中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位: 国家中医药管理局
- 主办单位: 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子: 1.62
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1005-9903
- 国内刊号: 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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止哮平喘方对哮喘大鼠肺组织EOS凋亡及Fas,Bcl-2基因表达的影响
目的:观察止哮平喘方对哮喘大鼠肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡及Fas,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bc1-2)mRNA表达的影响,探讨止哮平喘方影响哮喘大鼠肺组织EOS凋亡的机制.方法:SD大鼠60只,随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组(1 mg·kg-1·d-1)、止哮平喘方低、中、高剂量组(11,22,44 g·kg-1·d-1),每组10只.采用卵蛋白(OVA)致敏和激发复制哮喘大鼠模型,共治疗14 d.取右中肺组织4%多聚甲醛固定,石蜡切片,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肺组织EOS凋亡,原位杂交检测Fas,Bcl-2 mRNA的表达.结果:与正常组比较,哮喘模型组大鼠肺组织中EOS的数量较多,EOS凋亡减少,同时FasmRNA表达明显降低、Bcl-2 mRNA的表达明显增加(P<0.01).药物干预后,各治疗组EOS凋亡增加,Fas mRNA表达增加、Bcl-2 mRNA表达降低(P<0.01或P<0.05).Fas mRNA表达与EOS凋亡呈正相关(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达与EOS凋亡呈负相关(P<0.01).结论:止哮平喘方可促进肺组织Fas mRNA表达、抑制Bcl-2 mRNA的表达,促进肺组织EOS凋亡,减轻气道炎症,从而发挥平喘作用.
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沙枣总酚抗炎作用研究
目的:研究沙枣总酚的抗炎作用及其急性毒性.方法:昆明种小鼠60只随机分为模型组、阿司匹林组(200 mg·kg-1),沙枣总酚低、中、高剂量组(90,180,360 mg· kg-),检测药物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响;SD大鼠180只随机分为模型对照组,阿司匹林组(165 mg·kg-1),沙枣总酚低、中、高剂量组(75,150,300 mg· kg-1),分别采用角叉菜胶致大鼠足肿胀模型、大鼠毛细血管通透性模型以及大鼠棉球肉芽肿模型观察沙枣总酚的抗炎作用;采用大耐受量(MTD)测定其急性毒性.结果:与对照组相比,沙枣总酚对二甲苯所致小鼠耳肿胀有显著性抑制作用(P<0.05),其低、中、高剂量组的抑制率分别为31.30%,33.44%和49.75%;对角叉菜胶致大鼠足肿胀有显著抑制作用(P<0.01)并呈剂量依赖性;对大鼠棉球肉芽肿有明显抑制作用(P<0.01),其低、中、高剂量组的抑制率分别为17.86%,32.87%和42.24%;并能显著减少大鼠毛细血管渗出(P<0.01);其大耐受量为160 g·kg-1.结论:沙枣总酚具有一定的抗炎活性,其急性毒性小.
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银杏叶总黄酮正交提取工艺优化及其抗氧化能力与抑制亚硝化反应研究
目的:测定银杏叶总黄酮抗氧化能力、对亚硝酸盐的清除能力及对亚硝胺合成的抑制能力.并考察各指标相关性.方法:正交设计试验确定从银杏叶中提取黄酮类物质的佳条件,测定0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,2.0 g·m-1银杏叶总黄酮总抗氧化能力血浆铁还原能力(FRAP),二苯代苦味酰基自由基(DPPH·自由基)清除率,亚硝酸盐清除率及对二甲基亚硝胺(NDMA)阻断作用.结果:浸提温度80℃,浸提lh,乙醇浓度75%,料液比1:15是提取银杏叶总黄酮的佳条件,提取率为8.86%.总抗氧化能力和DPPH·清除率随总黄酮质量浓度增高而增强;对亚硝酸盐有很强的清除作用并能阻断亚硝胺的合成,和总黄酮质量浓度成正相关.结论:银杏叶总黄酮有很强的抗氧化及清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的能力.
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柴胡-白芍不同比例配伍应用的抗惊厥作用
目的:观察柴胡-白芍不同比例配伍应用对实验性惊厥小鼠的影响.方法:将雄性昆明种小鼠随机分为7组,即模型组(A),阳性药对照组(B),柴胡-白芍2∶1组(C),柴胡-白芍1∶1组(D),柴胡组(E),白芍组(F),柴胡-白芍1∶2组(G).模型组给予等量生理盐水,阳性药对照组用量为苯妥英钠0.025 g·kg-1或地西泮0.004 g·kg-1,柴胡-白芍不同比例配伍组用量为10.4 g·kg-1,各组小鼠连续ig给药7d,末次给药60 min后造模,观察各用药组对小鼠大电惊厥(MES)模型、戊四氮模型、士的宁模型及匹鲁卡品模型的阵挛潜伏期、强直潜伏期、死亡潜伏期及死亡数的影响.结果:与A组相比较,在MES模型中,B,F组可以显著降低惊厥发生率(P<0.05);在戊四氮模型中,B,C,D组均能显著延长实验小鼠的阵挛潜伏期、强直潜伏期(P<0.05),B,C组能显著延长实验小鼠的死亡潜伏期(P<0.05);在士的宁模型中,B组能够显著延长实验小鼠的阵挛潜伏期、死亡潜伏期(P<0.05),其余各组对实验小鼠的阵挛潜伏期、死亡潜伏期,无显著影响;在匹罗卡品模型中,B,C,D,E,G组均能显著延长实验小鼠的死亡潜伏期(P<0.05).结论:柴胡-白芍配伍应用具有良好的抗惊厥的作用,其抗惊厥作用优于单用柴胡或白芍,其中以柴胡-白芍2∶1配伍比例的抗惊厥作用好.
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滋水清肝饮对乳腺癌内分泌治疗不良反应的影响
目的:探讨滋水清肝饮对内分泌治疗后的去卵巢大鼠血清雌激素、血脂及子宫内膜厚度的影响.方法:去卵巢大鼠用来曲唑(0.23 mg·kg-1)建立乳腺癌患者内分泌治疗的类更年期症状模型;大鼠随机分为5组:假手术组、模型对照组、阳性药组(莉芙敏0.026 g·kg-1)、滋水清肝饮(11.28,45.10 g·kg-1)组,去卵巢术后2周开始ig给药,1次/d,连续6周.每7天测量大鼠体重.给药6周后腹主动脉取血,检测雌二醇(E2)、孕酮(内膜厚度PRO)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,镜下观察子宫内膜厚度.结果:滋水清肝饮高、低剂量组体重均低于模型组(P<0.05);滋水清肝饮高剂量组E2,PRO较模型组降低(P<0.05);.滋水清肝饮高剂量组CHO,TG显著降低(P<0.05),高剂量组明显升高LDL-C;滋水清肝饮和莉芙敏组的子宫内膜厚度与模型组无明显差别.结论:滋水清肝饮可以改善内分泌治疗的去卵巢大鼠的血脂,并不会引起雌激素水平的升高和子宫内膜增厚.
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合欢花总黄酮对抑郁模型大鼠海马CA3区BDNF和TrkB表达的影响
目的:观察合欢花总黄酮对抑郁模型大鼠海马CA3区脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)表达的影响.方法:将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸文拉法辛组(12.5 mg·kg-1)、合欢花总黄酮(100,50,25 mg·kg-1)剂量组.应用孤养加慢性不可预见性应激建立抑郁症模型,造模同时ig给药,每天1次,连续给药21 d,正常组、模型组ig等体积蒸馏水.用Morris水迷宫法测定各组大鼠学习记忆能力,免疫组织化法检测大鼠海马CA3区BDNF及TrkB表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠Morris水迷宫试验逃避潜伏期时间增加、成功次数减少(P <0.05,P<0.01);海马CA3区BDNF及受体TrkB的表达降低(P<0.01).与模型组比较,盐酸文拉法辛组、合欢花总黄酮3个剂量组Morris水迷宫试验逃避潜伏期时间缩短、成功次数增加(P< 0.05或P<0.01),海马CA3区BDNF及受体TrkB的表达明显增高(P<0.05或P<0.01).结论:合欢花总黄酮能够提高抑郁模型大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与增加抑郁模型大鼠海马CA3区BDNF及其受体TrkB的表达,进而保护海马神经元有关.
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铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响
目的:考察铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂、炎症相关蛋白的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饲喂养4w构建AS小鼠模型,分别用辛伐他汀(3 mg·kg-1)、铁皮石斛(1.5,3 g·kg-1)对小鼠灌胃给药,8w后处死,酶法检测血清血脂;ELISA检测血清中TNF-α,IL-6表达;苏丹Ⅳ染色观察主动脉瓣处斑块形成情况;HE和油红0染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块;免疫组化法检测TNF-α和IL-6在主动脉壁的表达.结果:铁皮石斛可显著降低小鼠血清中TG,TCHOL,LDL-C水平,下调血清中TNF-α,IL-6表达;可明显减少ApoE-/-小鼠主动瓣处粥样斑块的面积和ApoE-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积,可明显降低TNF-α,IL-6在主动脉内表达.结论:铁皮石斛能有效降低ApoE-/-小鼠血清中有关脂质含量,降低血清和主动脉内TNF-α,iL-6的表达,降低炎症反应的发生,缓解动脉粥样硬化损伤.
