中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位: 国家中医药管理局
- 主办单位: 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子: 1.62
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1005-9903
- 国内刊号: 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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肝豆汤改良方对Wilson's病模型TX乳鼠神经元内Cyt C/Caspase信号通路的分子调控机制
目的:探讨肝豆汤改良方调控TX乳鼠神经元内细胞色素C(Cyt C)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)信号通路的分子靶点并观察其相应的调控机制.方法:本实验乳鼠神经元通过原代方法分离培养所得,分为正常组、模型组、肝豆汤改良方组、丁苯酞组,正常组为正常DL乳鼠神经元,用完全培养基培养,模型组为TX乳鼠神经元,用10%空白兔血清培养,肝豆汤改良方组为TX乳鼠神经元,加入含体积浓度(5%,10%,15%,20%)肝豆汤改良方兔血清的培养基继续培养,丁苯酞组为TX乳鼠神经元,用10%含丁苯酞兔血清培养.采用原子吸收分光光度法检测不同浓度含肝豆汤改良方兔血清作用24 h后,对TX乳鼠神经元内微量元素的影响;流式细胞仪检测经肝豆汤改良方兔血清作用后活性氧(ROS)释放量的变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测经含肝豆汤改良方兔血清作用后Cyt C,Caspase-9,Caspase-3蛋白的表达.结果:与模型组比较,含肝豆汤改良方兔血清可显著降低TX乳鼠神经元内铜、铁含量,增加锌含量(P<0.01).流式细胞仪检测发现,含肝豆汤改良方兔血清较模型组可显著降低TX乳鼠神经元内ROS的释放量(P<0.01).Western blot检测结果显示与模型组比较,含肝豆汤改良方兔血清可显著降低TX乳鼠神经元内Cyt C,Caspase-9,Caspase-3蛋白表达(P<0.01).结论:肝豆汤改良方可能是通过促进过量铜排出而抑制神经元内Cyt C,Caspase-9,Caspase-3表达,从而减轻高铜对神经元的损伤作用.肝豆汤改良方可通过减少脑内铜含量,进而调控Cyt C/Caspase信号通路达到减轻高铜诱导的神经元损伤的治疗效果.
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氧化苦参碱通过免疫调节保护刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤
目的:本文旨在研究氧化苦参碱(OMT)对刀豆蛋白A(ConA)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用.方法:Balb/C小鼠随机分为5组,分别为正常组,模型组,氧化苦参碱低、高剂量(60,120 mg·kg-1)组和双环醇(156 mg·kg-1)阳性药组.连续给药5d,末次给药30 min后,除正常组外,其余各组均尾静脉注射ConA(15 mg·kg-1)建立肝损伤模型.造模8h后,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL)的表达.采用Luminex多因子检测的方法,检测血清干扰素-γ(IFN-γ),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-4(IL-4),IL-6,IL-10,IL-27表达,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理改变.流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞CD4+ IL-17A的表达,CD4+ CD25+ FoxP3+调节性T细胞(Treg)亚群的比例.结果:与正常组比较,ConA模型组ALT,AST,TBIL表达明显增高(P <0.05,P<0.01).与模型组比较,双环醇和OMT低高剂量组均可明显降低ALT活性(P <0.05,P<0.01).OMT高剂量可明显抑制AST表达(P<0.05),OMT低高剂量均可抑制TBIL表达(P<0.05),其余各组无统计学差异.各给药组均能不同程度缓解肝脏病理改变,减少炎性细胞浸润.OMT高剂量组血清IL-10,IL-27水平与模型组比较显着升高(P<0.05).流式细胞术检测结果显示,OMT高剂量组可明显降低CD4+ IL-17A表达(P<0.05),上调CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg比例(P<0.05).结论:OMT对ConA诱导小鼠免疫性肝损伤具有较好的保护作用,抑制CD4+ IL-17A的表达,上调CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg比例可能是其主要的作用机制.
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重楼皂苷Ⅰ诱导G2/M期阻滞及干扰微管结构抗结肠癌HCT116细胞作用机制
目的:探讨重楼皂苷Ⅰ (PPI)对人结肠癌HCT116细胞周期的影响,并研究其作用机制.方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测PPI对HCT116细胞的体外抑制活性;采用Hoechst33258染色法观察PPI对HCT116细胞核数量的影响;采用流式细胞仪检测PPI对HCT116细胞周期的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶(CDC2)和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)蛋白的表达和活性,利用细胞免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜检测PPI对HCT116细胞微管的影响.结果:PPI以剂量~时间依赖的方式抑制HCT116的体外增殖,Hoechst 33258染色发现PPI处理组双核细胞数量明显增加(P <0.05,P<0.01);将其细胞周期阻滞于G2/M期;PPI未能抑制G2/M期相关蛋白CDC2,CDC25C的表达和活性,却有促进作用;PPI可导致细胞微管结构紊乱.结论:PPI会导致HCT116细胞阻滞在G2/M期,其作用机制与干扰细胞内微管结构有关.
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黄芪甲苷配伍姜黄素对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤转移的抑瘤作用
目的:研究黄芪甲苷配伍姜黄素对人卵巢癌H O-8910原位移植瘤出现转移的抑瘤作用,探讨两者配伍对抗肿瘤是否有协同增效作用.方法:选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌动物模型,设G1模型组,G2顺铂组,G3黄芪甲苷组,G4姜黄素组,G5黄芪甲苷+姜黄素配伍组,每组8只.称瘤重并计算抑瘤率;免疫组化法检测肿瘤组织基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2),B细胞淋巴瘤/白血病-2(apoptosis regulator,Bcl-2)的蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测MMP2,Bcl-2及miR21,miR15a,miR200a基因表达.结果:荷瘤鼠经治疗后,与模型组比较,瘤重均有所减小,配伍组瘤重明显低于其他组(P<0.05).免疫组化结果显示,与模型组比较,顺铂组、单体组MMP2,Bcl-2蛋白表达均降低,配伍组明显降低(P<0.05);Real-time PCR结果显示,与模型组比较,中药组MMP2,Bcl-2,miR21基因表达均降低,配伍组明显下调(P<0.05),miR15a,miR200a基因表达均增强,配伍组明显上调(P<0.05).结论:黄芪甲苷配伍姜黄素对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤出现转移后有抑瘤作用,其作用机制可能与抑制MMP2,Bcl-2,miR21表达,上调miR15a,miR200a表达有关,黄芪甲苷配伍姜黄素确有协同增效作用.
