中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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金蝉花多糖对D-GlaN致小鼠急性肝损伤的保护作用及机制
目的:观察金蝉花多糖对D-半乳糖胺(D-galactosamine,D-GlaN)致小鼠急性肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法:75只雄性昆明小鼠根据数字表法随机分为5组,每组15只,正常组,腹腔注射生理盐水;模型组,腹腔注射D-GlaN;金蝉花多糖低、中、高剂量组,腹腔注射D-GlaN的同时予以金蝉花多糖溶液(0.5,1.0,2.0 g·kg-1)灌胃治疗.治疗12 d后检测各组肝组织病理评分、肝匀浆指标[超氧化物歧化物(superoxide dismutase,SOD),丙二醛(malondialdehyde,MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px),一氧化氮(nitric oxide,N0)],血清学指标[天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST),丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),胆碱酯酶(cholinesterase,CHE)],采用免疫组化法检测各组肝组织核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB),肿瘤坏死因子-o(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平.结果:模型组肝组织病理评分,MDA,NO,AST,ALT,ALP,NF-κB,TNF-α水平均明显高于正常组(P＜0.05),而SOD,GSH-Px,CHE水平明显低于正常组(P＜0.05);金蝉花多糖低、中、高剂量组肝组织病理评分均明显低于模型组(P＜0.05),且随治疗剂量升高,肝组织病理评分呈明显降低趋势(P＜0.05);金蝉花多糖低、中、高剂量组MDA,NO,AST,ALT,ALP,NF-κB,TNF-α水平均明显低于模型组(P＜0.05),而SOD,GSH-Px,CHE水平均明显高于模型组(P＜0.05),且随治疗剂量升高,MDA,NO,AST,ALT,ALP,NF-κB,TNF-α水平明显降低(P＜0.05),而SOD,GSH-Px,CHE水平明显升高(P＜0.05).结论:金蝉花多糖对D-GlaN致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,且呈剂量依赖性,其作用机制可能为抑制NF-κB炎性反应信号通路有关.
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甘草酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及Bcl-2和Bax表达的影响
目的:观察甘草酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用及B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响,探讨其可能机制.方法:50只SD大鼠随机分为假手术组,心肌缺血再灌注损伤组(模型组),甘草酸预处理低、中、高剂量组.采用结扎左冠状动脉前降支建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.假手术组穿线后不结扎;模型组于缺血前30 min腹腔注射2 mg·kg-1生理盐水;甘草酸低、中、高剂量组于缺血前30 min腹腔注射2,4,10 mg·kg-1甘草酸.光镜下观察心肌组织的病理组织学变化;检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,乳酸脱氢酶(LDH)活性,心肌肌钙蛋白-T(cTnT)水平,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,白细胞介素-6(IL-6)水平,髓过氧化物酶(MPO)活性,超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)水平;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌Bcl-2和Bax的表达.结果:与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组、中剂量组、高剂量组明显减轻心肌缺血再灌注损伤;与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组、中剂量组、高剂量组显著降低CK-MB,LDH,cTnT,TNF-α,IL-6,MPO,MDA水平,显著升高SOD,GSH-Px活性(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组,中剂量组,高剂量组显著降低心肌细胞凋亡指数(P＜0.01);与模型组比较,甘草酸预处理低、中、高剂量组显著上调心肌Bcl-2表达,下调Bax表达及上调Bcl-2/Bax(P＜0.05,P＜0.01).结论:甘草酸预对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且能上调心肌Bcl-2表达和下调心肌Bax表达,从而抑制细胞心肌凋亡.
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生脉姜黄散对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用
目的:探讨生脉姜黄散对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放射增敏作用及对细胞周期素依赖性激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)蛋白表达的影响,并讨论其增敏作用的相关机制.方法:通过皮下注射肿瘤细胞的方法建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,荷瘤鼠随机分为空白组、照射组、生脉姜黄散组、生脉姜黄散联合照射组、顺铂联合照射组,其中生脉姜黄散组和生脉姜黄散联合照射组按照药物高、低剂量(12.87,4.29 g·kg-1)各分为2个亚组.经处理后各组隔日测量移植瘤的大径,计算肿瘤体积抑制率和抑瘤率.免疫组化、蛋白免疫印迹法检测CDK6蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CDK6 mRNA表达.结果:与空白组比较,其余各组肿瘤生长都受到一定程度的抑制,与照射组比较,生脉姜黄散(12.87 g·kg-1)联合照射组、顺铂联合照射组肿瘤生长明显受到抑制(P＜0.05),肿瘤体积抑制率分别为54.94％,64.9％.与照射组比较,生脉姜黄散(12.87 g·kg-1)联合照射组、顺铂联合照射组CDK6 mRNA和蛋白表达均明显升高(P＜0.05).结论:生脉姜黄散对人鼻咽癌裸鼠移植瘤具有放射增敏作用,其增敏作用可能与细胞周期调控因子CDK6相关.
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气血并治方有效组分干预H/R损伤心肌细胞AMPK相关糖脂代谢通路的分析
目的:观察气血并治方有效组分对缺氧/复氧(H/R)损伤心肌细胞一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)相关糖脂代谢通路的作用机制.方法:分离、提取、培养出生1 ～2dSD乳鼠原代心肌细胞,于常规倒置相差显微镜下观察原代心肌细胞形态及生长状态,经α-横纹肌辅肌动蛋白(α-actinin)免疫荧光染色鉴定为心肌细胞后,进行缺氧3h复氧2h处理制作H/R损伤模型,随机分为正常组(正常氧),模型组(缺氧/复氧),曲美他嗪组(缺氧/复氧+100 μmol·L-1盐酸曲美他嗪,TMZ),气血并治方有效组分组(缺氧/复氧+1 mmol·L-1气血并治方有效组分,CWQB).采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定AMPK代表性亚基心肌一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα),及其糖代谢通路中葡萄糖转运体4(GLUT4),磷酸果糖激酶2(PFK2),脂肪酸代谢通路中乙酰辅酶A羧化酶(ACC2),脂肪酸移位酶(FAT/CD36)的基因及蛋白表达情况.结果:与正常组比较,模型组,TMZ组,CWQB组的AMPKα,GLUT4,PFK2基因和蛋白表达上调,ACC2,FAT/CD36基因和蛋白表达下调(P＜0.05);与模型组比较,TMZ组,CWQB组AMPKα,GLUT4,PFK2,ACC2,FAT/CD36基因和蛋白表达均上调(P＜0.05),其中TMZ组上调AMPKα,FAT/CD36基因和蛋白,上调GLUT4,PFK2基因表达的效果更为显著(P＜0.05).结论:气血并治方有效组分可以激活H/R损伤心肌细胞的AMPK信号通路,增强GLUT4介导的葡萄糖转送,PFK2参与的糖酵解,同时促进FAT/CD36调控的脂肪酸转运,上调ACC2抑制脂肪酸氧化过程,进而提高缺氧/复氧条件下心肌细胞对葡萄糖、脂肪酸等产能底物的利用能力,改善H/R损伤心肌细胞的能量代谢.