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菟丝子总黄酮对过氧化氢损伤的血管内皮细胞的保护作用
目的:探讨菟丝子总黄酮对H202损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:于37℃、5% CO2、95%空气饱和湿度的培养箱内体外培养内皮细胞,将细胞分为4组,即正常对照组:加入DMEM培养液(pH 7.2 ~7.4)、菟丝子对照组(菟丝子0.5mg·L-1)、模型组(过氧化氢终浓度为200 mmol·L-)、菟丝子+过氧化氢组(菟丝子0.5mg· L-1,过氧化氢200 mmol·L-),研究菟丝子总黄酮对受损血管内皮细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)释放情况、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及对细胞形态学的影响.结果:菟丝子总黄酮(0.5 mg·L-1)能明显减轻H2O2对HUVECs所致的氧化损伤,可明显改善氧化损伤的HUVECs形态学变化,H2O2模型组(200 mmol·L-)与空白组比较,LDH释放和MDA含量显著升高(P<0.01,P<0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著下降(P<0.01),菟丝子(0.5mg·L-1)+ H2O2(200 mmol·L-1)组与H2O2模型组(200 mmol·L-1)比较,LDH释放和MDA含量显著下降(P<0.01,P<0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著升高(P<0.01).结论:菟丝子总黄酮对H202诱导的HUVECs的损伤具有保护作用.
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复方川贝颗粒对OVA介导的豚鼠过敏性哮喘模型的平喘作用机制研究
目的:探讨复方川贝颗粒对豚鼠哮喘模型的平喘作用机制.方法:70只豚鼠,随机分为7组,每组10只,雌雄各半,即模型组,复方川贝颗粒(0.67,1.34,2.68)g·kg-1组,二陈丸组(2.325 g·kg-1),地塞米松组(9.30×10-4 g·kg-1),正常对照组;试验开始第1天,豚鼠ip10%卵白蛋白(OVA)生理盐水溶液致敏,致敏后第13天灌胃给药,每日1次,给药7d,各组均按体重ig,模型组和正常对照组给予等容积蒸馏水,15 d后用1%卵白蛋白生理盐水溶液激发5次,每日1次,建立豚鼠过敏性哮喘模型,观察复方川贝颗粒对哮喘豚鼠血清中血栓素B2(TXB2)、白三烯B4(LTB4)的含量、哮喘潜伏期及肺部病理切片嗜酸粒细胞(EOS)计数.结果:与正常对照组比较,模型组豚鼠血清中的TXB2,LTB4含量明显升高(P<0.01),EOS明显增多(P<0.01).与模型组比较,复方川贝颗粒(1.34,2.68 g·kg-1)均能降低哮喘豚鼠血清中的TXB2,LTB4含量(P <0.05,P<0.01);复方川贝颗粒(0.67,1.34,2.68 g·kg-1)剂量均能减少哮喘豚鼠小气道周围EOS总数(P<0.01),延长豚鼠哮喘潜伏期(P <0.05,P<0.01).结论:复方川贝颗粒对OVA介导的豚鼠过敏性哮喘模型的平喘作用机制与调节血清炎性介质和减少EOS浸润有关.
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荔枝核总黄酮对大鼠肝纤维化TGF-β/Smad信号通路的影响
目的:观察荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的肝纤维化大鼠肝脏组织转移生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路中关键信号传导分子TGF-β1,Smad3,Smad7表达水平的变化,探讨TFL抗纤维化的作用机制.方法:SD大鼠ip DMN 4周建立大鼠肝纤维化模型,以ig水飞蓟宾为阳性对照50 mg· kg-1组,用不同剂量的TFL(400,200,100 mg·kg-1·d-1)ig给药,造模当日开始分组给药,每日1次,共给药6周.于实验第6周末处死大鼠,抽取下腔静脉血检测天冬氨酸转氨酶(AST),丙氨酸转氨酶(ALT),留取肝脏同一部位行HE,Masson染色观察大鼠病理改变及肝纤维化程度,采用RT-PCR法检测TGF-β1,Smad3,Smad7 mRNA的表达.结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的肝纤维化程度明显增加,血清AST,ALT均显著升高,肝组织TGF-β1,Smad3 mRNA的表达明显增强(P<0.05),Smad7 mRNA的表达显著减弱(P<0.05);与模型组比较,TFL各剂量组和水飞蓟宾组血清AST,ALT均明显低于模型组,肝脏TGF-β1,smad3的表达明显降低(P<0.05),而smad7则有所升高.结论:荔枝核总黄酮可减轻实验性大鼠肝损伤及改善肝纤维化程度,其作用机制可能与抑制TGF-β1,Smad3 mRNA的表达,上调Smad7 mRNA的表达有密切关系.
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异甘草素与光甘草定抗肿瘤转移作用比较
目的:观察异甘草素和光甘草定对肿瘤细胞体外迁移能力以及血管内皮细胞管腔形成能力的影响,比较2种药物的抗肿瘤转移能力.方法:以20,40,60,80,100,120μmol·L-异甘草素和光甘草定作用于小鼠黑色素瘤B16F1细胞和血管内皮细胞(ECV304),干预48 h,磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖.划痕实验评价B16F1和ECV304细胞体外迁移能力,明胶酶电泳和酶联免疫法(ELISA)测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的活性和表达量,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色以及血管内皮细胞管腔样结构形成实验评价血管新生能力.结果:异甘草素和光甘草定均能显著抑制B16F1细胞和ECV304细胞增殖,且呈明显的剂量依赖性,但光甘草定对B16F1细胞的抑制率低于异甘草素.80 μmol·L-时,异甘草素与光甘草定的愈合面积分别为19.1%和27.2%,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),药物组与对照组相比均能降低基质金属蛋白酶-2(MM P-2)分泌与表达,药物组能显著降低血管内皮细胞迁移和管腔形成能力.光甘草定对B16F1细胞迁移,MMP-2分泌与表达,以及对ECV304细胞官腔形成的抑制能力低于异甘草素.结论:异甘草素和光甘草定都均具有抗肿瘤转移活性,80μmol·L-时,光甘草定抗肿瘤转移作用弱于异甘草素.
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生肌象皮膏对糖尿病大鼠溃疡肉芽组织中白介素-2与肿瘤坏死因子-α的影响
目的:探讨生肌象皮膏促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合的免疫-炎症反应机制.方法:将Wistar大鼠随机分成4组,一组为正常对照组,其余3组采用链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射制备糖尿病动物模型,4组动物均于背部打孔,造成溃疡模型.3组糖尿病溃疡大鼠按照血糖和体重分层随机分为糖尿病对照组、凡士林组、生肌象皮膏组.生肌象皮膏组外用生肌象皮膏纱条外敷,凡士林组用凡士林纱条外敷,正常对照组、糖尿病对照组均以生理盐水纱条外敷,观察血清白介素-2(IL-2)水平与创面组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化.结果:生肌象皮膏组大鼠糖尿病溃疡刨面的愈合速度加快,与糖尿病对照组比较于第7,14,21,30天有显著性差异;生肌象皮膏组大鼠血清IL-2水平与糖尿病对照组比较于第21,30天降低,有显著性差异,与凡士林组比较第21,30天降低,有显著性差异;生肌象皮膏组大鼠创面组织TNF-α mRNA表达水平与糖尿病对照组比较于第21,30天降低,有显著性差异,与凡士林组比较第21,30天降低,有显著性差异.结论:生肌象皮膏可以促进糖尿病大鼠溃疡创面的愈合与调节免疫-炎症反应密切相关.
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复方扶芳藤合剂含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞Notch信号通路的影响
目的:观察复方扶芳藤合剂含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Notch信号通路的影响.方法:采用全骨髓贴壁法分离纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞;制备复方扶芳藤合剂含药血清,将30只SD大鼠随机分为2组,每组随机15只,分别为ig复方扶芳藤合剂2 g·kg-1 ·d-1 ig的药物干预组和生理盐水2 mL·kg-1·d-1ig的阴性对照组.取10%的含药血清及阴性对照组血清分别干预大鼠BMSCs,采用RT-PCR方法检测Notch1,Jagged1,Hes1 mRNA表达变化;采用免疫细胞化学法检测Notch1,Jagged1表达变化.结果:RT-PCR显示药物干预组Notch1,Jagged1,Hes1的mRNA表达水平均高于阴性对照组(P<0.05),免疫细胞化学显示药物干预组Notch1,Jagged1蛋白表达均高于阴性对照组(P<0.05),差异有统计学意义.结论:复方扶芳藤合剂含药血清可以引起大鼠BMSCs Notch信号通路上的关键基因和蛋白表达上调,激活Notch信号通路.
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山麦胶囊对肾性高血压大鼠肾内小动脉血管重构的影响
目的:探讨山麦胶囊对肾性高血压大鼠肾内小动脉血管重构的影响.方法:建立“两肾一夹”肾性高血压大鼠模型,随机分为模型对照组8只,卡托普利组(0.007 g·kg-1)8只,山麦胶囊高剂量组(1.8 g·kg-1)8只,中剂量组(0.9 g·kg-1)7只,低剂量组(0.45 g·kg-1)6只;另设假手术组10只.于造模第5周开始每日灌胃给药,定期测定大鼠尾动脉收缩压(SBP),给药4周后处死大鼠,酶联免疫法测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和内皮素(ET)含量,组织切片图像分析法评价肾内小动脉重构指标及其形态改变.结果:经肾动脉缩窄术后大鼠血压显著增高(P<0.01).与模型对照组比较,山麦胶囊呈可逆性及浓度依赖性地降低肾性高血压大鼠的血压、血浆中AngⅡ和ET含量及肾内小动脉中层厚度(Mt),同时增加血管腔径(RAD)和腔面积(Lcsa),差异有统计学意义(P <0.01,P<0.05).结论:山麦胶囊可以有效预防肾性高血压大鼠肾内小动脉血管重构,该作用可能与其降压作用及拮抗体内AngⅡ和ET水平有关.