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肝乐颗粒对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的调控作用
目的:明确肝乐颗粒对转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号通路的干预作用,探讨其防治肝纤维化的分子学机制.方法:SD大鼠随机分为正常组,模型组,肝乐颗粒(1.5,3.0,6.0 g·kg-1)和秋水仙碱(1.0×10-4g·kg-l).采用50%四氯化碳每周2次,连续12周皮下注射的方法,诱导肝纤维化大鼠模型.造模第7周起,给药组分别灌胃给予相应剂量的肝乐颗粒和秋水仙碱,每天1次,连续6周.末次给药8h后,处置大鼠,取固定部位肝脏组织,苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察肝脏病理组织学损伤程度,免疫组化和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测肝组织中Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ),Smad2,TGF-β1或TGF-βⅠ型受体(TβR Ⅰ)蛋白的表达,实时定量荧光PCR(Real-time PCR)检测肝组织中Collagen Ⅰ,Smad2,TGF-β1mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠肝纤维化损伤程度,肝组织中Collagen Ⅰ,TGF-β1,Smad2,TβR Ⅰ蛋白及mRNA的表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,肝乐颗粒中、高剂量组不仅可减轻肝组织病理损伤程度,减少胶原沉积,还可显著降低Collagen Ⅰ,TGF-β1,Smad2,TβR Ⅰ蛋白及mRNA的表达(P<0.05,P<0.01).结论:肝乐颗粒对肝纤维化大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路,从而抑制HSC活化,减少细胞外基质过度沉积有关.
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升降散激活Wnt信号通路促进慢性脑缺血VD模型大鼠海马组织损伤修复
目的:升降散对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力的影响及神经保护分子机制.方法:SD大鼠70只,随机分为正常组、假手术组,模型组,阳性药物组(盐酸多奈哌齐,1 mg·kg-1),升降散低、中、高剂量组(0.67,1.33,2.66 g·kg-1),每组10只,除正常组和假手术组外,其余各组采用改良的2VO法制作慢性脑缺血VD模型,手术1周后开始给药,连续灌胃给药8周.采用2VO两血管阻断法观察升降散对VD各组大鼠学习和记忆的影响、定位航行和空间探索行为功能,分析其学习记忆和空间辨认的能力;采用苏木素-伊红(HE)染色考察海马区病理形态;利用蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫组织荧光化学染色法检测血管内皮生长因子(VEGF),巢蛋白(Nestin),Wnt信号通路关键蛋白,磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白(p-LRP),磷酸化糖原合成酶激酶(p-GSK3β)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平,初步探讨升降散对VD大鼠海马组织保护作用机制.结果:与模型组比较,升降散不同剂量组能不同程度延长VD大鼠的避暗实验的潜伏期、缩短VD大鼠水迷宫定位航行和空间探索实验的潜伏期,升降散呈剂量依赖性促进海马区的病理性损伤修复及VEGF和Nestin表达,升降散呈剂量依赖性上调海马组织Wnt信号通路关键蛋白p-LRP,p-GSK3β和β-catenin蛋白水平,均具有一定的统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论:升降散改善VD大鼠学习记忆和空间辨认的行为学能力可能与激活海马组织Wnt信号通路活性有关.
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桑叶对糖尿病小鼠肝脏Toll样受体基因表达的影响
目的:探讨桑叶水提物对糖尿病小鼠肝组织Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)基因表达量的影响,并探讨其相关的作用机制.方法:ICR小鼠随机分为正常组(6只),糖尿病组.糖尿病组小鼠利用高脂高糖饲料喂养10周联合多次注射链脲佐菌素(STZ)建立高脂饲养和STZ共同诱导的小鼠糖尿病模型.造模成功小鼠随机分为模型组,二甲双胍组(600 mg· kg-),桑叶高、中、低剂量组(8,4,2 g·kg-1),每组6只,灌胃(ig)给药,每周测空腹血糖,于实验中后期行口服糖耐量实验,ig给药10周后,测定小鼠血清胰岛素、总胆固醇、甘油三酯和肿瘤坏死因子-α (TNF-α),并应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测小鼠肝组织中TLR1~9表达量.结果:糖尿病模型小鼠经桑叶水提物治疗后,进水量减少,显著降低空腹血糖,改善糖耐量,显著降低血脂,增加胰岛素含量,改善胰岛素抵抗,同时降低血清中TNF-α(P<0.05,P<0.01).Real-time PCR结果显示,糖尿病小鼠肝脏组织TLRs受体中TLR1,TLR2,TLR3,TLR7,TLR8和TLR9表达明显高于正常组(P<0.05,P<0.01),TLR5表达明显低于正常组;桑叶给药组后,桑叶中剂量组肝组织中的TLR7,TLR8和TLR9表达量,显著降低于模型组(P<0.05,P<0.01).结论:桑叶水提物的降糖作用可能与抑制糖尿病模型小鼠肝组织中TLRs受体有关.
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水蒸气蒸馏及不同萃取纤维对白花蛇舌草挥发性成分分析
目的:分析比较不同固相萃取纤维头(PA,PDMS,PDMS-DVB)对白花蛇舌草挥发性成分的吸附性,并与传统的水蒸气蒸馏联用GS-MS(SD-GS-MS)方法进行比较.方法:采用PA,PDMS-DVB,PDMS 3种不同类型的固相微萃取纤维头以及水蒸气蒸馏法提取,联用GS-MS进行挥发性成分测定.结果:其中PA检测出50个成分,PDMS-DVB检测出51个,PDMS检测出18个.水蒸气蒸馏法检测出41个成分,与SPME法对比结果显示,相似度高的为PA,共有成分为21个,其次为PDMS-DVB 15个,PDMS 6个;有16个成分未在SPME法中检出.结论:HS-SPME-GS-MS方法可简便、高效地检测白花蛇舌草挥发性成分,但不能完全替代传统的水蒸气蒸馏联用GS-MS方法.
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UPLC-Q-TOF-MS对桑白皮总黄酮提取物的快速分析
目的:对桑白皮总黄酮提取物中的各化合物进行快速的分离和鉴定,并对其主要的裂解碎片和二级裂解规律进行探讨.方法:采用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS),在电喷雾离子源(ESI)负离子模式下进行分离和检测;使用Waters公司BRH分析柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);以0.1%甲酸水为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;流速0.3 mL·min-1;柱温为25℃.结果:基于UPLC-Q-TOF-MS技术分离所得精确相对分子质量,结合二级质谱裂解信息,使用Masslynx 4.1软件对数据进行统计和分析,并参考SciFinder数据库(美国化学学会在线数据库学术版),桑白皮总黄酮提取物中共鉴定出13种黄酮成分,其中有7个Diels-Alder加合物,主要代表物为桑根酮C(sanggenon C),桑根酮D(sanggenon D),6种异戊烯基黄酮类化合物,代表物为桑辛素(morusin).结论:通过超高效液相的分离,首次发现了桑白皮总黄酮提取物中的化合物在ESI源中脱去H2和H2O的现象,并对其二级裂解碎片的规律进行探讨,同时也为桑白皮总黄酮提取物的成分鉴定提供了一个快速、简便、可靠的方法.
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靶向轮廓分析核磁定量法测定4种秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸
目的:建立靶向轮廓分析核磁定量法(TP-qHNM R)同时测定秦艽、麻花艽、粗茎秦艽、小秦艽4种秦艽中龙胆苦苷、马钱苷酸的含量.方法:采集龙胆苦苷、马钱苷酸标准核磁共振氢谱,采用Chenomx NMR suit自建龙胆苦苷与马钱苷酸核磁共振氢谱数据库;秦艽药材采用甲醇超声法提取,提取液吹干以氘代甲醇复溶,同等条件下于记录核磁共振氢谱;基于Chenomx对谱图进行预处理与靶向轮廓分析定量;并采用HPLC-UV法验证TP-qHNMR法测定结果.结果:基于Chenomx的TP-qHNMR法测定秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸含量测定结果准确可靠,与HPLC-UV法无显著差异.所考察的4种秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸含量高低依次为:粗茎秦艽>秦艽>麻花艽>小秦艽.结论:所建立的TP-qHNMR法准确、可靠,可用于秦艽的质量控制,促进了核磁定量技术在中药质量控制中的应用.
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当归挥发油对人脐静脉内皮细胞增殖作用的谱效关系
目的:探讨不同产地当归挥发油与人脐静脉内皮细胞增殖作用的相关关系.方法:利用水蒸气蒸馏法提取当归挥发油,采用GC-MS联用分析技术建立44批不同产地当归药材挥发油指纹图谱,质谱检索库及保留指数法鉴定各色谱峰所示化学成分,用噻唑蓝染色(MTT)实验考察不同产地当归挥发油对HUVECs细胞的增值率,再通过线性回归分析方法,建立并分析当归挥发油促HUVECs细胞增殖作用的相关关系.结果:通过线性回归分析得色谱峰X1,X2与细胞增殖率呈负相关的关系,其余色谱峰与细胞增殖率均呈正相关的关系,且其中X3,X6,X7号色谱峰回归系数较大,是当归挥发油促HUVECs细胞增殖的主要化学成分.结论:该方法能快速、有效地建立当归挥发油谱效相关关系,可为当归挥发油化学成分药理性质的研究提供参考依据.
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UPLC测定醉鱼草不同部位中4种黄酮类成分
目的:建立超高效液相色谱(UPLC)同时测定醉鱼草Buddleja lindleyana茎、叶、花、果实中蒙花苷、木犀草素、金合欢-70-β-D-葡萄糖苷、金合欢素4种黄酮类成分含量方法,比较在醉鱼草各个部位中4种成分的分布情况.方法:采用Waters Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速0.15 mL·min-1,检测波长330 nm,柱温30℃,进样体积2μL.结果:蒙花苷、木犀草素、金合欢-7-O-β-D-葡萄糖苷和金合欢素的进样量分别在0.0020~0.6003 μg(r=0.999 7),0.000 4~0.040 1μg (r=0.999 9),0.000 4~0.039 9μg (r=0.999 9),0.000 2~0.020 0 μg(r =0.999 9)和峰面积呈良好的线性关系,仪器精密度及方法重复性均良好,符合定量测定要求.平均回收率分别为100.2%,97.1%,94.3%,92.4%,RSD分别为0.7%,1.1%,2.3%,1.9%.结论:4种黄酮类成分含量在醉鱼草不同部位存在较大差异,其中醉鱼草花中4种黄酮总含量高,通过比较各不同部位成分的含量差异,为醉鱼草的进一步开发利用提供实验依据.该检测方法操作简单,分离效果好,灵敏度高,可用于醉鱼草不同部位中多个黄酮成分的含量测定.
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蟾酥的化学成分
目的:研究蟾酥的化学成分,为蟾酥的资源综合利用提供依据.方法:使用正向硅胶,二醇基硅胶,RP-18及LH-20羟丙基葡聚糖凝胶等材料从蟾酥的石油醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇提取部位进行分离纯化,通过理化性质及1D (1H,13C)和2D-NMR(COSY,NOESY,HSQC,HMBC)波谱分析鉴定其化合物的结构.结果:分离纯化得到12个化合物,分别鉴定为isobufalin methyl ester(1),华蟾毒它灵(2),蟾毒灵(3),远华蟾毒精(4),蟾毒它灵(5);蟾毒色胺类为5-hydroxy-N-acetyhryptamine(6),hippophamide(7),其他类为正十五烷酸(8),4,4'-二苯甲烷二氨基甲酸甲酯(9),obtucarbamate A(10),邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(11),邻苯二甲酸二异辛酯(12).结论:化合物1为新的天然产物,化合物6~8,10,12为首次从蟾酥中分离得到.
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色度分析花椒黄酮类成分含量与颜色值的相关性
目的:研究花椒黄酮类成分与外观颜色相关性,为花椒品质评价提供参考.方法:引入色度空间系统CIEL*,a*,b*对花椒药材粉末颜色进行客观量化,以总黄酮及黄酮类成分芦丁、金丝桃苷、槲皮素、橙皮苷为指标,研究其与颜色值的相关性.结果:花椒的总黄酮、芦丁、槲皮素含量与L*,a*显著正相关(P<0.05),而总黄酮、芦丁与b*无显著相关性,金丝桃苷、槲皮素的含量与颜色值b*显著正相关(P<0.05);青椒橙皮苷的含量与L*,a*,b*显著负相关(P<0.05).结论:花椒颜色值与总黄酮、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、橙皮苷含量存在一定的相关性.
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益气化痰活血法改善超重/肥胖2型糖尿病患者糖脂代谢紊乱及肥胖抑制素的临床观察
目的:观察益气化痰活血法对气虚痰瘀型超重/肥胖2型糖尿病糖脂代谢及肥胖抑制素的影响,并探讨其作用机制.方法:86例超重/肥胖2型糖尿患者随机分为治疗组和对照组,各43例,治疗组采用益气化痰活血中药+基础治疗,对照组采用安慰剂+基础治疗;治疗前后分别检测空腹血糖、餐后2h血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、血脂、肥胖抑制素(obestatin),安全性指标(三大常规、肝肾功能),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并详细观察患者症状、体征的变化以及药物的毒副反应.结果:治疗后治疗组中医疗效优于对照组(P<0.05),可以明显改善少气乏力/懒言、口干不多饮、肢体麻木或刺痛等症状;治疗后与对照组比较,治疗组体质量指数、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数明显下降(P<0.05),obestatin明显升高(P<0.05),治疗组胆固醇、低密度脂蛋白显著下降(P<0.01),高密度脂蛋白显著升高(P<0.01);两组治疗后空腹血糖、甘油三酯比较差异无统计学意义.结论:益气化痰活血法可以改善治疗组患者糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗,提升obestatin水平,这可能是益气化痰活血中药复方发挥作用的途径之一.
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补髓生血汤对慢性再生障碍性贫血患者骨髓基质细胞相关细胞因子的影响
目的:观察补髓生血汤对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的疗效,并探讨其骨髓基质细胞相关细胞因子的机制.方法:随机将2012年3月-2015年10月收治的112例CAA患者分为两组患者,各56例,对照组采用康力龙联合环孢素治疗,观察组基于对照组采用补髓生血汤治疗,观察两组患者疗效,比较治疗前后的临床证候评分,血红蛋白(Hb),白细胞计数(WBC),血小板计数(PLT),骨髓像,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和bFGF受体(bFGFR) mRNA表达量.结果:观察组总有效率(87.50%)高于对照组(67.86%)(x2=6.231,P<0.05);两组患者治疗后的临床证候评分均下降,且观察组低于对照组(P<0.05);观察组治疗后WBC,PLT,Hb升高,且高于对照组(P<0.05);治疗后,观察组骨髓增生程度改善,且优于对照组(P<0.05),观察组的非造血细胞比率(41.68±7.85)%,明显低于对照组的(53.45±8.78)%(P<0.05);两组患者治疗后bFGF,bFGFR表达升高,且观察组高于对照组(P<0.05).结论:补髓生血汤治疗CAA患者的效果较好,对血象、骨髓象,骨髓造血功能具有改善作用,可能与调节细胞因子bFGF和bFGFR mRNA表达有关.
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肾脑复元汤治疗缺血性中风临床疗效及对血液流变学的影响
目的:观察肾脑复元汤治疗缺血性中风的临床疗效,并探讨其对血液流变学的影响.方法:将符合本研究诊断及纳入标准的96例患者采用随机数字表法分为对照组和治疗组,对照组给予西医常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上口服肾脑复元汤,分别于治疗前、治疗2,4周后观察两组患者临床神经功能缺损程度评分(CSS),日常生活活动能力量表评分(ADL),中医证候积分及血液流变学参数,评估临床疗效.结果:治疗2,4周后,治疗组CSS评分、中医证候积分、血液流变学参数均显著优于对照组(P<0.01);治疗2周后治疗组ADL评分升高,且明显高于对照组(P<0.05),治疗4周后治疗组ADL评分显著高于对照组(P<0.01).治疗组临床疗效显著优于对照组(P<0.01).两组患者治疗前安全性指标与治疗后比较均无统计学差异.结论:肾脑复元汤能显著改善缺血性中风患者神经功能,增强生活自理能力,提高临床疗效,同时降低血液黏度,增加血液流动性,且安全性高.
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天然黄酮类化合物抗肿瘤作用靶点研究进展
天然黄酮类化合物是很多常用抗癌方剂中药物的重要有效成分.随着中草药抗癌作用研究的深入,以及抗肿瘤药物研发目标从细胞毒药物逐渐转向针对肿瘤细胞特异性信号靶点药物,天然黄酮类化合物因其低毒高效的抗肿瘤活性成为研究热点.文章综述了近年来发现的天然黄酮类化合物在肿瘤细胞生长增殖,血管生成与侵袭转移,细胞凋亡,DNA与染色体调节和多药耐药性产生等过程的主要作用靶点,这将有助于从天然黄酮类单体中寻找抗癌先导化合物,为多靶点新型抗肿瘤药物的筛选、结构改造及多聚药理学研究提供参考依据.另外,借鉴当代分子生物学的新成果和技术手段,揭示中草药抗肿瘤作用的分子机制和组方依据也是推动中医药现代化的创新思路.文章后对天然黄酮类化合物抗肿瘤研究的未来方向提出一些可行性建议.
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胆南星质量评价方法初探
目的:建立胆南星中总胆酸、猪去氧胆酸及鹅去氧胆酸的含量测定方法,为该药物的质量评价提供检测手段.方法:采用紫外分光光度法,以鹅去氧胆酸为指标成分,建立胆南星中总胆酸的含量测定方法,检测波长379 nm.采用高效液相色谱-电雾式检测器法(HPLC-CAD),建立胆南星中猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量测定方法,流动相0.1%冰乙酸(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~20 min,40% ~45%B;20~45 min,45% ~55%B),流速0.8 mL·min-1,柱温30℃.结果:鹅去氧胆酸在0~2.435 g·L-1与吸光度呈良好线性关系,平均加样回收率98.98%,RSD 1.0%.猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸分别在4.7 ~94,5.44 ~ 108.8 mg· L-1与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率依次为99.53% (RSD 1.0%)和99.58% (RSD 1.4%).结论:建立的含量测定方法操作简便、准确度高、重复性好,适用于胆南星的质量评价.
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雷公藤红素-薏苡仁油微乳的制备及其体外抗肿瘤活性评价
目的:制备雷公藤红素-薏苡仁油微乳(CC-MEs)并对其理化性质及体外抗肿瘤活性进行评价.方法:通过考察雷公藤红素在不同介质中的溶解度,筛选CC-MEs的佳油相、乳化剂及助乳化剂.采用水滴定法制备微乳,根据其粒径,多分散指数(PDI),Zeta电位,包封率和载药量筛选CC-MEs的佳处方,并对制备微乳的形态、稳定性和体外释放进行考察.通过四甲基偶氮唑盐法考察CC-MEs对宫颈癌HeLa细胞的毒性,评价其体外抗肿瘤活性.结果:CC-MEs佳处方为雷公藤红素10 mg,薏苡仁油既为药物又兼作油相(用量400 mg),聚氧乙烯氢化蓖麻油450 mg,聚乙二醇400 150 mg;制备的微乳外观形态圆整,平均粒径(31.63±0.63) nm,PDI 0.06±0.01,Zeta电位(-10.14±1.35)mV,48 h时雷公藤红素体外累积释放度(19.89±0.59)%,具有一定的缓释特性.CC-MEs对HeLa细胞具有较好的增殖抑制作用,其半数抑制浓度以薏苡仁油计为20.7 mg·L-1,以雷公藤红素计为0.82 μmol·L-1,联合用药指数0.93,表明两药联用具有协同作用.结论:CC-MEs粒径小且分布均匀、稳定性好、辅料用量少.雷公藤红素与薏苡仁油组分配伍制剂能够增强对HeLa细胞的增殖抑制作用,二者具有协同抗肿瘤功效.
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盐炙益智仁石油醚部位缩尿成分分离与药效学分析
目的:探讨盐炙益智仁石油醚部位缩尿的有效成分,并进行药效学验证,拟阐明盐炙益智仁的缩尿药效物质基础以及作用机制.方法:采用硅胶和HPLC等色谱手段进行化学成分的分离纯化,根据理化性质和1H-NMR,13C-NMR波谱数据鉴定化合物结构;通过BL-420S型生物机能实验系统测定膀胱逼尿肌张力的变化,采用分别加4种兴奋剂BaCl2,磷酸组胺、多巴胺、乙酰胆碱累计加药物的方法,观察化合物对豚鼠膀胱逼尿肌肌条的收缩张力活动影响.结果:盐炙益智仁石油醚部位成分分离并鉴定出9个化合物[圆柚酮,11-hydroxy-valenc-1(10)-en-2-one,香科酮(teucrenone),7-表-香科酮(7-epi-teucrenone B),12-羟基圆柚酮(12-hydroxynootkatone),杨芽黄素,β-谷甾醇,胡萝卜苷,棕榈酸],通过药效学验证7-epi-teucrenone B与温肾缩尿密切相关.结论:7-epi-teucrenone B可能是通过拮抗磷酸组胺的H1受体释放从而抑制豚鼠膀胱逼尿肌收缩张力.推测盐炙益智仁石油醚部位中的7-epi-teucrenone B可能为盐炙益智仁缩尿主要有效成分.
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苦杏仁不同炮制品HPLC指纹图谱的比较
目的:建立具有生、制品个性特点的苦杏仁不同炮制品HPLC指纹图谱分析方法,为该药材的应用提供参考依据.方法:苦杏仁、燀苦杏仁、炒苦杏仁3种炮制品分别加50%甲醇超声提取,采用HPLC测定,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,进样量20 μL,柱温25℃,检测波长225 nm,比较苦杏仁不同炮制品的HPLC指纹图谱差异.结果:生苦杏仁指纹图谱与燀苦杏仁、炒苦杏仁指纹图谱有明显差异,而燀苦杏仁与炒苦杏仁指纹图谱较为相似.燀苦杏仁、炒苦杏仁色谱图与苦杏仁色谱图相比,缺失了5号峰(野黑樱苷)和6号峰,在保留时间22 min处增加一个新色谱峰a;8号峰的峰面积显著降低,4号峰的峰面积显著升高,1,2,3,7号峰的峰面积降低,但无明显变化.结论:建立的方法可用于苦杏仁不同炮制品的指纹图谱测定,苦杏仁经燀制和炒制后HPLC指纹图谱发生明显变化,为完善苦杏仁饮片的质量标准提供科学依据.苦杏仁苷水解后可能分解为5号峰(野黑樱苷),6号峰和8号峰.
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灯盏花乙素缓释微球的制备及药剂学性能考察
目的:优选灯盏花乙素缓释微球的处方和制备工艺并考察其药剂学性能.方法:采用S/O/W型乳化溶剂挥发法制备灯盏花乙素微球,以载药量、包封率及收率的综合评分为指标,通过正交试验优选处方和制备工艺,考察其体外释药性能.采用激光粒度分析仪、扫描电镜、傅里叶红外光谱和X射线衍射法对微球进行表征.结果:佳制备工艺为投药量25 mg,聚乳酸-羟基乙酸共聚物200 mg,聚乙烯醇质量分数1%,二氯甲烷-丙酮(1.7:0.3),搅拌转速1 000 r·min-1.灯盏花乙素微球载药量(6.18±0.11)%,包封率(50.79±2.01)%,收率(91.18 ±2.19)%,释放30%药物所需时间不低于600 h,粒径(126.0±2.1)μm;表面圆整光滑,无黏连;微球内部含有大量灯盏花乙素晶体,灯盏花乙素在高分子材料中未改变其晶体结构.结论:该方法可有效制备灯盏花乙素缓释微球,优选的制备工艺简单合理,为灯盏花乙素制剂的开发提供了参考.
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赤石脂和禹余粮作为灶心土替代品的分析
目的:通过比较灶心土、赤石脂和禹余粮的热解特性及红外光谱相似度来探讨赤石脂、禹余粮替代灶心土的可行性.方法:热解特性研究采用热重差热综合热分析仪,取试样量(30 ±5) mg置于坩锅中,以10℃·min-的升温速率、流量60 mL· min-的恒定流速通入模拟空气[N2-O2(4:1)],从室温升至900 ℃.红外光谱试验采用溴化钾压片法,光谱分辨率4cm-1,测量范围4 000~500 cm-,扫描信号累加32次,所得数据经Omnic软件进行自动基线校正、平滑及纵坐标归一化.数据处理及图表绘制采用Origin 8.0软件和Omnic软件完成.结果:比较热解特性发现灶心土、赤石脂、禹余粮的热解特性均在400~600℃处出现一段失重台阶;但整体而言,赤石脂与禹余粮热解特性没有体现出灶心土热解特性的复杂性;通过红外光谱相似度数值得出,以灶心土作为对照,赤石脂与灶心土相似度数值较偏低,禹余粮与与灶心土相似度数值处于中等水平.结论:就热解特性及红外光谱相似度而言,禹余粮与灶心土相似性较好,可能较赤石脂更适用作灶心土的替代品,为相关中药炮制辅料的研究提供参考.
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作炮制辅料用的不同姜汁对胃肠作用的差异比较
目的:明确炮制辅料的生姜榨汁、生姜煮汁和干姜煮汁在胃肠作用方面的不同,探讨不同姜汁存在的差异.方法:设空白组、干姜煮汁组、生姜煮汁组和生姜榨汁组,以动物小肠推进率和抗腹泻指数为指标,给药剂量均为0.2 mL/只,考察不同姜汁对小鼠胃肠动力作用的影响;设置空白组、模型组及3个姜汁组,空白组和模型组灌胃相同体积的生理盐水,给药组分别按10 mL·kg-1灌胃给药,给药30 min后除空白组外,其他各组分别按剂量5 mg·kg-1腹腔注射顺铂,以动物高岭土异嗜行为考察不同姜汁的止呕作用.结果:生姜榨汁、生姜煮汁和干姜煮汁均有促进胃肠动力作用,其中以生姜煮汁作用强,但3种姜汁均无抗腹泻作用.与模型组相比,生姜榨汁组、生姜煮汁组和干姜煮汁组异嗜高岭土量均有所减少,其中生姜煮汁组具有显著性差异.结论:3种姜汁中,生姜煮汁具有佳的胃肠推动和止呕作用.通过明确3种姜汁在胃肠作用的差异,为后续选用适宜的姜汁炮制药物以发挥更好的药效提供依据.
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基于中医传承辅助平台挖掘姜良铎教授治疗慢性乙型肝炎方药规律
目的:探讨姜良铎教授治疗慢性乙型肝炎方剂用药规律,挖掘治疗慢性乙型肝炎的新组方,为慢性乙型肝炎的防治提供新的思路.方法:通过回顾性研究方法,收集姜良铎教授治疗慢性乙型肝炎门诊处方并建立相关数据库,通过中医传承辅助系统挖掘姜良铎教授治疗慢性乙型肝炎用药规律.结果:筛选治疗慢性乙型肝炎的方剂160首,分析得出姜良铎教授治疗慢性乙型肝炎的常用药物有赤芍、白芍、枳壳、麦芽等61种,核心组合模式116组,其中对药43组,角药46组,4味及以上药物组合27组,并演化得到12首治疗慢性乙型肝炎的新处方.结论:以中医传承辅助系统为平台,利用文本挖掘、关联规则等数据挖掘方法较好的体现了姜良铎教授治疗慢性乙型肝炎的用药规律,即擅用角药,多以柔肝疏肝立法,通补结合,用药轻灵,主张从状态辨治,注重扶正驱邪.
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《中国药典》收录补肾中成药的组方规律分析
分析补肾中成药的用药特点及组方配伍规律.方法:收集2015年版《中国药典》收录补肾中成药,利用“中医传承辅助系统(V2.5)”软件进行组方规律分析.结果:腰膝酸软、头晕、耳鸣是肾虚常见症状;补肾中成药主要涉及52种证候,其中肝肾不足证、脾肾两虚证及肝肾阴虚证是常见证候;142首补肾中成药中,包含290味中药,使用频率前3味的是熟地黄、茯苓、当归,而熟地黄、茯苓、山药、当归是主要核心组合;针对肝肾同病,药物组合可视为六味地黄丸合四物汤加减,并配以专入肝肾二经的何首乌、枸杞子;针对脾肾同病,药物组合以四君汤为基础方的补气药物为主,并配以具有脾肾双补的菟丝子、山药,可视为源自于《景岳全书》主治脾肾虚损的苓术菟丝丸.结论:肾虚为本,重视“肾为五脏之本”,立足肾与他脏及气血之间的关系,兼顾虚实;补为核心,把握肾虚的病理变化,重视肾的阴阳特点,补泻结合.
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基于UPLC-Q-TOF/MS分析西洋参果总皂苷的入血成分
目的:研究西洋参果总皂苷(TSPQF)灌胃给予大鼠后的入血成分,为其药效物质基础研究提供参考.方法:选取雄性Wistar大鼠为实验对象,以2.6 g·kg-1灌胃给予TSPQF,收集血清样品,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF/MS)技术与多元统计分析相结合的方法快速分析并鉴定吸收入血的原型成分及其代谢产物.结果:大鼠含药血清中共鉴定了9个入血成分,其中5个入血成分为原型成分,分别为拟人参皂苷F11,人参皂苷Rc,Rb3,Rd和原人参三醇;其余4个为代谢产物,分别为原人参二醇,人参皂苷CK,人参皂苷Rh2和拟人参皂苷RT5.结论:9个入血成分可能是TSPQF在体内直接作用物质,为揭示TSPQF的药效物质基础提供了科学依据.
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利血平诱导的急性抑郁模型大鼠体内CYP450亚酶的活性变化
目的:运用Cocktail探针法测定利血平诱导的急性抑郁模型大鼠体内6种细胞色素P450(CYP450)亚酶活性变化,从药物代谢相互作用的角度探寻抑郁症的发病机制.方法:建立利血平诱导的急性抑郁模型,大鼠随机分为空白组(记为A组),模型组(记为C组)和西药文拉法辛组(记为H组),适应1星期后,H组连续给药2周,A组和C组给予清水2周,第21天C组和H组按4 mg·kg-1腹腔注射利血平注射剂,A组注射等体积生理盐水,第22天禁食不禁水12 h,第23天各组大鼠按10 mL·kg-1灌胃给予混合探针药物.选取茶碱、氯唑沙宗、甲苯磺丁脲、右美沙芬、奥美拉唑以及咪达唑仑作为大鼠CYP1 A2,CYP2C6,CYP2D1,CYP2D2,CYP2E1和CYP3 A2的探针底物,采用LC-MS/MS测定大鼠体内6种混合探针的血药浓度,计算药动学参数.结果:造模后甲苯磺丁脲在大鼠体内浓度显著升高、代谢减慢;咪达唑仑在大鼠体内浓度显著降低、代谢加快.给予抗抑郁文拉法辛后,茶碱、氯唑沙宗和咪达唑仑在大鼠体内浓度显著升高、代谢减慢.结论:利血平诱导的急性抑郁模型状态对大鼠CYP2D1和CYP2D2有中强抑制作用,对CYP3A2有中强诱导作用;给予文拉法辛后对模型大鼠CYP1A2,CYP2C6,CYP2E1,CYP3A2为中强抑制作用.
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配伍对珠子参中4个皂苷类成分药代动力学的影响
目的:研究不同配伍对藤珠胃康方中臣药珠子参主要成分在大鼠体内的药代动力学影响,为该复方的研究与开发提供参考.方法:将SD大鼠随机分为珠子参组、珠子参-藤梨根组、珠子参-白术组、珠子参-黄精组、珠子参-三棱组、藤珠胃康方组,灌服给药剂量均为10.0 g·kg-1(按生药量计算),采用HPLC检测0~24 h大鼠血浆中人参皂苷Re,人参皂苷Rb1,人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的血药浓度,流动相乙腈(A)-0.02%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ~ 14 min,19% ~ 26%A;14~22 min,26% ~ 29%A;22 ~ 30 min,29% A;30 ~ 40 min,29% ~ 35%A;40 ~ 55 min,35%A),检测波长205 nm,运用DAS 3.0软件计算药代动力学参数,比较不同配伍对珠子参中4个指标成分的药动学差异.结果:与珠子参组比较,珠子参-藤梨根组、珠子参-黄精组、珠子参-白术组、珠子参-三棱组中人参皂苷Re,人参皂苷Rb1,人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的药峰浓度(Cmax)和药时曲线下面积(AUC0.t)大部分增加,清除率/生物利用度(CL/F)降低;而藤珠胃康方组中上述4个成分的Cmax和AUC0-t增加,CL/F降低.与珠子参组相比,藤珠胃康方中主要成分代谢显著减慢,4个皂苷类成分的血药浓度明显提高.结论:不同配伍会影响珠子参主要药效成分在体内的药代动力学参数,为藤珠胃康方的临床应用提供参考依据.
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怀菊花种质资源品质评价
目的:对怀菊花种质资源品质评价,分析不同地域菊花的遗传关系及其药材的质量差异.方法:实地观察、走访药农等方法调查分析怀菊花种质资源;以2015年版《中国药典》中方法对绿原酸,木犀草苷,3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸的含量测定;紫外-可见分光光度法总黄酮测定,2015年版《中国药典》中方法对水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、挥发油测定为主要评价指标,对不同产地的菊花药材的质量进行评价;采用随机扩增多态性DNA分子标记(RAPD)法分析不同产地菊花的遗传关系.结果:通过对菊花6项指标的分析,其有效成分含量均符合2015年版《中国药典》标准,表明温县、武陟县适合怀菊花的生长,是道地产区;7条引物共扩增出50条带,其中46条呈多态性,多态性比率为92.00%,怀菊和杭菊、贡菊、野菊都未能聚类,表明它们之间的亲缘关系较远,也证明在菊花种质资源中存在较丰富的遗传多样性,怀菊花聚为一大类,表明怀菊花栽培品种的遗传纯度较高.结论:对怀菊花种质资源分析研究,为怀菊花的规范化种植提供科学的参考依据;保护怀菊花资源、合理开发利用药材提供了科学依据.
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基于电子鼻及顶空-气质联用技术结合化学计量学区分不同产地的砂仁
目的:采用电子鼻及自动顶空-气相色谱-质谱联用(HS-GC-MS)技术从整体香气轮廓和具体香气成分两个方面检测不同产地砂仁的香气物质,研究砂仁气味电子鼻响应的物质基础.方法:以广东、云南、缅甸、越南和老挝等不同产地砂仁药材为研究对象,利用电子鼻和HS-GC-MS技术检测其挥发性成分,采用双标图分析样品-传感器-挥发性化合物三者的联系.结果:电子鼻的PCA双标图显示不同产地的砂仁能较好地被区分,识别指数为83.90%,其中国产的阳春砂仁归为一类,进口的砂仁为一类;采用HS-GC-MS共鉴别得到萜烯、酯、醇、酮及烷烃类等70种挥发性成分,各类成分及含量在不同产地的砂仁中有明显不同,分类与电子鼻的结果相一致;PLS双标图显示传感器s14和s8/s6/s3与萜烯类、酯类和醇类成分的高度相关性揭示了传感器与香气物质之间的内在关系.结论:利用化学计量学,电子鼻检测技术可区分不同产地的砂仁药材,结合自动顶空-气质联用色谱分析方法为砂仁的气味电子鼻响应的物质基础研究提供了进一步的实验依据.
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忍冬叶总黄酮的测定及其体外抗菌活性
目的:研究忍冬叶总黄酮的分离工艺及其对9种常见病原菌的体外抗菌活性.方法:以河南封丘忍冬叶为研究对象,以总黄酮为主要考察指标,通过大孔树脂柱色谱分离得到忍冬叶总黄酮,并对其进行小抑菌浓度(MIC),小杀菌浓度(MBC),抑菌圈活性等体外抗菌评价.结果:建立了忍冬叶总黄酮简便、有效的分离工艺,证实了忍冬叶总黄酮对9种供试病原菌具有较好的广谱抑菌性(MIC为1.95 ~62.5 g·L-1,MBC几乎均为125 g·L-1).此外,当忍冬叶总黄酮部位同时含有较多绿原酸(4.2%)时,不仅得率高(10.5%),活性也更强.结论:忍冬叶总黄酮具有较好的广谱抗菌性,可以将其开发抗畜禽病原菌药物或者饲料添加剂,这也为忍冬叶资源的合理开发利用奠定了坚实的基础.
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黔产苦参根、茎、叶中生物碱含量累积与生态因子的相关性
目的:对黔产不同产区苦参根、茎、叶与经纬度、海拔、平均湿度、平均温度进行相关性分析,了解不同生态环境下苦参不同部位生物碱含量累积.方法:采用紫外分光光度法测定苦参的根、茎、叶生物总碱的含量,利用相关性分析(CA)法研究其生物碱累积差异与生态因子的相关性.结果:苦参不同部位生物碱含量大小依次为根>叶>茎,其中高的是毕节市大方县的苦参根、茎、叶生物碱质量分数之和为20.45 μg·g-1;苦参不同部位受到生态因子的不同程度影响.结论:苦参根、茎、叶生物碱含量在不同的产区有显著差异,生态因子中相对湿度和年均温对叶生物碱含量影响大,该结果可为中药苦参的规范化、标准化栽培管理和目标化种植提供理论依据,寻找苦参优质产区及为非药用部位综合利用提供理论依据.
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连翘不同果形质量评价
目的:探讨连翘的种内变异,明确不同果形连翘的形态特征,质量和产量的差异,为更好的开发、利用和保护连翘种质资源,以及优良品种的选育,奠定了基础.方法:观察不同果形连翘的形态特征,测定其果实长宽及产量,作为划分果形的依据;采用高效液相色谱法对不同果形连翘中化学成分的含量进行了测定,并对其进行综合评价.结果:种内变异的调查,根据连翘果实不同形状进行了分类,分为长角椭圆形、椭圆形、纺锤形、狭长形、圆形等果形;并对不同果形的经济指标和性状进行了评价分析和描述.结果表明纺锤形产量较高,属丰产型;测定不同果形连翘中连翘苷、连翘酯苷A、醇溶性浸出物及农业经济指标百果重,运用主成分分析对不同来源连翘进行了综合评价.其中纺锤形综合评价较好.结论:本实验为连翘品质的提高以及新品种的选育奠定基础.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |