综合评分法优化水提取工艺；以加醇体积分数、提取次数、加液倍量和提取时间为主要考察因素,以总黄酮提取量及出膏率为考察指标,多指标综合评分法优化醇提取工艺.结果:确定水提取条件为每次加12倍水,提取2次,每次1.5h；醇提条件为加入9.6倍量30％乙醇,提取3次,每次提取2h.结论:该提取工艺合理、稳定、可行.
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中医药治疗糖尿病临床证治研究概况
对中医药治疗糖尿病的临床证治情况进行整理和介绍.通过对中国知网27篇近期文献进行分析,从病因病机、辨证论治(传统按三消辩证论治；按阴阳气血失调分型论治,脏脏病机分型论治,以主要病邘分型论治等)、专方治疗以及治疗机制等方面对近年来中医药治疗糖尿病的临证认识进行归纳总结.中医药治疗糖尿病必须遵从的根本原则,临床上治疗糖尿病不能拘泥于养阴清热之法,切不可仅见消渴就投以滋阴清热之品,糖尿病程长,并发症多,其病机需以整体观念动态把握,在以燥热、痰湿、瘀血标实为主要矛盾时,应先解决主要矛盾,既要辨病更要辨证.
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寒热中药外用治疗口腔溃疡的文献回顾与思考
目的:通过文献查阅及整理,对寒热中药外用治疗口腔溃疡进行回顾与思考.方法:以CNKI,VIP数据库为依据,以口腔溃疡、中药外用、复方、临床研究、药理研究等为关键词,查阅数据库中近10年的相关文献,对单味药及复方中药治疗口腔溃疡的情况进行整理和分析.结果:外用治疗口腔溃疡的寒凉中药包括草珊瑚、青黛、白及、枯矾；温热中药包括细辛、吴茱萸、丁香、蜈蚣.复方中药主要有溃疡散、冰硼散、双黄连粉等,其方法以局部涂抹、穴位贴敷为主.结论:从寒热药性角度,对中药外用治疗口腔溃疡的文献进行系统分析,将为临床治疗口腔溃疡提供参考.
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附子白及同方配伍规律与应用条件探析
目的:附子、白及配伍规律与应用条件的研究.方法:在“中国中医药数据库”84 464首方剂中,共检索出含附子白及处方27首,对其主治、病机、配伍规律进行分析.结果:发现处方一致的病机是阳虚寒凝,瘀血阻滞.配伍规律是温阳散寒,开通道路,乌附为君；祛腐生肌敛疮,白及、白蔹为通用药；祛风解表,白芷、防风为首；活血化瘀,以当归、川芎为先；调畅气机,以木香、杏仁常用；清热解毒,以大黄、黄芩为佐.推测祛风散寒与活血化瘀药物能缓解附子、白及配伍产生的毒副作用,白芷与当归可能是附子、白及配伍的“解毒药”.结论:附子、白及并非绝对的相反,在一定配伍条件下可以应用.
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中国民族药的专利保护分析
目的:研究国内6家代表性民族药企业及其部分主打产品专利的申请量、类别、授权率等,分析民族药的知识产权保护现状,为我国民族药产业发展提出建议.方法:运用中外专利搜索引擎Soopat数据库,检索6家代表性民族药企业(奇正藏药集团有限公司、内蒙古蒙药股份有限公司、新疆维吾尔药业有限责任公司、贵州益佰医药有限责任公司、云南傣药有限公司、云南白药集团股份有限公司)及其主打产品(奇正藏药的奇正消痛贴膏、贵州益佰的镇痛活络酊、云南白药的云南白药气雾剂)的专利申请状况,数据截止专利申请公开或公告日为2011年3月10日.结果:民族药企业专利申请参差不齐,近年来专利申请量增加迟缓；部分主打产品专利质量高,发明专利比率大；民族药产业发展离不开知识产权尤其是专利的保护.结论:知识产权保护特别是专利制度在民族药发展中占有举足轻重的作用,民族药生产企业需加强专利申请意识,充分运用专利保护制度,注重专利战略和专利结构类型,抓住“十二五”知识产权政策优势,努力发展成为产业链,增强经济实力,为民族药走向世界做出贡献.
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达玛烷型三萜皂苷结构修饰研究进展
对达玛烷型三萜皂苷的结构修饰及其构效关系等方面研究成果进行了文献整理和介绍.在中国知识网(CNKI)学术文献总库和Medline数据库中,对近20年达玛烷型三萜皂苷的结构修饰进行检索,针对化学法、生物转化法、组合化学法等3种修饰方法及构效关系进行了综述,通过对玛烷型三萜皂苷进行结构修饰、结构优化,改善了玛烷型三萜皂苷的理化性质,提高了生物活性,提高了生物利用度,降低了毒副作用.不仅扩大了其临床应用的范围,还可以获得众多新化合物,供生物活性筛选,为充分利用玛烷型三萜皂苷类化合物提供理论依据,玛烷型三萜皂苷类化合物及其衍生物将发挥着更加重要的作用.
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支架血栓症及其中药防治研究
研究表明,血管内介入治疗技术较简单药物治疗效果好,和外科血管搭桥术相比创伤明显减小,已在心脑血管疾病领域得到广泛应用.从经皮冠状动脉腔内成形术、裸金属支架到药物洗脱支架,支架内再狭窄问题已控制在可接受的范围.然而,支架置入术后并发症“支架血栓症”却困扰着药物洗脱支架的发展.抗血栓治疗、选择合适的支架类型和操作技术、开发新型支架和抗血栓药物、注意冠心病二级预防是预防支架内血栓形成的关键.该文主要对支架血栓症的形成原因、机制、防治(抗血小板、抗凝、溶栓)的新研究进展及中药在其中的潜在应用进行探讨,以期为血管药物洗脱支架血栓症的防治及中医药在其中的应用提供一定的参考.
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酸枣仁-五味子药对不同配比的中医应用数据分析
目的:应用统计分析方法探究酸枣仁与五味子不同配伍比例的方剂与疾病科属的关系.方法:从《中医方剂大辞典》中检索出含酸枣仁与五味子的262首方剂,建立数据库,对其配伍比例、主治疾病以及疾病所属科属进行统计分析.结果:在含有酸枣仁、五味子的262首方剂中,两者剂量以1∶1配比的方剂出现的频次多,占总数的46.95％；所治疾病科属以内科的方剂出现的频率高,为66.41％.结论:运用频次统计等数据分析方法,能有效发现中医临床治疗疾病的用药规律,为临床遣方用药提供理论依据.
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新型载体经皮凝胶剂的研究进展
目的:对几种新型载体在经皮凝胶剂中的研究与应用进行文献整理和归纳.方法:通过查阅近20年经皮凝胶剂的相关文献,阐述几种新型载体的含义、特点及其凝胶剂经皮给药的实验性研究,比较它们与其他剂型经皮吸收的效果,归纳总结了几种新型载体凝胶经皮给药的研究近况,并提出了其在中药复方凝胶剂中的应用思路.结果:新型载体凝胶剂相对于普通凝胶剂及其他经皮给药剂型,有更强的渗透皮肤能力,能提高药物的稳定性,具有缓释性和靶向性.结论:目前,新型药物载体在经皮凝胶剂中的运用主要集中在几种常用载体和治疗皮肤疾病的药物上,随着研究的深入,必将拓宽到更多的新型药物载体和治疗非皮肤疾病的药物.新型载体凝胶剂给改善中药复方外用制剂带来启发和思考并有望在中药复方新剂型中得到应用.
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中医药调治亚健康失眠概况
亚健康状态普遍存在,是当今社会威胁人类健康的隐形杀手,调查表明75％的人处于亚健康状态,而失眠又占其中的42.5％.西医针对亚健康失眠多使用镇静催眠药物,甚则运用抗精神类药物达到睡眠的生理要求,此类药物会引起日间困倦和认知功能的损害,并会产生耐药性和依赖性.祖国医学对亚健康的认识结合了“治未病”的观点,强调未病先防,既病防传的理论.中医药治疗亚健康失眠的优势在于可根据中医辩证分型,采用不同方药论治,针对性强,因而取得了较为满意的疗效；且治疗手段多样,包括针灸、耳穴、心理干预、气功等.适当的联合运用或可获得可喜的疗效.用中医养生保健理念纠正不良睡眠习惯,保持健康的生活方式对预防亚健康失眠起到重要作用.应加强多中心大样本的临床研究,以加深对亚健康失眠的证候分布及辩证规律的认识,从而进一步丰富和完善中医学对亚健康失眠的诊治理论和治疗手段.
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胃舒散中重金属铋在大鼠体内药代动力学研究
目的:通过研究胃舒散中重金属铋在大鼠血液中的分布代谢情况,为研究该物质在体内的蓄积情况提供实验依据.方法:取健康大鼠,灌服胃舒散混悬液,分别于给药前及给药后5,10,15,20,25,30,40,60,120,180,240 min尾静脉采血.用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测铋含量,进行分析.结果:测得数据显示铋的血药浓度在0.5h左右达到高峰,达峰浓度在15 μg·L-1左右,然后快速下降,7h降至较低水平.铋在大鼠体内的吸收半衰期14.691 min,消除半衰期293.422 min,铋在大鼠体内的血浆药物总清除率1 571.044 L·min-1·kg-1.AUC 2 063.515 μg·L-1·min-1.结论:铋在大鼠体内的药代动力学模型符合一房二室模型.
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岭南草药粪箕笃的性状和显微鉴定
目的:对岭南民间草药粪箕笃Stephania longa Lour.进行基源鉴别、药材性状描述和茎叶结构及药材粉末特征的显微鉴定.方法:采用经典生药学方法进行基源鉴别和药材性状描述；以常规石蜡切片、临时水装片及水合氯醛粉末透化片对其显微结构进行鉴定分析.结果:粪箕笃的药材和显微特征主要有:叶盾状着生,叶背常为粉白色,叶柄长,基部常扭曲.茎有棱,外侧表皮细胞栓质化增厚,维管束外韧型,韧皮部外纤维连成一花环状.叶肉栅栏组织短,细胞2列,在叶脉附近易见细小草酸钙柱晶或方晶.下表皮细胞垂周壁弯曲,其上多数细胞乳头状突起,气孔不定式,副卫细胞4～6个.结论:本实验可为粪箕笃的药材鉴定及质量标准的制定提供科学依据.
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太空诱导对丹参不同生长阶段生理特性的影响
目的:探讨太空诱导对丹参不同生长阶段的生理生化特性的影响.方法:考察了航天搭载后丹参不同生长期叶片中的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白的含量变化以及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,并同时与地面对照组丹参进行比较.结果:搭载后丹参的光合色素含量增加明显,花前期不同部位叶绿素含量平均增加28.5％,可溶性糖的含量平均减少近42％,且可溶性糖含量与叶绿素含量呈负相关；CAT,SOD的活力均高于地面对照组.结论:航天搭载对丹参的光合特性和生理生化方面产生影响,能够显著提高其光合作用,增强CAT,SOD的活力.
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补肾法治疗慢性阻塞性肺病疗效的系统评价
目的:系统评价中医补肾法在治疗慢性阻塞性肺病中的疗效.方法:检索中医补肾法治疗慢性阻塞性肺病的随机临床研究,进行Meta分析.结果:纳入1 011名受试者在内的随机对照试验19个,Jadad评分4个1分,4个3分,5个2分,9个1分,5个研究为B级,14个研究为C级.Meta分析异质性检验中,中西医治疗vs西医治疗有效率x2=10.88,P=0.76,中医治疗vs西医治疗x2 =0.10,P=0.95,说明不存在异质性；中西医治疗vs西医治疗合并后OR=3.98,95％ CI[2.85-5.54],说明中西医结合治疗的疗效优于单纯西医治疗；中医治疗vs西医治疗OR=1.82,95％ CI[0.97-3.41],说明中医治疗的临床疗效不弱于西医治疗.结论:现有临床研究证据表明中西医结合治疗慢性阻塞性肺病疗效优于单纯西医治疗组,谨慎的认为单纯中医治疗慢性阻塞性肺病的临床疗效不弱于单纯西医治疗.
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“积淀雄厚丰硕创新”——记山东中医药大学方剂学科团队
山东中医药大学方剂学科始建于1958年,为山东省“十一五”和“十二五”重点建设学科,山东省重点实验室——中医经方工程中心依托学科,国家教学实验示范中心和山东省品牌专业中医学主要依托学科,中医学博士后工作站覆盖学科.本学科以博士为主,年龄与知识结构合理的学术梯队,现有专职教研人员27人,其中教授10名,副教授6名,讲师11名;博士生导师5名,硕士生导师6名;具有博士学位者17名,硕士学位者6名;所学专业有方剂学、中医文献学、中医内科学、中医临床基础、生物化学等.教授和博士所占比例超过50％,学术团队强大,学缘结构合理.其中有全国优秀教师、山东省优秀教师、山东省名中医药专家等.学科成员学术背景不同,知识结构互补,适应现代学科发展需要,具有强劲的发展潜力.学科始终将高层次人才培养作为学科建设的重要内容,并构建了本学科硕士、博士二级学位教育教学体系.已培养博士11名,硕士23名,博士后2名.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