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解表方通过调节黏膜免疫保护上呼吸道感染模型小鼠的研究
目的:观察解表方对上呼吸道黏膜免疫的作用.方法:复制寒冷刺激致上呼吸道黏膜免疫功能低下小鼠模型,观察解表方对模型小鼠唾液中分泌型免疫球蛋白A(S-IgA)含量和溶菌酶活性的影响;对模型小鼠进行滴鼻、腹腔注射感染肺炎链球菌,观察解表方对其死亡率和生存时间的影响;采用琼脂打孔法进行解表方体外抑菌实验,探讨解表方防治上呼吸道感染的作用.结果:麻黄汤、银翘散均能提高模型小鼠唾液中SIgA含量和溶菌酶活性,而玉屏风散仅能升高小鼠唾液中溶菌酶活性;麻黄汤和银翘散能降低滴鼻感染肺炎链球菌小鼠死亡率并延长生存时间;但3方对腹腔注射肺炎链球菌小鼠的死亡率没有抑制作用;体外实验证实,3方均无抑菌作用.结论:提高呼吸道黏膜免疫功能可能是解表方防治上呼吸道感染的作用机制.
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从线粒体途径探讨凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α致肝细胞凋亡的保护作用
目的:从线粒体途径探讨凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和D-氨基半乳糖(D-GaIN)所致肝细胞凋亡的保护作用.方法:体外培养人正常肝L02细胞,用TNF-α(100 μg·L-1)和D-GaIN(44 mg·L-1)诱导肝细胞损伤模型,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;采用细胞增殖实验(MTT)法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染色法结合高内涵细胞成像系统检测肝细胞凋亡;罗丹明123(Rh123)染色结合高内涵分析系统检测线粒体跨膜电位;Western-blot检测线粒体途径凋亡标志蛋白凋亡蛋白酶激活因子(Apaf-1)、细胞凋亡诱导因子(AIF)、胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9)表达水平的变化.结果:与正常对照组相比,TNF-α和D-GalN可明显抑制L02肝细胞增殖,诱导细胞凋亡,使细胞线粒体跨膜电位明显下降,并使促凋亡蛋白Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达显著增加.不同浓度的凉血化瘀方作用后,与TNF-α/GalN损伤组相比,可显著减轻L02肝细胞的增殖抑制、减少细胞凋亡,抑制细胞线粒体跨膜电位的下降,并促使凋亡蛋白Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达量呈逐渐下降的趋势.结论:凉血化瘀方对TNF-α和D-GaIN所诱导的肝细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能与稳定线粒体的膜电位和下调促凋亡基因Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达有关.
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补肾填精法促进骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究
目的:探讨补肾填精方右归丸含药血清体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的作用.方法:用DMEM/F-12培养液培养Wistar大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs).用右归丸含药血清诱导BMSCs分化后,倒置显微镜观察细胞形态变化;用尼氏染色法观察神经细胞特征性结构;用免疫细胞化学染色法鉴定神经胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经细胞特异性标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE),微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达.结果:诱导6h后,骨髓基质干细胞胞体收缩,有突起伸出;诱导24 h后突起增多形成网络结构;尼氏染色法显示诱导后的细胞胞体中有尼氏体.免疫细胞化学染色示NSE及MAP-2阳性表达,GFAP无表达.结论:右归丸含药血清可以体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞.
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千金苇茎汤促进撤血清舌鳞癌细胞凋亡机制的研究
目的:探讨千金苇茎汤辅助治疗舌鳞癌的分子机制.方法:体外培养SAS和TCA-8113舌鳞癌细胞,撤除血清模拟体内抗血管生成药物治疗环境,千金苇茎汤3个部位作用撤血清舌鳞癌细胞72 h,MTTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡,ELISA检测细胞培养上清前列腺素E2(PGE2)含量.结果:与撤血清对照相比,千金苇茎汤07部位能够降低撤血清舌鳞癌细胞的增殖活性(生长抑制率max34.36%),促进SAS和TCA-8113细胞凋亡率升高(P<0.05),抑制细胞分泌PGE2(P<0.05),且具有剂量和时间依赖性.结论:千金苇茎汤07部位促进撤血清舌鳞癌细胞凋亡的机制与抑制PGE2合成相关,为深入研究千金苇茎汤辅助治疗恶性肿瘤提供了新的思路和方法.
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奥沙利铂和7-羟基星形孢菌素联合用药对HCT116细胞的抑杀作用
目的:观察奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)与7-羟基星形孢菌素(7-hydroxystaurosporine,UCN-01)单独及联合应用对结肠癌细胞HCT116的增殖抑制作用,探讨其诱导细胞死亡的作用机制.方法:应用MTT法检测L-OHP,UCN-01单药及联用对HCT116细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞术、Western blot方法检测药物处理的结肠癌细胞凋亡;应用HE染色法检测丝裂灾变的形态改变.结果:低浓度L-OHP(6.25 μmol·L-1)与UCN-01(100 nmol·L-1)联用对结肠癌HCT116细胞的杀伤可产生协同作用,效果明显强于单独用药组;两药联用Annexin V阳性细胞率与UCN-01单用无明显差别,但死亡细胞明显增加;两药联用HCT116细胞的形态发生改变,巨核多核细胞较单独用药组增多约10%.结论:L-OHP与UCN-01联用对HCT116细胞的增殖具有协同抑制作用,诱导细胞发生凋亡和丝裂灾变.
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菟丝子对大鼠运动性肾脏缺血再灌注的保护作用
目的:研究菟丝子对大鼠运动性肾缺血再灌注损伤的保护作用及机制.方法:将7周龄雄性Wistar大鼠75只为对象随机分为4组:对照组(C组,12只)、一般训练组(M组,12只)、过度训练组(OM组,24只)、菟丝子+过度训练组(COM组,24只),进行56 d的力竭游泳训练.菟丝子+过度训练组灌胃(ig)给药,每天1次,剂量为6.96 g·kg-1,ig体积为5 mL·kg-1;其他各组ig等量生理盐水.末次训练后24 h,进行血清尿素氮、血清肌酐等生化指标检测.结果:8周的过度训练导致大鼠运动性肾缺血“再灌注”,自由基代谢紊乱,肾组织超微结构被严重破坏、组织病理学发生明显改变,肾功能受到严重损坏.血尿素氮和血清肌酐:过度训练组、菟丝子+过度训练组高于对照组(P<0.01);菟丝子+过度训练组低于过度训练组(P<0.05).SOD活性:过度训练组、菟丝子+过度训练组低于对照组(P<0.01);菟丝子+过度训练组高于过度训练组(P<0.05).MDA含量:过度训练组、菟丝子+过度训练组高于对照组(P<0.01),菟丝子+过度训练组低于过度训练组(P<0.05).结论:菟丝子改善了过度训练大鼠肾缺血再灌注所引起的自由基代谢紊乱,肾脏超微结构趋于正常,对运动性缺血再灌注肾脏具有保护作用.
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Ⅰ型过敏试验动物模型比较研究
目的:通过观察速发型过敏反应发生时的敏感指标的含量变化,比较常用于中药注射剂速发型过敏反应的几种动物模型的优劣.方法:①以卵蛋白为致敏原,直接对SD大鼠、BN大鼠、豚鼠进行致敏和激发,通过观察过敏反应的症状,ELISA法测量血清中的IgE、组胺、类胰蛋白酶以及β-氨基己糖苷酶的含量变化.②SD大鼠皮下注射致敏后的动物血清进行被动皮肤过敏试验,观察大鼠皮下是否出现蓝斑以及蓝斑面积.结果:①在致敏和激发途径、注射卵蛋白的剂量、次数、间隔时间相同的情况下,SD大鼠、BN大鼠、豚鼠血清中IgE、组胺、类胰蛋白酶以及β-氨基己糖苷酶的含量与相应的生理盐水组比均具有显著性的差异.其中豚鼠血清中IgE、类胰蛋白酶以及β-氨基己糖苷酶的变化率均高于SD大鼠和BN大鼠.BN大鼠血清中的组胺变化率高于豚鼠和SD大鼠.②被动过敏试验显示:BN大鼠卵蛋白组在SD大鼠上可造成明显的蓝斑.结论:仅采用豚鼠作为评价中药注射剂过敏反应的动物模型尚不能完全反映注射剂是否能引起过敏反应,增加不同品种试验动物以及相关检测指标,能更加全面的评价中药注射剂的致敏性.
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熊果酸抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长及凋亡的实验研究
目的:探讨熊果酸对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用.方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞株的增殖抑制作用;流式细胞术测定其对肝癌细胞凋亡及细胞周期的影响.结果:不同浓度熊果酸对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间和剂量依赖关系;24,72 h的半数抑制浓度(IC50)为12.59,8.32 mg·L-1.流式细胞仪检测结果表明,熊果酸12.5 mg·L-1对肝癌SMMC-7721细胞凋亡率14.07%,凋亡率随药物浓度的增加而上升;SMMC-7721细胞阻滞S期,作用与药物剂量呈正相关.结论:熊果酸对肝癌细胞株SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抗肿瘤作用机制可能与诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞于S期有关.
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赤雹根总皂苷对RA大鼠足跖组织中核转录因子、白介素6和白介素10mRNA表达水平的影响
目的:研究赤雹根总皂苷(STDR)对类风湿性关节炎(RA)大鼠足跖组织中核转录因子(NF-κB) p65 mRNA、白介素6(IL-6) mRNA、白介素10(IL-10) mRNA相对表达水平的影响.方法:雄性SD大鼠80只,随机取10只大鼠作为正常对照,其余大鼠采用弗氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎,将造摸成功的50只大鼠随机分为模型组,赤雹根总皂苷160,80,40 mg· kg-1·d-1组和雷公藤多苷12 mg· kg-1·d-1组,各组分别给予相应药物,模型组ig蒸馏水,连续21d.RT-PCR法检测足跖组织中NFκB p65 mRNA,IL-6 mRNA,IL-10 mRNA表达水平.结果:与对照组比较,模型组NF-κB p65和IL-6的表达显著增高(P<0.01),IL-10的表达明显降低(P<0.01);STDR 40,80,160 mg·kg-1剂量组大鼠足跖组织中NF-κB p65 mRNA,IL-6 mRNA相对表达水平均显著低于模型对照组(P <0.01);STDR各剂量组大鼠足跖组织中IL-10 mRNA相对表达水平均显著高于模型对照组(P<0.01).结论:调节NF-κB p65 mRNA,IL-6 mRNA和IL-10 mRNA表达水平是STDR治疗RA的作用机制之一.
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无创肢体缺血预处理对兔缺血性心肌的影响
目的:通过观察不同组兔心肌中热休克蛋白(HSP,0),环氧合酶(COX-2),一氧化氮合酶(iNOS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),转录因子-κB(NF-κB) mRNA的表达以及超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和一氧化氮(N0)的变化,探讨无创肢体缺血预处理对兔缺血性心肌的影响和可能机制.方法:实验分单纯缺血对照(Ctr),无创肢体缺血预处理(LIP)和LIP+KATP抑制剂(LG)组.Ctr组不作特殊处理,先静脉注射垂体后叶素后,再静脉注射肾上腺素诱发心律失常;LIP组兔双后肢缺血5 min,再灌注5 min,重复4次建立无创肢体缺血预处理模型,余同Ctr组;LG组先静脉注射KATP抑制剂(格列本脲),余处理同LIP组;实验结束后取心肌组织标本,生化法检测心肌组织中SOD活力,MDA,NO含量;RT-PCR法检测心肌组织中HSP70,COX4,iNOS,TNF-α及NF-κB mRNA的表达.结果:与Ctr组相比,LIP组COX-2和iNOS表达增高,TNF-α与NF-κB表达明显降低,LG组HSP70表达明显降低;与LIP组相比,LG组HSP70和iNOS表达均明显降低,TNF-α和NF-κB表达明显增高.心肌组织中SOD活力LIP组较高,LG组与Ctr和LIP组无差异;MDA含量Ctr组高于LIP组和LG组;NO含量LIP组较高,LG组NO含量与Ctr组相比无差异.结论:LIP具有减轻缺血性心肌损伤的作用,KATP是其发挥保护作用的重要途径.
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左、右归丸对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化中TGF-β1mRNA的影响
目的:研究左、右归丸含药血清对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用.方法:将28只大鼠随机分为4组,分别以左归丸(ZGW)、右归丸(YGW)、阳性对照药戊酸雌二醇片(estradiol valerate tablets,EVT)和蒸馏水给大鼠灌胃,各组灌胃剂量分别为18.9,20.52 g·kg-1,0.36 mg· kg-,1.0 mL·kg-1,日2次,于第4天给药2h后,腹主动脉取血,离心,56℃水浴灭活30 min后,大鼠含药血清制备完成.再配制10%各组含药血清的α-MEM分别加入诱导剂(YDJ)(10-7mol· L-1地塞米松、50μmol· L-维生素C、10 mmol·L-1β-甘油磷酸钠)与单纯诱导剂组共5组对BMSCs(1×105/L)进行干预9d,用Westernblot法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(type Ⅰ collagen,COL Ⅰ)蛋白表达,用RT-PCR法检测转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-1)mRNA表达.结果:Control组比较:ZGW+ YDJ组、YGW+ YDJ组、EVT+ YDJ组均可促进BMSCs的ALP,COLⅠ蛋白的表达,上调BMSCs TGF-β1 mRNA表达(P<0.05);与YDJ组比较:ZGW+ YDJ组、YGW+ YDJ组可促进BMSCs的ALP,COL Ⅰ蛋白的表达,上调BMSCs TGF-β1mRNA表达(P<0.05);且ZGW+ YDJ组优于YGW+ YDJ组(P<0.05).结论:左、右归丸含药血清能协同诱导剂促进BMSCs成骨分化,且左归丸组更为有效,表明中医“滋肾阴”对BMSCs的成骨诱导更为有效.
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女贞叶乙醇提取物对鹌鹑高脂血症的影响
目的:观察女贞叶乙醇提取物对鹌鹑高脂血症的影响.方法:用外源性胆固醇和高脂饲料复制鹌鹑高脂血症模型,并诱发其肝脂肪变性,分为正常对照组、高脂模型组、脂必妥组(3 g·kg-1)、女贞叶乙醇提取物高、中、低组(1.5,3,6g·kg-1),给药4周.分别测定各组血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,并进行鹌鹑肝脂肪变性的病理组织学检查.结果:女贞叶乙醇提取物低剂量能降低血清TG(P <0.05);中、高剂量能明显降低血清TG,CHO(P <0.01),中、高剂量降低血清LDL-C(P<0.05,P<0.01),高剂量组能明显升高血清HDLC(P<0.01).给予女贞叶乙醇提取物后,鹌鹑肝系数明显减轻(P<0.01),肝中脂肪空泡数明显减少(P<0.01).结论:女贞叶乙醇提取物具有明显的防治鹌鹑高脂血症和肝脂肪变性的作用.
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川楝子中的化学成分研究
目的:研究黔产川楝子中的化学成分.方法:应用正、反相硅胶(RP-18型)柱层析;葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20型)柱层析,结合重结晶方法进行分离纯化,运用1 H-NMR,13 C-NMR,ESI-MS和ES-MS等现代波谱技术对化合物的结构进行鉴定.结果:从黔产川楝子乙醇提取物中分离鉴定了12个化合物,分别被鉴定为:1-O-tigloyl-1-O-debenzoylohchinal(1),印楝醛(ohchinal,2),1-cinnamoyhrichilinin (3),3,7-diacetyl-14,15-deoxyhavanensin(4),7-O-acetyl-14,15-deoxyhavanensin(5),6α-O-acetyl-7-deacetylnimocinol (6),6α-hydroxyazadirone (7),24-Nor-5(ょ)-13α,17α-chola-14,20,22-triene-3β,7α-diol-21,23-epoxy-4,4,8-trimethyl-3-acetate(8),hedyotol-A(9),2,6-bis (3-methoxy-4-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3,3,0]octan-8-one(10),exo-endo-2,6-bis (4'-hydroxy-3 '-methoxy-phenyl)-3,7-dioxabicyclo[3,3,0]octane (11)和betulafolienediolone (12).结论:化合物2~12均为首次从该植物中分离得到.
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一测多评法测定透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的含量
目的:建立透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的一测多评含量测定方法.方法:采用高效液相色谱,以中药透骨香为研究对象,以儿茶素为内参物,建立其与白珠树苷、滇白珠苷A的相对校正因子,并进行含量测定,实现一测多评.同时采用外标法测定28批透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的含量,验证一测多评法的准确性.结果:建立的校正因子重复性良好,采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著差异.结论:以外标法测定儿茶素,利用相对校正因子实现对白珠树苷和滇白珠苷A测定是准确的、可行的,一测多评法可以用于特定的不同类型成分间的测定.
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两种不同寄主桑寄生挥发油成分分析
目的:研究寄主分别为桂花树和相思树桑寄生挥发油的化学成分.方法:采用水蒸气蒸馏法提取桑寄生挥发油,用气相色谱-质谱联用法分析鉴定其化学成分,用面积归一化法确定其相对含量.结果:寄主为桂花树桑寄生挥发油分离出85个色谱峰,鉴定其中52个化合物,占总量的77.08%;寄主为相思树桑寄生挥发油分离出97个色谱峰,鉴定其中29个化合物,占总量的67.40%.结论:水蒸气蒸馏法提取得到的2种不同寄主桑寄生挥发性成分及含量都有较大的差异.
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龙眼叶药材HPLC指纹图谱研究
目的:建立龙眼叶药材的HPLC色谱指纹图谱.方法:采用HPLC,Hypersil C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),以甲醇-0.2%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,柱温20℃,洗脱时间90 min,检测波长360 nm.结果:检测了广西不同来源的10批龙眼叶药材,确定11个共有色谱峰,相似度评价结果表明,各产地龙眼叶药材相似度均>0.90.结论:龙眼叶HPLC指纹图谱可用于龙眼叶药材的鉴别及质量控制.
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HPLC测定丝瓜根药材中常春藤皂苷元的含量
目的:测定丝瓜根药材中常春藤皂苷元的含量.方法:采用HPLC,Dikma Diamonsil C18色谱柱(钻石)(4.6 mm× 250 mm,5μm),甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.04∶0.02)为流动相,流速1 mL· min-,检测波长210 nm,柱温35℃.结果:常春藤皂苷元在0.563 2 ~5.632 μg线性关系良好(r=0.999 9),加样回收率97.49%,RSD 1.86% (n=6),重复性RSD 1.73% (n=6).结论:方法简便可行,重复性好,可用于丝瓜根药材的质量控制.
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HPLC测定除湿养血胶囊中柚皮苷的含量
目的:建立除湿养血胶囊的质量标准.方法:采用高效液相色谱法对除湿养血胶囊中的柚皮苷含量进行测定,Diamonsil C18(2)色谱柱(4.6 mm×250mm,5 μm),流动相0.1%醋酸水-甲醇(60∶40),流速1.0 mL· min-1,柱温35℃,检测波长283 nm.结果:柚皮苷在进样量0.035 83~ 1.146μg线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率98.9%,RSD 2.7%.结论:方法简便快捷,适于该制剂中柚皮苷的含量测定.
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清肺消痤颗粒的薄层鉴别研究
目的:建立清肺消痤颗粒的薄层鉴别方法,为质量标准的制定提供依据.方法:采用薄层色谱法对清肺消痤颗粒中黄芩、丹参、赤芍等所有饮片进行定性鉴别.结果:分别以含水量75%的微乳-甲酸(9.5∶0.5),三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2),苯-乙酸乙酯(19∶1),石油醚-甲酸甲酯-甲酸(15∶5∶1)氯仿-甲醇(20∶1),氯仿-乙醚(1∶1),苯-丙酮(1∶1)为黄芩、赤芍、丹参、虎杖、连翘、桔梗、浙贝母的展开剂,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶4∶0.5)为山楂和桃仁的展开剂;在聚酰胺薄膜或者硅胶板上展开,所得的薄层色谱斑点清晰,特征明显,阴性对照未见干扰.结论:所建立的方法专属性强,重复性好,可用于清肺消痤颗粒的定性鉴别.
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三黄泻心汤药效组分分析
目的:分析三黄泻心汤其泻火解毒的药效组分,为药效组分中药的发现和中药药效组分质量评价方法的建立提供科学数据.方法:依据经方的制剂方法制备样品,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定生物碱类-黄酮类-蒽醌类药效组分的含量.结果:测定了16种药效组分:盐酸药根碱-盐酸表小檗碱-盐酸黄连碱-盐酸巴马汀-盐酸小檗碱-黄芩苷-汉黄芩苷-黄芩素-汉黄芩素-番泻苷A-番泻苷B-芦荟大黄素-大黄酸-大黄素-大黄酚-大黄素甲醚,其含量依次为1.80%,5.40%,7.70%,4.50%,18.80%, 47.80%,9.40%, 3.60%,1.10%,0.42%, 3.54%,0.07%,0.11%,0.37%,0.11%,0.03%.结论:三黄泻心汤泻火解毒16种药效组分的含量为104.75% (mg·g-1),16种药效组分比例是56∶ 163∶ 232∶ 136∶ 571∶ 1448∶ 283∶110∶32∶ 107∶ 13∶2∶3∶ 11∶3∶1(盐酸药根碱-盐酸表小檗碱-盐酸黄连碱-盐酸巴马汀-盐酸小檗碱-黄芩苷-汉黄芩苷-黄芩素-汉黄芩素-番泻苷A-番泻苷B-芦荟大黄素-大黄酸-大黄素-大黄酚-大黄素甲醚).
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不同产区瓜蒌子有效成分含量测定
目的:对国内不同产区瓜蒌子的有效成分进行比较和研究.方法:采用高效液相色谱法,以瓜蒌仁三醇为对照品,以甲醇-水(93∶7)为流动相,检测波长230 nm,进行有效成分测定.结果:测定的45个样品中,含量存在明显的差异,以山东平阴025号样品的含量高为0.289 1%,山东肥城001号样品含量低为0.078 1%.各个产区内及产区间瓜篓子瓜蒌仁三醇含量变化都比较大,且稳定性比较低.各产区内山东长清产区的瓜蒌子瓜蒌仁三醇含量较高,且产区内含量稳定;产区间以山东肥城产区瓜篓仁三醇平均含量高为0.141 7%,但其稳定性低.结论:6个主要产区的瓜萎子平均含量均符合国家药典规定,但产区间和产区内有效成分含量均存在明显的差别,且稳定性都比较低.
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HPLC测定人参固本胶囊中人参皂苷Rg1,Re的含量
目的:建立高效液相色谱(HPLC)测定人参固本胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法.方法:Hypersil ODS2 C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-0.05%磷酸(19.3∶80.7),检测波长203 nm,柱温室温,流速1.0 mL· min-1.结果:人参皂苷Rg1在0.216~5.400μg呈良好的线性关系(r =0.999 4),平均回收率98.53%(RSD1.10%),人参皂苷Re在0.212~5.300 μg呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率98.36%(RSD 1.35%).结论:方法简便快速、专属性强、准确度高,可用于人参固本胶囊的质量控制.
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HPLC测定降粘胶囊中绿原酸的含量
目的:建立测定降粘胶囊中绿原酸含量的高效液相色谱法.方法:采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2%磷酸(20∶80),流速1.0 mL· min-1,检测波长327 nm,进样量10μL,柱温30℃.结果:绿原酸质量浓度在4.344~130.3 mg·L-1(r=0.9998)与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为99.93% (RSD0.12%).结论:方法测定降粘胶囊中绿原酸的含量,简便、准确,结果稳定,可为降粘胶囊的质量评价提供依据.
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翻白草黄酮类化学成分研究
目的:研究翻白草Potentilla discolor黄酮类化学成分.方法:采用硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备液相进行分离纯化,根据理化性质和光谱分析鉴定化合物结构.结果:从翻白草中分离得到7个黄酮类化合物,分别鉴定为异鼠李素(1)、槲皮素(2)、山柰酚(3)、山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷(4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(5)、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷(6)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖(1→2)[α-L-鼠李糖(1--→6)]-β-D-半乳糖苷(7).结论:化合物1,4,6,7为首次从该属植物中得到,化合物3为首次从该植物中得到.
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新疆紫草7种萘醌类成分的同时测定
目的:建立同时测定新疆紫草中紫草酸、紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素、异戊酰紫草素7种成分的HPLC检测方法.方法:选用安捷伦ZORBAX SB-C18(4.6 mm× 250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.03%甲酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长516,254 nm,柱温30℃,进样量6μL,流速1 mL· min-1.结果:7种萘醌类对照品在进样量范围内分别与峰面积呈现的良好线性关系(r>0.999 1);仪器精密度和稳定性RSD均<3%;加样回收率在97%~103% (n=3).结论:该方法快速、准确、重复性好,可同时定量新疆紫草的7种水溶性及脂溶性萘醌类成分,为新疆紫草的质量评价提供了更为全面的科学依据.
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FOLIN-酚比色法测定裸花紫珠中总酚含量
目的:建立裸花紫珠总酚的含量测定方法.方法:采用Folin-酚比色法测定裸花紫珠中总酚的含量,确定以没食子酸为对照品的佳测定条件.结果:Folin-酚用量为0.5 mL,7.5% Na2CO3用量为1.5 mL,反应条件为40℃下加热10 min,显色条件为25℃下显色60 min,没食子酸浓度在0~18 μμg时与其吸光度有良好线性关系,其回归方程Y=32.262X-0.001 2(n-7),r=0.999 9,根据此线性回归方程进行裸花紫珠总酚的含量测定.结论:该方法简单方便、稳定性好、准确度高,可用于裸花紫珠原料及其制剂的质量控制和定量分析.
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HPLC测定醋艾炭间羟基安息香酸的含量
目的:对不同产地醋艾炭间羟基安息香酸的含量进行比较研究,为醋艾炭的质量控制及合理利用提供科学依据.方法:采用HPLC,Prevail C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸(15∶85),流速1.0 mL·min-1,检测波长240 nm,柱温25℃.结果:间羟基安息香酸在0.010 02 ~0.50100 μg具有良好的线性(r=1.000 0),平均回收率(n=9)97.39%,RSD 0.99%.结论:所建方法准确、简单、重复性好,不同产地醋艾炭间羟基安息香酸的含量差异显著.
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不同来源甘草药材成分含量及其保肝降酶作用比较
目的:研究不同来源甘草药材的成分含量及其保肝降酶作用.方法:采用HPLC同时测定甘草成分含量;用醋氨酚复制肝损伤模型,灌胃不同来源甘草的相同提取物,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)和谷氨酸转氨酶(AST)活力.结果:不同来源甘草组的ALT,AST活力与模型组比较具有显著性差异(P<0.01);S1与S8甘草组之间的ALT,AST活力没有显著性差异,保护率分别为97.9%,95.8%,98.1%,94%,但前者甘草酸、甘草苷、异甘草素的含量却明显高于后者,分别为2.219%,2.86%,0.023%和0.767%,0.557%,0.013%;S4和S6甘草的保肝能力差,保护率分别为67.4%,65.6%和70.1%,64.5%,而甘草酸、甘草苷含量却明显高于其他产地三年栽培甘草.结论:不同来源甘草对肝损伤小鼠的肝功能都有不同程度的保护作用,并存在一定的质量差异,但与甘草酸、甘草苷的含量没有呈现正相关性,提示甘草保肝降酶作用可能是甘草药材中多种成分相互作用的结果.
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苯酚硫酸一步法测定白芍提取物中总糖含量
目的:建立白芍提取物中中总糖含量的测定方法.方法:通过单因素试验确定实验的大吸收波长,硫酸浓度,显色液用量,加热时间和显色时间.实验条件确定后,从加样回收率,重复性,线性和范围几方面进行方法学验证.同时,将优化后的方法与传统方法进行对比.结果:佳实验条件为:硫酸与水的体积比为5∶1;显色液体积为5 mL;加热时间为50min;显色时间为15 min.在佳实验条件下,葡萄糖标准溶液在0.019 ~0.189 mg线性关系良好,回归方程为y=7.488 X-0.000 2(R2=0.999 5).三个比例的加样回收率为102.00%,102.15%,95.86%,RSD分别为2.08%,1.51%,2.24%;6份样品的重复性RSD为2.4%.结论:该方法准确可靠,操作简单,也可用于其他中药提取物的质量控制.
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无花果内生真菌FL1O中吲哚二酮哌嗪类生物碱的研究
目的:研究无花果内生真菌FL10的次级代谢产物成分.方法:采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶色谱法等进行分离纯化,从无花果内生真菌FL10的发酵液中分离得到6个吲哚二酮哌嗪类生物碱.结果:通过理化常数测定和光谱分析,6个吲哚二酮哌嗪类生物碱鉴定分别为verruculogen(1),cyclotryprostatins B(2),fumitremorgin C(3),cyclotryprostatin A(4),tryprostatin A(5),tryprostatin B(6).结论:这6个吲哚二酮哌嗪类生物碱是首次从无花果内生真菌中分离得到,目前研究表明,无花果内生真菌Aspergillus tamarii可以作为一种可产生吲哚二酮哌嗪类生物碱的新来源.
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白蔹化学成分研究
目的:研究白蔹的化学成分.方法:利用正反相硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)等多种柱色谱法对白蔹化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果:分离得到15个化合物,分别鉴定为羽扇豆醇(1),β-谷甾醇(2),大黄素甲醚(3),β-谷甾醇亚油酸酯(4),丹皮酚(5),4-p-樟烷-1,8-二醇(6),香草醛(7),α-生育酚(8),α-生育醌(9),α-甲基吡咯酮(10),botcinins D(11),5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(12),4-酮松脂醇(13),bungein A(14),lasiodiplodin(15).结论:化合物4~15均为首次从该植物中分离得到.
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HPLC测定不同商品规格桂枝中香豆素、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛的含量
目的:建立高效液相色谱法比较桂枝不同商品规格化学成分差别,探讨中药材商品规格与药材化学成分的相关性.方法:采用Waters-Symmetry-RP-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,检测波长275 nm,柱温30℃.结果:香豆素、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛线性范围分别为0.001 32 ~0.132 μg(r =0.999 5),0.001 08~0.108μg(r=0.999 6),0.002 57~0.257 μg(r=0.999 6),0.141 4 ~ 1.448 μg(r=0.999 7);平均加样回收率分别为97.8% (RSD 1.5%),97.2% (RSD 1.1%),100.6% (RSD 1.3%),99.6% (RSD 1.7%).不同规格桂枝药材中香豆素、肉桂醇、肉桂酸与桂皮醛含量差别较大.结论:方法准确,重复性好,简便易行,可有效地评价桂枝药材的质量,为桂枝药材的商品流通和开发研究提供可靠的依据.
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HPLC测定复脉灵胶囊中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的含量
目的:建立复脉灵胶囊中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的含量测定方法.方法:采用HPLC,流动相甲醇-0.5%的三乙胺(70∶ 30),Aglient TC-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长235 nm,流速1.0 mL· min-,柱温室温.结果:乌头碱的进样量在0.0808~0.8080 μg具有良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率98.40%,RSD 2.84%;新乌头碱的进样量在0.866 ~4.330 μg具有良好的线性关系(r=0.999 7),平均回收率98.04%,RSD 2.05%;次乌头碱的进样量在0.089 ~0.890μg具有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率98.71%,RSD 2.34%.结论:方法操作简便、灵敏度高、结果准确,可作为复脉灵胶囊的含量测定方法.
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四君子汤加减配合替吉奥胶囊治疗晚期胃癌
目的:比较四君子汤加减配合替吉奥胶囊与单纯替吉奥胶囊对晚期胃癌患者的临床疗效、毒副作用及免疫功能的改变.方法:将40例晚期胃癌患者随机分为观察组(四君子汤加减加替吉奥胶囊组)与对照组(单纯替吉奥胶囊组)各20例,观察两组患者在近期疗效、免疫功能、不良反应及生活质量等方面的差异.结果:两组对比观察组近期疗效、生活质量及免疫功能均明显高于对照组(P<0.05);观察组毒副作用明显低于对照组(P<0.05).结论:四君子汤加减联合替吉奥胶囊治疗晚期胃癌可提高疗效、减轻毒副作用,改善患者的免疫功能,提高患者的生活质量.
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独活寄生汤加减结合透明质酸钠针关节腔注射治疗膝骨性关节炎
目的:探讨独活寄生汤加减结合透明质酸钠针关节腔注射膝骨性关节炎的疗效.方法对本院收治的150例膝骨性关节炎患者根据随机原则分为3组,每组50例.独活寄生汤组单独给予独活寄生汤加减进行治疗,透明质酸钠组单独给予透明质酸钠注射治疗,联合组注射透明质酸钠的同时服用独活寄生汤.对3组患者的疗效、VAS疼痛评分、血清C-反应蛋白水平以及不良反应进行比较.结果联合组的总有效率为94%,显著高于独活寄生汤组(80%)和透明质酸钠组(78%),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后联合组的VAS评分显著低于独活寄生汤组和透明质酸钠组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后联合组的CRP水平相比较独活寄生汤组和透明质酸钠组均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05).结论独活寄生汤加减结合透明质酸钠针关节腔注射治疗膝骨性关节炎疗效确切,能迅速缓解疼痛,改善功能,值得临床推广使用.
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热毒宁辅助阿奇霉素序贯疗法治疗儿童支原体肺炎
目的:分析热毒宁辅助阿奇霉素序贯疗法治疗儿童支原体肺炎的疗效及安全性.方法:取本院儿科于2008年1月至2013年1月住院收治的支原体肺炎患儿80例作为研究对象,所有患者均经临床确诊,根据治疗方式不同将所有患者分为单独使用阿奇霉素进行治疗的对照组患儿及联合使用热毒宁及阿奇霉素的观察组患儿各40例,比较两组患儿的治疗效果、并发症等差异.结果:观察组患儿接受治疗后的退热时间(1.73±1.03)d、止咳时间(3.44±1.44)d、住院时间(6.12±2.12)d明显低于对照组,总有效率明显高于对照组患者(P<0.05);观察组患儿接受治疗后出现并发症明显少于对照组患儿(P<0.05).结论:热毒宁辅助阿奇霉素序贯疗法可以有效提高儿童支原体肺炎患者的治疗效果,提高治疗安全性.
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杏贝止咳祛痰口服液辅助治疗小儿支气管肺炎
目的:观察杏贝止咳祛痰口服液辅助治疗小儿支气管肺炎的疗效.方法:90例支气管肺炎住院患儿,随机分成两组,治疗组47例给予支气管肺炎常规治疗(依病原菌选择给予头孢或阿奇霉素治疗,病毒性肺炎不给予抗生素,合并喘息患儿给予复方异丙托溴胺雾化治疗)的基础上,加用杏贝止咳祛痰口服液口服.对照组43例仅给予常规治疗.7d为1个疗程,观察患儿体温、咳嗽、肺部体征变化、疾病转归及住院天数.结果:治疗组患儿咳嗽明显好转(咳嗽频率减低>50%)时间及住院天数均短于对照组,患儿体温降至正常的时间及肺部体征消失的时间均短于对照组(P>0.05).治疗组患儿总有效率高于对照组(P<0.05),未愈率低于对照组.治疗组不良反应发生率低于对照组(P>0.05).结论:杏贝止咳祛痰口服液辅助治疗小儿支气管肺炎可以缩短患儿症状和肺部体征恢复时间及住院天数,提高治疗的有效性,未见明显不良反应.
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利巴韦林单用及联用喜炎平注射液治疗小儿轮状病毒肠炎
目的:研究利巴韦林单用及联用喜炎平注射液治疗小儿轮状病毒肠炎的临床疗效.方法:选择在青海大学附属医院就诊的轮状病毒肠炎患儿作为研究对象,随机分为给予利巴韦林联合喜炎平注射液治疗的观察组和单用利巴韦林治疗的对照组,观察消化道症状缓解时间、体温下降情况以及神经功能指标.结果:观察组患儿腹痛、腹泻、恶心呕吐、腹鸣缓解时间均明显短于对照组,神经生长因子(NGF),神经营养因子(NTF),脑源性神经营养因子(BDNF)含量均明显高于对照组;治疗后从15 min开始体温明显低于治疗前,明显快于对照组.结论:利巴韦林与喜炎平注射液联合应用能够更为快速的改善消化道症状、降低体温、保护神经功能,是治疗轮状病毒性肠炎行之有效的方法.
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中西医结合治疗小儿支气管肺炎
目的:探讨中西医结合治疗小儿支气管肺炎的临床疗效.方法:将126例小儿支气管肺炎患儿随机分入对照组与观察组,对照组患者接受常规西医治疗,观察组患者同时接受自拟中药口服.比较两组临床疗效及症状、体征缓解时间.结果:观察组治疗有效率96.9%,显著高于对照组82.3%(P<0.05);观察组患者咳嗽、咯痰、退热、平喘及肺部罗音消失时间显著少于对照组(P<0.05).结论:中西医结合治疗小儿支气管肺炎可显著提高临床疗效,缩短治疗时间.
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身痛逐瘀汤加减治疗腰椎间盘突出症近期疗效观察
目的:观察身痛逐瘀汤加减治疗腰椎间盘突出症(LDH)的近期疗效.方法:120例LDH患者随机按数字法分为对照组和观察组各60例.对照组给予壮医药线点灸,观察组给予身痛逐瘀汤加减联合壮医药线点灸,疗程均为20 d.记录治疗前及治疗后第2、4、6、8、10、12、14、20天疼痛VAS评分,并计算疼痛改善率;记录治疗前、后和随访期疼痛量表(包括疼痛分级指数、视觉模拟量表、现时疼痛强度)和Oswestry功能障碍指数的变化情况,并检测血浆β-内啡肽(β-EP)水平.结果:观察组总有效率93.33%,优于对照组的78.33% (P <0.05);两组治疗后VAS评分均呈下降趋势,第6天至疗程结束,观察组VAS评分均低于对照组(P <0.05或P<0.01);治疗后第7、14、20天观察组疼痛改善率均优于对照组(P<0.05或P<0.01);治疗后及随访期观察组腰椎间盘突出症(SF-MPQ)各项评分及Oswestry功能障碍指数均低于同期对照组(P<0.01);治疗后及随访期观察组血浆β-EP水平均高于对照组(P<0.01).结论:身痛逐瘀汤加减治疗腰椎间盘突出症能明显减轻患者疼痛,改善患者功能障碍,提高血浆β-EP水平,近期疗效显著.
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丹红注射液联合依达拉奉治疗急性脑梗死
目的:探讨临床上丹红注射液联合依达拉奉治疗急性脑梗死的有效性与安全性.方法:随机将126例急性脑梗死患者分为对照组和实验组各63例,两组均使用每日1次吸氧、抗凝、保护脑细胞等一般康复措施作为基础治疗,此外对照组给予依达拉奉静脉滴注,实验组给予依达拉奉和丹红注射液联合静脉滴注,10 d为1个疗程.3个疗程后对比两组治疗前后神经功能损害程度和日常生活能力改善情况.结果:实验组比对照组的神经功能缺损程度NIHSS评分明显降低,而日常生活能力ADL评分明显提高,且均具有统计学显著性(P<0.05).总体有效率上,实验组92.06%明显优于对照组的69.84%.结论:丹红注射液联合依达拉奉治疗急性脑梗死疗效确切,比使用依达拉奉单药治疗效果更好,并且安全性好,值得在临床上进行推广.
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逐步代人勾兑法考察中药饮片质量稳定性
目的:采用逐步代入勾兑法控制中药饮片的质量稳定性.方法:选取黄芩为研究对象,以黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素为指标成分,采用逐步代入法勾兑,对比勾兑前后各批饮片中指标成分含量与目标饮片的相对标准偏差和指纹图谱相似度差异.结果:勾兑饮片中各指标成分含量与目标饮片的RSD <5%,勾兑饮片与目标饮片HPLC指纹图谱相似度0.986.结论:不同批次饮片通过逐步代入法勾兑可使指标成分含量的RSD降低和指纹图谱相似度趋于一致,显著提高药材的质量均一性.该方法准确度高、操作简便,不使用复杂数学软件,可作为中药饮片勾兑的新方法.
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天杏咳喘贴中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的大鼠离体透皮试验
目的:测定天杏咳喘贴中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的大鼠离体透皮率.方法:以生理盐水为接受介质,采用HPLC测定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量,考察天杏咳喘贴中2种成分的离体透皮率.结果:盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱24 h的离体透皮率分别为12.37%,12.04%,36 h的离体透皮率分别为14.81%,14.34%.结论:天杏咳喘贴中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的大鼠离体透皮率较高,为该制剂的临床疗效研究提供依据.
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温度、pH对甘草酸溶液中内毒素团聚状态的影响
目的:考察温度及pH对甘草酸溶液中内毒素团聚状态的影响.方法:采用30 kDa Millipore膜过滤不同温度及pH条件下甘草酸溶液,通过动态浊度法测定超滤液中内毒素活性浓度,HPLC检测超滤前后有效成分的变化,利用内毒素纳米粒径仪测定不同温度及pH条件下内毒素团聚状态的粒径分布.结果:温度60℃,pH 4时,内毒素团聚状态的粒径分布和去除率均大,甘草酸溶液经30 kDa Millipore膜超滤前后有效成分含量>98%.结论:随温度的升高,甘草酸溶液中内毒素团聚状态的粒径分布变大,而随pH的增大则变小.
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不同纯化工艺对金钱草水提液的影响
目的:探索壳聚糖絮凝澄清工艺与醇沉工艺对中药水提浸膏吸湿性影响的差异.方法:考察2种纯化工艺对浸膏得率、糖类和氨基酸保留率、蛋白质和鞣质去除率、浸膏吸湿性的影响.结果:壳聚糖絮凝澄清工艺的浸膏得率、糖类和氨基酸保留率、蛋白质和鞣质去除率均高于醇沉工艺,但浸膏吸湿性低于醇沉工艺.结论:金钱草水提浸膏的吸湿性与多糖保留率、蛋白和鞣质去除率有关,为2种纯化工艺的选用提供依据.
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王瓜的微波-超声波联合提取工艺优选及抗氧化活性考察
目的:优选王瓜的微波-超声波联合提取工艺并考察其抗氧化活性.方法:以总三萜质量分数为指标,通过单因素试验和正交试验考察乙醇体积分数、提取时间、料液比、微波功率对王瓜提取工艺的影响;采用DPPH法、水杨酸法、ABTS法和FRAP法测定提取物的抗氧化能力.结果:佳提取工艺条件为加50倍量90%乙醇于500 W微波-超声波联合提取6 min;王瓜提取物清除DPPH·、清除ABTS+·和Fe3+还原/抗氧化能力大于茶多酚但小于抗坏血酸,清除OH·能力均小于二者.结论:优选的提取工艺简便、快速,王瓜提取物具有一定的抗氧化性能.
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咽速康气雾剂变更辅料对生产工艺及质量的影响
目的:考察抛射剂变更对咽速康气雾剂生产工艺及质量的影响.方法:通过观察药液与抛射剂混合液的均一性筛选咽速康气雾剂处方,以总揿次数为指标优选四氟乙烷灌装量,以泄漏率、残留量、外观等为指标,对比咽速康气雾剂变更抛射剂前后的质量.结果:药液与抛射剂混合液无分层现象,均一性良好.四氟乙烷灌装量4.5g时,总揿次数与变更前基本一致.泄漏率、残留量、体外喷雾雾滴粒度分布、模拟体内微细粒子分布、外观等与变更前均无显著性差异.结论:变更抛射剂和定量阀门后,产品处方无需调整.生产工艺需将四氟乙烷的灌装量由2.5g调至4.5g.生产工艺稳定可控,药品质量具有一致性.
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西洋参SOD脂质体的制备工艺优选和性质评价
目的:优选西洋参SOD脂质体的制备工艺并考察其性质.方法:采用逆相蒸发法制备西洋参SOD脂质体,以包封率为指标,通过正交试验考察卵磷脂-胆固醇、磷酸盐缓冲液体积及西洋参SOD加入量对制备工艺的影响,考察西洋参SOD脂质体的粒径分布、体外释放和稳定性.结果:佳制备工艺为卵磷脂-胆固醇(4:1),磷酸盐缓冲液体积12 mL,西洋参SOD加入量10 mg,制备的西洋参SOD脂质体形态均匀,平均粒径480 nm,平均包封率71.35%.结论:制备的脂质体包封率高、稳定性良好,具有一定的缓释效果.
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不同制备工艺对肺毒清体外抗病毒作用的影响
目的:考察不同制备工艺对肺毒清处方药物体外抗病毒作用的影响.方法:采用体外抗病毒法对比肺毒清的水提取物(A)、水醇提取物(D)、水提醇沉物(B)及水提醇沉物的正丁醇萃取物(C)的抗病毒作用.结果:样品D在1 250 nmg·L-1下能完全抑制甲1型和甲3型流感病毒,250 mg·L-1样品A在60%细胞毒性下能完全抑制甲1型及甲3型流感病毒,其他样品对其他呼吸道病毒均无抑制作用,且样品D的体外抗病毒作用较样品A更好.结论:相同处方不同制备工艺对复方的药效作用具有一定影响.
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正交试验优选复方甘草双层片片芯的制备工艺
目的:优选复方甘草片的片芯制备工艺.方法:以片芯崩解时限、溶出度和外观为综合评价指标,通过正交试验考察微晶纤维素、羧甲基淀粉钠(CMS-Na)、滑石粉、氧化镁(MgO)用量对复方甘草片双层片片芯制备工艺的影响.结果:佳制备工艺为5.6%微晶纤维素为填充剂,15.2% CMS-Na为崩解剂,4.9%滑石粉为润滑剂,5.1%氧化镁为吸收剂,制备的片芯外表光洁,崩解时限(26.4±10)s,溶出度达99%.结论:优选的制备工艺稳定可行,制得的片芯达到了双层片制备的要求.
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星点设计-效应面法优化陈皮多糖提取工艺
目的:采用星点设计-效应面法优化陈皮多糖的提取工艺.方法:在单因素试验基础上,选取料液比、提取温度、提取时间为自变量,陈皮多糖提取率为因变量,利用星点设计模型对3个自变量各水平二项式进行拟合,确定陈皮多糖的佳提取工艺.结果:优选的提取工艺为料液比1∶49,提取温度92℃,回流提取时间150 min,陈皮多糖提取率达14.77%,与预测值的偏差0.61%.结论:星点设计-效应面法优化的陈皮多糖提取工艺简便可靠,为陈皮多糖的开发利用奠定基础.
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Box-Behnken设计优化荷叶总黄酮的温浸提取工艺
目的:优化荷叶总黄酮的温浸提取工艺.方法:在单因素试验基础上,以总黄酮提取率为指标,通过Box-Behnken响应面设计考察乙醇体积分数、温浸时间、液固比及温浸温度对荷叶总黄酮提取工艺的影响.结果:佳提取工艺为加39倍量51%乙醇于71℃温浸2次,每次62 min,总黄酮提取率6.21%.结论:利用温浸方法提取荷叶总黄酮的工艺稳定可行.
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三七总皂苷脂质体微丸的制备
目的:制备三七总皂苷脂质体微丸.方法:以包封率为考察指标,大豆磷脂-胆固醇、水相-有机相,药物质量浓度,脂类用量为考察因素,通过正交设计优选三七总皂苷脂质体冻干粉的处方工艺,采用塑制法制备三七总皂苷脂质体微丸.结果:三七总皂苷脂质体冻干粉的佳处方工艺为大豆磷脂-胆固醇(6∶1),水相-有机相(1∶4),药物质量浓度20 g·L-1,磷脂用量150 mg.制备的脂质体微丸溶解后脂质体的平均粒径220.5 nm,Zeta电位-71.21 mV,1h内溶出度达81.41%.结论:制备的三七总皂苷脂质体微丸体外溶出度较高,脂质体的粒径分布较好、质量稳定.
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合欢花总黄酮的分离纯化工艺
目的:优选大孔吸附树脂法纯化合欢花总黄酮的工艺参数.方法:以合欢花总黄酮含量为指标,通过单因素试验考察树脂型号、上样液质量浓度、洗脱剂种类及用量、除杂溶媒种类及用量等对大孔树脂纯化工艺的影响.结果:采用AB-8型大孔树脂,优选的纯化工艺为上样液质量浓度0.2 g·mL-1,上样量2 BV,用4 BV水洗除杂,4 BV 10%乙醇洗脱,5 BV 50%乙醇洗脱,收集50%乙醇洗脱液,总黄酮纯度达34.62%.结论:优选的工艺条件可较好地分离、纯化合欢花总黄酮.
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盐酸小檗碱脂质体的制备工艺优选及体外释放性质考察
目的:优选盐酸小檗碱脂质体的制备工艺并考察其体外释放性质.方法:采用pH梯度结合薄膜分散法制备盐酸小檗碱脂质体,以包封率为指标,通过正交试验考察磷脂胆固醇比、药脂比、磷脂质量浓度、外水相pH对处方工艺的影响.采用透析法考察脂质体的体外释放性质.结果:佳处方工艺为磷脂胆固醇比3∶1,药脂比1∶15,磷脂质量浓度30 g·L-1,外水相pH7.0.制备的盐酸小檗碱脂质体包封率89.34%,平均粒径123.3 nm,Zeta电位-20.0 mV,24h累积释放率90.46%.结论:pH梯度结合薄膜分散法制备的脂质体包封率较高,粒径均匀,具有显著体外缓释特性.
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多孔壳聚糖膜的专一性酶法制备及性能表征
目的:制备多孔医用壳聚糖膜并进行性能表征.方法:采用溶剂蒸发凝胶法制膜,通过内切壳聚糖酶对膜原位降解制备多孔壳聚糖膜,利用扫描电镜观察其形态,称重法检测其吸湿保湿性与酶解时间-余重关系,检测多孔壳聚糖膜对牛血清白蛋白的吸附性和对磺胺嘧啶银的控缓释性能.结果:壳聚糖与内切酶的比例0.1 g·U-1,酶解时间3h,膜表面及内部均产生了适用于药物载体的多孔结构.结论:通过内切酶酶解原位成孔的壳聚糖膜具有反应条件温和、致孔率可控、无毒性物质残留等优点,具有良好的应用前景.
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首乌藤多糖的分离纯化及初步结构解析
目的:精制首乌藤中多糖并对其化学结构进行初步解析.方法:经脱脂、水提、分级醇沉、脱色、透析等工艺制备首乌藤粗多糖,通过纤维树脂柱和凝胶柱进行分离和纯化.采用化学分析方法对得到的多糖进行理化性质分析,并通过高效凝胶渗透色谱(HPGPC),气相色谱(GC),紫外光谱(UV)及红外光谱(IR)等对样品进行纯度鉴定、相对分子质量测定、单糖组成及结构分析.结果:分离纯化得到6种均一多糖(SWTPA-1,SWTPB-1,SWTPB-2,SWTPB-3,SWTPC-1,SWTPC-2),相对分子质量分别为9 162,56 314,44 502,37 278,40 558,61 000.均不含大分子蛋白质、多肽、核酸、淀粉类物质、酚类化合物,均含有糖类物质的IR特征吸收峰.SWTPA-1,SWTPC-1和SWTPC-2为中性多糖,SWTPB-1,SWTPB-2和SWTPB-3可能为酸性多糖,SWTPA-1,SWTPB-1,SWTPB-3,SWTPC-1和SWTPC-2为吡喃糖且含有β型糖苷键,SWTPB-2为吡喃糖且含有β型和α型2种糖苷键,SWTPB-2,SWTPB-3,SWTPC-1和SWTPC-2还含有呋喃糖环.结论:首次从首乌藤中分离纯化出了6种均一多糖,聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶S-300可用于多糖的分离与纯化,糖醇乙酸酯衍生化法可较好地实现首乌藤多糖水解产物的衍生化.
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脂质纳米粒给药系统体外释放方法研究进展
通过查阅近几年国内外相关文献,进行归纳整理并分类,介绍了近年来有关经典体外释放方法、透析法、室扩散法、流池法、基于体外脂解模型的体外释放研究方法等体外测定方法在药物释放特性评价中的应用进展.脂质纳米粒给药系统是近年来发展较快的一类药物传递系统,评价脂质纳米粒的指标主要有粒径、Zeta电位、载药量、体外释放、稳定性等.药物释放是影响药物进入体内发挥药效的重要因素之一,故体外释放是评价脂质纳米粒质量的重要指标,也是控制制剂质量的重要手段.但是如何建立一种更加科学合理的体外释放方法使其具有较好的预测性则需要科学工作者进一步研究优化,促进脂质纳米粒给药系统的研究与开发.
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微生物转化技术在中药研究中的应用
通过文献整理对用于中药转化的微生物,微生物转化技术在中药领域中的应用及微生物转化中药的反应机制进行了综述.微生物体内含有丰富的酶,酶能催化中药成分发生水解反应、氧化还原反应、羟基化反应和糖基化反应等生理生化反应,生成各类目标产物.微生物转化技术能增加天然活性先导化合物的来源,增强中药的药效,减弱中药的毒副作用,把无效中药成分转化为有效成分,促进中药活性成分吸收,降低中药的生产成本,为中药组分代谢机制研究提供辅助手段,实现微生物转化技术应用于中药生产的目标.
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古今中医治疗糖尿病用药异同探析
目的:探讨古今治疗糖尿病用药规律特点及异同,为更好的指导临床用药提供借鉴.方法:依据纳入排除标准,收集《中医方剂大辞典》中治疗消渴病的古方和中国期刊全文数据库(CNKI) 1979-2012年发表的中医药治疗糖尿病组方,录入数据库,应用SPSS 17.0进行统计学分析,分别对古今方高频用药种类、古今方用药功效、药性及药味进行列表分析,同时对高频用药进行聚类分析,以进一步探讨古今用药特点及思路的异同.结果:古方用药频次以麦冬、天花粉、人参位居前三;今方则以黄芪、山药、生地黄位居前三.古今方均善用补虚及清热药治疗糖尿病,其中以寒、甘药居多.聚类分析将古方与今方中高频用药分别聚为4类.结论:古今方用药思路及特点大体一致,但各有侧重,可根据不同病机灵活应用.
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小鼠体内半边旗5F微乳剂的药动学及组织分布特征
目的:考察半边旗抗癌二萜5F口服微乳剂在小鼠体内的组织分布及药物代谢动力学.方法:采用Hypersil C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.5%冰醋酸(55∶45),流速0.8 mL· min-,进样20 μL,柱温35℃.小鼠灌胃给药5F微乳剂与普通制剂后,在不同时间点取血及内脏器官,样品经处理后,采用反相高效液相色谱法测定血清及组织匀浆液中5F的浓度,分析其体内药物代谢动力学和组织分布.结果:小鼠半边旗5F微乳剂药动学参数分别为AUC0→t12.202μg·L-1·h-1,Cmax=3.434 μg·L-1和Tmax=1.048 h,MRT0→12.451 h,相对生物利用度为对照组616.15%.结论:半边旗5F微乳剂口服生物利用度提高,消除半衰期延长,具有一定的缓释作用.
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车前子与其伪品-柴胡果实的生药学鉴别
目的:对新出现的车前子伪品柴胡果实进行了生药鉴别,并与正品车前子进行了比较.方法:应用性状和显微鉴定法,对车前子及其伪品一柴胡果实进行了比较研究,并应用薄层色谱鉴别法,对伪品作了进一步的确证.结果:二者在性状、显微特征上均有明显区别,伪品与柴胡对照药材和对照用柴胡果实薄层色谱基本一致.结论:该伪品为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense的干燥果实,不能作车前子使用.
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雄黄肾脏毒性的病理形态学特征
目的:研究反复灌胃给予雄黄后,大鼠肾脏毒性的病理形态学特征,为临床安全、有效地使用雄黄提供科学依据.方法:随机将大鼠分为对照组和雄黄0.01,0.04,0.17 g·kg-1剂量组.各剂量组均每日灌胃给药1次,对照组给予高纯水,连续3个月.于给药后1,2,3个月和停药1,2个月后,计算肾脏指数,测定血清葡萄糖(GLU)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及尿蛋白等,并观察肾组织病理形态学变化.结果:连续灌服雄黄≥≥0.01 g·kg-13个月或0.17g·kg-1 2个月,肾组织出现不同程度的细胞肿胀,胞浆空泡变性,核固缩、溶解及血管扩张、充血等病变,近曲小管较肾小球损伤严重,病变呈现明显的量-时-毒关系,血BUN、GLU、尿蛋白也相应增高.停药1个月后,除0.17 g·kg-1剂量组有66.7%的肾小管轻度水肿、变性外,其余各组未见明显病变.结论:大鼠连续灌服雄黄≥0.01 g·kg-1 3个月或0.17 g·kg-1 2个月对大鼠肾脏病理学产生明显影响,尤其对肾脏近曲小管的损伤作用较为明显,停药后肾脏病变逐渐恢复至正常.
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山豆根水煎液致大鼠亚急性肝脏毒性研究
目的:给予质量可控的山豆根(RRST)水煎液致大鼠肝脏毒性,并探讨其毒性作用机制.方法:采用代表性好、来源固定的药材,取山豆根饮片加6倍量水,浸泡30 min,武火煮沸,换文火煎煮60 min,共煎煮2次,合并2次的滤液浓缩至生药2 g·mL-1,得山豆根水煎液储备液,并对其苦参碱及氧化苦参碱进行测定,对其质量进行控制.动物实验:选用Wistar大鼠30只,随机分为空白对照组(灌胃给予蒸馏水)、阳性对照组(灌胃给予10% CCl4)、低剂量组(灌胃给予1 g·kg-1山豆根水煎液)、中剂量组(灌胃给予4 g·kg-1山豆根水煎液)和高剂量组(灌胃给予16 g·kg-1山豆根水煎液),每组6只.连续给药14d,第15天ip 25%乌拉坦麻醉,腹主动脉取血,离心取血清测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA),采用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定炎症因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α).摘取肝脏,称重,计算脏器指数,病理制片,进行组织病理学检查.取部分肝组织加冷生理盐水制成10%肝匀浆,离心,取上清波,测定肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性,丙二醛(MDA)含量.结果:大鼠连续给予不同剂量山豆根水煎液7d后,高剂量组出现活动减少,四肢无力;14 d后,与空白对照组相比,高剂量组ALT,ALP,TBA值升高(P<0.05),病理组织学检查发现高剂量组的肝细胞肿大,并伴有炎症浸润.高剂量组及阳性对照组的IL-6,TNF-α含量升高(P<0.05及P<0.01),SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.05),SOD/MDA含量显著降低(P<0.01).结论:山豆根具有肝脏毒性,给予大鼠16 g·kg-1山豆根水煎液可导致明显的肝损伤,且其损伤机制与炎症因子的作用和脂质过氧化有关,与四氯化碳的肝毒性具有一定的相似性.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |