中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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小檗皮水浸膏对db/db糖尿病小鼠视网膜病变的影响(Ⅱ)
目的:观察小檗皮浸膏对基因突变自然发病型db/db糖尿病小鼠视网膜蛋白激酶C-B(PKC-β),缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响,探索该药防治糖尿病视网膜病变的作用机制.方法:选用18周龄db/db糖尿病小鼠,db/m型同性同窝瘦型小鼠为对照.采用随机方法将db/db小鼠分为db/db组,小檗皮高、中、低剂量组(1.50,0.75,0.38 g·kg-1),羟苯磺酸钙组(0.23 g·kg-1),盐酸小檗碱组(0.135 g·kg-1).相关药物连续ig2个月,并于ig2个月末处死小鼠.采用免疫组化方法观察3种因子在视网膜结构的表达情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测视网膜内3种因子的基因与蛋白表达.结果:与db/m组比较,db/db组视网膜组织PKC-β,VEGF免疫组化反应呈阳性,表达显著增加(P ＜0.01);HIF-1α免疫组化反应呈阳性,表达量有升高趋势,但差异无统计学意义;db/db组三种因子的基因与蛋白表达显著增加(P＜0.01).与db/db组比较,羟苯磺酸钙组视网膜组织PKC-β免疫组化反应呈阳性,表达显著降低(P＜0.05),小檗皮高剂量组视网膜组织PKC-β免疫组化反应呈阳性,表达显著降低(p＜0.01),其他各给药组较db/db组PKC-β表达有降低趋势,但差异无统计学意义;各给药组视网膜组织HIF-1α免疫组化反应呈阳性,表达有降低趋势,但差异无统计学意义;小檗碱组、小檗皮低剂量组视网膜组织VEGF免疫组化反应呈阳性,表达明显降低(P＜0.01),其他各给药组视网膜组织VEGF有降低趋势,但差异无统计学意义.与db/db组比较,羟苯磺酸钙组HIF-1α基因表达明显降低(P＜0.05),其他各给药组PKC-β,HIF-1α,VEGF基因表达有降低趋势,但差异无统计学意义.与db/db组比较,羟苯磺酸钙组、盐酸小檗碱组、小檗皮高、低剂量组PKC-β蛋白表达显著降低(P＜0.01),小檗皮中剂量组PKC-β蛋白表达有降低趋势,但差异无统计学意义;羟苯磺酸钙组、盐酸小檗碱组、小檗皮高、中剂量组HIF-1α蛋白表达显著降低(P＜0.01),小檗皮低剂量组HIF-1α蛋白表达量有降低趋势,但差异无统计学意义;各给药组VEGF蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论:小檗皮浸膏防治db/db糖尿病小鼠视网膜病变的作用机制可能与抑制PKC-B,HIF-1α,VEGF表达有关.
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柴胡总皂苷对小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍的改善作用
目的:研究柴胡总皂苷连续给药抗抑郁作用起效时间及作用维持时间,以及柴胡总皂苷对皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及认知功能障碍的影响.方法:ICR雄性小鼠随机分为正常组(蒸馏水)、柴胡总皂苷低剂量组(12.5 mg·kg-1),柴胡总皂苷中剂量组(25 mg·kg-1),柴胡总皂苷高剂量组(50 mg·kg-1).每周称体重,给药13 d后,进行空场实验.给药14 d后1h,3d,6d观察柴胡总皂苷对强迫游泳实验不动时间的影响.C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组,皮质酮组(CORT组),西酞普兰组(10 mg·kg-1)和柴胡总皂苷(25 mg· kg-1)组.CORT组、西酞普兰组和柴胡总皂苷组饮用皮质酮.造模3周后,ig给予柴胡总皂苷,给药时间为2周,至第5周结束,西酞普兰ig,给药时间同柴胡总皂苷.给药结束后1d,进行强迫游泳实验和水迷宫实验.行为学实验结束后,各组各取3只小鼠,断头,取海马,蛋白质免疫印迹(Western blot)进行脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶B(TrkB)蛋白表达检测.结果:柴胡总皂苷连续给药14 d,与正常组比较,对体重和空场实验运动路程及速度无影响.停药后1h和3d,柴胡总皂苷各剂量组均可缩短小鼠强迫游泳不动时间(P ＜0.01,P＜0.05);停药后6d,柴胡总皂苷25,50 mg· kg-仍可缩短小鼠强迫游泳实验不动时间(P＜0.05).柴胡总皂苷25 mg·kg-连续给药14 d,可缩短皮质酮损伤小鼠强迫游泳不动时间(P＜0.01),缩短水迷宫实验寻台潜伏期(P＜0.05),提高穿台次数(P＜0.05),并增加皮质酮损伤小鼠海马BDNF和TrkB蛋白表达(P＜0.01).结论:柴胡总皂苷连续给药产生较快而持久的抗抑郁作用,逆转皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍.其作用机制可能与增加小鼠海马BDNF及TrkB表达有关.
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清燥救肺汤对Lewis肺癌小鼠EGFR,NF-κB,ICAM-1表达及JAK1,STAT1蛋白磷酸化的影响
目的:观察清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌瘤重、瘤指数、检测核转录因子-κB(NF-κB),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),两面神激酶1(JAK1),表皮生长因子(EGFR)表达及信号传导及转录激活因子1(STAT1)蛋白磷酸化的影响.方法:雄性C57BL/6J小鼠50只,随机分为模型组,化疗[50 mg·kg-1·(2 d)-1]组,清燥救肺汤高、中、低剂量(15.2,7.6,3.8g·kg-1 ·d-1)组,每组10只.右腋下注射细胞建立荷Lewis肺癌小鼠模型,清燥救肺汤组以相应剂量造模前2周开始灌胃给药,环磷酰胺(CTX)组以CTX相应剂量腹腔注射给药,隔日1次,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,2周后处死各组小鼠并取瘤组织,称定质量计算瘤指数,免疫组化法检测NF-κB蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测ICAM-1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EGFR,pJAK1及pSTAT1蛋白表达.结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组瘤重、瘤指数显著降低(P＜0.01),清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组NF-κB蛋白表达,EGFR蛋白表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),清燥救肺汤高、中剂量组ICAM-1 mRNA,pJAK1蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),清燥救肺汤高、中、低剂量组pSTAT1蛋白磷酸化显著降低(P＜0.01),高、中剂量组效果优于CTX组(P＜0.01).结论:清燥救肺汤能显著抑制荷Lewis小鼠肺癌细胞增殖,其机制可能与降低NF-κB,ICAM-1,pJAK1,EGFR表达及抑制STAT1蛋白磷酸化有关.
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痰脂消汤调控PCOS-IR模型大鼠卵巢PI3K/Akt途径探讨
目的:观察痰脂消汤对来曲唑灌胃联合高脂膳食诱导的多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR)模型大鼠卵巢胰岛素信号转导途径的影响.方法:来曲唑灌胃联合高脂膳食喂养SD大鼠建立PCOS-IR模型,大鼠随机分为模型组、痰脂消汤组(35 g·kg-1·d-1)、二甲双胍组(200 mg·kg-1·d-1),连续灌胃20 d;另设正常组.实验结束后,腹主动脉采血,测定血清空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS)浓度,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠卵巢胰岛素受体(INSR),胰岛素受体底物(IRS)-1,酯酰肌醇-3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt) mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织INSR,IRS-1,PI3K,Akt蛋白及其相应磷酸化水平表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠空腹胰岛素(FINS),HOMA-IR水平均显著升高(P＜0.01),FPG无明显升高;模型组大鼠卵巢INSR,IRS,PI3K,Akt mRNA表达水平明显降低(P ＜0.05);INSR,p-INSR,IRS,p-IRS,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt等蛋白表达水平明显降低(P ＜0.05);INSR,IRS,PI3K及Akt磷酸化比例明显降低(P＜0.05).与模型组比较,中药和二甲双胍治疗后大鼠FINS,HOMA-IR均显著降低(P＜0.01);大鼠卵巢INSR,IRS,PI3K,Akt mRNA表达水平均明显升高(P ＜0.05);INSR,p-INSR,IRS,p-IRS,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt等蛋白表达水平明显升高(P ＜0.05);INSR,IRS,PI3K及Akt磷酸化比例明显升高(P＜0.05).结论:PCOS大鼠存在IR,卵巢内PI3 K/Akt信号途径转导存在异常.痰脂消汤能够显著改善大鼠胰岛素抵抗,可能与调控胰岛素信号转导通路中关键的蛋白表达有关.
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硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织中VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路的影响
目的:探讨硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织中VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路的影响.方法:SD雄性大鼠150只,随机分为5组,分别为正常组、模型组、硝菔通结方高、中、低剂量组(380,190,95 g·kg-1),每组30只,除正常组外采用复方地芬诺酯喀法建立SD大鼠功能性便秘模型,给予不同剂量硝菔通结方ig,共给药4周.检测大鼠首粒黑边排出时间及粪便含水率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白质免疫印迹(Western blot)分别检测治疗1,2,3周不同时间点大鼠结肠组织中血管活性肠肽(VIP),环磷酸腺苷(cAMP),蛋白激酶A(PKA),水通道蛋白3(AQP3) mRNA及蛋白质的表达变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠首粒黑便排出时间显著延长,粪便含水率显著降低(P＜0.01),结肠组织中VIP,cAMP,PKA,AQP3的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,硝菔通结方各剂量组大鼠首粒黑便排出时间显著缩短,粪便含水率明显增加(P＜0.05,P＜0.01),结肠组织中VIP,cAMP,PKA,AQP3的mRNA和蛋白表达水平均有升高趋势,且高、中剂量组较低剂量组升高更显著,给药后第2,3周较第1周的指标变化更显著(P＜ 0.05,P＜0.01).结论:硝菔通结方能够调节胃肠动力和改善肠道水液代谢治疗功能性便秘,其机制可能是通过干预VIP-cAMP-PKA-AQP3通路来实现,并且具有一定的时间和剂量依赖性.
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通络糖泰方对糖尿病周围神经病变大鼠JNK信号转导通路的影响
目的:观察通络糖泰方对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠JNK信号转导通路的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:SPF级GK大鼠给予高脂饲料喂养建立DPN大鼠模型,50只造模成功的GK大鼠随机分为5组,每组大鼠均为10只,分别为模型组,通络糖泰方高、中、低剂量组,西药联合(二甲双胍+弥可保)组,同时设立正常组Wistar大鼠为10只,分别给予相应处理4周后以免疫组化方法检测坐骨神经组织磷酸化氨基末端激酶(p-JNK),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)方法检测JNK,胰岛素样生长因子1(IGF-1)mRNA的表达水平,酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),C-反应蛋白(CRP),髓磷脂碱性蛋白(MBP)水平.结果:与正常组比较,模型组p-JNK及Caspase3蛋白和JNK mRNA的表达明显升高,IGF-1 mRNA的表达明显降低,血清TNF-α,IL-6,CRP,MBP的水平明显升高(P＜0.05);与模型组比较,通络糖泰方能一定程度下调p-JNK及Caspase3蛋白和JNK mRNA的表达,上调IGF-1 mRNA的表达,明显升高坐骨神经传导速度,明显降低血清TNF-α,IL-6,CRP,MBP的水平(P＜0.05).结论:通络糖泰方可能通过抑制高糖应激诱导的JNK信号转导通路的异常激活,改善细胞凋亡、胰岛素抵抗、炎症反应、下游靶基因的异常表达等病理过程,达到防治DPN发生发展的作用.
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黄芪提取物对结肠腺癌Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响
目的:探讨黄芪提取物对Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响,并探讨其作用机制.方法:采用系统溶剂法提取黄芪各部位,以Caco-2细胞为研究对象,设立空白组和黄芪各提取部位组(乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇4个部位组).以荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)做为光学探针检测黄芪各提取部位对Caco-2细胞葡萄糖吸收能力的影响.筛选出黄芪中促进Caco-2细胞葡萄糖吸收的药效部位后,对这一药效部位有效作用浓度进行考察.采用蛋白免疫印迹法(Western blot)法测定Caco-2细胞钠依赖葡萄糖转运蛋白(SGLT1)和2型葡萄糖转运蛋白(GLUT2)蛋白表达.结果:黄芪正丁醇提取部位可以促进Caco-2细胞葡萄糖的吸收,与空白组比较,黄芪正丁醇提取部位100,150 mg·L-1组Caco-2细胞葡萄糖含量升高(P ＜0.05,P＜0.01);且黄芪正丁醇部位可以上调Caco-2细胞GLUT2和SGLT1蛋白的表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论:黄芪正丁醇萃取部位可以促进Caco-2细胞葡萄糖的吸收,这一作用机制可能与SGLT1和GLUT2蛋白的调节有关.
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定心方上调ApoE-/-小鼠PTEN表达抑制动脉粥样硬化形成的分析
目的:探讨定心方(DXR)对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠人第十号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同系物(PTEN)的影响,以及DXR抗AS的可能机制.方法:将50只ApoE-/-小鼠随机分为模型组,辛伐他汀组,DXR低、中、高剂量组,另取10只C57/BL6J小鼠作为正常组.分别给予DXR低、中、高组按剂量9.25,18.59,37.18 g·kg-1 ·d-1DXR药液ig,辛伐他汀组按剂量0.005 g·kg-1 ·d-1ig辛伐他汀,高脂饲料喂养16周后处死,苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块面积,检测小鼠血脂以及血清中丙二醛(MDA),总超氧化物歧化酶(T-SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),总抗氧化能力(T-AOC)水平.蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测胸主动脉PTEN蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组小鼠血脂及MDA明显升高(P＜0.05),T-SOD,GSH-Px,T-AOC水平降低,胸主动脉PTEN蛋白表达明显降低(P＜0.05);与模型组比较,DXR中、高剂量组能明显降低ApoE-/-小鼠血脂水平,升高T-SOD,GSH-Px,T-AOC水平,并降低MDA水平(P＜0.05),且能上调ApoE-/-小鼠主动脉PTEN蛋白表达水平(P＜0.05).DXR各剂量组斑块面积较模型组明显缩小(P＜0.05).结论:DXR可通过调节ApoE--小鼠血脂代谢,抑制氧化应激,上调PTEN蛋白表达,进而抑制ApoE--小鼠AS的发生发展.
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枳术颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织COX-2和VEGF表达的影响
目的:观察枳术颗粒对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠的疗效,并探讨其作用机制.方法:选取已建立CAG模型的大鼠,分为模型组,胃复春(0.86 g·kg-1)组,枳术颗粒高、中、低剂量(20,10,5 g·kg-1)组.用蛋白免疫印迹法(Western blot),免疫组化及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测胃组织中环氧合酶-2(COX-2),血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜腺腔结构不完整,炎细胞浸润黏膜全层,体重增长率降低,COX-2,VEGF蛋白及mRNA表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,枳术颗粒高、中、低剂量组及胃复春组均显著增加CAG大鼠体重增长率(P＜0.01),下调大鼠胃组织COX-2,VEGF蛋白及mRNA表达(P＜0.01);与胃复春组比较,枳术颗粒高、中、低剂量组均显著增加CAG大鼠体重增长率(P＜0.01),高剂量组可下调大鼠胃组织COX-2,VEGF蛋白及mRNA表达,但无明显差异.结论:枳术颗粒可加快大鼠体重增长,使CAG大鼠胃黏膜组织得到改善和恢复.其作用机制可能为下调胃黏膜破坏因子COX-2,VEGF的表达,起到预防及治疗作用.
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肝豆汤对Wilson病模型TX小鼠肝细胞内铜代谢通路的分子调控机制
目的:探讨肝豆汤调控毒牛奶(TX)小鼠肝细胞内铜转运通路的分子靶点并观察其相应的调控机制.方法:20只家兔适应性喂养3d后,随机分为空白组(生理盐水)和肝豆汤组(4.5 g·kg-1·d-1),每日2次ig,连续10 d,制得含药血清;采用2步灌注法分离提取DL,TX小鼠肝细胞,采用原子吸收法检测加含不同百分含量(5％,10％,15％,20％)含肝豆汤兔血清作用24 h后,对TX小鼠肝细胞内微量元素的影响,另设空白组;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测经含肝豆汤兔血清作用后腺嘌呤核苷三磷酸7b(adenosine triphosphate7b,ATP7b),抗氧化蛋白1(anti-oxidant1,ATOX1),铜转运体1(coppertransporter1,CTR1),金属巯蛋白(metallothionein,MT),超氧化剂物歧化酶铜伴侣蛋白(copper chaperone of superoxide dismutase,CCS),细胞色素氧化酶17(cytochrome-coxidase17,COX17)蛋白的表达.结果:与空白组比较,模型组TX小鼠肝细胞内铜含量升高,锌含量降低,铁含量升高,ATP7b,ATOX1,CCS,COX17蛋白表达明显降低,CTR1,MT蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,含肝豆汤兔血清可显著降低TX小鼠肝细胞内铜含量,增加锌含量,降低铁含量(P ＜0.05,P＜0.01);Western blot检测结果显示,含肝豆汤兔血清可明显增加ATP7b,ATOX1,CCS,COX17蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01),降低CTR1,MT蛋白表达(P＜0.01).结论:肝豆汤可能是通过调控细胞内铜代谢相关蛋白,上调ATP7b,ATOX1,CCS,COX17蛋白表达,抑制CTR1,MT表达,从而发挥细胞内排铜作用.肝豆汤可通过多靶点、多途径调控铜代谢通路达到降低肝细胞内铜含量的治疗效果.
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正天丸挥发性成分的气相特征图谱分析
目的:建立正天丸中挥发性成分的气相特征图谱,为该制剂的质量控制提供参考.方法:采用水蒸气蒸馏法提取正天丸中挥发性成分,通过气相色谱法对16批正天丸中挥发性成分进行分析,以相对保留时间为指标,建立正天丸挥发性成分的气相特征图谱,考察14批正天丸中间体和制剂特征图谱的差异性.结果:正天丸挥发性成分气相特征图谱指定了20个共有峰,确定了3个化学成分(阿魏酸、甲基丁香酚和藁本内酯).精密度、重复性、稳定性试验中共有峰相对保留时间RSD均＜0.1％;14批正天丸中间体挥发性成分气相图谱各共有峰相对保留时间RSD均＜0.1％,与制剂特征图谱相对保留时间差别不大.结论:建立的正天丸挥发性成分气相特征图谱特征性强、方法准确可靠、重复性好,可用于正天丸挥发性成分的质量控制.正天丸制备工艺成熟、稳定,制剂批间一致性良好.
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UPLC-Q-TOF-MSE结合相对保留时间在线快速鉴定麦冬中甾体皂苷类成分
目的:采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MSE)表征并快速在线鉴定麦冬中甾体皂苷类成分;结合呋甾皂苷在反向色谱上的保留规律,鉴别同分异构体.方法:运用2种反相色谱柱(ACQUITY UPLC HSS T3和Agela VenusilXBP C18-2),在2种溶剂系统(0.1％甲酸/水-0.1％甲酸/乙腈,丙酮-水)和3个洗脱条件下对系列呋甾皂苷的色谱保留规律进行总结.利用UPLC-Q-TOF-MSE对麦冬成分进行分析,获得质谱数据.结果:3种色谱条件下呋甾皂苷的相对保留时间一致,呈现如下保留规律:甾体皂苷中糖链结构相同,苷元上羟基的数目越多保留时间越短;仅羟基位置不同时,保留时间为1位羟基＜17位羟基＜14位羟基;仅C-26位糖链糖基连接位置不同时,葡萄糖-(1→6)-葡萄糖＜葡萄糖-(1→2)-葡萄糖;从麦冬表征的图谱中共鉴定了21个色谱峰,其中14个呋甾皂苷,7个为螺甾皂苷.结论:色谱保留时间能为呋甾皂苷同分异构体的液质联用在线鉴定提供有益的数据支持.
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忍冬木层孔菌子实体的化学成分
目的:对忍冬木层孔菌PheUinus lonicerinus子实体进行提取、分离、结构鉴定.方法:通过正向硅胶,RP-18及凝胶SephadexLH-20等材料从忍冬木层孔菌乙酸乙酯部位进行分离纯化,通过波谱分析确定了化合物的结构.结果:分离纯化得到10个化合物,它们分别为亚油酸甲酯(1),麦角甾4,6,8 (14),22-四烯-3-酮(2),过氧麦角甾醇(3),麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(4),对羟基苯乙醇(5),2,5-呋喃二甲醇(6),邻羟基苯乙酸(7),环(亮-缬)二肽(8),麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(9),脑苷脂D(10).结论:除化合物3,4外其余8个化合物均为首次从该种真菌中分离得到.
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UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS对紫花地丁中化学成分的快速表征
目的:采用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱法(UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)对紫花地丁水提取物的主要化学成分进行分析鉴定.方法:采用Welch C18色谱柱(2.1 mm×100mm,1.7 μm),以0.1％甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速0.35 mL· min-,质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正负离子模式下采集数据,运行时间为30 min.结果:通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定32个化合物,包含香豆素、黄酮及有机酸类成分.结论:该研究利用UHPLC的高效分离能力和MS的高灵敏度检测优势,建立的分析方法,为控制紫花地丁药材质量、临床疗效及阐释其作用机制提供了科学依据.
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蘘荷提取物抗氧化能力及抑菌作用
目的:以新鲜蘘荷Zingiber mioga花蕾为原料,探讨蘘荷花蕾不同提取部位的抗氧化作用,并筛选其有效抑菌部位.方法:蘘荷花蕾用甲醇提取浓缩,依次萃取得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水等5个萃取部位后,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除模型评价不同萃取部位抗氧化能力,用打孔扩散法考察萃取部位对大肠埃希菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的体外抑菌活性.结果:加热回流法提取蘘荷花蕾,提取率为3.1％,其中乙酸乙酯部位DPPH自由基清除能力高,半数抑制率(IC50)达到(26.22±1.12)mg·L-1,对铜绿假单胞菌的抑菌圈达到(10±1) mm,石油醚部位抑菌活性高,对金黄色葡萄球菌的低抑菌浓度(MIC)低,达到25.0 mg·L-1.结论:蘘荷花蕾各部位均有一定的抗氧化能力,综合抑菌效果比较石油醚部位＞二氯甲烷部位＞乙酸乙酯部位＞甲醇提取物,为蘘荷花蕾抗氧化产品、抑菌剂的开发利用提供理论基础.
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鸡冠花有效成分与药材粉末颜色的相关性
目的:研究鸡冠花药材粉末颜色与其有效成分含量的相关性.方法:用电子感观分析法(色度计)测量药材粉末L*,a*,b*值,用RP-HPLC法同时测定鸡冠花4种有效成分含量,用紫外-可见分光光度法测定鸡冠花总黄酮(以芦丁计)含量,用SPSS 19.0分析颜色值与有效成分含量间的相关性.结果:L*与木犀草素、槲皮素、山柰酚、异鼠李素含量呈极显著负相关;a*与木犀草素、槲皮素、山柰酚含量呈极显著正相关;b*与木犀草素、槲皮素、山柰酚呈极显著负相关.a*,b*与异鼠李素含量不相关,L*,a*,b*与总黄酮(以芦丁计)的含量不相关.结论:鸡冠花粉末颜色越暗、偏红程度越大,其木犀草素、槲皮素、山柰酚含量越高,而偏黄程度大,则木犀草素、槲皮素、山柰酚含量越低;鸡冠花异鼠李素含量仅与鸡冠花粉末明暗程度相关(负相关);鸡冠花总黄酮含量(以芦丁计)与其粉末颜色不相关.木犀草素、槲皮素、山柰酚代表了植物中多的黄酮醇类化合物,因此用它们作对照品来分析药材有效成分与粉末颜色相关性有一定意义,且测定鸡冠花的颜色值用以评价其质量具有简便、节能的优点,可为鸡冠花的质量控制提供新的途径和参考.另外,鸡冠花主要色素类成分为红色素,鸡冠花粉末颜色值是否反应鸡冠花红色素的含量以及鸡冠花具体发挥作用的成分有待于进一步研究.
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一株黄芪内生真菌AR08中fumiquinazoline类生物碱
目的:研究黄芪内生真菌AR08的次级代谢产物.方法:采用反复硅胶柱色谱法,Sephadex LH-20凝胶色谱法结合HPLC等进行分离纯化,通过波谱分析鉴定其发酵液中分离得到6个生物碱的结构.结果:6个fumiquinazoline类生物碱鉴定分别为fumiquinazoline J(1),fumiquinazoline Ⅰ(2),fumiquinazoline C(3),fumiquinazoline H(4),fumiquinazoline D(5),fumiquinazoline B(6).结论:化合物2和4是首次从植物内生真菌中分离得到.
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助胃膏结合推拿治疗脾胃虚弱型小儿厌食症的临床观察
目的:探讨助胃膏结合推拿对厌食症患儿的体重、体质指数(body mass index,BMI),血清中微量元素钙、铁、锌、血红蛋白,食欲调节因子促食欲激素/瘦素(Ghrelin/Leptin),神经肽Y(NPY),中医临床证候积分的变化及临床疗效.方法:选取1～7岁符合诊断标准的患儿94例,随机分为治疗(助胃膏结合推拿)组与对照(健胃消食口服液)组,各47例.治疗组口服助胃膏3次/日,1丸/次,连续6日为1疗程,共治疗2个疗程;推拿1次/日,连续6日为1疗程,疗程间隔2日,共治疗2个疗程.对照组口服健胃消食口服液,按年龄服用,1岁以下5 mL/次,2次/日;5岁以上每次10 mL,3次/日;余者每次10mL,2次/日.观察两组治疗前后体重,BMI,血清中微量元素钙、铁、锌、血红蛋白,Ghrelin/Leptin,中医临床证候积分变化及临床疗效.结果:治疗组总有效率为87％,高于对照组总有效率的70％ (P ＜0.05),助胃膏结合推拿可有效改善患儿体重,BMI,血清中微量元素,血红蛋白,食欲调节因子Ghrelin/Leptin值,NPY水平,且疗效优于对照组(P＜0.05).结论:助胃膏结合推拿可有效改善患儿的食欲状况,疗效优于常规中成药.
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复方黄柏液促进糖尿病足溃疡愈合及其中AGEs与炎性因子的相关性
目的:探讨复方黄柏液促进糖尿病足溃疡愈合过程中对炎性因子的影响,观察其促进创面组织愈合的作用.方法:选择2014年5月-2015年6月东直门医院确诊的糖尿病足溃疡湿热毒盛证患者120例,随机分为治疗组和对照组,各60例,治疗组局部外用复方黄柏液,对照组外用康复新液,每日换药1次.于用药前0d,用药后7,14,21,28 d分别抽取静脉血,动态监测血清中超敏C反应蛋白(high sensitive C reactive protections,hs-CRP),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),晚期糖基化终末化产物(advanced glycation end-products,AGEs)动态变化情况,治疗4周后,观察两组临床症状改善情况.结果:在炎症反应的早期,两组患者hs-CRP,TNF-α,IL-6均明显上升(P＜0.05),第7,14,21,28天,治疗组和对照组均可明显降低hs-CRP,TNF-α,IL-6水平(P＜0.05),其中,治疗组效果优于对照组(P＜0.05);与对照组比较,第7,14,21,28天治疗组和对照组AGEs水平均呈下降趋势,与对照组比较,治疗组AGEs下降明显(P＜0.05),动态分析认为AGEs与炎性因子呈显著正相关;患者在主证积分、次证积分方面的改善治疗组均优于对照组(P＜0.05),经复方黄柏液治疗的治疗组总有效率83.3％,对照组总有效率71.6％,治疗组总疗效优于对照组(P＜0.05).结论:复方黄柏液对糖尿病足溃疡湿热毒盛证患者治疗有效,值得临床推广.
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单纯形网格法优选柿叶总黄酮自微乳处方
目的:采用单纯形网格法优选柿叶总黄酮自微乳的处方,为该制剂的后续研究奠定基础.方法:在制备工艺初步筛选基础上,以油相、乳化剂、助乳化剂的比例为考察因素,粒径、多分散指数及载药量为评价指标,采用单纯形网格法优选柿叶总黄酮自微乳的处方,并测定该自微乳的黏度、溶出度等基本理化性质.结果:柿叶总黄酮自微乳佳处方为中链甘油三酸酯-聚氧乙烯氢化蓖麻油-二乙二醇乙基醚(10∶30∶60);平均粒径、多分散指数、载药量分别为32.7 nm,0.163,22.42 mg·g-1,黏度低,性质稳定,20 min累积溶出度达89.09％.结论:单纯形网格法所建数学模型预测性好,分析准确客观,为自微乳处方的优选提供了新方法.
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大孔吸附树脂富集金银花中环烯醚萜苷类成分的工艺优选
目的:优选大孔吸附树脂分离纯化金银花中环烯醚萜苷类成分的工艺条件,为该药材资源的充分利用与开发提供参考.方法:采用UPLC对马钱苷酸、獐芽菜苷、断氧化马钱子苷和7-表-马钱子苷进行定量分析,流动相0.1％甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.3 mL· min-,柱温40℃,检测波长236.5 nm,进样量1μL.通过静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号,单因素试验优选金银花中环烯醚萜苷类成分的纯化工艺条件.结果:选择H-103型大孔树脂,上样液质量浓度100 g·L-1,吸附流速2.0 BV.h-1,上样量2.5 BV,吸附后加水2.5 BV和30％乙醇3 BV洗脱,洗脱流速2.0 BV·h-1.总环烯醚萜苷的洗脱率达90.0％,浸膏中总环烯醚萜苷质量分数达25.6％.结论:H-103型大孔树脂对金银花中环烯醚萜苷类成分具有较好的分离和纯化效果,工艺操作简单、稳定可行,适用于工业化生产.
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黄芩炒炭前后挥发性成分的GC-MS分析
目的:比较黄芩炒炭前后挥发性成分的含量变化,为阐明其炮制机制提供参考.方法:利用水蒸气蒸馏法提取黄芩中挥发油,利用GC-MS分析黄芩炮制品中挥发油成分的组成及含量变化,DB-5MS气相色谱柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),载气为氦气,电子轰击电离源,离子源温度280℃,质谱接口温度280℃,电子能量70 eV.全离子扫描,质量扫描范围m/z 33～350,流速40 mL·min-,分流比5∶1,采集延时2 min,图谱采集时间50.0 min.通过检索比对NIST-05标准质谱图谱库,鉴定样品挥发油中化学成分.结果:生黄芩、黄芩炭中挥发油提取量分别为1.3,0.8μL·g-1,GC-MS共鉴定了50种挥发油成分,其中生黄芩25种,黄芩炭31种.根据峰面积归一化法分析,鉴定的成分分别占生黄芩、黄芩炭饮片挥发油总量的100.00％,99.93％.结论:黄芩炒炭后挥发性成分含量有所降低,挥发性成分组成有所改变,但炒炭后挥发性成分尚存,可为阐释黄芩“炒炭存性”的炮制机制提供科学依据.
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栀子柏皮汤半仿生提取药材组合方式的优选
目的:优选栀子柏皮汤半仿生提取药材组合方式,为栀子柏皮汤提取工艺提供依据.方法:将方中方药按“君(A),臣(B),佐(C),使(D)”进行组合排列,共5种,用半仿生提取方法进行提取;以相对分子质量≤1 000 Da提取物、栀子苷、盐酸小檗碱、甘草次酸、总生物碱为指标,将各指标测得值标准化处理,经加权求和后得到综合评判值进行比较,大者为优.结果:5个指标综合评判值排序依次为B +AC ＞A +B +C ＞C +AB ＞ABC ＞A +BC,以B+AC(关黄柏单煎,栀子、甘草合煎)大.结论:栀子柏皮汤半仿生提取方法以关黄柏单煎,栀子、甘草合煎,后合并提取液为佳.
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斑蝥素载药胶束的制备及其体外释药性能考察
目的:制备pH敏感斑蝥素聚合物胶束纳米制剂,以提高斑蝥素在水中的溶解度,并考察该制剂在弱酸性条件下的体外释药特性.方法:以聚乙二醇-聚乳酸共聚物[poly(ethylene glycol)-b-polylactide,PELA]和聚乙二醇-聚乳酸-聚(β-氨基酯)[poly(ethylene glycol)-b-polylactide-b-poly(β-amino ester),PELA-PBAE]为载体,采用薄膜水化法制备斑蝥素胶束.通过透射电子显微镜观察胶束的微观形态,采用粒度分析仪测定粒径,HPLC测定其载药量和包封率,透析袋透析法测定纳米胶束在不同pH条件下的释放特性.结果:斑蝥素胶束呈明显的球状结构,PELA载药(PELA-C)胶束和PELA-PBAE载药(PELA-PBAE-C)胶束的粒度分别为21.6,21.2 nm,且至少在5d内稳定;载药量分别为1.68％和1.72％,包封率分别为92.0％和88.8％;在pH5.5下的8h累计释放率分别为24.7％和79.1％,在pH 6.5下的8h累计释放率分别为13.6％和50.0％,在pH 7.4下的8h累计释放率分别为10.2％和13.9％.结论:PELA-PBAE作为纳米载体能明显提高斑蝥素的水溶性,体外释药具有显著的pH响应性能,在抗肿瘤药物的开发方面具有较好的应用前景.
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58种活血化瘀类复方中成药抗血小板聚集活性评价揭示的方剂配伍规律
目的:通过评价58种活血化瘀类复方中成药抗血小板聚集活性并探究其用药规律,为抗血小板现代中药的研发提供一定的实验依据.方法:使用高通量微孔板比浊法检测药物对由二磷酸腺苷(ADP),凝血酶诱导的血小板聚集反应的抑制作用.结果:有41种活血化瘀类复方中成药能不同程度(药物血小板抑制聚集率达30％～98％)的拮抗ADP和凝血酶诱导的血小板聚集,其中有18种药物对诱导剂具有选择性.受试药物中,抗血小板聚集活性较高的复方多含有丹参、川芎、红花、三七、冰片等药味.活血化瘀类复方中成药多配伍补虚药、开窍药、止血药发挥其抗血小板聚集的作用.结论:活血化瘀类复方中成药可通过抗ADP和抗凝血酶的途径发挥抗血小板聚集作用,复方中配伍“理气”、“补气”、“开窍”等功效的药味或可增强其抗血小板聚集活性.
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基于中医传承辅助平台对岭南湿病组方规律的分析
目的:对岭南医家湿病治疗的组方规律、特点进行分析总结,为全国其他地区湿病的研究提供参考.方法:运用中医传承辅助平台V2.5软件对民国以前岭南代表医家著作进行整理并建立数据库,运用平台数据挖掘原理分析用药规律.结果:筛选方剂共161首,中药共计211味,降序排列方中药物使用频次,提取新处方核心药物组合共20个,演化新处方10个.结论:根据中医传承辅助平台的多角度分析,提示岭南地区湿病治疗应以燥湿利湿、温经化湿、理脾行气和血为主要原则.
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基于中医传承辅助系统分析钟孟良教授治疗痹证的用药经验
目的:基于中医传承辅助系统(V2.5)软件,分析钟孟良教授治疗痹证的用药经验.方法:收集钟孟良教授治疗痹证的病案,采用关联规则Apriori算法、复杂系统熵聚类及无监督的熵层次聚类等数据挖掘方法,结合专家校审,共同分析所选处方中药物的使用频次、配伍及组方规律等.结果:对筛选出的138个处方进行分析,得出钟教授治疗痹证的常用药物有黄芪、附子、木瓜等20种,得到核心组合22个和治疗痹证的新处方11个.结论:钟孟良教授对于痹证的治疗有着丰富的经验,多用益气温阳,祛风除湿,通络止痛之品随症加减,在临床均取得很好的疗效.
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UPLC-MS/MS测定十五味乳鹏丸中3种生物碱在大鼠体内的药代动力学
目的:采用超高效液相色谱质谱联用法测定大鼠灌胃十五味乳鹏丸后体内3种生物碱(乌头碱、新乌头碱、次乌头碱)的血浆药物浓度并进行药代动力学参数评价.方法:Welch UPLC XB-C18色谱柱(2.0 mm ×50 mm,1.7 μm),乙腈-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.35 mL·min-1,柱温40℃,进样量5μL,采用电喷雾正离子化质谱法监测血浆中各成分的浓度.结果:乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的线性范围分别为分别在126.56 ～10 125,18.75～1 500,16.32～1 305.5 ng·L-1.3种生物碱在大鼠体内的主要药代动力学参数药峰浓度(Cmax)分别为(0.75±0.14),(0.23±0.03),(0.17±0.02)μg·L-1,消除半衰期(t1/2)分别为(2.93±1.72),(3.02±1.60),(3.70 ±2.63)h,药时曲线下面积AUC0-t分别为(5.03±1.37),(1.51±0.26),(1.14±0.21)h·μg·L-1.结论:该方法快速、准确、灵敏,可用于该类成分的血药浓度测定及其药代动力学研究,为十五味乳鹏丸的体内研究提供参考.
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雷公藤致大鼠肾毒性血清代谢组学分析
目的:联合超高效液相色谱与复合型三重四级杆/线性离子阱串联质谱联用技术(UFLC-MS/MS)及统计学分析方法研究雷公藤对大鼠血清中内源性小分子化合物的影响和肾毒性作用机制,寻找与肾毒性相关的生物标记物和代谢通路.方法:利用试剂盒法测定给药14 d后大鼠血清生化指标,观察肾组织切片.血清样本采用乙腈沉淀蛋白法,UFLC-MS/MS分析测定,正离子一级全扫描模式,经主成分分析法和主成分判别分析法处理数据.结果:与空白组大鼠相比,雷公藤乙醇提取物组大鼠血清生化指标(血清肌酐、尿素氮)显著升高;组织病理学切片明显病变,表明造模成功.血清中二甲基甘氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、溶血卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸和甘油二酯等9种代谢物有显著性差异,鉴定为雷公藤致肾毒性的生物标记物.结论:雷公藤对肾脏的毒性作用机制可能与氨基酸代谢、磷脂代谢等有关,为雷公藤类药物临床毒性的早期预防提供参考.
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桂郁金EST资源的SSR信息分析及EST-SSR标记开发
目的:分析桂郁金EST中SSR位点分布规律,开发桂郁金EST-SSR引物,探讨EST-SSR用于桂郁金品种遗传多样性的可行性.方法:从NCBI公共数据库下载姜黄属EST序列(expressed sequence tag,EST)12 678条,利用MISA软件对其进行SSR位点查找,选出符合条件的序列,采用Primer 5.0软件设计EST-SSR引物,利用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳研究这些EST-SSR引物PCR扩增的特点,进一步验证开发结果的合理性与有效性.结果:下载得到的12 678条EST序列中,共有926条序列包含SSR位点,占整个EST数据库的7.30％,其中SSR位点所占比例大的是二核苷酸重复序列,三核苷酸和四核苷酸次之,分别为623 (50.90％)个,388 (31.70％)个和125(10.21％)个.根据筛选得到的微卫星序列共设计了165个EST-SSR引物对,选择其中92分以上的24个合成.PCR检测表明,21个引物对(87.50％)可以扩增出稳定清晰的带型;在6份不同种质桂郁金中检测到13对EST-SSR引物有多态性,占设计引物的54.17％.利用13对验证的EST-SSR引物对20个桂郁金品种进行了亲缘关系分析.结论:桂郁金EST-SSR标记开发的效率较高,是桂郁金SSR标记开发的重要措施,对于桂郁金品种鉴定和遗传多样性分析以及育种等方面具有重要的意义.
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飞龙掌血根皮的生药学鉴别与止血活性考察
目的:开展飞龙掌血根皮的组织切片、粉末显微方面的生药学鉴别研究,以及其止血活性与样品制备方法研究.方法:通过制作飞龙掌血全根横切片,飞龙掌血根皮与根心各自粉末的水装片、透化片、染色片,运用生药学传统鉴别手段完善飞龙掌血全根的组织切片特征,寻找飞龙掌血根皮与根心之间的粉末显微特征.采用小鼠断尾法、毛细玻管法,以出血时间、出血量、凝血时间为指标,考察不同提取方法、不同极性部位对飞龙掌血根皮止血活性的影响.结果:飞龙掌血根皮含有大量石细胞、草酸钙方晶、木栓细胞、油细胞等,飞龙掌血根心含木纤维、草酸钙方晶、网纹纹孔导管等.95％乙醇冷浸提取与50％乙醇回流提取都适合于飞龙掌血根皮提取;冷浸浸膏乙酸乙酯部位止血活性优于石油醚部位和正丁醇部位,冷浸浸膏乙酸乙酯部位按剂量1.50 g·kg-1给药,平均出血时间、出血量、凝血时间依次为(59.67±12.31)s,(4.42±1.67) mg,(79.67±5.57)s.结论:石细胞、木栓细胞、油细胞是飞龙掌血根皮的显微鉴别项目,木纤维是飞龙掌血根心的专有鉴别项目.飞龙掌血根皮的提取应结合乙醇冷浸法和回流法,飞龙掌血根皮具有良好的止血凝血效果,以冷浸提取乙酸乙酯部位止血效果好.
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湖北省淫羊藿属植物种质分布及质量评价
目的:掌握湖北省淫羊藿属植物资源种质分布,进而系统评价其药材质量,以期扩大药源,达到资源的合理利用和可持续发展.方法:通过查阅文献、标本、专著及花期深入野外调查,对湖北省淫羊藿属植物种类进行整理.并对调查到的物种进行花期居群采样,基于朝藿定A,B,C及淫羊藿苷进行质量评价.结果:各类文献和标本记载湖北省共分布淫羊藿属植物24种1变种,但由于该属类群处理更新较为频繁,且狭域分布种极易受生境影响,野外调查仅采集到11种.基于4种活性成分的质量分析表明,箭叶淫羊藿质量好;直距淫羊藿、长蕊淫羊藿和巫山淫羊藿质量较佳;四川淫羊藿4种成分含量均甚微;黔岭淫羊藿、木鱼坪淫羊藿、竹山淫羊藿、紫距淫羊藿、保靖淫羊藿和短茎淫羊藿则4种成分均未检测到.且箭叶淫羊藿和长蕊淫羊藿不同居群间含量差异较大.结论:由于分类学处理和植物生境的变化,淫羊藿属植物资源信息亟待更新.湖北省淫羊藿属植物种类丰富,尽管大部分非《中国药典》收录种的指标成分含量均较低,但其中直距淫羊藿和长蕊淫羊藿质量较好,其优异居群可作为资源利用的候选种质.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