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归芪聪志汤对VD模型大鼠海马神经元Claudin-1,TGF-β表达的影响
目的:研究归芪聪志汤对血管性痴呆(varscular dementia,VD)模型大鼠学习记忆和海马神经元紧密连接蛋白1(Claudin-1)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响.方法:Wistar雄性大鼠120只,按随机数字表选10只大鼠作为假手术组,其余大鼠制备VD模型,选成功模型大鼠随机分为5组,分别为模型组、阳性组和归芪聪志汤低、中、高剂量组.归芪聪志汤低、中、高剂量组给药量分别为9.9,19.8,39.6 g·kg-1·d-1.阳性组给予脑复康吡拉西坦胶囊0.3 g·kg-1·d-1.假手术组、模型组给予等量水.每日1次.连续灌胃治疗28 d后,Morris水迷宫予以行为学检测,实时荧光定量PCR(Real-time PCR),免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组海马组织Claudin-1,TGF-β基因和蛋白表达.结果:灌胃治疗28 d后,与假手术组比较,VD模型组大鼠的平均逃避潜伏期明显延长、跨原平台次数明显减少(P＜0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),大鼠海马的TGF-β mRNA及蛋白表达水平明显降低(P＜0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠逃逸潜伏期均缩短,跨原平台次数均增多(P＜0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),大鼠海马的TGF-β mRNA及蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),归芪聪志汤中剂量组与脑复康吡拉西坦胶囊组优于其他组(P＜0.05).结论:归芪聪志汤能够显著改善VD大鼠的学习记忆能力,可能与调节脑组织细胞间黏附作用、抑制炎性因子表达等有关.
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垂盆草总黄酮及异鼠李素对对乙酰氨基酚诱导的L02细胞损伤的保护作用
目的:探讨垂盆草总黄酮及异鼠李素对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的人正常肝细胞(L02)损伤的保护作用.方法:以不同浓度的APAP刺激L02细胞,制备损伤模型,筛选APAP的有效刺激浓度;复制APAP诱导的L02细胞损伤模型,用细胞增殖与活性试剂(CCK-8)检测细胞存活能力,分析盆草总黄酮及异鼠李素对APAP诱导的L02细胞活性的影响;检测细胞上清液中丙二醛(MDA),谷胱甘肽(GSH)含量,超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量.结果:与正常组比较,不同浓度的APAP处理的L02细胞活力显著降低,筛选出的造模条件为10 mmol· L-1 APAP孵育24 h,模型组肝细胞上清液中MDA含量升高(P ＜0.05,P＜0.01),GSH含量降低,SOD,GSH-Px活性降低,AST和ALT含量升高;与模型组比较,垂盆草总黄酮、异鼠李素均能显著提高APAP损伤细胞的存活率,降低MDA含量,提高GSH含量,提高SOD,GSH-Px活性,降低ALT和AST的释放量(P ＜0.05,P＜0.01).结论:垂盆草总黄酮及异鼠李素对APAP损伤的L02细胞具有较好的保护作用.
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丹皮酚联合三七总皂苷对大鼠糖尿病心肌纤维化的影响
目的:探讨丹皮酚联合三七总皂苷对大鼠糖尿病心肌纤维化的影响,探讨其作用机制.方法:采用高脂高糖饲喂联合腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病心肌病模型.按照二因素五水平均匀设计法,以心肌组织马松(Masson)染色测定的心肌胶原容积分数为观测指标,采用多元回归分析确定丹皮酚联合三七总皂苷对糖尿病心肌病大鼠佳组合剂量.运用2×2析因设计试验分析两者之间有无交互作用,设空白组,模型组,丹皮酚(80 mg·kg-1)组,三七总皂苷(100 mg·kg-1)组,丹皮酚(80 mg·kg-1)+三七总皂苷(100 mg·kg-1)组,二甲双胍(157.5 mg·kg-1)组.检测体质量,心重指数(HWI),血糖(FBG),乳酸脱氢酶(LDH),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)的含量,心肌组织中的丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)活性变化,观察Masson染色心肌胶原分布.结果:发现丹皮酚(80 mg·kg-1)和三七总皂苷(100 mg·kg-1)联合抗糖尿病心肌病作用佳并有协同作用.与正常组比较,模型组HWI,FBG,LDH,AST,CK-MB,MDA的含量升高,SOD活性降低,体质量显著下降(P＜0.05),Masson染色显示心肌胶原纤维明显增高(P＜0.05).与模型组比较,丹皮酚组,三七总皂苷组,联合用药组的HWI,FBG,LDH,AST,CK-MB,MDA的含量下降,SOD活性升高,体质量显著增高(_P＜0.05),Masson染色显示心肌胶原纤维明显减少(P＜0.05),而联合用药组与单味用药组比较有显著差异(P＜0.05).结论:丹皮酚联合三七总皂苷具有协同降低心肌纤维化作用,可能与抗氧化应激作用有关.
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基于TGF-β1/Smad3信号通路调控的温阳益气方对心梗后结构重塑的干预作用
目的:探讨温阳益气方改善心梗后心力衰竭大鼠肺结构重塑的作用和机制.方法:建立大鼠心力衰竭模型,分成6组,温阳益气方高、中、低(2.0,1.0,0.5 g·kg-1 ·d-1)剂量组,强的松组(0.1g·kg-1·d-1),模型组和假手术组(以同等体积的蒸馏水灌胃),连续灌胃8周.灌胃结束后,彩色多普勒超声诊断仪测定左心室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVIDd),左心室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVIDs),短轴缩短分数(fractional shortening,FS)和射血分数(ejection fraction,EF);测定湿肺/体质量和干肺/体质量,肺组织苏木素-伊红(HE)染色切片,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠肺组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1),胶原蛋白(Collagen),α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),p-Smad3蛋白家族(drosophila mothers against decapentaplegic,p-Smad3)蛋白表达量.结果:与模型组比较,温阳益气方高、中剂量组LVIDd,LVIDs明显升高,FS,EF明显降低(P＜0.05);与假手术组及强的松组比较,温阳益气方低剂量组LVIDd,LVIDs明显降低,FS,EF明显升高(P＜0.05);与模型组比较,温阳益气方高、中剂量组湿肺/体质量、干肺/体质量明显升高(P＜0.05);与假手术组及强的松组比较,温阳益气方低剂量湿肺/体质量、干肺/体质量明显降低(P＜0.05),模型组肺泡严重破化,淋巴细胞浸润明显;假手术组及强的松组未见明显肺泡破化,无淋巴细胞浸润,无胶原蛋白沉淀;温阳益气方高、中剂量组肺泡破化轻,胶原蛋白沉淀也较少;温阳益气方低剂量组淋巴细胞浸润明显,肺泡壁明显增厚;与模型组比较,温阳益气方高、中剂量组α-SMA,Collagen,TGF-β1,p-Smad3明显降低(P＜0.05),TGF-β1,p-Smad3 mRNA明显降低(P＜0.05);与假手术组及强的松组比较,温阳益气方低剂量组α-SMA,Collagen,TGF-β1,p-Smad3明显升高(P＜0.05).TGF-β1 mRNA与TGF-β1,p-Smad3 mRNA,α-SMA,Collagen;p-Smad3 mRNA与p-Smad3,α-SMA,Collagen正相关关系明显(P＜0.05).结论:温阳益气方能阻断TGF-β1/Smad3通路信号传导,抑制α-SMA,Collagen,TGF-β1,p-Smad3蛋白的表达,进而抑制成纤维细胞的活化增殖,降低肺部胶原蛋白的沉淀,终达到抑制肺部组织重塑的作用.
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甘草苷对中波紫外线诱导人皮肤角质形成细胞凋亡的影响
目的:研究甘草苷对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(HaCaT)凋亡的影响.方法:以不同浓度的甘草苷作用于HaCaT细胞,噻唑蓝(MTT)比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 mJ·cm-2的UVB作用于HaCaT细胞,建立光老化模型,MTT比色法检测光老化HaCaT细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞中活性氧自由基(ROS)含量和总凋亡率;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测光老化HaCaT细胞中半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3),半胱氨酸天冬氨酸-9(Caspase-9) mRNA表达水平;蛋白免疫印记法(Western blot)检测光老化HaCaT细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量.结果:筛选出甘草苷的佳有效安全浓度为1×10-7,1 × 10-6,1×10-5mol·L-1.与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P＜0.01),细胞中ROS含量和总凋亡率显著升高(P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达量显著降低(P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著升高(P＜0.01).与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草苷+UVB组细胞增殖率显著升高(P＜0.01);细胞中ROS含量和总凋亡率显著降低(P ＜0.05,P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著降低(P＜ 0.05,P＜0.01);Bcl-2蛋白表达量显著升高(P ＜0.05,P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:甘草苷能通过促进抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡相关细胞因子Caspase-3,Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,从而抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡.
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HPLC同时测定续断中7种成分的含量
目的:建立HPLC同时测定续断中7种成分(当药苷,马钱苷,马钱苷酸,绿原酸,川续断皂苷Ⅵ,续断苷A和续断苷B)含量的方法,为全面评价和控制续断的质量提供科学依据.方法:采用HPLC测定,色谱条件为Venusil HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ～ 20 min,95％ A;20 ～ 40 min,95％ ～ 87％A;40 ～ 64 min,87％ ～84％ A;64 ～65 min,84％ ～ 78％A;65 ～ 80 min,78％ ～ 77％ A),流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,进样量10 μL,检测波长235 nm和212 nm.结果:7种成分的分离度良好且在各自浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 9),平均回收率在99.11％～ 102.24％,RSD均＜2.0％.13批续断样品中川续断皂苷Ⅵ的含量均符合2015年版《中国药典》规定,但各样本中7种待测成分含量差异较大.绿原酸含量与川续断皂苷Ⅵ含量呈明显正相关,而总环烯醚萜与绿原酸、川续断皂苷Ⅵ无明显相关性.结论:所建立的方法简便、准确、重复性良好,可用于续断药材的多成分同步测定,为该药材的质量控制提供参考.
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怀地黄中地黄苷A,地黄苷D及益母草苷含量快速分析方法的建立
目的:建立一种快速测定怀地黄中地黄苷A,地黄苷D,益母草苷含量的方法.方法:应用近红外光谱技术(near infrared reflectance spectroscopy,NIRS)测得85-5,北京1号,白状元,沁怀,白选,沁怀郑共6个品种108份怀地黄样品的近红外光谱图,结合高效液相法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定的样品中地黄苷A,地黄苷D,益母草苷的含量,并利用TQ软件将光谱信息与测得含量相关联,采用偏小二乘法(partial least squares,PLS)建立怀地黄中地黄苷A,地黄苷D,益母草苷的定量分析模型.结果:模型的内部交叉验证决定系数(R2)分别为0.924 67,0.934 96,0.951 54,校正均方差(root mean square error of calibration,RMSEC)分别为0.016 6,0.015 9,0.022 8,验证均方差(root mean square error of prediction,RMSEP)分别为0.017 00,0.007 86,0.012 50,交叉验证均方差(root mean square error of cross validation,RMSECV)分别为0.032 13,0.030 36,0.069 22,以及性能指数(performance index,PI)分别为92.5,82.7,83.1;配对样本t检验显示NIR模型预测值与HPLC测得参考值的P分别为0.422,0.549,0.131,均＞0.05,表明两组数据无显著性差异.结论:该方法准确、快速、绿色,可用于怀地黄中地黄苷A,地黄苷D,益母草苷的定量分析.
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不同产地石上柏指纹图谱及主要双黄酮含量测定
目的:建立不同产地石上柏双黄酮的HPLC指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析,用于石上柏药材质量的评价.方法:采用Dikma Diamons C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1％甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.6 mL·min-1,检测波长330 nm,进样量10μL.采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对10批样品进行共有峰确认及相似度评价.运用SPSS 17.0统计学软件对HPLC指纹图谱进行聚类分析和主成分分析.结果:方法学考察指标的RSD均＜2.0％,表明在该色谱条件下,仪器精密度良好,样品在24 h内稳定性良好,方法准确度良好;根据10批药材测定结果表明,各共有峰较稳定,具有指纹图谱特征性,可初步确定为石上柏双黄酮的指目标成分群.在对照指纹图谱上共标定出9个色谱峰作为指纹图谱共有峰,指认了其中的3个化学成分,分别为穗花杉双黄酮、银杏双黄酮、扁柏双黄酮.10批样品的相似度计算结果均＞ 0.850,说明各产地的药材有较好的一致性;通过聚类分析可将10批样品可分为3类,第一类是重庆和四川产地的石上柏,第二类是贵州产地的石上柏,第三类是广西产地的石上柏,并且2个主成分的累计方差贡献率为98.096％.结论:该方法精密度高,重复性好,操作简便,可为石上柏药材的质量评价提供参考.
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中药材重金属元素及其与指标性成分相关性分析
通过第四次全国中药资源普查试点工作从11个省份收集到12种共525批中药材,依据2015年版《中国药典》中关于Pb,Cd,As,Hg,Cu 5种重金属元素和各种中药材指标性成分测定方法,分别对525批中药材样品的重金属元素和指标性成分含量进行检测,运用SPSS 22.0软件分析不同部位中药材重金属含量相关性和单一中药材指标性成分与重金属元素之间的相关性.结果表明,根类及根茎类中药材中Pb,As,Cu,Cd这4种金属元素之间相互呈显著正相关,全草类中药材中Pb,As,Cu,Hg这4种金属元素之间相互呈显著正相关,而以女贞子为例的果实类中药材和以侧柏叶为例的叶类中药材中只有3种金属元素之间存在显著正相关,Cu和Pb之间存在负相关,说明根及根茎类中药材和全草类中药材中重金属元素的协同效应要高于果实类和叶类中药材.丹参的指标性成分丹参酮类与重金属As,Hg之间存在显著正相关,推测与丹参中丹参酮类成分和As离子生成配合物有关,具体的金属配合物发挥作用的机制需要进一步深入研究.
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甘肃一年生、二年生红芪和黄芪HPLC-ELSD指纹图谱比较
目的:建立甘肃一年生、二年生红芪和黄芪指纹图谱,对比研究红芪和黄芪指纹图谱相似度.方法:采用HPLC-ELSD,选用Agilent ZROBAX-SBC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5iμm),以水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,进样体积15μL,Alhech ELSD 2000蒸发光检测器,漂移管温度110℃,载气流速3.0 L.min-1,分别建立一年生和二年生红芪各24批以及一年生和二年生黄芪各24批药材指纹图谱.结果:一年生、二年生红芪药材共有峰分别为8,7个,相似度分别为0.923,0.825,相同色谱峰6个,分别为毛蕊异黄酮苷,芒柄花苷,大豆皂苷Ⅰ,芒柄花素,异黄芪皂苷Ⅱ,黄芪皂苷Ⅰ;一年生、二年生黄芪药材共有峰分别为25,17个,相似度分别为0.980,0.997,相同色谱峰7个,分别为毛蕊异黄酮苷,芒柄花苷,毛蕊异黄酮,黄芪甲苷,黄芪皂苷Ⅲ,异黄芪皂苷Ⅱ,黄芪皂苷Ⅰ;一年生红芪与黄芪相似度为0.032,二年生红芪与黄芪相似度为0.023,共有色谱峰均为4个,分别为毛蕊异黄酮苷,芒柄花苷,异黄芪皂苷Ⅱ,黄芪皂苷Ⅰ.结论:在所确定的色谱条件下,一年生和二年生红芪和黄芪药材指纹图谱差异明显,可有效区分两种药材,二者共有成分少,相似度低,故红芪和黄芪不宜替代使用.
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凉粉草化学成分分离鉴定
目的:研究唇形科(Labiatae)植物凉粉草Mesona chinensis的干燥地上部分的化学成分,从物质基础的角度探寻其作为药食同源的可能性.方法:取凉粉草的干燥地上部分,用95％乙醇浸泡提取,经减压浓缩后得到凉粉草浸膏,然后将凉粉草浸膏加水溶解后,依次用正己烷,乙酸乙酯溶剂萃取,得到正己烷部位浸膏和乙酸乙酯部位浸膏,然后采用硅胶、小孔树脂凝胶(MCI)和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)等柱色谱分离方法对乙酸乙酯部位浸膏进行分离纯化,并且利用NMR,MS等各种现代波谱技术以及化合物的理化性质并结合参考文献确定化合物的化学结构.结果:从凉粉草的干燥地上部分的95％乙醇提取物中总共分离得到13个化合物,分别鉴定为熊果酸(ursolic acid,1),齐墩果酸(oleanic acid,2),2α,3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸(2α,3α-dihydroxyolean-12-en-28-oic acid,3),2α-羟基乌苏酸(corosolic acid,4),2α,3α,19α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸 (2α,3α,19α-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid,5),豆甾醇(stigmasterol,6),β-谷甾醇(β-sitosterol,7),山柰酚(kaempferol,8),槲皮素(quercetin,9),3-吲哚甲酸(3-indoleformic,10),橙黄胡椒酰胺乙酸酯(aurantiamide acetate,11),十七烷酸(heptadecanoic acid,12),十六烷酸(palmitic acid,13).结论:化合物3-5,7,10～13均为首次从凉粉草以及从凉粉草属植物中分离得到.
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解郁通络方对脑卒中后抑郁神经免疫炎症指标的影响
目的:探讨解郁通络方对脑卒中后抑郁症的临床疗效及对神经免疫炎症若干指标的影响.方法:选自缺血性脑卒中后抑郁症住院患者112例,采用人院先后顺序,随机按数字表法分为观察组和对照组各56例.两组患者均参照《中国脑卒中康复治疗指南》给予常规干预.对照组口服盐酸帕罗西汀片,初始剂量为20 mg-d-1,依病情逐渐以每周增加10 mg,大剂量≤40 mg*d-1.观察组在对照组治疗的基础上加服解郁通络方,1剂/d.两组疗程均连续治疗6周.比较两组患者抑郁自评量表(SDS),HAMD量表因子积分及临床疗效.检测两组血清中白细胞介素(IL)-1β,IL-2,IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,血浆中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(Cor)及T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD8+水平.结果:治疗3周和6周后,观察组患者的SDS评分分别低于对照组同时点(P＜0.01).观察组治疗后HAMD量表各因子评分明显少于对照组(P＜0.01).观察组患者总有效率为88.89％,明显高于对照组的71.7％(P＜0.05).治疗后,观察组患者血清中IL-1β,IL-2,IL-6和TNF-α水平及血浆中CRH,ACTH和Cor水平均明显低于对照组(P＜0.01).观察组治疗后CD3+,CD4+均显著高于对照组,CD8+明显低于对照组(P＜0.01).结论:解郁通络方治疗脑卒中后抑郁症有明显的疗效,可降低炎性因子的释放,调节下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)作用,增强细胞免疫功能,从而发挥改善脑卒中后抑郁症的效果.
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马齿苋化学成分及药理活性的现代研究整理
通过研究马齿苋的化学成分,药理作用和现有的临床应用,为马齿苋的药效物质基础研究和开发利用提供参考.笔者以“马齿苋”,“Portulaca olerace”等为关键词,组合检索1993年1月-2017年5月在Scifinder(R),Pub Med,中国知网,维普等数据库中的相关文献,按照化学成分、药理作用、临床及开发利用4个方面对马齿苋现状归纳总结.马齿苋是药食兼用药物,营养丰富,广泛分布于温带和热带地区,在我国南北各地均产.在化学成分方面,马齿苋主要含有生物碱类、萜类、香豆素类、黄酮类、有机酸类、挥发油及多糖等化学成分,其中包含8个新化合物;在药理作用方面,马齿苋具有抗炎、镇痛、抑菌、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、增强免疫、抗疲劳、抗惊厥、止咳平喘等作用,在临床上主要用于治疗糖尿病、炎症、瘙痒症、肠胃保护、鼻疔等疾病;在开发利用方面,马齿苋主要涉及药品、保健食品、化妆品、护发品日用品及动物饲料等,是极具开发前景的中药材.
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基于含药肠吸收液的麻黄-杏仁药对物质基础与作用机制分析
目的:探讨不同配比的麻黄-杏仁药对含药肠吸收液中化学成分含量-效应指标之间的关联性,初步阐明该药对的物质基础及作用机制.方法:选用U6(64)均匀设计表安排药对配比,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析麻黄-杏仁药对含药肠吸收液中主要差异性成分及其含量;观察含药肠吸收液对大鼠气管环舒张率及组织中白细胞介素-2(IL-2),IL-4,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响;经多元线性回归分析效应指标与主要成分含量的相关性.结果:通过变量重要性投影值＞1.5找出该药对的显著性差异成分为去甲基麻黄碱(X1),伪麻黄碱(X2),甲基麻黄碱(X3),苦杏仁苷(X4);该药对能明显增加气管环的舒张率(Y1),升高组织中IL-2(Y2)含量,降低IL-4(Y3)与TNF-α(Y4)含量;以差异性成分含量为自变量,效应指标为因变量,得回归方程分别为Y1=-4 810.119X1+3 516.816X2-2 663.871X3-81.310X4+ 33.562(r=0.937),Y2=4 203.354X1-2 567.853X2+1 445.790X3+ 47.460X4+ 237.192(r=0.996),Y3=587.549X1-456.975X2+ 366.365X3+6.239X4+ 27.519(r =0.951),Y4=-21 958.981X1-35 885.568X2 +40 943.441X3+ 944.167X4+4 465.528(r=0.968).结论:麻黄-杏仁药对平喘的主要物质基础为去甲基麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱和苦杏仁苷.其平喘机制与各效应成分双向调节气道舒张与收缩功能,以及改变IL-4,IL-2,TNF-α含量等有关.
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基于近红外光谱判定复方丹参片生产过程中冰片的混合均匀性
目的:探索一种近红外光谱用于判定复方丹参片生产过程中微量冰片混合均匀性的方法,为该制剂的质量改进提供参考.方法:收集混合过程中所需原料,按照一定的比例配制成不同的组分,采用研磨和喷雾2种方式将冰片混入干膏粉中,在不同部位均匀取样,所得样品进行近红外光谱扫描并计算其阈值及欧式距离,采用气相色谱法(GC)检验每份样品中冰片的含量,DB-FFAP毛细管柱(0.32 mm×30 m,0.25 μm),柱温110℃,进样口和检测器温度均为200℃,分流比1∶1.结果:当阈值或欧式距离＜0.01时,GC结果显示冰片含量的RSD＜ 10％,表明冰片混合均匀;当阈值或欧式距离＞0.01时,GC结果显示冰片含量的RSD＞ 30％,表明冰片混合不均匀.结论:所建立的方法能有效快速判定复方丹参片生产过程中冰片混合的均匀性,建议纳入企业内控或国家标准中.
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制剂用水蛭原粉掩味前后主要腥臭异味物质的变化分析
目的:探讨应用β-环糊精包合技术掩蔽制剂用水蛭原粉腥臭异味的作用及效果.方法:在通过气相色谱法验证β-环糊精对正己醛、三甲胺2种成分的包合作用基础上,分析水蛭原粉经β-环糊精掩味处理前后正己醛、三甲胺的溶出变化情况.结果:正己醛、三甲胺作为水蛭原粉中腥臭异味物质的主要组成成分,其质量分数分别为0.02,0.09 mg·g-1;正己醛包合物水相中未检出正己醛成分,同样三甲胺包合物水相中仅能检出微量三甲胺;水蛭原粉与β-环糊精共研磨后所得水蛭混合粉水相中均未检出游离的正己醛和三甲胺成分.结论:β-环糊精能对正己醛、三甲胺等低分子腥臭异味成分达到有效包合作用.β-环糊精可用作气味掩蔽剂,在生产中合理添加后可达到有效掩蔽药材原粉及其制剂不良气味的目的.
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LC-MS/MS考察白芷香豆素成分对硫酸长春新碱肠道转运及药代动力学的影响
目的:研究白芷香豆素类成分欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素对硫酸长春新碱肠道转运及药代动力学的影响.方法:采用MDCK-MDR1细胞模型,考察欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素对硫酸长春新碱肠道转运的影响.采用LCMS/MS测定给药后不同时间血浆中药物浓度,研究欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素成分对硫酸长春新碱药代动力学的影响.结果:长春新碱配伍质量浓度为10.80,5.42,1.35 mg·L-1欧前胡素的表观渗透系数(Papp)分别为(0.287 2±0.0266)×10-6,(0.351 5±0.041 6) ×10-6,(0.294 9±0.006 8)×10-6 cm·s-1,三者与硫酸长春新碱的Papp[(0.227 2±0.014 8)×10-6 cm·s-1]比较有显著性差异(P＜0.05).硫酸长春新碱与欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素配伍后药时曲线下峰面积(AUC0-t)分别为(343.50±10.29),(348.70±27.99),(235.70±17.56) μg·h·L-1,与硫酸长春新碱组比较有显著性差异(P＜0.01).药峰浓度(Cmax)分别为(81.870±8.517),(83.010±9.276),(60.440±6.679)μg· L-1,与硫酸长春新碱组的比较有显著性差异(P＜0.01).结论:白芷香豆素类成分能促进硫酸长春新碱的肠道转运,提高其生物利用度.
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雷公藤TwCYP88A1基因全长cDNA克隆与表达分析
目的:研究雷公藤萜类成分的生物合成相关基因,在雷公藤转录组信息数据的基础上,以雷公藤悬浮细胞为研究材料,克隆TwCYP88A1基因.方法:采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆雷公藤TwCYP88A1基因,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)分析其组织表达谱.结果:TwCYP88A1 cDNA全长1 594 bp,编码491个氨基酸,等电点9.16,相对分子质量55.957 kDa,具有半胱氨酸铁血红素配体信号活性催化位点.植物组织表达分析表明TwCYP88A1基因在雷公藤叶中的表达量高,根中低.结论:从雷公藤悬浮细胞中克隆得到TwCYP88A1基因全长cDNA,对其进行生物信息学分析,揭示其组织表达谱,为深入分析雷公藤细胞色素P450酶、解析雷公藤萜类化合物的生物合成下游途径奠定基础.
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基于HRM的常见伞形科香辛料快速鉴定
目的:4种香辛料小茴香、孜然、葛缕子、莳萝子与其混伪品蛇床子、防风子因外形特征相似,易混淆使用,带来安全隐患.针对鉴别困难的问题,建立高分辨率熔解曲线(HRM)分析法,以实现简便、快速鉴别的目的.方法:收集这4种香辛料及常见混伪品蛇床子、防风子共23份样本,作为参照样本,提取总DNA,基于内转录间隔区2(ITS2)序列通过聚合酶链式反应(PCR)进一步确定物种,并应用HRM技术建立检测方法和熔解曲线模型.香辛料市场收集这4种香辛料共17份样本,作为市场样本,通过HRM技术鉴定物种是否与标签相符.结果:小茴香、孜然、葛缕子、莳萝子、蛇床子、防风子的熔解曲线均表现出良好差异性,能明显区分开;17份市场样本中,编号N1和N3样品熔解曲线与标签显示的莳萝子熔解曲线具有明显差异,进一步测序结果显示二者均为毒芹子.结论:HRM技术能实现小茴香等伞形科香辛料及其混伪品间的可视化鉴别,可作为DNA条形码技术的有力补充,在中药资源鉴定中应用前景广阔.
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基于边缘检测的防风显微图像的分割与表征
目的:通过编程实现对防风药材中多种组织结构的量化表征,为定量描述中药材显微鉴定特征提供技术支持.方法:根据药材显微图像中主要形态结构的特征,利用数字图像处理技术和采用MATLAB R2013a软件编程的方法,进行防风药材横切面各视野显微图像的摄取和编码,采用模板匹配法对各视野灰度图像进行配准并拼接,用Canny算子对拼接图像进行边缘检测,通过形态学基本操作对拼接图像进行图像二值化以及分割各种显微特征目标物和分析其大小、形态、数量,并采用系统聚类法对油管和导管的分布进行表征;将提取的4个产地防风药材的数据进行判别分析.结果:从样品图像中分割出了防风药材的木栓层、韧皮部、木质部、油管、导管等横切面中的主要显微特征;从分割的图像中各提取了20个参数,经逐步判别分析筛选出12个参数,以此对4个产地防风药材样品在组织形态方面的差异进行判别分析,总正确率为91.4％.结论:该方法能较准确地描述4个产地防风药材横切面组织结构的细微差别,这对不同产地防风药材的显微鉴别具有一定的参考意义.
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西洋参根腐病与三七素积累之间关系
目的:西洋参的根腐病与西洋参自身产生和分泌的化感物质有关,研究西洋参根腐病的发生与西洋参根中三七素(β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸,β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionic acid,β-ODAP)积累之间的相关性.方法:采集陕西汉中留坝县佳仕森西洋参种植基地生长2-4年的重茬地与生茬地的正常西洋参和患根腐病西洋参,利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)柱前衍生法,然后通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定西洋参主根和侧根中β-ODAP含量的变化.结果:结果表明,患根腐病参样中β-ODAP的积累明显高于正常参样,重茬地患根腐病参样中β-ODAP的积累明显高于生茬地;正常参样中β-ODAP含量的积累为三年生高,二年生次之,四年生低,而在患根腐病参样中,四年生高,二年生次之,三年生低,呈完全相反趋势;且同株参样中,主根和须根中β-ODAP含量的积累存在明显差异,尤其是二年生和三年生的参样.结论:以上结果表明重茬地西洋参根中β-ODAP含量明显高于生茬地西洋参,患根腐病西洋参根中β-ODAP含量明显高于正常西洋参,西洋参根腐病的发生与西洋参根中β-ODAP含量的积累呈正相关.
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均匀设计结合多元回归分析用于淫羊藿对大鼠肝毒性的影响
目的:通过研究淫羊藿对大鼠肝脏毒性的影响,探索淫羊藿潜在肝毒性,并对造成其毒性的原因进行初步分析.方法:以基原、工艺、剂量、疗程为考察因素,采用均匀设计方法设计各实验分组,将220只SD大鼠随机分为正常组与各给药组,每组20只,雌雄各半,连续灌服对应淫羊藿提取物,灌胃过程中观察大鼠一般情况,每周定期测定体质量和摄食量2次,在各疗程给药结束后,腹主动脉取血,测定与肝功能相关的血液生化指标,大鼠处死后取肝脏称质量,计算脏脑比和脏体比,再制作肝脏石蜡切片,经苏木素-伊红(HE)染色后进行病理评分,比较各给药组与对应正常组间各指标统计学差异,并将肝脏病理评分结果作为“金指标”,结合其他检测指标作为参考,进行回归分析,评价各因素对肝毒性的影响.结果:与正常组相比,实验6组与实验8组大鼠直接胆红素(DBIL),y-谷氨酰转移酶(GGT),总胆红素(TBIL),肝脏质量,脏脑比值出现明显差异(P＜0.05),肝脏病理评分较高,表现出较明显的肝损伤情况,经回归分析并综合各指标检测结果推断,朝鲜淫羊藿和巫山淫羊藿潜在肝毒性较强,工艺与肝脏毒性强度呈负相关,剂量和疗程与肝脏毒性强度呈正相关,雌性动物受肝损害较雄性动物明显;结论:朝鲜淫羊藿及巫山淫羊藿存在潜在肝毒性,并与提取工艺、给药剂量和用药疗程存在密切关系,应当在临床应用及新药研发中引起重视.
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健脾消癌方对结肠癌TGF-β/lncRNA-ATB/miR-200a信号通路的影响
目的:观察健脾消癌方对结肠癌SW620细胞中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/长链非编码RNA-ATB(long noncoding RNA ATB,lncRNA-ATB)/微小RNA 200a(microRNA 200a,miR-200a)信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结直肠癌转移的可能作用机制.方法:10％,15％,20％健脾消癌方含药血清处理TGF-β诱导后SW620细胞,实时定量荧光聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测lncRNA-ATB,miR-200a,E盒结合锌指蛋白(Zinc finger E-box-binding homeobox 1,ZEBl) mRNA的表达水平,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测ZEB1蛋白表达水平.结果:与空白组比较,TGF-β诱导组lncRNA-ATB,ZEBl mRNA相对表达量升高,miR-200a mRNA相对表达量下降(P＜0.01);与TGF-β诱导组比较,健脾消癌方低剂量组lncRNA-ATB,ZEB1 mRNA相对表达量降低,miR-200a相对表达量升高(P＜0.05);与TGF-β 诱导组比较,健脾消癌方中、高剂量组IncRNA-ATB,ZEB1 mRNA相对表达量显著降低,miR-200a相对表达量升高(P＜0.01).与空白组比较,TGF-β诱导组的ZEB1蛋白相对表达量升高(P＜0.05);与TGF-β诱导组比较,健脾消癌方低剂量组ZEB1蛋白相对表达量稍降低,差异无统计学意义,健脾消癌方中、高剂量组ZEB1蛋白相对表达量显著降低(P＜0.01).结论:健脾消癌方可能通过抑制SW620细胞TGF-β诱导的lncRNA-ATB的表达,增加miR-200a的表达,降低ZEB1表达来抑制结肠癌的转移.
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结直肠癌转移模型裸鼠血管因子变化及健脾消癌方干预作用
目的:探讨结直肠癌裸鼠转移模型组织中血管内皮生长因子(VEGF),内皮抑素(ES),血管生成素(ANG),血管抑素(AS),基质金属蛋白酶-9(MMP-9),组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)变化及健脾消癌方干预的机制.方法:在BALB/C-nu裸鼠盲肠内注射HCT116细胞50 μL,造裸鼠结直肠癌转移模型.将模型裸鼠分为模型组、健脾消癌方组(40 g·kg-1),另设空白组.所有动物灌胃给予相应药物4周后,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定裸鼠结肠、肝、肺及盲肠肿瘤组织中相关血管因子蛋白表达.结果:HCT116结直肠癌模型裸鼠的结肠、肝、肺与肿瘤组织的VEGF,MMP-9,TIMP明显升高(P ＜0.05,P＜0.01);ANG在结肠、肝与肿瘤组织也明显升高(P ＜0.05,P＜0.01);ES在结肠、肺与肿瘤组织显著降低,AS在肝、肺及肿瘤组织显著降低(P＜0.05).健脾消癌方组的结肠MMP-9,肿瘤TIMP,肝组织ANG,MMP-9及肺组织VEGF明显降低,肺组织AS明显升高(P＜0.05).结论:HCT116结直肠癌模型裸鼠VEGF,ANG,MMP-9在结肠、肝、肺及肿瘤组织中蛋白表达升高,ES,AS降低,TIMP升高;健脾消癌方能比较全面地改善机体抗肿瘤血管生成的能力.
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健脾消癌方抑制结肠癌增殖的作用机制
目的:观察健脾消癌方对结肠癌HCT116细胞中微小RNA-21(microRNA-21,miR-21),第10号染色体丢失的磷酸酶基因(phasphatase and tensin homo-log deleted in chromosome 10,PTEN)表达的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制.方法:10％,15％,20％健脾消癌方含药血清处理HCT116细胞后,实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测miR-21,PTEN mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN蛋白的表达水平.结果:与空白组比较,健脾消癌方低剂量组miR-21 mRNA相对表达量降低,PTEN mRNA相对表达量升高,但差异无统计学意义;健脾消癌方中剂量组miR-21mRNA相对表达明显降低,PTEN mRNA相对表达明显升高(P＜0.05);健脾消癌方高剂量组miR-21 mRNA相对表达量显著降低,PTEN mRNA相对表达量显著升高(P＜0.01);与健脾消癌方中、低剂量组比较,健脾消癌方高剂量组miR-21 mRNA相对表达量明显降低,PTEN mRNA相对表达量明显升高(P＜0.05).与空白组比较,健脾消癌方中、低剂量组PTEN蛋白相对表达量升高,差异无统计学意义;与空白组比较,健脾消癌方高剂量组PTEN蛋白相对表达量明显上升(P＜0.05);与健脾消癌方中、低剂量组比较,健脾消癌方高剂量组PTEN蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05).结论:健脾消癌方可能通过降低miR-21的表达,上调miR-21靶基因PTEN蛋白表达抑制结肠癌的增殖.
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重楼皂苷Ⅰ对结肠癌HCT116细胞凋亡及Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白表达的影响
目的:观察重楼皂苷Ⅰ (polyphyllin Ⅰ,PPⅠ)对结肠癌HCT116细胞凋亡及凋亡相关因子Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax),B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2),半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响,探讨重楼皂苷Ⅰ抑制结直肠癌转移的可能作用机制.方法:Cell counting kit-8(CCK-8)法检测12,24,48 h的细胞生长抑制作用,流式细胞术检测不同浓度的重楼皂苷Ⅰ对HCT116细胞凋亡的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关因子Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白的表达.结果:重楼皂苷Ⅰ可抑制对HCT116细胞生长,呈一定的浓度、时间依赖性;可促进HCT116细胞凋亡,呈一定的浓度依赖性.与空白组、重楼皂苷Ⅰ低浓度组比较,重楼皂苷Ⅰ高浓度组Bax,剪切的半胱天冬酶-3蛋白(cleaved Caspase-3)蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05),未剪切的半胱天冬酶-3(pro-Caspase-3)蛋白表达无明显变化.结论:重楼皂苷Ⅰ可抑制HCT116细胞生长,诱导HCT116细胞凋亡,且其诱导HCT116细胞凋亡的机制可能与其降低线粒体途径相关的细胞凋亡因子Bcl-2表达,升高Bax表达,并上调线粒体通路下游的Caspase-3蛋白相关.
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健脾消癌方对大肠癌肝转移裸鼠模型肝组织PI3K/Akt通路相关蛋白表达的影响
目的:研究健脾消癌方对大肠癌肝转移裸鼠模型肝组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路相关蛋白表达的影响,探讨其拮抗大肠癌肝转移的作用机制.方法:随机抽取10只BALB/C-nu裸鼠作为空白组,其余裸鼠建立人大肠癌细胞肝转移裸鼠模型,建模3d后取存活裸鼠30只,随机分为模型组,健脾消癌方组(41.6 g·kg-1),人参皂苷Rg3组(5.2 mg·kg-1),各组裸鼠灌胃相应药物及生理盐水4周后脱颈处死,观察各组裸鼠肝转移情况,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定肝组织第10号染色体同源缺失性磷酸酶和张力蛋白基因(PTEN),磷酸化第10号染色体同源缺失性磷酸酶和张力蛋白基因(p-PTEN),Akt,磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达情况.结果:健脾消癌方及人参皂苷Rg3组肝转移率明显低于模型组(P＜0.05);与空白组比较,模型组中p-PTEN,p-Akt蛋白表达明显升高(P＜0.05),与模型组比较,健脾消癌方组与人参皂苷Rg3组肝组织中p-PTEN,p-Akt蛋白表达明显降低(P＜0.05);健脾消癌方组与人参皂苷Rg3组p-PTEN,p-Akt表达差异无统计学意义.与空白组比较,模型组PTEN,Akt蛋白表达明显降低(P＜0.05);与模型组比较,健脾消癌方组与人参皂苷Rg3组PTEN,Akt蛋白表达量明显升高(P＜0.05);健脾消癌方组与人参皂苷Rg3组PTEN,Akt蛋白表达差异无统计学意义.结论:健脾消癌方可拮抗大肠癌肝转移,其作用机制可能与升高PTEN蛋白表达,降低p-PTEN,p-Akt蛋白表达有关.
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外泌体在大肠癌中的研究进展
大肠癌是发病率高的消化道恶性肿瘤之一,总体5年生存率不高,且近年来随着饮食结构等的改变,大肠癌在我国发病率逐年上升,严重威胁着人类生命健康,故研究大肠癌发生、发展的机制及有效防治方法有重大意义.外泌体是一类由细胞分泌的直径约30 ～ 100 nm的有被小泡,表面携带特定分子,可通过受体-配体结合方式或通过内吞作用被内在化,或与靶细胞膜融合,将囊泡中的物质释放至靶细胞胞液中,诱导靶细胞生理状态发生改变,在细胞与细胞间的交流中发挥重要作用.在肿瘤组织中,外泌体作为肿瘤微环境的重要组成部分,可通过促进肿瘤新生血管形成、促使结直肠癌细胞上皮-间质转化、引导肿瘤细胞器官特异性转移、诱导结直肠癌细胞耐药及参与抗肿瘤免疫效应等影响结直肠癌的发展,对结直肠癌外泌体进行深入研究,有利于寻找防治结直肠癌的有效方法.同时,由于外泌体自身通常包含多种特异性分子,有望作为理想的肿瘤标志物用于结直肠癌的诊断及预后判断.中医药治疗以“整体观念”和“辨证论治”为基本原则,可通过多环节、多途径、多靶点起效,在降低大肠癌的复发转移率、改善大肠癌患者预后方面发挥着重要作用,已成为我国大肠癌综合治疗的重要组成部分.外泌体对大肠癌发生、发展过程影响的广泛性,与中医药防治大肠癌的多环节、多途径、多靶点性相契合,以其为切入点,或许可更全面地研究中医药防治大肠癌的作用机制.
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健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及Caspase-3,Bcl-xL,Bax蛋白表达的影响
目的:观察健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-xL(B-cell lymphoma/leukemia-xL,Bcl-xL)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响.方法:建立裸鼠肠癌原位瘤模型,分为模型组,健脾益气组(15 g·kg-1),化瘀解毒组(15 g·kg-1),健脾消癌方组(全方组,15 g·kg-1),5-氟尿嘧啶组(5-Fu,20 mg·kg-1),共5组.分别予以相应药物干预4周,观察裸鼠体重、瘤体抑制率、转移率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Caspase-3,Bcl-xL,Bax蛋白表达.结果:健脾益气组、全方组体重下降低于模型组(P＜0.05),化瘀解毒组体重下降高于模型组(P＜0.05);健脾益气组对瘤体的抑制与模型组比较无统计学差异,与空白组比较,化瘀解毒组、全方组对瘤体均有较好抑制作用(P＜0.05);各组均出现不同程度地转移,其中模型组、健脾益气组总体转移率达90％,化瘀解毒组、全方组转移率分别为70％,60％,低于模型组(P＜0.05);与模型组比较,化瘀解毒组及全方组能够上调Bax蛋白表达,下调Caspase-3,Bcl-xL蛋白表达(P＜0.01).结论:健脾消癌方中健脾益气组优势在于稳定体重,化瘀解毒组优势在于抑制肿瘤,抑制转移;全方组能够稳定体质量,抑制肿瘤,抑制转移,全方配伍疗效优,其抗肿瘤机制可能是上调凋亡相关蛋白Bax及下调Caspase-3,Bcl-xL,诱导肿瘤细胞凋亡.
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中药菊花的名实考证
目的:通过对中药菊花的字义进行考证,以阐明菊花名实.方法:查阅汉至明清时期的辞书及历代中草药书籍,对菊花进行字义及名实溯源考证.结果:《尔雅》,《说文解字》,《玉篇》,《集韵》对蘜释义是指中药菊花植物,对菊释义是指大菊、蘧麦,即现在中药瞿麦,这与影宋本石刻郭璞注的《尔雅》中菊、蘜的植物图是吻合的.至宋代辞书《广韵》错误地认为《礼记》中鞠与菊同,不知鞠乃蘜异体字,导致自《广韵》后的本草就以菊指代中药菊花植物.清代段玉裁在《说文解字注》中重新提出菊指中药瞿麦,(蘜)指中药菊花的观点,(蘜)在《正字通》释义即蘜字.我国本草从《重修政和经史证类备用本草》起皆以菊花字形为名,但蘜的字义表述了其植物形状特征,更适合为中药菊花的名称.结论:将古籍文献及历代中草药书籍中包含的本草学内容进行比对,梳理药物的名实关系,理清词义,指出中药菊花名称变化原因,为人们在研究本草时查阅古籍文献提供参考价值.
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运用互联网思维看中药产业链流通环节中批发企业的横向整合机会
以往对中药产业链的研究大多数是基于工业时代传统企业的研究,且主要关注产业链的内涵、特点、存在问题、组织模式与优化等方面.由于中药产业链涉及产业较广且结构复杂,链条上信息严重不对称,所以在纵向与横向细化方面还有很大差距.而在网络时代,运用互联网思维可以让中药产业链回归商业本质,回归产业链的本质.如何发挥产业协同价值,如何兼顾到不同的利益主体,如何对产业链乃至整个商业生态进行重新审视,进而对产业链进行整合是非常重要的.运用互联网思维与平台化商业模式对中药产业链流通环节中批发企业进行横向整合,既有效解决了产业的四大痛点,提升了各企业的运营能力与利润水平,重要的是还通过连接产生了大数据的应用价值,在平台上形成了资金蓄水池金融服务,这些都将为平台产生几何倍数的资本价值.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
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| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
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